第9单元 第38讲 微生物的培养技术及应用-（配套课件）【赢在微点·顶层设计】2027年高中生物学高考一轮总复习（多选版）

第38讲 第九单元　生物技术与工程 微生物的培养技术及应用 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 课 标 内 容 1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。2.阐明无菌技术是在操作过程中，防止无菌物品与无菌区域被微生物污染的技术。3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。4.概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。5.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 微考点 大突破 内容 索引 温馨提示:点击标题链接相关内容 微真题 重体悟 考点一　微生物的基本培养技术 考点二　微生物的选择培养和计数 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 赢在微点 生物 大一轮 考点一　微生物的基本培养技术 微考点/大突破 第一部分 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 1.培养基的配制 营养物质 碳源 无机盐 特殊营养物质 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 凝固剂 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 提醒　几种微生物的营养和能量来源 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 2.无菌技术 (1)目的：获得________的微生物培养物。 (2)关键：防止________污染。 (3)消毒与灭菌的比较。 项目 消毒 灭菌 作用 强度 较为______的物理、化学或生物等方法 _____的理化方法 纯净 杂菌 温和 强烈 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 作用 程度 杀死物体表面或内部_______微生物 杀死物体内外_____的微生物 芽孢和 孢子 一般不能杀灭 能杀灭 适用 对象 实验操作的空间、操作者的衣着和双手 微生物培养的器皿、接种用具和培养基等 一部分 所有 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 常用 方法 ①煮沸消毒法：一般物品，如家庭餐具等生活用品； ②____________：一些不耐高温的液体，如牛奶； ③化学药物消毒法：用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等； ④______________：接种室、接种箱、超净工作台 ①_________：培养基及容器等； ②干热灭菌：玻璃器皿、金属用具等； ③___________：接种工具、其他金属用具等 巴氏消毒法 紫外线消毒法 湿热灭菌 灼烧灭菌 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (4)注意事项。 ①实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与____________接触。 ②为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台上并在______________附近进行。 周围的物品 酒精灯火焰 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 3.微生物的纯培养概念辨析 固体培养基 一定形态结构 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 4.纯培养的过程(以酵母菌为例) 高压蒸汽灭菌法 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 平板划线法 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 倒置 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 教材基础辨析 (1)微生物就是难以用肉眼观察的细菌、真菌和病毒。(选择性必修3 P9“相关信息”)( ) (2)在培养霉菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性。(源自选择性必修3 P10)( ) (3)牛肉膏和蛋白胨含有糖、维生素和有机氮等，既可以充当碳源又可以充当氮源。(选择性必修3 P10“相关信息”)( ) (4)生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。(选择性必修3 P10“相关信息”)( ) × × √ √ 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (5)倒平板过程中，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上，将培养基倒入培养皿并盖上皿盖后，立即将培养皿倒置。(选择性必修3 P12“探究·实践”)( ) (6)培养酵母菌时，可将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入适宜温度的恒温培养箱中培养24~48 h。(选择性必修3 P13“探究·实践”)( ) × √ 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 教材素材拓展 如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析并回答下列问题： (1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是什么? 答：_______________________________________________________ __________________________。 获得题图A效果的接种方法为稀释涂布平板法，获得题图B效果的接种方法为平板划线法 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一 片，最可能的原因是什么?应当怎样操作才可避免此种现象? 答：_______________________________________________________ ___________________________________________________________________________。 (3)接种操作为什么一定要在火焰附近进行? 答：_________________________。 最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌 火焰附近存在着无菌区域 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 1.倒平板的操作步骤 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (1)培养基要冷却到50 ℃左右时开始倒平板。温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 (2)要使锥形瓶的瓶口通过酒精灯火焰。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 (3)倒平板时，要用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不要完全打开，以免杂菌污染培养基。 (4)平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，平板倒置后，既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 2.平板划线法操作步骤 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (1)实验成功关键点。 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (2)平板划线法操作中几次灼烧接种环的目的。 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 1.(2022·辽宁卷，T15)为避免航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，需要对航天器及洁净的组装车间进行环境微生物检 测。下列叙述错误的是(　　) A.航天器上存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物 B.细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀 C.在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品 D.采用平板划线法等分离培养微生物，观察菌落特征 能力一　培养基的制备和无菌技术(考查科学思维) 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 不同微生物对营养物质的需求不同，航天器上可能存在适应营养物质匮乏等环境的极端微生物，A项正确；航天器上的细菌可通过大量繁殖形成菌膜，并粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀，B项正确；为规避微生物污染的风险，需对航天器内外及组装车间等都进行微生物采样，对样品进行检测，并不仅限于采样组装车间地面和设备表面，C项错误；平板划线法可将混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上多次划线稀释而获得单个细胞，并让其成长为单菌落，进而通过观察菌落特征确定其类型，D项正确。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 2.回答下列与细菌培养相关的问题。 (1)在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_______ (填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是_____________________ ____________________。 硝化细菌在没有碳源的培养基上________(填“能够”或“不能”)生长，原因是________________________________________________。 蛋白胨 不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同 能够 硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (2)用平板培养细菌时一般需要将平板________(填“倒置”或“正置”)。 (3)单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形 状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是_______ ____________________________________________________。 (4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过__________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。 倒置 在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征 灭菌 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (1)细菌培养时常用牛肉膏蛋白胨培养基，牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素等，蛋白胨能提供碳源、氮源、维生素等，而葡萄糖不能提供氮源，NaNO3不能为微生物提供碳源。不同细菌生长繁殖所需要的最适pH是不同的，应该根据培养细菌的不同来调节培养基的pH。硝化细菌是化能自养型细菌，可以空气中的CO2为碳源，因此其在没有碳源的培养基上能够生长。(2)在平板培养基上培养细菌时，一般需将平板倒置，这样可以防止培养皿 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 盖上的水珠落入培养基，造成污染。(3)不同种类的微生物所形成的菌落，在大小、形状和颜色等方面具有一定的特征，不同种微生物在一定培养条件下表现出各自稳定的菌落特征，可以作为菌种鉴定的重要依据。(4)使用后的培养基在丢弃前需进行灭菌处 理，以免污染环境。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 能力二　微生物的纯培养(考查科学探究) 3.为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是(　　) A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整 B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落 C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的 D.菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 倒平板后无需间歇晃动，A项错误；题图中Ⅰ区、Ⅱ区的细菌数量太多，Ⅲ区的细菌数量较少，可从Ⅲ区挑取单菌落，B项正 确；Ⅲ区中存在单菌落，该实验结果能达到菌种纯化的目的，C项错误；刚果红能与纤维素形成红色复合物，但不能和纤维素水解后的产物形成红色复合物，因此菌落周围的纤维素被降解后，不能被刚果红染成红色，培养基中会出现透明圈，D项错误。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 4.(2024·山东卷，T15)酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为(　　) A.X→Y→Z B.Z→Y→X C.Y→X→Z D.Z→X→Y 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 由题意可知，色氨酸的合成过程如图所示： 。 由题图可知，trpX靠近trpY和trpZ的两端生长加快，推测trpY和trpZ可为trpX提供合成色氨酸的中间产物①，trpX不能合成酶①； 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 trpY在靠近trpZ的一端生长加快，说明trpZ可为trpY提供合成色氨酸所需要的中间产物②，说明trpY不能合成酶②；trpZ可为trpX和trpY提供中间产物①和②，自己却无法利用中间产物合成色氨 酸，说明trpZ不能合成酶③；所以3种酶在该合成途径中的作用顺序为X→Y→Z，A项符合题意。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 赢在微点 生物 大一轮 考点二　微生物的选择培养和计数 微考点/大突破 第一部分 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 1.选择培养基 抑制或阻止 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 2.微生物的选择培养——稀释涂布平板法的操作步骤 (1)系列稀释操作：该操作常用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。 操作步骤： 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (2)涂布平板操作。 序号 名称 图示 操作 1 取菌液   取0.1 mL菌液，滴加到____________ 2 涂布 器消毒   将涂布器浸在盛有______的烧杯中 培养基表面 酒精 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 3 涂布 器灭菌   将沾有少量酒精的涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后进行涂布 4 涂布 平板   用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养 皿，使菌液_________ (3)培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板________，放入30~ 37 ℃的____________中培养1~2 d。 涂布均匀 倒置 恒温培养箱 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 3.微生物的数量测定——两种计数方法的比较 项目  间接计数法(稀释涂布平板法) 直接计数法(显微镜直接计数法) 原理 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个________，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌 利用特定的______________ ______________，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量 单菌落 细菌计数板或 血细胞计数板 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 公式 每克样品中的菌株数=(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数 每毫升原液中所含的微生物数=每小格的平均微生物数×400×104×稀释倍数 缺点 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 不能区分死菌与活菌 结果 与实际值相比______ 与实际值相比______ 偏小 偏大 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 提醒　血细胞计数板比细菌计数板厚，常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。 4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作 (1)实验原理。 脲酶 尿素 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (2)操作步骤。 3~8 30~300 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 稀释涂布平板 30~37 菌落数目稳定 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (3)实验结果分析与评价。 对照组的培养皿中无菌落生长 对照组的培养皿中有菌落生长 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 30~300 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 教材基础辨析 (1)选择培养基可以鉴定某种微生物的种类。(源自选择性必修3 P16) ( ) (2)菌液的稀释度足够高时，培养基表面会获得单菌落。(源自选择性必修3 P18)( ) (3)对细菌进行计数能采用稀释涂布平板法，也能用平板划线法。(源自选择性必修3 P18)( ) (4)细菌计数板常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。 (选择性必修3 P18“相关信息”)( ) × √ × × 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (5)分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的碱性降低。(选择性必修3 P18“探究·实践”)( ) (6)用稀释涂布平板法计数时，平板上的一个菌落就是一个细菌。(选择性必修3 P20“概念检测”2)( ) (7)纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈越大，说明该类纤维素分解菌分解纤维素的能力越强。(选择性必修3 P20“拓展应用”2) ( ) × × √ 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 教材素材拓展 在发酵生产啤酒过程中，要随时检测培养液中的酵母菌数量、产物浓度等，以了解发酵进程。甲、乙、丙三位同学用稀释涂布平板法测定同一培养液的酵母菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下三种统计结果。 (1)甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果是否可靠?为什么? 答：_______________________________________________________ _________________________________________________________。 不可靠；为增加实验的说服力与准确性，应设置重复实验，在同一稀释度下至少涂布3个平板，统计结果后计算平均值 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (2)乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、 212、256，该同学将21舍去，然后取平均值。该同学对实验结果的处理是否合理?为什么? 答：_______________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________。 不合理；微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果差别很大的情况，应分析实验过程中可能的影响因素，找出差异的原 因，而不能简单地将结果舍弃后进行计数 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (3)在稀释涂布平板法中，为何需至少涂布3个平板? 答：_______________________________________________________ ________________________________。 (4)为什么要选取菌落数目稳定时的记录作为结果? 答：_______________________________________________________ ____________________________。 作为重复实验，统计时取平均值，以减少偶然因素对实验结果的影响，增强实验结果的说服力 尽量缩小统计的菌落数与实际活菌数的差值，因为繁殖慢的菌体开始看不出明显的菌落特征 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (5)丙同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)，那么稀释倍数为106的试管中细菌的浓度是________________个/mL。每克样品中的细菌数是______________个。 2.34×103 2.34×109 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 能力一　微生物的选择培养(考查科学思维) 1.(2025·陕西调研)利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有重大意义。科研人员开展选育高产纤维素酶菌株的相关研究，过程如图1。鉴定高产纤维素酶菌株是否产生，可使用刚果红平板法。其原理是纤维素被分解，刚果红无法与纤维素的分解产物结合，培养基中的菌落周围会形成透明圈，如图2。下列叙述正确的是(　　) 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 图1 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 A.采集的黑土壤需经过高压蒸汽灭菌再进行富集培养 B.人工筛选可以使产纤维素菌株发生定向进化，诱变处理使每个细菌的产纤维素酶能力提高 C.配制CMC平板培养基需加入纤维素为唯一碳源和蛋白胨为唯一氮源 D.图2中两个透明圈内的微生物均能将分解纤维素的酶分泌到细胞外 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 高压蒸汽灭菌会杀死黑土壤中的微生物，因此无法培养出产纤维素酶的菌株，A项错误；人工筛选可以决定产纤维素菌株进化的方向，但变异是不定向的，因此无法保证每个细菌的产纤维素酶的能力都能提高，B项错误；蛋白胨既是氮源也是碳源，C项错 误；题图2中两处位置都出现透明圈，说明菌落周围的纤维素都已被分解，因此确定纤维素酶出现在细胞外，D项正确。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 2.(多选)(2024·黑吉辽卷，T19)某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是 (　　) 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品 B.将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测 C.将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落 D.判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 内生菌可防治香蕉枯萎病，大量感染香蕉枯萎病的香蕉不含或仅含少量内生菌，样品采集应该在题述香蕉种植园内的未感染的植株上采集，A项错误；采集的样品充分消毒后，用无菌水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测(当结果为无菌时说明样品表面无菌，从而可进行后续实验)，B项错误；获得单菌落的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，C项正确；通过比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小，可判断内生菌的抗性效果，D项正确。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 能力二　微生物的分离与计数(考查科学探究) 3.(2023·辽宁卷，T9)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的，利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度(菌落数/m3)。下列叙述错误的是 (　　) A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理 B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值 D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 对采样器进行无菌处理可以减小采样器上附着细菌引起的实验误差，A项正确；为防止皿盖上的冷凝水落入培养基，冲散菌落，造成污染，以及防止水分大量蒸发，恒温培养细菌气溶胶样品时需将平板倒置，B项正确；同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数并取平均值，可减少偶然误差，C项正确；当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故稀释涂布平板法计数的细菌菌落数往往比实际值低，D项错误。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 两种纯化方法的比较 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 4.(2025·成都调研)耙耙柑是深受全国人民喜爱的一种水果。但是在贮运过程中白地霉侵染引起的酸腐病会导致耙耙柑腐烂，带来巨大经济损失。为了解决这一问题，科研人员研究了桔梅奇酵母对白地霉的抑菌效果，并且对其作用机制进行了探究。回答下列问题： (1)白地霉从耙耙柑中获得其生长繁殖所需的_____________________ _____等基本营养物质。 水、无机盐、碳源和氮源 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (2)将桔梅奇酵母与白地霉菌种用_________________________法分别接种到不同的平板上进行培养，得到纯培养物后，再挑取菌落，用无菌水分别制备菌种悬液，利用血细胞计数板在_________下计数，并稀释至实验所需浓度。 (3)为探究桔梅奇酵母对酸腐病的生物防治作用，研究人员在耙耙柑果实中部等距离刺两个孔，其中一孔接种0.1 mL桔梅奇酵母悬液和0.1 mL白地霉悬液。一段时间后统计果实发病率并测量白地霉菌丝生长情况，结果如图1、图2所示： 平板划线(或稀释涂布平板) 显微镜 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 另一个孔作为对照组的处理是接种_____________________________ ________________________________。综合图1、图2结果，表明桔梅奇酵母对白地霉最可能的抑制机制为_________________________ ______________________________。 等量无菌水和白地霉悬液(或0.1 mL无菌水和0.1 mL白地霉悬液) 桔梅奇酵母通过抑制白地霉菌丝的生长来降低酸腐病害 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (4)铁是真菌生长的必需元素，是细胞内重要酶活性中心的组成部 分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+结合形成稳定的红色复合物。研究者配制含有不同浓度FeCl3(单位：mg/L)的培养基，实验处理及结果如图3所示。 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈的原因是___________________ __________________________________________________________________________________________；随培养基中FeCl3浓度的增加，红色抑菌圈颜色加深但变窄，对白地霉的抑制效果________(填“增 强”或“减弱”)。 桔梅奇酵母产生的普切明酸与培养基中的Fe3+结合生成红色复合物，白地霉不能利用这种形式的Fe3+，从而生长受到抑制 减弱 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (1)白地霉引起的酸腐病会导致耙耙柑腐烂，从而为白地霉生长繁殖提供所需的碳源、氮源、水以及无机盐等营养物质。(2)微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，因此，可将桔梅奇酵母与白地霉菌种用平板划线法(或稀释涂布平板法)分别接种到不同的平板上进行培养，再用无菌水分别制备菌种悬液，利用血细胞计数板在显微镜下计数，并稀释至实验所需浓度。(3)分析题意可知，本实验的目的是探究桔梅奇酵母对酸腐病的生物防治作 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 用，则实验的自变量是梅奇酵母的有无，因变量是酸腐病的发病情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故在耙耙柑果实中部等距离刺两个孔，其中一孔接种白地霉和桔梅奇酵母悬液，另一孔应接种等量白地霉悬液。综合题图1、图2结果可知，与对照组相比，接种桔梅奇酵母后果实的发病率均有所降低，且菌丝长度保持在较低水平不再生长，表明桔梅奇酵母对白地霉的抑菌机制为桔梅奇酵母通过抑制白地霉菌丝的生长来显著降低酸腐病 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 害。(4)普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+结合形成稳定红色复合物。桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈的原因为桔梅奇酵母产生的普切明酸固定培养基中的Fe3+生成红色复合物，白地霉不能利用这种形式的Fe3+，从而生长受抑制。普切明酸与高浓度的Fe3+结合形成复合物增加(颜色加深)，且由于供白地霉生长利用的Fe3+减少，导致对白地霉的抑制效果逐渐变弱(抑菌圈变窄)。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 赢在微点 生物 大一轮 微真题/重体悟 第二部分 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 1.(2023·山东卷，T15)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是(　　) A.不含氮源的平板不能用于微生物培养 B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A项错误；平板涂布时涂布器使用前必须进行灭菌，B项错误；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，以免污染环境，C项错误；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源而进行生长繁殖，而不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源无法生长，因此以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物，D项正确。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 2.(2023·河北卷，T12)为筛选能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸 菌，下列相关实验设计错误的是(　　) A.从酸奶和泡菜中采样分离乳酸菌 B.平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境 C.对目的菌株进行胆固醇降解能力的测定 D.检测目的菌株对消化道环境的耐受力 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 酸奶和泡菜都是利用乳酸菌的发酵原理制作的，内含大量乳酸 菌，可从中采样分离获得乳酸菌，A项正确；平板倒置的目的是防止皿盖中的冷凝水落入培养基，避免培养基中的水分过快蒸 发，B项错误；实验的目的是筛选获得能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸菌，故需对目的菌株进行消化道环境耐受力的检测和胆固醇降解能力的测定，C、D两项正确。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 3.(2022·海南卷，T12)为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是 (　　) A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本 B.培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基 C.土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌落 D.鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 采集植物园中土壤样本的原则之一是要随机采样，A项正确；牛肉膏蛋白胨固体培养基中含有细菌生长所需的碳源、氮源、水、无机盐等，可用于细菌的培养，B项正确；土壤溶液稀释倍数足够高时，才能将聚集的菌体分散开，有助于在培养基表面形成单菌落，C项错误；不同种类细菌的理化特性一般不同，鉴定细菌种类时，除根据菌落特征进行形态学鉴定外，还可以借助生物化学的方法进行鉴定，D项正确。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 4.(2021·山东卷，T14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是(　　) A.甲菌属于解脂菌 B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源 C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比 D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”，说明甲菌可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A项正确；乙菌菌落周围没有出现深蓝色，说明乙菌不能以脂肪作为碳源，但乙菌也可以在培养基上生存，说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源，B项错误；可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比，更加直 观，C项正确；可以利用该平板来比较解脂菌分泌脂肪酶的能 力，观察指标可以是菌落周围深蓝色圈的大小，菌落周围深蓝色圈的直径越大，说明解脂菌分泌脂肪酶的能力越强，D项正确。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 5.(2023·北京卷，T16)自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。回答下列问题： (1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供____________和维生素等。 氮源、碳源 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (2)A菌通常被用作溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊(如图)，表明______________________________。 A菌能在培养平板中生长繁殖 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样________后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现________。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。 (4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证(主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱)：________________________ _________________________。 稀释 溶菌圈 假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 (1)蛋白胨主要为细菌提供氮源、碳源和维生素等。(2)将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊，表明A菌能在培养平板中生长繁殖。(3)将含菌量较高的湖泊水样稀释后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现溶菌圈。(4)根据实验材料和设备，圆形滤纸小片可用于吸收某种物质，离心机可用于分离菌体和细菌分泌物，为探究P菌溶解破坏A菌的方式，可假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂。 解析 内容索引 高考复习顶层设计 生物 第 ‹#› 页 微在字里 赢在行间 把握高考微点，实现素能提升 完成——课时微练(三十八) 本部分内容讲解结束 黑土壤CMC平板产纤维素霉菌株XZ-33 产纤维素霉菌株UV-10产纤维素霉菌株UV-co16 $$