精品解析：黑龙江省绥化市肇东市第四中学校2024-2025学年高二下学期期末生物试卷

肇东四中2024-2025学年下高二期末考试生物试卷 一、单选题 1. 下列关于家庭腌制泡菜的过程，叙述正确的是（ ） A. 腌制过程不必严格执行无菌操作 B. 腌制时，定期打开泡菜坛盖排气 C. 所用菌种是真菌 D. 所用菌种需要人工接种 【答案】A 【解析】 【分析】 泡菜发酵的实验原理： （1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。 （2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。 （3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。 【详解】A、乳酸菌耐酸性环境，其产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长，有利于其菌种优势的保持，因此制作过程不必严格无菌操作，A正确； B、由于腌制泡菜过程中乳酸菌无氧呼吸不产生气体，因此，腌制过程中不需要定期打开泡菜坛盖排气，B错误； C、乳酸菌是细菌，不属于真菌，C错误； D、家庭腌制泡菜的过程不需要人工接种，D错误。 故选A。 2. 中国的许多传统美食制作过程蕴含了传统发酵技术。下列叙述正确的是（ ） A. 腐乳制作过程中，是以毛霉为单一菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B. 米酒制作过程中，将容器密封可促进酵母菌增殖 C. 馒头制作过程中，酵母菌进行呼吸作用产生CO2 D. 果醋制作过程中，所需的发酵温度低于果酒制作时的温度 【答案】C 【解析】 【分析】1、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。 2、醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。 【详解】A、腐乳制作过程属于传统发酵技术，该过程中涉及多种微生物，其中毛霉是腐乳制作过程中主要菌种，A错误； B、米酒制作过程中，将容器密封可促进酵母菌无氧呼吸，不利于酵母菌增殖，B错误； C、馒头制作过程中，利用了酵母菌呼吸作用产生 CO2 ，二氧化碳是气体，遇热膨胀而形成小孔，使得馒头或面包松软多孔，C正确； D、果酒发酵的适宜温度是18℃～30℃，果醋发酵的适宜温度是30℃～35℃，因此果醋制作相对于果酒制作所需的发酵温度更高，D错误。 故选C。 3. 下列有关蛋白质工程的叙述，正确的是（ ） A. 蛋白质工程的直接操作对象是蛋白质分子 B. 蛋白质工程不能生产自然界不存在的蛋白质 C. 蛋白质工程最终是通过改造或合成基因来完成的 D. 蛋白质工程应先设计蛋白质的结构后再预期其功能 【答案】C 【解析】 【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。 2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，（基因）以上是蛋白质工程特有的途径，以下按照基因工程的一般步骤进行。 【详解】A、蛋白质工程的直接操作对象是基因，A错误； B、蛋白质工程可以现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求，B错误； C、蛋白质工程最终是通过基因修饰或基因合成来实现的，C正确； D、蛋白质工程应先预期其功能后再设计蛋白质的结构，D错误。 故选C。 4. 下列属于植物的快速繁殖技术的是（ ） A. 用兰花的芽尖组织培育兰花幼苗 B. 水稻种子萌发并长成新个体 C. 扦插的葡萄枝长成新个体 D. 柳树芽发育成枝条 【答案】A 【解析】 【分析】人们形象的把用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，叫做植物的微型繁殖技术，也叫快速繁殖技术。 【详解】A、茎尖不带病毒，故采用茎尖组织培养技术来脱毒苗，A正确； B、水稻种子萌发并长成新个体属于自然生长过程，不需要植物组织培养技术，B错误； C、扦插的葡萄枝长成新个体属于营养繁殖，不需要植物组织培养技术，C错误； D、柳树芽发育成枝条，为芽的发育过程，不需要植物组织培养技术，D错误。 故选A。 5. 纸片扩散法药物敏感试验是在涂有细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴上浸有不同种类抗生素的纸片，培养一段时间后测量抑菌圈的大小，从而得出受试菌株药物敏感性的结论。某次试验结果如图所示，下列有关叙述错误的是（ ） A. 本实验接种细菌时可以选用平板划线法 B. 出现抑菌圈的说明在接触抗生素后细菌受到抑制或已死亡 C. 抑菌圈越大，说明细菌对该种抗生素越敏感 D. 抗生素在培养基中的扩散速率会影响抑菌圈的大小 【答案】A 【解析】 【详解】A、图中需要比较不同种类抗生素的纸片周围的抑菌圈，则要求培养基的菌落分布比较均匀，因此接种细菌时应稀释后均匀涂布，选用的是稀释涂布平板法，A错误； B、出现抑菌圈说明纸片上的抗生素发生扩散，细菌接触到抗生素后生长受到抑制或死亡，B正确； C、抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，由此推测形成的抑菌圈越大，说明细菌对该种抗生素抗性越弱，对抗生素越敏感，抑菌圈越小，说明细菌对该种抗生素抗性越强，C正确； D、在平板上扩散速度慢的抗生素，形成的透明圈可能会比实际结果偏小，因此，不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响，D正确。 故选A。 6. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A. 基因工程是在细胞水平上进行设计和施工的，又叫重组DNA技术 B. 限制性内切核酸酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗一分子水 C. 在进行基因工程操作中，天然质粒需经过人工改造后才能作为载体 D. 质粒是一种裸露的、位于细胞核或拟核DNA上，具有自我复制能力的环状DNA 【答案】C 【解析】 【分析】生物工程中酶的作用： 1、DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起作用。 2、DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。 3、限制性核酸内切酶：从DNA链的内部进行切割，分为限制性内切酶和非限制性内切酶。 4、DNA修饰酶是指对DNA分子进行修饰的酶，目前基因工程中常用的酶有：碱性磷酸酶、末端转移酶、甲基化酶。 5、反转录酶：依赖于RNA的DNA聚合酶，既可以用DNA为模板，也可以用RNA为模板进行互补链的合成。基因工程中主要功能是利用真核mRNA为模板反转录成cDNA，用来建立cDNA文库，进而分离为特定蛋白质编码的基因。 【详解】A、基因工程在分子水平操作，A错误； B、限制性核酸内切酶将一个DNA分子片段切成两个片段，即断裂两个磷酸二酯键，因此需消耗两个水分子，B正确； C、在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，C正确； D、质粒独立于染色体外存在，D错误。 故选C。 7. 如图为植物组织培养技术的流程图，下列有关说法正确的是（　　） A. 实验中①试管细胞全能性最高 B. ①→②的过程需要光照 C. ①→④过程培养基保持不变 D. 实验过程需细胞分裂素和生长素共同调节 【答案】D 【解析】 【分析】分析图示，图示表示植物组织培养过程，其中①→②为脱分化的过程，②→③为再分化过程，③→④为幼苗进一步发育的过程。 【详解】A、图中愈伤组织是经脱分化后形成的，全能性最高，A错误； B、①→②为脱分化的过程，该过程需要避光处理，B错误； C、①→②为脱分化的过程，②→③为再分化过程，脱分化和再分化过程中所用的培养基不同，C错误； D、植物组织培养过程需细胞分裂素和生长素共同调节，细胞分裂素和生长素的比例不同，愈伤组织分化的方向也不同，D正确。 故选D。 8. 关于动物体细胞培养过程中细胞的活动或特性，下列表述错误的是 A. 细胞通常贴壁生长 B. 细胞进行有丝分裂 C. 细胞之间有接触抑制现象 D. 细胞的遗传物质均发生改变 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的特点：贴壁生长，有接触抑制现象。原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株。细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系。 【详解】A、动物细胞培养过程中，悬液中分散的细胞很快贴壁生长，A正确； B、动物细胞培养是细胞增多的过程，细胞增殖的方式为有丝分裂，B正确； C、动物细胞在培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，C正确； D、原代培养的细胞具有继续增殖能力，遗传物质一般不发生改变，传代培养过程中，部分细胞的细胞核型可能会发生改变，成为不死性的细胞，D错误。 故选D。 9. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”及“DNA片段的扩增与电泳鉴定”实验的叙述正确的是（ ） A. 洋葱研磨液过滤到烧杯中，需要在4℃冰箱放置几分钟，再弃上清液 B. 向含DNA的试管中加入二苯胺试剂，混合后即可比较观察颜色变化 C. DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA分子大小和构象有关，与凝胶浓度无关 D. 电泳凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来 【答案】D 【解析】 【分析】DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。 【详解】A、在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯，DNA在滤液中，在4℃冰箱放置几分钟后取上清液，A错误； B、将析出的丝状物先溶解在2mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺试剂，沸水浴加热才会出现蓝色，B错误； C、DNA分子的迁移速率不仅与DNA分子大小和构象有关，也与凝胶浓度有关，C错误； D、凝胶中的DNA分子可以用荧光染料进行染色，这些被染色的DNA分子在波长为300nm的紫外灯下会发出荧光，从而被检测出来，D正确。 故选D。 10. 下列对哺乳动物体细胞核移植技术的叙述，错误的是（　　） A. 可通过显微操作法去除卵母细胞的细胞核 B. 该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植 C. 通常采用MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞 D. 克隆动物是对提供体细胞的动物进行了100%的复制 【答案】D 【解析】 【分析】哺乳动物体细胞核移植技术把体细胞核和卵母细胞的细胞质重新组合，形成重组细胞，利用动物细胞核的全能性，把重组细胞培养为新个体。 【详解】A、动物体细胞核移植技术属于细胞水平的操作，可通过显微操作法除去卵母细胞的细胞核，A正确； B、由于体细胞分化程度较高，该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植，B正确； C、通常采用减数第二次分裂期的卵母细胞作为受体细胞，C正确； D、重组细胞的细胞质来源于卵母细胞，克隆动物不是对供核动物的完全复制，D错误。 故选D。 11. 下列关于生物技术的安全性及伦理问题的观点，错误的是（ ） A. 应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 B. 生殖性克隆人问题带来了巨大的伦理挑战 C. 反对“设计试管婴儿”的原因之一是试管婴儿技术属于无性繁殖方式 D. 生物武器具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止 【答案】C 【解析】 【详解】A、转基因植物需严格筛选目的基因，防止产生有害物质（如毒素或过敏原），该观点正确，符合安全规范，A正确； B、生殖性克隆人涉及伦理争议（如个体独特性、社会关系混乱等），确实带来巨大挑战，B正确； C、试管婴儿技术通过体外受精形成胚胎，属于有性生殖，反对“设计试管婴儿”的伦理原因在于基因筛选可能引发歧视或伦理滥用，而非繁殖方式，C错误； D、生物武器具有强传染性、广危害性，国际公约明确禁止，D正确。 故选C。 12. 下图表示哺乳动物胚胎早期发育过程的某个阶段，下列叙述正确的是（ ） A. 图中①将来发育成胎儿的各种组织 B. 图中③表示透明带，胚胎从其中伸展出来的过程叫作卵裂 C. 该胚胎均等分割后移植给受体，生出的后代毛色等性状一定相同 D. 胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得 【答案】D 【解析】 【详解】A、图中①为滋养层细胞，将来可发育成胎盘和胎膜，A错误； B、图中③表示透明带，胚胎从其中伸展出来的过程叫作孵化，B错误； C、囊胚均等分割后的后代理论上基因相同，但毛色等性状可能受表观遗传或环境因素影响，不一定完全相同，C错误； D、胚胎干细胞是一类未分化细胞，来源于早期胚胎或原始性腺，即胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得，D正确。 故选D。 13. 关于限制酶识别序列和切开部位的特点，下列叙述错误的是（　　） A. 限制酶所识别的序列都可以找到一条中轴线 B. 限制酶识别序列中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 C. 限制酶只识别和切割特定的核苷酸序列 D. 限制酶在任何部位都能将DNA切开 【答案】D 【解析】 【分析】作为“分子手术刀”的限制性核酸内切酶（限制酶）主要是从原核生物中分离纯化出来的，具有特异性。 【详解】A、限制酶在它识别序列的中心轴线将DNA切开时，产生的是平末端；限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA两条链分别切开时，产生的是黏性末端，A正确； B、中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列，形成黏性末端，B正确； C、酶有专一性，一种限制性内切酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键，C正确； D、限制性内切酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列，所以只能在特定的部位将DNA切开，D错误。 故选D。 14. 下列有关将目的基因导入受体细胞的叙述，正确的是（　　） A. 将目的基因导入裸子植物细胞采用最多的方法是花粉管通道法 B. 植物的受体细胞可以是受精卵，也可以是叶肉细胞等体细胞 C. 将目的基因导入大肠杆菌可以先用碳酸钙处理大肠杆菌 D. 将某种药用蛋白基因导入动物乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器 【答案】B 【解析】 【分析】将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 【详解】A、将目的基因导入裸子植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，A错误； B、植物细胞都具有全能性，因此植物的受体细胞可以是受精卵，也可以是叶肉细胞等体细胞，B正确； C、将目的基因导入大肠杆菌可以先用氯化钙处理大肠杆菌，增大细胞膜的通透性，C错误； D、乳腺生物反应器是将外源基因在哺乳动物的乳腺中特异表达，以转基因动物的乳腺组织生产药用蛋白，需要将某种药用蛋白基因导入动物受精卵中，通过胚胎体外培养、胚胎移植等手段获得转基因动物获得乳腺生物反应器，D错误。 故选B。 15. 下图为不同限制性核酸内切酶识别的序列及切割位置（箭头所指），下列错误的是（　　） A. 图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列 B. 若DNA上的碱基随机排列，NotI限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶高 C. 酶切时使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 D. 用酶Bg1 Ⅱ切出的目的基因与酶BamHI切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开 【答案】B 【解析】 【分析】1、常用的运载体：质粒（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子）、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。 3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 【详解】A、酶具有专一性，限制酶是专门切割DNA序列中一定部位酶，所以图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列，A正确； B、由于Not I限制性核酸内切酶识别的序列比其他三种酶的序列长，若DNA上的碱基随机排列，Not I限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶低，B错误； C、两种不同的限制酶可产生不同的黏性末端，所以使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，C正确； D、用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamHⅠ切割的质粒重组后，6个脱氧核苷酸对序列既不能被限制酶BglⅡ识别，也不能被BamHⅠ识别，所以不可能被这两种酶切开 ，D正确。 故选B。 二、不定项选题 16. 许多传统发酵食品如果酒、酸奶、面包、泡菜、火腿、腐乳、豆豉等，成为人们的美味佳肴。下列关于传统发酵技术的说法，错误的是（　　） A. 酵母、毛霉和曲霉等真核生物参与了腐乳的发酵 B. 制作泡菜过程中，适当提高温度可以抑制杂菌生长 C. 制作果醋时利用了醋酸菌在无氧条件下产生醋酸的原理 D. 面包松软可口的原因是酵母菌在发酵过程中产生了二氧化碳 【答案】BC 【解析】 【分析】1、腐乳制作原理：多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉。 2、果醋制作原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、酵母、毛霉和曲霉等真核生物参与了腐乳的发酵，其中毛霉是主要菌种，A正确； B、制作泡菜过程中，适当提高温度不能抑制杂菌生长，B错误； C、醋酸菌为好氧菌，必须在有氧条件下生活，C错误； D、发面过程中酵母菌在发酵过程中产生了二氧化碳，使面包变得松软可口，D正确。 故选BC。 17. 下列有关植物细胞工程应用的叙述正确的是（ ） A. 利用植物细胞培养技术获得紫草素，可实现细胞产物的工厂化生产 B. 通过单倍体育种得到的个体一定是纯合子 C. 利用植物组织培养技术可获得脱毒植株 D. 利用植物体细胞杂交技术培育的“白菜—甘蓝”，可获得双亲的遗传特性 【答案】ACD 【解析】 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、组织培养技术除了在农业生产上的应用外，还可广泛应用于另一个重要的领域，即细胞产物的工厂化生产，A正确； B、基因型为AAaa的植株，减数分裂产生的配子为AA、Aa、aa，单倍体育种后得到的个体基因型为AAAA、AAaa、aaaa，其中含有杂合子AAaa，B错误； C、因为分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，所以将分生组织（如根尖、茎尖）进行离体培养能获得脱毒植株，C正确； D、利用植物体细胞杂交技术培育的“白菜一甘蓝”，具有双亲的遗传物质，因此杂种植株可获得双亲的遗传特性，D正确。 故选ACD。 18. 下图表示三亲婴儿的培养过程，下列相关说法错误的是（ ） A. 该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作 B. 三亲婴儿细胞中的染色体不仅仅来自甲和丙 C. 图示方法可避免携带有线粒体致病基因的甲产下患该病的子代 D. 核移植时可将乙的卵母细胞在体外培养至MI中期 【答案】BD 【解析】 【分析】三亲婴儿的染色体来自母亲甲和父亲丙提供的细胞核，细胞质基因来自捐献者乙。 【详解】A、由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞培养、动物细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，A正确； B、三亲婴儿的染色体（即核基因）仅来自母亲甲和父亲丙提供的细胞核，B错误； C、根据图示可知卵母细胞的细胞质来自于捐献者乙，可避免母亲的线粒体遗传基因传递给后代，C正确； D、核移植时可将乙的卵母细胞在体外培养至MII中期，该时期卵母细胞核的位置靠近第一极体，可用微型吸管将之与细胞核一并吸出，D错误。 故选BD。 19. 科研人员以抗四环素基因作为标记基因，通过基因工程的方法让工程菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰状细胞贫血。下列相关实验设计，不合理的是（ ） A. 用β-珠蛋白基因、启动子、终止子、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体 B. 利用正常小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列 C. 将β-珠蛋白基因表达载体导入具有四环素抗性大肠杆菌中以便进行重组DNA的筛选 D. 生产鼠的β-珠蛋白的工程菌选择酵母菌比大肠杆菌更有优势 【答案】C 【解析】 【分析】基因表达载体包括启动子、目的基因（β-珠蛋白基因）、标记基因（抗四环素基因）、终止子等。抗四环素基因是标记基因，用于筛选导入重组质粒的受体细胞，因此受体细胞（大肠杆菌）不含有四环素抗性基因。导入重组质粒的大肠杆菌能抗四环素，因此可以用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌。 【详解】A、基因表达载体包括启动子、目的基因（β-珠蛋白基因）、标记基因（抗四环素基因）、终止子等，A正确； B、β-珠蛋白基因属于目的基因，可以利用正常小鼠DNA分子为模板，利用PCR技术扩增，B正确； C、若将β-珠蛋白基因表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中，由于大肠杆菌本身就有四环素抗性，无法通过抗四环素这一特性筛选出导入重组DNA的大肠杆菌，应该导入没有四环素抗性的大肠杆菌中，用含四环素的培养基筛选，C错误； D、酵母菌属于真核生物，大肠杆菌属于原核生物，真核生物细胞内有内质网、高尔基体等细胞器，能够对蛋白质进行加工和修饰，生产鼠的β-珠蛋白的工程菌选择酵母菌比大肠杆菌更有优势，D正确。 故选C。 20. 用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，限制酶对应切点一定切开。两种酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述正确的是（　　） A. 图1中限制酶A、B识别的核苷酸序列不相同 B. 图1中X代表的碱基对数为5500 C. 推测图1中Y是限制酶B的酶切位点 D. 推测图2中①是限制酶A处理得到的酶切产物 【答案】AD 【解析】 【分析】限制性核酸内切酶酶切，是一项基于DNA限制性核酸内切酶的基因工程技术，其基本原理是利用限制性核酸内切酶对DNA上特定序列的识别，来确定切割位点并实现切割，从而获得所需的特定序列。 【详解】A、限制酶具有特异性，不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，所以图1中限制酶A、B识别的核苷酸序列不相同，A正确； B、从图2的A+B酶一组结果可知，限制酶A和B切完后总共有4个片段，长度分别为 500、1500、3500、4500。而X代表的碱基对数为4500， B错误； C、图1表示酶A和B切割时只会得到3个片段，长度应该是3500、 X、2000，从图2A+B酶一组结果可知，限制酶A和B切完后总共有4个片段，长度分别为 500、1500、3500、4500。所以可推测Y是限制酶A的酶切位点，C错误； D、 根据以上结论，图1中有两个限制酶A的酶切位点，切割完后得到三个长度的片段：3500、 （4500+1500）、500：正好与图2的①结果相符，故推测图2中①是限制酶A处理得到的酶切产物，D正确。 故选AD。 三、解答题 21. 牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。请分析并回答下列问题： 实验步骤： Ⅰ、取样：从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。 Ⅱ、培养基的配制和灭菌： 配制全营养LB培养基。配方：水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂糖（一种凝固剂）。配制尿素培养基。配方：水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂糖。 Ⅲ、制备瘤胃稀释液并接种，如图1所示。 Ⅳ、在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。 （1）该小组采用_____法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下，利用该方法进行分离计数时，需要用到图2中的实验器材有_____，对③应采用_____方式灭菌。 （2）为了判断尿素培养基是否具有选择作用，实验时还需要同时接种全营养平板，如果同一浓度梯度下，尿素培养基上的菌落数_____（“大于”、“等于”或“小于”）全营养培养基上的菌落数，则说明尿素培养基具有选择作用。 （3）若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出现的菌落数如图1所示，则5 mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为_____。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数_____，原因是_____。 （4）降解尿素需要菌体中的_____酶催化。为鉴定菌落是否是尿素分解菌，可以在该培养基中需要加入的特殊染料是_____，通过观察菌落周围是否变红来筛选尿素分解菌。 【答案】（1） ①. 稀释涂布平板 ②. ①③④ ③. 干热灭菌 （2）小于  （3） ①. 3.5×1010      ②. 少 ③. 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落      （4） ①. 脲 ②.  酚红 【解析】 【分析】筛选尿素分解菌要以尿素为唯一氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素而缺乏氮源导致生长发育受抑制，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以用此培养基能够选择出分解尿素的微生物。 【小问1详解】 能够对微生物进行分离和计数的方法是稀释涂布平板法；稀释涂布平板法操作时需要在酒精灯火焰旁边操作，故需要用到①酒精灯、③培养皿、④涂布器；③是培养皿，对其灭菌的方法是干热灭菌法。 【小问2详解】 选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长，故同一浓度梯度下，尿素培养基上的菌落数小于全营养培养基上的菌落数，则说明尿素培养基具有选择作用。 【小问3详解】 5号试管的稀释倍数为107，5mL瘤胃样品中含有目标活菌数=（68+75+67）÷3÷0.1×107×5=3.5×1010（个）；由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故使用稀释涂布平板法统计获得的菌落数比实际的活菌数偏少。 【小问4详解】 降解尿素需要菌体中的脲酶的催化；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若菌落周围出现红色环带，则可准确说明该菌种能够分解尿素。 22. 白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强、易于贮藏等优点。如图为“白菜甘蓝”的培育过程，请回答下列问题： （1）由原生质体A和原生质体B形成原生质体C的过程中，常使用的诱导剂是____________，该过程体现了细胞膜具有___________性。 （2）由细胞D得到愈伤组织的过程叫作________；由愈伤组织得到根、芽等器官的过程叫作___________。由细胞D得到一个完整的杂种植株，需要采用的细胞工程技术是___________，该过程体现了细胞D具有___________性。 （3）经花粉培育的二倍体“白菜甘蓝”植株，体细胞的染色体数为___________。这种植株通常不育，为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜甘蓝”，这种变异属于____________。 （4）上述育种方法与传统杂交育种方法相比较其优点在于_______________________。 【答案】（1） ①. 聚乙二醇(PEG)　 ②. 流动 （2） ①. 脱分化　 　 ②. 再分化 ③. 植物组织培养 ④. 全能 （3） ①. 19　 ②. 染色体变异 （4）能克服远缘杂交的不亲和性(障碍) 【解析】 【分析】植物体细胞杂交过程： 先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，借助物理或化学方法诱导原生质体融合，得到的杂种细胞再经过诱导形成愈伤组织，并进一步发育成完整植株。 【小问1详解】 原生质体融合常用聚乙二醇(PEG)，原生质体融合体现了细胞膜具有流动性。 【小问2详解】 由细胞D得到愈伤组织的过程叫作脱分化，由愈伤组织得到根、芽等器官的过程叫再分化。由细胞D得到一个完整的杂种植株，采用的技术是植物组织培养技术，由细胞获得个体，体现细胞具有全能性。 【小问3详解】 来自白菜的花粉含有10条染色体，来自甘蓝的花粉含有9条染色体，经花粉培育的二倍体“白菜甘蓝”植株体细胞含有19条染色体。人工诱导产生四倍体“白菜甘蓝”，染色体加倍，这种变异属于染色体变异。 【小问4详解】 白菜与甘蓝属于两个物种，存在生殖隔离，按照传统杂交育种方法，无法产生可育后代，上述育种方法与传统杂交育种方法相比较其优点在于能克服远缘杂交的不亲和性(障碍)。 【点睛】本题主要考查植物体细胞杂交技术，识记和理解相关过程和原理即可解答。 23. 双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。如图是科研人员通过杂交瘤细胞技术生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体的部分过程。据图分析回答下列问题： （1）过程①后，从小鼠的脾脏中得到____________，说明小鼠体内形成了相应的B细胞。制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有________________、________________。 （2）过程②诱导细胞融合的方法是_______________（生物法），过程③是第1次在HAT培养基上筛选,在该培养基上，_______都会死亡。 （3）经过程③筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程④，目的是筛选出足够数量的能________的杂交瘤细胞。 （4）获得的单克隆杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠_______内增殖均可。 【答案】（1） ①. 抗癌胚抗原的抗体 ②. 动物细胞融合 ③. 动物细胞培养 （2） ①. 灭活的病毒诱导融合法 ②. 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞 （3）分泌所需抗体 （4）腹腔 【解析】 【分析】通过细胞融合技术（如用灭活的病毒诱导），将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞这种细胞融合，获得杂交瘤细胞。这种细胞同时具备两种亲本细胞的优势：既能像B淋巴细胞那样分泌针对特定抗原的特异性抗体，又能像骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖，从而可以大量制备纯度高、特异性强的单克隆抗体。 【小问1详解】 过程①是给小鼠注射癌胚抗原，这会刺激小鼠的免疫系统产生免疫反应，从而使B细胞增殖分化，从小鼠的脾脏中得到抗癌胚抗原的抗体，这就说明小鼠体内形成了相应的B细胞。制备双特异性单克隆抗体的过程中，首先需要将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，这用到了动物细胞融合技术，融合后的杂交瘤细胞需要在体外进行培养，以获得足够数量的细胞来产生抗体，这用到了动物细胞培养技术。 【小问2详解】 过程②诱导细胞融合，生物方法中常用的是灭活的病毒诱导融合法，HAT培养基是一种选择培养基，在该培养基上， 未融合的亲本细胞（B淋巴细胞和骨髓瘤细胞）以及融合的具有同种核的细胞都会死亡，因为B淋巴细胞不能在体外长期存活，骨髓瘤细胞，不能利用培养基中的次黄嘌呤进行DNA合成，所以在HAT培养基上无法生长。 【小问3详解】 经过程③筛选得到的细胞还需转移至多孔培养板中进行过程④，目的是筛选出足够数量的能分泌同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性抗体的杂交瘤细胞，因为过程③只是初步筛选出了杂交瘤细胞，这些杂交瘤细胞可能产生不同的抗体，还需要进一步筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 【小问4详解】 获得的单克隆杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖均可，注射到小鼠腹腔内，小鼠腹腔提供了适宜的环境，杂交瘤细胞可以在腹腔内大量增殖，从而获得大量的单克隆抗体。 24. 干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病，患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题： （1）利用RNA通过①过程获得cDNA需要______酶。将SSB基因片段与pET41a质粒“缝合”起来，需要______酶。 （2）为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的______（填“5′”或“3′”）端加上______酶切位点。 （3）③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_________的培养基上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加__________的培养基上培养，收集______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，筛选得到SSB蛋白。 （4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，后续实验内容应为抽取小鼠血液，提取其中的抗体，利用________________的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。 【答案】（1） ①. 逆转录 ②. DNA连接酶（T4 DNA连接酶或E. coli DNA连接酶） （2） ①. 5' ②. BamH Ⅰ和Xho Ⅰ （3） ①. 使大肠杆菌处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 ②. 卡那霉素 ③. 氯霉素 ④. 能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的 （4）抗原—抗体杂交 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成（2）基因表达载体的构建：是基 因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因启动子、终止子和标记基因等（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 由RNA合成cDNA的过程是逆转录，需要逆转录酶。将目的基因（SSB基因片段）与质粒“缝合”起来需要DNA连接酶。 【小问2详解】 在PCR扩增时，为确保定向连接，应在引物的5'端加上酶切位点。因为DNA合成方向是从5'到3'，5'端添加酶切位点不影响DNA的正常合成。观察可知，为了避免破坏质粒上的重要基因且实现定向连接，应加上BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点。 【小问3详解】 用Ca2+处理大肠杆菌，目的是使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态）。 由可知，重组质粒中卡那霉素抗性基因完整，氯霉素抗性基因被破坏，所以先接种在添加卡那霉素的培养基上，能生长的是导入了重组质粒或普通质粒的大肠杆菌。然后转移到添加氯霉素的培养基上。收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落，这些是导入了重组质粒的大肠杆菌。 【小问4详解】 检测是否含有抗SSB的抗体，利用抗原 - 抗体杂交的方法。 25. 和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎工程技术，按下图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请据图回答下列问题。 （1）过程②给供体母牛注射_____________激素，可使其超数排卵。 （2）过程④采用_____________方法，将早期胚胎切割成2等份，该过程的生殖方式为_____________；该过程应选择发育良好 、形态正常的______________。若要保证培育的子代为母牛，则需要对早期胚胎进行性别鉴定，宜取图中[甲]______________细胞进行DNA分析。 （3）过程⑤只有供体和受体生理环境条件高度一致，移入的胚胎才能被接受并继续发育。所以，我们把该技术的实质概括为________。 （4）通过图中过程生出的子代和牛的遗传特性与受体奶牛的___________（相同/不同/不完全相同）。 【答案】（1）促性腺 （2） ①. 机械 ②. 无性繁殖（克隆） ③. 桑葚胚或囊胚 ④. 滋养层 （3）早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 （4）不同 【解析】 【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植后获得同卵双胎或多胎的技术。胚胎分割就像对早期胚胎“克隆”，通过分割获得多个遗传相同的胚胎，实现高效繁殖。早期胚胎培养是指将获得的受精卵或早期胚胎，在人工控制的体外环境（如培养皿）中，培养至桑椹胚或囊胚阶段的技术，为胚胎移植奠定基础。 【小问1详解】 在胚胎工程中，给供体母牛注射促性腺激素，能够促进其卵巢中卵泡的发育和成熟，从而实现超数排卵，以便获得更多的卵细胞用于后续的操作。 【小问2详解】 过程④是胚胎分割，采用机械的方法，将早期胚胎切割成2等份。胚胎分割技术是将一个胚胎分割成多个部分，每个部分都能发育成一个新个体，这种生殖方式没有经过两性生殖细胞的结合，属于无性生殖或克隆的方法之一。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。因为桑椹胚和囊胚时期的胚胎细胞具有较高的全能性，分割后更容易发育成完整的个体。若要保证培育的子代为母牛，宜取图中的滋养层细胞进行DNA分析。滋养层细胞是囊胚时期胚胎外层的细胞，它将来会发育成胎膜和胎盘等结构，对其进行DNA分析不会影响内细胞团（内细胞团将来发育成胎儿的各种组织）的正常发育，并且可以通过分析滋养层细胞中的性染色体组成等信息来确定胚胎的性别。 【小问3详解】 过程⑤中，供体和受体生理环境条件高度一致时，移入的胚胎才能被接受并继续发育。胚胎移植技术的实质可以概括为早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。这是因为胚胎移植只是将早期胚胎从供体的子宫内转移到受体的子宫内，在这个过程中，胚胎本身的遗传物质并没有改变，只是所处的空间位置发生了变化，并且受体的子宫为胚胎的发育提供了与供体相似的生理环境。 【小问4详解】 图中过程生出的子代和牛的遗传物质来自供体公牛和供体母牛，受体奶牛只是为胚胎的发育提供了孕育的场所和营养物质等，并没有将自己的遗传物质传递给子代和牛。所以子代和牛的遗传特性与受体奶牛的不同。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 肇东四中2024-2025学年下高二期末考试生物试卷 一、单选题 1. 下列关于家庭腌制泡菜的过程，叙述正确的是（ ） A. 腌制过程不必严格执行无菌操作 B. 腌制时，定期打开泡菜坛盖排气 C. 所用菌种是真菌 D. 所用菌种需要人工接种 2. 中国的许多传统美食制作过程蕴含了传统发酵技术。下列叙述正确的是（ ） A. 腐乳制作过程中，是以毛霉为单一菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B. 米酒制作过程中，将容器密封可促进酵母菌增殖 C. 馒头制作过程中，酵母菌进行呼吸作用产生CO2 D. 果醋制作过程中，所需的发酵温度低于果酒制作时的温度 3. 下列有关蛋白质工程的叙述，正确的是（ ） A. 蛋白质工程的直接操作对象是蛋白质分子 B. 蛋白质工程不能生产自然界不存在的蛋白质 C. 蛋白质工程最终是通过改造或合成基因来完成的 D. 蛋白质工程应先设计蛋白质的结构后再预期其功能 4. 下列属于植物的快速繁殖技术的是（ ） A. 用兰花的芽尖组织培育兰花幼苗 B. 水稻种子萌发并长成新个体 C. 扦插的葡萄枝长成新个体 D. 柳树芽发育成枝条 5. 纸片扩散法药物敏感试验是在涂有细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴上浸有不同种类抗生素的纸片，培养一段时间后测量抑菌圈的大小，从而得出受试菌株药物敏感性的结论。某次试验结果如图所示，下列有关叙述错误的是（ ） A. 本实验接种细菌时可以选用平板划线法 B. 出现抑菌圈的说明在接触抗生素后细菌受到抑制或已死亡 C. 抑菌圈越大，说明细菌对该种抗生素越敏感 D. 抗生素在培养基中的扩散速率会影响抑菌圈的大小 6. 下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A. 基因工程是在细胞水平上进行设计和施工的，又叫重组DNA技术 B. 限制性内切核酸酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗一分子水 C. 在进行基因工程操作中，天然质粒需经过人工改造后才能作载体 D. 质粒是一种裸露的、位于细胞核或拟核DNA上，具有自我复制能力的环状DNA 7. 如图为植物组织培养技术的流程图，下列有关说法正确的是（　　） A. 实验中①试管细胞全能性最高 B. ①→②的过程需要光照 C. ①→④过程培养基保持不变 D. 实验过程需细胞分裂素和生长素共同调节 8. 关于动物体细胞培养过程中细胞的活动或特性，下列表述错误的是 A. 细胞通常贴壁生长 B. 细胞进行有丝分裂 C. 细胞之间有接触抑制现象 D. 细胞的遗传物质均发生改变 9. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”及“DNA片段的扩增与电泳鉴定”实验的叙述正确的是（ ） A. 洋葱研磨液过滤到烧杯中，需要在4℃冰箱放置几分钟，再弃上清液 B. 向含DNA的试管中加入二苯胺试剂，混合后即可比较观察颜色变化 C. DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA分子大小和构象有关，与凝胶浓度无关 D. 电泳凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来 10. 下列对哺乳动物体细胞核移植技术的叙述，错误的是（　　） A. 可通过显微操作法去除卵母细胞的细胞核 B. 该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植 C. 通常采用MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞 D. 克隆动物是对提供体细胞的动物进行了100%的复制 11. 下列关于生物技术的安全性及伦理问题的观点，错误的是（ ） A. 应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 B. 生殖性克隆人问题带来了巨大的伦理挑战 C. 反对“设计试管婴儿”的原因之一是试管婴儿技术属于无性繁殖方式 D. 生物武器具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止 12. 下图表示哺乳动物胚胎早期发育过程的某个阶段，下列叙述正确的是（ ） A. 图中①将来发育成胎儿的各种组织 B. 图中③表示透明带，胚胎从其中伸展出来的过程叫作卵裂 C. 该胚胎均等分割后移植给受体，生出的后代毛色等性状一定相同 D. 胚胎干细胞是一类未分化的细胞，可以从早期胚胎中分离获得 13. 关于限制酶识别序列和切开部位的特点，下列叙述错误的是（　　） A. 限制酶所识别的序列都可以找到一条中轴线 B. 限制酶识别序列中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 C. 限制酶只识别和切割特定的核苷酸序列 D. 限制酶在任何部位都能将DNA切开 14. 下列有关将目的基因导入受体细胞的叙述，正确的是（　　） A. 将目的基因导入裸子植物细胞采用最多的方法是花粉管通道法 B. 植物的受体细胞可以是受精卵，也可以是叶肉细胞等体细胞 C. 将目的基因导入大肠杆菌可以先用碳酸钙处理大肠杆菌 D. 将某种药用蛋白基因导入动物乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器 15. 下图为不同限制性核酸内切酶识别的序列及切割位置（箭头所指），下列错误的是（　　） A. 图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列 B. 若DNA上的碱基随机排列，NotI限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶高 C. 酶切时使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 D. 用酶Bg1 Ⅱ切出的目的基因与酶BamHI切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开 二、不定项选题 16. 许多传统发酵食品如果酒、酸奶、面包、泡菜、火腿、腐乳、豆豉等，成为人们的美味佳肴。下列关于传统发酵技术的说法，错误的是（　　） A. 酵母、毛霉和曲霉等真核生物参与了腐乳的发酵 B. 制作泡菜过程中，适当提高温度可以抑制杂菌生长 C. 制作果醋时利用了醋酸菌在无氧条件下产生醋酸的原理 D. 面包松软可口的原因是酵母菌在发酵过程中产生了二氧化碳 17. 下列有关植物细胞工程应用的叙述正确的是（ ） A. 利用植物细胞培养技术获得紫草素，可实现细胞产物的工厂化生产 B. 通过单倍体育种得到的个体一定是纯合子 C. 利用植物组织培养技术可获得脱毒植株 D. 利用植物体细胞杂交技术培育的“白菜—甘蓝”，可获得双亲的遗传特性 18. 下图表示三亲婴儿的培养过程，下列相关说法错误的是（ ） A. 该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作 B. 三亲婴儿细胞中的染色体不仅仅来自甲和丙 C. 图示方法可避免携带有线粒体致病基因的甲产下患该病的子代 D. 核移植时可将乙卵母细胞在体外培养至MI中期 19. 科研人员以抗四环素基因作为标记基因，通过基因工程方法让工程菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰状细胞贫血。下列相关实验设计，不合理的是（ ） A. 用β-珠蛋白基因、启动子、终止子、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体 B. 利用正常小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列 C. 将β-珠蛋白基因表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中以便进行重组DNA的筛选 D. 生产鼠的β-珠蛋白的工程菌选择酵母菌比大肠杆菌更有优势 20. 用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，限制酶对应切点一定切开。两种酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述正确的是（　　） A. 图1中限制酶A、B识别的核苷酸序列不相同 B. 图1中X代表的碱基对数为5500 C. 推测图1中Y是限制酶B的酶切位点 D. 推测图2中①是限制酶A处理得到的酶切产物 三、解答题 21. 牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。请分析并回答下列问题： 实验步骤： Ⅰ、取样：从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。 Ⅱ、培养基的配制和灭菌： 配制全营养LB培养基。配方：水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂糖（一种凝固剂）。配制尿素培养基。配方：水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂糖。 Ⅲ、制备瘤胃稀释液并接种，如图1所示。 Ⅳ、在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。 （1）该小组采用_____法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下，利用该方法进行分离计数时，需要用到图2中的实验器材有_____，对③应采用_____方式灭菌。 （2）为了判断尿素培养基是否具有选择作用，实验时还需要同时接种全营养平板，如果同一浓度梯度下，尿素培养基上的菌落数_____（“大于”、“等于”或“小于”）全营养培养基上的菌落数，则说明尿素培养基具有选择作用。 （3）若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出现的菌落数如图1所示，则5 mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为_____。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数_____，原因是_____。 （4）降解尿素需要菌体中的_____酶催化。为鉴定菌落是否是尿素分解菌，可以在该培养基中需要加入的特殊染料是_____，通过观察菌落周围是否变红来筛选尿素分解菌。 22. 白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强、易于贮藏等优点。如图为“白菜甘蓝”的培育过程，请回答下列问题： （1）由原生质体A和原生质体B形成原生质体C的过程中，常使用的诱导剂是____________，该过程体现了细胞膜具有___________性。 （2）由细胞D得到愈伤组织的过程叫作________；由愈伤组织得到根、芽等器官的过程叫作___________。由细胞D得到一个完整的杂种植株，需要采用的细胞工程技术是___________，该过程体现了细胞D具有___________性。 （3）经花粉培育的二倍体“白菜甘蓝”植株，体细胞的染色体数为___________。这种植株通常不育，为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜甘蓝”，这种变异属于____________。 （4）上述育种方法与传统杂交育种方法相比较其优点在于_______________________。 23. 双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。如图是科研人员通过杂交瘤细胞技术生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体的部分过程。据图分析回答下列问题： （1）过程①后，从小鼠的脾脏中得到____________，说明小鼠体内形成了相应的B细胞。制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的技术有________________、________________。 （2）过程②诱导细胞融合的方法是_______________（生物法），过程③是第1次在HAT培养基上筛选,在该培养基上，_______都会死亡。 （3）经过程③筛选得到细胞还需转移至多孔培养板中进行过程④，目的是筛选出足够数量的能________的杂交瘤细胞。 （4）获得单克隆杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠_______内增殖均可。 24. 干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病，患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题： （1）利用RNA通过①过程获得cDNA需要______酶。将SSB基因片段与pET41a质粒“缝合”起来，需要______酶。 （2）为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的______（填“5′”或“3′”）端加上______酶切位点。 （3）③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_________的培养基上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加__________的培养基上培养，收集______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，筛选得到SSB蛋白。 （4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，后续实验内容应为抽取小鼠血液，提取其中的抗体，利用________________的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。 25. 和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎工程技术，按下图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请据图回答下列问题。 （1）过程②给供体母牛注射_____________激素，可使其超数排卵。 （2）过程④采用_____________方法，将早期胚胎切割成2等份，该过程的生殖方式为_____________；该过程应选择发育良好 、形态正常的______________。若要保证培育的子代为母牛，则需要对早期胚胎进行性别鉴定，宜取图中[甲]______________细胞进行DNA分析。 （3）过程⑤只有供体和受体生理环境条件高度一致，移入的胚胎才能被接受并继续发育。所以，我们把该技术的实质概括为________。 （4）通过图中过程生出的子代和牛的遗传特性与受体奶牛的___________（相同/不同/不完全相同）。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$