生物技术与工程 综合测试-【5星学霸·高考白题】2026年高考生物一轮复习

第十四 生物技术与工 一、选择题 1.(2024·江西九江一模)“细菌喜荤，霉菌喜 素”，一般来说，在培养细菌时，需添加动物性 营养物质，如蛋白胨等：而在培养霉菌时，一 般需要添加植物性营养成分，如豆芽汁。下 列相关叙述不正确的是 ()》 A.蛋白胨为细菌提供碳源、氮源和特殊营养 物质 B.细菌和霉菌体内的酶存在差异，导致二者 偏好的营养成分不同 C.分别培养细菌和霉菌时，需将培养基调节 至相同的p D.若需要比较细菌和霉菌形成的菌落差异， 培养基中还需添加琼脂 2.(2025·安徽芜湖期末)由于过度捕猎和非法贸 易，哺乳动物中华穿山甲在中国大陆地区已经 “功能性灭绝”，科学家欲通过现代生物学技术 拯救中华穿山甲。下列说法中正确的是() A.为使中华穿山甲超数排卵，可以通过在饲 料中添加促性腺激素处理实现 B.为有效提高中华穿山甲胚胎的利用率，可 采用胚胎分割等无性繁殖技术 C.就地保护是对生物多样性最有效的保护 如建立穿山甲等濒危动植物繁育中心 D.穿山甲胚胎发育的卵裂期在透明带内进 行，细胞数量增加，胚胎体积适度增大 3.我国科学家成功将大熊猫皮肤成纤维细胞重 编程为诱导多能干细胞(PSCs)。这些大熊 猫PSCs不仅能在体外培养条件下稳定增殖 传代，还能在体内和体外条件下分化产生三 个胚层及各种不同类型的细胞，展现出很好 的发育潜能。下列叙述错误的是( A.将大熊猫成纤维细胞诱导为多能干细胞的 过程相当于脱分化过程 B.胚胎干细胞主要来源于囊胚的内细胞团， 章基因工程及生物技术的安全性与伦理问题学丽高春 程综合测试 具有发育成完整个体的潜能 C.大熊猫皮肤成纤维细胞被诱导为PSCs的 过程体现了细胞的全能性 D.利用诱导多能干细胞治疗疾病，理论上可 避免发生免疫排斥反应 4.(2025·安徽卷)质粒K中含有B-半乳糖苷 酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编 码的酶可分解X-l,产生蓝色物质，进而形 成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒 作为载体，采用基因工程技术实现人源干扰 素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述 错误的是 ( 启动天 BamH I 表达活性B-半 蓝色 导入(0醉 乳糖苷酰冠苗落 卡那客唐 B-半乳糖大肠 篇选平板 抗性基国 苷酶基国杆葡 (含X-g和卡那霉素) A.使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率， 可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数 B.如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的 白色菌落不可判定为含目的基因的菌株 C.因质粒K中含两个标记基因，筛选平板中长 出的白色菌落即为表达目标蛋白的菌株 D.若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质 粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌 5.自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产 生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱 性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的 靛蓝合成酶基因(idgS)及其激活基因（办）构 建基因表达载体（如图），通过农杆菌转化法 导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显 色的靛蓝。 Pme I BomH I Spe I Sac I T-DNA □现◆@下日 Ti质粒 T-DNA- Ti质粒 邺 ☐终止子1夕启动予1☐终止子2中启动子2 注：PmeI,BmHI.Se1、SarI为不同限制酶 学霸高春白题生物学 下列相关叙述错误的是 A.上述获得蓝色玫瑰的方案中无需转入能调 控液泡pH的基因 B.将s基因插入T质粒时使用的限制酶是 PmeI和BamH I C.办和dgS基因具有各自的启动子，表达是 相互独立进行的 D.农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白 玫瑰染色体DNA上 6.(2025·四川绵阳模拟预测)烟草在种植过程 中易发生虫害。科研人员通过构建双价抗虫 基因表达载体（如下图所示），将抗草地贪夜 蛾基因(VIP3a)和抗褐飞虱基因(Bph14)转 入烟草中，以期获得具有增强抗虫性的转基 因烟草。下列有关培育转基因抗虫烟草的叙 述，错误的是 ( LB RB 卫MaT回卫吟MPaT卫-或h4 注：Br为除草制抗性基因：PI、P2、P3为启动子： LB和RB为DNA的左右边界 A.成功导入了双价抗虫基因表达载体的烟 草，都具有很强的抗虫性 B.在表达载体中的启动子P1、P2、P3上有 RNA聚合酶识别的位点 C.从基因表达载体的组成角度分析，T1、T2、 T3的作用是终止转录 D.可用PCR技术检测基因VIP3a和Bphl4 是否导入受体基因组中 7.(2024·湖北名校联盟第二次联考)通过设计 引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定 点诱变。下图是获取突变基因的过程，其中 引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基 因片段配对，但不影响引物与模板链的整体 配对，反应体系中在目的基因两端的引物中 220 分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位 点。下列有关叙述错误的是 () 酶T 引物1 了引物2 第一轮PCR 酶h 酶aT 引物1 T引物2 酶aT第二轮PCR 酶h 引物1 2 7引物2 h A.限制酶a和限制酶b的识别序列应分别增 加至引物1和引物2的5'端 B.通过两种限制酶将扩增出的含突变位点的 目的基因切割下来有利于其定向插入载体 C.第三轮PCR结束后，两条链完全等长的且 含有突变碱基对的DNA分子有1个 D.PCR的一轮循环一般可分为变性、复性 延伸三步，其中延伸的温度高于复性的 温度 8.(不定项)当某单一营养缺陷型菌株所需的营 养大类确定后，就要确定其生长所需的特殊 营养物质。首先对特殊营养物质进行编组， 如表是对15种特殊营养物质进行的编组，编 组完成后，将沾有组合特殊营养物质的滤纸 片放在涂有实验菌甲、乙、丙的培养基上，培 养并观察其生长情况，三种试验菌的生长谱 如图所示。据图分析，下列叙述正确的是 ( 组别 组合特殊营养物质 A 1 2 3 4 公 2 6 1 8 9 C 3 7 10 11 12 D 4 8 11 13 14 E 5 9 12 14 15 第十四 ① 0 ® ① ① 甲 乙 两 A.实验中所用的培养基应为不含特殊营养物 质的基本培养基 B.实验菌甲、乙自身分别不能合成特殊营养 物质13、2 C.若单缺的特殊营养物质为10、11中的一 种，则在培养基上均会出现两个生长圈 D.实验菌丙的生长谱结果可能是由于所加营 养物质浓度过高，产生了抑菌圈 9.(不定项)(2025·江苏南京月考)在生殖细胞 形成早期，来自父方和母方的印记将全部被 消除，精子和卵细胞形成时产生新的甲基化 模式，因此在受精前来自父方和母方的等位 基因具有不同的甲基化模式。某研究团队利 用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改 变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变 性”，最终创造出“孤雌生殖”的小鼠（卵母细 胞中的H19、G12基因来自父方，lgf2r、Snpn 基因来自母方)。下列叙述正确的是( 第二完成 卵母 Ⅲ9和Gl2极体减数 基因的甲 细胞 基化 注入 分裂 卵泡 2,S7m次级并影 孤明 基因的去 食胚 卵丹 小 甲基化 细胞 A.上述甲基化重写没有改变小鼠体内的遗传 信息 B.可在小鼠的饲料中添加一定量的促性腺激 素促使超数排卵 C.“孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其 基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同 D.需对代孕母鼠进行同期发情处理后，再进 行胚胎移植 章 基因工程及生物技术的安全性与伦理问题学丽高吉 非选择题 10.(2025·山西朔州期末)玉米营养价值高，是 优良的粮食作物，但普通玉米缺乏动物生长 发育所必需的赖氨酸。科研工作者利用转 基因技术将马铃薯中已知序列的高赖氨酸 蛋白基因(SBgLR)转入玉米细胞获得高赖 氨酸玉米新品种，流程如图所示，其中强启 动子能驱动基因的持续转录。回答下列 问题： BomH I Kpn I Hind Ill 玉米 强启SR终止 构建导 幼 感 动子基因子 BamH 表达 EndΠ 11 抗性基因 T-DNA 卡那露 Ti质 抗性 (1)获取马铃薯SBgLR基因时，可取马铃薯 叶片进行DNA提取，并在沸水浴条件下用 鉴定。获取DNA后，通过 PCR技术扩增SBgLR基因，该技术依据的原 理是 。扩增出目的基因至少 需要3次循环，3次循环过程中，需要的引物 数量是 个。 (2)图中构建基因表达载体时，应选用的限 制酶是 。目的基因上的强启动子 是 (填“DNA聚合酶”或“RNA 聚合酶”)识别和结合的位点，T质粒中的卡 那霉素抗性基因是一种标记基因，其作用 是 (3)将重组质粒导入农杆菌前，常用Ca2+对 其进行处理，Ca·处理可以使细胞处于一种 的生理状态。利用农 杆菌侵染可将SBgLR基因转入玉米细胞中， 227 学霸高春白题生物学 原因是农杆菌T质粒中存在 能 将外源基因转移到植物细胞中并与植物细 胞的染色体DNA整合在一起。筛选转化的 玉米细胞时，需在培养基中加入 目的基因导入受体细胞后，常用 技术检测目的基因是否翻译出高赖氨酸蛋白。 11.(2024·江苏无锡模拟预测)为筛选出能与 SARS病毒的S蛋白特异性结合的受体蛋 白，研究人员在S蛋白末端添加TAP标签 (能特异性地与人和哺乳动物体内1gG类抗 体结合)，再利用该标签在病毒敏感细胞（如 非洲绿猴肾细胞)中快速纯化出S蛋白及其 相互作用的蛋白质，具体过程如下图所示。 其中Xho I、SmaI、EcoR I、BamH I表示限 制酶，PCMV、T7表示启动子，Kozak序列是 翻译起始因子结合位点的编码序列，Amp 表示氨苄青霉素抗性基因，oi表示复制原 点。请回答下列问题。 EeoR I BonH I 7P基因 列 5S固 PCMV.T7 S基周 S-TAP 转 5色一 TAP 非洲域猴STAP BromHI 基国肾细胞m融合蛋白 (1)为成功构建重组质粒peDNA3.1-S TAP,在利用PCR扩增S基因时，应在S基 因的5'端引入 序列，3'端删除 的编码序列。为了防止PCR扩增 发生突变，常选择高保真的Pyrobest DNA聚 合酶，该酶具有Tag DNA聚合酶所不具备的 3'→5'外切核酸酶活性，Pyrobest DNA聚合 酶能防止突变的原因是 228 (2)将S基因和TAP基因序列的扩增产物 进行 (方法)鉴定，结果显示两 个片段均得到扩增且与预期值大小相一致。 再经测序证实正确后，将这两个片段经 酶连接定向插入质粒pcDNA.3.1。 (3)重组质粒pcDNA3.1-S-TAP转染细胞 前，需将vero细胞置于37℃、 (填气体条件)下培养18~24h进行传代。 将传代的细胞与重组质粒peDNA3.1-S TAP以适宜比例混合，在转染试剂的作用下 转染细胞（实验组），为保证实验的科学性， 还需设置对照实验，具体做法为 将转染24h的细胞置于载玻片，洗涤、固定 后滴加正常人血清稀释液和荧光素标记的 羊抗人IgG抗体稀释液，荧光显微镜下观 察，若 ,则说明S-TAP融合蛋 白在vero细胞中得以表达。 (4)通过上述检测发现，S-TAP融合蛋白表 达量较低，其原因可能有 (填序号)。 ①重组质粒pcDNA3.1-S-TAP在vero细胞 中大量复制 ②S-TAP融合基因在vero细胞中转录出的 mRNA量较少 ③S基因与病毒宿主细胞的基因有不同的密 码子偏好性，翻译相应mRNA的RNA数量 不足 (5)为增强融合蛋白的表达，研究人员在质 粒转染前预先用重组痘苗病毒vT℉7-3感染 vero细胞，表达出的vTF7-3DNA聚合酶和 T7RNA聚合酶（能选择性高效激活T7启动 子)留存在细胞质基质中发挥作用。请据此 解释重组质粒peDNA3.1-S-TAP和重组痘 苗病毒vT下7-3共转染细胞能提高融合蛋白 表达效率的原因：11.(1)表达量与BD严重程度呈正相关(2))①AB②y/ (x+y)(3)X-l出现蓝色菌落 解析：(1)利用C2处理大肠杆菌细胞.可以使细胞处于一 种能够吸收周围环境DNA分子的生理状态，从而将重组 的基因表达载体导人细胞中；由题图1可知，启动子P是 硫代硫酸盐特异性诱导激活的启动子，因此，只有小鼠忠 BD时菌株E中的抗炎蛋白基因才会表达且精准治疗 BD,且其表达量与IBD严重程度呈正相关。(2)①由题图2 可知，方案1中的诱导型启动子只有在BD发生时才会表 达绿色荧光蛋白基因，绿色荧光蛋白的数量受Eε菌株数 量、活性和BD发病程度的影响。故选AB。②方案2中 因为有持续表达启动子Pc,在未受到BD诱导的时候，菌 株EC表达红色荧光蛋白基因，当受到BD诱导时，Ec既表 达红色荧光蛋白基因，也表达绿色荧光蛋白基因，如此 BD的患病程度就可以利用同时发红色和绿色荧光的工程 菌的数量与所有发荧光的工程菌的数量之比表示，即 y/(x+y).(3)由题图3可知，当小鼠患BD时，启动子P会 让基因B-sgRNA表达，从而使突变基因A-LaCZ恢复正常 序列，即恢复的LcZ基因会编码蛋白质使大肠杆菌菌落 在含X-(无色)的培养基上呈现蓝色（出现蓝色菌落）， 从而记录下小鼠曾经患过BD的情况， 12.(1)自我复制一个至多个限制酶切割位点启动子 (2)EcoR I、PstI磷酸二酯键(3)抗原一抗体杂交 (4)叶绿体基因不会通过花粉传给下一代 解析：(1)质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在 受体细胞中能自我复制、稳定存在：质粒DNA分子上有一 个至多个限制辞切割位点，经过限制酶切割后形成黏性末 端或平末端，便于外源DNA插入；RNA聚合酶识别和结合 的部位称为启动子。(2)E.coli DNA连接酶和T4DNA连 接酶都能连接黏性末端，另外T4DNA连接酶还可以连接 平末端。据题图可知，EcoR I和PtI切制DNA后产生的 是黏性末端，SmaI和EcoR V切割DNA后产生的是平末 端。因此题图2中EoRI、PsHI酶切割后的DNA片段可以 用E.coli DNA连接酶连接。DNA连接酶可以催化目的基 因片段与质粒载体片段之间形成磷酸二酯键，从而将其连 接。(3)检测目的基因是否表达产生蛋白质，用的方法是 抗原抗体杂交。(4)将目的基因导人叶绿体DNA中，叶 绿体基因不会通过花粉传给下一代，可以有效避免基因 污染。 第十四章真题演练 1.B解析：耐高温的DNA聚合酶的本质是蛋白质，基本单位 为氨基酸，A错误：耐高温DNA聚合酶在细胞内的DNA复 制和体外的PCR反应中均能发挥作用，B正确：缺少引物和 缓冲液及未控制温度时反应无法启动，C错误：高温保存会 不可逆地破坏酶活性，D错误。故选B。 2.A解析：琼脂糖凝胶的浓度会影响DNA分子在凝胶中的 迁移率和分辨率，琼脂糖凝胶的浓度通常是根据所需分离 的DNA片段大小来选择的。对于较大的DNA片段，比如基 因组DNA或质粒DNA,通常选择较低浓度的琼脂糖凝胶， 因为它们需要更大的速率来有效迁移：而对于较小的DNA 片段，比如PCR产物或酶切片段，则需要选择较高浓度的琼 脂糖凝胶，以提供更好的分辨率和分离效果，A正确。凝胶 载样缓冲液指示剂通常是一种颜色较深的染料，可以作为 电泳进度的指示分子，当溴酚蓝溶液达到凝胶2/3处时（可 看蓝色条带)，则停止电泳，B错误。在琼脂糖凝胶电泳中 当电场作用时，DNA片段实际上是向正极迁移，同时，DNA 片段的迁移速率与其大小成反比，即DNA片段越长，迁移 速率越授，C错误。琼脂糖凝胶中的DNA分子需染色后，才 可在波长为300m的紫外灯下被检测出来，D错误。故 选A。 3.(1)水解蛋白质，使得DNA与蛋白质分离溶解蛋白质等 一学霸高考·白题 物质，析出不溶于酒精的DNA(2)PCR技术扩增人工 合成(3)RNA案合酶识别并结合的部位同时实现两个 目的基因的共同表达及调控，从而降低基因工程的成本与 复杂性(4)HgB(5)3R2(6)D 解析：(1)从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作 用是水解蛋白质，使得DNA与蛋白质分离。提取过程中加 入体积分数为95%的顶冷酒精，其目的是溶解蛋白质等物 质，析出不溶于酒精的DNA。(2)本操作中获取目的基因的 方法是人工合成和PCR技术扩增。(3)穿梭质粒中p35s为 启动子，其作用是RNA聚合酶识别并结合的部位，驱动目 的基因转录：插人两个p35s启动子，其目的可能是同时实现 两个目的基因的共同表达及调控，从而降低基因工程的成 本与复杂性。(4)结合基因表达载体的示意图，分析题图中 穿梭质粒上的Kan和ygB两个标记基因的位置，用 山gB基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。 (5)为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色 体DNA作模板，进行PCR,应选用的引物是F3和R2。 (6)蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物 功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋 白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需 求，本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是用 1~1362合成基因序列和1363~1848天然基因序列获得 改造的抗虫蛋白，而将1~1362基因序列改变为棉花细胞 偏好密码子的基因序列，未产生新的蛋白质，不属于蛋白质 工程。A、B、C不符合题意，D符合题意。故选D。 生物技术与工程综合测试 1.C解析：蛋白陈富含营养物质，为细菌提供碳源、氮源和特 殊营养物质，A正确：酶具有专一性，细菌和霉菌体内的酶 存在差异，导致二者偏好的营养成分不同，B正确：培养细菌 时需将培养基的pH调至中性或弱碱性，培养霉菌时需将培 养基的pH调至酸性，C错误；在固体培养基上能形成菌落， 若需要比较细菌和霉菌形成的菌落差异，培养基中还需添 加琼脂，D正确。故选C。 2.B解析：促性腺激素属于蛋白质类激素，能被消化道中的 蛋白酶分解，因此在动物饲料中添加促性腺激素不能达到 超数排卵的目的，A错误：为提高胚胎利用率，可采用胚胎 分割等无性繁殖技术，获得同卵双胎或多胎，B正确：就地保 护是对生物多样性最有效的保护，如建立自然保护区，建立 穿山甲等颜危动植物繁育中心属于易地保护，C错误：卵裂 期的细胞数量增加，但胚胎总体积不变或略有减小，细胞内 有机物的种类增多，D错误。故选B。 3.C解析：脱分化是指已分化的细胞失去特有的结构和功 能，恢复到未分化状态的过程。将大熊猫成纤维细胞诱导 为多能干细胞，使其从已分化的状态转变为具有多向分化 潜能的细胞，此过程相当于脱分化，A正确。胚胎干细胞主 要来源于囊胚的内细胞团，具有发育的全能性，即其有发育 成完整个体的潜能，B正确：细胞全能性是指细胞经分裂和 分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的 潜能。大熊猫皮肤成纤维细胞被诱导为PSCs,只是形成了 多能干细胞，并没有发育成完整的个体，所以不能体现细胞 的全能性，C错误：利用诱导多能干细胞治疗疾病，由于是自 身细胞诱导形成的，其遗传物质与自身细胞相同，理论上可 避免发生免疫排斥反应，D正确。故选C 4.C解析：使用氯化钙处理大肠杆菌细胞，可使其处于感受 态，提高转化效率，即更多的大肠杆菌能吸收质粒，无论吸 收的是含目的基因的重组质粒（形成白色菌落）还是未重组 的质粒K(形成蓝色菌落)，都可增加筛选平板上白色和蓝 色菌落数，A正确：如果箭选平板中仅含卡那霉素，能生长 出的菌落都具有卡那霉素抗性，由于培养基不含X-,导 人重组质粒（含日的基因）的细菌与导入重组的质粒K的细 菌呈现白色，所以不可判定为含目的基因的菌株，B正确：筛 ·生物学·77 选平板中长出的白色菌落，可能是导入了重组质粒（含目的 基因)，但也可能是虽然导入了重组质粒但目的基因无法成 功表达目标蛋白，不能仅仅因为是白色菌落就判定为表达 目标蛋白的菌株，C错误：若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因 可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌，因为 自身环化的质粒K中B-半乳糖苷酶基因完整，能表达活性 B-半乳糖苷酶，分解X-gl形成蓝色菌落，D正确。故选C。 5.B解析：靛蓝能够稳定显色，不受H的影响，故本题方案 中无需转人能调控液泡pH的基因，A正确；将珈基因插人 Ti质粒时若使用的限制酶是PmeI和BamH I,则会将终止 子一同切除，故只能用BamH I,B错误：s师和idgS基因具 有各自的启动子，表达是相互独立进行的，C正确：将目的基 因导入植物细胞可采用农杆菌转化法，故农杆菌可将T质 粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，D正确。故 选B。 解题关键 由题图可知，将s师基因插入T质粒时若使用的限制晦 是PmeI和BamH I,则会将终止子一同切除，故只能用 BamH I;将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeI和SacI晦切 以避免产生的黏性宋端环化，提升构建成功的概率。 6.A解析：成功导人双价抗虫基因表达载体，并不意味着所 有转基因烟草都具有很强的抗虫性，基因表达受到多种因 素的影响，如基因的整合位置、表达水平，环境条件等，A错 误：启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点，启动转录过 程，B正确：基因表达截体包括启动子、终止子、目的基因、标 记基因和复制原点等，据此可推知，T1、T2,T3表示终止子， 作用是终止转录，C正确：PCR技术可以用于检测特定基因 是否存在于基因组中，因此可以用来检测P3a和Bph14是 否成功导入受体基因组中，D正确。故选A。 7.C解析：PCR扩增的方向是5'+3'，如果要将相应的识别 序列增加至扩增的DNA中，且最终可以通过限制 酶a和限制酶b从两端将目的基因切割下来，应当将相应 的序列增加至引物的5'端，用两种限制酶分别切割含有目 的基因的DNA片段和载体能够保证目的基因与载体的正 确连接，A、B正确：3轮循环结束，含有突变碱基对且两条链 完全等长的DNA分子有2个（可以画出第二轮循环结来后 所有的DNA分子情况，再通过观察得出该结果)，C错误；复 性的温度约为50℃，而延伸的温度约为72℃，D正确。故 选C。 8.ABD解析：本实验要确定某单一营养缺陷型菌株所需的特 殊营养物质，该菌在不含特殊营养物质的基本培养基上不 能生存，加人特殊营养物质才能生存，A正确。与其他组 (A、B、C、E组)相比，D组含有特殊营养物质13，实验菌甲 在D上能生存，在其他组上不能生存，因此推测实验菌甲不 能合成特殊营养物质13：同理，A组和B组共同含有的特殊 营养物质是2，实验菌乙在A和B上能生存，在其他组上不 能生存，因此推测实验菌乙不能合成特殊营养物质2，B正 确。与其他组相比，A组含有特殊营养物质1，据此推测实 验菌内不能合成特殊营养物质1，这三种菌都能合成10和 11,因此无论营养液中是否缺乏该营养物质，实验菌都能生 存，若单缺的特殊营养物质为10、11中的一种，则在培养基 上均会出现5个生长圈，C错误。实验菌丙的生长谱结果可 能是所加营养物质浓度过高，抑制了滤纸片周围菌种的生 长，因此产生了抑菌圈，D正确。故选ABD。 9.AD解析：题述甲基化重写没有改变DNA的序列，则小鼠 体内的遗传信息不会改变，A正确。促性腺激素属于多肽 口服会被水解，因此需要采用注射方式，B错误。“孤雎小 鼠”由两个生殖细胞（修饰后的次级卵母细胞和另一个卵母 细胞产生的极体)结合后发有而来，同时由于配子在形成过 程中会经历减数分裂的基因重组，或发生基因突变，将导致 两个生殖细胞结合后的“孤雕小鼠”基因型不一定与提供卵 母细胞的雌鼠相同，C错误。胚胎移植是指将通过体外受精 一学霸高考·白题 及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的睡 性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。其实质是早 期胚胎在同种生理环境条件下空间位置的转移，为了保证 胚胎移植的成功率，需要对代孕母鼠进行同期发情处理后， 再进行胚胎移植，D正确。故选AD。 10.(1)二苯胺试剂DNA半保留复制14(2)BamH I和 HindⅢRNA聚合酶便于重组DNA分子的筛选 (3)能吸收周围环境中DNA分子T-DNA潮霉素抗 原—抗体杂交 解析：(1)用二苯胺试剂进行沸水浴加热可鉴定DNA,PCR 技术依据的原理是DNA半保留复制。若该目的基因循环 扩增3次，则得到8个DNA分子、16条DNA链，除了最初 的两条模板链上没有引物，其余的DNA链上均有引物，故 理论上需要消耗16-2=14个引物。(2)用限制酶对目的 基因进行切割，题干信息表示强启动子能驱动基因持续表 达，所以用限制酶切割时需要保留强启动子，故选用 BamH I和HindⅢ两种限制酶。启动子是RNA聚合酶识 别和结合的位点，标记基因用来检测目的基因是否导入受 体细胞。(3)用Ca“处理农杆菌可使其处于一种能吸收周 围环境中DNA分子的生理状态。Ti质粒中的T-DNA能 将外源基因转移到植物细胞中并与植物细胞的染色体 DNA整合在一起，此时满霉素抗性基因也会整合上去，所 以需要用潮霉素进行筛选，对蛋白质进行检测常用抗原 抗体杂交技术 11.(1)Kozak序列和SmaI识别终止密码子能切除不正 确糝入的单核苷酸，并将其替换成正确的核苷酸(2)琼 脂糖凝胶电泳DNA连接(3)95%空气+5%C02使用 peDNA3.1空载体转染细胞，其余操作相同出现荧光标 记(4)②③(5)重组痘苗病毒vTF7-3感染vero细胞 表达出的TF7-3DNA聚合酵和T7RNA聚合酶能选择性 高效激活T7启动子，有利于S-TAP融合基因的转录，从而 有利于该蛋白质的表达 解析：(1)Kzk序列是翻译起始因子结合位点的编码序 列，分析题图可知，在S基因的上游加入了Kozak序列：为 了使目的基因和质粒连接，根据启动子的方向、质粒上的 酶切位点可知，上游不能用Xh和I,故应在S基因的上游加 人SmaI识别序列：因为S基因和TAP基因序列需要同步 表达才能利用TAP作为S蛋白的标签，二者共用一个启动 子，故应去除S基因下游的终止密码子编码序列。Pyrobest DNA聚合酶具有3'→5'外切核酸酶活性，能切除不正确摻 入的单核苷酸，并将其替换成正确的核苷酸，故可防止发 生突变。(2)将S基因和TAP基因序列的扩增产物进行琼 脂糖凝胶电泳鉴定，结果显示两个片段均得到扩增且与肉 期值大小相一致。DNA连接酶可将限制酶切割后形成的 末端连接。(3)细胞培养的气体条件是95%的空气和5% 的C02。对照组为了排除空质粒的影响，故应使用 peDNA3.1空载体转染细胞，其余操作相同。将转染24h 的细胞置于载玻片，洗涤、固定后滴加正常人血清稀释液 和荧光素标记的羊抗人IgG抗体稀释液，荧光显微镜下观 察，若出现荧光标记，则说明S-TAP融合蛋白在vem细胞 中得以表达，荧光素标记的羊抗人IgC抗体才能够与TAP 标签结合发出荧光。(4)蛋白质表达要经过转录和翻译两 个过程，①重组质粒peDNA3.1-S-TAP在veo细胞中大量 复制，与蛋白表达量较低无关，①不符合题意：②S-TAP融 合基因在veo细胞中转录出的mRNA量较少，模板少，影 响翻译出的蛋白质含量，②符合题意：③RNA在翻译过程 中起到转运氨基酸的作用，RNA数量不足影响翻译的进 行，③符合题意，故选②③。(5)先用重组痘苗病毒vTF7- 3感染vCrm细胞，表达出的vTF7-3DNA聚合商和T7RNA 聚合酶（能选择性高效激活T门启动子）留存在细胞质基质 中发挥作用，高效激活T7启动子，有利于S-TAP融合基因 的转录，从而有利于S-TAP融合蛋白的表达。 生物学·78