精品解析：山东省青岛市第六十七中学2024-2025学年高二下学期7月期末生物试题

青岛六十七中2024—2025学年度第二学期第二学段模块检测 高二生物 2025.07 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 微体是由单层膜构成的细胞器，包括过氧化物酶体和乙醛酸循环体。过氧化物酶体含有丰富的酶类，主要是氧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶。乙醛酸循环体是一种植物细胞器，在发芽的种子不能进行光合作用前存在，将脂肪转化为糖来提供能量。下列说法错误的是（　　） A. 过氧化物酶体和叶绿体两种细胞器中都能产生氧气 B. 油料作物种子萌发时，乙醛酸循环体数量明显增多 C. 脂肪转化为糖类的过程中，引起干重增加的元素主要是碳 D. 肝脏是重要的解毒器官，推测肝脏细胞中富含过氧化物酶体 2. 钠钾氯共转运蛋白（NKCC）是帮助钠离子、钾离子、氯离子进行运输的一类膜蛋白，其合成过程与分泌蛋白类似。在肾脏的尿液浓缩过程中NKCC利用细胞外相对较高的Na+浓度作为驱动力，逆浓度梯度转运K+和Cl-进入细胞。下图是肾小管上皮细胞对离子吸收和转运的示意图。下列说法错误的是（ ） A. 钠-钾泵发挥作用时发生磷酸化导致其空间结构改变 B. K+主动运输进入上皮细胞可以借助不同的载体蛋白 C. NKCC的合成需要线粒体供能，不需要高尔基体参与 D. Na+进出上皮细胞的跨膜运输方式不同 3. 用替代的实验材料或者试剂开展下列实验，不能达成实验目的的是（　　） 选项 实验内容 替代措施 A 用高倍显微镜观察叶绿体 用“菠菜叶”替代“藓类叶片” B DNA的粗提取与鉴定 用“猪成熟红细胞”替代“猪肝细胞” C 观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂 用“醋酸洋红液”替代“甲紫溶液” D 比较过氧化氢在不同条件下的分解 用“过氧化氢酶溶液”替代“肝脏研磨液” A. A B. B C. C D. D 4. 植物细胞内10%~25%的葡萄糖经过一系列反应，产生NADPH、CO2和多种中间产物，该过程称为磷酸戊糖途径。该途径的中间产物可进一步生成氨基酸和核苷酸等。下列说法错误的是（ ） A. 磷酸戊糖途径产生的NADPH与有氧呼吸产生的还原型辅酶不同 B. 与有氧呼吸相比，葡萄糖经磷酸戊糖途径产生的能量少 C. 正常生理条件下，利用14C标记的葡萄糖可追踪磷酸戊糖途径中各产物的生成 D. 受伤组织修复过程中所需要的原料可由该途径的中间产物转化生成 5. 单一使用干扰素-γ治疗肿瘤效果有限。降低线粒体蛋白V合成，不影响癌细胞凋亡，但同时加入干扰素-γ能破坏线粒体膜结构，促进癌细胞凋亡。下列叙述错误的是（　　） A. 癌细胞凋亡是由基因决定的 B. 蛋白V可能抑制干扰素-γ诱发的癌细胞凋亡 C. 线粒体膜结构破坏后，其DNA可能会释放 D. 抑制蛋白V合成会减弱肿瘤治疗的效果 6. 最早的双脱氧测序法是PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸（ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧腺苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 上述PCR反应体系中只加入一种引物 B. 电泳时产物的片段越小，迁移速率越慢 C. 5'-CTACCCGTGAT-3'为对照个体的一段序列 D. 患者该段序列中某位点的碱基C突变为G 7. 下图表示人体内干细胞中一条核苷酸链片段M，在酶X的作用下进行的某生理过程的部分示意图（①②③表示核苷酸链），下列说法正确的是（　　） A. 酶X为RNA聚合酶，该生理过程表示转录 B. 酶Ⅹ主要功能是催化磷酸二酯键的水解 C. 酶Ⅹ为解旋酶，①②③的合成需要DNA聚合酶的参与 D. 片段M发生碱基的替换一定导致合成的蛋白质结构改变 8. 机体长期感染某病毒可导致细胞癌变。交感神经释放的神经递质作用于癌细胞表面β受体，上调癌细胞某蛋白的表达，破坏癌细胞的连接，从而促进癌细胞转移。下列说法错误的是（ ） A. 机体清除癌细胞的过程属于免疫监视 B. 使用β受体阻断剂可增加癌细胞转移率 C. 可通过接种该病毒疫苗降低患相关癌症的风险 D. 辅助性T细胞可能参与机体清除癌细胞的过程 9. 干细胞培养成功是动物细胞培养领域的重大成就，其应用前景吸引着众多科学家投入到相关研究中。下列相关说法错误的是（　　） A. 胚胎干细胞可分化为成年动物体内任何一种类型的细胞 B. 成体干细胞具有组织特异性，其分化潜能是有一定限度的 C. iPS细胞可由成纤维细胞经相关因子诱导转化而来，类似于再分化 D. 理论上，移植来源于患者自身体细胞的iPS细胞可以避免免疫排斥反应 10. 某种二倍体植物的P1和P2植株杂交得F1，F1自交得F2。对个体的DNA进行PCR检测，产物的电泳结果如图所示，其中①～⑧为部分F2个体，上部2条带是一对等位基因的扩增产物，下部2条带是另一对等位基因的扩增产物，这2对等位基因位于非同源染色体上。下列叙述错误的是（ ） A. ①②个体均为杂合体，F2中③所占的比例大于⑤ B. 还有一种F2个体的PCR产物电泳结果有3条带 C. ③和⑦杂交子代PCR产物电泳结果与②⑧电泳结果相同 D. ①自交子代的PCR产物电泳结果与④电泳结果相同的占 11. 制备荧光标记的DNA探针时，需要模板、引物、DNA聚合酶等。在只含大肠杆菌DNA聚合酶、扩增缓冲液、H2O和4种脱氧核苷酸（dCTP、dTTP、dGTP和碱基被荧光标记的dATP）的反应管①~④中，分别加入如表所示的适量单链DNA。已知形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区。能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有（　　） 反应管 加入的单链DNA ① 5'-GCCGATCTTTATA-3' 3'-GACCGGCTAGAAA-5' ② 5'-AGAGCCAATTGGC-3' ③ 5'-ATTTCCCGATCCG-3' 3'-AGGGCTAGGCATA-5' ④ 5'-TTCACTGGCCAGT-3' A. ①② B. ②③ C. ①④ D. ③④ 12. DNA碱基发生甲基化修饰会抑制基因的表达。研究发现，豆科植物体内的某基因S的表达被抑制后，会导致豆科植物的固氮能力下降（ ） A. 可通过检测S基因的碱基序列确定该基因是否发生甲基化修饰 B. 若S基因发生甲基化修饰，该过程会发生磷酸二酯键的生成与断裂 C. S基因的表达被抑制后，可能会导致豆科植物的抗旱能力下降 D. S基因表达被抑制，说明RNA聚合酶与该基因的启动子结合受阻 13. 植物光合作用的光反应依赖类囊体膜上PSI和PSII光复合体，PSII光复合体含有光合色素，能吸收光能，并分解水。研究发现，PSII光复合体上的蛋白质LHCII，通过与PSII结合或分离来增强或减弱对光能的捕获（如图所示）。LHCⅡ与PSII的分离依赖LHC蛋白激酶的催化。下列叙述错误的是（ ） A. 叶肉细胞内LHC蛋白激酶活性下降，PSII光复合体对光能的捕获降低 B. Mg2+含量减少会导致PSII光复合体对光能的捕获减弱 C. 弱光下LHCⅡ与PSII结合，利于对光能的捕获 D. PSII光复合体分解水可以产生H+、电子和O2 14. 仙人掌的茎由内部薄壁细胞和进行光合作用的外层细胞等组成，内部薄壁细胞的细胞壁伸缩性更大。水分充足时，内部薄壁细胞和外层细胞的渗透压保持相等；干旱环境下，内部薄壁细胞中单糖合成多糖的速率比外层细胞快。下列说法错误的是（　　） A. 细胞失水过程中，细胞液浓度增大 B. 干旱环境下，外层细胞的细胞液浓度比内部薄壁细胞的低 C. 失水比例相同的情况下，外层细胞更易发生质壁分离 D. 干旱环境下内部薄壁细胞合成多糖速率更快，有利于外层细胞的光合作用 15. 如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ） A. 双抗可同时与2种抗原结合 B. 利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞 C. 筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原 D. 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 英国植物学家罗伯特·希尔1937年发现，在离体叶绿体的悬浮液中（无CO2）加入氧化剂，在光照条件下可以释放O2，现在把这种现象称为希尔反应。下列有关说法正确的是（　　） A. 希尔反应发生的场所是叶绿体基质 B. 如果不加入氧化剂，O2不会持续产生 C. 希尔反应证明了产生的O2全部来源于水 D. 希尔反应证明氧气的产生和糖类的合成是相对独立的过程 17. 神经细胞的离子跨膜运输除受膜内外离子浓度差影响外，还受膜内外电位差的影响。已知神经细胞膜外的Cl-浓度比膜内高。下列说法正确的是（ ） A. 静息电位状态下，膜内外电位差一定阻止K+的外流 B. 突触后膜的Cl-通道开放后，膜内外电位差一定增大 C. 动作电位产生过程中，膜内外电位差始终促进Na+的内流 D. 静息电位→动作电位→静息电位过程中，不会出现膜内外电位差为0的情况 18. 某雌雄异株多年生高等植物，其花色受两对等位基因控制，相关色素合成机制如图所示。已知B、b基因的碱基数相同而B基因控制合成的蛋白质中氨基酸数目较多。为研究其遗传机制，某同学选取一蓝花雌株与一红花雄株作为亲本进行杂交，F1表现为紫花雌株：蓝花雄株=1：1。已知两对基因不位于Y染色体，不考虑其他变异。下列说法错误的是（ ） A. 若要鉴定该植物幼苗的性别，可采用分生区细胞装片分析其染色体组数 B. B控制合成的蛋白质中氨基酸数目较多是因为基因突变导致终止子延后 C. A位于常染色体上控制蓝色色素合成，B位于X染色体上控制红色色素合成 D. 将F1中紫花雌株与蓝花雄株杂交，杂交子代不一定会出现紫色雄性个体 19. 种群延续所需要的最小种群密度为临界密度，只有大于临界密度，种群数量才能增加，最后会达到并维持在一个相对稳定的数量，即环境容纳量（K值）。不同环境条件下，同种动物种群的K值不同。图中曲线上的点表示在不同环境条件下某动物种群的K值和达到K值时的种群密度，其中m为该动物种群的临界密度，K0以下的环境表示该动物的灭绝环境。a、b、c、d四个点表示不同环境条件下该动物的4个种群的K值及当前的种群密度，且4个种群所在区域面积相等，各种群所处环境稳定。不考虑迁入迁出，下列说法正确的是（ ） A. 可通过一次投放适量该动物对a点种群进行有效保护 B. b点种群发展到稳定期间，出生率大于死亡率 C. c点种群发展到稳定期间，种内竞争逐渐加剧 D. 通过提高K值可使d点种群得以延续 20. 科研人员利用诱变育种选育高产β-胡萝卜素三孢布拉霉负菌。野生菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。图甲为选育菌种及获得β-胡萝卜素的流程。下列叙述正确的是（　　） A. 要得到图乙所示的菌落，可用平板划线法进行②操作，然后培养 B. 经过程①紫外线照射的三孢布拉霉负菌有的不能在含β-紫罗酮培养基上生长 C. 进行③操作时，应选择较小的橙红色菌落中的菌株继续接种培养 D. 为筛选纯化β-胡萝卜素产量高的菌种，⑤中采取重复③④过程 三、非选择题：本题共5小题．共55分。 21. 为探究水通道蛋白NtPIP对作物耐涝性的影响，科研小组测定了油菜的野生型（WT）及NtPIP基因过量表达株（OE）在正常供氧（AT）和低氧（HT，模拟涝渍）条件下的根细胞呼吸速率和氧浓度，结果见图1。 回答下列问题。 （1）据图1分析，低氧胁迫下，NtPIP基因过量表达会使根细胞有氧呼吸________，原因是________。有氧呼吸第二阶段丙酮酸中的化学能大部分被转化为________中储存的能量。 （2）科学家早期在探索有氧呼吸第二阶段代谢路径时发现，在添加丙二酸的组织悬浮液中加入分子A、B或C时，E增多并累积（图2a）；当加入F、G或H时，E也同样累积（图2b）。根据此结果，针对有氧呼吸第二阶段代谢路径提出假设：________。 （3）科研小组还发现，低氧条件下，NtPIP基因过量表达株的叶片净光合速率高于野生型。结合根细胞呼吸速率的变化分析，其原因是________。 （4）光合作用光反应实质是光能引起的氧化还原反应，最终接受电子的物质（最终电子受体）是________，而最终提供电子的物质（最终电子供体）是________。 22. 水稻籽粒外壳（颖壳）表型有黄色、黑色、紫色和棕红色等，种植颖壳表型不同的彩色稻，既可满足国家粮食安全需要，又可形成优美画卷，用于旅游开发。回答下列问题。 （1）研究发现，水稻颖壳的紫色、棕红色、黄绿色和浅绿色的形成与类黄酮化合物的代谢有关。假设显性基因C、R、A控制颖壳色素的形成，且独立遗传，相应的隐性等位基因不具有该效应。色素合成代谢途径如图。 现有基因型为CcRrAa与CcRraa的两品种水稻杂交，F1中颖壳表型为紫色、棕红色、黄绿色和浅绿色的比例为________。F1中，颖壳颜色在后代持续保持不变的个体所占比例为________。 （2）野生稻的颖壳为黑色，经过突变和驯化，目前栽培稻的颖壳多为黄色。黑色和黄色颖壳由一对等位基因控制，且黑色（Bh）对黄色（bh）为显性。科研小组对多个品种进行分析，发现有两个黄色颖壳突变类型（栽培稻1、2），推测两者的突变可能是来自同一个基因。设计一个杂交实验，以验证该推测，并说明判断理由________。 （3）科研小组采用PCR技术，扩增出野生稻和栽培稻Bh/bh基因的片段，电泳结果见图1。 说明：野生型Bh基因的部分序列为：5'-GATTCGCTCACA-3'， 该链为非模板链，编码的肽链为天冬氨酸-丝氨酸-亮氨酸-苏氨酸。UAA、UAG为终止密码子。 与野生稻相比，栽培稻2是由于Bh基因发生了________，颖壳表现为黄色。栽培稻1和野生稻的PCR扩增产物大小一致，科研小组进行了DNA测序，结果见图2（图中仅显示两者含有差异的部分序列，其余序列一致；A、T、C、C表示4种碱基）。比较两者DNA碱基序列，发现栽培稻1是由于Bh基因中的DNA序列发生________，导致________，颖壳表现为黄色。 23. 过度紧张、焦虑等刺激不仅会导致毛囊细胞数量减少引起脱发，也会导致黑色素细胞减少引起头发变白。利用黑色小鼠进行研究得出的相关调节机制如图所示。 （1）下丘脑通过垂体调节肾上腺分泌G的体液调节方式为_____。 （2）研究发现，NE主要通过过程②影响MesC，过程①作用很小。两过程中，NE作用于Mesc效果不同的原因可能是_____（答出3种原因即可） （3）已知长期束缚会引起小鼠过度紧张、焦虑。请设计实验验证上述调节机制中长期束缚及肾上腺对黑毛小鼠体毛的影响。 实验思路：取生理状况相同的黑色小鼠若干只，随机平均分为A、B、C、D四组，A组不作处理，B组切除肾上腺，C组_____，D组_____，其他条件相同且适宜，饲养一段时间后，观察并记录_____。 实验现象：A组小鼠的体毛无变化，B组小鼠______，C组小鼠______，D组小鼠_____。 24. 研究群落时，不仅要调查群落的物种丰富度，还要比较不同群落的物种组成。β多样性是指某特定时间点，沿某一环境因素梯度，不同群落间物种组成的变化。它可用群落a和群落b的独有物种数之和与群落a、b各自的物种数之和的比值表示。 （1）群落甲中冷杉的数量很多，据此______（填“能”或“不能”）判断冷杉在该群落中是否占据优势。群落甲中冷杉在不同地段的种群密度不同，这体现了群落空间结构中的______。从协同进化的角度分析，冷杉在群落甲中能占据相对稳定生态位的原因是______。 （2）群落甲、乙的物种丰富度分别为70和80，两群落之间的β多样性为0.4，则两群落的共有物种数为______（填数字）。 （3）根据β多样性可以科学合理规划自然保护区以维系物种多样性。群落丙、丁的物种丰富度分别为56和98，若两群落之间的β多样性高，则应该在群落______（填“丙”“丁”或“丙和丁”）建立自然保护区，理由是______。 25. 种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。 （1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为______。选用图甲中的Smal对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择_______对Ti质粒进行完全酶切，将其中产生的黏性末端补平，补平时使用的酶是______。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶_______进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为_______bp，则一定为反向重组质粒。 人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。 （2）为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在F1～F7末端添加的序列所对应的限制酶是______，在R末端添加的序列所对应的限制酶是______。本实验中，从产物扩增到载体构建完成的整个过程需要的酶分别是_______。 （3）将构建的载体导入除去BCL11A基因的受体细胞，成功转化后，含F1～F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光。含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光的原因是_______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 青岛六十七中2024—2025学年度第二学期第二学段模块检测 高二生物 2025.07 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1. 微体是由单层膜构成的细胞器，包括过氧化物酶体和乙醛酸循环体。过氧化物酶体含有丰富的酶类，主要是氧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶。乙醛酸循环体是一种植物细胞器，在发芽的种子不能进行光合作用前存在，将脂肪转化为糖来提供能量。下列说法错误的是（　　） A. 过氧化物酶体和叶绿体两种细胞器中都能产生氧气 B. 油料作物种子萌发时，乙醛酸循环体数量明显增多 C. 脂肪转化为糖类的过程中，引起干重增加的元素主要是碳 D. 肝脏是重要的解毒器官，推测肝脏细胞中富含过氧化物酶体 【答案】C 【解析】 【分析】脂肪中氧的含量明显低于糖类，因此脂肪转化为糖类，分子中氧元素含量会大大增大。 【详解】A、过氧化物酶体中的过氧化物酶在遇到过氧化氢时可催化其产生氧气，叶绿体光合作用能生成氧气，故二者都能产生氧气，A正确； B、据题干信息可知，乙醛酸循环体的功能是使细胞中的脂肪转化为糖类来供能，故油料种子萌发时细胞中的乙醛酸循环体比较活跃，数量增多，从而将脂肪转化为糖类，供种子萌发使用，B正确； C、脂肪中氧的含量明显低于糖类，故脂肪转化为糖类，分子中氧元素含量会大大增大，C错误； D、过氧化物酶体含有丰富的酶类，主要是氧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶等，能催化分解过氧化氢等有毒害的物质，而，肝脏是重要的解毒器官，故可推测肝脏细胞中富含过氧化物酶体，D正确。 故选C。 2. 钠钾氯共转运蛋白（NKCC）是帮助钠离子、钾离子、氯离子进行运输的一类膜蛋白，其合成过程与分泌蛋白类似。在肾脏的尿液浓缩过程中NKCC利用细胞外相对较高的Na+浓度作为驱动力，逆浓度梯度转运K+和Cl-进入细胞。下图是肾小管上皮细胞对离子吸收和转运的示意图。下列说法错误的是（ ） A. 钠-钾泵发挥作用时发生磷酸化导致其空间结构改变 B. K+主动运输进入上皮细胞可以借助不同的载体蛋白 C. NKCC的合成需要线粒体供能，不需要高尔基体参与 D. Na+进出上皮细胞的跨膜运输方式不同 【答案】C 【解析】 【详解】A、钠 - 钾泵发挥作用时，会发生磷酸化，这一过程会导致其空间结构改变，从而实现离子的运输，A正确； B、从图中可以看出，K+主动运输进入上皮细胞可以借助Na+-K+-2Cl-同向转运体和钠 - 钾泵这两种不同的载体蛋白，B正确； C、NKCC的合成过程与分泌蛋白类似，而分泌蛋白的合成需要线粒体供能（提供能量），也需要高尔基体参与（对蛋白质进行加工、分类和包装），因此NKCC 的合成需要线粒体供能，需要高尔基体参与，C错误； D、Na+进入上皮细胞是借助Na+-K+-2Cl-同向转运体，利用细胞外相对较高的Na+浓度作为驱动力，属于协助扩散；Na+出上皮细胞是通过钠 - 钾泵，需要消耗 ATP，属于主动运输，因此Na+进出上皮细胞的跨膜运输方式不同，D正确。 故选C。 3. 用替代的实验材料或者试剂开展下列实验，不能达成实验目的的是（　　） 选项 实验内容 替代措施 A 用高倍显微镜观察叶绿体 用“菠菜叶”替代“藓类叶片” B DNA的粗提取与鉴定 用“猪成熟红细胞”替代“猪肝细胞” C 观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂 用“醋酸洋红液”替代“甲紫溶液” D 比较过氧化氢在不同条件下的分解 用“过氧化氢酶溶液”替代“肝脏研磨液” A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【分析】制作装片流程：解离→漂洗→染色→制片。解离的目的是用药液使组织中的细胞相互分离开来，漂洗的目的是洗去药液，防止解离过度，染色时用甲紫溶液或醋酸洋红液能使染色体着色。 【详解】A、藓类叶片薄，只有一层细胞，可直接用于观察叶绿体，菠菜叶由多层细胞构成，但可用菠菜叶稍带些叶肉的下表皮细胞来观察叶绿体，因为叶肉细胞中有叶绿体，所以能用“菠菜叶”替代“藓类叶片”进行高倍显微镜观察叶绿体的实验，A正确； B、猪是哺乳动物，猪成熟红细胞没有细胞核和众多细胞器，也就不含DNA，而猪肝细胞含有细胞核和线粒体等含有DNA的结构，所以不能用“猪成熟红细胞”替代“猪肝细胞”进行DNA的粗提取与鉴定实验，B错误； C、醋酸洋红液和甲紫溶液都属于碱性染料，都能使染色体着色，所以在观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂实验中，能用“醋酸洋红液”替代“甲紫溶液”，C正确； D、肝脏研磨液中含有过氧化氢酶，所以在比较过氧化氢在不同条件下的分解实验中，能用“过氧化氢酶溶液”替代“肝脏研磨液”，D正确。 故选B。 4. 植物细胞内10%~25%的葡萄糖经过一系列反应，产生NADPH、CO2和多种中间产物，该过程称为磷酸戊糖途径。该途径的中间产物可进一步生成氨基酸和核苷酸等。下列说法错误的是（ ） A. 磷酸戊糖途径产生的NADPH与有氧呼吸产生的还原型辅酶不同 B. 与有氧呼吸相比，葡萄糖经磷酸戊糖途径产生的能量少 C. 正常生理条件下，利用14C标记的葡萄糖可追踪磷酸戊糖途径中各产物的生成 D. 受伤组织修复过程中所需要的原料可由该途径的中间产物转化生成 【答案】C 【解析】 【分析】有氧呼吸是葡萄糖等有机物彻底氧化分解并释放能量的过程。由题干信息可知，磷酸戊糖途径可以将葡萄糖转化成其他中间产物，这些中间产物可以作为原料进一步生成其他化合物。 【详解】A、根据题意，磷酸戊糖途径产生的NADPH是为其他物质的合成提供原料，而有氧呼吸产生的还原型辅酶是NADH，能与O2反应产生水，A正确； B、有氧呼吸是葡萄糖彻底氧化分解释放能量的过程，而磷酸戊糖途径产生了多种中间产物，中间产物还进一步生成了其他有机物，所以葡萄糖经磷酸戊糖途径产生的能量比有氧呼吸少，B正确； C、正常生理条件下，只有10%~25%的葡萄糖参加了磷酸戊糖途径，其余的葡萄糖会参与其他代谢反应，例如有氧呼吸，所以用14C标记葡萄糖，除了追踪到磷酸戊糖途径的含碳产物，还会追踪到参与其他代谢反应的产物，C错误； D、受伤组织修复即是植物组织的再生过程，细胞需要增殖，所以需要核苷酸和氨基酸等原料，而磷酸戊糖途径的中间产物可生成氨基酸和核苷酸等，D正确。 故选C。 5. 单一使用干扰素-γ治疗肿瘤效果有限。降低线粒体蛋白V合成，不影响癌细胞凋亡，但同时加入干扰素-γ能破坏线粒体膜结构，促进癌细胞凋亡。下列叙述错误的是（　　） A. 癌细胞凋亡是由基因决定的 B. 蛋白V可能抑制干扰素-γ诱发的癌细胞凋亡 C. 线粒体膜结构破坏后，其DNA可能会释放 D. 抑制蛋白V合成会减弱肿瘤治疗的效果 【答案】D 【解析】 【分析】细胞凋亡是由基因决定的细胞自动结束生命的过程，在成熟的生物体中，细胞的自然更新、被病原体感染的细胞的清除都是通过细胞凋亡完成的。 【详解】A、细胞凋亡是由基因决定的细胞自动结束生命的过程，癌细胞凋亡也不例外，A正确； B、根据题意，降低线粒体蛋白V合成，不影响癌细胞凋亡，但与干扰素-γ同时作用能促进癌细胞凋亡，由此推测蛋白V可能抑制干扰素-γ诱发的癌细胞凋亡，B正确； C、线粒体是半自主性细胞器，含有少量DNA，线粒体膜结构破坏后，其DNA可能会释放出来，C正确； D、由题可知，降低线粒体蛋白V合成，再同时加入干扰素-γ能促进癌细胞凋亡，所以抑制蛋白V合成会增强肿瘤治疗的效果，而不是减弱，D错误。 故选D。 6. 最早的双脱氧测序法是PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸（ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧腺苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 上述PCR反应体系中只加入一种引物 B. 电泳时产物的片段越小，迁移速率越慢 C. 5'-CTACCCGTGAT-3'为对照个体的一段序列 D. 患者该段序列中某位点的碱基C突变为G 【答案】AC 【解析】 【分析】1、PCR技术： （1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 （2）原理：DNA复制。 （3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。 （4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶） （5）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 2、双脱氧测序法的原理：在DNA聚合酶、引物、四种单脱氧核苷酸（dNTP）存在的情况下，如果在四管反应系统中再分别加入四种双脱氧核苷三磷酸（ ddNTP），DNA链合成反应过程中 ddNTP与dNTP处于一种竞争状态，即新合成DNA链既可能掺入正常dNTP，也可能掺入ddNTP并使新合成链终止延伸。这样在每个反应系统中形成的产物是一系列长度不等的多核苷酸片段，这些片段具有相同的起点，即引物的5'端，但有不同的ddNTP终端。 在结束反应后，用四个泳道进行电泳，分别分离各组反应体系中不同长度的DNA 片段，检测DNA片段终止末端位置的碱基种类，从自显影图谱中直接读取到与模板相匹配的新的链序。 【详解】A、利用双脱氧测序法时，PCR反应体系中加入的模板是待测的单链DNA，故只需加入一种引物，A正确； B、电泳时，产物的片段越大，迁移速率越慢。B错误； C、依据分析中双脱氧测序法的原理，可以确定每个泳道中的条带（DNA片段）的3'终端的碱基，如+ddATP的泳道中出现的条带（DNA片段）的3'终端碱基就是A。另外由于每个片段的起始点相同，但终止点不同，因此可以通过比较片段的长度来确定DNA序列中每个位置上的碱基；图示电泳方向为从上→下，即对应的DNA片段为长→短，则对应的DNA测序结果为3'→5'，如对照个体的电泳结果最短的条带为+ddCTP泳道组的条带，则说明该DNA片段5'端第一个碱基为C；因此对照个体的测序结果为5'-CTACCCGTGAT-3'，患者的测序结果为5'-CTACCTGTGAT-3'，C正确； D、对比患者和对照个体的测序结果可知，患者该段序列中某位点的碱基C突变为T，D错误。 故选AC。 7. 下图表示人体内干细胞中一条核苷酸链片段M，在酶X的作用下进行的某生理过程的部分示意图（①②③表示核苷酸链），下列说法正确的是（　　） A. 酶X为RNA聚合酶，该生理过程表示转录 B. 酶Ⅹ的主要功能是催化磷酸二酯键的水解 C. 酶Ⅹ为解旋酶，①②③的合成需要DNA聚合酶的参与 D. 片段M发生碱基的替换一定导致合成的蛋白质结构改变 【答案】C 【解析】 【分析】基因表达包括转录和翻译两个过程，其中转录过程中，需要以DNA的一条链为模板合成mRNA；翻译过程中，需要以mRNA为模板，tRNA运送氨基酸，从而合成多肽链，多肽链经盘曲折叠变成具有一定空间结构的蛋白质。 【详解】A、若酶X为RNA聚合酶，该生理过程表示转录，则酶X的移动方向应与图示移动方向相反，因此酶X不是RNA聚合酶，A错误； BC、若酶Ⅹ为解旋酶，则该过程表示DNA的复制，其中一条子链的合成方向与解旋酶移动方向相同，另一条子链的合成方向可与解旋酶移动方向相反，符合图示过程，故①②③的合成需要DNA聚合酶（另外一种酶）的参与，而酶Ⅹ催化氢键的打开，B错误，C正确； D、一种氨基酸可有多种密码子决定，因此片段M发生碱基替换不一定导致合成的蛋白质结构改变，D错误； 故选C。 8. 机体长期感染某病毒可导致细胞癌变。交感神经释放的神经递质作用于癌细胞表面β受体，上调癌细胞某蛋白的表达，破坏癌细胞的连接，从而促进癌细胞转移。下列说法错误的是（ ） A. 机体清除癌细胞的过程属于免疫监视 B. 使用β受体阻断剂可增加癌细胞转移率 C. 可通过接种该病毒疫苗降低患相关癌症的风险 D. 辅助性T细胞可能参与机体清除癌细胞的过程 【答案】B 【解析】 【详解】A、免疫监视是免疫系统识别并清除异常细胞（如癌细胞）的功能，清除癌细胞属于该过程，A正确； B、交感神经递质通过β受体促进癌细胞转移，若使用β受体阻断剂，会抑制递质作用，从而降低转移率，而非增加，B错误； C、长期感染该病毒可致癌，接种疫苗可预防感染，从而降低癌变风险，C正确； D、辅助性T细胞通过分泌细胞因子激活细胞毒性T细胞，后者可杀伤癌细胞，D正确。 故选B。 9. 干细胞的培养成功是动物细胞培养领域的重大成就，其应用前景吸引着众多科学家投入到相关研究中。下列相关说法错误的是（　　） A. 胚胎干细胞可分化为成年动物体内任何一种类型的细胞 B. 成体干细胞具有组织特异性，其分化潜能是有一定限度的 C. iPS细胞可由成纤维细胞经相关因子诱导转化而来，类似于再分化 D. 理论上，移植来源于患者自身体细胞的iPS细胞可以避免免疫排斥反应 【答案】C 【解析】 【分析】1、干细胞是指动物和人体内保留着少量具有分裂和分化能力的细胞。 2、iPS细胞，称诱导多能干细胞，是具有与胚胎干细胞相似的分化潜力的干细胞。 【详解】A、干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞，胚胎干细胞分化程度低，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞的潜能，A正确； B、成体干细胞只能分化为特定的组织，不具有分化为成年动物体内任何一种类型细胞的潜能，其分化潜能是有一定限度的，B正确； C、小鼠的成纤维细胞转变为 iPS 细胞，从高度分化的细胞形成分化程度低的细胞，类似于植物组织培养中的脱分化过程，C错误； D、iPS细胞可由患者自身体细胞经人工诱导获得，自体细胞获得的iPS细胞移植，其细胞膜表面的组织相容性抗原物质相同，理论上可避免免疫排斥反应，D正确。 故选C。 10. 某种二倍体植物的P1和P2植株杂交得F1，F1自交得F2。对个体的DNA进行PCR检测，产物的电泳结果如图所示，其中①～⑧为部分F2个体，上部2条带是一对等位基因的扩增产物，下部2条带是另一对等位基因的扩增产物，这2对等位基因位于非同源染色体上。下列叙述错误的是（ ） A. ①②个体均为杂合体，F2中③所占的比例大于⑤ B. 还有一种F2个体的PCR产物电泳结果有3条带 C. ③和⑦杂交子代的PCR产物电泳结果与②⑧电泳结果相同 D. ①自交子代的PCR产物电泳结果与④电泳结果相同的占 【答案】D 【解析】 【分析】基因自由组合定律的实质是：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或自由组合是互不干扰的；在减数分裂过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。 【详解】A、由题可知，这2对等位基因位于非同源染色体上，假设A/a为上部两条带的等位基因，B/b为下部两条带的等位基因，由电泳图可知P1为AAbb，P2为aaBB，F1为AaBb，F2中①AaBB②Aabb都为杂合子，③AABb占F2的比例为，⑤AABB占F2的比例为，A正确； B、电泳图中的F2的基因型依次为：AaBB、Aabb、AABb、aaBB、AABB、AAbb、aabb、AaBb，未出现的基因型为aaBb，其个体PCR产物电泳结果有3条带，B正确； C、③AABb和⑦aabb杂交后代为Aabb、 AaBb，其PCR产物电泳结果与②⑧电泳结果相同，C正确； D、①AaBB自交子代为，AABB（）、AaBB（）、aaBB（），其PCR产物电泳结果与④aaBB电泳结果相同的占，D错误。 故选D。 11. 制备荧光标记的DNA探针时，需要模板、引物、DNA聚合酶等。在只含大肠杆菌DNA聚合酶、扩增缓冲液、H2O和4种脱氧核苷酸（dCTP、dTTP、dGTP和碱基被荧光标记的dATP）的反应管①~④中，分别加入如表所示的适量单链DNA。已知形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区。能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有（　　） 反应管 加入的单链DNA ① 5'-GCCGATCTTTATA-3' 3'-GACCGGCTAGAAA-5' ② 5'-AGAGCCAATTGGC-3' ③ 5'-ATTTCCCGATCCG-3' 3'-AGGGCTAGGCATA-5' ④ 5'-TTCACTGGCCAGT-3' A. ①② B. ②③ C. ①④ D. ③④ 【答案】D 【解析】 【分析】子链的延伸方向为5'→3'，由题意可知，在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区，要能得到带有荧光标记的DNA探针，需要能根据所提供的模板进行扩增，且扩增子链种含有A。 【详解】分析反应管①～④中分别加入的适量单链DNA可知，①中两条单链DNA分子之间具有互补的序列，但双链DNA区之外的3'端无模板，因此无法进行DNA合成，不能得到带有荧光标记的DNA探针；②中单链DNA分子内具有自身互补的序列，由于在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区，故一条单链DNA分子不发生自身环化，但两条链可以形成双链DNA区，由于DNA合成的链中不含碱基A，不能得到带有荧光标记的DNA探针；③中两条单链DNA分子之间具有互补的序列，且双链DNA区之外的3'端有模板和碱基T，因此进行DNA合成能得到带有荧光标记的DNA探针；④中单链DNA分子内具有自身互补的序列，一条单链DNA分子不发生自身环化，两条链可以形成双链DNA区，且双链DNA区之外的3'端有模板和碱基T，因此进行DNA合成能得到带有荧光标记的DNA探针。 综上，能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有③④。 故选D。 12. DNA碱基发生甲基化修饰会抑制基因的表达。研究发现，豆科植物体内的某基因S的表达被抑制后，会导致豆科植物的固氮能力下降（ ） A. 可通过检测S基因的碱基序列确定该基因是否发生甲基化修饰 B. 若S基因发生甲基化修饰，该过程会发生磷酸二酯键的生成与断裂 C. S基因的表达被抑制后，可能会导致豆科植物的抗旱能力下降 D. S基因表达被抑制，说明RNA聚合酶与该基因的启动子结合受阻 【答案】C 【解析】 【分析】表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变，即基因型未发生变化而表现型却发生了改变。 【详解】A、甲基化不会改变DNA的碱基序列，因此无法通过检测DNA的碱基序列确定该DNA是否发生甲基化，A错误； B、甲基化不涉及碱基序列的改变，核苷酸数目没有改变，所以无磷酸二酯键的断裂与生成，B错误； C、由题干信息可知，S基因的表达被抑制后，豆科植物的固氮能力下降，细胞内可溶性氨基酸含量下降，可能导致细胞细胞液的渗透压降低，使得豆科植物的抗旱能力下降，C正确； D、仅题干信息，无法说明S基因表达被抑制是由于RNA聚合酶与该基因的启动子结合受阻引起的，也有可能是翻译异常引起的表达抑制，D错误。 故选C。 13. 植物光合作用的光反应依赖类囊体膜上PSI和PSII光复合体，PSII光复合体含有光合色素，能吸收光能，并分解水。研究发现，PSII光复合体上的蛋白质LHCII，通过与PSII结合或分离来增强或减弱对光能的捕获（如图所示）。LHCⅡ与PSII的分离依赖LHC蛋白激酶的催化。下列叙述错误的是（ ） A. 叶肉细胞内LHC蛋白激酶活性下降，PSII光复合体对光能的捕获降低 B. Mg2+含量减少会导致PSII光复合体对光能的捕获减弱 C. 弱光下LHCⅡ与PSII结合，利于对光能的捕获 D. PSII光复合体分解水可以产生H+、电子和O2 【答案】A 【解析】 【详解】A、LHCⅡ与PSⅡ的分离依赖LHC蛋白激酶的催化，叶肉细胞内LHC蛋白激酶活性下降，LHCⅡ与PSⅡ分离减少，PSIⅡ光复合体对光能的捕获增强，A错误； B、Mg2+是叶绿素的组成成分，其含量减少会导致PSⅡ光复合体上的叶绿素含量减少，导致对光能的捕获减弱 ，B正确； C、弱光下LHCⅡ与PSⅡ结合，增强对光能的捕获，C正确； D、PSⅡ光复合体能吸收光能，并分解水，水的光解产生H+、电子和O2，D正确。 故选A。 14. 仙人掌的茎由内部薄壁细胞和进行光合作用的外层细胞等组成，内部薄壁细胞的细胞壁伸缩性更大。水分充足时，内部薄壁细胞和外层细胞的渗透压保持相等；干旱环境下，内部薄壁细胞中单糖合成多糖的速率比外层细胞快。下列说法错误的是（　　） A. 细胞失水过程中，细胞液浓度增大 B. 干旱环境下，外层细胞的细胞液浓度比内部薄壁细胞的低 C. 失水比例相同的情况下，外层细胞更易发生质壁分离 D. 干旱环境下内部薄壁细胞合成多糖的速率更快，有利于外层细胞的光合作用 【答案】B 【解析】 【分析】成熟的植物细胞由于中央液泡占据了细胞的大部分空间，将细胞质挤成一薄层，所以细胞内的液体环境主要指的是液泡里面的细胞液。细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质称为原生质层。原生质层有选择透过性，相当于一层半透膜，植物细胞也能通过原生质发生吸水或失水现象。 【详解】A、细胞失水过程中，水从细胞液流出，细胞液浓度增大，A正确； B、依题意，干旱环境下，内部薄壁细胞中单糖合成多糖的速率比外层细胞快，则外层细胞的细胞液单糖多，且外层细胞还能进行光合作用合成单糖，故外层细胞液浓度比内部薄壁细胞的细胞液浓度高，B错误； C、依题意，内部薄壁细胞细胞壁的伸缩性比外层细胞的细胞壁伸缩性更大，失水比例相同的情况下，外层细胞更易发生质壁分离，C正确； D、依题意，干旱环境下，内部薄壁细胞中单糖合成多糖的速率比外层细胞快，有利于外层细胞光合作用产物向内部薄壁细胞转移，可促进外层细胞的光合作用，同时内薄壁细胞细胞液浓度降低，水分从内向外转移，促进外细胞光合作用，D正确。 故选B。 15. 如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（ ） A. 双抗可同时与2种抗原结合 B. 利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞 C. 筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原 D. 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，A正确； B、 根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用，B正确； C、在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成两种抗体，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原-抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确； D、 同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。 故选D。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 英国植物学家罗伯特·希尔1937年发现，在离体叶绿体的悬浮液中（无CO2）加入氧化剂，在光照条件下可以释放O2，现在把这种现象称为希尔反应。下列有关说法正确的是（　　） A. 希尔反应发生的场所是叶绿体基质 B. 如果不加入氧化剂，O2不会持续产生 C. 希尔反应证明了产生的O2全部来源于水 D. 希尔反应证明氧气的产生和糖类的合成是相对独立的过程 【答案】BD 【解析】 【分析】由题意可知，希尔反应为离体叶绿体在适当（铁盐或其他氧化剂、光照）条件下发生水的光解、产生氧气的化学反应，即光反应。 【详解】A、希尔反应是指离体叶绿体在适当条件下发生水的光解，产生氧气的化学反应，即光反应，发生在叶绿体的类囊体薄膜上，A错误； B、据题干信息可知，希尔反应的发生需要加入氧化剂，故不加入氧化剂，则O2不会持续产生，B正确； C、希尔反应并不能证明植物光合作用产生的O2中的氧元素全部来自H2O，因为它也可能来自于其他含氧的物质，C错误； D、希尔反应的悬浮液中没有CO2，不能合成糖类，说明水光解产生氧气与糖类的合成不是同一个化学反应，二者是相对独立的过程， D正确。 故选BD。 17. 神经细胞的离子跨膜运输除受膜内外离子浓度差影响外，还受膜内外电位差的影响。已知神经细胞膜外的Cl-浓度比膜内高。下列说法正确的是（ ） A. 静息电位状态下，膜内外电位差一定阻止K+的外流 B. 突触后膜的Cl-通道开放后，膜内外电位差一定增大 C. 动作电位产生过程中，膜内外电位差始终促进Na+的内流 D. 静息电位→动作电位→静息电位过程中，不会出现膜内外电位差为0的情况 【答案】A 【解析】 【分析】1、静息时，神经细胞膜对钾离子的通透性大，钾离子大量外流，形成内负外正的静息电位；受到刺激后，神经细胞膜的通透性发生改变，对钠离子的通透性增大，钠离子内流，形成内正外负的动作电位，兴奋部位和非兴奋部位形成电位差，产生局部电流，兴奋传导的方向与膜内电流方向一致。 2、兴奋在神经元之间需要通过突触结构进行传递，突触包括突触前膜、突触间隙、突触后膜，其具体的传递过程为：兴奋以电流的形式传导到轴突末梢时，突触小泡释放递质（化学信号），递质作用于突触后膜，引起突触后膜产生膜电位（电信号），从而将兴奋传递到下一个神经元。 【详解】A、静息电位状态下，K+外流导致膜外为正电，膜内为负电，膜内外电位差阻止了K+的继续外流，A正确； B、若膜内电位为正时，氯离子内流不会使膜内外电位差增大，B错误； C、动作电位产生过程中，膜内外电位差促进Na+的内流，当膜内变为正电时则抑制Na+的继续内流，C错误； D、静息电位→动作电位→静息电位过程中，膜电位的变化为，由外正内负变为外负内正，再变为外正内负，则会出现膜内外电位差为0的情况，D错误。 故选A。 18. 某雌雄异株多年生高等植物，其花色受两对等位基因控制，相关色素合成机制如图所示。已知B、b基因的碱基数相同而B基因控制合成的蛋白质中氨基酸数目较多。为研究其遗传机制，某同学选取一蓝花雌株与一红花雄株作为亲本进行杂交，F1表现为紫花雌株：蓝花雄株=1：1。已知两对基因不位于Y染色体，不考虑其他变异。下列说法错误的是（ ） A. 若要鉴定该植物幼苗的性别，可采用分生区细胞装片分析其染色体组数 B. B控制合成的蛋白质中氨基酸数目较多是因为基因突变导致终止子延后 C. A位于常染色体上控制蓝色色素合成，B位于X染色体上控制红色色素合成 D. 将F1中紫花雌株与蓝花雄株杂交，杂交子代不一定会出现紫色雄性个体 【答案】ABC 【解析】 【分析】由题意知，一蓝花雌株和一红花雄株作为亲本进行杂交，F1表现为紫花雌株︰蓝花雄株=1:1，说明控制花色的遗传是伴性遗传，子代雄株表现型与亲本蓝花雌株表现型相同，因此亲本蓝花雌株―对基因型是XbXb，红花雄株相关基因型是XBY，子一代雌株含有B基因，表现为紫花（有红色色素），因此B基因控制红色色素形成，子一代雌性含有A、a基因，能合成蓝色色素，因此A控制蓝色色素的合成；A、B基因都存在，开紫花，A存在、B不存在开蓝花，A不存在，B存在开红花，A、B都不存在开白花。 【详解】A、雌性和雄性植株中染色体组数相同，因此不能通过对分生区细胞染色体组数分析来鉴定该植物幼苗的性别，A错误； B、题干中“已知B、b基因的碱基数相同而B基因控制合成的蛋白质中氨基酸数目较多”，说明B基因表达时能够决定氨基酸的碱基数更多，基因突变导致终止子延后只会导致mRNA碱基数目增多，并不一定影响翻译产生的肽链氨基酸数目，因为翻译的终点是终止密码子，其位置与终止子位置无直接关联，B错误； C、一蓝花雌株和一红花雄株作为亲本进行杂交，F1表现为紫花雌株︰蓝花雄株=1:1，说明控制花色的遗传是伴性遗传，子代雄株表现型与亲本蓝花雌株表现型相同，因此亲本蓝花雌株―对基因型是XbXb，红花雄株相关基因型是XBY，子一代雌株含有B基因，表现为紫花（有红色色素），因此B基因控制红色色素形成，子一代雌性含有A、a基因，能合成蓝色色素，因此A控制蓝色色素的合成；A、B基因都存在，开紫花，A存在、B不存在开蓝花，A不存在，B存在开红花，A、B都不存在开白花，但是不能判断A( a )是位于X染色体还是位于常染色体上，C错误； D、若A( a )是位于X染色体上，则亲本基因型是XAbXAb、XaBY，子一代基因型是XAbXaB、XAbY，F1中紫花雌株与蓝花雄株杂交，子代基因型比例是XAbXAb:XAbXaB:XAbY:XaBY=1:1:1:1，表现为蓝花雌株:紫花雌株:蓝花雄株:红花雄株=1:1:1:1，没有出现紫色雄性个体，D正确。 故选ABC。 19. 种群延续所需要的最小种群密度为临界密度，只有大于临界密度，种群数量才能增加，最后会达到并维持在一个相对稳定的数量，即环境容纳量（K值）。不同环境条件下，同种动物种群的K值不同。图中曲线上的点表示在不同环境条件下某动物种群的K值和达到K值时的种群密度，其中m为该动物种群的临界密度，K0以下的环境表示该动物的灭绝环境。a、b、c、d四个点表示不同环境条件下该动物的4个种群的K值及当前的种群密度，且4个种群所在区域面积相等，各种群所处环境稳定。不考虑迁入迁出，下列说法正确的是（ ） A. 可通过一次投放适量该动物对a点种群进行有效保护 B. b点种群发展到稳定期间，出生率大于死亡率 C. c点种群发展到稳定期间，种内竞争逐渐加剧 D. 通过提高K值可使d点种群得以延续 【答案】ABD 【解析】 【分析】“S”型曲线：是受限制的指数增长函数，描述食物、空间都有限，有天敌捕食的真实生物数量增长情况，存在环境容纳的最大值K，种群增长速率先增加后减少，在K/2处种群增长速率最大。 【详解】A、a点时种群密度低于该动物种群的临界密度m，K值大于K0，故可通过一次投放适量该动物对a点种群进行有效保护，A正确； B、b点时种群密度小于其达到K值时对应的种群密度，种群发展到稳定期间，种群数量增加，出生率大于死亡率，B正确； C、c点时种群密度大于其达到K值时对应的种群密度，种群发展到稳定期间，种群数量减少，种内竞争减弱，C错误； D、d点时种群密度大于m，K值小于K0，可通过提高K值使d点种群得以延续，D正确。 故选ABD。 20. 科研人员利用诱变育种选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌。野生菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。图甲为选育菌种及获得β-胡萝卜素的流程。下列叙述正确的是（　　） A. 要得到图乙所示的菌落，可用平板划线法进行②操作，然后培养 B. 经过程①紫外线照射的三孢布拉霉负菌有的不能在含β-紫罗酮培养基上生长 C. 进行③操作时，应选择较小的橙红色菌落中的菌株继续接种培养 D. 为筛选纯化β-胡萝卜素产量高的菌种，⑤中采取重复③④过程 【答案】BD 【解析】 【分析】微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是纯化的菌落。稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂适体培养基的表面，进行培养。 【详解】A、图乙菌落分布均匀，要得到乙培养基中的分布均匀的菌落，可用稀释涂布平板法接种，A错误； B、野生菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。过程①紫外线照射的作用是利用物理因素诱导基因突变，由于突变具有低频性和不定向性，被照射的三孢布拉霉负菌有的突变，有的没有，未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长，B正确； C、随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色，橙红色的菌体为高产菌，进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养 ，C错误； D、采取重复③④过程可进一步的纯化β-胡萝卜素产量高的菌种，D正确。 故选BD。 三、非选择题：本题共5小题．共55分。 21. 为探究水通道蛋白NtPIP对作物耐涝性的影响，科研小组测定了油菜的野生型（WT）及NtPIP基因过量表达株（OE）在正常供氧（AT）和低氧（HT，模拟涝渍）条件下的根细胞呼吸速率和氧浓度，结果见图1。 回答下列问题。 （1）据图1分析，低氧胁迫下，NtPIP基因过量表达会使根细胞有氧呼吸________，原因是________。有氧呼吸第二阶段丙酮酸中的化学能大部分被转化为________中储存的能量。 （2）科学家早期在探索有氧呼吸第二阶段代谢路径时发现，在添加丙二酸的组织悬浮液中加入分子A、B或C时，E增多并累积（图2a）；当加入F、G或H时，E也同样累积（图2b）。根据此结果，针对有氧呼吸第二阶段代谢路径提出假设：________。 （3）科研小组还发现，低氧条件下，NtPIP基因过量表达株的叶片净光合速率高于野生型。结合根细胞呼吸速率的变化分析，其原因是________。 （4）光合作用光反应实质是光能引起的氧化还原反应，最终接受电子的物质（最终电子受体）是________，而最终提供电子的物质（最终电子供体）是________。 【答案】（1） ①. 增强 ②. 在低氧胁迫下，NtPIP基因的过量表达株（OE）的根细胞呼吸速率和氧气浓度均明显高于WT组 ③. NADH （2） 假设物质H能转化A （3） 低氧条件下，NtPIP基因过量表达株，根有氧呼吸增强，因而主动运输吸收更多无机盐，为叶绿体的物质和结构合成提供了更多原料 （4） ①. NADP+ ②. H2O 【解析】 【分析】1、有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，释放少量能量；第二阶段是丙酮酸和H2O反应生成CO2和NADH，释放少量能量；第三阶段是O2和[H]反应生成水，释放大量能量。 2、光反应场所在光合膜；光反应产物有氧气、ATP和NADPH。 【小问1详解】 据图1分析，低氧条件下，与野生型组相比，NtPIP基因过量表达株（OE）组氧气浓度升高且呼吸速率增加，故低氧胁迫下，NtPIP基因过量表达会使根细胞有氧呼吸增强。第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳（无机物）、NADH（储存大量能量）并释放出少量的能量（绝大部分以热能形式散失，少量用于合成ATP），其中的化学能大部分被转化为NADH储存的能量。 【小问2详解】 在添加丙二酸的组织悬浮液中加入分子A、B或C时，E增多并累积；当加入F、G或H时，E也同样累积，再结合根据图2中显示的代谢路径，可知丙二酸的加入会导致E积累；分子A、B、C和F、G、H均为E的前体或可通过代谢转化为E，表明有氧呼吸第二阶段代谢路径存在循环特性，即H→A，故提出：假设物质H能转化为A。 【小问3详解】 小问1可知，低氧条件下，与野生型相比，NtPIP基因过量表达株的根有氧呼吸增强，因而主动运输吸收更多无机盐，为叶绿体的物质和结构合成提供了更多原料，因而提高了净光合速率。 【小问4详解】 光反应中水在光下分解为H+、O2和e-，e-经传递最终与H+和NADP+结合生成NADPH，因此，光反应中最终的电子供体是H2O，最终的电子受体是NADP+。 22. 水稻籽粒外壳（颖壳）表型有黄色、黑色、紫色和棕红色等，种植颖壳表型不同的彩色稻，既可满足国家粮食安全需要，又可形成优美画卷，用于旅游开发。回答下列问题。 （1）研究发现，水稻颖壳的紫色、棕红色、黄绿色和浅绿色的形成与类黄酮化合物的代谢有关。假设显性基因C、R、A控制颖壳色素的形成，且独立遗传，相应的隐性等位基因不具有该效应。色素合成代谢途径如图。 现有基因型为CcRrAa与CcRraa的两品种水稻杂交，F1中颖壳表型为紫色、棕红色、黄绿色和浅绿色的比例为________。F1中，颖壳颜色在后代持续保持不变的个体所占比例为________。 （2）野生稻的颖壳为黑色，经过突变和驯化，目前栽培稻的颖壳多为黄色。黑色和黄色颖壳由一对等位基因控制，且黑色（Bh）对黄色（bh）为显性。科研小组对多个品种进行分析，发现有两个黄色颖壳突变类型（栽培稻1、2），推测两者的突变可能是来自同一个基因。设计一个杂交实验，以验证该推测，并说明判断理由________。 （3）科研小组采用PCR技术，扩增出野生稻和栽培稻Bh/bh基因的片段，电泳结果见图1。 说明：野生型Bh基因的部分序列为：5'-GATTCGCTCACA-3'， 该链为非模板链，编码的肽链为天冬氨酸-丝氨酸-亮氨酸-苏氨酸。UAA、UAG为终止密码子。 与野生稻相比，栽培稻2是由于Bh基因发生了________，颖壳表现为黄色。栽培稻1和野生稻的PCR扩增产物大小一致，科研小组进行了DNA测序，结果见图2（图中仅显示两者含有差异的部分序列，其余序列一致；A、T、C、C表示4种碱基）。比较两者DNA碱基序列，发现栽培稻1是由于Bh基因中的DNA序列发生________，导致________，颖壳表现为黄色。 【答案】（1） ①. 9：9：6：8 ②. 11/32 （2）栽培稻1和栽培稻2杂交，统计子代表型。若子代颖壳全为黑色，则两者的突变不是来自同一个基因；若子代颖壳全为黄色，两者的突变可能是来自同一个基因 （3） ①. 碱基对的缺失 ②. 碱基对的替换（C-G替换为A-T） ③. 相应的mRNA上的密码子UCG变为UAG，导致终止密码提前出现，其指导合成的肽链缩短 【解析】 【分析】1、基因通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而控制生物体的性状。 2、DNA分子中发生碱基的替换、增添或缺失，而引起的基因碱基序列的改变，叫作基因突变。 【小问1详解】 据色素合成代谢途径图可知，颖壳颜色紫色、棕红色、黄绿色和浅绿色对应的基因型分别是C_R_A_、C_R_aa、C_rr_ _、cc_ _ _ _ ，三对基因独立遗传，可以单独考虑各对基因的遗传。CcRrAa与CcRraa杂交，单独考虑C/c，子代基因型及比例为3C_：1cc；单独考虑R/r，子代基因型及比例为3R_：1rr；单独考虑A/a，子代基因型及比例为1Aa：1aa。三对基因自由组合，故F1中颖壳表型为紫色（C_R_A_）、棕红色（C_R_aa）、黄绿色（C_rr_ _）和浅绿色（cc_ _ _ _ ）的比例为9：9：6：8。F1中颖壳颜色在后代持续保持不变的个体比例为8cc_ _ _ _ ：2CCrr_ _ ：1CCRRaa，故这些个体所占比例为：11/（9+9+6+8）=11/32。 【小问2详解】 依题意，黑色对黄色为显性，若栽培稻1、2都是由Bh基因突变而来，则栽培稻1的基因型可假设为bh1bh1、栽培稻2的基因型可假设为bh2bh2。栽培稻1、2杂交，子代基因型为bh1bh2，全表现黄色；若栽培稻1、2不是由同一个基因突变而来，则可假设栽培稻1的基因型为AhAhbhbh，栽培稻2的基因型为ahahBhBh，栽培稻1、2杂交，子代基因型为AhahBhbh，全表现黑色。 【小问3详解】 据图1可知，野生稻的电泳条带比栽培稻2电泳条带距离进样口近，故野生稻的相关基因比栽培稻的相关基因长，故可知，与野生稻相比，栽培稻2是由于Bh基因发生了碱基对的缺失。据图2可知，野生型Bh基因的部分序列为：5'-GATTCGCTCACA-3' （该链为非模板链），栽培稻1相应的碱基序列是5'-GATTAGCTCACA-3'，故可知，发现栽培稻1是由于Bh基因中的DNA序列中C-G碱基对被替换成了A-T碱基对，导致相应的mRNA上的密码子UCG变为UAG，导致终止密码提前出现，其指导合成的肽链变短，颖壳表现为黄色。 23. 过度紧张、焦虑等刺激不仅会导致毛囊细胞数量减少引起脱发，也会导致黑色素细胞减少引起头发变白。利用黑色小鼠进行研究得出的相关调节机制如图所示。 （1）下丘脑通过垂体调节肾上腺分泌G的体液调节方式为_____。 （2）研究发现，NE主要通过过程②影响MesC，过程①作用很小。两过程中，NE作用于Mesc效果不同的原因可能是_____（答出3种原因即可） （3）已知长期束缚会引起小鼠过度紧张、焦虑。请设计实验验证上述调节机制中长期束缚及肾上腺对黑毛小鼠体毛的影响。 实验思路：取生理状况相同的黑色小鼠若干只，随机平均分为A、B、C、D四组，A组不作处理，B组切除肾上腺，C组_____，D组_____，其他条件相同且适宜，饲养一段时间后，观察并记录_____。 实验现象：A组小鼠的体毛无变化，B组小鼠______，C组小鼠______，D组小鼠_____。 【答案】（1）分级调节 （2）两过程NE的作用方式不同（或NE分别作为激素和神经递质起作用）；两过程NE的浓度不同；两过程NE运输到MeSC的时间不同 （3） ①. 束缚 ②. 切除肾上腺并束缚 ③. 小鼠体毛数量（生长情况）和颜色的变化 ④. 小鼠的体毛增多 ⑤. 小鼠脱毛且变白 ⑥. 小鼠毛发增多（生长旺盛），变白 【解析】 【分析】据图分析：过度紧张焦虑刺激下丘脑分泌相应激素作用于垂体，垂体分泌相应激素作用于肾上腺皮质，使其分泌糖皮质激素抑制成纤维细胞，通过一系列途经最终分化出的毛囊细胞减少。与此同时，过度紧张焦虑会刺激脑和脊髓通过传出神经作用于肾上腺髓质分泌NE或传出神经分泌NE作用于MeSc，使其异常增殖分化，最终黑色素细胞减少。 【小问1详解】 由图可知，下丘脑分泌相应激素通过体液运输作用于垂体，使垂体分泌相应激素，在通过体液运输作用于肾上腺皮质，使其分泌糖皮质激素，该过程体现了激素分泌的分级调节。 【小问2详解】 过程②为传出神经直接分泌NE作用于MeSC细胞属于神经调节，过程①是传出神经先作用于肾上腺髓质使其分泌NE再作用于MeSC细胞属于激素（体液）调节，这两种方式中过程②的作用效果大于过程①，这可能原因有两过程NE的作用方式不同，过程②中NE作为神经递质起作用，而过程①NE作为激素起作用，也可能是两过程NE的浓度不同或两过程NE运输到MeSC的时间不同，过程②中NE作用时间快，过程①中NE作用时间慢。 【小问3详解】 由图可知，过度紧张和焦虑会导致黑色素细胞减少，引起头发变白和导致毛囊细胞数量减少，引起脱发。为了验证长期束缚及肾上腺对黑毛小鼠体毛的影响，可取生理状况相同的黑色小鼠若识随机平均分为A、B、C、D四组，A组不作处理，B组切除肾上腺，C组束缚，D组切除肾上腺并束缚，其他条件相同且适宜饲养一段时间后，观察并记录小鼠体毛数量（生长情况）和颜色的变化。预期观察到的实验现象：A组小鼠的体毛无变化，B组小鼠的体毛增多，不变白，C组小鼠脱毛且变白，D组小鼠毛发增多（生长旺盛），变白。由此可见，长期束缚会引起小鼠过度紧张、焦虑导致脱发和白化现象，切除肾上腺有助于抑制脱毛的现象，但对白化减少影响不大。 24. 研究群落时，不仅要调查群落的物种丰富度，还要比较不同群落的物种组成。β多样性是指某特定时间点，沿某一环境因素梯度，不同群落间物种组成的变化。它可用群落a和群落b的独有物种数之和与群落a、b各自的物种数之和的比值表示。 （1）群落甲中冷杉的数量很多，据此______（填“能”或“不能”）判断冷杉在该群落中是否占据优势。群落甲中冷杉在不同地段的种群密度不同，这体现了群落空间结构中的______。从协同进化的角度分析，冷杉在群落甲中能占据相对稳定生态位的原因是______。 （2）群落甲、乙的物种丰富度分别为70和80，两群落之间的β多样性为0.4，则两群落的共有物种数为______（填数字）。 （3）根据β多样性可以科学合理规划自然保护区以维系物种多样性。群落丙、丁的物种丰富度分别为56和98，若两群落之间的β多样性高，则应该在群落______（填“丙”“丁”或“丙和丁”）建立自然保护区，理由是______。 【答案】（1） ①. 不能 ②. 水平结构 ③. 冷杉与无机环境以及其他物种在长期的自然选择过程中相互影响，共同进化，形成了相对稳定的生态关系 （2）45 （3） ①. 丙和丁 ②. 丙和丁特有的物种多，在群落丙和丁建立自然保护区，可以保护更多的物种，维系物种多样性 【解析】 【分析】由题意可知，β多样性可用群落a和群落b的独有物种数之和与群落a、b各自的物种数之和的比值表示，则计算两群落共有物种数，可以使用以下公式：共有物种数=(群落甲物种数＋群落乙物种数)×β多样性。 【小问1详解】 判断冷杉是否占据优势，不能仅仅根据数量多少，还需要考虑其他因素，如冷杉在群落中的生态作用、与其他物种的关系等。群落空间结构包括水平结构和垂直结构，冷杉在不同地段的种群密度不同，体现了群落的水平结构。冷杉能在群落甲中占据相对稳定的生态位，是因为它与无机环境以及其他物种之间存在相互影响，通过协同进化，冷杉适应了群落的环境，与其他物种形成了相对稳定的生态关系。 【小问2详解】 由题意可知，β多样性可用群落a和群落b的独有物种数之和与群落a、b各自的物种数之和的比值表示，则计算两群落共有物种数，可以使用以下公式：独有物种数之和=(群落甲物种数＋群落乙物种数)×β多样性，将题目中的数据代入公式，得到：独有物种数之和=(70 + 80) ×0.4 = 60，因此，两群落共有物种数为[70 + 80-60]/2=45。 【小问3详解】 β多样性高表示两群落之间的物种组成差异较大，丙和丁特有的物种多，在这种情况下，在群落丙和丁建立自然保护区可以保护更多的物种。这是因为自然保护区的建立可以保护物种的栖息地和生态环境，减少人类活动对物种的干扰和破坏，从而维系物种的多样性。在群落丙和丁建立自然保护区，可以将两个群落的物种都纳入保护范围，更好地保护生物多样性。 25. 种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。 （1）Ti质粒上与其在农杆菌中复制能力相关的结构为______。选用图甲中的Smal对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择_______对Ti质粒进行完全酶切，将其中产生的黏性末端补平，补平时使用的酶是______。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶_______进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为_______bp，则一定为反向重组质粒。 人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。 （2）为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在F1～F7末端添加的序列所对应的限制酶是______，在R末端添加的序列所对应的限制酶是______。本实验中，从产物扩增到载体构建完成的整个过程需要的酶分别是_______。 （3）将构建的载体导入除去BCL11A基因的受体细胞，成功转化后，含F1～F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光。含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光的原因是_______。 【答案】（1） ①. 复制原点 ②. SmaI、XbaI ③. DNA聚合酶 ④. SmaI和SpeI ⑤. 200 （2） ①. SalI ②. EcoRI ③. EcoRI、SalI、MunI、XhoI、DNA连接酶、DNA聚合酶 （3）F7与R扩增产物不含完整的启动子，荧光蛋白基因不表达 【解析】 【分析】用单一限制酶切目的基因和质粒，可能会造成自身环化或反向连接，故通常需要用两种限制酶对目的基因和质粒进行切割。 【小问1详解】 Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为复制原点，是复制开始的地方。由于BamHⅠ切割会破坏终止子，故不能用其切割质粒。为了方便后续的检测，需要选择两种不同的限制酶切割质粒，用Smal对抗除草剂基因X进行完全酶切，可以选择SmaⅠ和XbaⅠ或SmaⅠ和PstⅠ进行切割，质粒上一侧为黏性末端，一侧为平末端，而目的基因的两侧均为平末端，故需要用DNA聚合酶将黏性末端补平。由于DNA聚合酶只能从缺口的3'端添加脱氧核苷酸，DNA聚合酶无法补平PstⅠ切割产生的黏性末端，故应该选择SmaⅠ和XbaⅠ切割质粒。构建重组质粒后，重组质粒上含有一个SmaⅠ识别位点和一个SpeⅠ识别位点，经切割后会产生一长一短两种片段，且有卡那霉素的抗性基因，经卡那霉素筛选后可以存活的大肠杆菌可能含重组质粒，可以选择重组质粒上有酶切位点的SmaI和SpeI对质粒进行切割，根据模板链可知，目的基因的转录方向应该是从左向右，若目的基因正向插入，则重组质粒中SmaⅠ识别位点位于目的基因的右侧，用SmaI和SpeI对质粒进行切割，较短的片段长度大概550bp；若目的基因反向插入，则重组质粒中SmaⅠ识别位点位于目的基因的左侧，用SmaI和SpeI对质粒进行切割，较短的片段长度大概200bp。 【小问2详解】 由题目所给载体的序列可知：荧光蛋白基因中有EcoRⅠ切割位点，在不破坏荧光蛋白基因的前提下，只能选择MunⅠ、XhoⅠ切割载体，由于启动子中含有这两种酶的识别序列，故不能用这两种酶切割启动子，MunⅠ和EcoRI是同尾酶，XhoⅠ和SalI是同尾酶，故可以用EcoRI和SalI切割调控序列，由于荧光蛋白基因的转录方向为从右向左，故在F1～F7末端添加的序列所对应的限制酶SalI，在R末端添加的序列所对应的限制酶是EcoRI。该实验中，需要用EcoRI和SalI切割调控序列，MunⅠ、XhoⅠ切割载体，需要用DNA连接酶构建基因表达载体，PCR扩增的过程中还需要耐高温的DNA聚合酶，共需要6种酶的参与，即EcoRI、SalI、MunI、XhoI、DNA连接酶、DNA聚合酶。 【小问3详解】 含F1～F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，说明含F1～F6与R扩增产物的载体上有RNA聚合酶的结合位点，即含有完整的启动子，可以正常的表达；含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光，说明荧光蛋白基因未表达，可能是由于F7与R扩增产物不含完整启动子，荧光基因不表达。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $