精品解析：安徽省蚌埠市固镇县毛钽厂实验中学2024-2025学年高二下学期6月月考生物试题

固镇县毛钽厂实验中学2024~2025学年高二6月月考 生物学 考生注意： 1.满分100分，考试时间75分钟。 2.考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。 3.本卷命题范围∶选择性必修2（10％），选择性必修3第1章（25％），第2章（25％），第3章（40％）。 一、选择题∶本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 《舌尖上中国》讲述四川泡菜时曾强调“腌泡菜也有大讲究”。下列有关泡菜制作的叙述，正确的是（　　） A. 盐水煮沸冷却后，倒入装有菜料的泡菜坛中，并使盐水没过全部菜料，盖好坛盖 B. 泡菜制作过程中食盐用量越低越有利于乳酸菌的生长 C. 制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是避免外界杂菌的污染 D. 腌制泡菜过程中经发酵会产生多种酸，其中含量最高的酸是亚硝酸 2. 实验中常根据菌落外表特征鉴别微生物，进而对实验结果做出判断，下列实验不是根据菌落外表特征做出判断的是（ ） A. 艾弗里证明肺炎链球菌转化因子是DNA B. 判断分离酵母菌的固体培养基是否被毛霉污染 C. 利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株 D. 判断在尿素为唯一氮源的培养基上生长的尿素降解菌是否有不同种类 3. 青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法正确的是（　　） A. 发酵结束后，将发酵液离心，取菌体并破碎处理，从中提取青霉素 B. 青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌 C. 接种是发酵工程的中心环节，所用菌种大多是单一菌种 D. 青霉素工业化生产过程中，需要严格控制葡萄糖浓度 4. 某细菌菌株需从环境中摄取现成的亮氨酸（21种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感（对链霉素无抗性），科学家用诱变剂处理此菌株，筛选出表中列出的菌株类型。依据筛选目的，培养基添加物质合理的组别是（　　） 筛选目的 筛选出不需要亮氨酸菌株 筛选出抗链霉素的菌株 筛选出不需要亮氨酸抗链霉素的菌株 A L＋，S＋ L－，S－ L＋，S－ B L－，S－ L＋，S＋ L－，S＋ C L－，S＋ L＋，S＋ L－，S－ D L＋，S－ L－，S－ L＋，S＋ 注：L－亮氨酸、S－链霉素，“＋”—加入，“－”—不加入，如，L－：不加入亮氨酸，S＋：加入链霉素 A. A B. B C. C D. D 5. 下列有关实验的描述中，正确的有（　　） ①腐乳制作过程有多种微生物参与，其中毛霉和根霉为互利共生关系 ②果酒发酵的最适温度为30~35℃，果醋发酵的最适温度为18~30℃ ③传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程以单一菌种的液体发酵为主 ④果酒、泡菜发酵利用的主要菌种是真核生物，果醋、腐乳发酵利用的主要菌种是原核生物 ⑤在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗 A. 1项 B. 2项 C. 3项 D. 4项 6. 铁皮石斛是非常好的药材，但其自然繁殖力极弱，生长缓慢，由于人们的掠夺式采挖，资源已接近枯竭，植物组织培养技术为铁皮石斛的繁殖提供了新思路。下列说法正确的是（ ） A. 外植体脱分化后形成具有特定结构和功能的愈伤组织 B. 提高培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生芽 C. 接种时注意应将茎段的形态学上端插入培养基中 D. 通过植物细胞培养技术获得铁皮石斛的次生代谢物体现了细胞的全能性 7. 胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（　　） A. 用酶解法去除细胞壁时需要在低渗溶液中进行 B. 电刺激或Ca2+载体可用于诱导原生质体A和B的融合 C. “华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因位于线粒体中 D. 应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” 8. EDTA是一种金属螯合剂，可以抑制溶液中Ca2+等二价阳离子的作用。进行动物细胞培养时，常需要同时加入酶和EDTA才能彻底破坏细胞间的黏着以获取单个细胞。下列说法错误的是（ ） A. 动物细胞间的黏着可能依赖于某些二价阳离子 B. 培养动物细胞时，通常要使用弱酸性培养液 C. 在传代培养时，有些细胞的分散不需要用酶处理 D. PCR反应缓冲液中添加EDTA可能会降低扩增效率 9. 胚胎移植是医学和农业生产上应用较多的胚胎工程技术。下列生物技术需用到胚胎移植的是（ ） ①体细胞核移植 ②胚胎分割 ③培育转基因动物 ④动物细胞培养 ⑤动物细胞融合 A. ①②③ B. ②③④ C. ①③④ D. ②③⑤ 10. HER2是在胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞中特异性表达的膜蛋白。临床上用靶向HER2的抗体-药物偶联物（T-DM1）治疗癌症时，偶联药物DM1能破坏细胞骨架，T-DM1可通过杂交瘤细胞制备。下列说法错误的是（ ） A. T-DM1常由抗体、接头和药物三部分组成 B. 制备杂交瘤细胞需获得产生HER2抗体的B细胞 C. 用带标记的HER2抗体对克隆化培养的细胞进行检测 D. T-DM1能特异性识别肿瘤，并抑制肿瘤细胞的增殖 11. 限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，下列有关说法正确的是（　　） A. DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 B. 限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸 C. E.coli DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远高于T4 DNA连接酶 D. 限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA 12. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“琼脂糖凝胶电泳”实验的相关说法，正确的是（ ） A. 利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精 B. 过滤后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解 C. 琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快 D. 提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色 13. 下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是（ ） 注：AmpR：氨苄青霉素抗性基因；TetR：四环素抗性基因。 A. 用含氨苄青霉素的培养基筛选出的是含重组质粒的受体菌 B. 应选择的限制酶组合是酶F和酶G C. pBR322质粒含有的AmpR基因和TetR基因都属于标记基因 D. 同时用三种限制酶处理图中质粒，完全反应后可得到4种长度DNA 14. 草甘膦杀死杂草的同时也能杀死农作物。草甘膦可与植物体内的PEP竞争EPSP合酶，阻止PEP转化，影响细胞正常代谢。科学家通过转基因技术获得了抗草甘膦的转基因农作物。下列说法错误的是（ ） A. 可通过转入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相对含量来起作用 B. PCR扩增基因时每一轮循环中均需经历两次升温处理 C. 基因表达载体中的终止子位于目的基因下游，是翻译停止的信号 D. 将外源基因导入农作物的叶绿体基因组中可避免基因向近缘杂草扩散 15. 通过蛋白质工程可以改造蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需要。下列叙述正确的是（ ） A. 蛋白质工程只需要改造蛋白质，基因工程只需要改造基因 B. 天然蛋白质的合成过程与蛋白质工程的过程完全相同 C. 蛋白质工程要改造蛋白质所有的氨基酸序列 D. 蛋白质工程可以通过改造蛋白质，改变酶的催化效率 16. 基因工程应用广泛，成果丰硕。下列属于基因工程的是（ ） A. 通过物理辐射培育能产生大量青霉素的青霉菌 B. 利用体细胞杂交技术培育能同时结出多种水果的植物 C. 利用能分解石油的细菌来构造能降解石油的“超级细菌” D. 利用发酵技术培养大量能产生干扰素的工程菌 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17. 海陵岛红树林国家湿地公园位于广东省阳江市，是粤港澳大湾区重要的生态屏障。这片湿地公园内滩涂广袤、红树林茂密，孕育着多种独特的潮间带生物，同时也是众多候鸟的迁徙停歇地。回答下列问题： （1）在海陵岛红树林生态系统中，若人们更多选择食用滩涂贝类等初级消费者而非鹭鸟等次级消费者，会使生态足迹变小。结合生态系统能量流动特点，分析食用更高营养级的生物会增大生态足迹的原因___________。 （2）海陵岛红树林国家湿地公园内，潮间带生物种类繁多，记录在册的高等植物达数百种，候鸟等陆生脊椎动物也有上百种，这体现了生物多样性中________的多样性。生物多样性是不同物种之间以及生物与________之间协同进化的结果。为呵护好湿地生态环境，当地对公园周边海域实施全面禁渔政策，这一政策重要意义在于增大种群的_______。 （3）黄嘴白鹭是海陵岛湿地公园内的濒危物种，为保护黄嘴白鹭及其栖息地，最科学且能从根本上维持物种延续的保护措施是建立__________，并结合现代生物技术对其遗传资源进行长期保存。 （4）为进一步提升海陵岛湿地生态系统的稳定性，结合该公园实际情况，可以采取的有效措施有__________（答出2点）。 18. 水稻恶苗病主要由镰刀菌引起，是水稻苗期至穗期的主要病害之一。研究人员开展相关实验，从水稻根基土壤中筛选水稻恶苗病拮抗菌，并探究其抗菌机制。相关实验过程如图所示。 回答下列问题： （1）步骤①中需从______（填“患病”或“健康”）的水稻根基土壤获取菌株。步骤②和③中“a”表示______。接种后在28℃条件下培养1-2天，根据______对步骤④中获得的纯培养物进行初步的鉴定和分类。 （2）按照步骤⑤进行拮抗菌筛选，在甲处接种等量的拮抗菌菌株J1、J2后，培养一段时间，结果如图所示。据图判断，______的抑菌效果更佳，依据是______。该实验还需设置对照组，对照组的操作是______。 （3）用去除拮抗菌菌株J1后的无菌发酵液处理病原菌菌丝体，发现菌丝明显变短，推测拮抗菌抑菌的原理是_______。 （4）实验筛选出的菌株需要先进行大田种植试验以检测防治效果，原因是_______。 19. 和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。回答下列问题： （1）用_______激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子需要进行_________处理后才具有与卵细胞受精的能力。在实际胚胎工程操作中常以_______作为受精的标志。 （2）上图移植的胚胎处于__________期，移入的甲胚胎能在代孕雌牛子宫中存活的生理基础是________。 （3）为培育雌性子代小牛，胚胎移植前须进行性别鉴定，需取图中乙细胞进行________。胚胎移植前，需对供、受体进行______处理，目的是_________。 20. 新城疫病毒可引起家禽急性败血性传染病；我国科学家将该病毒相关基因改造为r2HN基因，使其在水稻胚乳特异表达，制备获得r2HN疫苗。根据所学知识回答下列问题∶ （1）实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如下图所示。其中GtP为启动子，其作用是__________。若需实现r2HN仅在水稻胚乳中表达，GtP应为______的启动子。图中Nos为终止子，已知r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点，可选择限制酶________对r2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。 （2）通常采用_________法将r2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测r2HN基因的表达情况，可通过PCR技术检测___________；通过抗原-抗体杂交技术检测是否翻译出r2HN蛋白。 （3）获得转基因植株后，还需筛选出纯合体进行后续研究，其原因是______。 21. 科研人员从某濒危动物体内提取出了一种极具研究价值的基因，将其导入大肠杆菌的质粒中保存，操作流程如图所示，其中是氨苄青霉素抗性基因。回答下列问题： （1）获取目的基因除了图中所示的方法外，还可以从相关动物细胞中获取目的基因的mRNA，在______的催化下合成。构建的重组质粒中，除了具有目的基因和标记基因外，还有______。 （2）如果培养基中只加入氨苄青霉素，能否筛选出含目的基因的大肠杆菌？______（填“能”或“否”），原因是______。如果在已成功导入质粒的大肠杆菌培养基中只加入X-gal，能否筛选出含有目的基因的大肠杆菌？______（填“能”或“否”），原因是______。 （3）将目基因导入大肠杆菌中进行保存以后，随时可以从中获取进行扩增，扩增目的基因的原理是______，所用的酶是______，除了加入这种酶和DNA模板外，还应向反应体系中加入_________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 固镇县毛钽厂实验中学2024~2025学年高二6月月考 生物学 考生注意： 1.满分100分，考试时间75分钟。 2.考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。 3.本卷命题范围∶选择性必修2（10％），选择性必修3第1章（25％），第2章（25％），第3章（40％）。 一、选择题∶本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 《舌尖上的中国》讲述四川泡菜时曾强调“腌泡菜也有大讲究”。下列有关泡菜制作的叙述，正确的是（　　） A. 盐水煮沸冷却后，倒入装有菜料的泡菜坛中，并使盐水没过全部菜料，盖好坛盖 B. 泡菜制作过程中食盐用量越低越有利于乳酸菌的生长 C. 制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是避免外界杂菌的污染 D. 腌制泡菜过程中经发酵会产生多种酸，其中含量最高的酸是亚硝酸 【答案】A 【解析】 【详解】A、盐水煮沸可灭菌，冷却后使用避免高温杀死乳酸菌；盐水需浸没菜料以隔绝空气，创造无氧环境，A正确； B、食盐浓度过低会导致杂菌繁殖，抑制乳酸菌生长，需适宜浓度（如10%-20%）才能抑制杂菌且不影响乳酸菌，B错误； C、密封的主要目的是为乳酸菌提供无氧发酵条件，而非单纯防杂菌污染（盐水本身已有抑菌作用），C错误； D、泡菜发酵主要产物是乳酸，亚硝酸盐含量早期升高但后期被分解，含量最高的酸是乳酸，D错误。 故选A。 2. 实验中常根据菌落外表特征鉴别微生物，进而对实验结果做出判断，下列实验不是根据菌落外表特征做出判断的是（ ） A. 艾弗里证明肺炎链球菌的转化因子是DNA B. 判断分离酵母菌的固体培养基是否被毛霉污染 C. 利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株 D. 判断在尿素为唯一氮源的培养基上生长的尿素降解菌是否有不同种类 【答案】C 【解析】 【分析】1、在艾弗里证明遗传物质是DNA的实验中，艾弗里将S型细菌的DNA、蛋白质、糖类等物质分离开，单独的、直接的观察它们各自的作用。另外还增加了一组对照实验，即DNA酶和S型活菌中提取的DNA与R型菌混合培养。 2、培养酵母菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。 3、抗生素消灭细菌的原理是抑制细菌细胞壁的合成、与细胞膜相互作用、干扰蛋白质的合成以及抑制核酸的复制和转录等。利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株可从抑菌圈边缘菌落挑取大肠杆菌，可能获得目的菌株。 4、将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而不能利用尿素的微生物不能生长繁殖，这是因为只有能够分解尿素的微生物能够产生脲酶，从中获取氮源。 【详解】A、艾弗里将S型细菌的DNA、蛋白质、糖类等物质分离开，单独的、直接的观察它们各自的作用进行对比，R型肺炎双球菌没有荚膜（菌落表面粗糙），S型肺炎双球菌有荚膜（菌落表面光滑），该实验是通过观察培养基上形成的不同菌落特征，来判断转化是否成功的，A不符合题意; B、毛霉属于多细胞的真菌，由细胞形成菌丝，可根据毛霉的形态判定固体培养基是否是被毛霉污染了，B不符合题意; C、抗生素可消灭细菌，利用浸有抗生素的滤纸片筛选大肠杆菌中耐药性强的菌株是从抑菌圈边缘菌落挑取大肠杆菌来获得目的菌株，没有依靠菌落外表形态特征做出判断，C符合题意; D、不同尿素降解菌降解尿素的能力不同，因此在分离出的以尿素为唯一氮源的尿素降解菌后，若要验证其中是否有不同种类降解菌，可在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若根据菌落周围出现红色环带的大小判定其种类，D不符合题意。 故选C。 3. 青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法正确的是（　　） A. 发酵结束后，将发酵液离心，取菌体并破碎处理，从中提取青霉素 B. 青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌 C. 接种是发酵工程的中心环节，所用菌种大多是单一菌种 D. 青霉素工业化生产过程中，需要严格控制葡萄糖浓度 【答案】D 【解析】 【分析】发酵工程的基本环节： （1）菌种的选育：性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。 （2）扩大培养：在发酵之前还需要对菌种进行扩大培养。 （3）培养基的配制：在菌种确定之后，要选择原料制备培养基。在生产实践中，培养基的配方要经过反复试验才能确定。 （4）灭菌：培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。 （5）接种：将菌种接种到发酵罐培养液中。 （6）发酵：这是发酵工程的中心环节。①在发酵过程中，要随时检测培养波中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。②要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。 （7）产品的分离、提纯：①如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后采用过滤沉淀等方法将菌体分离和干燥，即得到产品。②如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。 【详解】A、由题干“青霉菌会通过分泌青霉素杀死细菌，”可知青霉素不是在细胞内，不需要破碎菌体提取青霉素，A错误； B、青霉素可以杀死细菌，但是不能包括所有细菌，而且发酵罐还可能有真菌污染，B错误； C、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，发酵工程中所用的菌种大多单一菌种，传统发酵涉及多种菌种，C错误； D、葡萄糖浓度过高，则高渗透压环境会对生产青霉素的微生物细胞产生不利影响。高渗透压可能导致细胞失水，从而影响细胞的代谢活动和生长状况，最终不利于青霉素的合成，因此青霉素工业化生产过程中，需要严格控制葡萄糖浓度，D正确。 故选D。 4. 某细菌菌株需从环境中摄取现成的亮氨酸（21种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感（对链霉素无抗性），科学家用诱变剂处理此菌株，筛选出表中列出的菌株类型。依据筛选目的，培养基添加物质合理的组别是（　　） 筛选目的 筛选出不需要亮氨酸的菌株 筛选出抗链霉素的菌株 筛选出不需要亮氨酸抗链霉素的菌株 A L＋，S＋ L－，S－ L＋，S－ B L－，S－ L＋，S＋ L－，S＋ C L－，S＋ L＋，S＋ L－，S－ D L＋，S－ L－，S－ L＋，S＋ 注：L－亮氨酸、S－链霉素，“＋”—加入，“－”—不加入，如，L－：不加入亮氨酸，S＋：加入链霉素 A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【详解】某细菌菌株需从环境中摄取现成的亮氨酸（21种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感（对链霉素无抗性），筛选抗链霉素的菌株需添加链霉素（S+），同时需提供亮氨酸（L+）以保证原菌株的生长需求，从而通过链霉素杀死敏感菌，保留抗性菌，B正确，ACD错误。 故选B。 5. 下列有关实验的描述中，正确的有（　　） ①腐乳制作过程有多种微生物参与，其中毛霉和根霉为互利共生关系 ②果酒发酵的最适温度为30~35℃，果醋发酵的最适温度为18~30℃ ③传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程以单一菌种的液体发酵为主 ④果酒、泡菜发酵利用的主要菌种是真核生物，果醋、腐乳发酵利用的主要菌种是原核生物 ⑤在果酒的制作过程中，应先去除葡萄的枝梗，再进行多次反复冲洗 A. 1项 B. 2项 C. 3项 D. 4项 【答案】A 【解析】 【详解】①毛霉和根霉在腐乳制作中均为分解者，争夺相同资源，属于竞争关系，而非互利共生，①错误； ②果酒发酵（酵母菌）最适温度为18~25℃，果醋发酵（醋酸菌）为30~35℃，温度描述颠倒，②错误； ③传统发酵依赖混合菌种（如泡菜中的乳酸菌和酵母菌），多为固体/半固体发酵；发酵工程需灭菌并接种单一菌种，采用液体发酵，③正确； ④果酒菌种为酵母菌（真核），泡菜菌种为乳酸菌（原核）；果醋菌种为醋酸菌（原核），腐乳菌种为毛霉（真核），④错误； ⑤葡萄应先冲洗后去梗，避免杂菌污染，⑤错误；综上，仅③正确，正确项数为1项，A正确，BCD错误。 故选A。 6. 铁皮石斛是非常好的药材，但其自然繁殖力极弱，生长缓慢，由于人们的掠夺式采挖，资源已接近枯竭，植物组织培养技术为铁皮石斛的繁殖提供了新思路。下列说法正确的是（ ） A. 外植体脱分化后形成具有特定结构和功能的愈伤组织 B. 提高培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生芽 C. 接种时注意应将茎段的形态学上端插入培养基中 D. 通过植物细胞培养技术获得铁皮石斛的次生代谢物体现了细胞的全能性 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导形成完整植株的技术；原理为植物细胞的全能性；基本流程为：外植体→愈伤组织→诱导生芽、生根→完整植株。 【详解】A、愈伤组织没有特定的结构，A错误； B、细胞分裂素促进发芽，提高培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生芽，B正确； C、接种时注意应将茎段的形态学下端插入培养基中，C错误； D、通过植物细胞培养技术获得铁皮石斛的次生代谢物没有发育成一个个体，不能体现细胞的全能性，D错误。 故选B。 7. 胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（　　） A. 用酶解法去除细胞壁时需要在低渗溶液中进行 B. 电刺激或Ca2+载体可用于诱导原生质体A和B的融合 C. “华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因位于线粒体中 D. 应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” 【答案】C 【解析】 【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。 【详解】A、用酶解法去除细胞壁时需要在等渗溶液中进行，低渗溶液会导致原生质体吸水涨破，A错误； B、Ca2+载体可激活重构胚，但不能用于用于诱导原生质体融合，B错误； C、雄性不育的胞质杂种华柚2号的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，融合后品种A的细胞核消失，控制雄性不育的基因可能位于线粒体中，C正确； D、GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中，而融合后的华柚2号不含品种A的细胞核，因此发绿色荧光的杂种细胞应被淘汰，D错误。 故选C。 8. EDTA是一种金属螯合剂，可以抑制溶液中Ca2+等二价阳离子的作用。进行动物细胞培养时，常需要同时加入酶和EDTA才能彻底破坏细胞间的黏着以获取单个细胞。下列说法错误的是（ ） A. 动物细胞间的黏着可能依赖于某些二价阳离子 B. 培养动物细胞时，通常要使用弱酸性的培养液 C. 在传代培养时，有些细胞的分散不需要用酶处理 D. PCR反应缓冲液中添加EDTA可能会降低扩增效率 【答案】B 【解析】 【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 2、培养条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。 （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。 （3）温度和pH。 （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值）。 【详解】A、EDTA可以抑制二价阳离子，由加入EDTA后细胞间的黏着才能被彻底破坏可知，细胞之间的相互连接和黏着依赖某些二价阳离子，A正确； B、多数动物细胞的培养液pH为7.2～7.4，而培养霉菌的培养基才是酸性，B错误； C、悬浮细胞的传代培养直接离心即可，不需要用酶和EDTA处理，C正确； D、真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要镁离子来激活，因此PCR反应体系中的镁离子如果被EDTA抑制，可能导致DNA聚合酶不能发挥作用，D正确。 故选B。 9. 胚胎移植是医学和农业生产上应用较多的胚胎工程技术。下列生物技术需用到胚胎移植的是（ ） ①体细胞核移植 ②胚胎分割 ③培育转基因动物 ④动物细胞培养 ⑤动物细胞融合 A. ①②③ B. ②③④ C. ①③④ D. ②③⑤ 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎工程中要用到技术：体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术；转基因动物培育用到的技术：基因工程、动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植；核移植用到的技术：动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植等 【详解】①体细胞核移植是将体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中，构建重组细胞，重组细胞经培养发育成早期胚胎后，需要通过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母体子宫内，使其继续发育直至分娩，从而获得克隆动物。所以体细胞核移植需用到胚胎移植技术，①正确； ②胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经胚胎分割得到的胚胎，需要借助胚胎移植技术，将其移植到代孕母体的子宫内，使其发育为新个体，以提高优良胚胎的利用率，获得更多遗传性状相同的后代，因此胚胎分割需用到胚胎移植技术，②正确； ③培育转基因动物时，通常是将外源基因导入受精卵或早期胚胎细胞，然后培养发育成早期胚胎，为了使胚胎继续发育成完整的个体，需要将早期胚胎移植到代孕母体的子宫内，让其在子宫内着床、发育直至分娩，所以培育转基因动物需用到胚胎移植技术，③正确； ④动物细胞培养是指从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的过程,其目的是获得大量细胞或细胞产物,并不涉及将胚胎移植到母体子宫内发育成个体的过程,不需要用到胚胎移植技术，④错误； ⑤动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。动物细胞融合技术主要用于制备单克隆抗体等，不涉及胚胎的发育和移植，所以不需要用到胚胎移植技术，⑤错误； 故选A。 10. HER2是在胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞中特异性表达的膜蛋白。临床上用靶向HER2的抗体-药物偶联物（T-DM1）治疗癌症时，偶联药物DM1能破坏细胞骨架，T-DM1可通过杂交瘤细胞制备。下列说法错误的是（ ） A. T-DM1常由抗体、接头和药物三部分组成 B. 制备杂交瘤细胞需获得产生HER2抗体的B细胞 C. 用带标记的HER2抗体对克隆化培养的细胞进行检测 D. T-DM1能特异性识别肿瘤，并抑制肿瘤细胞的增殖 【答案】C 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：用特定抗原对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，从产生免疫反应小鼠的脾脏细胞中，得到了抗特定抗原的抗体，这说明在小鼠的脾细胞中形成了相应的B淋巴细胞。将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中产生的B淋巴细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选。在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长。这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。对上述经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体了。 【详解】A、T-DM1常由抗体、接头和药物三部分组成，其中抗体的作用是将药物定向运输到病灶部位，降低药物的副作用，A正确； B、HER2是在胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞中特异性表达的膜蛋白，为了让药物通过抗体作用与肿瘤细胞，在制备杂交瘤细胞时需获得产生HER2抗体的B细胞，因而需要首先将HER2作为抗原注射到小鼠体内产生免疫反应，B正确； C、用带标记的HER2蛋白对克隆化培养的细胞进行检测，进而筛选出能产生特定抗体，即HER2抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、T-DM1能特异性识别肿瘤，因为其上连接的抗体能与肿瘤细胞表面的特定蛋白结合，进而抑制肿瘤细胞的增殖，D正确。 故选C。 11. 限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，下列有关说法正确的是（　　） A. DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 B. 限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸 C. E.coli DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远高于T4 DNA连接酶 D. 限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程最基本的工具：①基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶（简称限制酶）；②基因的 “针线”——DNA连接酶；③基因的运载体——质粒、噬菌体、动植物病毒等。 【详解】A、DNA连接酶连接的是两个DNA片段，不能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上，A错误； B、限制酶只能切割DNA分子，烟草花叶病毒的核酸是RNA，限制酶不能切割，B正确； C、E.coli DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于T4 DNA连接酶，C错误； D、限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是不会剪切自身的DNA，D错误。 故选B。 12. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“琼脂糖凝胶电泳”实验的相关说法，正确的是（ ） A. 利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA溶于酒精 B. 过滤后的研磨液放置在4℃冰箱中可防止DNA被降解 C. 琼脂糖凝胶电泳时，DNA分子越大，迁移速率越快 D. 提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后即可变为蓝色 【答案】B 【解析】 【分析】DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。 【详解】A、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离，A错误； B、洋葱研磨液在4℃冰箱中放置几分钟，可降低DNA水解酶的活性，防止DNA降解，B正确； C、待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率，DNA分子越小，迁移的速率越快，DNA分子越大，迁移速率越慢，C错误； D、将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，水浴加热条件下才会呈现蓝色，D错误。 故选B。 13. 下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是（ ） 注：AmpR：氨苄青霉素抗性基因；TetR：四环素抗性基因。 A. 用含氨苄青霉素培养基筛选出的是含重组质粒的受体菌 B. 应选择的限制酶组合是酶F和酶G C. pBR322质粒含有的AmpR基因和TetR基因都属于标记基因 D. 同时用三种限制酶处理图中质粒，完全反应后可得到4种长度DNA 【答案】A 【解析】 【分析】题图分析，切割目的基因和质粒最好用酶F和酶G，这样可以获得不同的黏性末端，而且目的基因的两端也具有这两种限制酶的切割位点，既避免切割后DNA片段的自身环化，又保留质粒上的标记基因，由图可知构建基因表达载体破坏了四环素抗性基因，保留了氨苄青霉素抗性基因。 【详解】AB、酶E会破坏两种标记基因，为避免切割后DNA片段的自身环化，又保留质粒上的标记基因，切割时应选择的限制酶组合是酶F和酶G；由于酶F会破坏四环素抗性基因，故应使用含氨苄青霉素的培养基筛选出的有导入重组质粒的受体菌和导入原质粒的受体菌，A错误，B正确； C、pBR322质粒含有的AmpR基因和TetR基因都属于标记基因，以便于对含有目的基因的受体菌的选择，C正确； D、据图可知，同时用三种限制酶处理图中质粒，因酶E有两个作用位点，故同时用三种限制酶处理图中质粒，完全反应后可得到4种长度DNA，D正确。 故选A。 14. 草甘膦杀死杂草的同时也能杀死农作物。草甘膦可与植物体内的PEP竞争EPSP合酶，阻止PEP转化，影响细胞正常代谢。科学家通过转基因技术获得了抗草甘膦的转基因农作物。下列说法错误的是（ ） A. 可通过转入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相对含量来起作用 B. PCR扩增基因时每一轮循环中均需经历两次升温处理 C. 基因表达载体中的终止子位于目的基因下游，是翻译停止的信号 D. 将外源基因导入农作物的叶绿体基因组中可避免基因向近缘杂草扩散 【答案】C 【解析】 【分析】题意分析，草甘膦是一种非选择性除草剂，杀死杂草的同时也杀死农作物。它与植物体内的PEP （磷酸烯醇式丙酮酸）结构相似，可与PEP竞争结合EPSP合酶，阻止PEP转化，影响植物细胞正常代谢。 【详解】A、外源EPSP基因可以指导EPSP合酶的合成，所以可通过转入外源EPSP基因以提高EPSP合酶的相对含量来起作用，A正确； B、体外扩增GR79基因时每一轮循环包括高温变性、低温复性和中温延伸过程，可见每一个循环中均需经历两次目的不同的升温处理，B正确； C、基因表达载体中的终止子是转录停止的信号，C错误； D、将外源基因导入农作物的叶绿体基因组中可有效避免GR79基因向近缘杂草扩散，这是因为扩散是通过花粉传播，而花粉的精子中几乎不携带质基因，D正确。 故选C。 15. 通过蛋白质工程可以改造蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需要。下列叙述正确的是（ ） A. 蛋白质工程只需要改造蛋白质，基因工程只需要改造基因 B. 天然蛋白质的合成过程与蛋白质工程的过程完全相同 C. 蛋白质工程要改造蛋白质所有的氨基酸序列 D. 蛋白质工程可以通过改造蛋白质，改变酶的催化效率 【答案】D 【解析】 【分析】1、蛋白质工程的操作过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质。 2、基因工程与蛋白质工程的联系：①蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程 ；②基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造。 【详解】A、蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程，所以需要对基因进行改造，A错误； B、天然蛋白质的合成过程是按照中心法则进行的，蛋白质工程的过程与中心法则相反，B错误； C、蛋白质工程不是对蛋白质分子的直接改造，而是通过改造基因来改造蛋白质，同时也不需要改造所有的氨基酸序列，C错误； D、蛋白质工程可以通过改造蛋白质，改变酶的催化效率，D正确。 故选D。 16. 基因工程应用广泛，成果丰硕。下列属于基因工程的是（ ） A. 通过物理辐射培育能产生大量青霉素的青霉菌 B. 利用体细胞杂交技术培育能同时结出多种水果的植物 C. 利用能分解石油的细菌来构造能降解石油的“超级细菌” D. 利用发酵技术培养大量能产生干扰素的工程菌 【答案】C 【解析】 【分析】1、植物基因工程的应用：培育抗虫、抗病、抗逆的作物新品种，改良植物的品质，如抗虫棉、抗病毒烟草、抗盐碱和抗干旱的烟草、高赖氨酸玉米等。 2、动物基因工程的应用：培育快速生长的转基因动物，如转基因绵羊、转基因鲤鱼；改善畜产品品质的转基因动物 ，如乳汁中含乳糖较少的转基因牛；生产药物的转基因动物，如利用乳腺生物反应器生产药物；作器官移植供体的转基因动物，如无免疫排斥的转基因猪。 【详解】A、科学家通过诱变育种方式培育出高产青霉菌株，培养青霉菌并从中提取青霉素。该过程没有采用基因工程技术，不属于基因工程的应用，A不符合题意； B、利用体细胞杂交技术培育能同时结出多种水果的植物属于植物细胞工程，B不符合题意； C、野生型的假单胞杆菌只能分解石油中的一种烃类，科学家利用基因工程技术，制造出一种能分解石油中3种烃类的“超级细菌”，提高了石油的降解速率，这属于基因工程的应用，C符合题意； D、利用发酵技术培养大量能产生干扰素的工程菌属于发酵技术，D不符合题意。 故选C。 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17. 海陵岛红树林国家湿地公园位于广东省阳江市，是粤港澳大湾区重要的生态屏障。这片湿地公园内滩涂广袤、红树林茂密，孕育着多种独特的潮间带生物，同时也是众多候鸟的迁徙停歇地。回答下列问题： （1）在海陵岛红树林生态系统中，若人们更多选择食用滩涂贝类等初级消费者而非鹭鸟等次级消费者，会使生态足迹变小。结合生态系统能量流动特点，分析食用更高营养级的生物会增大生态足迹的原因___________。 （2）海陵岛红树林国家湿地公园内，潮间带生物种类繁多，记录在册的高等植物达数百种，候鸟等陆生脊椎动物也有上百种，这体现了生物多样性中________的多样性。生物多样性是不同物种之间以及生物与________之间协同进化的结果。为呵护好湿地生态环境，当地对公园周边海域实施全面禁渔政策，这一政策重要意义在于增大种群的_______。 （3）黄嘴白鹭是海陵岛湿地公园内的濒危物种，为保护黄嘴白鹭及其栖息地，最科学且能从根本上维持物种延续的保护措施是建立__________，并结合现代生物技术对其遗传资源进行长期保存。 （4）为进一步提升海陵岛湿地生态系统的稳定性，结合该公园实际情况，可以采取的有效措施有__________（答出2点）。 【答案】（1）生态系统中能量流动是单向流动、逐级递减的，营养级越高，能量在传递过程中损失越多，生产该营养级生物所需要的资源和空间就越多，所以食用更高营养级的生物会增大生态足迹 （2） ①. 物种 ②. 无机环境 ③. 环境容纳量##K值 （3）自然保护区 （4）适当增加红树林的面积，提高生态系统的自我调节能力；合理控制游客数量，减少人类活动对生态系统的干扰 【解析】 【分析】生物多样性的保护，可以概括为就地保护和易地保护两大类。就地保护是指在原地对被保护的生态系统或物种建立自然保护区以及国家公园等。易地保护是指把保护对象从原地迁出，在异地进行专门保护。此外，建立精子库、种子库等，利用生物技术对濒危物种的基因进行保护，也是对濒危物种保护的重要措施。 【小问1详解】 生态足迹，又叫生态占用，是指在现有技术条件下维持某个人口单位（一个人、一个城市、一个国家或全人类）生存所需的生产资源和吸收废物的土地和水域的面积。食用更高营养级的生物会增大生态足迹的原因是: 生态系统中能量流动的特点是单向流动、逐级递减，营养级越高，能量在传递过程中损失就越多，生产该营养级生物所需要的资源和空间就越多，所以食用更高营养级的生物会增大生态足迹。 【小问2详解】 生物多样性包括:遗传多样性（基因多样性）、物种多样性和生态系统多样性｡海陵岛红树林国家湿地公园内，潮间带生物种类繁多，这体现了生物多样性中物种多样性。生物多样性是不同物种之间以及生物与无机环境之间协同进化的结果。禁渔政策可以有效减少人类活动对鱼类资源的过度捕捞，使得鱼类种群能够在没有捕捞压力的情况下自然繁殖和增长，从而实现种群数量的恢复。可见，为呵护好湿地生态环境，当地对公园周边海域实施全面禁渔政策，这一政策重要意义在于增大种群的环境容纳量。 【小问3详解】 就地保护是指在原地对被保护的生态系统或物种建立自然保护区以及国家公园等，这是对生物多样性最有效的保护。为保护海陵岛湿地公园内的濒危物种——黄嘴白鹭及其栖息地，最科学且能从根本上维持物种延续的保护措施是建立自然保护区，并结合现代生物技术对其遗传资源进行长期保存。 【小问4详解】 为保护海陵岛红树林国家湿地公园，进一步提升海陵岛湿地生态系统的稳定性，可以采取的有效措施有：适当增加红树林的面积，提高生态系统的自我调节能力；合理控制游客数量，减少人类活动对生态系统的干扰。 18. 水稻恶苗病主要由镰刀菌引起，是水稻苗期至穗期的主要病害之一。研究人员开展相关实验，从水稻根基土壤中筛选水稻恶苗病拮抗菌，并探究其抗菌机制。相关实验过程如图所示。 回答下列问题： （1）步骤①中需从______（填“患病”或“健康”）的水稻根基土壤获取菌株。步骤②和③中“a”表示______。接种后在28℃条件下培养1-2天，根据______对步骤④中获得的纯培养物进行初步的鉴定和分类。 （2）按照步骤⑤进行拮抗菌筛选，在甲处接种等量的拮抗菌菌株J1、J2后，培养一段时间，结果如图所示。据图判断，______的抑菌效果更佳，依据是______。该实验还需设置对照组，对照组的操作是______。 （3）用去除拮抗菌菌株J1后的无菌发酵液处理病原菌菌丝体，发现菌丝明显变短，推测拮抗菌抑菌的原理是_______。 （4）实验筛选出的菌株需要先进行大田种植试验以检测防治效果，原因是_______。 【答案】（1） ① 患病 ②. 无菌水 ③. 菌落特征 （2） ①. 拮抗菌菌株J1 ②. 接种拮抗菌菌株J1的平板上乙处菌落直径更小 ③. 在甲处接种等量的无菌水，在乙处接种等量的恶苗病病原菌菌株 （3）拮抗菌通过分泌某种化学物质抑制病原菌的生长 （4）实际生产环境和实验室条件存在差异，可能会影响拮抗菌的活性和数量 【解析】 【分析】1、选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 2、由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物；菌落是在固体培养基表面形成的肉眼可见的、有一定态结构的子细胞群体，菌落特征有形状、大小和颜色等。 【小问1详解】 本实验目的是从水稻根基土壤中筛选水稻恶苗病拮抗菌，并探究其抗菌机制，故步骤①中需从患病的水稻根基土壤获取菌株。步骤②和③中“a”表示无菌水，对水稻根基土壤进行充分稀释，然后再菌液涂布到固体培养基上。接种后在28℃条件下培养1-2天，根据菌落特征对步骤④中获得的纯培养物进行初步的鉴定和分类，菌落特征有形状、大小和颜色等。 【小问2详解】 按照步骤⑤进行拮抗菌筛选，在甲处接种等量的拮抗菌菌株J1、J2，乙处接种等量的恶苗病病原菌菌株，分析题图结果可知，由于接种拮抗菌菌株J1的平板上乙处菌落直径更小，故拮抗菌菌株J1的抑菌效果更佳。该实验还需设置对照组，以增强实验结果的说服力，对照组的操作是，在甲处接种等量的无菌水，在乙处接种等量的恶苗病病原菌菌株。 【小问3详解】 用去除拮抗菌菌株J1后的无菌发酵液存在拮抗菌菌株J1的代谢物，用去除拮抗菌菌株J1后的无菌发酵液处理病原菌菌丝体，发现菌丝明显变短，说明拮抗菌抑菌的原理是拮抗菌通过分泌某种化学物质抑制病原菌的生长。 小问4详解】 实验筛选出的菌株需要先进行大田种植试验以检测防治效果，因为实际生产环境和实验室条件存在差异，可能会影响拮抗菌的活性和数量。 19. 和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。回答下列问题： （1）用_______激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子需要进行_________处理后才具有与卵细胞受精的能力。在实际胚胎工程操作中常以_______作为受精的标志。 （2）上图移植的胚胎处于__________期，移入的甲胚胎能在代孕雌牛子宫中存活的生理基础是________。 （3）为培育雌性子代小牛，胚胎移植前须进行性别鉴定，需取图中乙细胞进行________。胚胎移植前，需对供、受体进行______处理，目的是_________。 【答案】（1） ①. 促性腺 ②. 获能 ③. 观察到两个极体或雌、雄原核 （2） ①. 囊胚 ②. 代孕雌牛子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应 （3） ①. DNA分析 ②. 同期发情 ③. 为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境 【解析】 【分析】1、体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物；2、胚胎分割：胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一，在处理过程需特别注意的是要将内细胞团均等分割，否则将影响分割后胚胎的恢复和发育，结果是获得多个基因型相同的后代；3、胚胎移植的基本程序主要包括：(1)对供、受体的选择和处理：选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理；(2)配种或人工授精；(3)对胚胎的收集、检查、培养或保存(对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段)；(4)对胚胎进行移植；(5)移植后的检查；4、分析题图：图中①表示精子的采集；②表示卵母细胞的采集；③表示体外受精过程。通过胚胎工程培育试管牛的过程，包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等过程。 【小问1详解】 用促性腺激素处理雌牛后，可使供体母牛一次性排出多个卵细胞；采集的精子往往需要经过获能处理后才具有与卵细胞受精的能力；受精是精子与卵细胞结合，在实际胚胎工程操作中常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志。 【小问2详解】 由图可知，移植的胚胎具有内细胞团和滋养层细胞，因此移植的胚胎处于囊胚期；移入的胚胎能在代孕雌牛子宫中存活，其生理基础是代孕雌牛子宫对外来胚胎基本不会发生免疫排斥反应。 【小问3详解】 胚胎移植前的性别鉴定应取早期胚胎的滋养层细胞进行DNA分析；胚胎移植前，需对供、受体犬进行同期发情处理，目的是为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境。 20. 新城疫病毒可引起家禽急性败血性传染病；我国科学家将该病毒相关基因改造为r2HN基因，使其在水稻胚乳特异表达，制备获得r2HN疫苗。根据所学知识回答下列问题∶ （1）实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如下图所示。其中GtP为启动子，其作用是__________。若需实现r2HN仅在水稻胚乳中表达，GtP应为______的启动子。图中Nos为终止子，已知r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点，可选择限制酶________对r2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。 （2）通常采用_________法将r2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测r2HN基因的表达情况，可通过PCR技术检测___________；通过抗原-抗体杂交技术检测是否翻译出r2HN蛋白。 （3）获得转基因植株后，还需筛选出纯合体进行后续研究，其原因是______。 【答案】（1） ①. 识别和结合RNA聚合酶，是转录的起点 ②. 在胚乳中特异性表达 ③. Ⅲ和Ⅰ （2） ①. 农杆菌转化 ②. 的mRNA （3）纯合体自交后代不发生性状分离，便于获得大量转基因植株‍ 【解析】 【分析】基因工程是一项体外DNA重组技术，需要借助限制酶、 DNA 连接酶和载体等工具才能进行。它的基本操作程序包括：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 启动子能够识别和结合RNA聚合酶，是转录的起点。利用水稻细胞培育能表达r2HN的水稻胚乳细胞生物反应器，在胚乳中特异性表达的启动子在水稻胚乳细胞中更容易被RNA聚合酶识别和结合而驱动转录。r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点。KpnI破坏了启动子序列不能选用，SacI位于终止子序列之外不能选用，则为了将目的基因插入到载体的启动子和终止子之间，则需要用限制酶HindIII和EcoRI对r2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。 【小问2详解】 获得水稻愈伤组织后，通过农杆菌的侵染，使目的基因导入水稻细胞并完成转化，即通常采用农杆菌转化法将r2HN基因导入水稻愈伤组织。为检测r2HN表达情况，可通过PCR技术检测转录的r2HNmRNA，可从转基因水稻中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交检测是否翻译出r2HN蛋白。 小问3详解】 由于纯合体自交后代不发生性状分离，具有遗传的稳定性，所以选择纯合体进行后续研究。 21. 科研人员从某濒危动物体内提取出了一种极具研究价值的基因，将其导入大肠杆菌的质粒中保存，操作流程如图所示，其中是氨苄青霉素抗性基因。回答下列问题： （1）获取目的基因除了图中所示的方法外，还可以从相关动物细胞中获取目的基因的mRNA，在______的催化下合成。构建的重组质粒中，除了具有目的基因和标记基因外，还有______。 （2）如果培养基中只加入氨苄青霉素，能否筛选出含目的基因的大肠杆菌？______（填“能”或“否”），原因是______。如果在已成功导入质粒的大肠杆菌培养基中只加入X-gal，能否筛选出含有目的基因的大肠杆菌？______（填“能”或“否”），原因是______。 （3）将目的基因导入大肠杆菌中进行保存以后，随时可以从中获取进行扩增，扩增目的基因的原理是______，所用的酶是______，除了加入这种酶和DNA模板外，还应向反应体系中加入_________。 【答案】（1） ①. 逆转录酶 ②. 启动子、终止子和复制原点 （2） ①. 否 ②. 导入重组质粒和导入空白质粒的大肠杆菌均可在培养基中生存 ③. 能 ④. 导入含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌形成的菌落为白色，而导入不含目的基因的质粒的大肠杆菌形成的菌落为蓝色 （3） ①. DNA的（半保留）复制） ②. 耐高温的DNA聚合酶 ③. 2种引物和4种脱氧核苷酸 【解析】 【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心。 【小问1详解】 获取目的基因除了图中所示的方法外，还可以采用逆转录法，即从相关动物细胞中获取目的基因的mRNA，在逆转录酶的催化下合成。构建的重组质粒中除了具有目的基因和标记基因外，还有启动子、终止子和复制原点。 【小问2详解】 如果培养基中只加入氨苄青霉素，不能筛选出含目的基因的大肠杆菌，原因是导入重组质粒和导入空白质粒的大肠杆菌均可在培养基中生存。如果在已成功导入质粒的大肠杆菌培养基中只加入X—gal，可以筛选出含有目的基因的大肠杆菌，原因是导入含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌形成的菌落为白色，而导入不含目的基因的质粒的大肠杆菌形成的菌落为蓝色。 【小问3详解】 扩增目的基因的原理是DNA的（半保留）复制，所用的酶是耐高温的DNA聚合酶，除了加入这种酶和DNA模板外，还应向反应体系中加入2种引物及4种脱氧核苷酸。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$