第10单元 第45课时 动物细胞工程（课件PPT）-【优化指导】2026年高考生物学一轮复习高中总复习·第1轮（云南专版）

高考总复习 生物学 第十单元　生物技术与工程 第45课时　动物细胞工程 素养 目标 1.结合动物细胞的结构和功能理解动物细胞工程的基本原理和培养条件。(生命观念) 2．通过学习动物细胞工程的基本操作流程，培养模型构建能力。(科学思维) 3．探究动物细胞工程的应用；结合高产奶牛的克隆过程，掌握动物细胞核移植技术。(科学探究) 4．了解动物细胞工程的应用前景，为解决自然条件下动物繁殖率低、产量低的问题提出可行性建议。(社会责任) 1．动物细胞培养的概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成________，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞__________的技术。 2．动物细胞培养的条件 单个细胞 生长和增殖 考点一 动物细胞培养 考点一 动物细胞培养 3．动物细胞培养的过程 (1)体外培养的动物细胞的类型 ①一类细胞能够____________中生长增殖。 ②另一类则需要__________________才能生长增殖，而且还会发生________现象，从而使细胞停止分裂增殖。 悬浮在培养液 贴附于某些基质表面 接触抑制 考点一 动物细胞培养 (2)过程 考点一 动物细胞培养 4．干细胞的种类、来源及其特点 种类 胚胎干细胞 成体干细胞 诱导多能干细 胞(iPS细胞) 来源 ________ 骨髓、外周血、脐带血等 体细胞(如成纤维细胞等) 特点 具有分化成任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至____的潜能 具有________性，只能分化成________________ 能诱导分化成类似__________的细胞 早期胚胎 组织特异 特定的细胞或组织 胚胎干细胞 个体 考点一 动物细胞培养 1．辨析正误(正确的画“√”，错误的画“×”) (1)制备肝细胞悬液时可用胃蛋白酶处理。( 　) 提示：胃蛋白酶的最适pH为1.5，强酸性环境对肝细胞有伤害，应用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理。 (2)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸。( 　) 提示：动物细胞培养时通入5% CO2的主要作用是维持培养液的pH。 × × 考点一 动物细胞培养 (3)动物细胞培养技术的原理是细胞增殖。( 　) (4)动物细胞培养要定期更换培养液，其目的是便于清除代谢物，防止代谢物积累对细胞自身造成危害。( 　) √ √ 考点一 动物细胞培养 2．教材深挖 (1)(选择性必修3 P45“思考·讨论”拓展)动物细胞培养时，为什么一般选取幼龄动物的组织、器官作为材料？ ________________________________________________________ ________________________________________________________ (2)(选择性必修3 P44拓展)动物细胞培养时，为什么要将动物组织分散成单个细胞？ ________________________________________________________ ________________________________________________________ 考点一 动物细胞培养 答案：(1)幼龄动物的细胞分化程度较低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。 (2)①防止细胞因密度过大而抑制生长和增殖；②保证细胞所需要的营养供应；③保证细胞内有害代谢物的及时排出。 考点一 动物细胞培养 1．两对重要概念的辨析 (1)原代培养和传代培养 ①原代培养：动物组织经处理后的初次培养。 ②传代培养：分瓶后的细胞培养。在进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集；贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集。之后，将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养。 考点一 动物细胞培养 (2)细胞贴壁和接触抑制 ①细胞贴壁是指体外培养的细胞贴附在瓶壁上生长的现象；接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。 ②细胞贴壁生长对培养瓶的要求：培养瓶内表面光滑、无毒、易于贴附。 ③打破接触抑制现象的方法是将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。 考点一 动物细胞培养 2．动物细胞培养和植物组织培养的比较 项目 动物细胞培养 植物组织培养 理论基础 细胞增殖 植物细胞的全能性 培养前处理 无菌；用机械的方法，或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理，使组织分散成单个细胞 无菌、离体 取材 动物早期胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 植物幼嫩的部位或花药等 考点一 动物细胞培养 培养基性质 液体 固体 培养基成分 糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等 水、无机盐、蔗糖、维生素、植物激素和琼脂等 结果 细胞培养产生大量细胞，不形成新个体 可产生新个体 应用 人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产 快速繁殖、作物脱毒、细胞产物的工厂化生产和单倍体育种等 续表 考点一 动物细胞培养 相同点 ①都需人工条件下的无菌操作 ②都需要适宜的温度、pH等条件 ③都进行有丝分裂，都不涉及减数分裂 续表 考点一 动物细胞培养 角度 基于动物细胞培养的过程，考查生命观念及科学探究 1．HEK293细胞是人工改造后的人胚肾细胞，具有贴壁生长的特性。分瓶时，一瓶细胞可分到几瓶中培养，这个瓶数称为分瓶比，分瓶数越多，分瓶比越大。下列关于HEK293细胞培养的叙述，错误的是(　　) A．在HEK293细胞培养液中加入血清可补充蛋白质和生长因子 B．HEK293细胞的培养需要95%空气和5%CO2的气体环境 C．分瓶前应用胰蛋白酶等处理贴壁生长的HEK293细胞 D．分瓶比越大，HEK293细胞分瓶换液的周期越短 D 考点一 动物细胞培养 [多维解题] 考点一 动物细胞培养 解析：血清中含有蛋白质和生长因子，能促进细胞增殖，A正确；动物细胞培养时气体环境为95%空气和5%CO2，后者能起到维持培养液pH的作用，B正确；分瓶前需要用胰蛋白酶等处理贴壁生长的细胞，用于制作单细胞悬液，C正确；分瓶比越大，瓶中的细胞密度越低，形成紧密单层细胞的周期越长，细胞分瓶换液的周期越长，D错误。 考点一 动物细胞培养 2．(2025·云南保山模拟)下图所示为动物细胞培养的基本过程，下列关于甲、乙、丙、丁四个操作过程的叙述，正确的是 (　　) A．过程甲可选取动物个体的任何组织细胞 B．过程乙可用纤维素酶和果胶酶处理细胞 C．过程丙所用培养液中需添加动物血清 D．过程丁中的细胞因接触抑制而大量死亡 C 考点一 动物细胞培养 解析：过程甲应选取动物体中分裂能力强的细胞，A错误；过程乙可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理细胞，B错误；由于人们对细胞所需的营养物质尚未完全研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，C正确；过程丁中的细胞因接触抑制而影响细胞增殖，并不会大量死亡，D错误。 考点一 动物细胞培养 角度 基于干细胞培养及其应用，考查社会责任 3．(2025·广西南宁模拟)某学术期刊发表论文称，利用人类多能干细胞培养的皮肤类器官在培养4～5个月后，形成了多层皮肤组织，包含毛囊、皮脂腺和神经元回路，是迄今最逼真的人皮肤类器官。下列相关叙述正确的是(　　) A．多能干细胞形成多层皮肤组织的过程中，遗传物质通常会发生改变 B．多能干细胞培养形成多层皮肤组织，说明动物的体细胞具有全能性 C 考点一 动物细胞培养 C．给烧伤病人移植自身多能干细胞培养成的皮肤类器官可减弱免疫排斥反应 D．该项研究结果表明多能干细胞可以分化成为人体内所需的各种组织和器官 考点一 动物细胞培养 解析：多能干细胞形成多层皮肤组织的过程中，遗传物质并未发生改变，只是发生基因的选择性表达，A错误；多能干细胞培养形成多层皮肤组织，未发育成完整个体或分化成各种细胞，不能体现动物体细胞的全能性，B错误；研究结果表明，多能干细胞能形成多层皮肤组织，包含毛囊、皮脂腺和神经元回路，但不能说明其能分化成各种组织和器官，D错误。 考点一 动物细胞培养 4．有学者已成功地利用人体皮肤细胞诱导出具备胚胎干细胞功能的干细胞，并在利用皮肤干细胞治疗镰状细胞贫血方面获得进展。下列相关叙述正确的是 (　　) A．干细胞一般存在于早期胚胎中，而成体中没有干细胞的存在 B．皮肤干细胞可用于治疗镰状细胞贫血，是因其经诱导形成了造血干细胞 C．从皮肤细胞诱导出具备胚胎干细胞功能的干细胞，是细胞再分化的过程 D．与利用人体胚胎干细胞进行研究和疾病治疗相比，皮肤干细胞没有优势 B 考点一 动物细胞培养 解析：成体中也具有干细胞，如造血干细胞，A错误；镰状细胞贫血患者的红细胞结构和功能异常，所以皮肤干细胞可用于治疗镰状细胞贫血，是因其经诱导形成了造血干细胞，B正确；细胞再分化是指重新启动分化发育的过程，从皮肤细胞诱导出具备胚胎干细胞功能的干细胞，不属于细胞再分化的过程，C错误；与利用人体胚胎干细胞进行研究和疾病治疗相比，皮肤干细胞拥有更容易获得的优势，D错误。 考点一 动物细胞培养 1．动物细胞融合技术 (1)概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 (2)原理：______________。 (3)融合方法：_____________________________________等。 (4)结果：形成具有原来两个或多个细胞的遗传信息的杂交细胞。 (5)意义：突破了________的局限，使远缘杂交成为可能。 (6)应用 ①成为研究________________________________________等的重要手段。 ②为制造__________开辟了新途径。 细胞膜的流动性 PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法 有性杂交 细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种 单克隆抗体 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 2．单克隆抗体及其应用 (1)制备原理 ①B淋巴细胞的特点：每一个B淋巴细胞只分泌一种__________。 ②骨髓瘤细胞的特点：能在体外________。 ③杂交瘤细胞的特点：既能________，又能产生足够数量的________。 特异性抗体 大量增殖 大量增殖 特定抗体 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 (2)制备过程 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 (3)单克隆抗体的特点和应用 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 1．辨析正误(正确的画“√”，错误的画“×”) (1)相比植物体细胞杂交，动物细胞融合特有的诱导方式是用灭活的病毒处理。( 　) (2)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞类型(仅考虑细胞两两融合的情况)。( 　) (3)单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。( 　) 提示：第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，而第二次筛选是为了获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。 √ √ × 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 (4)杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体。( 　) (5)动物细胞融合过程中既有细胞膜的融合也有细胞核的融合。( 　) √ √ 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 2．教材深挖 (选择性必修3 P48“相关信息”)灭活病毒诱导细胞融合的原理是____________________________________________________________ ____________________________________________________________。 答案：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 1．植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性、细胞增殖 融合前处理 去除细胞壁 使细胞分散开 相关酶 纤维素酶和果胶酶 胰蛋白酶、胶原蛋白酶等 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 诱导方法 ①物理法：电融合法、离心法 ②化学法：聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法 ①物理法：电融合法 ②化学法：聚乙二醇(PEG)融合法 ③生物法：灭活病毒诱导法 结果 杂种植株 杂交细胞 应用 培育植物新品种 主要用于制备单克隆抗体 意义 突破远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合 续表 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 相同点 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的方法与诱导植物原生质体融合的方法相似 续表 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 2.单克隆抗体制备过程中两次筛选的比较 项目 第一次筛选 第二次筛选 筛选原因 诱导融合后会得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 筛选 方法 用特定的选择培养基筛选：未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞(“B—B”细胞、“瘤—瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B—瘤”细胞)才能生长 用多孔培养皿培养，在每个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能分泌所需抗体的细胞 筛选 目的 得到杂交瘤细胞 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 续表 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 角度 基于动物细胞融合技术的原理和过程，考查生命观念及科学探究 1．细胞融合技术是研究细胞遗传、细胞免疫等的重要手段，如图中A、B表示两种动物细胞。下列有关说法错误的是(　　) D 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 A．图示过程与植物原生质体融合的基本原理相同 B．需要将仙台病毒用紫外线等灭活使其失去感染能力 C．图中C细胞进行的细胞分裂方式为有丝分裂 D．将A、B细胞等量混合诱导得到的融合细胞即为杂交细胞 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 解析：图示过程利用的原理是细胞膜具有一定的流动性，与植物原生质体融合的基本原理相同，A正确；用灭活的病毒作诱导因素，需要将仙台病毒用紫外线等灭活使其失去感染能力，B正确；图中C细胞具有纺锤体，进行的细胞分裂方式为有丝分裂，C正确；将A、B细胞等量混合诱导得到的融合细胞可能有A—A、B—B、A—B型的，其中A—B是杂交细胞，D错误。 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 2．下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是 (　　) A．动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术 B．细胞融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个动物细胞的遗传信息 C．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 D．常用的诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法和紫外线照射等 D 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 解析：常用的诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，而紫外线照射不是诱导动物细胞融合的方法，D错误。 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 角度 基于单克隆抗体的制备及其应用，考查科学探究及社会责任 3．下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，下列有关叙述错误的是(　　) C 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 A.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B．利用PEG融合法、灭活病毒诱导法和电融合法等方法可诱导细胞融合获得乙 C．用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D．丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 解析：用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合的具有同种核的细胞和未融合的细胞均不能生长，只有杂交瘤细胞能生长，C错误。 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 4．单克隆抗体在多种疾病的诊断和治疗中发挥重要的作用，下图为利用小鼠制备单克隆抗体的过程，下列有关叙述正确的是 (　　) D 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 A．提取的脾B淋巴细胞有多种，是因为一种抗原可诱导产生多种B淋巴细胞 B．诱导动物细胞融合的方法与诱导植物细胞原生质体融合的方法完全相同 C．在具有杂交瘤细胞的培养板上滴加相应抗体，出现阳性反应的即为目标细胞 D．筛选出的目标杂交瘤细胞可在体外或注射到小鼠腹腔内进一步增殖培养 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 解析：一种抗原只能诱导B淋巴细胞产生一种抗体，提取的脾B淋巴细胞有多种，是因为小鼠曾经接触过多种抗原，A错误；诱导动物细胞融合的方法与诱导植物细胞原生质体融合的方法不完全相同，如诱导动物细胞融合的特有方法是灭活病毒诱导法，B错误；单抗检测时可用抗原—抗体反应鉴定，取培养液滴加相应抗原，出现阳性反应的为目标细胞，C错误；筛选出的目标杂交瘤细胞可在体外或注射到小鼠腹腔内进一步增殖培养，D正确。 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 5．(2025·云南昆明模拟)抗体—药物偶联物(ADC)通过将具有生物活性的小分子药物与能特异性识别肿瘤细胞的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如下图所示，下列有关说法错误的是 (　　) C 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 A．单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 B．用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体 C．ADC通过抗体与细胞膜上的受体特异性结合，以主动运输的方式进入肿瘤细胞 D．ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 解析：利用动物细胞融合技术将免疫后得到的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，从而制备单克隆抗体，A正确；单克隆抗体制备过程中至少经过两次筛选，第一次是用特定的选择培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞，第二次是进行克隆化培养和抗体检测，即用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞，然后可将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外大规模培养获得单克隆抗体，B正确；由图可知，ADC通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，C错误；ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，D正确。 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 1．动物细胞核移植技术的概念：是将动物一个细胞的细胞核移入______________中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 2．动物细胞核移植的原理：__________________。 3．动物细胞核移植的类型 (1)胚胎细胞核移植。 (2)______核移植。 去核的卵母细胞 动物细胞核的全能性 体细胞 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 4．体细胞核移植的过程 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 5．体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题 (1)应用前景 ①畜牧生产中：加速家畜________进程，促进____________。 ②医药卫生领域：转基因克隆动物可以作为__________，生产医用蛋白。 ③治疗人类疾病：转基因克隆动物的细胞、组织或器官可以用于________等。 ④使人类更深入地了解______________过程。 ⑤保护濒危物种方面：增加濒危物种的________。 遗传改良 优良畜群繁育 生物反应器 异种移植 胚胎发育及衰老 存活数量 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 (2)存在的问题 ①体细胞核移植技术的______非常低。 ②相对于技术研究，核移植的理论研究较为____。 ③绝大多数克隆动物存在健康问题，表现出遗传和____缺陷。 成功率 滞后 生理 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．辨析正误(正确的画“√”，错误的画“×”) (1)重构胚相当于受精卵，需要动物细胞培养和胚胎工程技术的支持。( 　) (2)克隆动物的性状与供核动物完全相同。( 　) 提示：克隆动物重构胚细胞质中的遗传物质来自卵母细胞，其性状与供核动物不完全相同。 (3)减数分裂 Ⅱ 中期的卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物。( 　) √ × √ 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 (4)与“多莉”等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植、细胞培养和体细胞核移植等。( 　) √ 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 2．教材深挖 (选择性必修3 P53“图2-18”拓展)动物体细胞核移植属于有性生殖还是无性生殖？并分析原因。 ________________________________________________________ ________________________________________________________ 答案：动物体细胞核移植得到的个体没有经过两性生殖细胞的结合，不是由受精卵发育来的，因此属于无性生殖。 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．动物体细胞核移植的过程分析 (1)原理：动物细胞核的全能性，而不是动物细胞的全能性。动物体细胞的全能性受到限制，不能经培养直接发育成完整个体。用体细胞核移植技术能够得到克隆动物，说明动物体细胞的细胞核具有全能性。 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 (2)受体细胞：M Ⅱ 期的卵母细胞。 选用该细胞的原因： ①卵母细胞的细胞质内存在激发细胞核全能性表现的物质。 ②卵母细胞体积大，便于操作。 ③卵母细胞内卵黄多，营养物质丰富。 (3)注入去核的卵母细胞 ①细胞核移植技术中注入去核卵母细胞中的不是供体细胞核，而是整个细胞，伴随着两细胞融合，体现出细胞膜具有一定的流动性的结构特点。 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 ②核移植时，一般先用电融合法使供体和受体细胞融合形成重构胚，再用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 (4)涉及的生物技术：动物细胞培养技术、动物细胞融合技术、体细胞核移植技术、胚胎移植技术等。其中，体细胞核移植是核心技术。 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 2．克隆动物的遗传特点 克隆动物的亲本有3个，即体细胞核供体、卵母细胞细胞质供体和代孕母体。 (1)体细胞核供体：克隆动物的细胞核基因来自体细胞核供体，克隆动物的性状与体细胞核供体基本相同。 (2)卵母细胞细胞质供体：克隆动物的细胞质基因来自卵母细胞，克隆动物的性状与卵母细胞细胞质供体部分相同。 (3)代孕母体：没有为克隆动物提供遗传物质，克隆动物的性状与代孕母体没有直接关系。 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．(2025·云南曲靖模拟)研究人员采用体细胞克隆技术培育克隆羊，其操作流程如下图所示。下列叙述正确的是 (　　) C 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 A. X不能直接发育为个体的原因是细胞中的遗传物质不能表达 B．重构胚要进行分裂和发育需经振荡或用灭活的病毒、PEG等激活 C．早期胚胎在丙体内能正常孕育是因为胚胎可与母体建立正常的生理和组织联系 D．经培育得到的丁羊，其细胞内的遗传物质与甲完全相同 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 解析：X不能直接发育为个体的原因是动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，A错误；重构胚要进行分裂和发育需用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活，B错误；经培育得到的丁羊，其细胞核遗传物质来自甲，而细胞质遗传物质大部分来自乙，因此其细胞内的遗传物质与甲不完全相同，D错误。 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 2．“中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆猴，它们也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的非人灵长类动物。下图表示培育“中中”和“华华”的流程。下列相关叙述不正确的是 (　　) B 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 A．图示过程中利用的技术有体细胞核移植和动物细胞培养等 B．这两只克隆猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎 C．融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件 D．利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猴的难度要小些 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 解析：图示过程包括体细胞核移植和动物细胞培养等技术，A正确；这两只克隆猴是通过体细胞核移植、胚胎移植获得的，不是由受精卵发育而成的，B错误；融合细胞的培养过程需要无菌、无毒的环境和营养等条件，C正确；胚胎干细胞的分化程度低，表现全能性相对容易，而体细胞分化程度高，全能性表达困难，所以利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猴的难度要小些，D正确。 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．(2024·浙江1月选考)某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。 下列叙述错误的是 (　　) A．①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离 B．②加培养液的目的是促进细胞增殖 C．③分装时需调整到合适的细胞密度 D．整个过程需要在无菌、无毒条件下进行 B 解析：①加消化液的目的是使细胞分散开来，A正确；②加培养液的目的是稀释消化液，避免过度消化，B错误；③分装时需调整到合适的细胞密度，若密度过大，则不利于细胞增殖，C正确；动物细胞培养需要无菌、无毒环境，因此整个过程需要在无菌、无毒条件下进行，D正确。 2． (2024·吉林高考)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是 (　　) A．传代培养时，培养皿需密封防止污染 B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理 C．直接用离心法收集细胞进行传代培养 D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关 D 解析：迷动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的。传代培养时，培养皿不能密封，A错误。处于指数增长期的细胞形态和生理特性相对稳定，适合进行传代培养，离体培养的细胞生命力比较脆弱，需要适应培养基的环境，传代最好在细胞生长覆盖瓶底80%～90%进行，选取②的细胞进行传代培养比①更合理，B错误。题干显示从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，C错误。悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，因此，细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关，D正确。 3．(2023·北京高考)甲状旁腺激素(PTH)水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述不正确的是 (　　) A．需要使用动物细胞培养技术 B．需要制备用PTH免疫的小鼠 C．利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞 D．筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞 D 解析：单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养，即需要使用动物细胞培养技术，A正确；制备单克隆抗体用于快速检测PTH，故需要用PTH刺激小鼠，使其产生相应的B细胞，B正确；抗原与抗体的结合具有特异性，可利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞，C正确；由于一个B细胞经分化形成浆细胞后通常只能产生一种抗体，故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌多种抗体，D错误。 4．(2023·湖北高考)某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如下图所示。 回答下列问题： (1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞(含浆细胞)________(填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是_______________________________________________________ ________________________________________________________。 (2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对________________________和________________________生长具有抑制作用。 (3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是______________________________________________________ ___________________________________________________________。 (4)构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下列属于DNA连接酶底物的是________。 答案：(1)不需要　使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 (2)未融合的亲本细胞　融合的具有同种核的细胞 (3)通过抗体检测呈阳性来筛选分泌所需抗体的杂交瘤细胞 (4)④ 解析：(1)浆细胞是高度分化的细胞，不能增殖，所以不需要通过原代培养扩大细胞数量。脂溶性物质PEG可使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。(2)在杂交瘤细胞筛选过程中，用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。(3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，是运用了抗原—抗体杂交技术，抗体检测呈阳性的细胞，即为所需的杂交瘤细胞。(4)DNA连接酶能连接DNA片段，脱氧核苷酸的磷酸基团位于5'端，—OH位于3' 端，①②③脱氧核苷酸链的两端基团有误；DNA连接酶能催化合成磷酸二酯键，即将一条脱氧核苷酸链5'端的磷酸基团与另一条脱氧核苷酸链的3'端的—OH相连，④符合题意。 ►情境素材 科学家将小鼠多能干细胞的4种基因Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4，同时导入已分化的小鼠成纤维细胞中，结果后者被诱导成为多能干细胞，称为诱导多能干细胞(iPS细胞)，此类细胞能分裂并产生皮肤细胞、神经细胞以及可以搏动的心肌细胞等。 ►命题设计 设计1　考查对基础知识的识记能力 (1)人体干细胞可以分为____________________________两大类。 设计2　考查长句表达能力 (2)动物细胞培养过程中需通入CO2，其作用是________________________________________________________________________________________________________。 设计3　考查科学探究与长句表达能力 (3)艾弗里在证明DNA是遗传物质的实验中，通过分别向不同实验组加入各类酶来确认“转化因子”的化学本质，利用了自变量控制的________原理。参考此方法，如果要了解Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因在诱导iPS细胞时，每个基因作用的相对大小，该如何进行实验？请你给出实验设计的思路：______________________________ ___________________________________________________________。 答案：(1)胚胎干细胞、成体干细胞 (2)维持培养液的pH (3)减法　依次去掉1个基因，将其他3个基因转入小鼠成纤维细胞中，通过与转入4个基因的小鼠成纤维细胞的诱导情况进行比较，来推测缺失的基因对诱导iPS细胞的影响，进而判断每个基因作用的相对大小(合理即可) 解析：(1)按照发育状态，干细胞可以分为成体干细胞和胚胎干细胞。(2)在动物细胞培养过程中，培养液中必须通入O2和CO2，通入CO2的目的是维持培养液的pH。(3)艾弗里通过加入酶水解某类特定的物质，利用了自变量控制的减法原理。若用减法原理验证Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因在诱导iPS细胞时，每个基因作用的相对大小，可在导入基因时，依次去掉某个特定的基因，只导入其他3个基因到小鼠成纤维细胞中，通过与转入4个基因的小鼠成纤维细胞的诱导情况进行比较，来推测缺失的基因对诱导iPS细胞的影响，进而判断每个基因作用的相对大小。 请完成：课时跟踪练(45) 温馨提示 谢谢观看！ $$