精品解析：广东省肇庆市第六中学2024-2025学年高二下学期期中检测生物试题

肇庆市第六中学2024-2025学年第二学期高二级期中检测 生物 一、单选题（共16题，1-12题每题2分，13-16题每题4分） 1. 关于现代生物技术的应用及其安全性与伦理问题，以下叙述正确的是（　　） A. 转基因食品千万不能吃，吃了会导致性早熟 B. 反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术设计婴儿性别 C. 为了国家的安全，可以进行必要的小范围的生物武器研究 D. 试管牛所采用的技术中包含体外受精、胚胎移植和克隆技术 【答案】B 【解析】 【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。 【详解】A、应基于科学和理性讨论转基因作物的安全性问题，目前尚无明确的科学证据表明转基因食品直接导致性早熟，A错误； B、我国不允许利用体外受精技术筛选早期胚胎性别，反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术设计婴儿性别，B正确； C、为了国家安全，应在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误； D、 试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，试管牛所采用的技术中包含体外受精、早期胚胎培养技术和胚胎移植等，没有克隆技术（核心是细胞核移植），D错误。 故选B。 2. 基于AI（人工智能）的蛋白质设计方法可以利用现有蛋白质数据库以及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构及功能。下列有关说法错误的是（ ） A. AI预测新型蛋白质结构和功能的原理是中心法则 B. AI可能帮助人们快速、深入了解蛋白质结构与功能的关系 C. AI有可能帮助人们高效地设计出自然界中原来没有的蛋白质 D. 人们可通过基因改造或合成新基因来获得AI所设计的蛋白质 【答案】A 【解析】 【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求，蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上只能生产自然界已有的蛋白质。 2、蛋白质工程的基本思路：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。 【详解】A、AI可基于大量的生物信息数据和复杂的算法，并根据氨基酸序列预测蛋白质的三维结构，进而预测新型蛋白质的功能，这个过程与中心法则无关，A错误； B、AI的蛋白质设计方法可用来预测新型蛋白质的结构及功能，可能能帮助人们快速、深入了解蛋白质结构与功能的关系，B正确； C、AI的蛋白质设计方法可用来预测新型蛋白质的结构及功能，AI有可能帮助人们高效地设计出自然界中原来没有的蛋白质，C正确； D、对蛋白质的改造是通过改造或合成基因来完成的，所以人们可通过基因改造或合成新基因来获得AI所设计的蛋白质，D正确。 故选A。 3. 在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞和组织才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答，叙述正确的是（ ） ①A过程需要的酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶　 ②C过程为脱分化过程，培养基中只需加入营养物质 ③B过程需要加入卡那霉素进行选择培养　 ④D过程可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测　 ⑤D过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测 A. ①②④⑤ B. ①②③④⑤ C. ③④⑤ D. ①③④⑤ 【答案】D 【解析】 【详解】A过程的构建基因表达载体，需要限制酶和DNA连接酶，①正确；c过程表示脱分化过程，需加营养物质、植物激素、矿质元素等，②错误；B过程进行筛选，所以需要加卡那霉素，③正确；D过程对目的基因的检测和鉴定，既可在分子水平上进行，也可在个体水平上进行，④⑤正确。 故选D 4. 超氧化物歧化酶（SOD）能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。下图为人工培育含SOD植物新品种的过程，相关叙述不正确的是 A. SOD催化O2形成H2O2的机制是降低了该化学反应的活化能 B. ②、③分别表示脱分化、再分化过程，均需严格的无菌操作 C. ①过程中最常用的方法是采用显微注射技术将SOD基因导入植物细胞 D. 该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性 【答案】C 【解析】 【详解】SOD超氧化物歧化酶催化O2形成H2O2的机制是降低了该化学反应的活化能，A正确。②、③分别表示脱分化、再分化过程，除了需要严格的无菌条件，还需要适宜的温度、PH、一定的营养等条件，B正确。①过程中最常用的方法是采用农杆菌转化法将SOD基因导入植物细胞，C错误；该育种方式利用了细胞工程和基因工程，从植物细胞培育成植物个体，能体现细胞的全能性，D正确。 【考点定位】植物组织培养、基因工程 【名师点睛】学生易对将目的基因导入受体细胞的方法混淆不清 5. 下表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。下列有关说法正确的是（ ） 限制酶 AluⅠ BamHⅠ SmaⅠ Sau3AⅠ 识别序列 切割位点 AG↓CT TC↑GA G↓GATCC CCTAG↑G CCC↓GGG GGG↑CCC ↓GATC CTAG↑ A. BamHⅠ切割的是氢键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键 B. 能被BamHⅠ切割的序列也能被Sau3AⅠ识别和切割 C. 限制酶AluⅠ和SmaⅠ切割产生的末端属于黏性末端 D. 上述限制酶切割产生的任意末端均可被T4DNA连接酶连接 【答案】B 【解析】 【分析】限制性内切核酸酶，简称限制酶： （1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来； （2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂； （3）结果：形成黏性末端或平末端。 【详解】A、BamHⅠ切割的是磷酸二酯键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键，A错误； B、BamHⅠ的识别序列是GGATCC，Sau3AⅠ的识别序列是GATC，前者的识别序列比后者长，且包括后者的识别序列，所以能被BamHⅠ切割的序列也能被Sau3AⅠ识别和切割，B正确； C、限制酶AluⅠ和SmaⅠ切割产生的末端属于平末端，C错误； D、T4DNA连接酶既可以缝合双链DNA片段互补的黏性末端，又可以缝合双链DNA片段的平末端，只是连接平末端的效率相对较低，但上述限制酶切割产生的末端，如AluⅠ产生的末端和BamHⅠ产生的末端，不可被T4DNA连接酶连接，D错误。 故选B。 6. 多溴联苯醚（简称BDE-47）是一种电子垃圾分解后产生的环境污染物，会对人体神经系统、生殖系统等产生毒害。为提高好氧细菌对其的降解效率，将GB-2细菌内获取的BDE-47降解基因导入WT-G受体菌，构建成基因工程菌1、2、3，如图是对三种菌相关基因的电泳结果。下列有关叙述错误的是（ ） A. 为获得GB-2菌应从多溴联苯醚污染区取样 B. 可通过PCR技术获取和扩增BDE-47降解基因 C. 凝胶中DNA分子迁移的速率仅与DNA分子大小和构象有关 D. 由图可知，工程菌2降解BDE-47的能力较强，可用于扩大培养 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。 （4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、GB-2细菌内具有BDE-47降解基因，若要获得GB-2菌，应该到特定的环境中取样，即从多溴联苯醚污染区取样，A正确； B、PCR是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的计数，所以可通过PCR技术获取和扩增BDE-47降解基因，B正确； C、凝胶中DNA分子迁移的速率不仅与DNA分子大小和构象有关，还与凝胶的浓度有关，C错误； D、由图可知，与阳性对照相比较，工程菌2含有降解基因，工程菌2降解BDE-47的能力较强，可用于扩大培养，D正确。 故选C。 7. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（ ） A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵 B. A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精 C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理 D. E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序：①对供、受体的选择和处理（用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、胚胎工程一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，A错误； B、A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才具有受精能力，C的精子获能后才能发生受精，B正确； C、D受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊♀A体内的胚胎，所以必须和动物园亚洲黑熊♀A同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊♀B只需要提供体细胞，所以不需要同期发情处理，C错误； D、E后代遗传物质来源于A和C，但遗传性状与A或C不一定一致，F后代遗传物质状主要来源于B，遗传性状与B基本一致，D错误。 故选B。 8. 玉米中赖氨酸含量比较低的原因是赖氨酸合成过程中的两种关键酶——天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性，受细胞内氨基酸浓度的影响较大。赖氨酸达到一定浓度时会抑制这两种酶的活性。为了提高玉米中的赖氨酸含量，兴趣小组提出的下列方法不可行的是（ ） A. 用紫外线处理玉米愈伤组织，筛选有利突变体 B. 将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞 C. 通过基因定点突变技术修饰天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶基因的个别碱基 D. 利用蛋白质工程直接改造天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的空间结构 【答案】D 【解析】 【分析】1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．其中构建基因表达载体是基因工程的核心步骤，需要限制酶和DNA连接酶．植物组织培养技术包括脱分化和再分化两个重要过程，而决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。 2、蛋白质工程：指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。 【详解】A、离体的细胞或组织通过脱分化培养可以形成愈伤组织，愈伤组织分裂能力比较强，用紫外线处理玉米愈伤组织会发生突变，可以筛选有利突变体，A不符合题意； B、赖氨酸达到一定浓度时会抑制天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性，因此将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞，能充分利用细胞内的赖氨酸合成蛋白质，从而降低细胞内赖氨酸对天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的抑制，从而提高玉米中的赖氨酸含量，B不符合题意； C、将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中104位的天冬酰胺变成异亮氨酸，就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸分别提高5倍和2倍。因此，增加玉米细胞中赖氨酸含量最有效的途径是通过基因定点突变技术修饰天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶基因的个别碱基，C不符合题意； D、蛋白质工程是对基因修饰或基因合成，从而改变蛋白质的结构，而不是直接改造蛋白质的空间结构，这方法不可行，D符合题意。 故选D。 【点睛】 9. 单倍体胚胎干细胞（haESCs）取自于孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞，具有极大的应用前景。下列叙述正确的是（ ） A. 培养液中通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B. haESCs通常不含等位基因，有利于研究隐性基因的功能 C. haESCs可取自于孤雌或孤雄发育至囊胚中任何一个细胞 D. 细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 【详解】A、动物细胞不能直接吸收蔗糖，因此动物细胞培养液中通常含有的糖类是葡萄糖，A错误； B、haESCs取自于孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞，其细胞中通常只有一个染色体组，因此不含等位基因，有利于研究隐性基因的功能，B正确； C、haESCs可取自于孤雌或孤雄发育至桑葚（椹）胚中任何一个细胞或囊胚的内细胞团的细胞，C错误； D、动物细胞培养中CO2的主要作用是维持培养液的pH，D错误。 故选B。 10. 噬菌体展示技术（如下图所示）可将某些目标蛋白（如抗体、受体等）呈递至噬菌体表面，便于对目标蛋白进行筛选、鉴定。以下对该技术的分析错误的是（ ） A. 外源目的基因都能在噬菌体中获得有效的表达和展示 B. 构建噬菌体展示库需要用到限制酶和DNA连接酶等工具 C. 构建噬菌体展示库需将目标蛋白基因与噬菌体DNA进行重组并转染细菌 D. 通过诱变处理及多轮筛选有可能获得与抗原亲和力更强的抗体及其基因 【答案】A 【解析】 【分析】噬菌体属于DNA病毒，是由蛋白质外壳和内部遗传物质构成。题中技术的原理是将目标基因与噬菌体DNA重组，并使目标蛋白表达于外壳上，进行筛选和鉴定。 【详解】A、有些真核细胞蛋白质功能的实现需要复杂的生物膜系统进行折叠、组装、加工等，而噬菌体及其宿主细胞细菌结构简单，很难进行有效表达和展示，A错误； B、建立噬菌体展示库需要切割目的基因和病毒载体，然后将二者连接起来，需限制酶和DNA连接酶等，B正确； C、噬菌体专性寄生在大肠杆菌等细菌细胞内，因此可用细菌作为宿主细胞培养噬菌体，C正确； D、诱变的原理是基因突变，具有不定向性，所以通过图中诱变处理及筛选最终可获得与抗原亲和力更强的抗体及其基因，D正确。 故选A。 11. 下列关于发酵工程在农牧业上的应用的说法，错误的是（ ） A. 在厌氧发酵制作青贮饲料时，添加乳酸菌可提高饲料的品质 B. 微生物农药利用微生物或其代谢物来防治病虫害，是生物防治的重要手段 C. 从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可制成微生物饲料，能使家畜增重快 D. 微生物肥料利用了微生物产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力 【答案】C 【解析】 【分析】微生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力，改良土壤结构，促进植株生长，常见的有根瘤菌肥、固氮菌肥等。 【详解】A、在青贮饲料中添加乳酸菌，通过乳酸菌的发酵，可提高饲料的品质，使得饲料保鲜，同时动物食用后还能提高免疫力，A正确； B、微生物农药是利用微生物或其代谢产物来防治农林害虫的，作为生物防治的重要手段，将在农业的可持续发展方面发挥越来越重要的作用，B正确； C、单细胞蛋白不是从微生物细胞中提取的，而是微生物细胞本身，C错误； D、生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力，改良土壤结构，促进植株生长，D正确。 故选C。 12. 精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，导致鸟氨酸在细胞内积累，这种菌可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，其中，待培养基甲上的菌落不再增加时，过程②向培养基中添加物质a，继续培养。下列相关叙述正确的是（ ） A. 实验过程中用到的培养基应调至酸性，用无菌水配制物质a溶液 B. 紫外线照射可诱发基因突变或染色体变异，从而提高获得目的菌株的概率 C. 培养基甲是一种完全培养基，过程②向培养基甲中添加的物质a是精氨酸 D. 菌落B是诱变产生的精氨酸依赖型菌种，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种 【答案】D 【解析】 【分析】谷氨酸棒状杆菌是原核生物，只能发生基因突变，精氨酸依赖营养缺陷型谷氨酸棒状杆菌需要在添加精氨酸的培养基上才能生长。 【详解】A、培养细菌时，需将培养基调至中性或弱碱性，A错误； B、野生型谷氨酸棒状杆菌没有染色体，B错误； C、培养基甲是选择培养基，C错误； D、因为精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，导致鸟氨酸在细胞内积累，所以菌落B是诱变产生的精氨酸依赖型菌种，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，D正确。 故选D。 13. 花粉植株是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。下面是培育四季橘（2n=18）花粉植株的过程示意图，下列有关叙述错误的是（ ） A. 花粉植株培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，其技术是植物组织培养 B. 过程③是细胞再分化，其根本原因是基因选择性表达 C. 4种培养基均属于固体培养基，常用秋水仙素处理花粉植株幼苗 D. 观察处于分裂中期的四季橘花粉植株根尖细胞，可观察到18条染色体 【答案】D 【解析】 【分析】花药离体培养是指将发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花药内花粉粒的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成胚状体，形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化成植株。而花粉离体培养是指将花粉从花药中分离出来，以单个花粉粒作为外植体进行离体培养的技术。由于花粉已是单倍体细胞，诱发它经愈伤组织或胚状体发育而成的植株都是单倍体，且不受花药的药隔、药壁、花丝等体细胞的干扰。可见花药离体培养与花粉离体培养是存在差异的，花药离体培养属器官培养，而花粉离体培养属细胞培养。不过两者的培养目的是一致的，都需要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成单倍体植株。 【详解】A、花粉细胞培育成单倍体植株，培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，其技术是植物组织培养，A正确； B、由愈伤组织到从芽的过程是再分化，其根本原因是基因选择性表达，B正确； C、在培育花粉植株的过程中，需要使用到不同类型的培养基来支持细胞的生长和分化。这些培养基通常都是固体培养基，可以提供细胞生长所需的营养物质和支撑。此外，为了诱导染色体数目加倍，常用秋水仙素处理花粉植株幼苗，使细胞在分裂时无法形成正常的纺锤体，从而导致染色体数目加倍，C错误； D、观察处于分裂中期的四季橘花粉植株根尖细胞，其染色体数为9条，D错误。 故选D。 14. 工业生产通常用黑曲霉发酵淀粉生产柠檬酸。科研人员对黑曲霉YZ－35进行复合诱变来提高其产柠檬酸能力，选取其中5个诱变菌株接种于含淀粉的培养基中培养，菌落及其产生的透明圈情况如下表。从中选取产酸率最高的菌株，分别接种于不同pH的液体培养基中培养，检测pH对产酸率的影响，结果如下图。下列说法正确的是（ ） 菌株 菌落直径（mm） 透明圈直径（mm） L4 5.8 18.5 L5 7.9 19.3 L6 5.3 18.9 Y1 6.0 10.1 Y6 6.3 13.7 A. 透明圈与菌落直径的比值越大，说明黑曲霉生产柠檬酸的能力越强 B. 据表可以推测，突变菌株的产酸能力均有所提升，其中L6的提升幅度最大 C. 对黑曲霉培养需要将经过高压蒸汽灭菌后的培养基的pH调至4.5左右 D. 黑曲霉还可以在工业生产中用来生产淀粉酶这种利用价值更高的单细胞蛋白 【答案】A 【解析】 【分析】选择培养基：在微生物学上，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，成为选择培养基。 【详解】A、题意显示，黑曲霉具有分解淀粉产生柠檬酸的能力，培养基中含淀粉，若黑曲霉能将淀粉分解，则会产生透明圈，因此，透明圈与菌落直径的比值越大，说明黑曲霉生产柠檬酸的能力越强，A正确； B、题意显示，科研人员对黑曲霉YZ－35进行复合诱变来提高其产柠檬酸能力，选取其中5个诱变菌株接种于含淀粉的培养基中培养，菌落及其产生的透明圈情况如下表，根据表中信息可知，突变菌株的产酸能力最强的是L6，但根据表中信息不能判断出突变菌株的产酸能力均有所提升，因为题中未给出野生菌株的产酸能力，B错误； C、培养基pH的调节需要在灭菌前进行，即高压蒸汽灭菌前进行pH的调节，并调至4.5左右，C错误； D、工业生产中，黑曲霉可以用来生产淀粉酶，但单细胞蛋白指的是微生物菌体，不是淀粉酶，D错误。 故选A。 15. 图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程，其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是（ ） A. PCR扩增A时可在引物中加入PstI和XhoI的酶切位点 B. 在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌 C. 用农杆菌转化植物愈伤组织时选择呈现蓝色的农杆菌与植物进行培养 D. 启动子若为除草剂诱导启动子将减少细胞物质和能量浪费 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等； （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法； （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、PCR扩增A后，为使A能与质粒结合形成重组质粒，需要在A的两侧加入相应的限制酶的酶切位点，即在引物中加入PstI和XhoI的酶切位点，A正确； B、由图可知，卡那霉素抗性基因是标记基因，因此在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌，B正确； C、由题意可知，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色，不能在农杆菌中表达，C错误； D、启动子若为除草剂诱导启动子，表达后具有了除草剂的功能，将减少细胞物质和能量浪费，D正确。 故选C。 16. CRISPR/Cas9基因编辑技术根据靶基因序列设计向导sgRNA，精确引导核酸酶Cas9切割与sgRNA配对的DNA，相关酶在修复断裂DNA的过程中会改变连接部位的碱基序列。科研人员通过删除编码PD-1蛋白基因的2、3、4片段造成蛋白质的功能缺失，制作PD-1基因敲除鼠的流程如图1所示。将体外转录获得的 Cas9mRNA和sgRNA 导入小鼠的受精卵中，获得了12只基因编辑小鼠。利用PCR鉴定小鼠的基因型，电泳结果如图2所示。已知P1和P2是PCR的引物。下列相关分析正确的是（ ） A. 敲除2、3、4片段引起的变异属于染色体变异 B. 敲除前，根据敲除的位置需要设计3个sgRNA C. 图2中，4和12个体杂交的子代均为敲除纯合子 D. 图2中，3、5、7个体的体内均能检测到PD-1 【答案】C 【解析】 【分析】电泳是指带电粒子在电场的作用下，向与其携带电荷相反的电极迁移的过程。不同带电粒子因分子大小、形状、所带电荷等因素不同，迁移速率也会有所差异。核酸是带负电的生物大分子，其迁移速率主要受核酸片段长度的影响，在电场强度一定时，核酸分子越大，向正极迁移速率越慢。 【详解】A、据图分析，通过删除编码PD-1蛋白功能区的2、3、4片段造成蛋白的功能性缺失，指的是将野生型基因内部的部分碱基对剪切，改变的是基因内部的碱基序列，属于可遗传变异中的基因突变，A错误； B、分析图1可知，需要将基因的2、3、4共3个片段切除，需要设计片段2和片段4的2个sgRNA，B错误； C、基因敲除后，其核苷酸数量减少，电泳时移动速度快，距离点样孔远，4和12个体均为敲除纯合子，C正确； D、3个体的基因未敲除， 5个体为基因敲除杂合子，7个体为敲除纯合子，因此3和5体内均能检测到PD-1，7个体检测不到PD-1，D错误。 故选C。 二、非选择题（共5题，除特别说明，每空2分） 17. 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求配制出的供其生长繁殖的营养基质。培养某微生物的培养基的配方如表所示，回答下列问题： 成分 葡萄糖 （NH4）2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 琼脂 含量 1.0g 0.4g 4.0g 0.5g 0.5g 100mL 1.5g （1）该培养基属于______________（填“固体”或“液体”）培养基，判断依据是______________。 （2）在接种前需要检测培养基是否被污染，常用的检测方法是______________。 （3）若用该培养基筛选固氮菌，则应该去除的成分是______________。培养时，菌落在平板上的培养时间不宜过长的原因是______________。 （4）某同学在做微生物实验时，不小心把自养型细菌和酵母菌混在一起，请你写出可分别用于分离得到纯度较高的自养型细菌和酵母菌的两种培养基的设计思路：_________________________。 【答案】（1） ①. 固体 ②. 培养基中有添加凝固剂琼脂 （2）将未接种的培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生长 （3） ①. （NH4）2SO4 ②. 固氮菌菌落周围可能会生长以固氮菌分泌的含氮化合物为氮源的杂菌 （4）培养基中不加碳源，自养型细菌可生长，酵母菌不能生长，可分离出自养型细菌；培养基中加青霉素（或抗生素），酵母菌可生长，自养型细菌生长受到抑制，可分离出酵母菌 【解析】 【分析】培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质；营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水；根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、鉴别培养基；根据性质分为液体、半固体和固体培养基。 【小问1详解】 该培养基中含有添加凝固剂琼脂，属于“固体”培养基，可用于鉴别和分离菌种。 【小问2详解】 在接种前需要检测培养基是否被污染，常用的检测方法是将未接种的培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生长，若无菌落生长说明培养基制备合格。 【小问3详解】 若除去该培养基中的（NH4）2SO4后再加入不含氮元素的有机物，则此培养基可培养能够从空气中固氮的自养型微生物，即自生固氮微生物或者固氮微生物，菌落在平板上的培养时间不宜过长，否则在固氮菌菌落周围可能会生长以固氮菌分泌的含氮化合物为氮源的杂菌。 【小问4详解】 某同学在做微生物实验时，不小心把自养型细菌和酵母菌混在一起，自养型细菌不需要有机物作为能源物质，因此，培养基中不加碳源，自养型细菌可生长，酵母菌不能生长，可分离出自养型细菌；培养基中加青霉素（或抗生素），由于青霉素会抑制细菌的生长，因此在培养基中加入酵母菌可生长，而自养型细菌生长受到抑制，可分离出酵母菌。 18. 某病毒B对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。请回答： （1）过程②基因A能在工程菌内表达产生蛋白A的原因是_____。 （2）过程③处理的目的是_____。过程⑤常用_____诱导细胞融合（写出1种不同于植物细胞融合的方法即可）。 （3）图中经筛选1得到的杂交瘤细胞具有的特点是_____，筛选2的方法是_____。 （4）为了得到大量的抗病毒B的单克隆抗体，可将杂交瘤细胞接种到适宜的动物细胞培养液中进行培养，但杂交瘤细胞的接种量会影响单克隆抗体的产量。为了探究培养液中杂交瘤细胞的最佳接种量，请写出实验思路：_____。 【答案】（1）生物共用一套遗传密码 （2） ①. 将蛋白A注射到小鼠体内，使之发生免疫反应 ②. 灭活病毒诱导法 （3） ①. 既能大量增殖，又能产生足够数量的抗体 ②. 抗体检测 （4）将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的若干组，在不同组中接种不同量的杂交瘤细胞，一定且相同时间后测定各培养液中的相应抗体含量 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【小问1详解】 因为生物共用一套遗传密码，所以过程②基因A能在工程菌内表达产生蛋白A。 【小问2详解】 过程③将蛋白A注射到小鼠体内，使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；过程⑤诱导动物细胞融合的常用方法有灭活病毒诱导法。 【小问3详解】 筛选1得到的杂交瘤细胞具有的特点是既能大量增殖，又能产生足够数量的抗体。筛选2的方法是抗体检测，所依据的基本原理是抗原与抗体的反应具有特异性。 【小问4详解】 为了探究培养液中杂交瘤细胞的最佳接种量，则实验的自变量是杂交瘤细胞的接种量，因变量是抗体的含量，则实验思路如下：将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的若干组，在不同组中接种不同量的杂交瘤细胞，一定且相同时间后测定各培养液中的相应抗体含量。 19. 土壤盐渍化会影响水稻生长发育，研究人员将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱水稻新品种，其操作流程及可能用到的限制酶如图所示，其中TetR为四环素抗性基因，AmpR为氨苄青霉素抗性基因，①~⑦表示操作过程。回答下列问题： 限制酶 BamHI BclI SmaI Sau3AI 识别位点及切割位点 -G↓GATCC- -T↓GATCA- -CCC↓GGG- -↓GATC- （1）过程①PCR扩增OsMYB56基因时加入的酶催化_____键的形成，还需要添加引物，应选用引物组合_____。 ①5'-CTTGGATGAT-3'②5'-TAAGTTGTCT-3'③5'-TAGTAGGTTC-3'④5'-TCTGTTGAAT-3'⑤5'-ATTCAACAGA-3'⑥5'-ATCATCCAAG-3' （2）为了筛选出含重组质粒的根瘤农杆菌，根瘤农杆菌应在添加_____的选择培养基上培养。 （3）过程③应选用限制酶_____切割质粒，利用所选限制酶进行操作的优势是_____。 （4）在分子检测中，研究人员对转基因水稻DNA进行PCR，再对PCR产物进行_____鉴定。若要鉴定OsMYB56基因是否表达，从分子水平上检测的方法是_____技术。 【答案】（1） ①. 磷酸二酯 ②. ①④ （2）四环素 （3） ①. BclI和SmaI ②. 防止酶切后的质粒、目的基因自身环化；保证OsMYB56基因和酶切后的质粒定向连接 （4） ①. 琼脂糖凝胶电泳 ②. 抗原—抗体杂交 【解析】 【分析】PCR技术可特异性的扩增DNA片段，关键在于引物可以和特定DNA片段的3'端特异性结合，使耐高温的DNA聚合酶沿引物的3'端延伸子链。基因表达载体一般包括启动子、终止子、目的基因、标记基因、复制原点等元件。 【小问1详解】 DNA分子由2条链构成，每一条链都有3'端与5'端，-OH端为3'，磷酸基团的末端为5'，因此OsMYB56基因游离的磷酸基团侧为5'端，羟基端为3'端。过程①PCR扩增OsMYB56基因时加入的酶是Taq,该酶能催化磷酸二酯键的形成。在进行PCR操作时，引物应分别与基因两条链的3'端根据碱基互补配对原则结合，根据图中两端序列，通常选择5′-CTTGGATGAT-3′（上面链的引物）和5′-TCTGTTGAAT-3′（下面链的引物）作为引物对，①④正确。 【小问2详解】 标记基因可用于重组DNA分子的筛选，质粒上有TetR为四环素抗性基因，AmpR为氨苄青霉素抗性基因标记基因，但AmpR为氨苄青霉素抗性基因被限制酶切割失活，故应在添加四环素的选择培养基上培养。 【小问3详解】 据图可知，质粒中的两个标记基因TetR和AmpR中都含有限制酶BamHⅠ识别序列，如果用限制酶BamHⅠ，会破坏质粒中的两个标记基因，为防止质粒自身环化，保证OsMYB56和酶切后的质粒定向连接，需要用双酶切，因此过程③可以选择限制酶BclⅠ和SmaⅠ。 【小问4详解】 PCR的产物用琼脂糖凝胶电泳进行鉴定，分子水平检测OsMYB56基因是否表达，可以检测基因是否转录形成RNA或翻译成蛋白质，因此方法如下;可以提取细胞的mRNA，逆转录得到cDNA后进行PCR扩增；根据OsMYB56基因设计探针进行核酸分子杂交检测OsMYB56基因或者其转录出的mRNA；通过抗原一抗体杂交技术检测OsMYB56基因表达的蛋白质。 20. 甲植物（2n=18）具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙（4n=32）的细胞质中存在抗除草剂基因，科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗除草剂性状的优良品种丙，途径如图所示。已知X射线处理会使细胞分裂功能丧失但不影响线粒体功能，丙烯酸异辛酯（IOA）处理会使线粒体失活，但不影响细胞分裂。回答下列问题： （1）利用植物体细胞杂交技术获得新植物体，利用的生物学原理是_____。 （2）过程②可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有_____法等。 （3）过程④中，会在培养基中加入蔗糖，蔗糖的作用是_____。过程⑤先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，此时生长素与细胞分裂素的比值_____（填“>1”、“<1”或“=1”）。 （4）与其他育种方式相比，植物体细胞杂交的突出优点是_____。 （5）在细胞融合体系中，未融合的细胞不能形成愈伤组织，原因是_____。杂种植株丙的抗除草剂基因不会通过花粉造成基因污染，原因是_____。 【答案】（1）细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 （2）高Ca2+-高pH融合 （3） ①. 提供碳源、能源（或提供营养）和维持渗透压 ②. <1 （4）克服远缘杂交不亲和的障碍，打破生殖隔离，实现远缘杂交 （5） ①. 甲细胞用IOA处理后线粒体失活，细胞生命活动受限；乙细胞经X射线处理后失去分裂能力 ②. 抗除草剂基因位于细胞质中，受精时，只有精子头部（即细胞核）进入卵母细胞 【解析】 【分析】该图为植物体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，制备原生质体，可用酶解法；②为诱导融合过程，可以用聚乙二醇处理；③为杂种细胞再生细胞壁的过程；④为脱分化；⑤为再分化形成杂种植株。 【小问1详解】 植物体细胞杂交利用细胞膜的流动性，杂种细胞形成新植物体利用植物细胞的全能性。 【小问2详解】 步骤②是促进原生质体融合，可以采用化学法进行诱导，其中化学方法除了聚乙二醇(PEG)融合法，还有高Ca2+-高pH融合法等。 【小问3详解】 过程④为脱分化，蔗糖的作用是提供碳源、能源(或提供营养)和维持渗透压。植物组织培养时，细胞分裂素用量较高，即生长素与细胞分裂素的比值＜1，有利于芽的分化，抑制根的形成。 【小问4详解】 植物体细胞杂交的突出优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，打破生殖隔离，实现远缘杂交。 【小问5详解】 X射线处理会使细胞分裂功能丧失但不影响线粒体的功能，IOA处理会使线粒体失活，但不影响细胞分裂，因此未融合的细胞和同种细胞的融合细胞均不能正常分裂，都不能形成愈伤组织，只有杂种细胞由于生理互补能形成愈伤组织。丙的抗除草剂基因位于细胞质中，精子的头部几乎只有细胞核，线粒体主要集中在尾部。受精时，精子的头部进入卵母细胞而尾部留在外面，因此质基因一般不会通过花粉遗传给后代，避免了基因污染。 21. B基因存在于水稻基因组中，该基因可在体细胞和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，科学家设计并完成了如下实验来获取能够在卵细胞中表达B基因的转基因植株。请回答下列问题： 注：Luc基因表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光 （1）从水稻体细胞中提取总RNA，在_____酶的催化下构建cDNA文库，进而获得B基因编码蛋白的序列；再与Luc基因组装成融合基因。 （2）融合基因必须连接到T-DNA中的启动子和终止子之间，其中启动子是_____识别并结合的位点。表达载体中卡那霉素抗性基因的作用是_____。 （3）过程①常对农杆菌进行_____溶液处理，使其处于能_____的生理状态。若借助Luc基因的表达产物来完成图中第二次鉴定筛选，则筛选的具体方法是_____。 （4）从转基因水稻植株的未成熟种子中分离出胚，观察到其细胞内仅含一个染色体组，科学家据此判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的。已知正常情形下的水稻卵细胞在未受精时，不能继续发育形成胚；由此说明B基因的表达能使卵细胞_____。实验结果发现该转基因水稻产生的所有卵细胞并不都含有B基因，出现该结果的可能原因是_____。 【答案】（1）逆转录 （2） ①. RNA聚合酶 ②. 作为标记基因，检测B-Luc融合基因是否成功导入（农杆菌） （3） ①. Ca2+/CaCl2/钙离子/氯化钙 ②. 吸收周围环境中的DNA分子 ③. 检测加入荧光素的水稻幼苗细胞中是否发出荧光存活 （4） ①. 不经受精而直接发育成胚 ②. B基因仅整合水稻的一条染色体上，因此减数分裂形成的卵细胞中仅有部分卵细胞含有B基因（或转基因水稻形成卵细胞的过程中B基因发生了突变或丢失） 【解析】 【分析】1、基因工程的基本操作步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 2、基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、 DNA 连接酶、运载体。 3、基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 【小问1详解】 从水稻的体细胞中提取 RNA ，通过逆转录产生DNA，从而构建cDNA文库，该过程需要逆转录酶的催化，进而获得B基因编码蛋白的序列。 【小问2详解】 启动子是启动转录的序列，含有RNA聚合酶的结合位点。标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，图中卡那霉素抗性基因的作用是作为标记基因，检测B-Luc融合基因是否导入农杆菌细胞。 【小问3详解】 由图可知，过程①为农杆菌转化法，是将目的基因导入受体细胞中的常用方法，常对农杆菌进行CaCl2处理成感受态细胞，即容易吸收周围环境中DNA分子的状态，便于转化。B 基因与 Luc 基因连接形成 B-Luc融合基因，即可通过 Luc 基因表达，故借助Luc基因的表达产物来完成图中第二次鉴定筛选，则具体方法是检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光。 【小问4详解】 转基因植株含有促进 B 基因在卵细胞转录的启动子，推测转基因植株分离出的只含一个染色体组的胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而非转基因水稻卵细胞中 B 基因不能转录，卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明 B 基因表达能使卵细胞不经受精作用直接发育成胚。实验结果发现该转基因水稻产生的所有卵细胞并不都含有B基因，出现该结果的可能原因是B基因仅整合水稻的一条染色体上，因此减数分裂形成的卵细胞中仅有部分卵细胞含有B基因（或转基因水稻形成卵细胞的过程中B基因发生了突变或丢失）。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 肇庆市第六中学2024-2025学年第二学期高二级期中检测 生物 一、单选题（共16题，1-12题每题2分，13-16题每题4分） 1. 关于现代生物技术的应用及其安全性与伦理问题，以下叙述正确的是（　　） A. 转基因食品千万不能吃，吃了会导致性早熟 B. 反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术设计婴儿性别 C. 为了国家的安全，可以进行必要的小范围的生物武器研究 D. 试管牛所采用的技术中包含体外受精、胚胎移植和克隆技术 2. 基于AI（人工智能）的蛋白质设计方法可以利用现有蛋白质数据库以及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构及功能。下列有关说法错误的是（ ） A. AI预测新型蛋白质结构和功能的原理是中心法则 B. AI可能帮助人们快速、深入了解蛋白质结构与功能的关系 C. AI有可能帮助人们高效地设计出自然界中原来没有的蛋白质 D. 人们可通过基因改造或合成新基因来获得AI所设计的蛋白质 3. 在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞和组织才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答，叙述正确的是（ ） ①A过程需要的酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶　 ②C过程为脱分化过程，培养基中只需加入营养物质 ③B过程需要加入卡那霉素进行选择培养　 ④D过程可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测　 ⑤D过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测 A. ①②④⑤ B. ①②③④⑤ C. ③④⑤ D. ①③④⑤ 4. 超氧化物歧化酶（SOD）能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。下图为人工培育含SOD植物新品种的过程，相关叙述不正确的是 A. SOD催化O2形成H2O2的机制是降低了该化学反应的活化能 B. ②、③分别表示脱分化、再分化过程，均需严格的无菌操作 C. ①过程中最常用的方法是采用显微注射技术将SOD基因导入植物细胞 D. 该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性 5. 下表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。下列有关说法正确的是（ ） 限制酶 AluⅠ BamHⅠ SmaⅠ Sau3AⅠ 识别序列 切割位点 AG↓CT TC↑GA G↓GATCC CCTAG↑G CCC↓GGG GGG↑CCC ↓GATC CTAG↑ A. BamHⅠ切割的是氢键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键 B. 能被BamHⅠ切割的序列也能被Sau3AⅠ识别和切割 C. 限制酶AluⅠ和SmaⅠ切割产生的末端属于黏性末端 D. 上述限制酶切割产生的任意末端均可被T4DNA连接酶连接 6. 多溴联苯醚（简称BDE-47）是一种电子垃圾分解后产生的环境污染物，会对人体神经系统、生殖系统等产生毒害。为提高好氧细菌对其的降解效率，将GB-2细菌内获取的BDE-47降解基因导入WT-G受体菌，构建成基因工程菌1、2、3，如图是对三种菌相关基因的电泳结果。下列有关叙述错误的是（ ） A. 为获得GB-2菌应从多溴联苯醚污染区取样 B. 可通过PCR技术获取和扩增BDE-47降解基因 C. 凝胶中DNA分子迁移的速率仅与DNA分子大小和构象有关 D. 由图可知，工程菌2降解BDE-47的能力较强，可用于扩大培养 7. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（ ） A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵 B. A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精 C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理 D. E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致 8. 玉米中赖氨酸含量比较低的原因是赖氨酸合成过程中的两种关键酶——天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性，受细胞内氨基酸浓度的影响较大。赖氨酸达到一定浓度时会抑制这两种酶的活性。为了提高玉米中的赖氨酸含量，兴趣小组提出的下列方法不可行的是（ ） A. 用紫外线处理玉米愈伤组织，筛选有利突变体 B. 将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞 C. 通过基因定点突变技术修饰天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶基因的个别碱基 D. 利用蛋白质工程直接改造天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的空间结构 9. 单倍体胚胎干细胞（haESCs）取自于孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞，具有极大的应用前景。下列叙述正确的是（ ） A. 培养液中通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B. haESCs通常不含等位基因，有利于研究隐性基因的功能 C. haESCs可取自于孤雌或孤雄发育至囊胚中任何一个细胞 D. 细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 10. 噬菌体展示技术（如下图所示）可将某些目标蛋白（如抗体、受体等）呈递至噬菌体表面，便于对目标蛋白进行筛选、鉴定。以下对该技术的分析错误的是（ ） A. 外源目的基因都能在噬菌体中获得有效的表达和展示 B. 构建噬菌体展示库需要用到限制酶和DNA连接酶等工具 C. 构建噬菌体展示库需将目标蛋白基因与噬菌体DNA进行重组并转染细菌 D. 通过诱变处理及多轮筛选有可能获得与抗原亲和力更强的抗体及其基因 11. 下列关于发酵工程在农牧业上的应用的说法，错误的是（ ） A. 在厌氧发酵制作青贮饲料时，添加乳酸菌可提高饲料的品质 B. 微生物农药利用微生物或其代谢物来防治病虫害，是生物防治的重要手段 C. 从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可制成微生物饲料，能使家畜增重快 D. 微生物肥料利用了微生物产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力 12. 精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，导致鸟氨酸在细胞内积累，这种菌可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，其中，待培养基甲上的菌落不再增加时，过程②向培养基中添加物质a，继续培养。下列相关叙述正确的是（ ） A. 实验过程中用到的培养基应调至酸性，用无菌水配制物质a溶液 B. 紫外线照射可诱发基因突变或染色体变异，从而提高获得目的菌株的概率 C. 培养基甲是一种完全培养基，过程②向培养基甲中添加的物质a是精氨酸 D. 菌落B是诱变产生的精氨酸依赖型菌种，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种 13. 花粉植株是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。下面是培育四季橘（2n=18）花粉植株的过程示意图，下列有关叙述错误的是（ ） A. 花粉植株培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，其技术是植物组织培养 B. 过程③是细胞再分化，其根本原因是基因选择性表达 C. 4种培养基均属于固体培养基，常用秋水仙素处理花粉植株幼苗 D. 观察处于分裂中期的四季橘花粉植株根尖细胞，可观察到18条染色体 14. 工业生产通常用黑曲霉发酵淀粉生产柠檬酸。科研人员对黑曲霉YZ－35进行复合诱变来提高其产柠檬酸能力，选取其中5个诱变菌株接种于含淀粉的培养基中培养，菌落及其产生的透明圈情况如下表。从中选取产酸率最高的菌株，分别接种于不同pH的液体培养基中培养，检测pH对产酸率的影响，结果如下图。下列说法正确的是（ ） 菌株 菌落直径（mm） 透明圈直径（mm） L4 5.8 18.5 L5 7.9 19.3 L6 5.3 18.9 Y1 6.0 10.1 Y6 6.3 13.7 A. 透明圈与菌落直径的比值越大，说明黑曲霉生产柠檬酸的能力越强 B. 据表可以推测，突变菌株的产酸能力均有所提升，其中L6的提升幅度最大 C. 对黑曲霉培养需要将经过高压蒸汽灭菌后的培养基的pH调至4.5左右 D. 黑曲霉还可以在工业生产中用来生产淀粉酶这种利用价值更高的单细胞蛋白 15. 图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程，其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是（ ） A. PCR扩增A时可在引物中加入PstI和XhoI的酶切位点 B. 在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌 C. 用农杆菌转化植物愈伤组织时选择呈现蓝色的农杆菌与植物进行培养 D. 启动子若为除草剂诱导启动子将减少细胞物质和能量浪费 16. CRISPR/Cas9基因编辑技术根据靶基因序列设计向导sgRNA，精确引导核酸酶Cas9切割与sgRNA配对的DNA，相关酶在修复断裂DNA的过程中会改变连接部位的碱基序列。科研人员通过删除编码PD-1蛋白基因的2、3、4片段造成蛋白质的功能缺失，制作PD-1基因敲除鼠的流程如图1所示。将体外转录获得的 Cas9mRNA和sgRNA 导入小鼠的受精卵中，获得了12只基因编辑小鼠。利用PCR鉴定小鼠的基因型，电泳结果如图2所示。已知P1和P2是PCR的引物。下列相关分析正确的是（ ） A. 敲除2、3、4片段引起的变异属于染色体变异 B. 敲除前，根据敲除的位置需要设计3个sgRNA C. 图2中，4和12个体杂交的子代均为敲除纯合子 D. 图2中，3、5、7个体的体内均能检测到PD-1 二、非选择题（共5题，除特别说明，每空2分） 17. 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求配制出的供其生长繁殖的营养基质。培养某微生物的培养基的配方如表所示，回答下列问题： 成分 葡萄糖 （NH4）2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 琼脂 含量 1.0g 0.4g 4.0g 0.5g 0.5g 100mL 1.5g （1）该培养基属于______________（填“固体”或“液体”）培养基，判断依据是______________。 （2）在接种前需要检测培养基是否被污染，常用的检测方法是______________。 （3）若用该培养基筛选固氮菌，则应该去除的成分是______________。培养时，菌落在平板上的培养时间不宜过长的原因是______________。 （4）某同学在做微生物实验时，不小心把自养型细菌和酵母菌混在一起，请你写出可分别用于分离得到纯度较高的自养型细菌和酵母菌的两种培养基的设计思路：_________________________。 18. 某病毒B对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。请回答： （1）过程②基因A能在工程菌内表达产生蛋白A的原因是_____。 （2）过程③处理的目的是_____。过程⑤常用_____诱导细胞融合（写出1种不同于植物细胞融合的方法即可）。 （3）图中经筛选1得到的杂交瘤细胞具有的特点是_____，筛选2的方法是_____。 （4）为了得到大量的抗病毒B的单克隆抗体，可将杂交瘤细胞接种到适宜的动物细胞培养液中进行培养，但杂交瘤细胞的接种量会影响单克隆抗体的产量。为了探究培养液中杂交瘤细胞的最佳接种量，请写出实验思路：_____。 19. 土壤盐渍化会影响水稻生长发育，研究人员将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱水稻新品种，其操作流程及可能用到的限制酶如图所示，其中TetR为四环素抗性基因，AmpR为氨苄青霉素抗性基因，①~⑦表示操作过程。回答下列问题： 限制酶 BamHI BclI SmaI Sau3AI 识别位点及切割位点 -G↓GATCC- -T↓GATCA- -CCC↓GGG- -↓GATC- （1）过程①PCR扩增OsMYB56基因时加入的酶催化_____键的形成，还需要添加引物，应选用引物组合_____。 ①5'-CTTGGATGAT-3'②5'-TAAGTTGTCT-3'③5'-TAGTAGGTTC-3'④5'-TCTGTTGAAT-3'⑤5'-ATTCAACAGA-3'⑥5'-ATCATCCAAG-3' （2）为了筛选出含重组质粒的根瘤农杆菌，根瘤农杆菌应在添加_____的选择培养基上培养。 （3）过程③应选用限制酶_____切割质粒，利用所选限制酶进行操作的优势是_____。 （4）在分子检测中，研究人员对转基因水稻DNA进行PCR，再对PCR产物进行_____鉴定。若要鉴定OsMYB56基因是否表达，从分子水平上检测的方法是_____技术。 20. 甲植物（2n=18）具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙（4n=32）的细胞质中存在抗除草剂基因，科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗除草剂性状的优良品种丙，途径如图所示。已知X射线处理会使细胞分裂功能丧失但不影响线粒体功能，丙烯酸异辛酯（IOA）处理会使线粒体失活，但不影响细胞分裂。回答下列问题： （1）利用植物体细胞杂交技术获得新植物体，利用的生物学原理是_____。 （2）过程②可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有_____法等。 （3）过程④中，会在培养基中加入蔗糖，蔗糖的作用是_____。过程⑤先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，此时生长素与细胞分裂素的比值_____（填“>1”、“<1”或“=1”）。 （4）与其他育种方式相比，植物体细胞杂交的突出优点是_____。 （5）在细胞融合体系中，未融合的细胞不能形成愈伤组织，原因是_____。杂种植株丙的抗除草剂基因不会通过花粉造成基因污染，原因是_____。 21. B基因存在于水稻基因组中，该基因可在体细胞和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，科学家设计并完成了如下实验来获取能够在卵细胞中表达B基因的转基因植株。请回答下列问题： 注：Luc基因表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光 （1）从水稻体细胞中提取总RNA，在_____酶的催化下构建cDNA文库，进而获得B基因编码蛋白的序列；再与Luc基因组装成融合基因。 （2）融合基因必须连接到T-DNA中的启动子和终止子之间，其中启动子是_____识别并结合的位点。表达载体中卡那霉素抗性基因的作用是_____。 （3）过程①常对农杆菌进行_____溶液处理，使其处于能_____的生理状态。若借助Luc基因的表达产物来完成图中第二次鉴定筛选，则筛选的具体方法是_____。 （4）从转基因水稻植株的未成熟种子中分离出胚，观察到其细胞内仅含一个染色体组，科学家据此判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的。已知正常情形下的水稻卵细胞在未受精时，不能继续发育形成胚；由此说明B基因的表达能使卵细胞_____。实验结果发现该转基因水稻产生的所有卵细胞并不都含有B基因，出现该结果的可能原因是_____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $