第十三章 细胞工程 综合测试&真题演练-【5星学霸·高考白题】2026年高考生物一轮复习

第十三章 ☑章末自测阶段强化，巩国提升1限时：35mim 一、选择题 1.(2025·贵州遵义二模)如图为利用大花灼兰 地下芽实现颜危植物规模化培养过程，其中 ①~③代表培养流程。下列相关叙述错误的是 ( ) 接种大花均兰①诱导愈②诱导生芽③移线 地下芽外植体 伤红织 生根 成活 A.大花灼兰地下芽外植体需用酒精和次氯酸 钠溶液处理 B.②过程为再分化，该过程的培养基成分与 ①过程不同 C.③过程中将多个丛芽分割培养可提高快速 繁殖的效率 D.培养过程会发生基因重组，增加大花灼兰 的遗传多样性 2.(2025·黑龙江哈尔滨模拟预测)科研人员探 究了避光与昼夜节律(16h光照和8h黑暗) 对诱导百岁兰叶片形成愈伤组织的影响，实 验结果见下图。相关叙述正确的是 ( 30o质量mg 质量m吧 400 250 昼夜节律 200 暗处理叶片 300 处理叶片 150 200 100H 50A 100H 0 26802 04 123456 时间/周 时间/周 A.实验中要将采集的叶片充分消毒，用蒸馏 水冲洗后，再将其接种到培养基中培养 B.该实验通常用固体培养基，且培养基中的 生长素与细胞分裂素含量的比值小于1 C.暗处理和昼夜节律处理所用培养基中均需 要添加蔗糖，且蔗糖的添加量要一致 D.昼夜节律处理下百岁兰脱分化和再分化的 速率更快，愈伤组织生长更好 第十三章细胞工程学霸高春 宗合测试 3.(2025·北京昌平区期末)科学家利用仙台病 毒诱导A、B两种动物细胞进行融合，之后进 行细胞培养。已知A、B两种细胞各自的生活 环境（如下表所示），且融合细胞只能在选择 培养基Ⅱ上生长，下列说法错误的是() 只能在选择培养基I上生长，生长 A细胞 环境的pH为4~6 只能在选择培养基Ⅱ上生长，生长 B细胞 环境的pH为7~8 A.可用PEG融合法和电融合法诱导动物细 胞融合 B.A、B两种动物细胞融合依赖于细胞膜的流 动性 C.在选择培养基Ⅱ上存活并生长的细胞就是 融合细胞 D.将融合后的细胞置于CO,培养箱以维持 培养液的pH 4.VEGF是血管内皮生长因子。研究表明恶性肿 瘤患者血清中的VEGF水平普遍高于健康人， VEGF已成为新型肿瘤标志物，在肿瘤筛查中具 有诊断价值。科研人员设计如下流程制备 VEGF单克隆抗体。下列叙述错误的是( 至时 培养骨 腊霜细胞 A.该流程利用了动物细胞融合和动物细胞培 养技术 B.①是从免疫小鼠脾脏中提取的多种B淋巴 细胞 C.②和③所进行的两次筛选过程都不需要用 到VEGF D.该单克隆抗体直接应用于人体可能会引起 过敏反应 209 学霸高春白题生物学 5.中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通 过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔卵母细 胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚 胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走 在世界前列。下列叙述错误的是 ()》 A.兔卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全 能性的物质 B.重组胚胎需要用物理或化学方法激活，使 之完成细胞分裂和发育进程 C.哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植 和体细胞核移植，前者的难度明显高于后者 D.在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期 开始出现细胞的分化 6.第三代试管婴儿技术(PGD/PGS)是对早期胚 胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行 胚胎移植，流程如图所示。图中检测包括 PGD和PGS(PGD是指胚胎植入前的基因诊 断，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结 构检测)。下列叙述正确的是 子宫输卵管 卵母细胞 0 胚胎移植 “理想 胚胎受精卵 胚胎”检测培养 卵母细胞和精子 单精子注入受精 A.采集的卵母细胞需培养至MⅡ期才能与获 能的精子进行受精 B.PGD和PGS技术可分别用于筛选唐氏综 合征和红绿色盲 C.进行胚胎移植前需要对夫妻双方进行免疫 检查 D.“理想胚胎”需培养至原肠胚期才能植入 子宫 210 7.(2025·山东青岛期末)如图所示，研究人员 将4CL胚胎干细胞（可表达绿色荧光蛋白）注 射到与其遗传信息不同的猕猴胚胎中，并最 终得到嵌合体猴。下列说法正确的是( 站 4C1胚胎千细胞 桑甚胚 嵌合体翼 战合原肠胚 A.嵌合原肠胚阶段进行胚胎分割可能产生更 多的嵌合体猴 B.嵌合胚胎中的滋养层细胞将发育为嵌合体 猴的各种组织 C.植人胚胎前通常需要对代孕母猴注射相关 激素使其超数排卵 D.嵌合体猴部分细胞可发出绿色荧光，其遗 传信息不一定能遗传给后代 8.(不定项)解偶联蛋白1(UCP1)具有消除线粒 体内膜两侧的H浓度差、减少ATP合成、增加 产热的功能。我国科学家应用CRISPR/Cas9 技术将猪的UCPI基因置换成小鼠的UCP1基 因，并使鼠UCP1基因在猪的白色脂肪组织中 特异性表达，获得脂肪沉积少的“瘦肉猪”。如 图是“瘦肉猪”的主要培育过程，下列叙述正确 的是 胤CPI Cas9-gRNA 靶向载体 质粒 n转化 猪胚胎成并维 细跑PEFs) 山筛选（有限 稀释法培养) 细胞核 沙 移植 g 重组细胞 瘦肉猪 A.应用CRISPR/Cas9技术育种的主要原理 是基因重组 B.过程b进行有限稀释培养的目的是获得阳 性单克隆细胞系 C.过程d的受体细胞最好是去核的猪卵母 细胞 D.过程e要对代孕母猪进行同期发情处理， 并选择发育正常的原肠胚植入代孕母猪输 卵管内 二、非选择题 9.(2025·重庆沙坪坝开学考试)某科研小组发 现某种植物(M)耐盐碱，控制性状的基因位 于细胞质中，另一种植物(N)高产氰化物，控 制性状的基因位于染色体上。该科研小组利 用植物体细胞杂交技术对培育耐盐碱高产氰 化物植物进行了课题立项，研究思路如图（序 号表示过程)。请回答下列问题： ⑧I@ M细胞 ⊙①o N细胞 (1)图中①过程常用 去除 细胞壁。甲细胞通过④过程得到愈伤组织， 该过程所用培养基除了加入基本的营养物质 外，还需添加一定比例的 通过PCR技术发现，甲细胞含有耐盐碱基因， 而部分愈伤组织细胞中没有检测到耐盐碱基 因，从细胞分裂时基因分配的角度分析，主要 原因是 (2)将处理后的M、N两种原生质体分别制成 适宜浓度的细胞悬液，进行密度检测并等比 例混合后，用PEG诱导融合。如果融合时只 考虑两个原生质体的融合，一定时间后混合 细胞悬液中的原生质体最多有 种。 当原生质体融合到一定程度时，在混合悬液 中加入过量的培养液可以阻止原生质体融 合，主要原理是 (3)丙需要移栽到 的环境中才 可以筛选出目的植株。 第十三章细胞工程学霸高春 10.(2025·湖北武汉月考)癌症的免疫疗法是 指重新激活抗肿瘤的免疫细胞，进而克服肿 瘤的免疫逃逸。某些种类癌细胞表面有高 表达的银蛋白PSMA,CD28是T细胞表面受 体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细 胞与T细胞结合部位的聚集。图甲为科研 人员尝试构建的双特异性抗体PSMA×CD28 生产流程图：图乙为双特异性抗体PSMA× CD28的结构及作用机理图，请回答问题： 物质X骨髓府 热细胞)一 T细胞 细胞、 诱导融合 之融合品选筛选】 PSMA CD28 淋巴细胞 杂文杂交瘤 细胞AB细胞AxB H链 乙 (1)图甲分析可知，制备双特异性抗体 PSMA×CD28的过程中，用到的动物细胞工 程技术主要有 (答出2点即可)。 (2)双特异性抗体PSMA×CD28制备时，应 先将 (物质X)分别注射到小鼠 体内再分离出B淋巴细胞。诱导杂交瘤细 胞融合与诱导植物原生质体融合不同的是 可用 (填方法)。将第一次 筛选获得的细胞进行多倍稀释，借助多孔细 胞培养板，利用 的原理进行 第二次筛选，选出能分泌所需抗体的杂交瘤 细胞。 (3)抗体都是由两条H链和两条L链组成 的4条肽链对称结构。由于融合细胞会表 达出两种L链和两种H链且L链和H链又 能随机组合，因此杂交瘤细胞A×B会产生 (填“一种”或“多种”)抗体。双 特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞 的机理是 21 学霸高春白题生物学 第十三章 ☑真题集训探究考向，剖析考点限时：15min 1.(2025·安徽卷)细胞工程技术已在生物制药 和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关 于动物细胞工程的叙述，正确的是 A.从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后 直接培养的细胞称为传代细胞 B.将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细 胞，可将其诱导形成PS细胞 C.将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导 融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞 D.采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑甚胚 或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化 2.(不定项)(2024·山东卷)下列关于植物愈伤 组织的说法正确的是 ( A.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细 胞壁获得原生质体 B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形 成愈伤组织 C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来 自亲本的2个细胞核 D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程 属于无性繁殖 3.(2024·湖北卷)波尔山羊享有“世界山羊之 王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优 点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波 尔山羊。下列叙述错误的是 () A.选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行 超数排卵处理 B.胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学 检测 C.普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为 受体 D.生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 212 真题演练 4.(2024·黑吉辽卷)从小鼠胚胎中分离获取胚 胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不 同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙 述正确的是 ( :指数增长期平台期 104 期①D 23 4 时问届 A.传代培养时，培养皿需密封防止污染 B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C.直接用离心法收集细胞进行传代培养 D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大 有关 5.(2024·湖北卷)植物甲抗旱、抗病性强，植物 乙分藥能力强、结实性好。科研人员通过植 物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性 状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错 误的是 降解(1.5h) 甲的 植物甲 原生 叶片 艹a 质体 合 况合酶液处理 的 ③杂种④愈伤 生质 组织 乙的 体 植物乙 am 原生 叶片 酶解(2h) 质体 植物两 A.过程①中酶处理的时间差异，原因可能是 两种亲本的细胞壁结构有差异 B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG 诱导原生质体融合 C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素 和细胞分裂素 D.可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是 否为杂种植株12.(1)囊胚内细胞团(2)原肠胚内胚层同期发情 (3)细胞中的蛋白质糖基化程度低排除细胞本身蛋白表 达受阻的情况（或保证细胞都具有正常表达蛋白质的功 能)(4)促进primed干细胞中表达更多OGA,从而转化 为naive干细胞促进胚胎发育的物质 具有产生完整生 物体或分化成其他各种细胞的潜能 解析：(1)从题图1流程来看，猴子芽体后续能进一步发育 形成胚胎，在胚胎发育过程中，囊胚期的胚胎开始出现细 胞分化，具有内细胞团等结构，可进一步发育成个体，所以 猴子芽体相当于囊胚期的胚胎。囊胚期的内细胞团将来 发育成胎儿的各种组织，所以过程③的起点细胞应取自芽 体的内细胞团部位。(2)过程④⑤是从囊胚进一步发育 形成的胚胎是原肠胚，原肠胚发有过程中，由该胚胎表面 细胞向内迁移形成内胚层。过程⑥是胚胎移植，需对受体 母猴进行同期发情处理，使供受体生殖器官的生理变化相 同，为移入受体的供体胚胎提供相同的生理环境。(3)据 题干信息和题图2分析可知，naive干细胞中OGA相对含 量高，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶，故naive干 细胞发育潜能更高的原因可能是naive干细胞中的蛋白质 糖基化程度低。该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作 为对照，是因为其表达量相对稳定，不受实验处理的影响， 可以作为内参基因用于校正其他蛋白的表达水平，排除细 胞本身蛋白表达受阻的情况（或保证细胞都具有正常表达 蛋白质的功能)。(4)过程①是将primed千细胞诱导形成 naive干细胞，需在题图2中的诱导培养基中完成，目的是 促进primed千细胞表达更多OGA,从而转化为naive干细 胞。与过程①相比，过程②是naive干细胞的培养，nive干 细胞具有较高的发育潜能，所以培养液中还应添加能促进 胚胎发育的物质。神经干细胞是已经分化的细胞，与神经 干细胞相比，primed干细胞具有产生完整生物体或分化成 其他各种细胞的潜能。 第十三章综合测试 1.D解析：植物组织培养过程中，需用酒精和次氯酸钠溶液 对外植体进行消毒处理，A正确：过程①为脱分化，过程② 为再分化，这两个过程所需的培养基成分不同，主要是植物 激素的浓度和比例不同，B正确：③过程中将多个丛芽分制 培养，可使一个外植体培养出更多的植株，从而提高快速繁 殖的效率，C正确：植物组织培养过程中，细胞进行的是有丝 分裂，不会发生基因重组，基因重组一般发生在减数分裂过 程中，D错误。故选D 2.C解析：在植物组织培养中，为防止微生物污染，采集的时 片需充分消毒，再用无菌水冲洗后接种到培养基中，A错 误：诱导叶片形成愈伤组织时，生长素与细胞分裂素含量的 比值等于1时有利于愈伤组织形成，B错误：暗处理和昼夜 节律处理实验中，蔗糖是提供能量和调节渗透压的重要物 质，遵循单一变量原则，蔗糖添加量要一致，C正确：从题图 中可知，昼夜节律处理条件下随着时间推移愈伤组织质量 增加更显著，说明昼夜节律处理下百岁兰脱分化形成愈伤 组织的速率更快，愈伤组织生长更好，但无法判断再分化的 速度，D错误。故选C。 3.C解析：可用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法诱 导动物细胞融合，A正确；A、B两种动物细胞融合，体现了 细胞膜具有流动性，B正确：选择培养基Ⅱ上存活并生长的 细胞是融合细胞或B细胞，C错误：C0,属于酸性气体，将酚 合后的细胞置于CO,培养箱以维持培养液的pH,D正确。 故选C。 4.C解析：制备单克降抗体需要将已免疫的B淋巴细胞与骨 髓瘤细胞融合，制成杂交瘤细胞，然后进行细胞培养使之产 生单克隆抗体，该过程中需要用到动物细胞融合和动物细 胞培养技术，A正确：由题图可知，在①之前向小鼠体内注 射VEGF(作抗原)，引发小鼠特异性免疫，获得已免疫的 B淋巴细胞，由于在此过程中，小鼠还可能接受其他抗原物 质刺激，因此从免疫细胞脾脏中提取的B淋巴细胞有多种 B正确：②代表利用选择培养基进行的第一次筛选，该过程 一学霸高考·白思 不需要用到VEGF,③代表第二次筛选，即克隆化培养和抗 体检测，其中抗体检测需要用VEGF与克隆化培养的杂交瘤 细胞产生的抗体进行抗原一抗体杂交，C错误：由题图可知 该单克隆抗体是利用小鼠制备的，作为生物制剂应用于人 体时，因为其属于异源蛋白，可能引起过敏反应，D正确。 故选C。 5.C解析：由题意可知，兔卵母细胞质中有使大熊猫细胞核 表达全能性的物质，A正确：去核的卵母细胞与供体细胞通 过电融合法形成重组胚胎，融合后的重构胚需要用物理或 化学的方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程， B正确：由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对 容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难 因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植， C错误：胚胎发育过程中早期胚胎具有全能性，还没分化，囊 胚期开始出现细胞分化，D正确。故选C 6.A解析：体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外 培养到MⅡ期，才可以与获能的精子完成受精作用，A正确。 PGD是指胚胎植入前的基因诊断，可用于筛选红绿色官 PGS是指胚胎植人前的染色体数目和结构检测，可用于筛 选唐氏综合征，B错误。受体子宫对外来胚胎儿乎不发生免 度反应.因此进行胚胎移植前不需要对夫妻双方进行免疫 检查，C错误。“理想胚胎”需培养至桑甚胚阶段或囊胚阶 段才能植人子官，D错误。故选A。 7,D解析：原肠胚阶段细胞已经分化，所以嵌合原肠胚阶段 进行胚胎分割一般不会产生更多的嵌合体猴，A错误：滋养 层细胞将会发育成胎盘和胎膜，B错误：嵌合胚胎移植前，需 要对代孕母猴注射相关激素，进行同期发情处理，C错误：嵌 合体猴部分细胞可发出绿色荧光，如果控制表达绿色荧光 蛋白的基因位于体细胞中，则遗传信息一般不能遗传给后 代，D正确。故选D。 8.ABC解析：应用CRISPR/Cas9技术育种的主要原理是基 因重组，使得小鼠的UCP1基因在猪的体细胞中正常表达 A正确：过程b进行有限稀释培养，保证加到每个培养孔内 的细胞数不超过1个，该操作的目的是获得阳性单克隆细 胞系，B正确：卵母细胞含有激发细胞核全能性的物质，还可 为细胞的早期分裂提供营养物质，故过程d的受体细胞最 好是去核的猪卵母细胞，C正确；过程ε要对代孕母猪进行 同期发情处理，使之与供体处于相同生理状态，并选择发育 正常的桑葚胚或囊胚植人代孕母猪输卵管内，D错误。故 选ABC。 解题突破 分析题意和题图：科学家应用CRISPR/Cas9技术将猎的 UCP1基因置换成小鼠的UCP1基因，并使小鼠UCP1基因在 猪的白色脂肪组织中特异性表达，猪的体细胞获得了小鼠的 UCP1基因，且该基因在猪的体细胞中正常表达。 9.(1)纤维素酶和果胶酶生长素和细胞分裂素M耐盐碱 的基因位于细胞质中，而细胞质基因在细胞分裂过程中是 随机分配的(2)3过量培养液可以达到稀释的目的，进 而可降低PEG浓度，使其失去促进原生质体融合的作用 (3)含高浓度盐溶液 解析：(1)题图中①过程的操作是为了获得原生质体，由于 细胞壁的主要成分是纤维煮和果胶，根据酶的专一性可推 知，为了获得原生质体常用酶解法，即用纤维素酶和果胶酶 去除细胞壁。甲细胞通过④过程（脱分化）得到愈伤组织， 该过程所用培养基除了加入基本的营养物质外，还需添加 一定比例的生长素和细胞分裂素。通过PCR技术发现，甲 细胞含有耐盐碱基因，而部分愈伤组织细胞中没有检测到 耐盐碱基因，题意显示，M耐盐碱的基因位于细胞质中，而 细胞质基因在细胞分裂过程中是随机分配的，因此就可能 出现有的愈伤组织细胞中含有耐盐基因，有的愈伤组织细 胞中不含时盐碱基因。(2)将处理后的M、N两种原生质体 分别制成适宜浓度的细胞悬液，进行密度检测并等比例混 合后，用PEG诱导融合。如果融合时只考虑两个原生质体 的融合，一定时间后混合细跑悬液中的原生质体最多有3 ·生物学·72一 种，包含两种细胞自融和互融的类型，可表示为MM、NN MN类型。当原生质体融合到一定程度时，在混合悬液中加 入过量的培养液可以阻止原生质体融合，因为过量培养液 可以达到稀释的目的，进而可降低PEG浓度，使其失去促进 原生质体融合的作用。(3)丙需要移栽到含高浓度盐溶液 的环境中才可以筛选出目的植株，因为目的植株需要具有 耐盐碱的特征。 10.(1)动物细胞融合、动物细胞培养(2)PSMA、CD28灭 活病毒诱导法抗原与抗体特异性结合(3)多种双特 异性抗体PSMA×CD28既能结合PSMA,又能结合CD28. 使CD28在癌细胞与T细胞结合部位聚集，从而有效激活 T细胞杀伤癌细胞 解析：(1)制备双特异性抗体的过程中用到的动物细胞工 程技术主要有动物细胞融合（诱导B淋巴细胞和骨髓膏细 胞融合)和动物细胞培养技术（培养B淋巴细胞等）等。 (2)双特异性抗体PSMA×CD28制备时，PSMA、CD28相当 于抗原，需要先将PSMA,CD28分别注射到小鼠体内刺温 小鼠产生相应B淋巴细胞，再分离出B淋巴细胞。灭活病 毒诱导法是诱导动物细胞融合特有的方法。抗原与抗体 的结合具有特异性，故利用抗原与抗体特异性结合的原理 可筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。(3)融合细胞会 表达出两种L链和两种H链，而L链和H链又是随机组合 的，所以杂交瘤细胞A×B会产生多种抗体。双特异性抗体 PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是双特异性抗体 PSMA×CD28既能结合PSMA,又能结合CD28,使CD28在 癌细胞与T细胞结合部位聚集，从而有效激活T细胞杀伤 癌细胞 第十三章真题演练 1.B解析：用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为原代细 胞，A错误：将特定基因或特定蛋白（特定的转录因子如 Oct4、Sox2、Kf4和c-Myc)导人已分化的T细胞，可将其诱 导形成PS细胞，B正确：融合细胞包括具有同种核的融合 细胞和杂交瘤细胞，需经多次筛选才能获得分泌特定抗体 的杂交瘤细胞，C错误：囊胚细胞已开始分化，D错误。故 选B。 2.BD解析：植物细胞壁的主要组成成分是纤维素和果胶，故 用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质 体，A错误：用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细 胞，得到原生质体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形 成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成 杂种植株，故融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成 愈伤组织，B正确：体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有 来自亲本的遗传物质，只有1个细跑核，C错误：通过愈伤组 织再生出多个完整植株的过程属于植物的组织培养，从繁 殖方式看属于无性繁殖，D正确。故选BD。 3.D解析：选择遗传性状优良的健康波尔母山羊作为供体 进行超数排卵处理，A正确：胚胎移植前，采集部分滋养层 细胞进行遗传学检测，B正确：作为受体的杜泊母山羊需具 备健康的体质和正常繁殖能力，但山羊和绵羊是不同的物 种，具有生殖隔离，不能将山羊的胚胎移植到绵羊子宫内发 有，即普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体，C正确： 生产中需选择品质优良的波尔公山羊提供精子，D错误。 故选D。 4.D解析：传代培养时需要营造无菌、无毒以及95%空气+ 5%C02的气体环境，而非密封，A错误：选取②的细胞进行 传代培养比①更合理，因为②的细胞增长开始变得缓慢， B错误：对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，需要先用胰 蛋白酶等处理，使之分散为单个细胞，然后用离心法收集 C错误；细胞增长进人平台期可能与细胞密度过大、细胞间 产生接触抑制有关，D正确。故选D 5,B解析：酶解是为了去除植物细跑的细胞壁，过程①中酶 处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，A正 一学霸高考·白题 确：过程②为原生质体的融合，常用PEG诱导，灭活的仙台 病毒可诱导动物细胞融合，不能用于植物，B错误：过程④ (脱分化)和⑤（再分化）的培养基中均需要添加生长索和细 胞分裂素，但二者在两个过程中比例不同，C正确：植物丙是 植物甲和植物乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗 传物质，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为 杂种植株，D正确。故选B。 第十四章基因工程及生物技术的安全性 与伦理问题 第1节基因工程的工具及操作程序 1.B解析：基因工程中的“分子缝合针"是指DNA连接酶而 非DNA聚合酶，A错误：限制酶能够识别双链DNA分子的 特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯 键断开，即一条链断开1个磷酸二酯键，产生1个游离的磷 酸基团，所以限制酶切脚DNA分子一次可断开2个磷酸二 酯键，产生2个游离的磷酸基团，B正确：T4DNA连接酶既 可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合” 双链DNA片段的平末端，恢复被限制酶切开的磷酸二酯 键，C错误：作为载体的质粒上通常含有抗性基因（四环素 抗性基因、氧苄青霉素抗性基因)作为标记基因，便于筛选 成功导入重组DNA分子的受体细胞，D错误。故选B。 2.C解析：细菌CRISPR序列间隔区储存的外源DNA信息是 转录生成gRNA的模板，A正确；由于gRNA能识别外源 DNA的靶序列，Cas9/RNA复合物与限制性内切核酸酶类 似，切割具有序列特异性，B正确：外源DNA人侵后，并非 Cas9基因表达产物随即切割外源DNA,而是Cas9要与 gRNA进行一系列组装过程，形成有靶向切割能力的复合体 并切断人侵DNA,C错误；gRNA识别外源DNA靶序列遵循 碱基互补配对原则，但在实际过程中可能会受到多种因素 影响而出现错配的情况，D正确。故选C。 3.C解析：转录时，RNA聚合酶识别并结合DNA分子上的启 动子，启动转录过程，A正确：运输基因的载体需要将基因 运输到受体细跑中进行扩增和表达，因此运输基因的载体 应有复制原点、标记基因、启动子和终止子等，B正确：同源 切割构建基因表达载体的过程中有DNA片段的断裂和连 接，因此有磷酸二酯键的断开和形成，C错误：目的基因两端 需要有同源序列A-B才能完成同源切割，因此需要将A、B 序列在内的日的基因进行PCR扩增，可选择题图中的引物 PI(或P2)和P6(支P5)对目的基因进行PCR,D正确。故 选C 4,C解析：用同一种限制酶切割质粒和含目的基因的DNA 片段后，目的基因可能会反向连接到质粒上，因此目的基因 表达的产物可能不相同，A正确；若单独使用SmaI切割质 粒和含目的基因的DNA片段，会破坏质粒上的氨苄青霉素 抗性基因，使含有目的基因的受体菌不能在含氨苄青霉素 的培养基中生长，B正确：若选择BamH I和SmaI切割质 粒和含目的基因的DNA片段，重组质粒上含有正常的四环 素抗性基因，能在含四环素培养基中生长的受体菌有可能 是含有目的基因的重组质粒，也有可能是不含目的基因的 普通质粒，C错误：含目的基因的DNA片段上没有BlI的 识别序列，不能用BcI切割含目的基因的DNA片段，但 Sau3AI切割DNA后产生的黏性末端与BdI相同，故若用 EcoR I和BcI切割质粒，则需用EcoR I和Sau3AI切割含 目的基因的DNA片段，D正确。故选C。 5.C解析：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液 中溶解度不同，加入食盐的目的是溶解DNA和过滤去除不 溶的杂质，A正确：65℃水浴处理可使蛋白质变性，而DNA 不降解，DNA热稳定性比蛋白质高，B正确：获取白色絮状 物后，需要加入KC溶液处理，再加入二苯胺试剂，沸水浴 加热时需等待相应时间才可观察到鉴定结果，C错误：若上 ·生物学·73一