课时微练42 基因工程的基本工具和基本操作程序-(Word练习)【赢在微点·顶层设计】2027年高中生物学高考一轮总复习（不定项版）

课时微练(四十二)　基因工程的基本工具和基本操作程序 　 一、选择题:本题共8小题,在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的 1.(2025·广州模拟)下列有关基因工程中载体的说法,正确的是(　　) A.在进行基因工程操作中,被用作载体的质粒都是天然质粒 B.所有的质粒都可以作为基因工程中的载体 C.质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子 D.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因 2.(2025·南通统考)如图所示三个DNA片段依次表示EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制酶的识别序列与切割位点。下列有关叙述错误的是(　　) A.三种限制酶切割产生的末端的长度大小相同 B.这三种限制酶切割后形成的都是黏性末端 C.BamHⅠ和Sau3AⅠ切割DNA片段形成的末端不能彼此连接 D.图中的DNA片段被EcoRⅠ切割后,会增加两个游离的磷酸基团 3.(2023·湖北卷,T4)用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒,构建基因表达载体(重组质粒),并转化到受体菌中。下列叙述错误的是(　　) A.若用HindⅢ酶切,目的基因转录的产物可能不同 B.若用PvuⅠ酶切,在含Tet(四环素)培养基中的菌落,不一定含有目的基因 C.若用SphⅠ酶切,可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D.若用SphⅠ酶切,携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落 4.蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白,有着超强的抗张强度,被称为“生物钢”。某科研小组欲利用转基因大肠杆菌生产蛛丝蛋白。如图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图,其中1~4表示PCR过程中DNA上引物可能结合的位置。下列有关叙述错误的是(　　) A.若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因,限制酶会破坏4个磷酸二酯键 B.若用PCR技术获取目的基因,则图中的1、4分别是2种引物结合的位置 C.在PCR反应缓冲液中加入Mg2+的作用是激活耐高温的DNA聚合酶 D.受体细胞一般需先用Ca2+处理,更利于实现转化 5.(2025·重庆调研)叶绿体遗传转化体系是近年发展起来的一种新的植物生物反应器。研究人员以HIV病毒包膜蛋白上的V3环和C4结构域序列的基因作为目的基因,与叶绿体特异性启动子、终止子等序列整合后,构建成基因表达载体,转入叶绿体成功表达出C4V3抗原。下列说法不正确的是(　　) A.植物生物反应器主要依赖基因工程和细胞工程等现代生物学技术 B.构建叶绿体遗传转化体系需要的工具酶有限制酶、DNA聚合酶 C.按上述方式构建的基因表达载体使得目的基因只能在叶绿体中表达 D.C4V3抗原表达成功与否,可以用凝胶电泳法进行分子水平的检测 6.研究人员发现高强度光照下,番茄会通过NPQ(一种光保护机制)散失过多热能,避免高强度光照造成损伤。为研究V基因对NPQ的作用机制,科研人员利用病毒诱导基因沉默技术(VIGS技术)特异性地使V基因沉默,发现高强度光照下番茄叶片的损伤明显增强。技术原理如图所示。下列叙述正确的是(　　) A.本实验中的目的基因应选用V基因,该基因可通过PCR技术获得 B.该过程中目的基因整合到特殊农杆菌的T⁃DNA上 C.该过程中VIGS技术通过降解V基因的mRNA进而抑制V基因的表达 D.V基因的表达可能促进了NPQ机制的活化 7.(2025·湖北模拟)疟疾是一种严重危害人类健康的红细胞寄生虫病,可用氯喹治疗。疟原虫pfcrt基因编码的蛋白,在第76位发生了赖氨酸到苏氨酸的改变,从而获得了对氯喹的抗性。现有6份血样,处理后进行PCR扩增pfcrt基因。产物用限制酶ApoⅠ消化,酶解产物的电泳结果如图所示。1~6号血样中,来自氯喹抗性患者的是(　　) [注]　泳道号对应血样号。 A.1号和6号 B.2号和4号 C.3号和5号 D.1号、2号、4号和6号 8.(2025·湖北模拟)研究人员利用农杆菌介导法和花粉管通道法培育出转抗寒基因PgLCBF1的月季石榴,主要过程示意图如图。下列说法正确的是(　　) A.用限制酶XbaⅠ分别切割质粒和抗寒基因产生平末端,便于目的基因插入到质粒 B.过程②筛选时,使用的液体培养基需加入新霉素、碳源、氮源和水等物质 C.实验中过程③主要目的是使转基因大肠杆菌快速增殖,获得更多的重组质粒 D.花粉管通道转化法不需要经过植物组织培养,并且获得的种子一定为转基因种子 二、选择题:本题共4小题,在每小题给出的四个选项中,有一项或多项符合题目要求 9.限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶,下列说法正确的是(　　) A.DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 B.限制酶只能切割双链DNA片段,不能切割烟草花叶病毒的核酸 C.只有用相同限制酶处理含目的基因的DNA片段和质粒,才能形成重组质粒 D.限制酶主要从原核生物中分离纯化而来,不能剪切自身的DNA 10.青蒿素是有效的抗疟疾药物,但野生黄花蒿中青蒿素的产量较低。为缓解青蒿素供应不足的状况,科学家将基因tms和tmr导入黄花蒿的愈伤组织,获得了黄花蒿的冠瘿组织,改造过程用到的部分结构如图所示。下列叙述错误的是(　　) A.将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞常用的方法是农杆菌转化法 B.图中P位于基因的首端,作用是DNA聚合酶识别和结合的部位,驱动转录 C.图中还缺少的结构是标记基因,标记基因的作用是表达出目的基因产物 D.欲检测目的基因是否导入冠瘿组织细胞的染色体DNA上可采用PCR技术 11.(2024·湖南卷,T15)最早的双脱氧测序法是在PCR反应体系中,分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸(ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP),子链延伸时,双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则,以加入ddATP的体系为例:若配对的为ddATP,延伸终止;若配对的为脱氧腺苷三磷酸(dATP),继续延伸;PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列,结果如图所示。下列叙述正确的是(　　) A.上述PCR反应体系中只加入一种引物 B.电泳时产物的片段越小,迁移速率越慢 C.5'—CTACCCGTGAT—3'为对照个体的一段序列 D.患者该段序列中某位点的碱基C突变为G 12.大丽轮枝菌(一种丝状真菌)是引起棉花黄萎病的主要病原菌。为观察大丽轮枝菌对棉花根的侵染路径,研究人员用绿色荧光蛋白基因(sGFP)转染大丽轮枝菌,培育出表达绿色荧光蛋白的转基因菌株,主要过程如图。下列相关叙述错误的是(　　) A.图中启动子能被DNA聚合酶识别并结合,驱动sGFP基因的持续转录 B.被相关限制酶处理后,图中b链上黏性末端的碱基序列(5'→3')为AGCT C.若①是利用PCR扩增出含有限制酶酶切位点的sGFP,则5轮后消耗引物数为32个 D.③过程用含潮霉素的培养基筛选农杆菌,得到多个菌落的质粒DNA中可能不含sGFP 三、非选择题 13.(2024·黑吉辽卷,T25)将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒(辅助T⁃DNA转移)和不含有Vir基因、含有T⁃DNA的穿梭质粒,共同转入农杆菌,可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同,为提高翻译效率,增强棉花抗病虫害能力,进行如下操作。回答下列问题: [注]　F1~F3,R1~R3表示引物;T⁃DNA⁃LB表示左边界;T⁃DNA⁃RB表示右边界;Ori表示复制原点;KanR表示卡那霉素抗性基因;HygBR表示潮霉素B抗性基因。 (1)从苏云金杆菌提取DNA时,需加入蛋白酶,其作用是__________________。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精,其目的是______________________________________________________________。 (2)本操作中获取目的基因的方法是_______和_______。 (3)穿梭质粒中p35s为启动子,其作用是__________________________________________,驱动目的基因转录;插入两个p35s启动子,其目的可能是________________________________________。 (4)根据图中穿梭质粒上的KanR和HygBR两个标记基因的位置,用________________基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。 (5)为检测棉花植株是否导入目的基因,提取棉花植株染色体DNA作模板,进行PCR,应选用的引物是_______和_______。 (6)本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程,理由是_______(填选项字母)。 A.通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞 B.将苏云金杆菌Bt基因导入棉花细胞中表达 C.将1~1 362基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列 D.用1~1 362合成基因序列和1 363~1 848天然基因序列获得改造的抗虫蛋白 14.(科学探究)(2025·邯郸模拟)稻米胚乳直链淀粉含量高会导致食用品质差。研究发现,水稻蜡质基因(Wx)编码直链淀粉合成酶。Wx基因模板链第226位碱基为G,此时胚乳中直链淀粉含量最高(表现为非糯性),记为品种G;若该位点突变成T,胚乳中直链淀粉的合成水平会降低(表现为糯性),记为品种T。已知品种G和品种T杂交,后代均表现为非糯性,如图表示品种G和品种T中Wx基因的部分碱基序列,请回答下列问题: (1)研究人员以待测水稻叶片总DNA为材料进行PCR扩增,若引物1的核苷酸序列为5'—GCTTCACTTCTCTGCTTGTG—3',则引物2的核苷酸序列为5'—_______________________—3'。 (2)研究人员对PCR扩增产物经AccⅠ酶(已知AccⅠ酶的识别位点为,两引物之间无另外的AccⅠ酶的识别位点)切割后进行________________可以检测出该待测水稻属于哪种品种。若检测结果只观察到长度为________bp的DNA条带,则表明该水稻为品种T。 (3)将品种T的Wx基因与载体结合构建基因表达载体的过程中用到的工具酶有________________。若利用我国科学家独创的目的基因导入方法获得转基因水稻,此种方法________(填“需要”或“不需要”)进行植物组织培养,原因是_____________________________________。 (4)若利用基因工程改造品种G,获得胚乳直链淀粉含量低的新品种水稻,可以将Wx基因_______(填“正向”或“反向”)接入质粒,导入品种G的受体细胞进而获得转基因水稻,从_______水平抑制Wx基因表达。 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 答案 学科网（北京）股份有限公司 $$