精品解析：江苏省镇江市京口区镇江市实验高级中学2024-2025学年高二下学期5月月考生物试题

镇江市实验高中2024-2025学年第二学期5月考试 高二生物试卷 一、单选题（每题2分，共50分） 1. 下列有关发酵技术的叙述，正确的是（ ） A. 制作泡菜过程中，泡菜盐水浓度过高可能会导致泡菜咸而不酸 B. 传统制作果酒时，葡萄要尽量清洗干净，以免杂菌污染使果酒变质 C. 以大豆为主要原料制作酱油，应选择分泌脂肪酶能力强的黑曲霉 D. 果酒和果醋发酵过程中均有pH值先升高后明显下降的现象 2. 发酵工程在农牧业、食品工业等方面均有广泛的应用。下列关于发酵工程的叙述，错误的是（　　） A. 发酵工程与传统发酵技术的主要区别是菌种是否单一 B. 可采用过滤、沉淀的方法将酵母菌从培养液中分离出来 C. 检测啤酒酿造过程中活体酵母菌的密度时，可采用稀释涂布平板法 D. 向发酵液中加入一定量的酸性重铬酸钾溶液可以检测是否产生酒精 3. 赖氨酸营养缺陷型突变大肠杆菌在科研领域中具有广泛的应用价值。下图表示科研人员利用野生大肠杆菌，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷型突变菌株的流程图，其中A、B、C为操作步骤。已知野生大肠杆菌可以在普通培养基上生长繁殖，但赖氨酸营养缺陷型突变大肠杆菌不能，下列叙述错误的是（　　） 注：原位影印是指用无菌绒布轻盖在已经长好菌落的培养基②上，然后不转动任何角度，将②上的菌落按原位“复印”至新的培养基③和④上。 A. 培养基①和②在物质种类上的差异在于，前者不含凝固剂 B. 赖氨酸缺陷型可能是基因突变引起相关酶缺乏，从而自身不能合成所需氨基酸 C. 培养基③和④在物质种类上的差异在于，前者不含赖氨酸等特殊营养物质 D. 培养基④上，乙是由赖氨酸营养缺陷型突变菌繁殖而来 4. 超低温冷冻脱毒法是先用超低温对细胞进行选择性破坏，再用植物组织培养技术获得脱毒植株的方法。以马铃薯茎尖为材料，采用超低温冷冻脱毒法可获得脱毒苗。下列叙述错误的是（　　） A. 植物组织培养所用培养基中生长素与细胞分裂素的比值影响了分化方向 B. 该技术利用了茎尖分生区组织细胞无成熟大液泡、不易形成冰晶的特性 C. 经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯比未脱毒的马铃薯抗病毒能力更强 D. 用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少或无病毒 5. 珍稀植物红豆杉因能产生具有良好抗癌作用的紫杉醇而闻名。下图所示为相关实验流程，相关叙述错误的是（ ） A. 诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等 B. 利用植物细胞培养技术获得初生代谢产物紫杉醇能避免大量破坏野生红豆杉种群 C. 用液体培养基扩大培养愈伤组织生产紫杉醇时，通常要通入无菌空气 D. 同一株植物不同部位的组织细胞经诱导培养获得的植株基因型不一定相同 6. 如下图为诱导多能干细胞（iPS细胞）用于治疗糖尿病的示意图，下列叙述错误的是（ ） A. 干细胞存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等 B. 除图中的成纤维细胞，已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞 C. 诱导iPS细胞分化的实质是动物细胞核具有发育的全能性 D. 将分化得到的胰岛细胞移植回病人体内治疗，理论上可避免免疫排斥反应 7. 我国科学家培育克隆小猴的简要流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 克隆小猴的培育应用了动物体细胞核移植等技术 B. 采集到的母猴卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期 C. 重构胚需用梯度离心或化学物质处理等方法激活 D. 克隆小猴的线粒体DNA不可能来自代孕母猴 8. 下图表示精子入卵后，发生(或引起的)一系列变化形成受精卵的过程，下列叙述正确的是（　　） A. 图中X指卵细胞膜反应，Y指卵子的减数分裂Ⅱ B. 经图中Y过程只形成了雌原核 C. 精子入卵主要指整个精子进入卵细胞内 D. 观察到两个极体或雌、雄原核标志着受精完成 9. 实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B. 二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C. 若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D. 图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 10. 南通某生物兴趣小组的同学用猪肝进行DNA的粗提取与鉴定实验，主要实验流程如下图。相关叙述不正确的是（　　） A. 过程②过滤后应取滤液 B. 过程⑤加入酒精后，也可将溶液倒入离心管离心后取沉淀物 C. 过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D. 提取到的丝状物直接加入二苯胺试剂中，沸水浴加热后变蓝 11. 天然荧光素酶不能高效催化人工合成的荧光素（DTZ）发光。研究人员采用蛋白质工程解决该问题。下列相关叙述正确的是（ ） A. 通过化学诱变剂可定向改造天然荧光素酶的基因序列 B. 蛋白质工程的实质是通过改变氨基酸的结构来改变荧光素酶的功能 C. 改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将化学能转化为光能 D. 可用PCR方法检测突变的荧光素酶基因是否翻译成蛋白质 12. 为研究治疗性克隆能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图所示实验。下列说法错误的是（ ） A. 过程①～⑤利用并体现了动物细胞核的全能性 B. 鼠皮肤细胞在进行①过程前可用灭活的病毒处理 C. 在过程③和④中都体现了基因的选择性表达 D. 受体小鼠应该不需要注射相应的免疫抑制剂 13. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析下列叙述错误的是（ ） A. 该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目少 B. 3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍 C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个 D. 该实验需设置未涂布的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用 14. 下图为啤酒生产的主要流程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 粉碎的目的是有利于麦芽中的淀粉与a-淀粉酶充分接触，缩短糖化过程时间 B. 麦汁煮沸的主要目的是抑制糖化过程后残留酶的活性同时杀死麦汁中微生物 C. 加入酒花的主要目的是提供酵母菌菌种有利于主发酵进行并产生大量酒精 D. 主发酵结束后发酵液还要在低温密闭的环境下储存一段时间才能形成成熟啤酒 15. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B. 过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C. 过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D. 可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 16. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（ ） A. 后代丁的遗传性状由甲、乙、丙的遗传物质共同决定 B. 过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体 C. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D. 过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或者原肠胚后移植 17. 研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法正确的是（ ） A. 步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞 B. 经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖 C. 步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原一抗体杂交 D. 步骤⑥和植物组织培养均需使用二氧化碳培养箱进行大规模培养 18. 下列相关实验操作正确的是（ ） A. 植物组织培养中，对外植体使用70%的酒精消毒30min，再用次氯酸钠消毒30s B. 在DNA的粗提取与鉴定实验中，粗提取的DNA中可能含有蛋白质 C. 将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板 D. 将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落 19. 下表是培养纤维素生产菌的培养基配方，下列说法错误的是（ ） 葡萄糖 酵母膏 碳酸钙 琼脂 蒸馏水 100g 10g 20g 20g 定容至1L A. 该培养基的碳源是葡萄糖和酵母膏 B. 在配制培养基时，一般需要先调pH再灭菌 C. 该培养基从物理性质上看属于固体培养基 D. 该培养基也可用于筛选和培养淀粉分解菌 20. 柑橘是江西省的重要经济水果，但在贮藏和运输过程中，由真菌引起的采后病害严重危害柑橘产业。青绿霉病是最常见的病害，从柑橘果皮中筛选出拮抗细菌是有效的防治手段。拮抗细菌的筛选过程如下，下列说法正确的是（ ） A. 样本采集时需对果皮表面进行消毒，然后将果皮样本加到清水中洗脱细菌 B. 图示细菌分离使用的技术为稀释涂布平板法，该方法还可用于细菌计数但结果偏大 C. 初步筛选时将细菌和青绿霉真菌共培养，测量真菌生长直径，图中a抑制效果更好 D. 为进一步评估拮抗菌的效果，可以测定其培养滤液对真菌生长和繁殖的抑制效果 21. 一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（ ） A. 注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大 B. 单抗制备过程中通常从小鼠腹腔中获得已免疫的B淋巴细胞 C. 利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗 D. p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况 22. 利用“细胞农业”技术（即通过细胞扩大培养形成产物），成功培育出第一杯“人造咖啡”。已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列说法，不正确的是（ ） A. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”的原理是植物细胞具有全能性 B. 利用“细胞农业”获得植物产品，可减少对森林的大面积砍伐 C. “人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养，以增加其产量 D. “人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物 23. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（ ） A. 该项替换研究中，目前可行的直接操作对象是蛋白质 B. 该项替换研究中，改造前后水蛭素的空间结构未发生改变 C. 改造的水蛭素基因导入微生物后可利用发酵工程生产水蛭素 D. 该项替换研究的思路与按照中心法则合成蛋白质的思路一致 24. 苹果醋是以苹果为原料经甲、乙两个阶段发酵而成的，如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 甲阶段的发酵温度高于乙阶段的发酵温度 B. 根据醋酸菌的呼吸作用类型，乙过程需要在无氧条件下完成 C. 过程①②在酵母菌细胞的细胞质基质进行，③在线粒体进行 D. 醋酸菌可以直接将葡萄糖分解产生乙醛，再将乙醛变为醋酸 25. 变酸的果酒表面长的一层膜、泡菜坛内长的一层白膜、腐乳外部的一层白色致密的“皮”，它们分别是由哪种菌的繁殖形成的(　　) A. 醋酸菌、酵母菌、毛霉 B. 酵母菌、毛霉、醋酸菌 C. 醋酸菌、乳酸菌、毛霉 D. 酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 二、多选题（每题3分，多选不得分，漏选得1分，共15分） 26. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述，正确的是（　　） A. 切割质粒的限制酶均特异性地识别6个或4个核苷酸序列 B. ④→⑤需要先避光培养一段时间后，再给予合适的光照条件 C. 获得基因表达载体的过程中，至少需要限制酶断开6个磷酸二酯键、DNA连接酶连接4个磷酸二酯键 D. ⑤表现出抗虫性状说明植株发生了定向的基因重组 27. 某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata 3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata 3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（ ） A. 据甲图分析，进行PCR扩增时，用引物1的模板为M链 B. 2号条带的小鼠是Gata 3-GFP基因纯合子 C. Gata 3-GFP基因转录是以N链为模板 D. 选用引物1和引物3进行PCR，能更好的区分杂合子和纯合子 28. 下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有（ ） A. 加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合 B. 细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞 C. 芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上 D. 胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上 29. 某实验室期望用夹层培养法筛选到符合预期的酵母菌，具体操作如下：先在培养皿底部倒一薄层已灭菌的基本培养基；待冷凝后，再添加一层内含酵母菌液（经诱变剂处理）的基本培养基；冷凝后再加一薄层已灭菌的基本培养基。培养一段时间后，对出现的菌落做好标记；然后再加一层完全培养基，培养一段时间后会长出形态不一的菌落。已知微生物可透过薄层培养基形成菌落，且所有培养基均含有抗生素。下列说法正确的的是（ ） A. 该实验室预期想要得到是具有营养缺陷的酵母菌 B. 培养基中添加抗生素主要是为了抑制细菌的生长，对酵母菌影响较小 C. 最终应选取培养基上较大的菌落作为目标菌种进行后续实验 D. 在用诱变剂处理从外界富集而来的酵母菌前需要对酵母菌进行纯培养 30. 下图表示用荧光PCR法检测目的DNA的过程。在PCR反应体系中，加入足量与目的DNA部分序列互补的探针，探针包含一段脱氧核苷酸单链和发光基团，在完整的探针中发光基团不发光。在PCR过程中，当子链延伸到探针处时，TaqDNA聚合酶催化探针水解并释放发光基团，此时发光基团能发光。下列叙述正确的是（ ） A. PCR的每一次循环包含变性、复性和延伸三步 B. 探针和引物在目的DNA单链上的结合位点不同 C. TaqDNA聚合酶沿着子链5′→3′的方向催化氢键的形成 D. 经历相同的循环次数，起始目的DNA量越多荧光强度越强 三、解答题 31. 我国古代劳动人民用不同原料酿酒的历史已有五千多年，并总结了制作果酒、果醋、泡菜等发酵食品的丰富经验和方法。图1是制作苹果酒、苹果醋的简要工艺流程。 请回答问题： （1）制作苹果醋的菌种呼吸方式是________，与制作苹果酒的菌种相比，制作苹果醋的菌种在结构上的主要特点是________。 （2）苹果酒制作时，发酵瓶中不能装满苹果汁，要留约1/3的空间，目的是________（答出1点即可）。 （3）在苹果酒和苹果醋的制作过程中，使用如图2所示的发酵装置。充气口在制作苹果酒时应________（填“打开”或“关闭”）；排气口要通过一个长而弯曲的胶管d与瓶身相连，这样做的目的是________。检验苹果酒的制作是否成功，除了嗅闻发酵液是否有酒味外，还可用________溶液进行鉴定，若显示________色，则说明产生了酒精。 （4）若继续用图2所示装置在制酒的基础上制作苹果醋，还需要改变的条件是①________；②________。 （5）市场上购买的真空包装酸菜，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，同学怀疑是杂菌污染导致的，同学B怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并说明理由________。 （6）泡菜制作时要用适宜浓度的盐水没过新鲜蔬菜。所用盐水需煮沸，其目的是________（答出1点即可）。为了缩短制作时间，通常会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，目的是________。 32. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题： 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）过程①中需将植物组织经_____后接种于MS培养基上诱导_____过程，产生愈伤组织。 （2）过程②中将愈伤组织加入_____酶去壁，对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理分别为_____、_____。 （3）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择_____（填“有”或“无”）荧光的原生质体用于融合。 （4）过程③可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有_____法等，融合完成的标志是_____，与该过程完成有关的细胞器是_____。 （5）过程④中，再分化阶段所用培养基需含有植物激素X和Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况不同。当植物激素X多Y少时，未分化细胞群将分化出芽，则植物激素X的名称是_____。 （6）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下： 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA分子标记鉴定 甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 由表可知，后代植株中_____类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源于亲本_____的染色体，另一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进主要来源亲本的基因组。 33. 同源重组技术结合tetr-sacB双重选择系统可对基因进行敲除与回补，研究基因的功能。下图是科研人员利用该方法对大肠杆菌tacZ基因进行敲除与回补的相关过程，其中tetr是四环素抗性基因，sacB基因（2071bp）是蔗糖致死基因，LacZ基因表达产物能将无色化合物X-gal水解成蓝色化合物。请回答下列问题： （1）过程①PCR除需要加入Taq酶、dNTP、缓冲液、Mg2+外，还需加入__________________，所加dNTP的作用有_________________________________________________________。 （2）为保证sacB基因和质粒2定向连接，设计引物P1、P2时，需在引物______端添加限制酶________________（填种类）的识别序列；过程②需要限制酶和____________酶。 （3）过程③中，需先用Ca2+处理大肠杆菌，使其成为__________细胞。筛选导入质粒3的大肠杆菌时需在培养基中添加____________。 （4）下图是对质粒3转化菌落进行PCR验证时的产物电泳结果，泳道4、5、7对应的菌株可能转化成功，判断的理由_______________________，过程⑤PCR中设计引物P3、P4时，需在引物5′端分别添加_________________基因两端的同源序列。 （5）过程⑦中，在含有四环素和___________的培养基中出现了白色菌落，即为筛选出的敲除LacZ基因菌株。过程⑧通过同源重组技术结合tetr-sacB双重选择系统可对LacZ基因进行回补，筛选LacZ基因回补菌株时应在培养基中添加_____________________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 镇江市实验高中2024-2025学年第二学期5月考试 高二生物试卷 一、单选题（每题2分，共50分） 1. 下列有关发酵技术的叙述，正确的是（ ） A. 制作泡菜过程中，泡菜盐水浓度过高可能会导致泡菜咸而不酸 B. 传统制作果酒时，葡萄要尽量清洗干净，以免杂菌污染使果酒变质 C. 以大豆为主要原料制作酱油，应选择分泌脂肪酶能力强的黑曲霉 D. 果酒和果醋发酵过程中均有pH值先升高后明显下降的现象 【答案】A 【解析】 【分析】1、果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，前期需氧，后期不需氧。 2、果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是30~35℃，一直需氧，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、泡菜的制作的菌种是乳酸菌，代谢类型为异养厌氧型，乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。 【详解】A、泡菜制作过程中，盐水浓度过高会抑制乳酸菌的发酵活动，导致乳酸产生减少，从而泡菜会显得咸而不酸，A正确； B、传统制作果酒时，葡萄不能过度清洗，因为葡萄表面的野生酵母菌是果酒发酵的关键微生物，过度清洗会将这些酵母菌冲掉，导致发酵失败或杂菌污染，B错误； C、制作酱油主要依赖黑曲霉分泌的蛋白酶，而不是脂肪酶，C错误； D、果酒发酵过程中，酵母菌分解糖产生酒精和二氧化碳，同时会产生有机酸，导致pH值逐渐下降，果醋发酵过程中，醋酸菌将酒精转化为醋酸，pH值也会持续下降，D错误。 故选A。 2. 发酵工程在农牧业、食品工业等方面均有广泛的应用。下列关于发酵工程的叙述，错误的是（　　） A. 发酵工程与传统发酵技术的主要区别是菌种是否单一 B. 可采用过滤、沉淀的方法将酵母菌从培养液中分离出来 C. 检测啤酒酿造过程中活体酵母菌的密度时，可采用稀释涂布平板法 D. 向发酵液中加入一定量的酸性重铬酸钾溶液可以检测是否产生酒精 【答案】D 【解析】 【分析】啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，其中酵母菌的繁殖大部分糖的分解和代谢物的生成在主发酵完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能获得澄清、成熟的啤酒。 【详解】A、发酵工程一般是利用单一菌种进行发酵，传统发酵技术利用的微生物往往不是单一菌种，比如酿酒过程中除了酵母菌，可能还有其他微生物参与，所以发酵工程与传统发酵技术的主要区别是菌种是否单一，A正确； B、酵母菌是单细胞微生物，可采用过滤、沉淀等方法将酵母菌从培养液中分离出来，B正确； C、检测啤酒酿造过程中活体酵母菌的密度常用的是稀释涂布平板法或血细胞计数板计数法等，C正确； D、酸性重铬酸钾溶液对发酵液有影响，检测酒精应从产物中进行检测，而不是将酸性重铬酸钾溶液加入发酵液中，D错误。 故选D。 3. 赖氨酸营养缺陷型突变大肠杆菌在科研领域中具有广泛的应用价值。下图表示科研人员利用野生大肠杆菌，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷型突变菌株的流程图，其中A、B、C为操作步骤。已知野生大肠杆菌可以在普通培养基上生长繁殖，但赖氨酸营养缺陷型突变大肠杆菌不能，下列叙述错误的是（　　） 注：原位影印是指用无菌绒布轻盖在已经长好菌落的培养基②上，然后不转动任何角度，将②上的菌落按原位“复印”至新的培养基③和④上。 A. 培养基①和②在物质种类上的差异在于，前者不含凝固剂 B. 赖氨酸缺陷型可能是基因突变引起相关酶缺乏，从而自身不能合成所需氨基酸 C. 培养基③和④在物质种类上的差异在于，前者不含赖氨酸等特殊营养物质 D. 培养基④上，乙是由赖氨酸营养缺陷型突变菌繁殖而来 【答案】D 【解析】 【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。 【详解】A、培养基①是液体培养基，培养基②是固体培养基，培养基①和②在物质种类上的差异在于，前者不含凝固剂，A正确； B、步骤A通过紫外线诱发基因突变获得赖氨酸营养缺陷型突变大肠杆菌原材料，可能是基因突变引起相关酶缺乏，从而自身不能合成所需氨基酸，B正确； C、培养基③是不添加赖氨酸的普通培养基，培养基④是添加赖氨酸的普通培养基，所以培养基③和④在物质种类上的差异在于，前者不含赖氨酸，C正确； D、培养基④上，甲能在④普通培养基上生长，但不能在③不添加赖氨酸的普通培养基上生长，因此甲是由赖氨酸营养缺陷型突变菌繁殖而来，D错误。 故选D。 4. 超低温冷冻脱毒法是先用超低温对细胞进行选择性破坏，再用植物组织培养技术获得脱毒植株的方法。以马铃薯茎尖为材料，采用超低温冷冻脱毒法可获得脱毒苗。下列叙述错误的是（　　） A. 植物组织培养所用培养基中生长素与细胞分裂素的比值影响了分化方向 B. 该技术利用了茎尖分生区组织细胞无成熟大液泡、不易形成冰晶的特性 C. 经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯比未脱毒的马铃薯抗病毒能力更强 D. 用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少或无病毒 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养的应用：微型繁殖、作物脱毒(选材应该选择茎尖组织)、制造人工种子、单倍体育种(最大的优点是明显缩短育种年限，得到的全为纯种)、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、组织培养所用培养基中生长素与细胞分裂素的比值较高时利于根的分化，生长素和细胞分裂素比值低时有利于芽的分化，说明培养基中生长素与细胞分裂素的比值影响了分化方向，A正确； B、由于茎尖分生组织无成熟液泡，不易形成冰晶，因此可采用超低温冷冻脱毒法对外植体进行消毒，B正确； C、经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯只是脱毒，并没有获得抗病毒的能力，C错误； D、植物的顶端分生区病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，经过人工培养可获得脱毒苗，D正确。 故选C。 5. 珍稀植物红豆杉因能产生具有良好抗癌作用的紫杉醇而闻名。下图所示为相关实验流程，相关叙述错误的是（ ） A. 诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等 B. 利用植物细胞培养技术获得初生代谢产物紫杉醇能避免大量破坏野生红豆杉种群 C. 用液体培养基扩大培养愈伤组织生产紫杉醇时，通常要通入无菌空气 D. 同一株植物不同部位的组织细胞经诱导培养获得的植株基因型不一定相同 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。 【详解】A、外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等都会影响愈伤组织的形成，A正确； B、紫杉醇是植物体内的次生代谢物，B错误； C、用液体培养基扩大培养愈伤组织生产紫杉醇时，通常要通入无菌空气，以保证无菌环境，C正确； D、同一株植物不同部位的组织细胞经诱导培养获得的植株基因型不一定相同，比如花粉粒最终获得的是单倍体植物，D正确。 故选B。 6. 如下图为诱导多能干细胞（iPS细胞）用于治疗糖尿病的示意图，下列叙述错误的是（ ） A. 干细胞存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等 B. 除图中的成纤维细胞，已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞 C. 诱导iPS细胞分化的实质是动物细胞核具有发育的全能性 D. 将分化得到的胰岛细胞移植回病人体内治疗，理论上可避免免疫排斥反应 【答案】C 【解析】 【分析】动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。 【详解】A、动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，A正确； B、iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞，B正确； C、诱导iPS细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，没有形成个体，不能体现全能性，C错误； D、用患者自己的体细胞通过体外诱导成胰岛细胞，并将胰岛细胞细胞移植回病人体内，由于移植的细胞是由病人自身细胞得到的，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。 故选C。 7. 我国科学家培育克隆小猴的简要流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 克隆小猴的培育应用了动物体细胞核移植等技术 B. 采集到的母猴卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期 C. 重构胚需用梯度离心或化学物质处理等方法激活 D. 克隆小猴的线粒体DNA不可能来自代孕母猴 【答案】C 【解析】 【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。由此可见，克隆动物的形成需采用核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术，属于无性生殖。 【详解】A、据图分析，将胎猴体细胞中的细胞核取出，移植到去核的卵母细胞中形成重构胚，应用了动物体细胞核移植技术，A正确； B、采集到的母猴卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期，才能用于核移植，B错误； C、不能使用梯度离心的方法（可以去核）激活重构胚，可以使用电刺激等方法，C错误； D、克隆小猴的线粒体DNA来自于去核的卵母细胞，不可能来自代孕母猴，D正确。 故选BC。 8. 下图表示精子入卵后，发生(或引起的)一系列变化形成受精卵的过程，下列叙述正确的是（　　） A. 图中X指卵细胞膜反应，Y指卵子的减数分裂Ⅱ B. 经图中Y过程只形成了雌原核 C. 精子入卵主要指整个精子进入卵细胞内 D. 观察到两个极体或雌、雄原核标志着受精完成 【答案】A 【解析】 【分析】获能后的精子与卵子相遇时，首先它释放出多种酶以溶解卵细胞膜外的一些结构，同时借助自身的运动接触卵细胞膜。在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带会迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带然后精子入卵。精子入卵后，卵细胞膜也会立即发生生理反应，拒绝其他精子再进入卵内。精子入卵后，精子的尾部脱落，并且原有的核膜破裂；随后精子形成一个新的核膜，最后形成一个比原来精子核还大的核，叫做雄原核，与此同时，精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体后，形成雌原核，雌原核一般略小于雄原核。 【详解】AB、受精阶段，精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，形成阻止多精入卵的第一道屏障，精子入卵后，卵细胞膜也会立即发生生理反应，形成第二道屏障，即图中X过程，精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体，形成雌原核，精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体，形成雌原核，故Y过程既形成了雌原核，又形成了第二极体，A正确、B错误； C、精子入卵主要指精子头部外膜与卵细胞膜融合，C错误； D、在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志，D错误。 故选A。 9. 实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B. 二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C. 若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D. 图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A 、从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质能与小鼠产生的抗体发生特异性结合，所以该蛋白质相当于抗原，A正确。 B 、由图可知，二抗是与一抗结合的，且带有特殊标记，所以二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体，B正确。 C 、若未显示出杂交带，有可能是目的基因导入了受体细胞，但目的基因没有表达，而不是目的基因未导入受体细胞，C错误。 D 、图示操作是通过抗原 - 抗体杂交技术来检测转基因棉花是否产生了 Bt 毒蛋白，D正确。 故选C。 10. 南通某生物兴趣小组的同学用猪肝进行DNA的粗提取与鉴定实验，主要实验流程如下图。相关叙述不正确的是（　　） A. 过程②过滤后应取滤液 B. 过程⑤加入酒精后，也可将溶液倒入离心管离心后取沉淀物 C. 过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D. 提取到的丝状物直接加入二苯胺试剂中，沸水浴加热后变蓝 【答案】D 【解析】 【分析】DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。 【详解】A、过程②过滤后，纱布为残留的组织和细胞结构，DNA在滤液中，应取滤液，A正确； B、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，过程⑤加入酒精后，蛋白质溶解，DNA析出，因此离心后弃上清取沉淀，B正确； C、酶活性的发挥需要适宜的温度等条件，将过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精的目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，C正确； D、将析出的丝状物先溶于5ml的2mol/L的NaCl溶液中，然后加入4mL二苯胺试剂，混匀后沸水浴中加热可出现蓝色，D错误。 故选D。 11. 天然荧光素酶不能高效催化人工合成的荧光素（DTZ）发光。研究人员采用蛋白质工程解决该问题。下列相关叙述正确的是（ ） A. 通过化学诱变剂可定向改造天然荧光素酶的基因序列 B. 蛋白质工程的实质是通过改变氨基酸的结构来改变荧光素酶的功能 C. 改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将化学能转化为光能 D. 可用PCR方法检测突变的荧光素酶基因是否翻译成蛋白质 【答案】C 【解析】 【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。 【详解】A、通过化学诱变剂可以让天然荧光素酶的基因序列进行随机突变，但化学诱变通常是不定向的，A错误； B、蛋白质工程的实质是通过改造基因结构来改造或制造新的蛋白质，B错误； C、改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将化学能转化为光能，C正确； D、PCR 方法主要用于检测DNA的存在或者染色体DNA上是否插入目的基因，检测目的基因是否翻译为蛋白质的方法为抗原﹣抗体杂交，D错误。 故选C。 12. 为研究治疗性克隆能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图所示实验。下列说法错误的是（ ） A. 过程①～⑤利用并体现了动物细胞核的全能性 B. 鼠皮肤细胞在进行①过程前可用灭活的病毒处理 C. 在过程③和④中都体现了基因的选择性表达 D. 受体小鼠应该不需要注射相应的免疫抑制剂 【答案】A 【解析】 【分析】分析题图：图中①为核移植过程，②是早期胚胎培养，③是动物细胞培养，④是诱导胚胎干细胞分化形成神经元的过程，⑤是器官移植过程。 【详解】A、细胞全能性指分化的细胞产生完整有机体或分化出其他各种细胞，治疗性克隆的原理是动物细胞核具有全能性，但本实验只分化出了神经元，并未体现出细胞全能性的特点，A错误； B、鼠皮肤细胞需要与去核卵母细胞进行细胞融合，用灭活的病毒处理可促进该过程，B正确； C、细胞的分裂、分化等生命活动中都是部分基因在表达，过程③和④都体现了基因的选择性表达，C正确； D、治疗性克隆由体细胞提供细胞核进行细胞核移植，避免免疫排斥是其目的之一，因此鼠皮肤细胞应该取自受体小鼠，受体小鼠不排斥此神经元，不需要注射免疫抑制剂，D正确。 故选A。 13. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析下列叙述错误的是（ ） A. 该实验方法统计得到的结果常会比实际活菌数目少 B. 3号试管中的样品溶液稀释倍数为104倍 C. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个 D. 该实验需设置未涂布的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，用以判断选择培养基是否有选择作用 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：图中5支试管为梯度稀释，最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。统计菌落数在30-300的平板，取其平均值，进行计数。计数公式为(C÷V)×M。(C为平均菌落数， V为涂布液体积，M为稀释倍数)。 【详解】A、用稀释涂布平板计数时，当两个或多个细胞连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，故使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，A正确； B、据图可知，将10g土样加入到无菌水中定容至100mL后，此时土样稀释倍数为10倍，再经3次10倍稀释得到3号试管中的样品，故3号试管中样品的稀释倍数是104倍，B正确； C、5号试管稀释倍数为106，进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109个，C正确； D、要判断选择培养基是否起到选择作用，需设置接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，若牛肉膏蛋白胨培养基培养基上的菌落种类数目多于选择培养基上的菌落类型，则说明起到了选择作用，D错误。 故选D。 14. 下图为啤酒生产的主要流程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 粉碎的目的是有利于麦芽中的淀粉与a-淀粉酶充分接触，缩短糖化过程时间 B. 麦汁煮沸的主要目的是抑制糖化过程后残留酶的活性同时杀死麦汁中微生物 C. 加入酒花的主要目的是提供酵母菌菌种有利于主发酵进行并产生大量酒精 D. 主发酵结束后发酵液还要在低温密闭的环境下储存一段时间才能形成成熟啤酒 【答案】C 【解析】 【分析】啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 【详解】A、“糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质”，故过程破碎有利于淀粉与α−淀粉酶的充分接触，缩短糖化过程所用的时间，A正确； B、麦汁煮沸的主要目的是使淀粉酶失活，终止酶的进一步作用，并对糖浆杀菌，B正确； C、加入酒花的主要目的是赋予啤酒特殊的香味，赋予啤酒爽快的苦味，增加防腐能力，提高啤酒的非生物稳定性，防止煮沸时窜味，C错误； D、主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒，D正确。 故选C。 15. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B. 过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C. 过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D. 可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 【答案】B 【解析】 【分析】1、植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。 2、分析题图：图示为甲、乙两种植物细胞融合并培育新植株的过程，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②③表示人工诱导原生质体融合以及再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化形成愈伤组织；⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。 【详解】A、酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，A正确； B、过程②为原生质体的融合，常用PEG诱导原生质体融合，灭活的仙台病毒可诱导动物细胞融合，不能用于植物，B错误； C、过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，C正确； D、植物丙是植物甲和植物乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。 故选B。 16. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（ ） A. 后代丁的遗传性状由甲、乙、丙的遗传物质共同决定 B. 过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体 C. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D. 过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或者原肠胚后移植 【答案】B 【解析】 【分析】…分析图解：图示过程为体细胞克隆过程，取乙牛体细胞，对处于减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。 【详解】A、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，A错误； B、动物细胞培养中需要提供95%空气（保证细胞的有氧呼吸）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，B正确； C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C错误； D、过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑椹胚后移植，D错误。 故选B。 17. 研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法正确的是（ ） A. 步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞 B. 经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖 C. 步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原一抗体杂交 D. 步骤⑥和植物组织培养均需使用二氧化碳培养箱进行大规模培养 【答案】A 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程： （1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞； （2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体； （3）克隆化培养和抗体检测； （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖； （5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、步骤①向小鼠注射TREM2蛋白，让小鼠发生免疫反应，获得能产生抗体的B淋巴细胞；步骤⑤向小 鼠腹腔注射杂交瘤细胞，目的是获得单克隆抗体，A正确； B、经步骤②诱导后融合的细胞只有杂交瘤细胞才能既能分泌TREM2抗体又可无限增殖，B错误； C、步骤三是特定培养基筛选杂交瘤细胞，步骤4是抗原抗体杂交，C错误； D、动物细胞培养过程中二氧化碳用于调节培养液的pH值，而植物组织培养的过程中不需要二氧化碳培养箱，D错误。 故选A。 18. 下列相关实验操作正确的是（ ） A. 植物组织培养中，对外植体使用70%的酒精消毒30min，再用次氯酸钠消毒30s B. 在DNA的粗提取与鉴定实验中，粗提取的DNA中可能含有蛋白质 C. 将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板 D. 将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落 【答案】B 【解析】 【分析】PCR的原理是DNA复制，DNA的单体是脱氧核糖核苷酸。琼脂糖凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合，利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果。 【详解】A、植物组织培养中，对外植体使用 70%的酒精消毒30s左右，用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠消毒30min，立即用无菌水清洗2-3次，A错误； B、在DNA的粗提取与鉴定实验中，粗提取的DNA中可能含有蛋白质等杂质，后续还需要进一步的提纯等操作，B正确； C、将配制的酵母培养基煮沸并冷却至50℃后，在酒精灯火焰旁倒平板，这样可以防止杂菌污染，C错误； D、将接种环烧红，待冷却后再蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，若烧红后迅速蘸取菌液，高温会杀死菌种，D错误。 故选B。 19. 下表是培养纤维素生产菌的培养基配方，下列说法错误的是（ ） 葡萄糖 酵母膏 碳酸钙 琼脂 蒸馏水 100g 10g 20g 20g 定容至1L A. 该培养基的碳源是葡萄糖和酵母膏 B. 在配制培养基时，一般需要先调pH再灭菌 C. 该培养基从物理性质上看属于固体培养基 D. 该培养基也可用于筛选和培养淀粉分解菌 【答案】D 【解析】 【分析】1、培养基按其配成成分分为天然培养基、半合成培养基和合成培养基，用化学成分不清楚或不恒定的天然有机物配成的培养基称为天然培养基； 2、培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。筛选分离目的微生物时需要使用选择培养基。鉴别某种微生物用鉴别培养基； 【详解】A、由表格培养基得成分可知，该培养基的碳源是葡萄糖和酵母膏，A正确； B、培养基配制时需先调节pH再灭菌，B正确； C、由于加入的有琼脂，该培养基从屋里性质上看属于固体培养基，C正确； D、该培养基含葡萄糖作为碳源，而筛选淀粉分解菌需以淀粉为唯一碳源的选择培养基。葡萄糖的存在会干扰筛选，无法保证只有淀粉分解菌生长。因此该培养基不能用于筛选淀粉分解菌，D错误。 故选D。 20. 柑橘是江西省的重要经济水果，但在贮藏和运输过程中，由真菌引起的采后病害严重危害柑橘产业。青绿霉病是最常见的病害，从柑橘果皮中筛选出拮抗细菌是有效的防治手段。拮抗细菌的筛选过程如下，下列说法正确的是（ ） A. 样本采集时需对果皮表面进行消毒，然后将果皮样本加到清水中洗脱细菌 B. 图示细菌分离使用的技术为稀释涂布平板法，该方法还可用于细菌计数但结果偏大 C. 初步筛选时将细菌和青绿霉真菌共培养，测量真菌生长直径，图中a抑制效果更好 D. 为进一步评估拮抗菌的效果，可以测定其培养滤液对真菌生长和繁殖的抑制效果 【答案】D 【解析】 【分析】稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。 【详解】A、避免杂菌污染，需将果皮样本加到无菌水中获取目的菌，A错误； B、稀释涂布平板法用于微生物的分离计数，统计结果比实际值偏小，这是因为当两个或多个细胞连在一起是，平板上观察到的只是一个菌落，B错误； C、为获得拮抗细菌，需将其与青绿霉真菌共同培养，检测其对真菌的抑制效果，真菌生长直径越小，抑制效果越好，因此b抑制效果好，C错误； D、通过测定拮抗菌培养滤液对真菌生长和繁殖的抑制作用，可以直观了解拮抗菌的抗菌活性，D正确。 故选D。 21. 一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（ ） A. 注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大 B. 单抗制备过程中通常从小鼠腹腔中获得已免疫的B淋巴细胞 C. 利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗 D. p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况 【答案】D 【解析】 【分析】根据题干信息“一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一种抗体”，非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 上有多个抗原决定簇，所以可以刺激机体产生多种抗体。每个抗原决定簇刺激产生的抗体是单抗。 【详解】A、单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A错误； B、单抗制备过程中通常从小鼠脾中获得B淋巴细胞，B错误； C、非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72 上有多种抗原决定簇，一个抗决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72 后，利用该小鼠可制备出多种抗p72的单抗，C错误； D、p72 部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。 故选D。 22. 利用“细胞农业”技术（即通过细胞扩大培养形成产物），成功培育出第一杯“人造咖啡”。已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列说法，不正确的是（ ） A. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”的原理是植物细胞具有全能性 B. 利用“细胞农业”获得植物产品，可减少对森林的大面积砍伐 C. “人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养，以增加其产量 D. “人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物 【答案】A 【解析】 【分析】初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢活动，因此在整个 生命过程中它一直进行着。初生代谢物有糖类、脂质、蛋白质和核酸等。次生代谢不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或器官中，并在一定的环境和时间条件下才进行。 【详解】A、利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”只是获得了大量植物细胞及其产物，没有发育成完整个体，也没有发育成其他各种细胞，不能体现细胞的全能性，A 错误； B、利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”可以不用种植咖啡树便能产生咖啡因，从而减少咖啡的种植面积，可减少对森林的大面积砍伐，B 正确； C、液体悬浮培养可以增加细胞与培养液的接触面积，有利于细胞生长繁殖，从而增加“人造咖啡”的产量，C正确； D、“人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或 器官中，并在一定的环境和时间条件下才能产生，属于植物细胞的次生代谢产物，D正确。 故选A。 23. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（ ） A. 该项替换研究中，目前可行的直接操作对象是蛋白质 B. 该项替换研究中，改造前后水蛭素的空间结构未发生改变 C. 改造的水蛭素基因导入微生物后可利用发酵工程生产水蛭素 D. 该项替换研究的思路与按照中心法则合成蛋白质的思路一致 【答案】C 【解析】 【详解】A、蛋白质工程的直接操作对象是基因而非蛋白质，通过修改基因序列来改变氨基酸组成，而非直接对蛋白质进行操作，A错误； B、根据题意信息可知，将天冬酰胺（极性氨基酸）替换为赖氨酸（带正电荷的碱性氨基酸），两者的理化性质差异显著，可能导致局部电荷分布和空间结构改变，从而影响蛋白质功能，B错误； C、改造后的水蛭素基因导入微生物（如大肠杆菌或酵母菌）后，可通过发酵工程大规模生产水蛭素，C正确； D、中心法则是从DNA到RNA再到蛋白质的正向流程，而蛋白质工程的思路是逆向的：先设计所需蛋白质结构，再反向推导并修改基因序列。因此，两者的研究思路并不一致，D错误。 故选C。 24. 苹果醋是以苹果为原料经甲、乙两个阶段发酵而成的，如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 甲阶段的发酵温度高于乙阶段的发酵温度 B. 根据醋酸菌的呼吸作用类型，乙过程需要在无氧条件下完成 C. 过程①②在酵母菌细胞的细胞质基质进行，③在线粒体进行 D. 醋酸菌可以直接将葡萄糖分解产生乙醛，再将乙醛变为醋酸 【答案】C 【解析】 【分析】分析题图可知，甲为果酒发酵，乙为果醋发酵，①是细胞呼吸第一阶段，②是无氧呼吸第二阶段，③是有氧呼吸第三阶段。 【详解】A、甲为果酒发酵，乙为果醋发酵，甲阶段的发酵温度低于乙阶段的发酵温度，A错误； B、醋酸菌为好氧菌，故根据醋酸菌的呼吸作用类型，乙过程需要在有氧条件下完成，B错误； C、过程①②是无氧呼吸，在酵母菌细胞的细胞质基质进行，③是有氧呼吸第三阶段在线粒体进行，C正确； D、醋酸菌如果在糖源充足的情况下，可以直接将葡萄糖变成醋酸；在缺少糖源的情况下，先将乙醇变成乙醛，再将乙醛变成醋酸，D错误。 故选C。 25. 变酸的果酒表面长的一层膜、泡菜坛内长的一层白膜、腐乳外部的一层白色致密的“皮”，它们分别是由哪种菌的繁殖形成的(　　) A. 醋酸菌、酵母菌、毛霉 B. 酵母菌、毛霉、醋酸菌 C. 醋酸菌、乳酸菌、毛霉 D. 酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 【答案】A 【解析】 【分析】1、醋酸菌是好氧菌，在氧气充足的条件下可以将乙醇转化成醋酸。  2、泡菜制作的原理是乳酸菌发酵，在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，产膜酵母生长繁殖会在泡菜坛液面上形成一层白膜。  3、腐乳表面的一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的，它能形成腐乳的体，使腐乳成形。 【详解】醋酸菌是好氧菌，在氧气充足的条件下，可以将酒精转化成乙醛并进一步转化成醋酸，因此密封不严的酒会变酸，且表面形成醋酸菌的菌膜；在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，产膜酵母的生长繁殖会在泡菜坛液面形成一层白膜；腐乳外部的一层白色致密的“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的毛霉的匍匐菌丝。综上所述，A正确，BCD错误。 故选A。 【点睛】本题考查传统发酵技术的应用过程中一些常见现象的解释，明确不同微生物代谢过程中的现象，正确的解释传统发酵技术中出现的现象是本题考查的重点。 二、多选题（每题3分，多选不得分，漏选得1分，共15分） 26. 下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列相关叙述，正确的是（　　） A. 切割质粒的限制酶均特异性地识别6个或4个核苷酸序列 B. ④→⑤需要先避光培养一段时间后，再给予合适的光照条件 C. 获得基因表达载体的过程中，至少需要限制酶断开6个磷酸二酯键、DNA连接酶连接4个磷酸二酯键 D. ⑤表现出抗虫性状说明植株发生了定向的基因重组 【答案】BCD 【解析】 【分析】1、切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，简称限制酶。这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。迄今分离的限制酶有数千种，它们能够识别双链 DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成。例如， EcoRI、SmaI限制酶的识别序列均为6个核苷酸，也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。 2、植物组织培养包括脱分化和再分化两个重要的过程，决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。脱分化过程要避光，否则会形成维管组织，不形成愈伤组织，而再分化过程需要光照。 【详解】A、限制性内切核酸酶均能特异性地识别核苷酸序列，但识别的核苷酸序列不一定是6个或4个，大多数限制性核酸内切酶识别6个核苷酸序列，少数限制酶识别列由4或8个核苷酸组成，A错误； B、④→⑤为植物组织培养过程，需要先避光培养一段时间，利于形成愈伤组织，之后再给予合适的光照条件，使其发育为正常植株，B正确； C、若只用同一种限制酶切割质粒和目的基因，则获得目的基因片段需要切断目的基因两侧，共4个磷酸二酯键，切开质粒需要断开环状质粒的一处，共2个磷酸二酯键，即至少需要断开6个磷酸二酯键，而在重组时，连接目的基因和质粒需要用到DNA连接酶，要连接两个切口，共4个磷酸二酯键，C正确； D、⑤只要表现出抗虫性状就表明抗虫基因已整合到植物细胞染色体上，且成功表达，即植株发生了定向的基因重组，D正确。 故选BCD。 27. 某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata 3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata 3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（ ） A. 据甲图分析，进行PCR扩增时，用引物1的模板为M链 B. 2号条带的小鼠是Gata 3-GFP基因纯合子 C. Gata 3-GFP基因转录是以N链为模板 D. 选用引物1和引物3进行PCR，能更好的区分杂合子和纯合子 【答案】BC 【解析】 【分析】PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。 【详解】A、PCR进行过程中，DNA子链是从5'→3'进行的，所以引物1的模板应为N链，A错误； B、整合GFP基因后，核酸片段变长，2号个体只有大片段，所以是Gata3-GFP基因纯合子，4号个体只有小片段，是野生型，B正确； C、据图可知，因启动子在左侧，转录从左向右，转录时是沿着模板链的3'-5'，据此推测Gata 3-GFP基因转录是以N链为模板，C正确； D、若用引物1和引物3进行PCR，杂合子和Gata3-GFP基因纯合子都能扩增出相应的片段则不能区分杂合子和纯合子，D错误。 故选BC。 28. 下图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人-鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失，通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4种酶活性，只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有（ ） A. 加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合 B. 细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人-人、人-鼠、鼠-鼠融合细胞 C. 芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上 D. 胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上 【答案】ACD 【解析】 【分析】分析题干信息：Ⅰ保留X、11号染色体，Ⅱ保留2、11号染色体，具有芳烃羟化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17号染色体具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性，所以支配芳烃羟化酶合成的基因位于2号染色体上，支配胸苷激酶合成的基因位于17号染色体上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X号染色体上；支配乳酸脱氢酶合成的基因位于11号染色体上。 【详解】A、动物细胞融合过程中，可以利用灭活的仙台病毒或聚乙二醇作诱导剂促进细胞融合，A正确； B、细胞Ⅲ中保留了人的X、11、17号染色体，故不会是鼠-鼠融合细胞，B错误； CD、根据分析可知，芳烃羟化酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色上， 胸苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上，CD正确。 故选ACD。 29. 某实验室期望用夹层培养法筛选到符合预期的酵母菌，具体操作如下：先在培养皿底部倒一薄层已灭菌的基本培养基；待冷凝后，再添加一层内含酵母菌液（经诱变剂处理）的基本培养基；冷凝后再加一薄层已灭菌的基本培养基。培养一段时间后，对出现的菌落做好标记；然后再加一层完全培养基，培养一段时间后会长出形态不一的菌落。已知微生物可透过薄层培养基形成菌落，且所有培养基均含有抗生素。下列说法正确的的是（ ） A. 该实验室预期想要得到是具有营养缺陷的酵母菌 B. 培养基中添加抗生素主要是为了抑制细菌的生长，对酵母菌影响较小 C. 最终应选取培养基上较大的菌落作为目标菌种进行后续实验 D. 在用诱变剂处理从外界富集而来的酵母菌前需要对酵母菌进行纯培养 【答案】ABD 【解析】 【分析】1、选择培养是利用培养基或培养条件针对性地促进或抑制某类微生物的生长，从而使目标微生物数目增加的一种培养方法； 2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、 在夹层培养法中，中间层含诱变处理后的酵母菌液，基本培养基不含特定营养成分，若有菌落能在基本培养基上生长，后在完全培养基上长出形态不同的菌落，说明这些菌落可能是具有营养缺陷的酵母菌，A正确； B、 酵母菌是真菌，细菌是原核生物，抗生素对细菌抑制作用强，对酵母菌影响较小，在培养基中添加抗生素可抑制细菌生长，B正确； C、 营养缺陷型酵母菌在基本培养基上难以生长，在完全培养基上才可以繁殖形成菌落，最终应选取培养基上较小的菌落作为目标菌种进行后续实验，C错误； D、 在用诱变剂处理酵母菌前需要对酵母菌进行纯培养，这样才能保证处理后的结果是针对单一酵母菌种群的，D正确。 故选ABD。 30. 下图表示用荧光PCR法检测目的DNA的过程。在PCR反应体系中，加入足量与目的DNA部分序列互补的探针，探针包含一段脱氧核苷酸单链和发光基团，在完整的探针中发光基团不发光。在PCR过程中，当子链延伸到探针处时，TaqDNA聚合酶催化探针水解并释放发光基团，此时发光基团能发光。下列叙述正确的是（ ） A. PCR的每一次循环包含变性、复性和延伸三步 B. 探针和引物在目的DNA单链上的结合位点不同 C. TaqDNA聚合酶沿着子链5′→3′的方向催化氢键的形成 D. 经历相同的循环次数，起始目的DNA量越多荧光强度越强 【答案】ABD 【解析】 【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。 【详解】A、PCR技术的基本过程包括变性、复性、延伸，每一次循环也都包含这三个步骤，A正确； B、根据题意可知在PCR过程中，当子链延伸到探针处时探针被TaqDNA聚合酶催化水解，说明探针和引物在目的DNA单链上的结合位点不同，B正确； C、TaqDNA聚合酶沿着子链5′→3′的方向催化磷酸二酯键的形成，C错误； D、起始目的DNA量越多，探针与目标DNA结合就越多，经历相同的循环次数后，形成的游离的发光基团就越多，荧光强度越强，D正确。 故选ABD。 三、解答题 31. 我国古代劳动人民用不同原料酿酒的历史已有五千多年，并总结了制作果酒、果醋、泡菜等发酵食品的丰富经验和方法。图1是制作苹果酒、苹果醋的简要工艺流程。 请回答问题： （1）制作苹果醋的菌种呼吸方式是________，与制作苹果酒的菌种相比，制作苹果醋的菌种在结构上的主要特点是________。 （2）苹果酒制作时，发酵瓶中不能装满苹果汁，要留约1/3的空间，目的是________（答出1点即可）。 （3）在苹果酒和苹果醋的制作过程中，使用如图2所示的发酵装置。充气口在制作苹果酒时应________（填“打开”或“关闭”）；排气口要通过一个长而弯曲的胶管d与瓶身相连，这样做的目的是________。检验苹果酒的制作是否成功，除了嗅闻发酵液是否有酒味外，还可用________溶液进行鉴定，若显示________色，则说明产生了酒精。 （4）若继续用图2所示装置在制酒的基础上制作苹果醋，还需要改变的条件是①________；②________。 （5）市场上购买的真空包装酸菜，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，同学怀疑是杂菌污染导致的，同学B怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并说明理由________。 （6）泡菜制作时要用适宜浓度的盐水没过新鲜蔬菜。所用盐水需煮沸，其目的是________（答出1点即可）。为了缩短制作时间，通常会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，目的是________。 【答案】（1） ①. 有氧呼吸 ②. 没有核膜包被的细胞核 （2）让酵母菌有氧呼吸大量繁殖（或防止发酵过程中产生的CO2使发酵液溢出） （3） ①. 关闭 ②. 防止空气中杂菌污染 ③. (酸性的)重铬酸钾 ④. 灰绿 （4） ①. 打开气阀a，不断通入无菌空气(氧气) ②. 将温度调整为30~35℃ （5）支持A的观点，乳酸菌代谢过程中不产生气体 （6） ①. 除氧（或杀菌） ②. 增加乳酸菌数量(相当于接种乳酸菌) 【解析】 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧条件下，将葡萄糖氧化成二氧化碳和水，在无氧条件下将葡萄糖分解成酒精和二氧化碳；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成乙酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为乙酸。 【小问1详解】 果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。制作苹果醋的菌种呼吸方式是有氧呼吸，与制作苹果酒的菌种相比，制作苹果醋的醋酸菌菌种在结构上的主要特点是没有核膜包被的细胞核。 【小问2详解】 苹果酒制作时，为了让酵母菌有氧呼吸大量繁殖，或防止发酵过程中产生的CO2使发酵液溢出，发酵瓶中不能装满苹果汁，要留约的1/3空间。 【小问3详解】 在苹果酒和苹果醋的制作过程中，发酵装置的充气口在制作苹果酒时应关闭，而需要在排气口要连接一个长而弯曲的胶管d与瓶身相连，目的是防止空气中杂菌污染。 检验苹果酒的制作是否成功，除了嗅闻发酵液是否有酒味外，还可用酸性条件下的重铬酸钾溶液进行鉴定，若表现灰绿色说明有酒精产生。 【小问4详解】 参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作过程中充气口a应打开，不断通入无菌空气(氧气)，将温度调整为30~35℃。 【小问5详解】 乳酸菌无氧呼吸没有气体产生，故支持A的观点，乳酸菌代谢过程中不产生气体，不会胀袋。 【小问6详解】 制作泡菜时所用盐水需煮沸，其目的是消灭杂菌，去除氧气，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液是为了增加乳酸菌含量。 32. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图。请回答下列问题： 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）过程①中需将植物组织经_____后接种于MS培养基上诱导_____过程，产生愈伤组织。 （2）过程②中将愈伤组织加入_____酶去壁，对红豆杉和柴胡原生质体进行的A、B处理分别为_____、_____。 （3）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择_____（填“有”或“无”）荧光的原生质体用于融合。 （4）过程③可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有_____法等，融合完成的标志是_____，与该过程完成有关的细胞器是_____。 （5）过程④中，再分化阶段所用培养基需含有植物激素X和Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况不同。当植物激素X多Y少时，未分化细胞群将分化出芽，则植物激素X的名称是_____。 （6）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下： 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA分子标记鉴定 甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 由表可知，后代植株中_____类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源于亲本_____的染色体，另一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进主要来源亲本的基因组。 【答案】（1） ①. 消毒 ②. 脱分化 （2） ①. 纤维素酶、果胶酶 ②. X射线 ③. 碘乙酰胺 （3）有 （4） ①. 高Ca2+-高pH融合 ②. 植物细胞再生出细胞壁 ③. 高尔基体 （5）细胞分裂素 （6） ①. 乙 ②. 柴胡 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或是化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。 【小问1详解】 植物组织培养之前需要对外植体进行消毒，之后诱导脱分化形成愈伤组织。 【小问2详解】 原生质体为去除了植物细胞壁后的结构，要获得原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞。要培育能产生紫杉醇的柴胡，红豆杉是供体需要X射线照射，柴胡是受体需要碘乙酰胺处理。 【小问3详解】 根据题干信息可知，荧光的强度与原生质体的活力呈正相关，因此应选择有荧光的原生质体用于融合。 【小问4详解】 过程③可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有高Ca2+-高pH融合法等，融合完成的标志是植物细胞再生出细胞壁，与该过程完成有关的细胞器是高尔基体。 【小问5详解】 在植物组织培养中，生长素/细胞分裂素比例高时有利于根的分化，比例低时有利于芽的分化，比例适中促进愈伤组织的形成，因此植物激素X的名称是细胞分裂素。 【小问6详解】 根据表格信息可知，植株后代乙无红豆杉DNA片段，说明其不是杂种植株。甲、丙类型植株与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段，说明甲、丙植株属于杂种植株，它们的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成。 33. 同源重组技术结合tetr-sacB双重选择系统可对基因进行敲除与回补，研究基因的功能。下图是科研人员利用该方法对大肠杆菌tacZ基因进行敲除与回补的相关过程，其中tetr是四环素抗性基因，sacB基因（2071bp）是蔗糖致死基因，LacZ基因表达产物能将无色化合物X-gal水解成蓝色化合物。请回答下列问题： （1）过程①PCR除需要加入Taq酶、dNTP、缓冲液、Mg2+外，还需加入__________________，所加dNTP的作用有_________________________________________________________。 （2）为保证sacB基因和质粒2定向连接，设计引物P1、P2时，需在引物______端添加限制酶________________（填种类）的识别序列；过程②需要限制酶和____________酶。 （3）过程③中，需先用Ca2+处理大肠杆菌，使其成为__________细胞。筛选导入质粒3的大肠杆菌时需在培养基中添加____________。 （4）下图是对质粒3转化菌落进行PCR验证时的产物电泳结果，泳道4、5、7对应的菌株可能转化成功，判断的理由_______________________，过程⑤PCR中设计引物P3、P4时，需在引物5′端分别添加_________________基因两端的同源序列。 （5）过程⑦中，在含有四环素和___________的培养基中出现了白色菌落，即为筛选出的敲除LacZ基因菌株。过程⑧通过同源重组技术结合tetr-sacB双重选择系统可对LacZ基因进行回补，筛选LacZ基因回补菌株时应在培养基中添加_____________________。 【答案】（1） ①. 引物（或P1、P2）和模板（或质粒1） ②. 既作为原料又提供能量 （2） ①. 5’ ②. BamHⅠ、EcoRⅠ ③. DNA连接 （3） ①. 感受态 ②. 四环素 （4） ①. 4、5、7的电泳结果接近（或大于）2071bp ②. LacZ （5） ①. X-gal ②. 蔗糖和X-gal 【解析】 【分析】PCR技术：1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2）原理：DNA复制。3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物。4）条件：Mg2+、模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。5）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【小问1详解】 PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。故在PCR反应体系中，需加入引物（P1、P2）、模板、Taq酶、4种脱氧核苷酸（dNTP）、缓冲液、Mg2+等，引物能使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，dNTP的作用除了能为反应提供原料，还能提供能量。 【小问2详解】 HindⅢ会破坏tetr基因，XmaⅠ会破坏复制原点，为保证sacB基因和质粒2定向连接，应用限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ切割目的基因和质粒，引物是根据目的基因两端的DNA序列设计的，因此设计引物P1、P2时，需在引物5'端添加限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ的识别序列，过程②为基因表达载体的构建，基因表达载体的构建需要限制酶和DNA连接酶。 【小问3详解】 过程③为将目的基因导入受体细胞，导入目的基因时，首先用Ca2+处理大肠杆菌使其成为感受态细胞。重组质粒的标记基因为tetr（四环素抗性基因），筛选导入质粒3的大肠杆菌时需在培养基中添加四环素。 【小问4详解】 sacB基因是目的基因，sacB基因中含有2071bp，4、5、7的电泳结果接近（或大于）2071bp，说明4、5、7对应的菌株中含有目的基因，说明泳道4、5、7对应的菌株可能转化成功。引物是根据目的基因两端的DNA序列设计的，目的基因（tetr-sacB）两端均为LacZ基因，因此需在引物5′端分别添加LacZ基因两端的同源序列。 【小问5详解】 LacZ基因表达产物能将无色化合物X-gal水解成蓝色化合物，过程⑦为筛选LacZ基因敲除菌株，因此，若LacZ基因被敲除，则在含有四环素和X-gal培养基中出现白色菌落。sacB基因是蔗糖致死基因，则添加蔗糖起到选择作用，LacZ基因表达产物能将无色化合物X-gal水解成蓝色化合物，则添加X-gal起到筛选作用，所以在培养基中添加蔗糖和X-gal可筛选LacZ基因回补菌株。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $