精品解析：天津市四校联考2024-2025学年高二下学期7月期末生物试题

2024~2025学年度第二学期期末四校联考高二生物学 一、单选题（本题共20小题，每题2分，共40分） 1. 肺炎是由病原微生物、理化因素、免疫损伤、过敏及药物等因素引起的炎症，可分为细菌性肺炎、非典型病原体肺炎（如支原体肺炎等）、病毒性肺炎。下列相关叙述正确的是（　　） A. 细菌、支原体和病毒都含有糖类且都不含有细胞核 B. 细菌、支原体和病毒都属于原核生物 C. 细菌、支原体和病毒都可用普通培养基进行培养 D. 抑制细胞壁合成的药物对非典型病原体肺炎有效，对病毒性肺炎无效 2. 下图是生物体细胞内部分有机化合物的概念图。下列有关叙述错误的是（　　） A. 不同氨基酸的R基一定不同，人体细胞可合成非必需氨基酸 B. 宿主细胞的RNA—蛋白质复合物中的蛋白质可能来自病毒 C. 烟草花叶病毒的遗传信息储存在c中，其基本单位是核糖核苷酸 D. 图中DNA 是多聚体，则构成其脱氧核糖的组成元素为C、H、O、N、P 3. 研究者发现一种肉眼可见的细长型异类细菌，其菌体长度是一般细菌的5000倍，基因数量是常规细菌的3倍，基因组与核糖体包裹在同一囊泡中，另一个囊泡充满了水等物质，占总体积的73%。下列叙述错误的是（ ） A. 囊泡中的水以结合水为主，是良好的溶剂 B. 基因组与核糖体的包裹利于基因高效表达 C. 菌体细长利于该细菌与外界进行物质交换 D. 包裹基因组囊泡的发现为细胞的演化历程提供证据 4. 下列关于真核细胞的结构与功能的叙述，正确的是（　　） A. 线粒体能够通过细胞骨架移动，其数目可随细胞代谢需求变化 B. 细胞质基质、线粒体基质和叶绿体基质中均含有DNA和RNA，种类不完全相同 C. 胰岛B细胞中粗面内质网比口腔上皮细胞更发达，而高尔基体数量相对较少 D. 溶酶体内的水解酶由高尔基体合成后，经囊泡运输至溶酶体储存 5. 脂筏模型被认为是对细胞膜流动镶嵌模型的重要补充：脂筏是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，其中的胆固醇就像胶水一样，对鞘磷脂亲和力很高，并特异吸收或排出某些蛋白质（如某些跨膜蛋白质、酶等），形成一些特异蛋白聚集的区域。推测下列叙述正确的是（　　） A. 图中脂筏跨膜蛋白可能代表运输物质的蛋白质，其跨膜区段的氨基酸具有较强的亲水性 B. “脂筏模型”比“流动镶嵌模型”更能代表生物膜的特性 C. 脂筏模型表明脂质和蛋白质在膜上的分布是不均匀的 D. 脂筏区域在动植物细胞中都有广泛分布 6. 泡菜、腐乳、米酒和米醋等传统发酵食品的制作均依赖特定微生物的作用，下列叙述正确的是（　　） A. 泡菜坛需完全装满并密封，以防止乳酸菌代谢产生的气体导致发酵液溢出 B. 腐乳制作过程中，毛霉分泌的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 C. 制作米酒时，需将蒸熟的米饭立即与酒曲混合，并在高温环境下保温以加速发酵 D. 醋酸菌在无氧条件下可将乙醇转化为醋酸，因此米醋制作需在较低温度下进行 7. 下列操作能达到灭菌目的的是（ ） A. 用免洗酒精凝胶擦手 B. 制作泡菜前用开水烫洗容器 C. 在火焰上灼烧接种环 D. 防疫期间用石炭酸喷洒教室 8. 下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，错误的是（　　） A. 选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源 B. 配制培养基时，需先进行高压蒸汽灭菌，再调节pH至中性或弱碱性 C. 平均每克土壤中分解尿素的细菌数约为2.2×108个 D. 实验需设置未接种的培养基作对照，以验证培养基的灭菌效果 9. 下列关于细胞工程的叙述中，错误的是（ ） A. 动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体 B. 动物体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植 C. 植物体细胞杂交包括细胞融合和植物植物组织培养过程 D. 动物细胞培养可用胰蛋白酶进行处理获得单个细胞 10. 线粒体DNA突变会导致多种线粒体遗传病。为了研究线粒体遗传病的分子机制，可构建永生淋巴细胞系和转线粒体细胞系，构建过程如图所示。淋巴细胞被EB病毒（EBV）感染后能获得可无限增殖的永生淋巴细胞，但该细胞会被BrdU杀死，p°细胞不会被BrdU杀死，但其在含有尿嘧啶和丙酮酸的培养基中才能生长。下列叙述错误的是（　　） A. 诱导细胞融合时，灭活病毒可使细胞接触处的蛋白质和脂质分子重新排布 B. 由图可知，永生淋巴细胞提供线粒体DNA，P°细胞提供细胞核 C. 为了筛选出转线粒体细胞，选择培养基中应添加BrdU，不添加尿嘧啶和丙酮酸 D. 经选择培养基筛选后，还需要进行克隆化培养和抗体检测 11. 右图为玉米（染色体数为2n）组织培养的相关研究，亲本植物的基因型为Aa，A、B、C、D表示以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，图中融合细胞只考虑两两融合。下列叙述正确的是（　　） A. 图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，接着用次氯酸钠处理30min后，最后用无菌水清洗2~3次 B. 研究中A、B、C、D的染色体数分别是1n、2n、2n、4n C. 图中①表示再分化过程，A过程得到的子代植株基因型为Aa D. 在研究过程中，用显微镜可以观察到愈伤组织的各细胞形态大小一致 12. 土壤盐渍化是目前制约我国部分地区农业生产的重要原因之一。我国科学家利用甲、乙两种植物培育新品种耐盐植株的过程如下图所示，序号代表过程或结构。下列分析错误的是（ ） A. ①可以使用物理法或化学法诱导原生质体融合 B. 由愈伤组织得到④需要脱分化、再分化等过程 C. 生长素和细胞分裂素的比值高有利于根的分化 D 该过程打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种 13. 植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，相关叙述正确的是（ ） A. 细胞产物的工厂化生产是利用植物细胞培养技术获得次生代谢物 B. 利用植物顶端分生组织培养的脱毒苗具有抗病毒的特点 C. 利用花药离体培养获得玉米幼苗，直接从中选择出具有优良性状的个体 D. 快速繁殖花卉过程中，可以改良植物的性状 14. 在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基因的表达，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理，使胚胎的发育率和妊娠率提高，具体培育流程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物 B. 胚胎移植前应对代孕母猴进行同期发情处理 C. 将组蛋白去甲基化和去（脱）乙酰化，有利于重构胚的分裂和发育 D. 形成重构胚后可加入化学药物将其激活，待发育至桑葚胚或囊胚再进行胚胎移植 15. CRISPR/Cas9是一种高效的基因编辑技术, Cas9基因表达的Cas9 蛋白像一把“分子剪刀”，在单链向导RNA（SgRNA）引导下，切割DNA 双链以敲除目标基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因编辑技术的工作原理如图所示，下列分析错误的是（　　） A. 构建重组质粒时，SgRNA 编码序列需要插入到质粒的启动子的下游 B. SgRNA 和Cas9 蛋白形成复合体后,其功能类似限制酶 C. 根据目标DNA 设计相应的SgRNA，可实现对目标 DNA的定点切割 D. CRISPR/Cas9识别目标 DNA 序列主要与Cas9蛋白的特异性相关 16. 人干扰素（IFN）是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时，每个细胞最多只能产生100~1000个干扰素分子，而用基因工程技术改造的大肠杆菌发酵生产（原理如图），在1~2天内每个菌体能产生20万个干扰素分子。天然的干扰素在体外保存相当困难，如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸变为丝氨酸，在一定条件下可以延长保存时间。下列说法错误的是（　　） A. 本研究中基因工程核心步骤用到酶有限制酶、DNA连接酶，其作用部位都是磷酸二酯键 B. 将重组质粒导入受体细胞时常用Ca2+处理大肠杆菌 C. 除大肠杆菌外，还可以利用酵母菌做受体菌制备干扰素 D. 为延长保存时间，需对干扰素的氨基酸序列进行直接改造 17. 下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（　　） A. 图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B. 利用聚乙二醇、灭活的病毒和电融合等方法均可诱导细胞融合获得乙 C. 用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D. 丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 18. 温度是影响实验成功的重要条件之一、下列实验操作中，所需温度最低的是（　　） A. 用斐林试剂检测梨匀浆中的还原糖 B. 用二苯胺试剂鉴定洋葱的DNA粗提取物 C. 观察叶绿体和细胞质的流动 D. 用PCR仪自动完成延伸步骤 阅读下面的材料，完成问题。 利用基因工程对动植物的遗传物质进行改造，可制作动植物生物反应器，在药物蛋白，疫苗等的生产上有着广泛的应用，我国在这方面也取得重大进展 材料一：动物生物反应器的研究开发重点是动物乳腺反应器和动物血液反应器。我国“动物乳腺生物反应器”研究取得重要成果，7只含有人生长激素基因的兔子在深圳培育成功，还有一批已接受转基因胚胎移植的牛和羊等待最后检测。 材料二：我国对植物生物反应器研究的成果有： 成果1将乙型肝炎病毒包膜的蛋白基因导入马铃薯和番茄中，获得了高效表达该外源基因的工程植株。 成果2已将产毒素大肠杆菌热敏毒素b亚基及定居因子CS6B抗原蛋白基因导入马铃薯中，获得了高效表达重组抗原蛋白的转基因马铃薯植株。 成果3已成功地在烟草叶片中大量表达出与TMV外壳蛋白融合的多个口蹄疫病毒表面抗原小肽，并成功从烟草叶肉细胞中提取了该物质。 成果4建立了农杆菌介导的胡萝卜转化系统，已在胡萝卜中表达出了霍乱毒素b亚单位（CTB）。 19. 下列关于动植物生物反应器的描述正确的是（　　） A. 7只含有人生长激素基因的兔子所含目的基因和人体内生长激素基因的启动子相同 B. 动物血液反应器和动物乳腺反应器相比的优点是没有性别和年龄的限制 C. 制作动物乳腺生物反应器需要利用显微注射法把目的基因导入雌牛的乳腺细胞中 D. 农杆菌介导的胡萝卜转化系统中，农杆菌的Ti质粒进入受体细胞完成转化 20. 利用动植物生物反应器生产疫苗、药物蛋白等产品是一个复杂的过程，下面分析正确的是（　　） A. 植物生物反应器生产的乙型肝炎病毒包膜的蛋白、CTB等物质属于单克隆抗体 B. 动植物生物反应器生产多肽、蛋白质都一定需核糖体、内质网和高尔基体的参与 C. 由上述材料可大致推测出不同生物共用一套遗传密码 D. 利用转基因马铃薯的块茎进行繁殖，后代会发生性状分离 二、非选择题（本大题共5小题，共60分） 21. 材料一：图1为某病毒的结构示意图。图2是该病毒刺突蛋白S的部分片段结构示意图，刺突蛋白S能与宿主细胞上的特异性受体结合并介导病毒入侵细胞。图3是该病毒核酸的部分结构示意图。请回答下列问题： 材料二：人体血糖维持相对稳定对于保障细胞正常代谢至关重要，如图显示了胰岛素调节血糖平衡的部分机理。GLUT-4是一种运输葡萄糖的膜蛋白，仅存在于胰岛素敏感的骨骼肌、心肌和脂肪细胞中。质膜上GLU T-4蛋白的数量受胰岛素调节。在胰岛素作用下，细胞内发生一系列生理反应，使质膜上的 GLUT-4蛋白增加，进而引起血糖浓度下降。 （1）该病毒的囊膜来源于宿主细胞的细胞膜，其主要成分是________，病毒刺突蛋白S的合成场所在________。 （2）图3方框中核苷酸的名称是________，该病毒的遗传物质完全水解可以得到的物质有________种。图2所示片段是由________种氨基酸脱水缩合而成。 （3）图中的双层膜的细胞结构是___________；在蛋白质合成分泌过程中，为生命活动提供能量的细胞 器是___________。 （4）葡萄糖进入脂肪细胞后可以合成甘油三酯，以甘油三酯为代表的脂质对维持人体健康有 着重要作用。青少年体内脂质过少不利于生长发育，下列解释合理的________。 A. 脂肪可以提供能量来源 B. 脂肪有维持体温恒定的作用 C. 胆固醇可以作为合成性激素的原料 D. 胆固醇是质膜重要的结构成分 （5）图细胞的细胞核中显示了两种核酸，含有碱基ATCG的核苷酸有________。 A. 4种 B. 5种 C. 7种 D. 8种 （6）图中从基因调控GLUT-4合成，到质膜上出现GLUT-4蛋白，需依次经历以下过程：_______。（选择所需的编号并正确排序） ① 内质网加工运输GLUT-4蛋白②核糖体初步合成GLUT-4蛋白③细胞核相关基因将信息传 递到细胞质④高尔基体加工转运GLUT-4蛋白⑤GLUT-4蛋白直接整合到质膜⑥ 囊泡包裹GLUT-4蛋白整合到质膜 （7）科学家尝试提取人胰岛素的基因，并通过重组DNA技术连接到酵母菌的基因组上，从而实现人胰岛素的规模化生产。以上过程中运用到的生物科学技术是________。 A. 免疫治疗技术 B. 发酵工程 C. 基因编辑技术 D. 生态学技术 （8）人胰岛素制剂在制造、储存、运输过程中要特别注意条件控制，以保证胰岛素的有效性。下列可能导致胰岛素失效的有________。 A. 制造过程中强碱性物质污染，导致胰岛素制剂处于强碱环境中 B. 储存设施内部紫外灯意外打开，胰岛素制剂接受了过量射线照射 C. 运输过程中制冷设施故障，胰岛素制剂暴露在过高温环境中 22. 甜米酒是我国的传统酒种，某酿酒厂以无核黄皮果（富含维生素、有机酸及特殊的香味）为辅料研制出黄皮甜米酒，该酒具有消食、润肺和清热解毒等功效。制作黄皮甜米酒的工艺流程如图1所示。回答下列问题： （1）生活中，我们也可以利用传统发酵技术来生产食品，比如果酒或果醋。下列关于果酒和果醋制作的叙述，不正确的是____。 A. 果酒和果醋制作分别需要醋酸菌和酵母菌 B. 制作果醋需要不断充入氧气 C. 果醋是在果酒基础上，进行醋酸发酵酿制而成 D. 果酒制作过程中需始终拧紧瓶盖以防止杂菌污染 （2）与现代发酵技术相比，传统发酵技术的特点是____。 A. 能够保证食品安全 B. 能大规模生产 C. 不易控制发酵过程 D. 生产效率较高 （3）我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“世人云：米过酒甜，此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”下列有关叙述不正确的是____。 A. “米过酒甜”是因为米中糖类物质过量，发酵停止时仍未被完全消耗 B. “酒冷沸止”说明微生物的代谢产热和释放CO2逐渐停止 C. “曲势尽”的原因可能是米酒中pH或酒精含量升高 D. 酿制米酒所用微生物的呼吸类型为兼性厌氧 （4）对酒曲微生物进行分离纯化时，需制备LB（培养细菌）和YPD（培养真菌）培养基。LB培养基的成分为胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水，此培养基为____（填写编号） ①合成培养基②天然培养基③液体培养基④半固体培养基 ⑤固体培养基 ⑥通用培养基 ⑦选择培养基 ⑧鉴别培养基 （5）将不同种酒曲稀释液涂布于LB和YPD培养基上，培养一段时间后，挑取长出的单菌落，转移到相对应的新LB和YPD培养基中继续分离纯化培养，此过程中YPD培养基中需加入一定量的四环素和链霉素，其目的是____。 （6）在制作黄皮甜米酒的过程中，为确定黄酒高活性干酵母（YWBY）的添加量及发酵时间，研究人员进行了相关实验，实验结果如图2所示。根据实验结果制作黄皮甜米酒时，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是____。YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是____。 酵母发酵产生的乙醇除了可以作为我们日常的饮品，乙醇也可作为可再生清洁能源，具有良好的应用前景。酵母菌可利用纤维素生产乙醇，此过程中产生的乙酸等物质会抑制酵母菌的生长和发酵，进而影响乙醇的产量。为选择合适的菌株，提高乙醇产量，科研人员进行下列实验。 （7）在现代发酵工业中，酵母菌发酵通常在____中进行，在发酵之前必须采用高压蒸汽对培养基和附属设备等进行____。 （8）科研人员基于前期实验，获得两株高表达MRP8的酵母菌菌种P1和P2。将菌种____后，分别涂布于不同的培养基上，培养一段时间后，记录菌落生长情况，结果如图3。实验结果表明____。 （9）将野生型酵母菌和P2菌分别接种于含4.8g/L乙酸的两个发酵装置中。一段时间后，检测其中葡萄糖消耗量和乙醇的生成量，结果如图4。 科研人员认为：在实际生产中，使用P2菌株比使用野生型菌株更有利于提高乙醇产量，判断的依据是____。 23. 人心肌细胞中肌钙蛋白由三个结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中肌钙蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌损伤的特异指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。 （1）细胞培养应在5%的CO2培养箱中进行，CO2的作用是________，为防止有害代谢物的积累，可采用________的方法，以便清除代谢物。多次注射抗原cTnI，取___________内的B淋巴组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，不同于诱导植物原生质体融合的方法是________。融合的细胞将________（填“贴壁生长”/“悬浮生长”）生长。 （2）①②为筛选过程，则甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，通过多次的________最终筛选得到的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 （3）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部分结合。据图可知该检测方法中，酶标抗体的作用是_______，可通过测定产物量来判断待测抗原量，若酶标抗体是抗cTnI的单克隆抗体，则固相抗体可以用__________。 （4）为鉴定抗cTnI单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将对应抗原（cTnI蛋白）进行逐步截短，分别与纯x蛋白示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。结果证明该单克隆抗体识别抗原（cTnI蛋白）的区域大概为__________（填“40~50”、“40~55”或“40~60”）位氨基酸。 24. 图1是我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和胚胎发育潜能研究的流程。人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态（naive）和始发态（primed）．naive干细胞具有最高的发育潜能，primed干细胞全能性相对较低。图2是OGT、OGA以及细胞骨架蛋白在胚胎干细胞中表达情况的电泳图谱，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶。 （1）猴子芽体相当于_______期的胚胎，过程③的起点细胞应取自芽体的_______部位。 （2）过程④⑤形成的胚胎是_______。过程⑥需对受体母猴进行的处理是_______。 （3）据图2推测，naive干细胞发育潜能更高的原因可能是_______；该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作为对照的作用是_______。 （4）过程①需在图2中的诱导培养基中完成，目的是_______。与过程①相比，过程②培养液中还应添加_______。 25. 我国科学家尝试构建地衣芽孢杆菌基因编辑系统，并通过将外源vgb基因定向插入19T-pfIB 质粒中对该系统进行初步验证，主要过程如图1.请回答下列问题。 （1）步骤①利用已构建的质粒19T-pflB，通过反向 PCR获得左右同源片段，除图中已有的组分外，还应添加缓冲液（Mg2+）和___________（答两点）等。下表为pflB部分基因序列和 设计的相关引物，可选用的引物是___________（填编号）。 DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列） pflB基因 5'-TCGCACACCTGACTACAATT……TCGCAATGGCAATCGGCAAACT-3' 3'-AGCGTGTGGACTGATGTTAA……AGCGTTACCGTTAGCCGTTTGA-5' PCR引物 ① 5'ACGGGATCCTTGTAGTCAGGTGTGCGA3' ② 5'ACGGGATCCTTTGCCGATTGCCATTGC3' ③ 5'AACTGCAGTCGCACACCTGACTACAA3' ④ 5'AACTGCAGGCAATGGCAATCGGCAAA3' 注：下划线标注为BamHI识别序列5'-G↓GATCC-3'和PstI识别序列 5'-CTGCA↓G-3' （2）步骤②双酶切时，需使用限制酶a和限制酶b分别是_________和________，影响DNA连接酶反应速率的因素有反应体系的温度、pH、酶浓度和___________（答出两点）等。 （3）图2是质粒PNZTK-PFTF-vgb转入地衣芽孢杆菌后，将目的基因插入基因组的过程示意图。 将受体菌接种在含四环素和___________（含/不含）卡那霉素培养基中培养一段时间后，因没有选择压力，会导致发生双交换的质粒丢失。挑取一定数量的单菌落，接种到含四环素的培养基上，并一一对应接种到含卡那霉素的培养基上，实验结果如图3所示。其中在两种培养基均能生长的菌株是只发生单交换或___________的受体菌。 （4）科学家通过分析vgb基因在重组菌株及原始菌株中的表达水平验证该基因编辑系统。分析时需要以rpsE基因（核糖体S5蛋白基因）为参照，该基因表达的特点是___________，可采用___________的方法检测基因表达的产物量。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2024~2025学年度第二学期期末四校联考高二生物学 一、单选题（本题共20小题，每题2分，共40分） 1. 肺炎是由病原微生物、理化因素、免疫损伤、过敏及药物等因素引起的炎症，可分为细菌性肺炎、非典型病原体肺炎（如支原体肺炎等）、病毒性肺炎。下列相关叙述正确的是（　　） A. 细菌、支原体和病毒都含有糖类且都不含有细胞核 B. 细菌、支原体和病毒都属于原核生物 C. 细菌、支原体和病毒都可用普通培养基进行培养 D. 抑制细胞壁合成的药物对非典型病原体肺炎有效，对病毒性肺炎无效 【答案】A 【解析】 【详解】A、细菌、支原体和病毒都含有核酸，核酸中含有五碳糖属于糖类，细菌和支原体属于原核生物，病毒是非细胞结构生物，都不含有细胞核，A正确； B、细菌和支原体是原核生物，没有核膜包被的细胞核，病毒是非细胞结构生物，B错误； C、病毒是非细胞结构生物，必须寄生在活细胞中才能增殖，所以病毒不能在普通培养基中进行培养，C错误； D、支原体没有细胞壁，抑制细胞壁合成的药物对支原体肺炎和病毒性肺炎均无效，D错误。 故选A。 2. 下图是生物体细胞内部分有机化合物的概念图。下列有关叙述错误的是（　　） A. 不同氨基酸的R基一定不同，人体细胞可合成非必需氨基酸 B. 宿主细胞的RNA—蛋白质复合物中的蛋白质可能来自病毒 C. 烟草花叶病毒的遗传信息储存在c中，其基本单位是核糖核苷酸 D. 图中DNA 是多聚体，则构成其脱氧核糖的组成元素为C、H、O、N、P 【答案】D 【解析】 【分析】由题图信息分析可知，a属于脂质，则a可能是脂肪、磷酸或固醇类物质；b的基本组成单位是氨基酸，则b是蛋白质；c和DNA组成核酸，则c是RNA。 【详解】A、氨基酸的不同在于R基的不同，不同氨基酸的R基一定不同，非必需氨基酸能在人体内合成，不能在人体内合成的氨基酸是必需氨基酸，A正确； B、RNA病毒侵染时将自身的逆转录酶、RNA复制酶一并注入，宿主细胞的RNA—蛋白质复合物中的蛋白质可能来自病毒，B正确； C、烟草花叶病毒是RNA病毒，其遗传信息储存在c（RNA）中，其基本单位是核糖核苷酸，C正确； D、图中DNA 是多聚体，则构成其脱氧核糖核苷酸的组成元素为C、H、O、N、P，脱氧核糖只含C、H、O，D错误。 故选D。 【点睛】 3. 研究者发现一种肉眼可见的细长型异类细菌，其菌体长度是一般细菌的5000倍，基因数量是常规细菌的3倍，基因组与核糖体包裹在同一囊泡中，另一个囊泡充满了水等物质，占总体积的73%。下列叙述错误的是（ ） A. 囊泡中的水以结合水为主，是良好的溶剂 B. 基因组与核糖体的包裹利于基因高效表达 C. 菌体细长利于该细菌与外界进行物质交换 D. 包裹基因组囊泡的发现为细胞的演化历程提供证据 【答案】A 【解析】 【分析】1、细胞内的水的存在形式是自由水和结合水，结合水是细胞结构的重要组成成分；自由水是良好的溶剂，是许多化学反应的介质，自由水还参与许多化学反应，自由水对于营养物质和代谢废物的运输具有重要作用。 2、真核生物的DNA主要分布在细胞核中，此外在细胞质中也有分布，都与外界环境分隔开。 【详解】A、细胞中水以自由水为主，自由水是良好的溶剂，A错误； B、基因组与核糖体包裹在同一囊泡中，该现象可使基因组在特定空间高效表达，B正确； C、菌体细长，则表面积和体积之比更大，即相对表面积更大，更有利于与外界进行物质交换，C正确； D、真核细胞中的DNA通常位于细胞核或线粒体、叶绿体中，而原核细胞的DNA也位于细胞内，故包裹基因组囊泡的发现为细胞的演化历程提供证据，D正确。 故选A。 4. 下列关于真核细胞的结构与功能的叙述，正确的是（　　） A. 线粒体能够通过细胞骨架移动，其数目可随细胞代谢需求变化 B. 细胞质基质、线粒体基质和叶绿体基质中均含有DNA和RNA，种类不完全相同 C. 胰岛B细胞中粗面内质网比口腔上皮细胞更发达，而高尔基体数量相对较少 D. 溶酶体内的水解酶由高尔基体合成后，经囊泡运输至溶酶体储存 【答案】A 【解析】 【详解】A、线粒体的移动依赖细胞骨架的运输功能，且其数量可随细胞代谢需求（如能量需求增加时）而增加，A正确； B、细胞质基质中不含DNA，仅含RNA（如tRNA、rRNA等），而线粒体基质和叶绿体基质含有自身的DNA和RNA，B错误； C、胰岛B细胞分泌胰岛素（分泌蛋白），粗面内质网和高尔基体均发达，而非高尔基体数量较少，C错误； D、溶酶体水解酶由核糖体合成，经内质网加工后通过高尔基体形成的囊泡运输至溶酶体，而非由高尔基体直接合成，D错误。 故选A。 5. 脂筏模型被认为是对细胞膜流动镶嵌模型的重要补充：脂筏是质膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微结构域，其中的胆固醇就像胶水一样，对鞘磷脂亲和力很高，并特异吸收或排出某些蛋白质（如某些跨膜蛋白质、酶等），形成一些特异蛋白聚集的区域。推测下列叙述正确的是（　　） A. 图中脂筏跨膜蛋白可能代表运输物质的蛋白质，其跨膜区段的氨基酸具有较强的亲水性 B. “脂筏模型”比“流动镶嵌模型”更能代表生物膜的特性 C. 脂筏模型表明脂质和蛋白质在膜上的分布是不均匀的 D. 脂筏区域在动植物细胞中都有广泛分布 【答案】C 【解析】 【分析】细胞膜的流动镶嵌模型：（1）磷脂双分子层构成膜的基本支架，这个支架是可以流动的；（2）蛋白质分子有的镶嵌在磷脂双分子层表面，有的部分或全部嵌入磷脂双分子层中，有的横跨整个磷脂双分子层。大多数蛋白质也是可以流动的；（3）在细胞膜的外表，少数糖类与蛋白质结合形成糖蛋白。除糖蛋白外，细胞膜表面还有糖类与脂质结合形成糖脂。 【详解】A、图中脂筏跨膜蛋白可能代表运输物质的通道蛋白，其跨膜区段的氨基酸与磷脂分子的疏水段接触，说明其具有较强的疏水性，A错误； B、由题意可知，脂筏模型认为膜的部分区域流动性因含有大量胆固醇而降低，“流动镶嵌模型”更能代表所有生物膜的特性，B错误； C、脂筏是富含胆固醇和鞘磷脂区域，还能特异聚集某些蛋白质，表明脂质和蛋白质在膜上分布不均匀，C正确； D、由题意可知，脂筏区域富含胆固醇，胆固醇是动物细胞膜的重要组成成分，植物细胞膜不含胆固醇，因此脂筏区域在动物细胞中广泛分布，而植物细胞中不含胆固醇，D错误。 故选C。 6. 泡菜、腐乳、米酒和米醋等传统发酵食品的制作均依赖特定微生物的作用，下列叙述正确的是（　　） A. 泡菜坛需完全装满并密封，以防止乳酸菌代谢产生的气体导致发酵液溢出 B. 腐乳制作过程中，毛霉分泌的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 C. 制作米酒时，需将蒸熟的米饭立即与酒曲混合，并在高温环境下保温以加速发酵 D. 醋酸菌在无氧条件下可将乙醇转化为醋酸，因此米醋制作需在较低温度下进行 【答案】B 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。 4、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、泡菜制作依赖乳酸菌的无氧呼吸，但初期坛内残留的氧气可能使杂菌如酵母菌等繁殖产气，因此装坛时需留约1/3空间，A错误； B、毛霉产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，脂肪酶分解脂肪为甘油和脂肪酸，B正确； C、蒸熟的米饭需冷却至室温后再加入酒曲，高温会杀死酒曲中的霉菌和酵母菌。酵母菌酒精发酵需在20℃左右进行，高温会抑制其活性。C错误； D、醋酸菌为好氧型细菌，其将乙醇转化为醋酸需在有氧条件下进行，且最适生长温度为30-35℃，D错误。 故选B。 7. 下列操作能达到灭菌目的的是（ ） A. 用免洗酒精凝胶擦手 B. 制作泡菜前用开水烫洗容器 C. 在火焰上灼烧接种环 D. 防疫期间用石炭酸喷洒教室 【答案】C 【解析】 【分析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。 【详解】A、用免洗酒精凝胶擦手属于消毒，A错误； B、制作泡菜前用开水烫洗容器属于消毒过程，B错误； C、在火焰上灼烧接种环能达到灭菌目的，C正确； D、防疫期间用石炭酸喷洒教室，属于消毒，D错误。 故选C。 8. 下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，错误的是（　　） A. 选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源 B. 配制培养基时，需先进行高压蒸汽灭菌，再调节pH至中性或弱碱性 C. 平均每克土壤中分解尿素的细菌数约为2.2×108个 D. 实验需设置未接种的培养基作对照，以验证培养基的灭菌效果 【答案】B 【解析】 【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。 【详解】A、培养基的营养成分应该包括碳源、氮源、水和无机盐等，实验目的是分离尿素分解菌，应该以尿素为唯一氮源，A正确； B、为了防止杂菌污染，应将培养基的pH调至中性或弱碱性后，再高压蒸汽灭菌，B错误； C、将10g土壤先稀释10倍，再进行梯度稀释10000倍，然后取0.1mL进行涂布平板，若步骤④平板上统计的菌落数平均为（212+230+218）÷3=220个，则每克土壤含分解尿素的细菌数约220÷0.1×10×10000=2.2×108个，C正确； D、验证培养基的灭菌效果，可培养未接种的培养基，观察表面是否有菌落产生，D正确。 故选B。 9. 下列关于细胞工程的叙述中，错误的是（ ） A. 动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体 B. 动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植 C. 植物体细胞杂交包括细胞融合和植物植物组织培养过程 D. 动物细胞培养可用胰蛋白酶进行处理获得单个细胞 【答案】A 【解析】 【分析】1、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。 2、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 【详解】A、动物细胞融合只能得到杂种动物细胞，不能得到杂种个体，A错误； B、由于胚胎细胞的全能性高于体细胞，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，B正确； C、植物体细胞杂交技术是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术，主要包括细胞融合和植物植物组织培养过程，C正确； D、动物细胞培养可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，以获得单个细胞，D正确。 故选A。 10. 线粒体DNA突变会导致多种线粒体遗传病。为了研究线粒体遗传病的分子机制，可构建永生淋巴细胞系和转线粒体细胞系，构建过程如图所示。淋巴细胞被EB病毒（EBV）感染后能获得可无限增殖的永生淋巴细胞，但该细胞会被BrdU杀死，p°细胞不会被BrdU杀死，但其在含有尿嘧啶和丙酮酸的培养基中才能生长。下列叙述错误的是（　　） A. 诱导细胞融合时，灭活病毒可使细胞接触处的蛋白质和脂质分子重新排布 B. 由图可知，永生淋巴细胞提供线粒体DNA，P°细胞提供细胞核 C. 为了筛选出转线粒体细胞，选择培养基中应添加BrdU，不添加尿嘧啶和丙酮酸 D. 经选择培养基筛选后，还需要进行克隆化培养和抗体检测 【答案】D 【解析】 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微直接去除法以及密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法。 【详解】A、灭活的病毒能够使细胞膜上的蛋白质分子和脂质重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，A正确； B、由图可知，永生淋巴细胞提供线粒体DNA，P°细胞提供细胞核，B正确； C、因为永生淋巴细胞会被BrdU杀死，P°细胞在不含尿嘧啶和丙酮酸的培养基中不能生长，所以在选择培养基中添加BrdU，不添加尿嘧啶和丙酮酸，可以筛选出转线粒体细胞(既含有永生淋巴细胞的线粒体又含有P°细胞核的细胞)，C正确； D、转线粒体细胞系的构建不需要抗体检测，因为研究的是线粒体疾病，而不是抗体生产，D错误。 故选D。 11. 右图为玉米（染色体数为2n）组织培养的相关研究，亲本植物的基因型为Aa，A、B、C、D表示以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，图中融合细胞只考虑两两融合。下列叙述正确的是（　　） A. 图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，接着用次氯酸钠处理30min后，最后用无菌水清洗2~3次 B. 研究中A、B、C、D的染色体数分别是1n、2n、2n、4n C. 图中①表示再分化过程，A过程得到的子代植株基因型为Aa D. 在研究过程中，用显微镜可以观察到愈伤组织的各细胞形态大小一致 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养是指通过无菌操作，将离体的植物器官（如根、茎、叶、花、果实等）、组织（如形成层、皮层、胚乳等）、细胞（如体细胞、生殖细胞等）以及原生质体，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其生长、分化并发育成完整植株的技术。 【详解】A、植物组织培养中，外植体消毒时，先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，用无菌水清洗2～3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2～3次，A错误； B、研究中A为单倍体植株，体细胞中含有的染色体数目为n；B植株是植物组织培养的产物，其中含有的染色体数目为2n，C植株也是植物组织培养的产物，染色体数目也为2n，D植株是通过植物体细胞杂交获得的多倍体植株，其中含有的染色体数分别是4n，B正确； C、①表示脱分化和再分化过程，A过程为单倍体育种，单倍体植株基因型为A或a，经秋水仙素处理后A过程得到的子代植株基因型为AA或aa，C错误； D、愈伤组织是植物组织培养过程中经过脱分化过程产生的一团无定型状态的薄壁细胞，因而在研究过程中，用显微镜可以观察到愈伤组织的各细胞形态大小未必一致，D错误。 故选B。 12. 土壤盐渍化是目前制约我国部分地区农业生产的重要原因之一。我国科学家利用甲、乙两种植物培育新品种耐盐植株的过程如下图所示，序号代表过程或结构。下列分析错误的是（ ） A. ①可以使用物理法或化学法诱导原生质体融合 B. 由愈伤组织得到④需要脱分化、再分化等过程 C. 生长素和细胞分裂素的比值高有利于根的分化 D. 该过程打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种 【答案】B 【解析】 【详解】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成杂种植株的技术。植物体细胞杂交技术：（1）原理：细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。（2）过程：去壁的方法：酶解法；诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电激等。化学法是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。 【分析】A、诱导原生质体融合可以选择物理法或化学法，A正确； B、由愈伤组织得到④只需要进行再分化，B错误； C、再分化的过程，生长素和细胞分裂素的比值高有利于根的分化，C正确； D、该过程打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种，D正确。 故选B。 13. 植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用，相关叙述正确的是（ ） A. 细胞产物的工厂化生产是利用植物细胞培养技术获得次生代谢物 B. 利用植物顶端分生组织培养的脱毒苗具有抗病毒的特点 C. 利用花药离体培养获得玉米幼苗，直接从中选择出具有优良性状的个体 D. 快速繁殖花卉过程中，可以改良植物的性状 【答案】A 【解析】 【分析】由于植物细胞的次生代谢物含量很低，从植物组织提取会大量破坏植物资源，有些产物又不能或难以通过化学合成途径得到，因此人们期望利用植物细胞培养来获得目标产物，这个过程就是细胞产物的工厂化生产。植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。 【详解】A、细胞产物工厂化生产是利用植物细胞培养技术，通过促进细胞增殖，以从细胞中获得次生代谢物，A正确； B、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，用这种方法获得的植株不抗病毒，B错误； C、利用花药离体培养可获得玉米幼苗的单倍体，再经过诱导染色体数目加倍后，直接从中选择出具有优良性状的个体，这样能够极大的缩短育种年限，C错误； D、植物的快速繁殖技术是指用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，它可以保持优良品种的遗传特性，因此在运用此项技术快速繁殖花卉过程中，不能改良植物的性状，D错误。 故选A。 14. 在体细胞克隆猴培育过程中，为调节相关基因的表达，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）处理，使胚胎的发育率和妊娠率提高，具体培育流程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物 B. 胚胎移植前应对代孕母猴进行同期发情处理 C. 将组蛋白去甲基化和去（脱）乙酰化，有利于重构胚的分裂和发育 D. 形成重构胚后可加入化学药物将其激活，待发育至桑葚胚或囊胚再进行胚胎移植 【答案】C 【解析】 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、将卵母细胞培养到M II期后进行去核操作，此时细胞核退化，出现的是纺锤体—染色体复合物，故去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物，A正确； B、胚胎移植前需对供体和代孕母猴注射孕激素进行同期发情处理，保证胚胎移植入相同的生理环境，不发生免疫排斥反应，B正确； C、结合题意和图示操作可知，将组蛋白去甲基化和增加乙酰化，有利于重构胚的分裂和发育，使其完成细胞分裂和发育进程，C错误； D、重组细胞融合后，可以用物理或化学方法进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程，发育至桑葚胚或囊胚期再进行胚胎移植，D正确。 故选C。 15. CRISPR/Cas9是一种高效的基因编辑技术, Cas9基因表达的Cas9 蛋白像一把“分子剪刀”，在单链向导RNA（SgRNA）引导下，切割DNA 双链以敲除目标基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因编辑技术的工作原理如图所示，下列分析错误的是（　　） A. 构建重组质粒时，SgRNA 编码序列需要插入到质粒的启动子的下游 B. SgRNA 和Cas9 蛋白形成复合体后,其功能类似限制酶 C. 根据目标DNA 设计相应的SgRNA，可实现对目标 DNA的定点切割 D. CRISPR/Cas9识别目标 DNA 序列主要与Cas9蛋白的特异性相关 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、启动子是一段有特殊结构的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质，构建重组质粒时，SgRNA编码序列需要插入到质粒的启动子下游，便于转录产生SgRNA，A正确； B、SgRNA和Cas9蛋白形成复合体后，可切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因，其功能类似于限制酶，B正确； C、SgRNA可以特异性切割DNA位点，根据目标DNA设计相应的SgRNA，可实现对目标DNA的定点切割，C正确； D、CRISPR/Cas9识别目标DNA序列主要与SgRNA编码序列有关，D错误。 故选D。 16. 人干扰素（IFN）是机体免疫细胞产生的一类细胞因子。用白细胞生产干扰素时，每个细胞最多只能产生100~1000个干扰素分子，而用基因工程技术改造的大肠杆菌发酵生产（原理如图），在1~2天内每个菌体能产生20万个干扰素分子。天然的干扰素在体外保存相当困难，如果将干扰素分子上的一个半胱氨酸变为丝氨酸，在一定条件下可以延长保存时间。下列说法错误的是（　　） A. 本研究中基因工程核心步骤用到的酶有限制酶、DNA连接酶，其作用部位都是磷酸二酯键 B. 将重组质粒导入受体细胞时常用Ca2+处理大肠杆菌 C. 除大肠杆菌外，还可以利用酵母菌做受体菌制备干扰素 D. 为延长保存时间，需对干扰素氨基酸序列进行直接改造 【答案】D 【解析】 【详解】A、基因工程核心步骤是基因表达载体的构建，需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶，其作用部位都是磷酸二酯键，A正确； B、将重组质粒导入大肠杆菌常用钙离子处理法，B正确； C、酵母菌是真核生物，干扰素是糖蛋白，可以利用酵母菌做受体菌制备干扰素，C正确； D、为延长保存时间，对干扰素进行改造，可以利用基因工程生产干扰素，所以需通过改造干扰素基因来实现，D错误。 故选D。 17. 下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（　　） A. 图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B. 利用聚乙二醇、灭活的病毒和电融合等方法均可诱导细胞融合获得乙 C. 用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D. 丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体丁 【答案】C 【解析】 【详解】A、图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原，以刺激机体产生相应的B细胞，A正确； B、诱导动物细胞融合的方法有物理方法、化学方法等，利用聚乙二醇、灭活的病毒和电融合法等方法均可诱导动物细胞融合获得乙，B正确； C、用特定的选择培养基对乙筛选，只有杂种融合细胞能生长，未融合细胞和同种细胞的融合体不能生长，C错误； D、对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后可获得既能无限增殖又能产生单一抗体的杂交瘤细胞丁，D正确。 故选C。 18. 温度是影响实验成功的重要条件之一、下列实验操作中，所需温度最低的是（　　） A. 用斐林试剂检测梨匀浆中的还原糖 B. 用二苯胺试剂鉴定洋葱的DNA粗提取物 C. 观察叶绿体和细胞质的流动 D. 用PCR仪自动完成延伸步骤 【答案】C 【解析】 【详解】斐林试剂检测还原糖需水浴加热（50-65℃），在沸水浴条件下生成砖红色沉淀，二苯胺鉴定DNA需沸水浴（100℃）显蓝色，温度较高，观察叶绿体和细胞质流动需保持细胞活性，在常温（如25℃）下进行，无需加热，PCR延伸步骤需72℃（Taq酶最适温度），温度较高，综上分析，C符合题意，ABD不符合题意。 故选C。 阅读下面的材料，完成问题。 利用基因工程对动植物的遗传物质进行改造，可制作动植物生物反应器，在药物蛋白，疫苗等的生产上有着广泛的应用，我国在这方面也取得重大进展 材料一：动物生物反应器的研究开发重点是动物乳腺反应器和动物血液反应器。我国“动物乳腺生物反应器”研究取得重要成果，7只含有人生长激素基因的兔子在深圳培育成功，还有一批已接受转基因胚胎移植的牛和羊等待最后检测。 材料二：我国对植物生物反应器研究的成果有： 成果1将乙型肝炎病毒包膜的蛋白基因导入马铃薯和番茄中，获得了高效表达该外源基因的工程植株。 成果2已将产毒素大肠杆菌热敏毒素b亚基及定居因子CS6B抗原蛋白基因导入马铃薯中，获得了高效表达重组抗原蛋白的转基因马铃薯植株。 成果3已成功地在烟草叶片中大量表达出与TMV外壳蛋白融合的多个口蹄疫病毒表面抗原小肽，并成功从烟草叶肉细胞中提取了该物质。 成果4建立了农杆菌介导的胡萝卜转化系统，已在胡萝卜中表达出了霍乱毒素b亚单位（CTB）。 19. 下列关于动植物生物反应器的描述正确的是（　　） A. 7只含有人生长激素基因的兔子所含目的基因和人体内生长激素基因的启动子相同 B. 动物血液反应器和动物乳腺反应器相比的优点是没有性别和年龄的限制 C. 制作动物乳腺生物反应器需要利用显微注射法把目的基因导入雌牛的乳腺细胞中 D. 农杆菌介导胡萝卜转化系统中，农杆菌的Ti质粒进入受体细胞完成转化 20. 利用动植物生物反应器生产疫苗、药物蛋白等产品是一个复杂的过程，下面分析正确的是（　　） A. 植物生物反应器生产的乙型肝炎病毒包膜的蛋白、CTB等物质属于单克隆抗体 B. 动植物生物反应器生产多肽、蛋白质都一定需核糖体、内质网和高尔基体的参与 C. 由上述材料可大致推测出不同生物共用一套遗传密码 D. 利用转基因马铃薯的块茎进行繁殖，后代会发生性状分离 【答案】19. B 20. C 【解析】 【分析】转基因动物生产药物： （1）基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子（原理：基因的选择性表达）。 （2）成果：乳腺生物反应器。 （3）过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁产生所需要的药物。 【19题详解】 A、7只含有人生长激素基因的兔子能够生产人的生长激素，其细胞中所含目的基因和人体内生长激素基因的启动子不同，其含有的启动子应该是兔子乳腺细胞中特异性表达的启动子，A错误； B、动物血液反应器和动物乳腺反应器相比的优点是没有性别和年龄的限制，因而生产能力更强，B正确； C、制作动物乳腺生物反应器需要利用显微注射法把目的基因牛的受精卵中，培育出转基因牛，C错误； D、农杆菌介导的胡萝卜转化系统中，农杆菌的T-DNA进入受体细胞完成转化，D错误。 故选B。 【20题详解】 A、植物生物反应器生产的乙型肝炎病毒包膜的蛋白、CTB等物质不属于单克隆抗体，是基因工程在医学上的应用，A错误； B、动植物生物反应器生产多肽、蛋白质未必都一定需核糖体、内质网和高尔基体的参与，但一定需要核糖体的参与，B错误； C、由上述材料可大致推测出不同生物共用一套遗传密码，否则基因工程无法实现，这是生物具有共同起源的证据，C正确； D、利用转基因马铃薯的块茎进行繁殖，这种生殖方式为无性繁殖，产生的后代不会发生性状分离，D错误。 故选C。 二、非选择题（本大题共5小题，共60分） 21. 材料一：图1为某病毒的结构示意图。图2是该病毒刺突蛋白S的部分片段结构示意图，刺突蛋白S能与宿主细胞上的特异性受体结合并介导病毒入侵细胞。图3是该病毒核酸的部分结构示意图。请回答下列问题： 材料二：人体血糖维持相对稳定对于保障细胞正常代谢至关重要，如图显示了胰岛素调节血糖平衡的部分机理。GLUT-4是一种运输葡萄糖的膜蛋白，仅存在于胰岛素敏感的骨骼肌、心肌和脂肪细胞中。质膜上GLU T-4蛋白的数量受胰岛素调节。在胰岛素作用下，细胞内发生一系列生理反应，使质膜上的 GLUT-4蛋白增加，进而引起血糖浓度下降。 （1）该病毒的囊膜来源于宿主细胞的细胞膜，其主要成分是________，病毒刺突蛋白S的合成场所在________。 （2）图3方框中核苷酸的名称是________，该病毒的遗传物质完全水解可以得到的物质有________种。图2所示片段是由________种氨基酸脱水缩合而成。 （3）图中的双层膜的细胞结构是___________；在蛋白质合成分泌过程中，为生命活动提供能量的细胞 器是___________。 （4）葡萄糖进入脂肪细胞后可以合成甘油三酯，以甘油三酯为代表的脂质对维持人体健康有 着重要作用。青少年体内脂质过少不利于生长发育，下列解释合理的________。 A. 脂肪可以提供能量来源 B. 脂肪有维持体温恒定的作用 C. 胆固醇可以作为合成性激素的原料 D. 胆固醇是质膜重要的结构成分 （5）图细胞的细胞核中显示了两种核酸，含有碱基ATCG的核苷酸有________。 A. 4种 B. 5种 C. 7种 D. 8种 （6）图中从基因调控GLUT-4合成，到质膜上出现GLUT-4蛋白，需依次经历以下过程：_______。（选择所需的编号并正确排序） ① 内质网加工运输GLUT-4蛋白②核糖体初步合成GLUT-4蛋白③细胞核相关基因将信息传 递到细胞质④高尔基体加工转运GLUT-4蛋白⑤GLUT-4蛋白直接整合到质膜⑥ 囊泡包裹GLUT-4蛋白整合到质膜 （7）科学家尝试提取人胰岛素的基因，并通过重组DNA技术连接到酵母菌的基因组上，从而实现人胰岛素的规模化生产。以上过程中运用到的生物科学技术是________。 A. 免疫治疗技术 B. 发酵工程 C. 基因编辑技术 D. 生态学技术 （8）人胰岛素制剂在制造、储存、运输过程中要特别注意条件控制，以保证胰岛素的有效性。下列可能导致胰岛素失效的有________。 A. 制造过程中强碱性物质污染，导致胰岛素制剂处于强碱环境中 B. 储存设施内部紫外灯意外打开，胰岛素制剂接受了过量射线照射 C. 运输过程中制冷设施故障，胰岛素制剂暴露在过高温环境中 【答案】（1） ①. 脂质和蛋白质 ②. 宿主细胞的核糖体 （2） ①. 胞嘧啶核糖核苷酸 ②. 6##六 ③. 3##三 （3） ①. 细胞核##核膜 ②. 线粒体 （4）ABCD （5）C （6）③②①④⑥ （7）B （8）ABC 【解析】 【分析】病毒无细胞结构，一般由蛋白质和核酸组成，病毒内只有一种核酸，因此病毒的遗传物质为DNA或RNA。 【小问1详解】 细胞膜主要由脂质（磷脂）和蛋白质组成，病毒无细胞结合，合成病毒刺突蛋白S的场所是宿主细胞的核糖体。 【小问2详解】 分析题图3，含有碱基U，说明该化合物是RNA，则方框中核苷酸的名称是胞嘧啶核糖核苷酸。该病毒的遗传物质为RNA，彻底水解后得到的物质为磷酸、核糖、A、G、C、U四种碱基共六种物质。氨基酸的种类由R基决定，图2所示片段是由3种氨基酸脱水缩合而成。 【小问3详解】 图中含有的双层膜结构的细胞结构是核膜（或细胞核）；在蛋白质合成分泌过程中，为生命活动提供能量的细胞器是线粒体，线粒体通过有氧呼吸将有机物中的化学能转化为ATP中的能量，为细胞的生命活动提供动力。 【小问4详解】 A、脂肪可以提供能量来源，在青少年生长发育过程中，身体需要足够的能量来支持各种生理活动，如细胞分裂、生长等，A正确； B、脂肪有维持体温恒定的作用，对维持身体正常体温有重要意义，B正确； C、胆固醇可以作为合成性激素的原料，性激素对青少年的生殖器官发育和第二性征的出现等生长发育过程有重要影响，C正确； D、胆固醇是构建动物细胞质膜重要的结构成分，D正确。 故选ABCD。 【小问5详解】 图细胞的细胞核中显示了两种核酸，DNA和RNA，含有碱基A、C、G的核苷酸各有2种，含有碱基T的核苷酸有1种，所以一共有7种，C正确，ABD错误。 故选C。 【小问6详解】 从基因调控GLUT-4合成，到后膜上出现GLUT-4蛋白，首先是细胞核相关基因将信息传递到细胞质（③），然后核糖体初步合成GLUT-4蛋白（②），接着内质网加工转运GLUT-4蛋白（①），再由高尔基体加工转运GLUT-4蛋白（④），之后囊泡包裹GLUT-4蛋白整合到质膜（⑥），所以正确顺序为③②①④⑥。 【小问7详解】 摄取人胰岛素的基因，并通过重组DNA技术连接到酵母菌的基因组上，通过发酵工程，让酵母菌生产人的胰岛素，从而实现人胰岛素的规模化生产，B正确，ACD错误。 故选B。 【小问8详解】 A、胰岛素是一种蛋白质，在强碱性环境中，蛋白质会发生变性，从而导致胰岛素失效，A正确； B、过量的射线照射可能会破坏胰岛素的结构，因为胰岛素是一种蛋白质，结构被破坏后会导致其失效，B正确； C、胰岛素在高温环境下，其结构会发生改变，因为它是一种蛋白质，高温会使其变性，从而导致失效，C正确； 故选ABC。 22. 甜米酒是我国的传统酒种，某酿酒厂以无核黄皮果（富含维生素、有机酸及特殊的香味）为辅料研制出黄皮甜米酒，该酒具有消食、润肺和清热解毒等功效。制作黄皮甜米酒的工艺流程如图1所示。回答下列问题： （1）生活中，我们也可以利用传统发酵技术来生产食品，比如果酒或果醋。下列关于果酒和果醋制作的叙述，不正确的是____。 A. 果酒和果醋制作分别需要醋酸菌和酵母菌 B. 制作果醋需要不断充入氧气 C. 果醋是在果酒基础上，进行醋酸发酵酿制而成 D. 果酒制作过程中需始终拧紧瓶盖以防止杂菌污染 （2）与现代发酵技术相比，传统发酵技术的特点是____。 A. 能够保证食品安全 B. 能大规模生产 C. 不易控制发酵过程 D. 生产效率较高 （3）我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“世人云：米过酒甜，此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”下列有关叙述不正确的是____。 A. “米过酒甜”是因为米中糖类物质过量，发酵停止时仍未被完全消耗 B. “酒冷沸止”说明微生物的代谢产热和释放CO2逐渐停止 C. “曲势尽”的原因可能是米酒中pH或酒精含量升高 D. 酿制米酒所用微生物的呼吸类型为兼性厌氧 （4）对酒曲微生物进行分离纯化时，需制备LB（培养细菌）和YPD（培养真菌）培养基。LB培养基的成分为胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水，此培养基为____（填写编号） ①合成培养基②天然培养基③液体培养基④半固体培养基 ⑤固体培养基 ⑥通用培养基 ⑦选择培养基 ⑧鉴别培养基 （5）将不同种酒曲稀释液涂布于LB和YPD培养基上，培养一段时间后，挑取长出的单菌落，转移到相对应的新LB和YPD培养基中继续分离纯化培养，此过程中YPD培养基中需加入一定量的四环素和链霉素，其目的是____。 （6）在制作黄皮甜米酒的过程中，为确定黄酒高活性干酵母（YWBY）的添加量及发酵时间，研究人员进行了相关实验，实验结果如图2所示。根据实验结果制作黄皮甜米酒时，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是____。YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是____。 酵母发酵产生的乙醇除了可以作为我们日常的饮品，乙醇也可作为可再生清洁能源，具有良好的应用前景。酵母菌可利用纤维素生产乙醇，此过程中产生的乙酸等物质会抑制酵母菌的生长和发酵，进而影响乙醇的产量。为选择合适的菌株，提高乙醇产量，科研人员进行下列实验。 （7）在现代发酵工业中，酵母菌发酵通常在____中进行，在发酵之前必须采用高压蒸汽对培养基和附属设备等进行____。 （8）科研人员基于前期实验，获得两株高表达MRP8的酵母菌菌种P1和P2。将菌种____后，分别涂布于不同的培养基上，培养一段时间后，记录菌落生长情况，结果如图3。实验结果表明____。 （9）将野生型酵母菌和P2菌分别接种于含4.8g/L乙酸的两个发酵装置中。一段时间后，检测其中葡萄糖消耗量和乙醇的生成量，结果如图4。 科研人员认为：在实际生产中，使用P2菌株比使用野生型菌株更有利于提高乙醇产量，判断的依据是____。 【答案】（1）AD （2）C （3）C （4）②③⑥ （5）抑制细菌生长 （6） ①. 0.1%、8天 ②. 接种量较大，酵母菌数量增长过快导致葡萄糖消耗过多，用于酵母菌无氧呼吸产生酒精的葡萄糖减少 （7） ①. 发酵罐 ②. 灭菌 （8） ①. （梯度）稀释 ②. 乙酸会抑制野生型酵母菌的生长和发酵，与菌株P1相比，而菌株P2的耐乙酸能力更强 （9）在一定的时间内，菌株P2与野生型酵母菌相比，菌株P2消耗的葡萄量少，产生的乙醇多 【解析】 【分析】醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。 【小问1详解】 A、制作果酒是利用酵母菌无氧呼吸，制作果醋是利用醋酸菌产生醋酸，A错误； B、醋酸菌是严格需氧型微生物，所以制作果醋需要不断充入氧气，B正确； C、醋酸菌在缺少糖源，有氧条件下将乙醇转变为乙醛再转变为乙酸，所以果醋是在果酒基础上，进行醋酸发酵酿制而成 ，C正确； D、果酒制作过程中需每隔一段时间，将瓶盖拧松，释放发酵过程中产生的气体，D错误。 故选AD。 【小问2详解】 现代发酵技术与传统发酵技术相比，优势体现在多方面，如产物专一，生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉、废弃物对环境污染小，能够保证食品安全，大规模生产和生产效率较高，传统发酵技术是利用自然界中菌种进行发酵，不易控制发酵过程，C正确，ABD错误。 故选C。 【小问3详解】 A、酿造米酒的原料富含糖类，米酒过甜是因为米中有糖类物质未被完全消耗，A正确； B、“酒冷沸止”说明酵母菌的代谢产热和释放CO2逐渐停止，由于微生物呼吸作用消耗糖类等有机物，会释放能量，且释放的能量绝大多数以热能的形式散失，导致酒液温度产生变化，B正确； C、微生物无氧呼吸产生的CO2溶于发酵液会形成碳酸，使液体pH值降低，“曲势尽”的原因可能是发酵过程pH降低或酒液中酒精含量升高，C错误； D、酿制米酒所用微生物是酵母菌，酵母菌的呼吸类型为兼性厌氧型，D正确。 故选C。 【小问4详解】 LB培养基的成分为胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水，该培养基中胰蛋白胨和酵母提取物含有多种成分，是②天然培养基，不含凝固剂，这是③液体培养基，其中不含有鉴别的试剂，适合多种微生物生长，是⑥通用培养基 。 故选②③⑥。 【小问5详解】 四环素和链霉素属于抗生素，可以抑制细菌的生长，所以YPD培养基中需加入一定量的四环素和链霉素，其目的是抑制细菌生长。 【小问6详解】 由题图2可知，接种量为0.1%时，达到最大酒精含量时，产酒精量比其它接种量高，当发酵时间为8天时，还原糖含量几乎不再变化，因此，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是0.1%、8天。YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是接种量较大，菌种数量增长过快导致葡萄糖消耗过多，用于酵母菌无氧呼吸产生酒精的葡萄糖减少。 【小问7详解】 酵母菌发酵通常在发酵罐中进行，在发酵之前必须采用高压蒸汽对培养基和附属设备等进行灭菌，杀死所有的微生物菌体、孢子和芽孢。 【小问8详解】 得两株高表达MRP8的酵母菌菌种P1和P2，将菌种（梯度）稀释后，分别涂布于不同的培养基上，这是稀释涂布平板法；实验结果表明培养基中添加乙酸会抑制菌株的生长，其中对菌株P1和野生型的抑制作用更明显。 【小问9详解】 在实际生产中，使用P2菌株比使用野生型菌株更有利于提高乙醇产量，判断的依据是在一定的时间内，菌株P2与野生型酵母菌相比，菌株P2消耗的葡萄量少，产生的乙醇多。 23. 人心肌细胞中的肌钙蛋白由三个结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中肌钙蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌损伤的特异指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。 （1）细胞培养应在5%的CO2培养箱中进行，CO2的作用是________，为防止有害代谢物的积累，可采用________的方法，以便清除代谢物。多次注射抗原cTnI，取___________内的B淋巴组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，不同于诱导植物原生质体融合的方法是________。融合的细胞将________（填“贴壁生长”/“悬浮生长”）生长。 （2）①②为筛选过程，则甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，通过多次的________最终筛选得到的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 （3）酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部分结合。据图可知该检测方法中，酶标抗体的作用是_______，可通过测定产物量来判断待测抗原量，若酶标抗体是抗cTnI的单克隆抗体，则固相抗体可以用__________。 （4）为鉴定抗cTnI单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将对应抗原（cTnI蛋白）进行逐步截短，分别与纯x蛋白示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。结果证明该单克隆抗体识别抗原（cTnI蛋白）的区域大概为__________（填“40~50”、“40~55”或“40~60”）位氨基酸。 【答案】（1） ①. 维持溶液的PH ②. 定期更换培养基 ③. 脾脏 ④. 灭活的病毒 ⑤. 悬浮生长 （2） ①. 乙、丙 ②. 克隆化培养和抗体检测 （3） ①. 既能与待测抗原结合，又能催化待测底物反应 ②. 另一种抗cTnI单克隆抗体 （4）“40~55” 【解析】 【分析】动物细胞培养是指在体外模拟体内环境，将动物细胞从机体中取出，在无菌、适宜温度、pH值和营养条件下，使其生长、增殖并维持一定结构和功能的技术。单克隆抗体是由单一B淋巴细胞克隆产生的、只针对某一特定抗原决定簇的抗体，具有特异性强、纯度高、可大量制备等特点。制备原理基于杂交瘤技术，将能产生特定抗体的B淋巴细胞（不能无限增殖）与骨髓瘤细胞（能无限增殖但不能产生抗体）融合，获得既能无限增殖又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，再通过培养或小鼠腹腔接种等方式获得大量单克隆抗体。 【小问1详解】 在细胞培养中，5%的CO2的作用是维持培养液的pH。因为细胞培养过程中，细胞的代谢活动会影响培养液的酸碱度，CO2可以与水反应生成碳酸，参与调节培养液的pH值，使其保持相对稳定。为防止有害代谢物的积累，可采用定期更换培养液的方法。随着细胞培养时间的延长，代谢废物会在培养液中积累，定期更换培养液可以清除这些代谢废物，为细胞提供良好的生长环境。 多次注射抗原cTnI，取脾脏内的B淋巴组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合。因为脾脏是机体重要的免疫器官，其中含有大量经过抗原刺激后活化的B淋巴细胞。诱导植物原生质体融合常用物理法（如离心、振动、电激等）和化学法（如聚乙二醇），而诱导动物细胞融合除了物理法和化学法外，还可以用灭活的病毒，这是动物细胞融合特有的方法。融合的细胞将悬浮生长。因为杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的特性，骨髓瘤细胞在体外培养时呈悬浮生长状态。 【小问2详解】 在①②筛选过程中，甲是经过融合后的细胞混合物，其中有未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B - B融合细胞、骨髓瘤 - 骨髓瘤融合细胞以及杂交瘤细胞；乙是经过第一次筛选（如用选择培养基筛选）后得到的杂交瘤细胞；丙是经过第二次筛选（如抗体检测等）后只含产生特异性抗体的杂交瘤细胞，所以只含杂交瘤细胞的是乙、丙。 ②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，通过多次的克隆化培养和抗体检测最终筛选得到的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。克隆化培养可以使杂交瘤细胞大量增殖，抗体检测可以筛选出能产生特异性抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 据图可知该检测方法中，酶标抗体的作用是既能与待测抗原结合，又能催化待测底物反应。因为酶标抗体具有特异性，能与抗原结合，同时其携带的酶可以催化底物反应生成特定产物，通过检测产物量来反映与酶标抗体结合的抗原量，进而判断待测抗原量。 若酶标抗体是抗cTnI的单克隆抗体，则固相抗体可以用抗cTnI的单克隆抗体（或其他能与cTnI结合的抗体 ）。因为不同抗体可与同一抗原表面的不同部分结合，只要能与cTnI结合且不与酶标抗体竞争同一结合位点的另一种抗cTnI的单克隆抗体都可以作为固相抗体。 【小问4详解】 观察表格，当截短的抗原片段包含40 - 55位氨基酸时，抗cTnI单克隆抗体有反应，而去掉55位之后无反应，所以结果证明该单克隆抗体识别抗原（cTnI蛋白）的区域大概为40 - 55位氨基酸。 24. 图1是我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和胚胎发育潜能研究的流程。人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态（naive）和始发态（primed）．naive干细胞具有最高的发育潜能，primed干细胞全能性相对较低。图2是OGT、OGA以及细胞骨架蛋白在胚胎干细胞中表达情况的电泳图谱，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶。 （1）猴子芽体相当于_______期的胚胎，过程③的起点细胞应取自芽体的_______部位。 （2）过程④⑤形成的胚胎是_______。过程⑥需对受体母猴进行的处理是_______。 （3）据图2推测，naive干细胞发育潜能更高的原因可能是_______；该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作为对照的作用是_______。 （4）过程①需在图2中的诱导培养基中完成，目的是_______。与过程①相比，过程②培养液中还应添加_______。 【答案】（1） ①. 囊胚 ②. 内细胞团 （2） ①. 原肠胚 ②. 同期发情 （3） ①. 细胞中的蛋白质糖基化程度低 ②. 排除细胞本身蛋白表达受阻的情况##保证细胞都具有正常表达蛋白质的功能 （4） ①. primed干细胞中表达更多的OGA，从而转化为 naive干细胞 ②. 促进胚胎发育的物质 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【小问1详解】 分析图1，猴子芽体后续能进一步发育形成胚胎，在胚胎发育过程中，囊胚期的胚胎开始出现细胞分化，具有内细胞团等结构，可进一步发育成个体，,故猴子芽体相当于囊胚期的胚胎；囊胚期的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，过程③的起点细胞应取自芽体的内细胞团部位。 【小问2详解】 过程④⑤是从囊胚进一步发育，形成的胚胎是原肠胚；过程⑥是胚胎移植，需对受体母猴进行同期发情处理，使供受体生殖器官的生理变化相同，为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境。 【小问3详解】 据题干信息和图2分析可知，naive干细胞中OGT相对含量高，OGA相对含量低，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶，naive干细胞发育潜能更高的原因可能是naive干细胞中的蛋白质糖基化程度低；该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作为对照，是因为其表达量相对稳定，不受实验处理的影响，可以作为内参基因用于校正其他蛋白的表达水平，排除细胞本身蛋白表达受阻的情况（或保证细胞都具有正常表达蛋白质的功能）。 【小问4详解】 过程①是将primed干细胞诱导形成naive干细胞，需在图2中的诱导培养基中完成，目的是primed干细胞中表达更多的OGA，从而转化为naive干细胞；与过程①相比，过程②是naive干细胞的培养，naive干细胞具有较高的发育潜能，故培养液中还应添加能促进胚胎发育的物质。 25. 我国科学家尝试构建地衣芽孢杆菌基因编辑系统，并通过将外源vgb基因定向插入19T-pfIB 质粒中对该系统进行初步验证，主要过程如图1.请回答下列问题。 （1）步骤①利用已构建的质粒19T-pflB，通过反向 PCR获得左右同源片段，除图中已有的组分外，还应添加缓冲液（Mg2+）和___________（答两点）等。下表为pflB部分基因序列和 设计的相关引物，可选用的引物是___________（填编号）。 DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列） pflB基因 5'-TCGCACACCTGACTACAATT……TCGCAATGGCAATCGGCAAACT-3' 3'-AGCGTGTGGACTGATGTTAA……AGCGTTACCGTTAGCCGTTTGA-5' PCR引物 ① 5'ACGGGATCCTTGTAGTCAGGTGTGCGA3' ② 5'ACGGGATCCTTTGCCGATTGCCATTGC3' ③ 5'AACTGCAGTCGCACACCTGACTACAA3' ④ 5'AACTGCAGGCAATGGCAATCGGCAAA3' 注：下划线标注为BamHI识别序列5'-G↓GATCC-3'和PstI识别序列 5'-CTGCA↓G-3' （2）步骤②双酶切时，需使用的限制酶a和限制酶b分别是_________和________，影响DNA连接酶反应速率的因素有反应体系的温度、pH、酶浓度和___________（答出两点）等。 （3）图2是质粒PNZTK-PFTF-vgb转入地衣芽孢杆菌后，将目的基因插入基因组的过程示意图。 将受体菌接种在含四环素和___________（含/不含）卡那霉素培养基中培养一段时间后，因没有选择压力，会导致发生双交换的质粒丢失。挑取一定数量的单菌落，接种到含四环素的培养基上，并一一对应接种到含卡那霉素的培养基上，实验结果如图3所示。其中在两种培养基均能生长的菌株是只发生单交换或___________的受体菌。 （4）科学家通过分析vgb基因在重组菌株及原始菌株中的表达水平验证该基因编辑系统。分析时需要以rpsE基因（核糖体S5蛋白基因）为参照，该基因表达的特点是___________，可采用___________的方法检测基因表达的产物量。 【答案】（1） ①. 四种脱氧核苷酸、TaqDNA聚合酶 ②. ①④ （2） ①. SmaI ②. Xhol ③. DNA片段浓度、DNA片段末端类型 （3） ①. 不含 ②. 未发生交换 （4） ①. 在细胞中的表达水平相对恒定 ②. 琼脂糖凝胶电泳 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成（2）基因表达载体的构建：是基 因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因启动子、终止子和标记基因等（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 PCR反应除了图中已有的组分外，还需要添加TaqDNA聚合酶（用于催化DNA的合成）、四种脱氧核苷酸（dNTP）。PCR扩增时，引物需要与模板链进行碱基互补配对，且引物的延伸方向是5’到3’，分析pflB基因序列和各引物序列，①中5端含有BamHI识别序列（GGATCC），且其碱基序列能与pflB基因的一条链互补配对；④中5端含有PstI识别序列（CTGCAG），且其碱基序列能与pflB基因的另一条链互补配对，所以可选用的引物是①④。不同的引物，其碱基组成和长度可能不同，引物的Tm值（解链温度）就不同，所以需要根据不同的引物重新设置PCR程序中的退火温度。 【小问2详解】 观察图可知，要将外源vgb基因定向插入19T-pfIB质粒中，构建重组质粒，需要用与切割含目的基因的DNA片段相同的限制酶切割质粒，由步骤①可知，pflB片段两端具有Smal和Xhol的酶切位点，步骤②双酶切时，是要将Kan插入到pflB片段的外侧，需使用的限制酶a和限制酶b分别是Smal和Xhol。影响DNA连接酶反应速率的因素有反应体系的温度、pH、酶浓度和底物浓度，DNA片段末端类型（DNA片段的浓度，因为DNA连接酶催化的是DNA片段之间的连接反应，底物浓度会影响反应速率）等，所以②处应填底物浓度、DNA片段末端类型。 【小问3详解】 因为要让发生双交换的质粒丢失，而双交换后的重组菌含有四环素抗性但不含卡那霉素抗性（发生双交换后卡那霉素抗性基因随质粒丢失），所以受体菌应接种在含四环素和不含卡那霉素培养基中培养。只发生单交换会使受体菌含有四环素抗性和卡那霉素抗性，另外未发生交换的受体菌本身就对四环素和卡那霉素有抗性（从质粒和原始受体菌的抗性情况分析），所以在两种培养基均能生长的菌株是只发生单交换或未发生交换的受体菌。 【小问4详解】 psE基因是核糖体S5蛋白基因，核糖体是细胞进行蛋白质合成的场所，在细胞中的表达相对稳定，即该基因表达的特点是在细胞中的表达水平相对恒定。检测基因表达的产物（蛋白质）量可采用琼脂糖凝胶电泳的方法，琼脂糖凝胶电泳通过分子大小分离和可视化标记，将基因表达产物的量转化为可检测的条带信号，是基因表达分析中简单、直观的方法。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $