内容正文:
1.微生物:对所有形体微小、肉眼不可见的生物的统称。人们需要的微生物即目标微生物。
2.培养基
(1)培养基的概念和成分
第一节 微生物的培养需要适宜条件
知识点 1 培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
必备知识 清单破
概念 人们为满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的需求而配制的混合养料
成分 水 无机盐 碳源 氮源 生长因子
来源 — 无机物 无机碳、有机物 含氮化合物 有机化合物
功能 水是细胞的重要组成成分 影响微生物细胞的吸水能力、微生物的代谢和生长 构建微生物自身的有机物;有机物既是碳源又是能源 合成微生物自身的蛋白质等有机物 满足某些微生物特殊的需求
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
在满足微生物生长所需的各种物质的同时,还要考虑微生物生活所需要的能量来源。
(2)不同微生物对培养基的理化特性需求不同
营养成分配比(“细菌喜荤,霉菌喜素”) 培养基的酸碱性
细菌 培养基常用蛋白胨和酵母提取物等来配制 通常为中性偏碱
霉菌 培养基一般用可溶性淀粉加无机物配制,或用添加蔗糖的豆芽汁等配制 中性偏酸
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
(3)培养基的类型
按物理特征分类 按化学成分分类
液体培养基 固体培养基 合成培养基 天然培养基
特点 不加凝固剂(如琼脂),微生物生长速度快 加入凝固剂(如琼脂),微生物生长速度慢 化学成分完全清楚 用化学成分不明确或成分不恒定的天然有机物制成,成本低
用途 常用于大规模快速繁殖某种微生物 常用于微生物分离、鉴定、活菌计数(平板)、菌种保存(斜面) 一般用于在实验室进行的、要求可重复性强的研究工作 常用于大规模的生物发酵工业
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
易错强调 区分平板和斜面
(1)平板和斜面都属于固体培养基,但两者制备方法稍有不同,用途也有所区别。
(2)平板
①概念:将灭菌后未凝固的固体培养基注入培养皿中,冷凝后制成的固体培养基简称为“平
板”。
②作用:可以让人们清楚地观察到在培养基表面由单个细胞生长繁殖成的菌落,常用于微生
物的分离、鉴定、活菌计数等。
③倒平板的过程
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第1讲 描述运动的基本概念
(3)斜面
①概念:将灭菌后未凝固的固体培养基注入试管,将试管斜放在台面上,培养基冷却后在试管
中形成了一个斜面,这样的固体培养基简称为“斜面”。
②作用:常用于菌种保存。
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
1.无菌技术:在培养某种微生物时,防止其他微生物混入,保持无菌物品及无菌区域不被污染
的操作技术。
2.保证实验器具与培养基无菌是获得微生物“纯”培养物的基础。
(1)加热是除掉各种微生物的简便易行的办法。
(2)高压灭菌
①装置:高压灭菌锅。
②灭菌时所需的温度、压力和时间:根据要消灭的微生物芽孢等结构的耐热性来确定。在微
生物实验中常用121 ℃(1 kg/cm2压力)对实验器具和培养基进行15~20 min的灭菌处理。
(3)较高温度下会分解的物质如尿素,可进行过滤除菌后,再在超净工作台内添加到培养基中;
对含葡萄糖的培养基,可采用适当降低温度、压力以及延长时间的高压灭菌方法灭菌。
(4)高压灭菌后,培养基放入超净工作台。实验器具放入烘箱中烘干,除去灭菌时高压蒸汽产
生的水分以免金属器械锈蚀。
知识点 2 灭菌和无菌操作技术可以排除非目标微生物的干扰
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
3.分装和接种
(1)分装时,培养基不可黏附在三角瓶口、试管口、培养皿内壁上的原因:防止在培养过程中
非目标微生物从瓶口沿器皿内壁上的培养基向内生长而发生污染。
(2)接种
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
4.对于接种间、培养间应定期采用紫外线或药物熏蒸的方法进行杀菌或消毒。在全部培养
工作结束后,所有使用过的器皿、废弃物等都必须先经过高压灭菌后再洗涤或倾倒,以免有
害菌体致病或污染环境。
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第1讲 描述运动的基本概念
知识点 3 配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基
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第1讲 描述运动的基本概念
特别提醒 配制斜面培养基注意事项
(1)控制好温度,防止培养基提前凝固。
(2)不要让培养基粘在试管口。
(3)试管中的液体量约为试管长度的1/4。
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
知识辨析
1.大肠杆菌在液体培养基和固体培养基中的繁殖速度相同吗?
不相同。细胞与固体培养基接触面积较小,细胞与环境间物质交换速度相对较慢,固体培养基表面的微生物生长速度比在液体培养基中慢。
2.已知某微生物培养基的成分为(NH4)2SO4、KH2PO4、FeSO4、CaCl2、H2O,推测该培养基可
培养圆褐固氮菌。这种说法正确吗?
不正确。该培养基缺少有机碳源,可用于培养自养型微生物。圆褐固氮菌虽可以固氮,但其同化作用类型为异养型,培养基中必须提供含碳有机物,所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌。
提示
提示
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
3.在使用涂布器接种时,应该将涂布器在酒精灯的火焰上进行灼烧,然后立即进行涂布,以防
止其他微生物进入。这种说法正确吗?
不正确。在使用涂布器接种时,应将涂布器浸泡在75%的酒精中,接种前将表面残留着少量
酒精的涂布器在酒精灯火焰上灼烧,冷却后用于涂布,避免高温烫死菌种。
4.微生物培养结束后,所有使用过的器皿需直接洗涤后保存。这种说法正确吗?
不正确。微生物培养结束后,所有使用过的器皿、废弃物等都必须先经过高压灭菌后再洗
涤或倾倒。
5.马铃薯浸汁给酵母菌的生长提供了碳源、氮源、无机盐等成分。这种说法正确吗?
正确。马铃薯浸汁为天然成分,含有糖类、氨基酸、无机盐等,可为酵母菌的生长提供碳源、氮源、无机盐等。
提示
提示
提示
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
定点 比较消毒、灭菌与防腐
关键能力 定点破
消毒 灭菌 防腐
方法 较温和的物理、化学方法 强烈的物理、化学方法 控制理化因素
结果 仅杀死物体表面或内部一部分不需要的微生物 杀灭物体表面以及内部的一切微生物,包括芽孢和孢子 抑制微生物生长繁殖
实例 (1)日常用品用煮沸消毒法;
(2)接种室、超净工作台用紫外线消毒法;
(3)皮肤、水果、饮用水用化学药剂消毒法 (1)接种工具用灼烧灭菌法;
(2)培养基、器具用高压蒸汽灭菌法;
(3)不能高温灭菌的化合物,要用无菌的G6玻璃砂漏斗过滤除菌 (1)除氧剂抑制需氧型微生物的繁殖;
(2)低温、盐腌、糖渍、干燥等措施保存食物
第一章 发酵工程
第1讲 描述运动的基本概念
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