精品解析：四川省成都市简阳实验学校（成都石室阳安学校）2024-2025学年高二下学期5月月考生物试题

成都石室阳安学校2024-2025学年度下期高2023级5月月考 生物 本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分。第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。 考试时间75分钟 第Ⅰ卷（选择题 共45分） 一、单项选择题（本题共15题，每小题3分，共45分） 1. 科研人员在加勒比地区瓜德罗普岛上的红树林中发现了2厘米长的华丽硫珠菌，这是有史以来发现的体型最大的细菌。华丽硫珠菌利用氧化含硫化合物获得的能量将CO₂合成糖类，维持自身生命活动。华丽硫珠菌（ ） A. 是一种异养型微生物 B. 在核糖体上合成蛋白质 C. 在线粒体中合成ATP D. 遗传物质是核糖核酸 2. “三千作成都，两千作蜀锦”，蜀锦作为中国四大名锦之一，以其独特的工艺和绚丽的色彩而闻名。蜀锦在织造过程中多使用染色后的熟蚕丝线，蚕丝线的主要成分是蚕丝蛋白。下列叙述正确的是（ ） A. 蚕丝蛋白基因是由两条脱氧核苷酸链构成的 B. 生蚕丝线煮制为熟蚕丝线后肽键几乎全部破坏 C. 蚕丝蛋白中的氮元素主要存在于游离的氨基中 D. 蚕丝蛋白基因中含有腺嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶 3. 脂滴是细胞内储存脂肪的结构，脂滴膜由磷脂分子构成，脂滴表面镶嵌有多种蛋白，这些蛋白在脂滴的形成、转运和降解过程中发挥重要作用。下列叙述错误的是（ ） A. 脂肪在生命活动需要时可以分解供能 B. 脂滴膜上的蛋白质分子是可以运动的 C. 脂肪是由脂肪酸和甘油反应形成的酯 D. 脂滴膜的基本支架由磷脂双分子层构成 4. 生命观念中的“结构与功能观”，内涵是指一定结构必然有其对应的功能，而一定功能需要对应的结构来完成。下列有关“结构与功能观”的叙述中正确的是（ ） A. 分布在细胞不同部位的核糖体结构有差异，导致合成的蛋白质种类不同 B. 高尔基体在分泌蛋白加工运输过程中起交通枢纽作用，是由于其能接收和形成囊泡 C. 根部细胞不含叶绿体，利用这类细胞不可能培育出含叶绿体的植株 D. 吞噬细胞的溶酶体能合成多种水解酶，有利于杀死侵入机体的病毒或病菌 5. 生活中我们经常会接触到发酵食品，如果酒、果醋、泡菜等，下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（ ） A. 泡菜坛内的白色菌膜、变酸的果酒表面的菌膜所含菌种完全相同 B. 制作果醋时发酵液中的醋酸菌通过无丝分裂增殖，繁殖速度快 C. 酿制果醋和制作果酒所利用的主要微生物的代谢类型不相同 D. 制成果醋和泡菜都需要经高压蒸汽灭菌，目的是延长产品保质期 6. GA3是一种由C、H、O三种元素构成的植物生长调节剂，能促进茎伸长和种子萌发。但GA3的广泛施用会导致其在土壤中残留。某研究小组从长期施用GA3的农田土壤中筛选能降解GA3的菌株，实验思路如下图所示，实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和X，乙的组分为无机盐、水、X和Y。下列相关叙述错误的是（ ） A. 多次筛选⑤可适当提高GA3浓度，以期获得降解能力强的变异菌株 B. 选择丙中GA3含量低的培养液，接入新的培养液，扩增目的菌数量 C. X是GA3和蛋白胨，统计乙的菌落数目可计算土壤中目的菌的浓度 D. 用于环保实践前，需检测菌株代谢物、繁殖能力等，以防二次污染 7. 2024年世界园艺博览会在成都举行，世园会的吉祥物“桐妹儿”的核心创意来自中国特有孑遗植物珙桐。珙桐有“植物活化石”之称，是国家一级重点保护植物。科研人员从珙桐叶中分离出了具有抗肿瘤功效的次生代谢物——槲皮素。野生珙桐资源有限，下图是通过植物细胞工程等技术手段进行珙桐的扩大培养，其中序号代表相应的处理过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 通过过程①②④可定向改变植株性状 B. 启动过程②③的关键激素是生长素和赤霉素 C. 过程⑥体现了愈伤组织全能性高的特点 D. 植株乙丙丁的获取都采用了植物组织培养技术 8. 非对称细胞融合技术是指利用射线照射某原生质体，去除其细胞核，用蕊香红6G处理另一原生质体，使其细胞质失活，然后诱导两原生质体融合。研究者通过该技术，利用野生雄性不育稻（2n=24，雄性不育基因为细胞质基因）和优良水稻（2n=24）培育优良水稻雄性不育系已获得成功。下列说法正确的是（ ） A. 应用射线照射优良水稻原生质体，用蕊香红6G处理野生雄性不育稻原生质体 B. 需在低渗或等渗环境下用纤维素酶和果胶酶处理两种植物细胞获得原生质体 C. 原生质体融合成功的标志是形成新的植物细胞壁 D. 可用聚乙二醇融合法诱导原生质体的融合，成功融合的细胞染色体的组成为4n=48 9. “细胞培养肉”是利用体外培养动物细胞的方式来获得构成肌肉组织的细胞，再经收集、塑形、食品化加工等过程制备可供食用的肉类制品。下列叙述错误的是（ ） A. 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织可获得分散的肌肉母细胞 B. 肌肉母细胞的原代培养是指肌肉母细胞的第一次细胞增殖 C. 生物反应器中支架可为细胞贴壁生长提供更多贴附空间 D. 往生物反应器中充入CO₂的主要作用是维持培养液的pH 10. 科学家利用雌性小鼠的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），随后添加生物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞，并使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康小鼠。下列说法错误的是（ ） A. iPS细胞培养过程需置于95%空气和5%二氧化碳混合气体的培养箱中 B. 该技术有望解决某些女性不能产生卵细胞的不育问题 C. iPS细胞与原始生殖细胞样细胞遗传信息相同 D. 题中研究过程涉及动物细胞培养、动物细胞融合、体外受精、胚胎移植等技术 11. 以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列正确的是 （ ） A. 体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 B. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 C. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 D. 将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 12. “低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程，下列叙述正确的是（ ） A. 重组细胞1培养后可以不取核，直接注入去核卵母细胞 B. 胚胎成纤维细胞分化程度高，核移植难度高于体细胞核移植 C. 犊牛的遗传物质全部来自黑白花奶牛和乳糖酶基因 D. 犊牛成年后与普通牛杂交，子代有1/2是低乳糖奶牛 13. 濒危动物保护组织曾宣布单峰骆驼野外灭绝。但近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家计划通过如图所示途径研究拯救野化单峰骆驼的方案。下列对研究途径的分析，正确的是（ ） A. 无论培育E后代还是F后代，都需要对A、D进行同期发情处理 B. 取胚胎①的内细胞团的细胞鉴定E的性别和遗传病致病基因携带情况 C. 胚胎①②移植前，要给D注射免疫抑制药物，以减少对胚胎的免疫排斥 D. E属于“四亲骆驼”，此技术可以避免A的线粒体遗传病基因传递给后代 14. 目的基因与质粒连接，导入大肠杆菌，构成基因文库。某同学提取到一份目的基因（两端有SpeI、XbaI识别位点），计划连接到质粒。下列对实验分析正确的是（ ） SpeI识别位点 XbaI识别位点 质粒DNA片段碱基序列 5'-A↓CTAGT-3' 5'-T↓CTAGA-3' 5'-ATTGATCACATCTAGATAC-3' 3'-TGATC↑A-5' 3'-AGATC↑T-5' 3'-TAACTAGTGTAGATCTATG-5' A. 可用T4 DNA连接酶连接经限制酶处理过的目的基因和质粒 B. 质粒DNA片段有SpeI识别位点和XbaI识别位点各1处 C. 两种限制酶在5'-CTAG-3'处断开氢键，产生相同的黏性末端 D. 连接好的重组DNA可以用SpeI或XbaI再次切割出目的基因 15. PCR扩增目的基因、琼脂糖凝胶电泳鉴定目的基因是基因工程常用操作。下列对操作的叙述正确的是（ ） A. PCR体系中需加入DNA聚合酶、解旋酶、核糖核苷酸、引物、模板 B. 电泳结束后，向凝胶喷洒二苯胺溶液，沸水浴后显示DNA条带位置 C. DNA本身携带有大量正电荷，均匀电场作用下由负极向正极迁移 D. PCR原理是DNA半保留复制，每次循环分为变性、复性、延伸三步 第II卷（非选择题 共55分） 二、非选择题（共5题，共55分） 16. 帕金森综合征是一种神经退行性疾病，神经元中α-Synuclein蛋白聚积是主要致病因素。研究发现患者普遍存在溶酶体膜蛋白TMEM175变异，如图所示。为探究TMEM175蛋白在该病发生中的作用，进行了一系列研究。请回答下列问题： （1）帕金森综合征患者TMEM175蛋白的第41位氨基酸由天冬氨酸突变为丙氨酸，说明TMEM175基因发生_____而突变，神经元中发生的这种突变_____（从“能”“不能”“不一定”中选填）遗传。 （2）突变TMEM175基因在细胞核中以_____为原料，由RNA聚合酶催化形成_____键，不断延伸合成mRNA． （3）mRNA转移到细胞质中，与_______结合，合成一段肽链后转移到粗面内质网上继续合成，再由囊泡包裹沿着细胞质中______由内质网到达高尔基体。突变的TMEM175基因合成的肽链由于氨基酸之间作用的变化使肽链的______改变，从而影响TMEM175蛋白的功能。 （4）基因敲除等实验发现TMEM175蛋白参与溶酶体内酸碱稳态调节。如图1所示，溶酶体膜的______对H+具有屏障作用，膜上的H+转运蛋白将H+以______的方式运入溶酶体，使溶酶体内pH小于细胞质基质。TMEM175蛋白可将H+运出，维持溶酶体内pH约为4．6．据图2分析，TMEM175蛋白变异将影响溶酶体的功能，原因是_____。 （5）综上推测，TMEM175蛋白变异是引起α-Synuclein蛋白聚积致病的原因，理由是____。 17. 海水稻是一种能在海边滩涂地和盐碱地生长的农作物品种。与传统水稻相比，海水稻具备更为优良的耐盐碱性。下图乙为海水稻与普通水稻在3%KNO3溶液中原生质体体积变化图。请据图回答： （1）由图乙分析可知海水稻为______（填“Ⅰ”或“Ⅱ”）组水稻；由此也可推知滩涂地和盐碱地不利于一般的农作物生长的原因______________________________。 （2）为了探究海水稻根尖细胞适应低盐和高盐胁迫的调节机制，科研工作者使用NaCl培养液培养某种海水稻，海水稻体内物质相对浓度变化如图丙所示： ①本实验的自变量是______，实验中每组均放置了较多数量海水稻植株的目的是__________________。 ②若以NaCl溶液浓度150mmol·L⁻¹为界，分为低盐和高盐胁迫，由图丙可知，随着NaCl溶液浓度的升高，该海水稻根尖细胞适应低盐和高盐胁迫的调节机制不同：低盐条件下海水稻主要靠逐步提高细胞内______的相对浓度，高盐条件下海水稻主要靠通过______。 ③研究还发现，海水稻地上部分的细胞可积累Na⁺作为渗透压调节剂，推测其积累部位是______（填细胞器名称）。 （3）非洲狼尾草具有耐热、高光效等特性，某同学认为可利用所学的植物体细胞杂交技术将其与海水稻的优势集中在一起。在进行体细胞杂交前，必须先利用______（填酶的名称）处理，获得原生质体；然后利用物理法如______（至少答一种）或化学法诱导融合；再生出细胞壁后形成杂种细胞，再把杂种细胞培育成杂种植株。 18. 酸浆是一种经微生物自然发酵，形成的淡黄色或乳白色的液体。我国食用酸浆和利用酸浆进行农产品加工的历史悠久，西北地区的地方特色食物浆水面就是以蔬菜浆水为主要配料制作而成。蔬菜浆水的制作过程如下图所示。请据图回答： （1）制作蔬菜浆水时向缸中加入面汤的主要目的是______。 （2）发酵好的蔬菜浆水呈乳白色，味酸，某研究小组测定其pH值为3.7—4.9，结合其制作过程，你认为发酵过程中发挥主要作用的微生物是______（填“乳酸菌”或“醋酸杆菌”）。该微生物不能在热烫后马上加入的原因是______。 （3）为验证上述推测是否正确，研究小组用______法分离蔬菜浆水中的微生物，通过观察菌落特征来鉴别微生物种类。同时，该方法也可用来统计样品中的活菌数，于是某兴趣小组采用此方法对蔬菜浆水中该微生物进行了计数。若将10mL的蔬菜浆水悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为105的样液接种到5个培养基上，培养一段时间后统计的菌落数分别为39、41、42、43、45，则1mL悬液中活菌数量为______个，这样的计数方法所得结果比实际值偏小的原因是______。 （4）近期兰州大学的科研团队还从蔬菜浆水中成功筛选出具有尿酸降解能力的菌种。利用Gomori六胺银法对尿酸盐染色，会使含有尿酸的培养基呈黑色，而具有尿酸降解能力的菌种周围会出现透明圈，测定菌落直径为d、透明圈直径为D。下表是该研究团队初步筛选出的3种优良菌株，根据实验结果分析，降解能力最强的菌株是______。 菌株 菌落直径为d 透明圈直径为D L—1 5.3 18.5 L—2 7.9 19.7 L—3 6.9 10.1 19. CTLA-4、PD-1是存在于T细胞表面的受体蛋白。CTLA-4可阻断T细胞的抗原呈递，从而抑制细胞毒性T细胞增殖。PD-1与正常细胞表面的PD-L1一旦结合，T细胞即可“认清”对方，不触发免疫反应，而癌细胞会过量表达PD-L1来逃避免疫系统的“追杀”。科研人员通过动物细胞融合技术制备抗CTLA-4单克隆抗体的过程如图所示。回答下列问题： （1）为了在小鼠体内获得能产生特定抗体的B淋巴细胞，需要先给小鼠注射的抗原是______。图中过程①诱导细胞融合常用的方法有______、______和灭活病毒诱导法等。 （2）单克隆抗体制备过程中，需要用特定的选择培养基进行第一次筛选，在该培养基上，未融合的细胞和______的细胞都会死亡，筛选得到的细胞具有的特点是______。将第一次筛选获得的细胞进行克隆化培养和______，经过多次筛选，就可以获得产生单克隆抗体的细胞。 （3）抗体都是由两条H链和两条L链组成的4条肽链对称结构（如图）。 研究人员将产生抗CTLA-4抗体的杂交瘤细胞与产生抗PD-1抗体的杂交瘤细胞融合，融合后的细胞除了产生图中的三种抗体。图中所示的双特异性抗体对癌细胞的杀伤较抗CTLA-4单克隆抗体效果更好，原因是______。 20. 将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒（辅助T-DNA转移）和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。 注：F1-F3、R1-R3表示引物；T-DNA-LB表示左边界；T-DNA-RB表示右边界；Ori表示复制原点；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。 （1）本操作中获取目的基因的方法是______和______。 （2）穿梭质粒中p35s为启动子，其作用是______，驱动目的基因转录。 （3）根据图中穿梭质粒上的KanR和HygBR两个标记基因的位置，用______基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。 （4）为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是______和______。 （5）本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是______。 A. 通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞 B. 将苏云金杆菌Bt基因导入棉花细胞中表达 C. 将1-1362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列 D. 用1-1362合成基因序列和1363-1848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 成都石室阳安学校2024-2025学年度下期高2023级5月月考 生物 本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分。第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。 考试时间75分钟 第Ⅰ卷（选择题 共45分） 一、单项选择题（本题共15题，每小题3分，共45分） 1. 科研人员在加勒比地区瓜德罗普岛上的红树林中发现了2厘米长的华丽硫珠菌，这是有史以来发现的体型最大的细菌。华丽硫珠菌利用氧化含硫化合物获得的能量将CO₂合成糖类，维持自身生命活动。华丽硫珠菌（ ） A. 是一种异养型微生物 B. 在核糖体上合成蛋白质 C. 在线粒体中合成ATP D. 遗传物质是核糖核酸 【答案】B 【解析】 【详解】A、华丽硫珠菌利用氧化含硫化合物获得的能量将CO2合成糖类，维持自身生命活动，是自养微生物，A错误； B、华丽硫珠菌是细菌，为原核生物，具有核糖体，蛋白质的合成场所是核糖体，B正确； C、华丽硫珠菌是原核生物，不具有线粒体，C错误； D、细菌的遗传物质是DNA（脱氧核糖核酸），而非RNA（核糖核酸），D错误。 故选B。 2. “三千作成都，两千作蜀锦”，蜀锦作为中国四大名锦之一，以其独特的工艺和绚丽的色彩而闻名。蜀锦在织造过程中多使用染色后的熟蚕丝线，蚕丝线的主要成分是蚕丝蛋白。下列叙述正确的是（ ） A. 蚕丝蛋白基因是由两条脱氧核苷酸链构成的 B. 生蚕丝线煮制为熟蚕丝线后肽键几乎全部破坏 C. 蚕丝蛋白中的氮元素主要存在于游离的氨基中 D. 蚕丝蛋白基因中含有腺嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶 【答案】A 【解析】 【详解】A、蚕丝蛋白基因是有遗传效应的DNA片段，由两条脱氧核苷酸链构成的，A正确； B、生蚕丝线煮制为熟蚕丝线后空间结构被破坏，但肽键没有被破坏，B错误； C、蚕丝蛋白的氮元素主要存在于肽键中，而非游离氨基，C错误； D、蚕丝蛋白基因是有遗传效应的DNA片段，故含有腺嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和鸟嘌呤，D错误。 故选A。 3. 脂滴是细胞内储存脂肪的结构，脂滴膜由磷脂分子构成，脂滴表面镶嵌有多种蛋白，这些蛋白在脂滴的形成、转运和降解过程中发挥重要作用。下列叙述错误的是（ ） A. 脂肪在生命活动需要时可以分解供能 B. 脂滴膜上的蛋白质分子是可以运动的 C. 脂肪是由脂肪酸和甘油反应形成的酯 D. 脂滴膜基本支架由磷脂双分子层构成 【答案】D 【解析】 【详解】A、脂肪是细胞主要的储能物质，在生命活动需要时可以分解供能，A正确； B、脂滴表面镶嵌有多种蛋白，这些蛋白在脂滴的形成、转运和降解过程中发挥重要作用，说明这些蛋白质分子都是可以运动的，B正确； C、脂肪是由三分子脂肪酸和一分子甘油反应形成的酯，C正确； D、由于磷脂分子头部亲水，尾部疏水，所以裹在脂滴表面的膜结构最可能具有单层磷脂分子，D错误。 故选D。 4. 生命观念中的“结构与功能观”，内涵是指一定结构必然有其对应的功能，而一定功能需要对应的结构来完成。下列有关“结构与功能观”的叙述中正确的是（ ） A. 分布在细胞不同部位的核糖体结构有差异，导致合成的蛋白质种类不同 B. 高尔基体在分泌蛋白加工运输过程中起交通枢纽作用，是由于其能接收和形成囊泡 C. 根部细胞不含叶绿体，利用这类细胞不可能培育出含叶绿体的植株 D. 吞噬细胞的溶酶体能合成多种水解酶，有利于杀死侵入机体的病毒或病菌 【答案】B 【解析】 【详解】A、分布在细胞不同部位的核糖体结构相同，蛋白质种类不同是基因选择性表达的结果，A错误； B、在细胞内，许多由膜构成的囊泡就像深海中的潜艇，在细胞中穿梭往来，繁忙地运输着“货物”，而高尔基体在其中起着重要的交通枢纽作用，高尔基体在分泌蛋白加工运输过程中起交通枢纽作用，是由于其能接收和形成囊泡，B正确； C、根部细胞不含叶绿体，但是细胞中含有本物种的全套遗传信息，具有全能性，所以利用这类细胞可能培育出含叶绿体的植株，C错误； D、水解酶的本质是蛋白质，合成场所是核糖体，D错误。 故选B。 5. 生活中我们经常会接触到发酵食品，如果酒、果醋、泡菜等，下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（ ） A. 泡菜坛内的白色菌膜、变酸的果酒表面的菌膜所含菌种完全相同 B. 制作果醋时发酵液中的醋酸菌通过无丝分裂增殖，繁殖速度快 C. 酿制果醋和制作果酒所利用的主要微生物的代谢类型不相同 D. 制成的果醋和泡菜都需要经高压蒸汽灭菌，目的是延长产品保质期 【答案】C 【解析】 【详解】A、尽管制作泡菜的主要菌种为乳酸菌，但由于材料本身带有一些酵母菌等其他菌， 泡菜的制作过程中会有酵母菌等菌的生长，尤其是泡菜坛密封不严，致使泡菜坛内出现白色菌膜(酵母菌密度增大以后可能会出现灰色菌膜)，而变酸的果酒表面菌膜的主体为醋酸菌，故所含菌种不同，A错误； B、醋酸菌属于原核生物，原核生物通过无性繁殖的二分裂方式增殖，而无丝分裂是真核生物特有的增殖方式，B错误； C、酿制果醋的微生物是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，制作果酒的微生物是酵母菌，其代谢类型也是异养兼性厌氧型，两者的代谢类型不相同，C正确； D、制成的果醋和泡菜不能使用高压蒸汽灭菌，高压蒸汽灭菌会杀死菌种，从而会影响产品的口感和品质，D错误。 故选C。 6. GA3是一种由C、H、O三种元素构成的植物生长调节剂，能促进茎伸长和种子萌发。但GA3的广泛施用会导致其在土壤中残留。某研究小组从长期施用GA3的农田土壤中筛选能降解GA3的菌株，实验思路如下图所示，实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和X，乙的组分为无机盐、水、X和Y。下列相关叙述错误的是（ ） A. 多次筛选⑤可适当提高GA3浓度，以期获得降解能力强的变异菌株 B. 选择丙中GA3含量低的培养液，接入新的培养液，扩增目的菌数量 C. X是GA3和蛋白胨，统计乙菌落数目可计算土壤中目的菌的浓度 D. 用于环保实践前，需检测菌株代谢物、繁殖能力等，以防二次污染 【答案】C 【解析】 【详解】A、多次筛选⑤时，可适当提高GA3浓度，以筛选出降解能力强的菌株，A正确； B、能降解GA3的菌株可降解GA3使GA3含量降低，因此GA3含量低的培养液能降解GA3 的菌株含量高，故选择丙中GA3含量低的培养液，接入新的培养液，扩增目的菌数量，B正确； C、从长期施用GA3的农田土壤中筛选能降解GA3的菌株，应以GA3为唯一碳源，X是GA3，C错误； D、用于环保实践前，需检测菌株代谢物、繁殖能力等， 以防二次污染，对生态环境造成破坏，D正确。 故选C。 7. 2024年世界园艺博览会在成都举行，世园会的吉祥物“桐妹儿”的核心创意来自中国特有孑遗植物珙桐。珙桐有“植物活化石”之称，是国家一级重点保护植物。科研人员从珙桐叶中分离出了具有抗肿瘤功效的次生代谢物——槲皮素。野生珙桐资源有限，下图是通过植物细胞工程等技术手段进行珙桐的扩大培养，其中序号代表相应的处理过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 通过过程①②④可定向改变植株性状 B. 启动过程②③的关键激素是生长素和赤霉素 C. 过程⑥体现了愈伤组织全能性高的特点 D. 植株乙丙丁的获取都采用了植物组织培养技术 【答案】D 【解析】 【详解】A、过程④是诱发突变，由于基因突变具有不定向性，故①②④不能保证性状的定向改变，A错误； B、启动过程②（脱分化）、③（再分化）的关键激素主要是生长素和细胞分裂素，B错误； C、过程⑥是将愈伤组织分瓶培养，为植物细胞培养的过程，并从中获取细胞代谢产物的过程，该过程没有将愈伤组织培养为个体，因此不能体现愈伤组织全能性高的特点，C错误； D、植株丁是通过植物体细胞杂交技术获得的杂种植株，将融合的细胞培养为杂种植株应用了植物组织培养技术，植株乙是通过植物组织培养技术将愈伤组织再分化形成的植株，植株丙则是通过植物组织培养技术将愈伤组织时期的细胞诱变，然后再培养为植株，因此植株乙丙丁的获取都采用了植物组织培养技术，D正确。 故选D。 8. 非对称细胞融合技术是指利用射线照射某原生质体，去除其细胞核，用蕊香红6G处理另一原生质体，使其细胞质失活，然后诱导两原生质体融合。研究者通过该技术，利用野生雄性不育稻（2n=24，雄性不育基因为细胞质基因）和优良水稻（2n=24）培育优良水稻雄性不育系已获得成功。下列说法正确的是（ ） A. 应用射线照射优良水稻原生质体，用蕊香红6G处理野生雄性不育稻原生质体 B. 需在低渗或等渗环境下用纤维素酶和果胶酶处理两种植物细胞获得原生质体 C. 原生质体融合成功的标志是形成新的植物细胞壁 D. 可用聚乙二醇融合法诱导原生质体的融合，成功融合的细胞染色体的组成为4n=48 【答案】C 【解析】 【详解】A、野生雄性不育稻中含雄性不育基因，故应利用射线照射野生雄性不育稻，破坏其细胞核，用蕊香红6G处理优良水稻原生质体，使其细胞质失活，原生质体融合后就可得优良水稻雄性不育系（雄性不育基因控制）的新品种，A错误； B、植物细胞壁成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性可用纤维素酶和果胶酶进行处理，得到原生质体，低渗环境会导致原生质体破裂，B错误； C、原生质体融合后需再生出新的细胞壁才能形成完整细胞，因此新细胞壁的形成是融合成功的标志，C正确； D、利用野生雄性不育稻的染色体在融合前被去除，仅留下细胞质基因，故融合后的细胞染色体组成为2n=24，D错误。 故选C。 9. “细胞培养肉”是利用体外培养动物细胞的方式来获得构成肌肉组织的细胞，再经收集、塑形、食品化加工等过程制备可供食用的肉类制品。下列叙述错误的是（ ） A. 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织可获得分散的肌肉母细胞 B. 肌肉母细胞的原代培养是指肌肉母细胞的第一次细胞增殖 C. 生物反应器中的支架可为细胞贴壁生长提供更多贴附空间 D. 往生物反应器中充入CO₂的主要作用是维持培养液的pH 【答案】B 【解析】 【详解】A、用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理可将组织分散成单个细胞，A正确； B、动物组织经处理后的初次培养称为原代培养，不是指肌肉母细胞的第一次细胞增殖，B错误； C、生物反应器中的支架提供了更多的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长，即可为细胞贴壁生长提供更多贴附空间，C正确； D、动物细胞培养的气体环境：95%空气(细胞代谢必需的)和5%CO2，CO2的作用是维持培养液的pH稳定，D正确。 故选B。 10. 科学家利用雌性小鼠的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），随后添加生物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞，并使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康小鼠。下列说法错误的是（ ） A. iPS细胞培养过程需置于95%空气和5%二氧化碳混合气体的培养箱中 B. 该技术有望解决某些女性不能产生卵细胞的不育问题 C. iPS细胞与原始生殖细胞样细胞遗传信息相同 D. 题中研究过程涉及动物细胞培养、动物细胞融合、体外受精、胚胎移植等技术 【答案】D 【解析】 【详解】A、iPS细胞培养需在含95%空气和5%CO2的气体环境中，CO2用于维持培养液pH，A正确； B、通过iPS技术生成卵细胞，可解决因卵细胞缺失导致的不育问题，B正确； C、iPS细胞与原始生殖细胞样细胞均来自同一体细胞，分化未改变遗传信息，二者DNA序列相同，C正确； D、体外受精是精卵自然结合，不涉及动物细胞融合技术，D错误。 故选D。 11. 以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列正确的是 （ ） A. 体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 B. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 C. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 D. 将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 【答案】C 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞(体内培养和体外培养)最后获取单克隆抗体。 【详解】A、单个效应B细胞有产生抗体的能力，但没有无限增殖的能力，因此在体外培养单个效应B细胞不可能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，A错误； B、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，此外小鼠还会接触到其他抗原成分，所以产生的血清抗体化学性质不单一，不是单克隆抗体，杂交瘤细胞产生的抗体才是单克隆抗体，B错误； C、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，C正确； D、将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，D错误。 故选C。 12. “低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程，下列叙述正确的是（ ） A. 重组细胞1培养后可以不取核，直接注入去核卵母细胞 B. 胚胎成纤维细胞分化程度高，核移植难度高于体细胞核移植 C. 犊牛的遗传物质全部来自黑白花奶牛和乳糖酶基因 D. 犊牛成年后与普通牛杂交，子代有1/2是低乳糖奶牛 【答案】A 【解析】 【详解】A、据图可知，重组细胞1培养后可以不取核，直接注入去核卵母细胞，A正确； B、胚胎成纤维细胞分化程度低，核移植难度低于体细胞核移植，B错误； C、犊牛的核遗传物质来自黑白花奶牛提供的细胞核再加上导入的乳糖酶基因，犊牛的细胞质遗传物质来自卵母细胞，C错误； D、犊牛含有乳糖酶基因个数及基因位置不确定，普通牛不含乳糖酶基因，为隐性纯合子，故犊牛成年后与普通牛杂交，子代低乳糖奶牛无法确定，D错误。 故选A。 13. 濒危动物保护组织曾宣布单峰骆驼野外灭绝。但近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家计划通过如图所示途径研究拯救野化单峰骆驼的方案。下列对研究途径的分析，正确的是（ ） A. 无论培育E后代还是F后代，都需要对A、D进行同期发情处理 B. 取胚胎①的内细胞团的细胞鉴定E的性别和遗传病致病基因携带情况 C. 胚胎①②移植前，要给D注射免疫抑制药物，以减少对胚胎的免疫排斥 D. E属于“四亲骆驼”，此技术可以避免A的线粒体遗传病基因传递给后代 【答案】D 【解析】 【详解】A、培育E后代需要对A、D进行同期发情处理，以便D提供适宜的胚胎着床环境，F后代是克隆动物，无需对A、D进行同期发情处理，A错误； B、取胚胎①的滋养层的细胞鉴定E的性别和遗传病致病基因携带情况，B错误； C、受体一般不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，C错误； D、E属于“四亲（ABCD）骆驼”，此技术只用到A的细胞核，用B的细胞质，可以避免A的线粒体遗传病基因传递给后代，D正确。 故选D。 14. 目的基因与质粒连接，导入大肠杆菌，构成基因文库。某同学提取到一份目的基因（两端有SpeI、XbaI识别位点），计划连接到质粒。下列对实验分析正确的是（ ） SpeI识别位点 XbaI识别位点 质粒DNA片段碱基序列 5'-A↓CTAGT-3' 5'-T↓CTAGA-3' 5'-ATTGATCACATCTAGATAC-3' 3'-TGATC↑A-5' 3'-AGATC↑T-5' 3'-TAACTAGTGTAGATCTATG-5' A. 可用T4 DNA连接酶连接经限制酶处理过的目的基因和质粒 B. 质粒DNA片段有SpeI识别位点和XbaI识别位点各1处 C. 两种限制酶在5'-CTAG-3'处断开氢键，产生相同的黏性末端 D. 连接好的重组DNA可以用SpeI或XbaI再次切割出目的基因 【答案】A 【解析】 【详解】A、T4DNA连接酶既可以连接平末端，又可以连接黏性末端，因此可用T4DNA连接酶连接经限制酶处理过的目的基因和质粒，A正确； B、由表可知，质粒DNA片段中有Xba I识别位点TCTAGA，但没有Spe I识别位点ACTAGT，B错误； C、由限制酶的识别序列和切割位点可知，两种限制酶在5'-CTAG-3'处断开磷酸二酯键， 产生的黏性末端相同，C错误； D、Spe I和Xba Ⅰ识别序列不同，但能切出相同的黏性末端，用Spe I和Xba I切割的DNA片段连接后，连接好的重组DNA不可以再用Spe I或Xba I再次切割出目的基因，D错误。 故选A。 15. PCR扩增目的基因、琼脂糖凝胶电泳鉴定目的基因是基因工程常用操作。下列对操作的叙述正确的是（ ） A. PCR体系中需加入DNA聚合酶、解旋酶、核糖核苷酸、引物、模板 B. 电泳结束后，向凝胶喷洒二苯胺溶液，沸水浴后显示DNA条带位置 C. DNA本身携带有大量正电荷，在均匀电场作用下由负极向正极迁移 D. PCR原理是DNA半保留复制，每次循环分为变性、复性、延伸三步 【答案】D 【解析】 【详解】A、PCR 体系中需加入耐高温的DNA 聚合酶、脱氧核糖核苷酸、引物、模板等，不需要加解旋酶，双链DNA受热变性后解旋为单链，A错误； B、琼脂糖凝胶电泳鉴定目的基因过程中，凝胶中的DNA分子通过核酸染料染色，可以在波长为300mm的紫外灯下被检测出来，不需要向凝胶喷洒二苯胺溶液，沸水浴后显示DNA 条带位置，B错误； C、DNA的磷酸基团使DNA带负电荷，在电场中向正极迁移，C错误； D、PCR基于DNA半保留复制，每个循环依次为变性（高温解链）、复性（引物结合）、延伸（合成新链），D正确。 故选D。 第II卷（非选择题 共55分） 二、非选择题（共5题，共55分） 16. 帕金森综合征是一种神经退行性疾病，神经元中α-Synuclein蛋白聚积是主要致病因素。研究发现患者普遍存在溶酶体膜蛋白TMEM175变异，如图所示。为探究TMEM175蛋白在该病发生中的作用，进行了一系列研究。请回答下列问题： （1）帕金森综合征患者TMEM175蛋白的第41位氨基酸由天冬氨酸突变为丙氨酸，说明TMEM175基因发生_____而突变，神经元中发生的这种突变_____（从“能”“不能”“不一定”中选填）遗传。 （2）突变的TMEM175基因在细胞核中以_____为原料，由RNA聚合酶催化形成_____键，不断延伸合成mRNA． （3）mRNA转移到细胞质中，与_______结合，合成一段肽链后转移到粗面内质网上继续合成，再由囊泡包裹沿着细胞质中的______由内质网到达高尔基体。突变的TMEM175基因合成的肽链由于氨基酸之间作用的变化使肽链的______改变，从而影响TMEM175蛋白的功能。 （4）基因敲除等实验发现TMEM175蛋白参与溶酶体内酸碱稳态调节。如图1所示，溶酶体膜的______对H+具有屏障作用，膜上的H+转运蛋白将H+以______的方式运入溶酶体，使溶酶体内pH小于细胞质基质。TMEM175蛋白可将H+运出，维持溶酶体内pH约为4．6．据图2分析，TMEM175蛋白变异将影响溶酶体的功能，原因是_____。 （5）综上推测，TMEM175蛋白变异是引起α-Synuclein蛋白聚积致病的原因，理由是____。 【答案】（1） ①. 碱基对替换 ②. 不能 （2） ①. 核糖核苷酸 ②. 磷酸二酯键 （3） ①. 游离的核糖体 ②. 细胞骨架 ③. 空间结构 （4） ①. 磷脂双分子层 ②. 主动运输 ③. TMEM175蛋白结构变化使其不能把溶酶体中多余的氢离子转运到细胞质基质中，进而使溶酶体中的pH下降，而pH会影响酶的活性，影响溶酶体的消化功能， （5）TMEM175蛋白结构的改变导致无法行使正常的功能，即使得溶酶体中的氢离子无法转运到细胞质基质，导致溶酶体中的pH下降，影响了溶酶体中相关酶的活性，导致细胞中α-Synuclein蛋白无法被分解，进而聚积致病。 【解析】 【分析】基因突变是指基因中碱基对的增添、缺失或替换，这会导致基因结构的改变，进而产生新基因。表现为如下特点：普遍性：基因突变是普遍存在的；随机性：基因突变是随机发生的；不定向性：基因突变是不定向的；低频性：对于一个基因来说，在自然状态下，基因突变的频率是很低的；多害少益性：大多数突变是有害的；可逆性：基因突变可以自我回复(频率低)。 溶酶体是“消化车间”，内部含有多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵人细胞的病毒或病菌。被溶酶体分解后的产物，如果是对细胞有用的物质，细胞可以再利用，废物则被排出细胞外。溶酶体中的水解酶是蛋白质，在核糖体上合成。 【小问1详解】 帕金森综合征患者TMEM175蛋白的第41位氨基酸由天冬氨酸突变为丙氨酸，说明TMEM175基因发生了突变，突变的结果是蛋白质中某个氨基酸发生了改变，因而可推测该基因发生突变的原因是基因中碱基对的替换造成的，神经元属于体细胞，其中发生的这种突变“不能”遗传。 【小问2详解】 突变的TMEM175基因在细胞核中以解开的DNA的一条链为模板，利用细胞核中游离的四种核糖核苷酸为原料，由RNA聚合酶催化形成磷酸二酯键，不断延伸合成mRNA，完成转录过程。 【小问3详解】 mRNA通过核孔转移到细胞质中，与核糖体结合，合成一段肽链后转移到粗面内质网上继续合成，再由囊泡包裹沿着细胞质中的细胞骨架由内质网到达高尔基体。突变的TMEM175基因合成的肽链由于氨基酸之间作用的变化使肽链的空间结构发生改变，从而影响TMEM175蛋白的功能，进而表现出患病症状。 【小问4详解】 基因敲除等实验发现TMEM175蛋白参与溶酶体内酸碱稳态调节。如图1所示，溶酶体膜的磷脂双分子层对H+具有屏障作用，膜上的H+转运蛋白将H+以主动运输的方式运入溶酶体，使溶酶体内pH小于细胞质基质，维持其中pH的相对稳定，TMEM175蛋白可将H+运出，维持溶酶体内pH约为4．6，图中显示，，TMEM175蛋白结构改变将不能把溶酶体中多余的氢离子转运到细胞质基质中，进而使溶酶体中的pH下降，而pH会影响酶的活性，影响溶酶体作为消化车间的功能。 【小问5详解】 综上推测，TMEM175蛋白变异是引起α-Synuclein蛋白聚积致病的原因，结合图示可推测，TMEM175蛋白结构改变导致无法行使正常的功能，即使得溶酶体中的氢离子无法转运到细胞质基质，导致溶酶体中的pH下降，影响了溶酶体中相关酶的活性，导致细胞中α-Synuclein蛋白无法被分解，进而聚积致病。 17. 海水稻是一种能在海边滩涂地和盐碱地生长的农作物品种。与传统水稻相比，海水稻具备更为优良的耐盐碱性。下图乙为海水稻与普通水稻在3%KNO3溶液中原生质体体积变化图。请据图回答： （1）由图乙分析可知海水稻为______（填“Ⅰ”或“Ⅱ”）组水稻；由此也可推知滩涂地和盐碱地不利于一般的农作物生长的原因______________________________。 （2）为了探究海水稻根尖细胞适应低盐和高盐胁迫的调节机制，科研工作者使用NaCl培养液培养某种海水稻，海水稻体内物质相对浓度变化如图丙所示： ①本实验的自变量是______，实验中每组均放置了较多数量海水稻植株的目的是__________________。 ②若以NaCl溶液浓度150mmol·L⁻¹为界，分为低盐和高盐胁迫，由图丙可知，随着NaCl溶液浓度的升高，该海水稻根尖细胞适应低盐和高盐胁迫的调节机制不同：低盐条件下海水稻主要靠逐步提高细胞内______的相对浓度，高盐条件下海水稻主要靠通过______。 ③研究还发现，海水稻地上部分的细胞可积累Na⁺作为渗透压调节剂，推测其积累部位是______（填细胞器名称）。 （3）非洲狼尾草具有耐热、高光效等特性，某同学认为可利用所学的植物体细胞杂交技术将其与海水稻的优势集中在一起。在进行体细胞杂交前，必须先利用______（填酶的名称）处理，获得原生质体；然后利用物理法如______（至少答一种）或化学法诱导融合；再生出细胞壁后形成杂种细胞，再把杂种细胞培育成杂种植株。 【答案】（1） ①. Ⅱ ②. 一般农作物细胞液浓度低于外界溶液浓度，细胞失水，发生质壁分离现象 （2） ①. NaCl溶液浓度 ②. 避免偶然因素，减少实验误差 ③. 无机盐的浓度 ④. 提高可溶性还原糖的含量通过提高渗透压适应高盐环境 ⑤. 液泡 （3） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 电融合法、离心法 【解析】 【分析】题图分析，图乙中用3%的KNO3溶液分别处理两组水稻细胞，Ⅰ组水稻原生质体的体积先减小后增加，说明细胞先发生质壁分离后复原，Ⅱ组水稻原生质体的体积增加，则说明Ⅱ组水稻细胞液浓度比较大，因此I组是普通水稻，Ⅱ组是海水稻。Ⅰ组曲线中，A→B段，水稻细胞液浓度低于外界溶液浓度，细胞失水，发生质壁分离；由于细胞能通过主动运输吸收 K+和 NO3-，当细胞液浓度大于外界溶液浓度时，细胞吸水，质壁分离复原，即B→C段。 【小问1详解】 图乙中用3%的KNO3溶液分别处理两组水稻细胞，Ⅰ组水稻原生质体的体积先减小后增加，说明细胞先发生质壁分离后复原，Ⅱ组水稻原生质体的体积增加，则说明Ⅱ组水稻细胞液浓度比较大，因此I组是普通水稻，Ⅱ组是海水稻。由此也可推知滩涂地和盐碱地不利于一般的农作物生长的原因是：一般农作物细胞液浓度低于外界溶液浓度，细胞失水，发生质壁分离现象，进而影响生长。 【小问2详解】 ①本实验是探究海水稻根尖细胞适应低盐和高盐胁迫的调节机制，自变量为NaCl溶液浓度，因变量为海水稻体内无机盐和可溶性糖的相对浓度，实验中每组均放置了较多数量海水稻植株的目的是避免偶然因素，减少实验误差。 ②分析图可知，当NaCl溶液浓度低于150mmol·L-1时（低盐胁迫），随着NaCl溶液浓度的升高，根尖细胞内无机盐的浓度逐渐增加；当NaCl溶液浓度高于150mmol·L-1时（高盐胁迫），随着NaCl溶液浓度的升高，根尖细胞内可溶性糖浓度大幅度增加，可见该海水稻根尖细胞适应低盐和高盐胁迫的调节机制不同。即低盐条件下海水稻主要靠逐步提高细胞内无机盐的相对浓度来耐受高盐胁迫；高盐条件下海水稻主要靠通过提高可溶性还原糖的含量提高渗透压适应高盐环境。 ③液泡是植物细胞的“水盐仓库”，据此可知，海水稻地上部分的细胞通过在液泡中积累Na+，来调节渗透压。 【小问3详解】 在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体。人工诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法等。 18. 酸浆是一种经微生物自然发酵，形成的淡黄色或乳白色的液体。我国食用酸浆和利用酸浆进行农产品加工的历史悠久，西北地区的地方特色食物浆水面就是以蔬菜浆水为主要配料制作而成。蔬菜浆水的制作过程如下图所示。请据图回答： （1）制作蔬菜浆水时向缸中加入面汤的主要目的是______。 （2）发酵好的蔬菜浆水呈乳白色，味酸，某研究小组测定其pH值为3.7—4.9，结合其制作过程，你认为发酵过程中发挥主要作用的微生物是______（填“乳酸菌”或“醋酸杆菌”）。该微生物不能在热烫后马上加入的原因是______。 （3）为验证上述推测是否正确，研究小组用______法分离蔬菜浆水中的微生物，通过观察菌落特征来鉴别微生物种类。同时，该方法也可用来统计样品中的活菌数，于是某兴趣小组采用此方法对蔬菜浆水中该微生物进行了计数。若将10mL的蔬菜浆水悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为105的样液接种到5个培养基上，培养一段时间后统计的菌落数分别为39、41、42、43、45，则1mL悬液中活菌数量为______个，这样的计数方法所得结果比实际值偏小的原因是______。 （4）近期兰州大学的科研团队还从蔬菜浆水中成功筛选出具有尿酸降解能力的菌种。利用Gomori六胺银法对尿酸盐染色，会使含有尿酸的培养基呈黑色，而具有尿酸降解能力的菌种周围会出现透明圈，测定菌落直径为d、透明圈直径为D。下表是该研究团队初步筛选出的3种优良菌株，根据实验结果分析，降解能力最强的菌株是______。 菌株 菌落直径为d 透明圈直径为D L—1 5.3 18.5 L—2 7.9 19.7 L—3 6.9 10.1 【答案】（1）面汤中含有丰富的糖类，可以为乳酸菌发酵提供碳源和能源 （2） ①. 乳酸菌 ②. 防止温度过高，杀死乳酸菌 （3） ①. 稀释涂布平板 ②. 4.2×107 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上只生长有一个菌落 （4）L—1 【解析】 【分析】选择培养基只允许特定的微生物生长，所以甲图中的选择培养基应以乐果为唯一碳源，培养基冷凝后应将平板倒置，以防冷凝水落入培养基造成污染。平板划线法一般多用于菌种的纯化，对混合菌进行分离；稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征。乙图中 D/d越大说明菌株的分解能力越强。 【小问1详解】 面汤中含有丰富的糖类，可以为乳酸菌发酵提供碳源和能源。 【小问2详解】 由于酸浆发酵中需要加盖（无氧），而醋酸杆菌是好氧菌，故发酵过程中发挥主要作用的微生物是乳酸菌。该微生物不能在热烫后马上加入的原因是防止温度过高，烫死乳酸菌。 【小问3详解】 分离微生物的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，而只有稀释涂布平板法同时可以用于计数。1mL悬液中活菌数量为（39+41+42+43+45）/5 ×105/0.1=4.2×107个，这样的计数方法所得结果比实际值偏小的原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上只有一个菌落。 【小问4详解】 根据题意，降解能力最强菌株应该是D/d值最大的，即L—1菌株。 19. CTLA-4、PD-1是存在于T细胞表面的受体蛋白。CTLA-4可阻断T细胞的抗原呈递，从而抑制细胞毒性T细胞增殖。PD-1与正常细胞表面的PD-L1一旦结合，T细胞即可“认清”对方，不触发免疫反应，而癌细胞会过量表达PD-L1来逃避免疫系统的“追杀”。科研人员通过动物细胞融合技术制备抗CTLA-4单克隆抗体的过程如图所示。回答下列问题： （1）为了在小鼠体内获得能产生特定抗体的B淋巴细胞，需要先给小鼠注射的抗原是______。图中过程①诱导细胞融合常用的方法有______、______和灭活病毒诱导法等。 （2）单克隆抗体制备过程中，需要用特定的选择培养基进行第一次筛选，在该培养基上，未融合的细胞和______的细胞都会死亡，筛选得到的细胞具有的特点是______。将第一次筛选获得的细胞进行克隆化培养和______，经过多次筛选，就可以获得产生单克隆抗体的细胞。 （3）抗体都是由两条H链和两条L链组成的4条肽链对称结构（如图）。 研究人员将产生抗CTLA-4抗体的杂交瘤细胞与产生抗PD-1抗体的杂交瘤细胞融合，融合后的细胞除了产生图中的三种抗体。图中所示的双特异性抗体对癌细胞的杀伤较抗CTLA-4单克隆抗体效果更好，原因是______。 【答案】（1） ①. CTLA-4 蛋白 ②. PEG 融合法 ③. 电融合法 （2） ①. 融合的具有同种核 ②. 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 ③. 抗体检测     （3）双特异性抗体既能结合CTLA-4，促进细胞毒性T细胞增殖，又能结合 PD-1，防止癌细胞逃避免疫监视      【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【小问1详解】 为了在小鼠体内获得能产生抗CTLA-4抗体的B淋巴细胞，需要先给小鼠注射的抗原是CTLA-4 蛋白。诱导动物细胞融合常用的方法有PEG 融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 【小问2详解】 在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞在选择性培养基都会死亡，有相应的杂交瘤细胞才能生长，筛选得到的细胞是杂交瘤细胞，该细胞既能迅速大量增殖，又能产生抗体。将第一次筛选获得的细胞进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，就可以获得产生单克隆抗体的细胞。 【小问3详解】 因为双特异性抗体既能结合CTLA-4，促进细胞毒性T细胞增殖，又能结合 PD-1，防止癌细胞逃避免疫监视，故双特异性抗体对癌细胞的杀伤较抗CTLA-4单克隆抗体效果更好。 20. 将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒（辅助T-DNA转移）和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。 注：F1-F3、R1-R3表示引物；T-DNA-LB表示左边界；T-DNA-RB表示右边界；Ori表示复制原点；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。 （1）本操作中获取目的基因的方法是______和______。 （2）穿梭质粒中p35s为启动子，其作用是______，驱动目的基因转录。 （3）根据图中穿梭质粒上的KanR和HygBR两个标记基因的位置，用______基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。 （4）为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是______和______。 （5）本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是______。 A. 通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞 B. 将苏云金杆菌Bt基因导入棉花细胞中表达 C. 将1-1362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列 D. 用1-1362合成基因序列和1363-1848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白 【答案】（1） ①. PCR技术扩增 ②. 人工合成 （2）RNA聚合酶识别并结合的部位 （3）HygBR （4） ①. F3 ②. R2 （5）D 【解析】 【分析】基因工程技术基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 基因工程中获取目的基因的方法有人工合成和PCR技术扩增。 【小问2详解】 穿梭质粒中p35s为启动子，其作用是RNA聚合酶识别并结合的部位，驱动目的基因转录；插入两个p35s启动子，其目的可能是调控目的基因的表达。 【小问3详解】 结合基因表达载体的示意图，根据图中穿梭质粒上的KanR和HygBR两个标记基因的位置，用HygBR基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。 【小问4详解】 PCR扩增目的基因时，引物应在目的基因的两端，所以为检测棉花植株是否导入目的基因，应选用的引物是F3和R2。 【小问5详解】 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求，用1-1362合成基因序列和1363-1848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白，属于蛋白质工程。将1-1362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列，未改变氨基酸序列，不属于蛋白质工程，ABC不符合题意，D符合题意。 故选D。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $