2026年高考生物一轮复习 细胞工程

高考生物一轮复习 细胞工程 一．选择题（共20小题） 1．三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A．①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成 B．②过程通常在等渗或略高渗溶液中，可采用高Ca2+﹣高pH融合法诱导 C．④过程需要调节培养基中生长素和细胞分裂素的比例，诱导生芽和生根 D．图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 2．甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。如图表示利用悬浮培养生产甘草黄酮的过程。下列叙述正确的是（　　） A．可用次氯酸钠和酒精对种子进行灭菌 B．图中添加果胶酶的主要目的是获得原生质体 C．对细胞悬液进行人工诱变，其变异率常高于对器官或个体进行诱变 D．图示过程能体现植物细胞的全能性 3．呼吸道合胞病毒（RSV）是一种引起下呼吸道感染的RNA病毒。科研人员选取病毒NS2基因获得具有免疫原性的NS2蛋白，利用该蛋白及小鼠制备获得了四株能分泌不同单克隆抗体的细胞系，为后续建立RSV检测系统提供了实验材料。下列说法错误的是（　　） A．为获得更多的B淋巴细胞，需向小鼠多次注射NS2蛋白 B．用NS2蛋白可诱导小鼠产生能分泌多种抗体的B淋巴细胞 C．若要区分上述四株细胞系，可用NS2蛋白进行抗体检测 D．单克隆抗体可准确识别抗原的细微差异并能够大量制备 4．科研人员设法保存了北部白犀牛的精子和部分组织，欲通过胚胎移植等方法繁育该物种，其研究过程如图所示，其中①②③表示操作过程。下列说法正确的是（　　） A．①表示注射相关激素，从卵巢中收集的卵母细胞可直接与精子完成体外受精过程 B．③表示胚胎移植，重构胚发育为胚胎的过程不需要进行任何处理 C．两种后代细胞中的核DNA相同，细胞质DNA不同 D．后代B为雌性白犀牛，后代A与后代B的性别不一定相同 5．无糖组织培养技术通常以珍珠岩或蛭石代替琼脂作为支撑物，加入无蔗糖培养液，用CO2代替糖作为植物体的碳源，是更接近植物自然生长状态的一种新型植物组织培养技术。下列叙述错误的是（　　） A．该技术的外植体必须具有一定叶面积或带绿色子叶 B．多孔的支撑物能改善组培苗的根区环境，从而促进了根系的发育 C．为满足植物需求，培养容器不能密封并需人为通入CO2 D．自养微生物仍可在无蔗糖培养液中繁殖并形成菌落 6．种间体细胞核移植（iSCNT）将供体动物体细胞与来自不同种的家畜去核卵母细胞融合并激活，以获得较多的重构胚，进而获得动物个体。因野生动物数量少，采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难，而从活体采集体细胞利用iSCNT技术获得动物个体，可一定程度维持濒危动物数量。下列叙述正确的是（　　） A．iSCNT技术必须通过显微操作技术将供体细胞的细胞核取出，然后注入去核的卵母细胞 B．若从野生动物体内采集到的体细胞数目较少，可先用添加动物血清的固体培养基培养 C．因受体不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应，代孕母体可以任意选择不同种的家畜 D．同一野生动物经iSCNT技术获得的多个重构胚中，遗传物质可能不完全相同 7．紫杉醇是红豆杉属植物体内的一种天然物质，具有高抗癌活性，广泛用于乳腺癌的治疗。经过我国科学家多年研究，现可通过植物细胞工程工厂化生产紫杉醇，操作环节如图。下列相关叙述错误的是（　　） A．紫杉醇是初生代谢物，在细胞中含量很低 B．诱导愈伤组织过程需要考虑激素种类和比例 C．使用液体培养基并振荡有利于细胞获取氧气和营养物质 D．图示方法的优点包括不占用耕地、几乎不受季节、天气等限制 8．科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述，正确的是（　　） A．利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒 B．体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体 C．将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 D．将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离的抗体为单克隆抗体 9．细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，并取得了显著的社会效益和经济效益。下列关于细胞工程的叙述错误的是（　　） A．利用茎尖组织培养技术培育出的脱毒马铃薯往往比未脱毒马铃薯产量高 B．利用植物体细胞杂交技术可以获得白菜—甘蓝杂种植株，打破了生殖隔离 C．使用胚胎分割技术获得同卵双胎或多胎的过程属于有性生殖 D．将病人自身体细胞诱导形成的iPS细胞移植回病人体内，理论上可避免免疫排斥 10．植物细胞壁中存在大量不能被动物消化的多聚糖类物质，研究人员通过生物工程技术培育出含多聚糖水解酶基因猪，主要流程如图，①～⑤表示操作过程。下列有关说法错误的是（　　） A．在基因表达载体中构建诱导型启动子，可以利用诱导物激活多聚糖水解酶基因表达 B．从卵巢中采集的卵母细胞需培养到MⅡ期后用显微操作技术去除核膜包裹的细胞核 C．用蛋白酶合成抑制剂激活③过程形成的重构胚使其完成分裂和发育进程 D．④过程的实质是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移 11．我国科学家成功构建了具有高比例胚胎干细胞的活产嵌合体猴。如图所示，研究人员将4CL体系下培育的、可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，最终得到嵌合体猴。下列叙述正确的是（　　） A．为防止细菌污染，培养4CL干细胞时可向培养液中加入适量的干扰素 B．4CL干细胞注入桑葚胚后会与其他胚胎细胞发生融合进而形成嵌合体 C．对嵌合囊胚或原肠胚进行胚胎分割后移植，可以产生更多的嵌合体猴 D．嵌合体猴部分细胞可发出绿色荧光，其遗传信息不一定能遗传给后代 12．、研究不同激素对猕猴桃组织培养过程的影响，实验结果如下，相关说法错误的是（　　） 组别 处理（浓度/ppm） 愈伤组织诱导率（%） 愈伤组织生长状况 1 ﹣ 29.6 ++ 2 细胞分裂素0.5 26.7 ++ 3 玉米素1 87.5 ++ 4 2，4﹣D0.5 85.2 +++ 5 2，4﹣D0.5，细胞分裂素0.5 95.0 +++ 注：“+”越多，生长状况越好 A．愈伤组织是已分化植物细胞发生脱分化的结果 B．第1组能诱导愈伤组织形成是内源激素的作用 C．诱导狲猴桃组织脱分化应选择第5组处理方案 D．玉米素浓度超过1ppm会抑制愈伤组织再分化 13．为培育繁殖周期快、高产人参皂苷的杂种植物，研究人员将人参和胡萝卜的原生质体进行融合，并检测了原生质体密度对融合率的影响，结果如表。 原生质体密度（1：1混合） 0.5×105个/mL 2×105个/mL 5×105个/mL 10×105个/mL 融合率（%） 18.6 35.8 29.2 23.6 下列相关叙述不正确的是（　　） A．利用纤维素酶和果胶酶进行去壁处理获得原生质体 B．原生质体密度过高或过低均不利于原生质体的融合 C．融合后的原生质体经过脱分化即可发育成杂种植株 D．对杂种植株需进行生长速度和人参皂苷含量的检测 14．由于受到逆境胁迫影响，大豆的品质和产量往往难以满足人们的需求。科研人员以大豆子叶节的腋生分生组织为受体材料，用携带抗细菌基因载体的农杆菌侵染受体材料，获得独立的抗菌丛生芽，然后进一步培养为转基因抗菌株系。下列叙述错误的是（　　） A．与叶肉细胞相比，用大豆子叶节的腋生分生组织进行植物组织培养更容易成功 B．农杆菌侵染受体材料时会将带有抗菌基因的T﹣DNA插入到受体材料的基因组中 C．需要用能杀死对应细菌的抗生素进行筛选来获得独立的抗菌丛生芽 D．获得独立的抗菌丛生芽需要注意培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例 15．某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列分析不正确的是（　　） 2%次氯酸钠处理时间（min） 8 10 12 75%酒精处理时间（min） 20 30 40 20 30 40 20 30 40 污染率（%） 25.6 21.1 13.3 22.2 16.7 12.2 20 17.8 8.9 褐化率（%） 0 0 8.9 0 5.6 14.4 7.8 16.7 16.7 注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。 A．消毒处理时间越长，组织培养成功率越高 B．消毒处理时间越长，外植体的污染率越低 C．诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中一般不需要光照 D．组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根 16．源于非洲绿猴肾细胞的Vero细胞系是一种连续细胞系。Vero细胞不表达干扰素，但干扰素受体功能正常。因此，Vero细胞对很多病毒敏感，是生产病毒疫苗的理想材料。下列叙述错误的是（　　） A．Vero细胞的培养需要使用CO2培养箱 B．Vero细胞可多次分裂，具有不死性 C．Vero细胞用于培养病毒时，培养液中应添加适量干扰素 D．Vero细胞可用于测定药物对病毒复制速度的影响 17．金菊花是多年生草本植物，是经长期人工选择培育出的名贵观赏花卉。如图表示某生物兴趣小组利用金菊花未开花的幼嫩枝条进行组织培养的过程。下列叙述正确的是（　　） A．过程①是获取离体的未开花的幼嫩枝条，用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液消毒 B．过程②是经过脱分化形成愈伤组织，期间一般不需要光照 C．过程③表示再分化，需要先诱导生根，再诱导生芽 D．过程④是培育形成的试管苗直接移栽入土进一步培养成金菊花植物体 18．雌性胚胎发育到一定阶段时，其细胞中两条X染色体中的随机一条失活，失活的那个成为沉默的巴氏小体，巴氏小体上的基因不表达，未失活的染色体上的基因可以表达。人体G﹣6PD蛋白有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。将某女性皮肤组织用酶分散成单个细胞后先进行细胞培养，再用单克隆抗体对培养细胞的F和S两种蛋白进行检测，结果如图所示。下列说法正确的是（　　） A．分散皮肤组织用的酶可以是胰蛋白酶或胃蛋白酶 B．细胞培养用的无菌空气要添加5%的CO2以提供碳源 C．该女性基因型为XFXS，3、6、7号细胞中XS基因不能表达 D．用来检测F和S两种蛋白的单克隆抗体是由一种杂交瘤细胞产生的 19．转录因子Gh1和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是（　　） A．将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养可得到幼苗 B．Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖 C．促进GhE1基因的表达可促进愈伤组织分化成根等器官 D．Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达 20．悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻。生产上常用灌流式培养避免这些现象出现。灌流式培养是在细胞培养管内，一边不断注入新鲜培养基，一边将培养液的上清液不断移出。下列相关叙述正确的是（　　） A．灌流式培养的细胞会贴壁生长，但不会出现接触抑制现象 B．灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行 C．灌流速率越高，营养物质利用越充分 D．培养管通常放置在95%的O2和5%的CO2的环境中 二．解答题（共5小题） 21．妊娠与子宫内膜基质细胞的功能密切相关。某研究小组通过如图所示的实验流程获得了子宫内膜基质细胞，以期用于妊娠相关疾病的研究。回答下列问题： （1）手术获得的皮肤组织需在适宜的低温条件下运至实验室，适宜低温对细胞中各种蛋白质的作用为 　 　。 （2）过程①中，诱导形成iPS细胞时，需要让4个外源基因在成纤维细胞中大量表达，通常可采用 　 　技术将这些基因导入该细胞。这4个基因的主要作用为：M基因促进增殖，S基因和C基因控制干细胞特性，K基因抑制凋亡和衰老。若成纤维细胞形成肿瘤细胞，最有可能的原因是 　 　基因过量表达。 （3）培养iPS细胞时，应对所处环境定期消毒以降低细胞被污染的风险。下列各项中可用紫外线进行消毒的是 　 　（多选）。 A．培养基 B．培养瓶 C．细胞培养室 D．CO2培养箱 （4）过程②中，iPS细胞经历的生命历程为 　 　。PCR技术可用于检测子宫内膜基质细胞关键基因的mRNA水平，mRNA需经过 　 　才能作为PCR扩增的模板。 22．米酵菌酸（BA）是由椰毒假单胞菌产生的一种可以引起食物中毒的毒素。据不完全统计，自2014年以来，我国由BA引起的食物中毒事件高达几十余起，死亡率高达50%以上。为了应对中毒后的快速治疗处理，科研人员进行了下列实验： ①细胞融合及筛选 按小鼠脾脏细胞：骨髓瘤细胞＝10：1的比例混合后缓慢滴加1mLPEG（边加边轻轻搅拌），静置1min，离心后弃去上清液，用HAT培养基进行选择培养，选出杂交瘤细胞，后用96孔细胞培养板进行培养，培养后利用BA进行检测。 ②抗BA单克隆抗体腹水的制备 选取10只6周龄小鼠，腹腔注射1×103个杂交瘤细胞，2周后收集小鼠腹水。 ③抗BA单克隆抗体特异性检测 选取BA及8种BA结构类似物（毒黄素、T﹣2毒素、赭曲霉毒素、伏马毒素、呕吐毒素、河豚毒素、黄曲霉毒素B1、玉米赤霉酮）进行特异性检测，结果如下（IC50为半数抑制浓度）。 交叉物 IC50/（ng/mL） BA 10 毒黄素 ＞10000 T﹣2毒素 ＞10000 赭曲霉毒素 ＞10000 伏马毒素 ＞10000 呕吐毒素 ＞10000 河豚毒素 ＞10000 黄曲霉毒素B1 ＞10000 玉米赤霉酮 ＞10000 回答下列问题： （1）实验所用小鼠应在实验前利用 　 　进行免疫。已免疫小鼠脾脏剪碎后，用 　 　酶处理使其分散成单个细胞。 （2）实验中滴加PEG时边加边轻轻搅拌的目的是 　 　。诱导动物细胞融合的方法除实验中所用方法外，还可以采用 　 　法和 　 　法。 （3）用HAT培养基能选择培养出杂交瘤细胞的原因是 　 　。用96孔细胞培养板进行培养时需先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴加0.1mL稀释后的细胞悬浮液，其目的是 　 　。 （4）表格数据表明抗BA单克隆抗体与这8种毒素 　 　（填“有”或“没有”）交叉反应，说明 　 　。 23．小鼠是科学研究中不可或缺的动物模型，具有容易饲养、世代周期短、繁殖率高、组织器官结构和细胞功能与人类接近等特点。下面是关于小鼠的一系列科学研究工作，回答问题： （1）在器官再生方面，小鼠胚胎干细胞具有显著的能力。体外培养胚胎干细胞一般需要定期更换培养液，这样做的目的是 　 　。 （2）为保留小鼠A的优良性状，可进行体细胞核移植。以小鼠A的体细胞和小鼠B卵母细胞为材料进行操作，以获得重构胚，主要操作步骤是 　 　。进行小鼠胚胎工程操作时，要在光控周期下饲养成年雌鼠，并注射 　 　，促进排卵。从雄鼠采集的精子需进行 　 　处理。体外受精后，在适宜条件下培养受精卵，用于胚胎移植。进行胚胎移植的优势是 　 　。 （3）若将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中，这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因是 　 　。 （4）在药物研究过程中，研究者发现因小鼠与人类亲缘关系较远，很多在小鼠体内有效的候选药物，用在人身上不一定有效，或有很大副作用。通过以上分析，在药物研究的实验动物方面研究的方向是 　 　。 24．如图是转乳糖酶基因试管牛和克隆牛的培育过程，回答下列问题： （1）细胞1为 　 　，是动物基因工程中常用的受体细胞，可通过 　 　法导入目的基因，基因工程的核心步骤是 　 　。 （2）胚胎移植前需要将细胞1在发育培养液中培养成胚胎，培养时的气体环境条件为 　 　。胚胎移植前可对早期胚胎进行胚胎分割和性别鉴定，性别鉴定一般用发育到囊胚期的细胞，对囊胚期胚胎进行分割时，要注意将 　 　均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （3）克隆牛的培育是通过 　 　技术实现的，属于 　 　（填“有性”或“无性”）生殖。从进化角度分析，试管牛相比于克隆牛的优势是 　 　。 （4）有人提出，克隆动物的培育技术已经逐渐成熟，是时候将其应用于培育克隆人了，你是否赞同这种观点？　 　。对于克隆，中国政府的态度是 　 　 25．如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题： （1）图1所示过程所用的生物技术有 　 　和 　 　，将特定的抗原注入小鼠，需在一定时间内间隔注射3次以上，其目的是 　 　。 （2）将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中，至少要进行两次筛选，一次是通过 　 　培养基，筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过 　 　检测，筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （3）培养杂交瘤细胞的培养基提供气体条件CO2的作用 　 　，杂交瘤细胞体外培养过程中，为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，常采取的措施是 　 　。 （4）图2中的早期胚胎发育到 　 　阶段才可以移植，在移植之前，需要进行质量检查，用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是 　 　。为了获得多个基因型相同的优质奶牛，可采用的技术手段是 　 　。 高考生物一轮复习 细胞工程 参考答案与试题解析 一．选择题（共20小题） 1．三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A．①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成 B．②过程通常在等渗或略高渗溶液中，可采用高Ca2+﹣高pH融合法诱导 C．④过程需要调节培养基中生长素和细胞分裂素的比例，诱导生芽和生根 D．图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 【考点】植物体细胞杂交技术及应用． 【专题】模式图；植物的组织培养． 【答案】B 【分析】图示为三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③脱分化形成愈伤组织，④提取代谢产物。 【解答】解：A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此过程①三白草和鱼腥草体细胞杂交过程中要利用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁获得原生质体，盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液会杀死细胞，A错误； B、过程②通常在等渗或略高渗溶液中，不能用低渗溶液，不然原生质体会吸水涨破；可以采用化学法（高Ca2+﹣高pH融合法）或物理法诱导原生质体融合，B正确； C、④过程为提取代谢产物，不需要诱导生芽和生根，C错误； D、图中过程②原生质体融合体现了细胞膜的流动性；将杂种细胞培育成一个完整的新的植物体的过程才体现了植物细胞的全能性，故图中所示的生产流程没有体现植物细胞的全能性，D错误。 故选：B。 【点评】本题主要考查植物组织体细胞杂交的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的原理及过程，能正确分析图形，再结合所学知识对选项作出正确的判断，难度适中。 2．甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。如图表示利用悬浮培养生产甘草黄酮的过程。下列叙述正确的是（　　） A．可用次氯酸钠和酒精对种子进行灭菌 B．图中添加果胶酶的主要目的是获得原生质体 C．对细胞悬液进行人工诱变，其变异率常高于对器官或个体进行诱变 D．图示过程能体现植物细胞的全能性 【考点】植物的组织培养． 【专题】模式图；植物的组织培养． 【答案】C 【分析】植物组织培养技术： 1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。 2、原理：植物细胞的全能性。 3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 4、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【解答】解：A、可用次氯酸钠和酒精对种子进行消毒，A错误； B、图示过程中添加果胶酶的主要目的是更快获得细胞悬液，B错误； C、愈伤组织细胞分裂旺盛，更易发生突变，C正确； D、题图所示过程并未从已分化的植物细胞获得完整植株，不能体现植物细胞的全能性，D错误。 故选：C。 【点评】本题以生产甘草黄酮为情境，考查植物组织培养。 3．呼吸道合胞病毒（RSV）是一种引起下呼吸道感染的RNA病毒。科研人员选取病毒NS2基因获得具有免疫原性的NS2蛋白，利用该蛋白及小鼠制备获得了四株能分泌不同单克隆抗体的细胞系，为后续建立RSV检测系统提供了实验材料。下列说法错误的是（　　） A．为获得更多的B淋巴细胞，需向小鼠多次注射NS2蛋白 B．用NS2蛋白可诱导小鼠产生能分泌多种抗体的B淋巴细胞 C．若要区分上述四株细胞系，可用NS2蛋白进行抗体检测 D．单克隆抗体可准确识别抗原的细微差异并能够大量制备 【考点】单克隆抗体及其应用． 【专题】正推法；克隆技术． 【答案】C 【分析】单克隆抗体的制备： （1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞； （2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体； （3）克隆化培养和抗体检测； （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖； （5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【解答】解：A、给小鼠多次注射NS2蛋白是为了刺激机体产生更多的已免疫的B淋巴细胞，A正确； B、由题意可知，用NS2蛋白可诱导小鼠产生能分泌多种抗体的B淋巴细胞，B正确； C、抗体与相应的抗原特异性结合，因此要区分上述四株细胞系，应该用不同的抗原进行抗体检测，C错误； D、单克隆抗体可准确识别抗原的细微差异，与相应的抗原特异性结合，并且可以大量制备，D正确。 故选：C。 【点评】本题考查单克隆抗体的制备，要求考生识记单克隆抗体制备的过程，掌握单克隆抗体的应用及实例，能结合所学的知识准确答题。 4．科研人员设法保存了北部白犀牛的精子和部分组织，欲通过胚胎移植等方法繁育该物种，其研究过程如图所示，其中①②③表示操作过程。下列说法正确的是（　　） A．①表示注射相关激素，从卵巢中收集的卵母细胞可直接与精子完成体外受精过程 B．③表示胚胎移植，重构胚发育为胚胎的过程不需要进行任何处理 C．两种后代细胞中的核DNA相同，细胞质DNA不同 D．后代B为雌性白犀牛，后代A与后代B的性别不一定相同 【考点】体外受精和胚胎移植． 【专题】模式图；胚胎工程． 【答案】D 【分析】1、哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等几个主要步骤。 2、动物排出的卵子成熟程度不同，有的可能是初级卵母细胞，如马、犬等，有的可能是次级卵母细胞，如猪、羊等。但它们都要在输卵管内进一步成熟，当达到减数第二次分裂的中期（MⅡ）时，才具备与精子受精的能力。 【解答】解：A、收集的卵母细胞须培养到MⅡ期才能与获能的精子进行体外受精，A错误； B、③表示胚胎的早期发育，重构胚需要经激活处理才能完成细胞分裂和发育进程，B错误； C、两种后代细胞中的核DNA与细胞质DNA均可能不完全相同，C错误； D、后代B的细胞核来自北部白犀牛（雌性），故后代B为雌性白犀牛，后代A有性生殖产生的，性别不确定，D正确。 故选：D。 【点评】本题结合胚胎移植的过程图解，考查胚胎移植的相关知识，要求考生识记胚胎移植的基本程序和受精作用的具体过程，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查。 5．无糖组织培养技术通常以珍珠岩或蛭石代替琼脂作为支撑物，加入无蔗糖培养液，用CO2代替糖作为植物体的碳源，是更接近植物自然生长状态的一种新型植物组织培养技术。下列叙述错误的是（　　） A．该技术的外植体必须具有一定叶面积或带绿色子叶 B．多孔的支撑物能改善组培苗的根区环境，从而促进了根系的发育 C．为满足植物需求，培养容器不能密封并需人为通入CO2 D．自养微生物仍可在无蔗糖培养液中繁殖并形成菌落 【考点】植物的组织培养． 【专题】正推法；植物的组织培养． 【答案】D 【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。植物组织培养的流程是：离体的植物器官、组织或细胞经脱分化形成愈伤组织，经再分化形成芽、根或胚状体，进而形成完整植株。 【解答】解：A、因为无糖培养是依靠植物叶片光合作用产生有机物来促进植物生长，所以无糖培养的对象必须能进行光合作用，即该技术的外植体必须具有一定叶面积或带绿色子叶，A正确； B、多孔的支撑物具有良好的透气性，使植物的根区环境中有较高的氧浓度，从而促进了植株根系的发育，B正确； C、单靠容器内的CO2浓度远远不能满足植株生长的需求，需要人为的输入CO2，C正确； D、自养微生物可利用无机碳源，因此可在无蔗糖培养液中繁殖，但菌落的形成需要固体培养基，D错误。 故选：D。 【点评】本题主要考查植物组织培养的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。 6．种间体细胞核移植（iSCNT）将供体动物体细胞与来自不同种的家畜去核卵母细胞融合并激活，以获得较多的重构胚，进而获得动物个体。因野生动物数量少，采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难，而从活体采集体细胞利用iSCNT技术获得动物个体，可一定程度维持濒危动物数量。下列叙述正确的是（　　） A．iSCNT技术必须通过显微操作技术将供体细胞的细胞核取出，然后注入去核的卵母细胞 B．若从野生动物体内采集到的体细胞数目较少，可先用添加动物血清的固体培养基培养 C．因受体不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应，代孕母体可以任意选择不同种的家畜 D．同一野生动物经iSCNT技术获得的多个重构胚中，遗传物质可能不完全相同 【考点】动物细胞核移植技术；体外受精和胚胎移植． 【专题】正推法；克隆技术． 【答案】D 【分析】1、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新的胚胎，继而发育成动物个体的技术，其原理是动物细胞核具有全能性。 2、胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 【解答】解：A、在进行核移植时，可以通过显微操作技术，将供体细胞注入去核的卵母细胞，A错误； B、若从野生动物体内采集到的体细胞数目较少，可先用添加动物血清的液体培养基进行培养，以增加体细胞的数目，B错误； C、同种胚胎移植时受体不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应，种间体细胞核移植为了保证成功率，应尽量选择亲缘关系较近的代孕母体，C错误； D、在种间体细胞核移植（iSCNT）过程中，去核的卵母细胞来自不同种、科、目或纲的家畜（驯养动物），获得的重构胚胎的细胞质遗传物质可能不同，因此同一野生动物经iSCNT技术获得的多个重构胚中，遗传物质可能不完全相同，D正确。 故选：D。 【点评】本题考查动物细胞工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。 7．紫杉醇是红豆杉属植物体内的一种天然物质，具有高抗癌活性，广泛用于乳腺癌的治疗。经过我国科学家多年研究，现可通过植物细胞工程工厂化生产紫杉醇，操作环节如图。下列相关叙述错误的是（　　） A．紫杉醇是初生代谢物，在细胞中含量很低 B．诱导愈伤组织过程需要考虑激素种类和比例 C．使用液体培养基并振荡有利于细胞获取氧气和营养物质 D．图示方法的优点包括不占用耕地、几乎不受季节、天气等限制 【考点】植物的组织培养． 【专题】模式图；植物的组织培养． 【答案】A 【分析】初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢活动，因此在整个生命过程中它一直进行着。初生代谢物有糖类、脂质、蛋白质和核酸等。次生代谢不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或器官中，并在一定的环境和时间条件下才进行。 【解答】解：A、紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物，次生代谢物不是生长必需的，在细胞中含量很低，A错误； B、诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位（幼嫩部位较易成功）、培养基组成和激素种类（主要是生长素和细胞分裂素）等，B正确； C、使用液体培养基并振荡有利于细胞获取氧气和营养物质，促进细胞生长，故液体培养基可用于扩大培养，C正确； D、图示方法的优点包括不占用耕地、几乎不受季节、天气等限制，D正确。 故选：A。 【点评】本题考查植物组织培养的相关知识，学生要识记植物细胞工程技术的应用，掌握细胞产物的工厂化生产，能结合所学的知识准确判断各选项。 8．科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述，正确的是（　　） A．利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒 B．体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体 C．将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 D．将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离的抗体为单克隆抗体 【考点】单克隆抗体及其应用． 【专题】正推法；克隆技术． 【答案】A 【分析】1、效应B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。 2、该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，并且单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。 【解答】解：A、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，A正确； B、单个效应B细胞有产生抗体的能力，但没有无限增殖的本领，因此在体外培养单个效应B细胞不可能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，B错误； C、将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，C错误； D、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，使其产生免疫反应，以获得相应的B细胞，D错误。 故选：A。 【点评】本题难度不大，属于考纲中识记、理解层次的要求，考查了单克隆抗体制备的有关知识，该内容是动物细胞工程中的重点内容，考生要能够识记制备过程以及制备过程中的相关注意点。 9．细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，并取得了显著的社会效益和经济效益。下列关于细胞工程的叙述错误的是（　　） A．利用茎尖组织培养技术培育出的脱毒马铃薯往往比未脱毒马铃薯产量高 B．利用植物体细胞杂交技术可以获得白菜—甘蓝杂种植株，打破了生殖隔离 C．使用胚胎分割技术获得同卵双胎或多胎的过程属于有性生殖 D．将病人自身体细胞诱导形成的iPS细胞移植回病人体内，理论上可避免免疫排斥 【考点】植物的组织培养；植物体细胞杂交技术及应用；干细胞的培养及其应用；胚胎分割技术． 【专题】正推法；植物的组织培养． 【答案】C 【分析】植物组织培养的应用：微型繁殖、作物脱毒（选材应该选择茎尖组织）、制造人工种子、单倍体育种（最大的优点是明显缩短育种年限，得到的全为纯种）、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。 【解答】解：A、茎尖组织中不带毒或没有病毒，因而利用茎尖作为外植体进行植物组织培养可获得脱毒培育的马铃薯幼苗，因此利用茎尖组织培养技术培育出的脱毒马铃薯往往比未脱毒马铃薯产量高，A正确； B、利用植物体细胞杂交技术获得白菜﹣甘蓝杂种植株，打破了生殖隔离，克服了生物远缘杂交不亲和的障碍，B正确； C、使用胚胎分割技术获得同卵双胎或多胎的过程属于无性生殖，C错误； D、iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。 故选：C。 【点评】本题主要考查植物的组织培养、胚胎分割等相关知识，要求考生能够结合所学知识准确判断各选项，属于识记和理解层次的考查。 10．植物细胞壁中存在大量不能被动物消化的多聚糖类物质，研究人员通过生物工程技术培育出含多聚糖水解酶基因猪，主要流程如图，①～⑤表示操作过程。下列有关说法错误的是（　　） A．在基因表达载体中构建诱导型启动子，可以利用诱导物激活多聚糖水解酶基因表达 B．从卵巢中采集的卵母细胞需培养到MⅡ期后用显微操作技术去除核膜包裹的细胞核 C．用蛋白酶合成抑制剂激活③过程形成的重构胚使其完成分裂和发育进程 D．④过程的实质是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移 【考点】体外受精和胚胎移植． 【专题】正推法；胚胎工程． 【答案】B 【分析】分析题图：①为目的基因导入细胞，②为核移植，③为早期胚胎的发育，④为胚胎移植，⑤为产生子代转基因猪。 【解答】解：A、启动子（RNA聚合酶与之结合启动转录的片段）具有特异性，在基因表达载体中构建诱导型启动子，可以利用诱导物激活多聚糖水解酶基因表达，A正确； B、常用显微操作法去除卵母细胞纺锤体—染色体复合物，而非去除核膜包裹的细胞核，B错误； C、用蛋白酶合成抑制剂（电刺激、Ca2+载体等）激活③过程形成的重构胚使其完成分裂和发育进程，C正确； D、④为胚胎移植，④过程的实质是早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移，D正确。 故选：B。 【点评】本题考查胚胎工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力、运用所学知识综合分析问题的能力。 11．我国科学家成功构建了具有高比例胚胎干细胞的活产嵌合体猴。如图所示，研究人员将4CL体系下培育的、可表达绿色荧光蛋白的供体猕猴的胚胎干细胞（简称4CL干细胞）注射至与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，最终得到嵌合体猴。下列叙述正确的是（　　） A．为防止细菌污染，培养4CL干细胞时可向培养液中加入适量的干扰素 B．4CL干细胞注入桑葚胚后会与其他胚胎细胞发生融合进而形成嵌合体 C．对嵌合囊胚或原肠胚进行胚胎分割后移植，可以产生更多的嵌合体猴 D．嵌合体猴部分细胞可发出绿色荧光，其遗传信息不一定能遗传给后代 【考点】干细胞的培养及其应用；胚胎分割技术． 【专题】模式图；胚胎工程． 【答案】D 【分析】胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。胚胎干细胞，是高度未分化的细胞。如果进行体外培养，能够无限的增殖和分化。胚胎肝细胞还可以分化成多功能的细胞。胚胎干细胞具有多能性，可以分化成多种组织的能力但是无法独自发育成一个个体细胞。胚胎里的干细胞被称为一种“全能”细胞，可以分化成所有类型的细胞，并且携带生物体的全套遗传信息。 【解答】解：A、为防止细菌污染，培养4CL干细胞时可向培养液中加入适量的抗生素，A错误； B、4CL干细胞不会与其他胚胎细胞发生细胞融合，B错误； C、对嵌合囊胚中的内细胞团细胞进行胚胎分割后移植，可以产生更多的嵌合体猴，C错误； D、嵌合体猴中，由4CL干细胞增殖分化形成的组织可发出绿色荧光，如果存在于体细胞，其遗传信息不能遗传给后代，D正确。 故选：D。 【点评】本题主要考查胚胎工程的相关知识点，意在考查学生对相关知识点的理解和掌握。 12．、研究不同激素对猕猴桃组织培养过程的影响，实验结果如下，相关说法错误的是（　　） 组别 处理（浓度/ppm） 愈伤组织诱导率（%） 愈伤组织生长状况 1 ﹣ 29.6 ++ 2 细胞分裂素0.5 26.7 ++ 3 玉米素1 87.5 ++ 4 2，4﹣D0.5 85.2 +++ 5 2，4﹣D0.5，细胞分裂素0.5 95.0 +++ 注：“+”越多，生长状况越好 A．愈伤组织是已分化植物细胞发生脱分化的结果 B．第1组能诱导愈伤组织形成是内源激素的作用 C．诱导狲猴桃组织脱分化应选择第5组处理方案 D．玉米素浓度超过1ppm会抑制愈伤组织再分化 【考点】植物的组织培养． 【专题】坐标曲线图；植物的组织培养． 【答案】D 【分析】表格分析：第5组愈伤组织诱导率和愈伤组织生长状况最好。 曲线分析：随着玉米素浓度升高分化成植株的比例先升高后降低。 【解答】解：A、愈伤组织是离体已经分化的植物细胞经过脱分化形成的，A正确； B、由表格可知，第1组没有用相应的激素处理，但可以形成愈伤组织，其原因是植物细胞中存在内源激素，B正确； C、据表格分析，在上述5组实验中，第5组愈伤组织诱导率和愈伤组织生长状况最好，因此诱导狲猴桃组织脱分化可选择第5组处理方案，C正确； D、由曲线可知，玉米素浓度超过1ppm，促进愈伤组织分化成植株的能力减弱，D错误。 故选：D。 【点评】本题以植物激素的相关对照实验为背景材料，考查植物激素的作用，要求学生能够掌握实验分析方法和植物激素的基础知识并运用。 13．为培育繁殖周期快、高产人参皂苷的杂种植物，研究人员将人参和胡萝卜的原生质体进行融合，并检测了原生质体密度对融合率的影响，结果如表。 原生质体密度（1：1混合） 0.5×105个/mL 2×105个/mL 5×105个/mL 10×105个/mL 融合率（%） 18.6 35.8 29.2 23.6 下列相关叙述不正确的是（　　） A．利用纤维素酶和果胶酶进行去壁处理获得原生质体 B．原生质体密度过高或过低均不利于原生质体的融合 C．融合后的原生质体经过脱分化即可发育成杂种植株 D．对杂种植株需进行生长速度和人参皂苷含量的检测 【考点】植物体细胞杂交技术及应用． 【专题】数据表格；植物的组织培养． 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交技术： （1）植物体细胞杂交技术：将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 （2）去除植物细胞壁，获得原生质体的方法：酶解法（纤维素酶和果胶酶处理）。 （3）诱导原生质体融合的方法： 物理法：电融合法、离心法； 化学法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+_ 高pH融合法。 （4）植物体细胞杂交的原理：原生质体融合的过程利用了细胞膜的流动性，杂种细胞发育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。 （5）植物体细胞杂交的意义：打破生殖隔离，克服了远缘杂交育种，培育植物新品种。 【解答】解：A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，利用纤维素酶和果胶酶进行去壁处理获得原生质体，A正确； B、根据表格中数据可知，原生质体密度过高或过低均不利于原生质体的融合，B正确； C、融合后的原生质体经过脱分化和再分化过程才可发育成杂种植株，C错误； D、该研究的目的是培育繁殖周期快、高产人参皂苷的杂种植物，因此对杂种植株需进行生长速度和人参皂苷含量的检测，D正确。 故选：C。 【点评】本题结合表格数据，考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交技术的具体过程，能正确分析表格并从中提取有效信息准确答题。 14．由于受到逆境胁迫影响，大豆的品质和产量往往难以满足人们的需求。科研人员以大豆子叶节的腋生分生组织为受体材料，用携带抗细菌基因载体的农杆菌侵染受体材料，获得独立的抗菌丛生芽，然后进一步培养为转基因抗菌株系。下列叙述错误的是（　　） A．与叶肉细胞相比，用大豆子叶节的腋生分生组织进行植物组织培养更容易成功 B．农杆菌侵染受体材料时会将带有抗菌基因的T﹣DNA插入到受体材料的基因组中 C．需要用能杀死对应细菌的抗生素进行筛选来获得独立的抗菌丛生芽 D．获得独立的抗菌丛生芽需要注意培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例 【考点】植物的组织培养． 【专题】正推法；植物的组织培养． 【答案】C 【分析】1、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T﹣DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。 2、转化：目的基因插入Ti质粒的T﹣DNA上，农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。 【解答】解：A、分生组织细胞的全能性较高，因此，与叶肉细胞相比，用大豆子叶节的腋生分生组织进行植物组织培养更容易成功，A正确； B、农杆菌侵染受体材料时会将带有抗菌基因的T﹣DNA插入到受体材料的基因组中，B正确； C、需要接种相应细菌进行筛选来获得独立的抗菌丛生芽，C错误； D、获得独立的抗菌丛生芽需要注意培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例，D正确。 故选：C。 【点评】本题考查基因工程与植物组织培养技术的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。 15．某科学小组探索长寿花组织培养过程中外植体的消毒条件，实验结果如下表。下列分析不正确的是（　　） 2%次氯酸钠处理时间（min） 8 10 12 75%酒精处理时间（min） 20 30 40 20 30 40 20 30 40 污染率（%） 25.6 21.1 13.3 22.2 16.7 12.2 20 17.8 8.9 褐化率（%） 0 0 8.9 0 5.6 14.4 7.8 16.7 16.7 注：褐化是指培养材料在组培过程中向培养基中释放褐色物质，并变褐死亡的现象。 A．消毒处理时间越长，组织培养成功率越高 B．消毒处理时间越长，外植体的污染率越低 C．诱导培养外植体脱分化为愈伤组织的过程中一般不需要光照 D．组织培养过程中提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根 【考点】植物的组织培养． 【专题】数据表格；植物的组织培养． 【答案】A 【分析】表格分析：本实验的自变量为次氯酸钠处理时间和酒精处理时间，因变量为污染率和褐化率。 【解答】解：A、由表格信息可知，消毒处理时间越长褐化率越高，死亡率越高，组织培养成功率越低，A错误； B、表中数据显示消毒处理时间越长污染率越低，B正确； C、导愈伤组织形成过程中一般不需要光照，因为光可以诱导产生微管组织，不利于愈伤组织形成，C正确； D、生长素和细胞分裂素的比值大时有利于根的形成，因此提高生长素与细胞分裂素的比例有助于生根，D正确。 故选：A。 【点评】本题以表格的形式，考查了植物组织培养的相关知识，要求学生理解植物组织培养的过程包括脱分化和再分化，以及各过程的培养条件。 16．源于非洲绿猴肾细胞的Vero细胞系是一种连续细胞系。Vero细胞不表达干扰素，但干扰素受体功能正常。因此，Vero细胞对很多病毒敏感，是生产病毒疫苗的理想材料。下列叙述错误的是（　　） A．Vero细胞的培养需要使用CO2培养箱 B．Vero细胞可多次分裂，具有不死性 C．Vero细胞用于培养病毒时，培养液中应添加适量干扰素 D．Vero细胞可用于测定药物对病毒复制速度的影响 【考点】动物细胞培养的条件与过程． 【专题】正推法；克隆技术． 【答案】C 【分析】动物细胞培养条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。 （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。 （3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 【解答】解：A、动物细胞培养的过程中需要控制培养箱中的气体条件为95%空气+5%CO2，其中CO2起到维持培养液的pH的作用，A正确； B、Vero细胞系是一种连续细胞系，可多次分裂，具有不死性，B正确； C、向Vero细胞培养液中加入适量抗生素可防止杂菌污染，而干扰素抗病毒，C错误； D、病毒必须寄生在活细胞内，因此Vero细胞可作为新冠病毒大量繁殖的“培养基”，可用于测定药物对病毒复制速度的影响，D正确。 故选：C。 【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查学生的识记和理解能力，难度不大。 17．金菊花是多年生草本植物，是经长期人工选择培育出的名贵观赏花卉。如图表示某生物兴趣小组利用金菊花未开花的幼嫩枝条进行组织培养的过程。下列叙述正确的是（　　） A．过程①是获取离体的未开花的幼嫩枝条，用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液消毒 B．过程②是经过脱分化形成愈伤组织，期间一般不需要光照 C．过程③表示再分化，需要先诱导生根，再诱导生芽 D．过程④是培育形成的试管苗直接移栽入土进一步培养成金菊花植物体 【考点】菊花的组织培养． 【专题】正推法；植物的组织培养． 【答案】B 【分析】1、植物组织培养过程：（1）用酒精擦拭双手和超净工作台台面。将流水充分冲洗后的外植体（幼嫩的茎段）用酒精消毒30s，然后立即用无菌水清洗2〜3次；再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2〜3次。（2）将消过毒的外植体置于无菌的培养皿中，用无菌滤纸吸去表面的水分。用解剖刀将外植体切成0.5〜1cm长的小段。（3）在酒精灯火焰旁，将外植体的〜 插入诱导愈伤组织的培养基中。用封口膜或瓶盖封盖瓶口，并在培养瓶上做好标记。（4）将接种了外植体 的锥形瓶或植物组织培养 瓶置于18〜22℃的培养箱中培养。在培养过程中，定期观察和记录愈伤组织的生长情况。（5）培养15〜20d后，将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上。长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗。（6）移栽前先打开封口膜或瓶盖，让试管苗在培养箱内生长几日。用流水清洗掉根部的培养基后，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土。每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花。 2、植物组织培养过程注意事项：（1）实验中使用的培养基和所有的器械都要灭菌。（2）接种操作必须在酒精灯火焰旁进行，并且每次使用后的器械都要灭菌。（3）接种时注意外植体的方向，不要倒插。 （4）诱导愈伤组织期间一般不需要光照，在后续的培养过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照。 【解答】解：A、过程①是获取离体的未开花的幼嫩枝条，先用体积分数为70%的酒精消毒，无菌水冲洗2～3次后，再用质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液处理，再用无菌水清洗2～3次，A错误； B、过程②是经过脱分化形成愈伤组织，期间一般不需要光照，B正确； C、过程③表示再分化，一般先诱导生芽，再诱导生根，C错误； D、培育形成的试管苗要移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，D错误。 故选：B。 【点评】本题考查植物组织培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，具备运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。 18．雌性胚胎发育到一定阶段时，其细胞中两条X染色体中的随机一条失活，失活的那个成为沉默的巴氏小体，巴氏小体上的基因不表达，未失活的染色体上的基因可以表达。人体G﹣6PD蛋白有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。将某女性皮肤组织用酶分散成单个细胞后先进行细胞培养，再用单克隆抗体对培养细胞的F和S两种蛋白进行检测，结果如图所示。下列说法正确的是（　　） A．分散皮肤组织用的酶可以是胰蛋白酶或胃蛋白酶 B．细胞培养用的无菌空气要添加5%的CO2以提供碳源 C．该女性基因型为XFXS，3、6、7号细胞中XS基因不能表达 D．用来检测F和S两种蛋白的单克隆抗体是由一种杂交瘤细胞产生的 【考点】动物细胞培养的条件与过程；单克隆抗体及其应用． 【专题】信息转化法；克隆技术． 【答案】C 【分析】动物细胞培养所需的气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【解答】解：A、分散皮肤组织用的酶可以是胰蛋白酶，不能用胃蛋白酶，A错误； B、进行动物细胞培养时，CO2培养箱中加入5%的CO2的主要目的是维持培养液的pH，B错误； C、女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活。单克隆培养的细胞都来自于原代培养的细胞，其基因型都为XFXS，只不过在细胞1、2、4、5、8、9中含XS基因的染色体具有活性，可以表达出S型G﹣6PD；而细胞3、6、7中XS基因不能表达，而含XF基因的染色体具有活性，可以表达出F型G﹣6PD，C正确； D、由题干可知，原代培养细胞是基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理得到的，但是这些细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活，即只能表达出一种G﹣6PD，只有检测多个原代培养的细胞时，才可以检测出两个条带（两种G﹣6PD），因此用来检测F和S两种蛋白的单克隆抗体是由两种杂交瘤细胞产生的，D错误。 故选：C。 【点评】本题考查动物细胞培养和单克隆抗体制备的相关知识，意在考查学生的识记和理解能力，难度不大。 19．转录因子Gh1和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是（　　） A．将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养可得到幼苗 B．Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖 C．促进GhE1基因的表达可促进愈伤组织分化成根等器官 D．Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达 【考点】植物的组织培养；表观遗传． 【专题】模式图；遗传信息的转录和翻译；植物的组织培养． 【答案】B 【分析】细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。高度分化的植物细胞仍然具有发育成完整植株的能力。 【解答】解：A、将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养只能得到更多的细胞，不能得到幼苗，A错误； B、由图示可知，Gh1基因发生甲基化抑制Gh1表达Gh1蛋白，不能与的表达产物形成复合物调控GhPs基因表达，从而抑制愈伤组织细胞的增殖，B正确； C、由图示可知，GhE1基因表达GhE1蛋白，与Gh1基因的表达产物Gh1蛋白形成复合物调控GhPs基因表达，从而抑制愈伤组织分化成根等器官，C错误； D、由图示可知，Gh1与GhE1共同作用才能调控GhPs基因的表达，D错误。 故选：B。 【点评】本题考查植物组织培养和表观遗传的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。 20．悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻。生产上常用灌流式培养避免这些现象出现。灌流式培养是在细胞培养管内，一边不断注入新鲜培养基，一边将培养液的上清液不断移出。下列相关叙述正确的是（　　） A．灌流式培养的细胞会贴壁生长，但不会出现接触抑制现象 B．灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行 C．灌流速率越高，营养物质利用越充分 D．培养管通常放置在95%的O2和5%的CO2的环境中 【考点】动物细胞培养的条件与过程． 【专题】正推法；克隆技术． 【答案】B 【分析】动物细胞培养：（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。（2）原理：细胞增殖。（3）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【解答】解：A、悬浮培养的动物细胞不出现贴壁生长现象，A错误； B、悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻，而灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行，B正确； C、过高的灌流速率，都会导致培养的细胞没有及时利用营养物质，而使营养物质不能得到充分利用，C错误； D、进行动物细胞培养时通常置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养，D错误。 故选：B。 【点评】本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的具体过程，掌握动物细胞培养的条件，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。 二．解答题（共5小题） 21．妊娠与子宫内膜基质细胞的功能密切相关。某研究小组通过如图所示的实验流程获得了子宫内膜基质细胞，以期用于妊娠相关疾病的研究。回答下列问题： （1）手术获得的皮肤组织需在适宜的低温条件下运至实验室，适宜低温对细胞中各种蛋白质的作用为 　抑制酶的活性（降低蛋白质或酶的活性），防止蛋白质变性（维持蛋白质的结构，抑制蛋白质变性）　。 （2）过程①中，诱导形成iPS细胞时，需要让4个外源基因在成纤维细胞中大量表达，通常可采用 　转基因（显微注射，病毒介导，基因工程）　技术将这些基因导入该细胞。这4个基因的主要作用为：M基因促进增殖，S基因和C基因控制干细胞特性，K基因抑制凋亡和衰老。若成纤维细胞形成肿瘤细胞，最有可能的原因是 　M　基因过量表达。 （3）培养iPS细胞时，应对所处环境定期消毒以降低细胞被污染的风险。下列各项中可用紫外线进行消毒的是 　CD　（多选）。 A．培养基 B．培养瓶 C．细胞培养室 D．CO2培养箱 （4）过程②中，iPS细胞经历的生命历程为 　增殖、分化　。PCR技术可用于检测子宫内膜基质细胞关键基因的mRNA水平，mRNA需经过 　逆转录　才能作为PCR扩增的模板。 【考点】干细胞的培养及其应用；动物细胞培养的条件与过程． 【专题】模式图；克隆技术． 【答案】（1）抑制酶的活性（降低蛋白质或酶的活性），防止蛋白质变性（维持蛋白质的结构，抑制蛋白质变性） （2）转基因（显微注射，病毒介导，基因工程） M （3）CD （4）增殖、分化 逆转录 【分析】动物细胞培养条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。 （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。 （3）温度和pH。 （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【解答】解：（1）酶活性的保持需要适宜的温度，低温可以抑制酶的活性，防止蛋白质变性，使细胞中的蛋白质维持正常的生理功能，故手术获得的皮肤组织需在低温下运至实验室。 （2）将外源基因导入细胞内，通常需要转基因技术，其中将目的基因导入动物细胞常用方法是显微注射法；分析题意可知，M基因促进增殖，S基因和C基因控制干细胞特性，K基因抑制凋亡和衰老，肿瘤细胞（癌细胞）具有无限增殖的能力，因此若成纤维细胞形成肿瘤细胞，最有可能的原因是M基因过量表达造成的。 （3）动物细胞培养的关键技术是无菌操作，培养iPS细胞时，应对所处环境定期消毒以降低细胞被污染风险，可用紫外线对细胞培养室和CO2培养箱进行消毒处理，而对培养基和培养瓶需要进行灭菌处理。 故选：CD。 （4）过程②中，iPS细胞经历的生命历程为增殖（使细胞数目增多）、分化（使细胞种类增多）；PCR扩增的模板为DNA，因此若想利用PCR技术检测子宫内膜基质细胞关键基因的mRNA水平，mRNA需经过逆转录过程形成DNA，才可作为PCR的模板。 故答案为： （1）抑制酶的活性（降低蛋白质或酶的活性），防止蛋白质变性（维持蛋白质的结构，抑制蛋白质变性） （2）转基因（显微注射，病毒介导，基因工程） M （3）CD （4）增殖、分化 逆转录 【点评】本题考查动物细胞培养和PCR技术等知识，要求考生识记相关操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题。 22．米酵菌酸（BA）是由椰毒假单胞菌产生的一种可以引起食物中毒的毒素。据不完全统计，自2014年以来，我国由BA引起的食物中毒事件高达几十余起，死亡率高达50%以上。为了应对中毒后的快速治疗处理，科研人员进行了下列实验： ①细胞融合及筛选 按小鼠脾脏细胞：骨髓瘤细胞＝10：1的比例混合后缓慢滴加1mLPEG（边加边轻轻搅拌），静置1min，离心后弃去上清液，用HAT培养基进行选择培养，选出杂交瘤细胞，后用96孔细胞培养板进行培养，培养后利用BA进行检测。 ②抗BA单克隆抗体腹水的制备 选取10只6周龄小鼠，腹腔注射1×103个杂交瘤细胞，2周后收集小鼠腹水。 ③抗BA单克隆抗体特异性检测 选取BA及8种BA结构类似物（毒黄素、T﹣2毒素、赭曲霉毒素、伏马毒素、呕吐毒素、河豚毒素、黄曲霉毒素B1、玉米赤霉酮）进行特异性检测，结果如下（IC50为半数抑制浓度）。 交叉物 IC50/（ng/mL） BA 10 毒黄素 ＞10000 T﹣2毒素 ＞10000 赭曲霉毒素 ＞10000 伏马毒素 ＞10000 呕吐毒素 ＞10000 河豚毒素 ＞10000 黄曲霉毒素B1 ＞10000 玉米赤霉酮 ＞10000 回答下列问题： （1）实验所用小鼠应在实验前利用 　BA（米酵菌酸）　进行免疫。已免疫小鼠脾脏剪碎后，用 　胰蛋白　酶处理使其分散成单个细胞。 （2）实验中滴加PEG时边加边轻轻搅拌的目的是 　促进PEG与小鼠脾脏细胞、骨髓瘤细胞混合，提高诱导融合效率　。诱导动物细胞融合的方法除实验中所用方法外，还可以采用 　电融合　法和 　灭活病毒诱导　法。 （3）用HAT培养基能选择培养出杂交瘤细胞的原因是 　在该培养基上，未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞能生长　。用96孔细胞培养板进行培养时需先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴加0.1mL稀释后的细胞悬浮液，其目的是 　使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的　。 （4）表格数据表明抗BA单克隆抗体与这8种毒素 　没有　（填“有”或“没有”）交叉反应，说明 　抗BA单克隆抗体的特异性良好　。 【考点】单克隆抗体及其应用． 【专题】实验性简答题；克隆技术． 【答案】（1）BA（米酵菌酸） 胰蛋白 （2）促进PEG与小鼠脾脏细胞、骨髓瘤细胞混合，提高诱导融合效率 电融合 灭活病毒诱导 （3）在该培养基上，未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞能生长 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的 （4）没有 抗BA单克隆抗体的特异性良好 【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【解答】解：（1）为制备抗BA单克隆抗体，实验所用小鼠应在实验前利用BA（米酵菌酸）进行免疫，以获得相应的B淋巴细胞。已免疫小鼠脾脏剪碎后，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液。 （2）诱导动物细胞融合的方法包括物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）和生物法（灭活的病毒），实验中按小鼠脾脏细胞：骨髓瘤细胞＝10：1的比例混合后缓慢滴加1mLPEG，边加边轻轻搅拌，能够促进PEG与小鼠脾脏细胞、骨髓瘤细胞混合，提高诱导融合效率，因此除PEG外，还可以采用电融合法和灭活病毒诱导法等。 （3）在HAT培养基上，未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞能生长，因此用HAT培养基能选择培养出杂交瘤细胞。用多孔培养板培养时，需要稀释，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。 （4）选取BA及8种BA结构类似物进行特异性检测，由表格数据可知，抗BA单克隆抗体与这8种毒素没有交叉反应，说明抗BA单克隆抗体的特异性良好。 故答案为： （1）BA（米酵菌酸） 胰蛋白 （2）促进PEG与小鼠脾脏细胞、骨髓瘤细胞混合，提高诱导融合效率 电融合 灭活病毒诱导 （3）在该培养基上，未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞能生长 使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的 （4）没有 抗BA单克隆抗体的特异性良好 【点评】本题考查单克隆抗体的制备与应用的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。 23．小鼠是科学研究中不可或缺的动物模型，具有容易饲养、世代周期短、繁殖率高、组织器官结构和细胞功能与人类接近等特点。下面是关于小鼠的一系列科学研究工作，回答问题： （1）在器官再生方面，小鼠胚胎干细胞具有显著的能力。体外培养胚胎干细胞一般需要定期更换培养液，这样做的目的是 　及时清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害　。 （2）为保留小鼠A的优良性状，可进行体细胞核移植。以小鼠A的体细胞和小鼠B卵母细胞为材料进行操作，以获得重构胚，主要操作步骤是 　将小鼠B卵母细胞培育到MⅡ中期，通过显微操作去核，将小鼠A体细胞注入去核的小鼠B卵母细胞，通过电刺激方法使两细胞融合，小鼠A体细胞核进入小鼠B卵母细胞，形成重构胚　。进行小鼠胚胎工程操作时，要在光控周期下饲养成年雌鼠，并注射 　促性腺激素　，促进排卵。从雄鼠采集的精子需进行 　获能　处理。体外受精后，在适宜条件下培养受精卵，用于胚胎移植。进行胚胎移植的优势是 　充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力　。 （3）若将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中，这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因是 　外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能表达　。 （4）在药物研究过程中，研究者发现因小鼠与人类亲缘关系较远，很多在小鼠体内有效的候选药物，用在人身上不一定有效，或有很大副作用。通过以上分析，在药物研究的实验动物方面研究的方向是 　培育大批具有相同遗传背景的与人类亲缘关系较近动物（如克隆猴）　。 【考点】体外受精和胚胎移植． 【专题】信息转化法；胚胎工程． 【答案】（1）及时清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 （2）将小鼠B卵母细胞培育到MⅡ期，通过显微操作去核，将小鼠A体细胞注入去核的小鼠B卵母细胞，通过电刺激方法使两细胞融合，小鼠A体细胞核进入小鼠B卵母细胞，形成重构胚；促性腺激素；获能；充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 （3）外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能表达 （4）可培育大批具有相同遗传背景的与人类亲缘关系较近动物（如克隆猴） 【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 2、胚胎移植的生理基础 （1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境； （2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能； （3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。 （4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。 【解答】解：（1）动物细胞培养过程中，为及时清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，需要定期更换培养液。 （2）为保留小鼠A的优良性状，以小鼠A的体细胞和小鼠B卵母细胞为材料进行操作，具体的步骤：将小鼠B卵母细胞培育到MⅡ期，通过显微操作去核，将小鼠A体细胞注入去核的小鼠B卵母细胞，通过电刺激方法使两细胞融合，小鼠A体细胞核进入小鼠B卵母细胞，形成重构胚。为获得较多的卵母细胞，可用促性腺激素对成年雌鼠进行超数排卵处理。采集雄鼠的精子也需进行获能处理。胚胎移植的优势是充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。 （3）外源基因插入导致受精卵死亡的原因可能是外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能表达。 （4）药物研究过程中，研究者发现因小鼠与人类亲缘关系较远，很多在小鼠体内有效的候选药物，用在人身上不一定有效，或有很大副作用。为解决这一问题，可培育大批具有相同遗传背景的与人类亲缘关系较近动物（如克隆猴）。 故答案为： （1）及时清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 （2）将小鼠B卵母细胞培育到MⅡ期，通过显微操作去核，将小鼠A体细胞注入去核的小鼠B卵母细胞，通过电刺激方法使两细胞融合，小鼠A体细胞核进入小鼠B卵母细胞，形成重构胚；促性腺激素；获能；充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 （3）外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能表达 （4）可培育大批具有相同遗传背景的与人类亲缘关系较近动物（如克隆猴） 【点评】本题考查胚胎工程的相关知识，要求考生识记识记胚胎移植的概念及基本途径，掌握胚胎移植的生理学基础，能结合所学的知识准确答题。 24．如图是转乳糖酶基因试管牛和克隆牛的培育过程，回答下列问题： （1）细胞1为 　受精卵　，是动物基因工程中常用的受体细胞，可通过 　显微注射　法导入目的基因，基因工程的核心步骤是 　构建基因表达载体　。 （2）胚胎移植前需要将细胞1在发育培养液中培养成胚胎，培养时的气体环境条件为 　95%的空气+5%的CO2　。胚胎移植前可对早期胚胎进行胚胎分割和性别鉴定，性别鉴定一般用发育到囊胚期的细胞，对囊胚期胚胎进行分割时，要注意将 　内细胞团　均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （3）克隆牛的培育是通过 　细胞核移植　技术实现的，属于 　无性　（填“有性”或“无性”）生殖。从进化角度分析，试管牛相比于克隆牛的优势是 　试管牛属于有性生殖的产物，可产生更多的变异性，能为生物进化提供更多的原材料　。 （4）有人提出，克隆动物的培育技术已经逐渐成熟，是时候将其应用于培育克隆人了，你是否赞同这种观点？　不赞同　。对于克隆，中国政府的态度是 　禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆　 【考点】体外受精和胚胎移植；胚胎分割技术；动物细胞核移植技术． 【专题】模式图；克隆技术；胚胎工程． 【答案】（1）受精卵；显微注射；构建基因表达载体 （2）95%的空气+5%的CO2；内细胞团 （3）细胞核移植；无性；试管牛属于有性生殖的产物，可产生更多的变异性，能为生物进化提供更多的原材料 （4）不赞同；禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆 【分析】分析题图：图示试管牛的培育采用了体外受体、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，属于有性生殖；克隆牛的培育采用了核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，属于无性生殖。 【解答】解：（1）精子和卵细胞结合形成的细胞1为受精卵，是动物基因工程中常用的受体细胞，将目的基因导入动物细胞常用显微注射法。构建基因表达载体是基因工程的核心步骤。 （2）将细胞1在发育培养液中培养成胚胎，培养时的气体环境条件为95%的空气+5%的CO2。对囊胚期胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （3）据图可知，克隆牛是通过细胞核移植技术实现的，由于没有经过精卵细胞结合，因此属于无性繁殖。试管牛是有性生殖形成的，由于减数分裂时形成的配子具有多样性以及受精时雌雄配子随机结合，因此有性生殖形成的子代变异性更强，可为生物进化提供更多的原材料，有利于生物进化，而克隆牛是无性繁殖的结果，只能保持亲本的特性，变异性差，不能为进化提供更多的原材料，不利于生物进化。 （4）克隆人存在伦理道德上的争议，因此不赞同克隆人；中国政府对于克隆技术的态度是禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆。 故答案为： （1）受精卵；显微注射；构建基因表达载体 （2）95%的空气+5%的CO2；内细胞团 （3）细胞核移植；无性；试管牛属于有性生殖的产物，可产生更多的变异性，能为生物进化提供更多的原材料 （4）不赞同；禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆 【点评】本题主要考查细胞工程及胚胎工程等相关知识点，意在考查学生对相关知识点的理解和掌握。 25．如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题： （1）图1所示过程所用的生物技术有 　动物细胞融合技术　和 　动物细胞培养技术　，将特定的抗原注入小鼠，需在一定时间内间隔注射3次以上，其目的是 　加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞　。 （2）将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中，至少要进行两次筛选，一次是通过 　选择　培养基，筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过 　克隆化培养和抗体　检测，筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （3）培养杂交瘤细胞的培养基提供气体条件CO2的作用 　维持培养液的pH　，杂交瘤细胞体外培养过程中，为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，常采取的措施是 　定期更换培养液　。 （4）图2中的早期胚胎发育到 　桑葚胚或囊胚　阶段才可以移植，在移植之前，需要进行质量检查，用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是 　活细胞的细胞膜具有选择透过性，染料不能进入细胞　。为了获得多个基因型相同的优质奶牛，可采用的技术手段是 　胚胎分割　。 【考点】单克隆抗体及其应用；体外受精和胚胎移植． 【专题】图文信息类简答题；克隆技术． 【答案】（1）动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞 （2）选择 克隆化培养和抗体 （3）维持培养液的pH 定期更换培养液 （4）桑葚胚或囊胚 活细胞的细胞膜具有选择透过性，染料不能进入细胞 胚胎分割 【分析】1、图1所示为单克隆抗体的制备过程．小鼠的B细胞经过免疫，再与能无限增殖的骨髓瘤细胞融合，形成的杂交瘤细胞同时具备了分泌抗体和无限增殖的能力。 2、图2将基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成细胞①，该过程采用了基因工程技术，其原理是基因重组；取出细胞①的细胞核，注入去核牛卵母细胞中，形成细胞②，该过程采用了核移植技术，其原理是动物细胞的细胞核具有全能性；要形成转基因克隆奶牛还需要采用早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。 【解答】解：（1）图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程，所用的生物技术有动物细胞融合技术和动物细胞培养技术；为加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞，将特定的抗原注入小鼠时，需在一定时间内间隔注射3次以上。 （2）获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞，至少要进行两次筛选，一次是通过选择培养基，筛选出杂交瘤细胞；另一次是通过抗体阳性检测，筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。 （3）提供气体条件CO2的作用维持培养液的pH；为避免细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，常采取定期更换培养液的措施。 （4）早期胚胎发育到桑椹（葚）胚或囊胚阶段才可以移植，在移植之前，用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞的细胞膜具有选择透过性，染料不能进入细胞；为了获得多个基因型相同的优质奶牛，可采用的技术手段是胚胎分割。 故答案为： （1）动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞 （2）选择 克隆化培养和抗体 （3）维持培养液的pH 定期更换培养液 （4）桑葚胚或囊胚 活细胞的细胞膜具有选择透过性，染料不能进入细胞 胚胎分割 【点评】本题考查了细胞工程和胚胎工程的基本操作，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力。 学科网（北京）股份有限公司 $$