内容正文:
高频考点强化练16 微生物的培养与应用
一、选择题:本题共6小题,在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的
1.(2021·北京卷,T12)人体皮肤表面存在着多种微生物,某同学拟从中分离出葡萄球菌。下列操作不正确的是(C)
A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌
B.使用无菌棉拭子从皮肤表面取样
C.用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布
D.观察菌落的形态和颜色等进行初步判断
解析 对培养基一般进行高压蒸汽灭菌,A项正确;从皮肤表面取样时可用无菌棉拭子擦拭皮肤,B项正确;将取样后的棉拭子浸入无菌水中制备菌液(必要时需富集培养),取0.1 mL菌液滴加到培养基表面,再用灼烧灭菌过的且冷却的涂布器涂布,C项错误;不同的微生物一般有不同的菌落特征,可通过观察菌落的形态和颜色等进行初步判断,D项正确。
2.(2025·惠州模拟)微生物的纯培养既需要适宜的培养基,又要防止杂菌污染。下列相关叙述正确的是(A)
A.消毒和灭菌的杀菌程度存在差异
B.培养基中的营养物质浓度越高,对微生物的生长越有利
C.将培养基分装于培养皿中后再进行灭菌,可降低培养基污染的概率
D.操作者要对操作的空间、自己的衣服和手进行灭菌
解析 消毒是指使用较为温和的物理、化学或者生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物,灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,二者的杀菌程度存在差异,A项正确;培养基中的营养物质浓度过高,有可能使培养的微生物脱水死亡,对微生物的生长不利,B项错误;培养基应先灭菌再分装于培养皿中,C项错误;操作者要对操作的空间、自己的衣服和手进行清洁和消毒,将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌,D项错误。
3.天冬氨酸缺陷型菌株不能合成天冬氨酸,必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。影印法(部分过程如图所示)可用于天冬氨酸缺陷型菌株的筛选,其中基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸;转印是将揭起的丝绒布平移到培养基上,使吸附的菌体“印”在培养基平板上。下列叙述正确的是(A)
A.培养皿1中的培养基是完全培养基
B.过程①和过程②应使用相同的接种工具
C.过程②中,应将揭起的丝绒布先转印至培养皿2中
D.菌落B可能是天冬氨酸缺陷型菌株的菌落
解析 两种培养基分别培养是为了筛选出氨基酸缺陷型菌株,因此与基本培养基相比,培养皿1中特有的成分有氨基酸,类似于完全培养基,A项正确;过程①导致菌落均匀分布,因此该方法为稀释涂布平板法,所用工具是涂布器,而过程②所用的工具通常是丝绒布,B项错误;过程②应将揭起的丝绒布先转印至培养皿3基本培养基上,原因是防止基本培养基中混入氨基酸,C项错误;比较基本培养基和完全培养基中的菌落可知,菌落A能在完全培养基上生长,但不能在基本培养基上生长,说明菌落A可能是天冬氨酸缺陷型菌株的菌落,菌落B能在完全培养基上生长,也能在基本培养基生长,说明菌落B不是天冬氨酸缺陷型菌株的菌落,D项错误。
4.(2025·成都检测)为检测自制冰激凌是否符合国家食品安全标准,某校学生进行了相关实验,检测自制冰激凌中的大肠杆菌含量。下列有关说法正确的是(B)
A.培养大肠杆菌时,需要将培养基的pH调至弱酸性
B.在伊红—亚甲蓝培养基上大肠杆菌的菌落将呈现深紫色
C.将冰激凌融化后进行梯度稀释,用平板划线法进行接种
D.培养结束统计到的大肠杆菌的菌落数即为大肠杆菌的活菌数
解析 大肠杆菌属于细菌,培养细菌时一般需将培养基的pH调至中性或弱碱性,A项错误;伊红—亚甲蓝培养基通常用于鉴别大肠杆菌,生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色,B项正确;由题干信息可知,实验要检测自制冰激凌中的大肠杆菌含量,则需要将冰激凌融化后进行梯度稀释,用稀释涂布平板法进行接种,C项错误;菌落计数时,当两个或多个菌落连在一起时,观察到的只是一个菌落,故培养结束统计到的大肠杆菌的菌落数并不是大肠杆菌的活菌数,D项错误。
5.(2025·福州模拟)某研究小组用马铃薯琼脂培养基对新酿米酒中的酵母菌进行初步分离,结果如图所示,下列相关叙述正确的是(C)
A.图a中下一次划线总是从上一次划线的首端开始
B.配制马铃薯琼脂培养基时,其pH需要调节到中性
C.浸泡在酒精中消毒的涂布器使用前需要在火焰上灼烧
D.图a、图b的方法都可以实现对酵母菌的分离和计数
解析 用平板划线法分离微生物时,下一次划线应该从上一次划线的末端开始,A项错误;酵母菌适合生长在偏酸性的环境中,对酵母菌进行分离时,配制的马铃薯琼脂培养基的pH需要调节到酸性,B项错误;将涂布器从酒精中取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后放在火焰上灼烧,再继续进行后续规范操作,C项正确;题图a为用平板划线法分离微生物得到的结果,平板划线法能用于微生物的分离,但不能用于微生物的计数,D项错误。
6.氨苄青霉素在高温下易降解,在含氨苄青霉素的固体培养基中接种没有氨苄青霉素抗性的大肠杆菌,培养一段时间后培养基上出现了菌落。对该现象的原因分析不合理的是(D)
A.大肠杆菌发生了基因突变
B.培养基灭菌不彻底,出现了杂菌
C.培养基中的氨苄青霉素因时间过长已失效
D.先对培养基进行高压蒸汽灭菌再加入无菌的氨苄青霉素
解析 大肠杆菌发生了基因突变,获得了氨苄青霉素抗性,这个原因可解释题干现象,A项不符合题意;培养基灭菌不彻底,出现了其他的杂菌,这个原因可解释题干现象,B项不符合题意;培养基中的氨苄青霉素因时间过长已失效,培养基可出现菌落,这个原因可解释题干现象,C项不符合题意;氨苄青霉素在高温下易降解,因此应先对培养基进行高压蒸汽灭菌再加入无菌的氨苄青霉素,会保证培养基中氨苄青霉素的有效性,这个原因不能解释题干现象,D项符合题意。
二、选择题:本题共3小题,在每小题给出的四个选项中,有两个或两个以上选项符合题目要求
7.某研究小组进行了土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验,操作流程如图所示。下列叙述错误的是 (AD)
A.需要配制以尿素为唯一氮源的培养基并用干热灭菌法灭菌
B.甲平板上的一个单菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌
C.上述实验中制备3个平板可避免偶然因素导致的实验误差
D.5号试管的计数结果表明每克土壤中的活菌数约为1.7×107个
解析 分离土壤中分解尿素的细菌时,应选用以尿素为唯一氮源的选择培养基,并采用高压蒸汽灭菌法(湿热灭菌法)灭菌,A项错误;当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,B项正确;进行多个重复实验的目的是避免偶然因素导致的实验误差,C项正确;由题图可知,稀释倍数为106,涂布液的体积为0.1 mL,平均菌落数为(168+175+167)÷3=170(个),故5号试管的计数结果表明,每克土壤中的活菌数约为170÷0.1×106=1.7×109(个),D项错误。
8.(2025·石家庄模拟)如图所示,科研人员利用诱变方式选育可高产β⁃胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌。未突变菌不能在含有β⁃紫罗酮的培养基上生长。随β⁃胡萝卜素含量增加,菌体颜色从黄色加深至橙红色。如图甲为选育菌种及获得β⁃胡萝卜素的流程,下列相关叙述正确的是 (ACD)
甲
乙
A.要得到图乙所示的菌落,可用稀释涂布平板法进行②操作,然后将培养皿倒置培养
B.经过程①紫外线照射的三孢布拉氏霉菌都能在含β⁃紫罗酮的鉴别培养基上生长
C.进行③操作时,应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养,目的是纯化菌株
D.在进行实验前,需要对试管、培养皿、锥形瓶等进行干热灭菌
解析 题图乙中的菌落均匀分布于平板上,说明②操作(接种)的方法是稀释涂布平板法,且培养皿倒置培养,A项正确;过程①紫外线照射的作用是利用物理因素诱导三孢布拉氏霉菌发生基因突变,由于突变具有不定向性和低频性,因此被照射的三孢布拉氏霉菌不一定都能在含β⁃紫罗酮的鉴别培养基上生长,B项错误;橙红色的菌体为β⁃胡萝卜素高产菌,进行③操作时,应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养,C项正确;在进行实验前,需要对试管、培养皿、锥形瓶等进行干热灭菌,D项正确。
9.(2025·南昌模拟)粪肠球菌是一种栖息于人体肠道的益生菌,当肠黏膜被破坏时,肠道内的粪肠球菌及其代谢产生的毒素可能进入人体内导致某些疾病的发生。科研人员进行了青霉素和某种噬菌体对粪肠球菌杀灭效果的相关研究。下列叙述正确的是(AD)
A.粪肠球菌寄生于人体肠道,利用自身细胞的核糖体合成菌体蛋白
B.采用稀释涂布平板法接种,培养菌落数量达到30~300时进行计数
C.长期使用青霉素治疗粪肠球菌感染性疾病,可能会诱导耐药菌产生
D.用噬菌体治疗粪肠球菌导致的疾病,对机体内正常菌群的影响较小
解析 粪肠球菌可寄生于人体肠道,可利用自身细胞核糖体合成自身蛋白质,A项正确;采用稀释涂布平板法接种,培养至菌落数量稳定时,选择菌落数为30~300的平板进行计数,B项错误;长期使用青霉素治疗粪肠球菌感染性疾病,不是诱导耐药菌产生,而是耐药菌被筛选出来,C项错误;用某种噬菌体治疗粪肠球菌导致的疾病,只会灭杀粪肠球菌,对机体内其他正常菌群的影响较小,D项正确。
三、非选择题
10.(科学探究)(2023·全国乙卷,T37)某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是:先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中,喷水浸润、接种菌T,培养一段时间后,再用清水淋洗秸秆堆(清水淋洗时菌T不会流失),在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌,进行乙醇发酵(酒精发酵)。实验流程如图所示。
回答下列问题:
(1)在粉碎的秸秆中接种菌T,培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解,其原因是菌T能分泌分解纤维素的酶(纤维素酶),将纤维素分解成葡萄糖。
(2)采用液体培养基培养酵母菌,可以用淋洗液为原料制备培养基,培养基中还需要加入氮源等营养成分,氮源的主要作用是为酵母菌合成蛋白质、核酸等物质提供原料(答出1点即可)。通常,可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在使用该方法时,为了达到良好的灭菌效果,需要注意的事项有排净锅内冷空气,使锅内均匀升温;蒸汽压力必须保持一段时间;灭菌包不宜过大过紧,以免影响蒸汽的渗入等(答出2点即可)。
(3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中,拧紧瓶盖,置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是创造无氧环境,利于酒精发酵,同时可防止杂菌污染。但是在酵母菌发酵过程中,还需适时拧松瓶盖,原因是排出瓶内气体。发酵液中的乙醇可用酸性重铬酸钾溶液检测。
(4)本实验收集的淋洗液中的(纤维素的分解产物)葡萄糖可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比,本实验中乙醇生产方式的优点是不需要消耗粮食,降低粮食短缺风险;促进秸秆的回收利用,提高能量利用率。
解析 (1)菌T能产生分解纤维素的酶(纤维素酶)可将纤维素大量分解。(2)蛋白质、核酸等的合成都需要氮元素。高压蒸汽灭菌必须要保持一定的压力和温度、灭菌时间适宜,才能灭菌充分。具体见答案。(3)酵母菌进行酒精发酵需要无氧条件,拧紧瓶盖可以创造无氧环境,同时还可防止杂菌污染。酵母菌发酵过程中适时拧松瓶盖是为了排出瓶内酒精发酵产生的气体。橙色的重铬酸钾可在酸性条件下与酒精反应变成灰绿色,故发酵产生的酒精可用酸性重铬酸钾溶液检测。(4)纤维素的分解产物葡萄糖经清水淋洗进入淋洗液中,灭菌后可作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比,用作物秸秆生产乙醇不需要消耗粮食,降低了粮食短缺风险;可促进秸秆的回收利用,提高能量利用率。
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