精品解析：山东省聊城市2024-2025学年高二下学期期中生物试题

2024—2025学年度第二学期期中教学质量检测 高二生物试题 注意事项： 1．本试卷分第I卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第I卷时．选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。 3．回答第Ⅱ卷时．将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 第I卷（选择题共45分） 一、单项选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。每题只有一个选项符合题目要求） 1. 传统发酵技术大大丰富了食品种类。下列关于传统发酵技术及其应用的叙述，错误的是（ ） A. 传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B. 制作豆豉、酱油、豆腐等食品均利用了传统发酵技术 C. 泡菜腌制全过程需保持密封，以利于菌种的厌氧呼吸 D. 果酒发酵控制的温度一般要比果醋发酵控制的温度低 【答案】B 【解析】 【分析】参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸；脂肪酶将脂肪分解为甘油和脂肪酸。 【详解】A、传统发酵过程中，由于微生物来源的自然性，多以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，这种发酵方式较为常见且符合传统发酵的特点，A正确； B、制作豆豉、酱油利用了传统发酵技术，但豆腐的制作主要是豆浆凝固的过程，并没有利用传统发酵技术，B错误； C、泡菜腌制利用的是乳酸菌等厌氧菌，全过程需保持密封，为菌种的厌氧呼吸创造条件，C正确； D、果酒发酵控制的温度一般为 18 - 30℃，果醋发酵控制的温度一般为 30 - 35℃，所以果酒发酵控制的温度一般要比果醋发酵控制的温度低，D正确。 故选B。 2. 用“麦汁酸化”法酿造的酸啤酒既有麦芽清香，又酸甜适口。它是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为乳酸，再结合酒精发酵制作而成。下列叙述错误的是（ ） A. 利用大麦作原料时，需浸泡大麦并加入赤霉素有助于淀粉酶的形成 B. 发酵过程中需将乳酸菌和酵母菌同时接种以有利于同时进行乳酸发酵和酒精发酵 C. 达到一定酸度后需将麦汁蒸煮以杀死乳酸菌，同时加入啤酒花产生风味组分 D. 为延长啤酒的保存期，可采用过滤消毒法去除啤酒中的部分微生物 【答案】B 【解析】 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 【详解】A、用适量赤霉素溶液浸泡大麦种子可以有效促进淀粉酶形成，淀粉酶分解淀粉，促进大麦种子发芽，A正确； B、在发酵的不同过程中，需要控制不同的发酵温度，以确保微生物的活性达到最佳状态，所以麦汁酸化的过程不是在同一容器中同时进行的，即发酵过程中不能将乳酸菌和酵母菌同时接种，B错误； C、达到一定酸度后需将麦汁蒸煮，蒸煮时加入糖浆、啤酒花等可产生一些风味成分并同时也对糖浆灭菌，C正确； D、过滤能除去啤酒中部分微生物，消毒能杀死啤酒中部分微生物，防止杂菌污染，延长其保存期，D正确。 故选B。 3. 微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列叙述错误的是（ ） A. 根据微生物对碳源需求的差别，使用含有不同碳源的培养基 B. 接种前后．接种环都要在酒精灯火焰上灼烧灭菌 C. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 D. 固体培养基表面生长的一个菌落一般是由单个微生物繁殖形成的 【答案】C 【解析】 【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。另外，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 2、获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。消毒是指使用较为温和的物理、化学和生物等方法，仅杀死物体表面或内部一部分微生物。灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 【详解】A、不同微生物对碳源的需求不同，比如自养型微生物可利用无机碳源（如CO2），异养型微生物需要有机碳源（如葡萄糖 ），所以根据微生物对碳源需求的差别，使用含有不同碳源的培养基可筛选不同微生物，A正确； B、接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上灼烧灭菌，接种前灭菌是为了杀死接种环上的杂菌，接种后灭菌是为了防止污染环境和感染操作者，B正确； C、微生物的纯培养物是指由单一微生物繁殖形成的培养物，即使是纯培养物，微生物在生长过程中也会产生代谢废物，C错误； D、在固体培养基表面，单个微生物繁殖形成的肉眼可见的子细胞群体就是菌落，一般一个菌落是由单个微生物繁殖形成的，D正确。 故选C。 4. 双层平板法是先在培养皿中倒入底层固体培养基，凝固后形成底层平板；再倒入由宿主细菌、噬菌体以及琼脂含量较低的培养基组成的混合液，形成上层平板。培养一段时间后，在上层平板上可观察到由噬菌体侵染周围细菌而形成的噬菌斑（通常一个噬菌斑来自一个噬菌体），根据噬菌斑的数目可计算噬菌体的数量。下列叙述错误的是（ ） A. 需先调节培养基的pH再灭菌，然后进行倒平板 B. 需使用灭菌后的涂布器将混合液均匀涂布在底层平板上 C. 利用双层平板法获得的噬菌斑不容易出现上下重叠现象 D. 由于上层培养基较软形成的噬菌斑较大，故有利于计数 【答案】B 【解析】 【分析】双层平板法，先在培养皿中倒入底层固体培养基，凝固后再倒入含有宿主细菌和一定稀释度噬菌体的半固体培养基。培养一段时间后，计算噬菌斑的数量。双层平板法的优点：①加了底层培养基后，可使原来底面不平的玻璃皿的缺陷得到了弥补；②所形成全部噬菌体斑都接近处于同一平面上，因此不仅每一噬菌斑的大小接近、边缘清晰，而且不致发生上下噬菌斑的重叠现象；③因上层培养基中琼脂较稀，故形成的噬菌斑较大，更有利于计数。 【详解】A、配制培养基的步骤，计算→称量→溶化→调节pH→分装→灭菌→倒平板，A正确； B、题干信息可知，由宿主细菌、噬菌体以及琼脂含量较低的培养基组成的混合液，形成上层平板，而不是用涂布器将混合液均匀涂布在底层平板上，B错误； C、双层平板法所形成全部噬菌体斑都接近处于同一平面上，因此不仅每一噬菌斑的大小接近、边缘清晰，而且不致发生上下噬菌斑的重叠现象，C正确； D、双层平板法因上层培养基中琼脂较稀，故形成的噬菌斑较大，更有利于计数，D正确。 故选B。 5. 科研人员采用平板法筛选出淀粉酶高产菌株S458-1，然后对该菌株进行扩大培养，并研究了装瓶量（培养瓶中培养液的装有量）、发酵时间等发酵条件对该菌株产生的淀粉酶活力的影响，实验结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 筛选时可在平板上喷洒碘液，菌落周围棕色区域较大的菌株即为S458-1 B. 进行扩大培养时，培养基中不需要添加琼脂但要以淀粉作为唯一碳源 C. 装瓶量增大会降低S458-1的产酶能力，可能是由于培养液中溶解氧的含量降低 D. 由图示可知，装瓶量10%、发酵时间60h为S458-1的最佳发酵条件 【答案】C 【解析】 【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 2、酶活性是指酶催化特定化学反应的能力，其可用一定条件下酶所催化某一化学反应的速率表示。 【详解】A、淀粉酶高产菌株能分解淀粉，淀粉遇碘变蓝。在平板上喷洒碘液后，菌落周围棕色区域（淀粉被分解的区域）较大，说明该菌株分解淀粉的能力强，即为淀粉酶高产菌株 S458 - 1，A正确； B、扩大培养通常使用液体培养基，液体培养基不需要添加琼脂。要筛选和培养淀粉酶高产菌株，应以淀粉作为唯一碳源，这样只有能利用淀粉的菌株才能生长，B正确； C、由左图可知，自变量为装瓶量，因变量为酶活力，当装瓶量超过10%时，酶活力逐渐下降，但酶活力不等于产酶能力，C错误； D、根据左图和右图可知，装瓶量10%，发酵时间60 h时，酶活力最大，因此为最佳发酵条件，D正确。 故选C。 6. 海洋杜氏藻是一种单细胞绿藻，具有耐盐特性；紫球藻是一种单细胞红藻，是制备重要医药原料花生四烯酸的良好材料．且对青霉素有抗性。通过植物细胞工程技术，培育出了能在高盐海水中养殖且高产花生四烯酸的杂种藻类。下列叙述错误的是（ ） A. 用酶解法获取原生质体的过程需在等渗或高渗溶液中进行 B. 用高Ca2+-高pH融合法可人工诱导原生质体的融合 C. 在高盐培养基中添加青霉素可筛选出所需的杂种细胞 D. 杂种细胞需脱分化形成愈伤组织后才能进一步发育 【答案】D 【解析】 【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。2、过程分析：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等．化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。 【详解】A、植物细胞去除细胞壁后得到原生质体，原生质体没有细胞壁的保护和支持。如果在低渗溶液中，原生质体会吸水涨破，所以用酶解法获取原生质体的过程需在等渗或高渗溶液中进行，A正确； B、人工诱导原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇、高Ca2+ - 高 pH 等），B正确； C、海洋杜氏藻耐盐，紫球藻对青霉素有抗性，杂种细胞既耐盐又对青霉素有抗性。在高盐培养基中添加青霉素，只有杂种细胞既能适应高盐环境又能抗青霉素，从而可筛选出所需的杂种细胞，C正确； D、藻类是单细胞生物，杂种细胞直接进行有丝分裂等进一步发育，不需要脱分化形成愈伤组织，D错误。 故选D。 7. 三维细胞培养技术（3D细胞培养技术）是通过人工模拟细胞间质微环境，允许动物细胞在三维空间中生长和相互作用的技术。与传统的细胞培养相比，3D细胞培养更接近体细胞的实际生长环境。下列叙述正确的是（ ） A. 传统细胞培养时，细胞往往需要贴附于某些基质表面才能生长增殖 B. 用胰蛋白酶处理传统培养的贴壁细胞，使其胞间连丝断裂有利于传代培养 C. 3D细胞培养前需要对动物组织进行灭菌处理，培养时需定期更换培养液 D. 利用3D细胞培养技术研究干细胞分化过程时，一定不需要进行分瓶处理 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【详解】A、在传统的动物细胞培养中，大多数细胞具有贴壁生长的特性，即细胞往往需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，A正确； B、用胰蛋白酶处理传统培养的贴壁细胞，是使细胞间的蛋白质分解，从而使细胞相互分离，而不是使胞间连丝断裂（植物细胞间存在胞间连丝，动物细胞间不存在胞间连丝 ），这样有利于传代培养，B错误； C 、3D 细胞培养前需要对动物组织进行消毒处理，而不是灭菌处理（灭菌会杀死所有微生物包括芽孢和孢子，会破坏组织细胞 ），培养时为了保证细胞所需营养物质和清除代谢废物，需定期更换培养液，C错误； D、利用 3D 细胞培养技术研究干细胞分化过程时，如果细胞数量过多，也可能需要进行分瓶处理以提供足够的空间和营养等条件，D错误。 故选A。 8. 干细胞的培养成功是动物细胞培养领域的重大成就，其应用前景吸引着众多科学家投入到相关研究中。下列叙述错误的是（ ） A. 胚胎干细胞具有可分化为成年动物体内任何一种类型的细胞的潜能 B. 成体干细胞具有组织特异性，不具有发育成完整个体的能力 C. iPS细胞可由成纤维细胞经相关因子诱导转化而来，类似于再分化 D. 移植来源于患者自身体细胞的iPS细胞理论上可以避免免疫排斥反应 【答案】C 【解析】 【分析】1、干细胞是指动物和人体内保留着少量具有分裂和分化能力的细胞。 2、iPS细胞，称诱导多能干细胞，是具有与胚胎干细胞相似的分化潜力的干细胞。 【详解】A、干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞，胚胎干细胞分化程度低，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞的潜能，A正确； B、成体干细胞只能分化为特定的组织，不具有分化为成年动物体内任何一种类型细胞的潜能，其分化潜能是有一定限度的，B正确； C、小鼠的成纤维细胞转变为 iPS 细胞，从高度分化的细胞形成分化程度低的细胞，类似于植物组织培养中的脱分化过程，C错误； D、iPS细胞可由患者自身体细胞经人工诱导获得，自体细胞获得的iPS细胞移植，其细胞膜表面的组织相容性抗原物质相同，理论上可避免免疫排斥反应，D正确。 故选C。 9. HER-2蛋白主要在胎儿期表达，成年以后只在极少数组织内低水平表达。由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体—药物偶联物T-DMI，对HER-2有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述正确的是（ ） A. 给小鼠反复注射HER-2蛋白，以便在血清中获取曲妥珠单抗 B. 用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 C. DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键 D. 用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、制备单克隆抗体时，需向小鼠多次注射抗原（HER-2），以激活B淋巴细胞，但免疫后的B淋巴细胞应从小鼠的脾脏中获取，而非血清（血清中含多克隆抗体，而非B细胞），A错误； B、选择培养基（如HAT培养基）的作用是筛选出杂交瘤细胞（融合的B细胞与骨髓瘤细胞），但无法直接筛选出分泌特定抗体的细胞。分泌抗体的杂交瘤细胞需通过后续的抗体检测进一步确认，B错误； C、根据题意信息可知，T-DMI中，曲妥珠单抗（抗体）负责特异性结合HER-2，而DMI是连接的细胞毒药物。特异性靶向的关键在于抗体部分，而非DMI，C错误； D、灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面的糖蛋白促使细胞膜融合。此过程依赖细胞膜的流动性，导致膜蛋白和脂质分子重新排布，D正确。 故选D。 10. 在胚胎工程技术中，有很多操作步骤都需要“检查”。下列叙述正确的是（ ） A. 取出的卵母细胞移入培养液中培养，需检查其是否分裂到MII中期 B. 胚胎移植前，需对胚胎进行检查以确定是否发育至原肠胚阶段 C. 检查胚胎性别时，需取样囊胚内细胞团细胞做DNA分析 D. 胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，避免发生免疫排斥反应 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）； ④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、卵母细胞培养到MII中期才具有受精能力，因此取出的卵母细胞移入培养液中培养，需检查其是否分裂到MII中期，A正确； B、哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能和受精等几个主要步骤。精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养基中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力，并将其培养至桑葚胚或囊胚进行胚胎移植，所以胚胎移植前，要对胚胎进行检查以确定其是否发育到桑葚胚或囊胚阶段，B错误； C、在胚胎移植前，若要对胚胎的性别进行鉴定，应取囊胚的滋养层细胞做DNA分析，C错误； D、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，因此胚胎移植入受体母畜的子宫前，不需对受体母畜进行胚胎免疫检查，D错误。 故选A。 11. 下列关于重组DNA技术的基本工具的叙述，错误的是（ ） A. E．coliDNA连接酶既能“缝合”黏性末端，也能“缝合”平末端 B. 限制性内切核酸酶主要来自原核生物，一般不切割自身DNA C. 载体上要有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入 D. DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键 【答案】D 【解析】 【分析】DNA连接酶：（1）根据酶的来源不同分为两类：E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。 【详解】A、E.coli DNA连接酶能连接具有互补黏性末端的DNA片段，也能“缝合”平末端，A正确； B、限制性内切核酸酶主要来自原核生物，一般不切割自身DNA，B正确； C、载体上要有一个至多个限制酶切割位点，便于切割后与外源DNA片段进行连接，C正确； D、DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键，D错误。 故选D。 12. 苹果切开后颜色会加深的现象称为“褐变”，“褐变”是由于多酚氧化酶催化多酚类物质生成褐色素所致。培育抗褐变转基因苹果的操作流程如图。下列叙述正确的是（ ） A. 图中的目的基因为多酚氧化酶基因，标记基因为卡那霉素抗性基因 B. 目的基因的表达依赖上游的启动子，标记基因的表达则不需要启动子 C. 步骤①是获得转基因苹果的核心工作，一般需要限制酶和DNA聚合酶的参与 D. 可通过PCR技术检测苹果的染色体DNA上是否成功插入了目的基因 【答案】D 【解析】 【分析】题图分析：过程①为构建目的基因表达的载体，过程②为获取受体细胞，过程③为将目的基因导入受体细胞，过程④为脱分化，过程⑤为再分化。 【详解】A、要想获得抗褐变的转基因苹果，应以抑制多酚氧化酶表达的基因作为目的基因，同时以卡那霉素抗性基因作为标记基因，A错误； B、启动子的作用是驱动基因的转录，目的基因的表达依赖上游的启动子，标记基因表达也需要启动子，B错误； C、过程①表示基因表达载体的构建，是基因工程的核心步骤，一般需要限制酶和DNA连接酶的参与，C错误； D、检测苹果的染色体DNA上是否成功插入了目的基因可利用PCR技术，若插入成功，则可扩增出相应的基因（电泳中有相应的条带），D正确。 故选D。 13. 目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因与卵子完成受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述错误的是（ ） A. 导入外源基因的精子需放入ATP溶液中进行获能处理 B. ②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合 C. ④过程是胚胎移植，需移植到同种的、生理状态相同的代孕母鼠子宫中 D. 精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小 【答案】A 【解析】 【分析】分析题图：图示表示培育转基因鼠的基本流程，其中①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，②是体外受精过程，③是早期胚胎培养过程，④是胚胎移植过程。 【详解】A、①过程需将成熟的精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体溶液中，用化学药物诱导精子获能，获能是指获得受精的能力而不是获得能量，因此不是放在ATP溶液中，A错误； B、受精是精子和卵细胞的结合，②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合，B正确； C、④过程是胚胎移植，需移植到同种的、生理状态相同的代孕母鼠子宫中，以保证胚胎的正常发育，C正确； D、与显微注射法相比，精子载体法对受精卵中核的影响会更小，理由是不需要穿过核膜，雌雄原核自动融合（通过受精作用完成整合），D正确。 故选A。 14. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究发现，用赖氨酸替换水蛭素第47位天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（ ） A. 水蛭素的改造属于蛋白质工程，自然界中的酶也都可通过该工程进行改造 B. 水蛭素疗效提高的根本原因是水蛭素氨基酸的排列顺序发生了改变 C. 用基因定点突变技术进行碱基的替换可实现水蛭素第47位氨基酸的替换 D. 改造水蛭素过程中遗传信息的流向和天然水蛭素合成过程中的相同 【答案】C 【解析】 【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。 【详解】A、自然界中的酶大部分是蛋白质，少数是RNA，RNA不能通过基因工程进行改造，A错误； B、水蛭素疗效提高的根本原因是控制水蛭素合成的基因的碱基排列顺序发生了改变，B错误； C、改造过程中，用基因定点突变技术对水蛭素基因的碱基对进行替换，从而实现赖氨酸替换水蛭素的第47位的天冬酰胺，C正确； D、蛋白质工程的原理是中心法则逆推，故改造水蛭素的过程中的遗传信息流向和天然水蛭素合成过程中的有所不同，D错误。 故选C。 15. 现代生物技术有着巨大的应用前景，但会涉及到生物安全问题。下列叙述错误的是（ ） A. 消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 B. 我国禁止一切与生殖性克隆和治疗性克隆有关的研究 C. 为避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果 D. 设计试管婴儿需要经过国家有关部门的严格审批，不宜推广 【答案】B 【解析】 【分析】生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，物武器的致病能力强，攻击范围广。 【详解】A、生物武器的致病能力强，攻击范围广，消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面，A正确； B、我国不允许进行任何生殖性克隆人实验，主张对治疗性克隆进行有效的监控和严格审查，B错误； C、为避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果，C正确； D、设计试管婴儿涉及伦理问题，需要经过国家有关部门的严格审批，不宜推广，D正确。 故选B。 二、不定项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。每题有一个或多个选项符合题目要求，全对得3分，选对但不全得1分，错选得0分） 16. 乳酸链球菌素（Nisin）是一种蛋白质类抗生素，对许多革兰氏阳性菌，包括对食品造成严重危害的主要腐败菌和某些致病菌有强烈的抑制作用。目前获得Nisin的唯一途径是通过乳酸链球菌发酵生产。下列叙述正确的是（ ） A. 随发酵时间的延长，菌液的pH下降会抑制菌种的生长 B. 发酵生产过程中，可用抽样检测法对乳酸链球菌的数量进行监测 C. Nisin的分泌离不开细胞膜、细胞器膜等组成的生物膜系统 D. Nisin可被人体消化道中的蛋白酶水解，故对人体无害，可作为食品防腐剂 【答案】ABD 【解析】 【分析】分析题意可知，乳酸链球菌属于原核生物，其细胞内无以核膜为界限的细胞核，只有核糖体一种细胞器。 【详解】A、随发酵时间的延长，由于乳酸链球菌无氧呼吸产生乳酸，故菌液的pH下降会抑制菌种的生长，A正确； B、由于微生物数量较多，发酵生产过程中，可用抽样检测法对乳酸链球菌的数量进行监测，B正确； C、Nisin是由乳酸链球菌产生的，属于原核生物，不含生物膜系统，C错误； D、Nisin是一种蛋白质类抗生素，可被人体消化道中的蛋白酶水解，对食品造成严重危害的主要腐败菌和某些致病菌有强烈的抑制作用，所以对人体无害，可作为食品防腐剂，D正确。 故选ABD。 17. 嗜盐单胞菌是一类嗜盐微生物，能够在高pH、高温和高盐等极端条件下生长。中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，其以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室通过发酵生产出PHA等新型高附加值可降解材料，从而提高了甘蔗的整体利用价值。具体的工艺流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 使用嗜盐单胞菌能够节约淡水资源，还能建立抗杂菌污染的开放式发酵系统 B. 实验室用嗜盐单胞菌H发酵生产PHA时，需要提供无氧等发酵条件 C. 为统计嗜盐单胞菌H的数目，在培养过程中应定期取样并采用平板划线法进行计数 D. 为提高嗜盐单胞菌H对蔗糖的耐受力，应以蔗糖为唯一碳源，并不断提高蔗糖浓度 【答案】BC 【解析】 【分析】微生物的计数方法：稀释涂布平板法可用于微生物计数，原理是将菌液进行一系列梯度稀释，涂布到平板上，通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数；平板划线法主要用于微生物的分离纯化，不能用于计数，它是通过划线将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，以获得单个菌落。 【详解】A、嗜盐单胞菌是嗜盐微生物，能在高盐环境生长，使用它可减少对淡水资源的依赖，达到节约淡水资源的目的；同时高盐环境不利于其他杂菌生长，所以能建立抗杂菌污染的开放式发酵系统，A正确； B、从图中可以看到发酵过程有“空气”通入，说明嗜盐单胞菌H发酵生产PHA时需要有氧条件，而不是无氧条件，B错误； C、平板划线法不能用于计数，因为平板划线法是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，无法准确统计菌落数目，统计微生物数目常用稀释涂布平板法，C错误； D、以蔗糖为唯一碳源，并不断提高蔗糖浓度，能筛选出对蔗糖耐受力强的嗜盐单胞菌H，从而提高其对蔗糖的耐受力，D正确。  故选BC。 18. 野生型草莓一般是二倍体，而平常食用的草莓是八倍体。某生物兴趣小组选用八倍体草莓进行了“DNA粗提取与鉴定”实验。下列有关说法错误的是（　　） A. 八倍体草莓细胞中的DNA含量高于野生型草莓细胞 B. 研磨液用滤纸过滤后，于4℃冰箱中静置后再取上清液 C. 向上清液中加入体积分数为95%的冷酒精，利于DNA析出 D. 用二苯胺试剂鉴定DNA时，需进行沸水浴加热并冷却处理 【答案】B 【解析】 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不容于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。 【详解】A、DNA位于染色体上，八倍体草莓的细胞中含有八个染色体组，其DNA含量高于野生型二倍体草莓细胞，A正确； B、研磨液用纱布过滤后，于4℃冰箱中静置后再取上清液，B错误； C、向上清液中加入体积分数为95%的冷酒精，DNA会因不溶于酒精而析出，形成白色的絮状或丝状沉淀，C正确； D、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，需沸水浴加热冷却后再观察颜色变化，D正确。 故选B。 19. 研究表明，精子进入卵母细胞时带入的少量miRNA可促进早期胚胎发育。重构胚不能正常发育是限制核移植技术的重要因素，为探究其原因科学家进行相关实验，结果如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 重构胚需用电刺激等方法激活后才能完成细胞分裂和发育进程 B. 精子miRNA可通过改变重构胚中DNA的遗传信息促进其正常发育 C. 精子miRNA可通过降低重构胚中组蛋白甲基化水平促进其正常发育 D. 与正常胚胎相比，重构胚中甲基化水平异常主要发生在胚胎孵化时期 【答案】BD 【解析】 【分析】重构胚需要用物理或化学方法激活，如电刺激等，这样才能使重构胚完成细胞分裂和发育进程。 【详解】A、重构胚在核移植后，需用电刺激等方法激活，以促使其完成细胞分裂和发育进程，这是核移植技术中的常见操作，A正确； B、miRNA 是一类非编码 RNA，它不能改变重构胚中 DNA 的遗传信息，只是通过影响基因的表达等方式来促进重构胚的正常发育，B错误； C、从图中可以看出，添加精子 miRNA 的重构胚组蛋白甲基化水平比重构胚低，且正常胚胎组蛋白甲基化水平也较低，说明精子 miRNA 可通过降低重构胚中组蛋白甲基化水平促进其正常发育，C正确； D、由图可知，与正常胚胎相比，重构胚中甲基化水平异常主要发生在 8 细胞时期，而不是胚胎孵化时期（囊胚期），D错误。 故选BD。 20. 研究发现，大豆GmNF-YA19基因在干旱胁迫中有响应。科研人员利用PCR扩增GmNF-YA19基因，构建GmNF-YA19基因表达载体并转化烟草。含GmNF-YA19基因的DNA片段和载体的结构分别如图1、2所示。下列叙述正确的是（ ） A. PCR扩增GmNF-YA19基因所需的两种引物的碱基序列一般不同 B. 为获得能正确表达目的基因的重组质粒，应选用限制酶KpnI、EcoRI进行切割 C. 终止子为一段DNA序列，其作用是使翻译在所需要的地方停下来 D. 重组质粒转化烟草后，可使用含氨苄青霉素的培养基来筛选受体细胞 【答案】AD 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：PCR技术扩增等。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、PCR扩增GmNF-YA19基因的前提是根据已知核苷酸序列合成两种引物，因为子链的延伸方向是在引物的3’端连接脱氧核苷酸，因此PCR扩增GmNF-YA19基因所需的两种引物的碱基序列一般不同，A正确； B、根据图中信息，在质粒的启动子和终止子中间含有的限制酶为Pvu Ⅱ、Kpn I 和EcoR I三种限制酶切割位点，由于Kpn I在质粒中不只一个识别位点，用其切割会丢失终止子，因此最好选用Pvu Ⅱ和EcoR I进行切割。且在目的基因的两端也存在着两种酶的识别位点，即选用Pvu Ⅱ和EcoR I两种限制酶切割含目的基因的DNA片段和载体，这样可以保证目的基因和质粒正向连接，避免它们发生自身环化，B错误； C、终止子是位于基因末端的一段特殊的DNA序列，其作用是使转录过程在所需要的地方停下来，C错误； D、重组质粒转化烟草后，重组质粒中含有抗氨苄青霉素的基因，该基因可作为标记基因，因而使用含氨苄青霉素的培养基来筛选成功导入重组质粒的目的细胞，D正确。 故选AD。 第Ⅱ卷（非选择题共55分） 21. 产黄青霉菌是一种自然界中广泛存在的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。当产黄青霉菌处于葡萄糖浓度不足的环境中时，会分泌青霉素。工业上生产青霉素的流程如图所示。 （1）由图中分离纯化的结果推测，该过程中采用的方法是_____。刚分离获得的菌种不会直接加入主发酵罐，而是先进行母种培养，其目的是_____。 （2）图中主发酵过程中要随时取样检测培养液中的微生物数量、产物浓度等．同时，要严格控制_____（答出三点）等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。 （3）随着主发酵过程的进行，需要适时向发酵罐内“补料”。为使产黄青霉菌处于“半饥饿”状态，延长青霉素的合成期，“补料”添加葡萄糖时应采取的方式是_____（从添加的量与频次角度回答）。青霉素是青霉菌的_____（填“初生”或“次生”）代谢物，一般采取适当的_____措施来获得产品。 【答案】（1） ①. 稀释涂布平板法 ②. 增加菌种数量 （2）pH、温度、溶解氧 （3） ①. 少量、多次添加 ②. 次生 ③. 提取、分离和纯化 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。 【小问1详解】 由发酵工程流程图中平板上菌落的分布，可推知分离纯化菌种采用的方法是稀释涂布平板法。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，因此稀释涂布平板法可用于菌落计数；由于发酵过程中需要的菌种数量大，因此将分离后的菌种先进行菌种的扩大化培养，即进行“母种培养”以增加菌种数量。 【小问2详解】 在发酵过程中，要随时检测培养液中微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。要及时添加必需的营养组分，要严格控制溶氧量、pH和温度等发酵条件。环境条件的变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径，影响微生物代谢物的形成。 【小问3详解】 葡萄糖容易被菌体氧化并产生抑制抗生素合成酶形成的物质、一次性添加过量会影响青霉素的合成，因此“补料”添加葡萄糖时易采用多次少量添加的方法。青霉素是青霉菌的次生代谢物，一般采用提取、分离和纯化措施来获得产品。 22. 多肉植物因其观赏性和耐旱易培的特点受到人的喜爱。研究人员以叶插繁殖能力强的多肉植物长寿花为实验材料，通过使用改良的“切-浸-芽”（CDB）方法实现了多肉植物的遗传转化和基因编辑，为多肉植物的遗传改良开辟了新途径。图1和图2分别表示利用常规转化法和CDB法在长寿花中递送基因的示意图。回答下列问题。 （1）无菌操作是图1操作成功的关键，诱导愈伤组织的固体培养基应采用______法灭菌。若①过程在诱导生芽的培养基上未形成芽但分化出了根，原因可能是生长素与细胞分裂素用量的比值______（填“偏高”或“偏低”），该过程还需要提供光照，目的是_______。 （2）为测试CDB法能否对长寿花实现遗传转化，研究人员用携带增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP基因）和除草剂抗性基因（bar基因）的农杆菌K599侵染外植体B，再将被侵染的外植体B放入充满湿润土壤的培养箱中培养。紫外灯下，实现遗传转化的转基因芽表现为______；农杆菌侵染植物细胞时可将外源基因递送到外植体B细胞中的原因是_____。 （3）为确定CDB法能否用于传递基因编辑工具，研究人员构建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体，已知PDS蛋白缺失会导致植株白化。鉴定导入转基因长寿花B中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是______，依据是_____。 （4）与常规转化法相比，采用CDB法进行基因递送的优点是：______。 【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌（湿热灭菌） ②. 偏高 ③. 诱导形成叶绿素，有利于进行光合作用 （2） ①. 发出绿色荧光 ②. 外源基因插入到农杆菌Ti质粒上的T-DNA后可转移到被侵染的外植体B细胞中，并与外植体B细胞的染色体DNA整合到一起 （3） ①. 观察植株是否表现出白化性状 ②. PDS基因缺失会导致植株白化，出现白化苗则说明通过基因编辑技术实现了PDS基因的敲除 （4）不需要植物组织培养技术、操作简单、培养周期短 【解析】 【分析】植物组织培养原理是植物细胞具有全能性，即已分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能。过程：外植体（离体的植物组织、器官或细胞）经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再经过再分化形成根、芽等器官，进而发育成完整植株。植物激素的比例影响器官分化，生长素与细胞分裂素用量比值偏高利于生根，偏低利于生芽。 【小问1详解】 诱导愈伤组织的固体培养基应采用高压蒸汽灭菌法灭菌，这是常用的对培养基进行灭菌的方法，可以有效杀灭各种微生物及其芽孢，保证培养基的无菌状态。在植物组织培养中，生长素与细胞分裂素用量的比值会影响植物器官的分化。若在诱导生芽的培养基上未形成芽但分化出了根，原因是生长素与细胞分裂素用量的比值偏高。因为当生长素比例相对较高时，有利于根的分化，而抑制芽的形成。该过程提供光照的目的是诱导叶绿素的形成，使植物能够进行光合作用合成有机物，为植物的生长发育提供物质和能量基础。 【小问2详解】 因为农杆菌K599携带增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP基因），所以在紫外灯下，实现遗传转化的转基因芽表现为发出绿色荧光，这是绿色荧光蛋白基因表达的结果。农杆菌侵染植物细胞时可将外源基因递送到外植体B细胞中的原因是农杆菌Ti质粒上的T - DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上。这样携带目的基因的T-DNA就能够进入植物细胞并稳定存在和表达。 【小问3详解】 鉴定导入转基因长寿花B中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是观察植株是否表现出白化性状。依据是已知PDS蛋白缺失会导致植株白化，若导入的基因编辑载体成功发挥作用，PDS基因被敲除，那么植株就会因为PDS蛋白缺失而表现为白化；若植株未出现白化现象，则说明基因编辑载体未成功发挥作用。   【小问4详解】 与常规转化法相比，采用CDB法进行基因递送的优点是：不需要植物组织培养技术，直接形成转基因芽、培养周期短、操作简单。 23. 猪细小病毒（PPV）会导致猪患细小病毒传染病。NS1 蛋白参与 PPV 的复制等生命活动，猪感染PPV后会产生抗NS1 蛋白抗体，研究人员开发了一种通过检测该抗体以快速检测 PPV 的试纸。 （1）研究发现，金黄色葡萄球菌A 蛋白（SPA）和NS1 蛋白均能与抗 NS1 蛋白抗体特异性结合。为探究它们与抗体的结合位点是否相同，研究人员首先制备了抗 NS1 蛋白的单克隆抗体，基本思路是：将从注射过_________的小鼠中提取的B淋巴细胞与________细胞融合，再经过两次筛选最终获得具有________特点的阳性杂交瘤细胞。然后将得到的抗 NS1蛋白抗体分为Fab和Fc两部分，电泳后分别用SPA 和NS1蛋白作探针进行杂交，结果如图1所示，由此得出的实验结论为________。 （2）利用NS1蛋白和SPA制备的PPV 检测试纸，原理如图2所示。其中PPV 多抗IgG可特异性结合包含NS1蛋白在内的多种 PPV抗原，当胶体金在检测线、质控线处聚集时，会出现可见条带。 若检测结果为检测线和质控线处均出现可见条带，则说明样品中含有________，理由是____ 。 （3）研究发现，只有当PPV 在细胞内大量繁殖后，才会在猪血清中检测到抗 NS1 蛋白抗体。据此推测，若将灭活的PPV疫苗接种到健康猪体内后，取其血清利用上述试纸进行检测的结果应为________。 【答案】（1） ①. NS1 蛋白 ②. 骨髓瘤 ③. 既能大量增殖又能产生专一抗体 ④. SPA 和 NS1 蛋白与抗体的结合位点不同 （2） ①. 抗NS1 蛋白抗体 ②. SPA 和 NS1 蛋白与抗NS1 蛋白抗体的结合位点不同，样品中的抗NS1 蛋白抗体与与胶体金标记的 NS1 蛋白结合后，与检测线上的SPA结合形成可见条带，过量胶体金标记的 NS1 蛋白也会与质控线上的抗体结合形成可见条带 （3） 质控线处出现可见条带，检测线处不出现可见条带；灭活的 PPV 不能大量繁殖，血清中检测不到抗 NS1 蛋白抗体 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【小问1详解】 在单克隆抗体制备的过程中首先要得到已经免疫的B淋巴细胞，因此将从注射了 NS1 蛋白的小鼠中提取的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经过两次筛选最终获得既能大量增殖又能产生专一抗体特点的阳性杂交瘤细胞。从图 1 可以看出，Fab 部分只能与 NS1 蛋白结合，Fc 部分与 SPA 结合，不与 NS1 蛋白结合，说明 SPA 和 NS1 蛋白与抗体的结合位点不同。 【小问2详解】 若检测结果为检测线和质控线处都出现可见条带，则说明样品中含有 抗NS1 蛋白抗体，原因是SPA 和 NS1 蛋白与抗NS1 蛋白抗体的结合位点不同，样品中的抗NS1 蛋白抗体与与胶体金标记的 NS1 蛋白结合后，与检测线上的SPA结合形成可见条带，过量胶体金标记的 NS1 蛋白也会与质控线上的抗体结合形成可见条带。 【小问3详解】 由于灭活的 PPV 不能大量繁殖，所以血清中检测不到抗 NS1 蛋白抗体，利用上述试纸进行检测的结果为质控线处出现可见条带，检测线处不出现可见条带。 24. 为筛选出能与SARS病毒的S蛋白特异性结合的受体蛋白，研究人员在S蛋白末端添加TAP标签（能特异性地与人和哺乳动物体内IgG类抗体结合），再利用该标签在病毒敏感细胞中快速纯化出S蛋白及其相互作用的蛋白质，部分过程如图。回答下列问题。 注：XhoI、SmaI、EcoRI、BamHI表示限制酶；PCMV、T7表示启动子：Kozak序列是调控基因表达的重要序列且不含限制酶识别序列；Ampr表示氨苄青霉素抗性基因；ori表示复制原点。 （1）为成功构建pcDNA3．1-S-TAP重组质粒，在利用PCR扩增S基因时，应该在S基因的5'端引入Kozak序列和_______限制酶识别序列，并删除S基因3'端的________编码序列；缓冲液中Mg2+的作用是______。 （2）S基因和TAP基因的扩增产物通常用________进行初步鉴定，结果显示两个片段均得到扩增再经测序证实正确后，将这两个片段经限制酶切割并通过_______酶连接导入质粒pcDNA3．1。在重组质粒中，T7的作用是_______。 （3）为检测转染细胞中是否表达出了S-TAP融合蛋白，科研人员将转染24h的细胞置于载玻片，洗涤、固定后，滴加带有荧光标记的_____稀释液，荧光显微镜下观察。若出现荧光标记，则说明转染细胞中表达出了S-TAP融合蛋白。 【答案】（1） ①. SmaI ②. 终止密码子 ③. 激活TaqDNA聚合酶 （2） ①. 琼脂糖凝胶电泳 ②. DNA连接 ③. 是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA （3）IgG类抗体 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 构建重组质粒时，要将S基因与含TAP基因的载体连接，从图中可知载体上S基因插入位点一侧有XhoI限制酶识别序列，所以在利用PCR扩增S基因时，应该在S基因的5'端引入Kozak序列和SmaI限制酶识别序列。因为要构建S-TAP融合蛋白，所以需删除S基因3'端的终止密码子序列，这样才能使S基因和TAP基因编码的蛋白连接起来。缓冲液中Mg2+的作用是作为Taq酶的激活剂，维持Taq酶的活性。 【小问2详解】 S基因和TAP基因的扩增产物通常用琼脂糖凝胶电泳进行初步鉴定，通过电泳可根据片段的迁移速率等判断是否扩增成功。将这两个片段经限制酶切割后，通过DNA连接酶连接导入质粒DNA3.1。在重组质粒中，T7是启动子，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA。 【小问3详解】 因为TAP标签能特异性地与人或哺乳动物体内IgG类抗体结合，所以为检测转染细胞中是否表达出了S-TAP融合蛋白，科研人员将转染24h的细胞置于载玻片，洗涤、固定后，滴加带有荧光标记的IgG类抗体稀释液，若出现荧光标记，则说明转染细胞中表达出了S-TAP融合蛋白。  25. 小麦的D1b基因是调控光周期的重要基因，当小麦细胞接受足够时长的短日照刺激后，细胞中的A 蛋白就会与D1b基因启动子区中的光周期响应序列结合，进而启动该基因的表达，小麦表现为延迟开花。 （1）与D1b基因相比，D1a 基因的启动子区缺失了含光周期响应序列的片段，但其他序列相同，因此D1a基因会使小麦表现为提前开花。欲利用PCR 扩增出D1b和D1a基因的启动子区，科研人员设计了图1中的引物DF 和DR，引物的作用是________。若D1a基因启动子区扩增产物为 709bp，D1b基因启动子区扩增产物为2518bp，则光周期响应序列片段的长度为________ bp。 （2）为找到光周期响应序列的位置，将通过引物F1~F9扩增得到的9种片段、D1b启动子区和D1a启动子区分别与报告基因连接成基因表达载体，如图2 所示。为正确构建基因表达载体，引物DR 的序列应为5‘-___________3’（,写出10个碱基）。将构建成功的11组基因表达载体分别转入拟南芥后，用短日照处理，检测不同组的报告基因开始表达的时间。当实验结果为________时，说明光周期响应序列位于引物F7~F8结合的DNA片段之间。 （3）为找到小麦细胞中的A蛋白，科研人员利用组氨酸和亮氨酸双营养缺陷型酵母菌为受体菌，进行了两次转化实验得到双转化的酵母菌，如图3所示。 ①将含光周期响应序列的诱导型启动子与组氨酸合成酶基因连接，构建成诱饵载体，用该载体转化酵母菌后，其会自主整合到酵母菌基因组中。 ②提取小麦总mRNA，通过_________得到不同的cDNA，以这些 cDNA 片段为目的基因，以亮氨酸合成酶基因为________基因，构建成猎物载体转化上述酵母菌。 ③将双转化后的酵母菌接种到________的选择培养基上培养，若________，则说明该组酵母菌中 cDNA 指导合成的是 A 蛋白。 【答案】（1） ①. 使DNA聚合酶能够从引物端开始连接脱氧核苷酸 ②. 1809 （2） ①. GGATCCCATG ②. 引物F1-F7组，报告基因表达，引物F8，F9组，报告基因不表达 （3） ①. 逆转录##反转录 ②. 标记 ③. 不含亮氨酸和组氨酸 ④. 有菌落出现 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 引物是一段与模板链碱基互补配对的短、单核苷酸序列，其作用是使DNA聚合酶能够从引物端开始连接脱氧核苷酸；依据题干信息，与D1b基因相比，Dla基因的启动子缺失了含光周期响应序列的片段，但其他序列相同，若Dla基因启动子扩增产物为709bp，D1b基因启动子扩增产物为2518bp，故光周期响应序列片段长度为（2518-709）bp=1809bp。 【小问2详解】 结合题意及题图可知，为正确构建基因表达载体，需要在引物DR的5'端添加限制酶的识别序列，根据转录的方向需要在引物DR的5'端添加BamH Ⅰ的识别序列，此后根据碱基互补配对得出引物DR的部分序列为5'CATGA3'，故引物DR的序列应为5'GGATCCCATG3'；D1b启动子区与报告基因连接成基因表达载体，因其中含有光周期序列，将其转入拟南芥后，用短日照处理，检测到拟南芥表现出延迟开花，D1a启动子区与报告基因连接成基因表达载体，因其中不含有光周期序列，将其转入拟南芥后，用短日照处理，检测到拟南芥表现出提前开花：若光周期响应序列位于引物F7~F8结合的DNA片段之间，则F1~F7结合的DNA片段上含光周期序列，因此将F1~F7结合的DNA片段与报告基因构建的基因表达载体转入拟南芥后，用短日照处理，F1到F7为引物时，报告基因表达，F8、F9为引物时，报告基因不表达。 【小问3详解】 ②以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录（反转录）；基因表达载体的组成有目的基因、标记基因、启动子和终止子，由图可知，该猎物载体中有启动子、终止子，目的基因（cDNA），还缺少标记基因，因此亮氨酸合成酶基因应为标记基因。 ③若该组酵母菌中的cDNA指导合成的是A蛋白，则A蛋白能和光周期相应序列结合，进而启动基因的表达，即能启动组氨酸合成酶基因的表达，则该酵母菌能利用组氨酸，故应将转化后的酵母菌接种到不含亮氨酸和组氨酸的选择培养基上培养，若培养基中出现菌落，则说明该组酵母菌中cDNA指导合成的是A蛋白。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2024—2025学年度第二学期期中教学质量检测 高二生物试题 注意事项： 1．本试卷分第I卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第I卷时．选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。 3．回答第Ⅱ卷时．将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 第I卷（选择题共45分） 一、单项选择题（本题共15小题，每小题2分，共30分。每题只有一个选项符合题目要求） 1. 传统发酵技术大大丰富了食品种类。下列关于传统发酵技术及其应用的叙述，错误的是（ ） A. 传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 B. 制作豆豉、酱油、豆腐等食品均利用了传统发酵技术 C. 泡菜腌制全过程需保持密封，以利于菌种的厌氧呼吸 D. 果酒发酵控制的温度一般要比果醋发酵控制的温度低 2. 用“麦汁酸化”法酿造的酸啤酒既有麦芽清香，又酸甜适口。它是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为乳酸，再结合酒精发酵制作而成。下列叙述错误的是（ ） A. 利用大麦作原料时，需浸泡大麦并加入赤霉素有助于淀粉酶的形成 B. 发酵过程中需将乳酸菌和酵母菌同时接种以有利于同时进行乳酸发酵和酒精发酵 C. 达到一定酸度后需将麦汁蒸煮以杀死乳酸菌，同时加入啤酒花产生风味组分 D. 为延长啤酒的保存期，可采用过滤消毒法去除啤酒中的部分微生物 3. 微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列叙述错误的是（ ） A. 根据微生物对碳源需求的差别，使用含有不同碳源的培养基 B. 接种前后．接种环都要在酒精灯火焰上灼烧灭菌 C. 微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 D. 固体培养基表面生长的一个菌落一般是由单个微生物繁殖形成的 4. 双层平板法是先在培养皿中倒入底层固体培养基，凝固后形成底层平板；再倒入由宿主细菌、噬菌体以及琼脂含量较低的培养基组成的混合液，形成上层平板。培养一段时间后，在上层平板上可观察到由噬菌体侵染周围细菌而形成的噬菌斑（通常一个噬菌斑来自一个噬菌体），根据噬菌斑的数目可计算噬菌体的数量。下列叙述错误的是（ ） A. 需先调节培养基的pH再灭菌，然后进行倒平板 B. 需使用灭菌后的涂布器将混合液均匀涂布在底层平板上 C. 利用双层平板法获得的噬菌斑不容易出现上下重叠现象 D. 由于上层培养基较软形成的噬菌斑较大，故有利于计数 5. 科研人员采用平板法筛选出淀粉酶高产菌株S458-1，然后对该菌株进行扩大培养，并研究了装瓶量（培养瓶中培养液的装有量）、发酵时间等发酵条件对该菌株产生的淀粉酶活力的影响，实验结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 筛选时可在平板上喷洒碘液，菌落周围棕色区域较大的菌株即为S458-1 B. 进行扩大培养时，培养基中不需要添加琼脂但要以淀粉作为唯一碳源 C. 装瓶量增大会降低S458-1的产酶能力，可能是由于培养液中溶解氧的含量降低 D. 由图示可知，装瓶量10%、发酵时间60h为S458-1的最佳发酵条件 6. 海洋杜氏藻是一种单细胞绿藻，具有耐盐特性；紫球藻是一种单细胞红藻，是制备重要医药原料花生四烯酸的良好材料．且对青霉素有抗性。通过植物细胞工程技术，培育出了能在高盐海水中养殖且高产花生四烯酸的杂种藻类。下列叙述错误的是（ ） A. 用酶解法获取原生质体的过程需在等渗或高渗溶液中进行 B. 用高Ca2+-高pH融合法可人工诱导原生质体的融合 C. 在高盐培养基中添加青霉素可筛选出所需的杂种细胞 D. 杂种细胞需脱分化形成愈伤组织后才能进一步发育 7. 三维细胞培养技术（3D细胞培养技术）是通过人工模拟细胞间质微环境，允许动物细胞在三维空间中生长和相互作用的技术。与传统的细胞培养相比，3D细胞培养更接近体细胞的实际生长环境。下列叙述正确的是（ ） A. 传统细胞培养时，细胞往往需要贴附于某些基质表面才能生长增殖 B. 用胰蛋白酶处理传统培养的贴壁细胞，使其胞间连丝断裂有利于传代培养 C. 3D细胞培养前需要对动物组织进行灭菌处理，培养时需定期更换培养液 D. 利用3D细胞培养技术研究干细胞分化过程时，一定不需要进行分瓶处理 8. 干细胞的培养成功是动物细胞培养领域的重大成就，其应用前景吸引着众多科学家投入到相关研究中。下列叙述错误的是（ ） A. 胚胎干细胞具有可分化为成年动物体内任何一种类型的细胞的潜能 B. 成体干细胞具有组织特异性，不具有发育成完整个体的能力 C. iPS细胞可由成纤维细胞经相关因子诱导转化而来，类似于再分化 D. 移植来源于患者自身体细胞的iPS细胞理论上可以避免免疫排斥反应 9. HER-2蛋白主要在胎儿期表达，成年以后只在极少数组织内低水平表达。由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体—药物偶联物T-DMI，对HER-2有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述正确的是（ ） A. 给小鼠反复注射HER-2蛋白，以便在血清中获取曲妥珠单抗 B. 用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 C. DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键 D. 用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布 10. 在胚胎工程技术中，有很多操作步骤都需要“检查”。下列叙述正确的是（ ） A. 取出的卵母细胞移入培养液中培养，需检查其是否分裂到MII中期 B. 胚胎移植前，需对胚胎进行检查以确定是否发育至原肠胚阶段 C. 检查胚胎性别时，需取样囊胚内细胞团细胞做DNA分析 D. 胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，避免发生免疫排斥反应 11. 下列关于重组DNA技术的基本工具的叙述，错误的是（ ） A. E．coliDNA连接酶既能“缝合”黏性末端，也能“缝合”平末端 B. 限制性内切核酸酶主要来自原核生物，一般不切割自身DNA C. 载体上要有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入 D. DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯键 12. 苹果切开后颜色会加深的现象称为“褐变”，“褐变”是由于多酚氧化酶催化多酚类物质生成褐色素所致。培育抗褐变转基因苹果的操作流程如图。下列叙述正确的是（ ） A. 图中的目的基因为多酚氧化酶基因，标记基因为卡那霉素抗性基因 B. 目的基因的表达依赖上游的启动子，标记基因的表达则不需要启动子 C. 步骤①是获得转基因苹果的核心工作，一般需要限制酶和DNA聚合酶的参与 D. 可通过PCR技术检测苹果的染色体DNA上是否成功插入了目的基因 13. 目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因与卵子完成受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述错误的是（ ） A. 导入外源基因的精子需放入ATP溶液中进行获能处理 B. ②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合 C. ④过程是胚胎移植，需移植到同种的、生理状态相同的代孕母鼠子宫中 D. 精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小 14. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究发现，用赖氨酸替换水蛭素第47位天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（ ） A. 水蛭素的改造属于蛋白质工程，自然界中的酶也都可通过该工程进行改造 B. 水蛭素疗效提高的根本原因是水蛭素氨基酸的排列顺序发生了改变 C. 用基因定点突变技术进行碱基的替换可实现水蛭素第47位氨基酸的替换 D. 改造水蛭素过程中遗传信息的流向和天然水蛭素合成过程中的相同 15. 现代生物技术有着巨大的应用前景，但会涉及到生物安全问题。下列叙述错误的是（ ） A. 消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面 B. 我国禁止一切与生殖性克隆和治疗性克隆有关的研究 C. 为避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果 D. 设计试管婴儿需要经过国家有关部门的严格审批，不宜推广 二、不定项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。每题有一个或多个选项符合题目要求，全对得3分，选对但不全得1分，错选得0分） 16. 乳酸链球菌素（Nisin）是一种蛋白质类抗生素，对许多革兰氏阳性菌，包括对食品造成严重危害的主要腐败菌和某些致病菌有强烈的抑制作用。目前获得Nisin的唯一途径是通过乳酸链球菌发酵生产。下列叙述正确的是（ ） A. 随发酵时间的延长，菌液的pH下降会抑制菌种的生长 B. 发酵生产过程中，可用抽样检测法对乳酸链球菌的数量进行监测 C. Nisin的分泌离不开细胞膜、细胞器膜等组成的生物膜系统 D. Nisin可被人体消化道中的蛋白酶水解，故对人体无害，可作为食品防腐剂 17. 嗜盐单胞菌是一类嗜盐微生物，能够在高pH、高温和高盐等极端条件下生长。中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，其以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室通过发酵生产出PHA等新型高附加值可降解材料，从而提高了甘蔗的整体利用价值。具体的工艺流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 使用嗜盐单胞菌能够节约淡水资源，还能建立抗杂菌污染的开放式发酵系统 B. 实验室用嗜盐单胞菌H发酵生产PHA时，需要提供无氧等发酵条件 C. 为统计嗜盐单胞菌H的数目，在培养过程中应定期取样并采用平板划线法进行计数 D. 为提高嗜盐单胞菌H对蔗糖的耐受力，应以蔗糖为唯一碳源，并不断提高蔗糖浓度 18. 野生型草莓一般是二倍体，而平常食用的草莓是八倍体。某生物兴趣小组选用八倍体草莓进行了“DNA粗提取与鉴定”实验。下列有关说法错误的是（　　） A. 八倍体草莓细胞中的DNA含量高于野生型草莓细胞 B. 研磨液用滤纸过滤后，于4℃冰箱中静置后再取上清液 C. 向上清液中加入体积分数为95%的冷酒精，利于DNA析出 D. 用二苯胺试剂鉴定DNA时，需进行沸水浴加热并冷却处理 19. 研究表明，精子进入卵母细胞时带入的少量miRNA可促进早期胚胎发育。重构胚不能正常发育是限制核移植技术的重要因素，为探究其原因科学家进行相关实验，结果如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 重构胚需用电刺激等方法激活后才能完成细胞分裂和发育进程 B. 精子miRNA可通过改变重构胚中DNA的遗传信息促进其正常发育 C. 精子miRNA可通过降低重构胚中组蛋白甲基化水平促进其正常发育 D. 与正常胚胎相比，重构胚中甲基化水平异常主要发生在胚胎孵化时期 20. 研究发现，大豆GmNF-YA19基因在干旱胁迫中有响应。科研人员利用PCR扩增GmNF-YA19基因，构建GmNF-YA19基因表达载体并转化烟草。含GmNF-YA19基因的DNA片段和载体的结构分别如图1、2所示。下列叙述正确的是（ ） A. PCR扩增GmNF-YA19基因所需的两种引物的碱基序列一般不同 B. 为获得能正确表达目的基因的重组质粒，应选用限制酶KpnI、EcoRI进行切割 C. 终止子为一段DNA序列，其作用是使翻译在所需要的地方停下来 D. 重组质粒转化烟草后，可使用含氨苄青霉素的培养基来筛选受体细胞 第Ⅱ卷（非选择题共55分） 21. 产黄青霉菌是一种自然界中广泛存在的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。当产黄青霉菌处于葡萄糖浓度不足的环境中时，会分泌青霉素。工业上生产青霉素的流程如图所示。 （1）由图中分离纯化的结果推测，该过程中采用的方法是_____。刚分离获得的菌种不会直接加入主发酵罐，而是先进行母种培养，其目的是_____。 （2）图中主发酵过程中要随时取样检测培养液中的微生物数量、产物浓度等．同时，要严格控制_____（答出三点）等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。 （3）随着主发酵过程的进行，需要适时向发酵罐内“补料”。为使产黄青霉菌处于“半饥饿”状态，延长青霉素的合成期，“补料”添加葡萄糖时应采取的方式是_____（从添加的量与频次角度回答）。青霉素是青霉菌的_____（填“初生”或“次生”）代谢物，一般采取适当的_____措施来获得产品。 22. 多肉植物因其观赏性和耐旱易培的特点受到人的喜爱。研究人员以叶插繁殖能力强的多肉植物长寿花为实验材料，通过使用改良的“切-浸-芽”（CDB）方法实现了多肉植物的遗传转化和基因编辑，为多肉植物的遗传改良开辟了新途径。图1和图2分别表示利用常规转化法和CDB法在长寿花中递送基因的示意图。回答下列问题。 （1）无菌操作是图1操作成功的关键，诱导愈伤组织的固体培养基应采用______法灭菌。若①过程在诱导生芽的培养基上未形成芽但分化出了根，原因可能是生长素与细胞分裂素用量的比值______（填“偏高”或“偏低”），该过程还需要提供光照，目的是_______。 （2）为测试CDB法能否对长寿花实现遗传转化，研究人员用携带增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP基因）和除草剂抗性基因（bar基因）的农杆菌K599侵染外植体B，再将被侵染的外植体B放入充满湿润土壤的培养箱中培养。紫外灯下，实现遗传转化的转基因芽表现为______；农杆菌侵染植物细胞时可将外源基因递送到外植体B细胞中的原因是_____。 （3）为确定CDB法能否用于传递基因编辑工具，研究人员构建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体，已知PDS蛋白缺失会导致植株白化。鉴定导入转基因长寿花B中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是______，依据是_____。 （4）与常规转化法相比，采用CDB法进行基因递送的优点是：______。 23. 猪细小病毒（PPV）会导致猪患细小病毒传染病。NS1 蛋白参与 PPV 的复制等生命活动，猪感染PPV后会产生抗NS1 蛋白抗体，研究人员开发了一种通过检测该抗体以快速检测 PPV 的试纸。 （1）研究发现，金黄色葡萄球菌A 蛋白（SPA）和NS1 蛋白均能与抗 NS1 蛋白抗体特异性结合。为探究它们与抗体的结合位点是否相同，研究人员首先制备了抗 NS1 蛋白的单克隆抗体，基本思路是：将从注射过_________的小鼠中提取的B淋巴细胞与________细胞融合，再经过两次筛选最终获得具有________特点的阳性杂交瘤细胞。然后将得到的抗 NS1蛋白抗体分为Fab和Fc两部分，电泳后分别用SPA 和NS1蛋白作探针进行杂交，结果如图1所示，由此得出的实验结论为________。 （2）利用NS1蛋白和SPA制备的PPV 检测试纸，原理如图2所示。其中PPV 多抗IgG可特异性结合包含NS1蛋白在内的多种 PPV抗原，当胶体金在检测线、质控线处聚集时，会出现可见条带。 若检测结果为检测线和质控线处均出现可见条带，则说明样品中含有________，理由是____ 。 （3）研究发现，只有当PPV 在细胞内大量繁殖后，才会在猪血清中检测到抗 NS1 蛋白抗体。据此推测，若将灭活的PPV疫苗接种到健康猪体内后，取其血清利用上述试纸进行检测的结果应为________。 24. 为筛选出能与SARS病毒的S蛋白特异性结合的受体蛋白，研究人员在S蛋白末端添加TAP标签（能特异性地与人和哺乳动物体内IgG类抗体结合），再利用该标签在病毒敏感细胞中快速纯化出S蛋白及其相互作用的蛋白质，部分过程如图。回答下列问题。 注：XhoI、SmaI、EcoRI、BamHI表示限制酶；PCMV、T7表示启动子：Kozak序列是调控基因表达的重要序列且不含限制酶识别序列；Ampr表示氨苄青霉素抗性基因；ori表示复制原点。 （1）为成功构建pcDNA3．1-S-TAP重组质粒，在利用PCR扩增S基因时，应该在S基因的5'端引入Kozak序列和_______限制酶识别序列，并删除S基因3'端的________编码序列；缓冲液中Mg2+的作用是______。 （2）S基因和TAP基因的扩增产物通常用________进行初步鉴定，结果显示两个片段均得到扩增再经测序证实正确后，将这两个片段经限制酶切割并通过_______酶连接导入质粒pcDNA3．1。在重组质粒中，T7的作用是_______。 （3）为检测转染细胞中是否表达出了S-TAP融合蛋白，科研人员将转染24h的细胞置于载玻片，洗涤、固定后，滴加带有荧光标记的_____稀释液，荧光显微镜下观察。若出现荧光标记，则说明转染细胞中表达出了S-TAP融合蛋白。 25. 小麦的D1b基因是调控光周期的重要基因，当小麦细胞接受足够时长的短日照刺激后，细胞中的A 蛋白就会与D1b基因启动子区中的光周期响应序列结合，进而启动该基因的表达，小麦表现为延迟开花。 （1）与D1b基因相比，D1a 基因的启动子区缺失了含光周期响应序列的片段，但其他序列相同，因此D1a基因会使小麦表现为提前开花。欲利用PCR 扩增出D1b和D1a基因的启动子区，科研人员设计了图1中的引物DF 和DR，引物的作用是________。若D1a基因启动子区扩增产物为 709bp，D1b基因启动子区扩增产物为2518bp，则光周期响应序列片段的长度为________ bp。 （2）为找到光周期响应序列的位置，将通过引物F1~F9扩增得到的9种片段、D1b启动子区和D1a启动子区分别与报告基因连接成基因表达载体，如图2 所示。为正确构建基因表达载体，引物DR 的序列应为5‘-___________3’（,写出10个碱基）。将构建成功的11组基因表达载体分别转入拟南芥后，用短日照处理，检测不同组的报告基因开始表达的时间。当实验结果为________时，说明光周期响应序列位于引物F7~F8结合的DNA片段之间。 （3）为找到小麦细胞中的A蛋白，科研人员利用组氨酸和亮氨酸双营养缺陷型酵母菌为受体菌，进行了两次转化实验得到双转化的酵母菌，如图3所示。 ①将含光周期响应序列的诱导型启动子与组氨酸合成酶基因连接，构建成诱饵载体，用该载体转化酵母菌后，其会自主整合到酵母菌基因组中。 ②提取小麦总mRNA，通过_________得到不同的cDNA，以这些 cDNA 片段为目的基因，以亮氨酸合成酶基因为________基因，构建成猎物载体转化上述酵母菌。 ③将双转化后的酵母菌接种到________的选择培养基上培养，若________，则说明该组酵母菌中 cDNA 指导合成的是 A 蛋白。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $