贵州省毕节市第一中学2024-2025学年高二下学期期中考试生物试卷

毕节市第一中学2025学年高二下学期期中考试生物试卷 一、单选题 1．2023年2月2日“世界湿地日”的主题为“湿地修复”。党的十八大以来，以习近平同志为核心的党中央将湿地保护和修复工作纳入生态文明建设，从而推进我国湿地保护事业高质量发展。下列叙述错误的是（　　） A．湿地被誉为地球的“肾”体现的是生物多样性的间接价值 B．湿地修复选择净化能力强的多种水生植物体现了循环和自生原理 C．湿地修复过程中可以依靠自然演替等机制恢复湿地的生态功能 D．在湿地生态恢复过程中，建立缓冲带主要是为了减少人类的干扰 2．某草原生态系统因过度放牧导致土壤沙化、植被覆盖率下降，鼠害频发。当地牧民尝试多种措施改善现状，下列措施不利于有效缓解生态恶化的是（　　） A．开挖灌溉水渠将草原改造为农田 B．种植耐旱固沙植物并建立防护林带 C．适当引入狐狸等鼠类天敌控制鼠群密度 D．实施轮牧制度并控制载畜量 3． 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。工业生产上，有时需要对菌种进行筛选纯化，平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列相关叙述错误的是（　　） A．传统发酵以天然菌种为主，菌种差异、杂菌不明等原因往往造成传统发酵食物品质不一 B．筛选酵母菌菌种时，可在培养基中加入一定量的青霉素来抑制真菌的生长 C．稀释涂布平板法计算获得的菌落数往往少于实际活菌数，采用细菌计数板统计时则相反 D．平板划线法纯化菌种时，对接种环灼烧了5次，说明操作员在培养基上进行了4次划线 4．腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵制作的大豆食品。下列叙述错误的是（　　） A．腌制腐乳的卤汤中加入的一定浓度的酒精能够起到灭菌作用 B．若制作过程中温度过低会导致毛霉菌丝不易进入豆腐块深层 C．微生物产生的酶将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 D．腐乳的风味因豆腐含水量、发酵条件以及辅料的不同而不同 5．几丁质是世界上含量巨大的生物多聚体之一，研究人员以湛江金沙湾海水作为样品，筛选分离出产几丁质酶的菌株并鉴定其降解能力。下列有关叙述正确的是（　　） A．筛选降解菌——加入适量的葡萄糖作为碳源 B．对菌株计数——接种环蘸取菌液后在培养基上连续划线 C．几丁质不能与溶液中重金属离子有效结合，用于废水处理 D．检测酶活性——对发酵液中几丁质的剩余量进行测定 6．研究人员用特定选择培养基从土壤中筛选出了一种石油降解菌，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．上述富集培养基中需要加入牛肉膏、蛋白胨等有机物 B．在固体培养基上进行纯培养时可用平板划线法进行接种 C．富集培养的目的是逐渐筛选出能够高效分解石油的降解菌 D．研究人员筛选出的石油降解菌可用于修复被石油污染的土壤 7． 研究者从某种海洋微生物中分离了一种新的抗真菌药物，为治疗真菌感染提供新思路。下列有关药物研制或生产叙述错误的是（　　） A．按海水的成分和浓度添加相应的无机盐配置的培养基具有选择作用 B．用接种环在培养基表面对样品连续划线、逐步稀释，纯化海洋微生物 C．用固体培养基培养物微生物获得次级代谢产物，用于抗真菌活性检测 D．获得目的微生物后，可进一步利用基因工程方法调节代谢途径提高生产量 8．我国古代劳动人民利用发酵技术生产了许多传统食品，如腐乳、果酒、果醋、泡菜等，下列有关分析，错误的是（　　） 选项 发酵食品 发酵所需的主要菌种 该菌种分类地位 A 腐乳 毛霉 细菌 B 果酒 酵母菌 真菌 C 果醋 醋酸菌 细菌 D 泡菜 乳酸菌 细菌 A．A B．B C．C D．D 9．某同学计划用选择培养基筛选尿素分解菌，关于实验方案下列说法正确的是（　　） A．进行梯度稀释的时候每次吸取的菌液量是随意的 B．从烧杯取出涂布器在火焰上灼烧后要放回烧杯中进行冷却 C．选择培养基能允许特定种类微生物生长并抑制其他种类微生物生长 D．涂布不同稀释倍数菌液的平板的培养时间应随菌液浓度的增大而增加 10．固氮微生物能将大气中的分子氮还原成氨，而其他微生物不能。为了从土壤中分离自生固氮菌，某课题小组的A同学从稀释了106倍的无氮培养基中筛选出大约150个菌落。但是，其他同学在同样的稀释度下只筛选出大约50个菌落。为确定A同学的结果是否有问题，该小组同学不必做的是（　　） A．观察A同学培养基上长出的菌落是否具有固氮菌的特征 B．其他同学用A同学的土壤样液再做一次同样的实验 C．将A同学得到的菌落接种到新的选择培养基上，观察菌落能否存活 D．其他同学将A同学实验结束后的培养基分离提纯以确定是否含氮 11．“春种一粒粟，秋收万颗子”一粒粟就是种子。下列有关种子的说法，正确的是（　　） A．保存种子最适宜的环境条件是在烘干后低温低氧 B．遮光条件下萌发的种子，有机物种类和总量都在减少 C．单倍体育种过程中通过秋水仙素处理萌发的种子或幼苗 D．未受粉的植物可通过用生长素类似物获得无子果实 12．利用“细胞农业”技术（即通过细胞扩大培养形成产物）已成功培育出“人造咖啡”，其含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质。下列相关叙述，错误的是（　　） A．“人造咖啡”培育过程需用PEG、灭活的病毒诱导原生质体融合 B．“细胞农业”技术培育“人造咖啡”可减少对森林的大面积砍伐 C．“人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养，以增加其产量 D．“人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物 13．苦参是中国传统中药，苦参产生的苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用。科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．过程①和过程②需要适宜的温度和一定的营养条件，一般不需要光照 B．愈伤组织由未分化的一团薄壁细胞组成，能重新分化成芽、根等器官 C．次生代谢物苦参碱不是苦参基本生命活动所必需的，在细胞中含量很少 D．通过植物细胞培养获得苦参碱的过程和获得苦参幼苗的过程均体现了植物细胞的全能性 14．细胞培养肉技术是一种新型食品合成生物技术，其合成过程是首先将肌肉干细胞从肌肉组织中分离出来，随后在体外大规模培养细胞获得肌肉、脂肪等组织，再经食品化加工得到肉类食品。下列说法正确的是（　　） A．宜用胃蛋白酶处理肌肉组织得到分散的肌肉干细胞 B．培养过程中需要定期更换培养液，以防止杂菌污染 C．体外大规模培养细胞时，通常要通入5%的CO2，以刺激细胞呼吸 D．肌肉干细胞具有组织特异性，只能培养获得肌肉、脂肪等组织 15． 植物体细胞杂交技术，可以跨越植物种属间生殖隔离的屏障，培育出新的作物类型。科学家经过长期的探索，也实现了用不同种动物的体细胞进行杂交（如图）。下列叙述错误的是（　　） A．动物细胞融合依赖细胞膜的流动性 B．杂交细胞发育成的个体具有两种生物的特征 C．动物细胞融合特有的诱导方法是灭活病毒诱导法 D．单克隆抗体的制备利用了动物细胞融合技术 16． 生活饮用水中大肠杆菌超标会引起肠道外感染和急性腹泻，严重时会危及生命。某研究小组利用表中的培养基对生活饮用水中的大肠杆菌进行培养和计数，下列叙述正确的是（　　） 成分 蛋白胨 蔗糖 乳糖 K2HPO4 显色剂（伊红—亚甲蓝） 琼脂 含量 10.0g 5.0g 2.0g 2.0g 0.2g 12.0g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL A．该培养基为选择培养基，只允许大肠杆菌生长繁殖 B．配置培养基时，应先进行灭菌后再调节pH值 C．可根据培养基上的紫黑色菌落数推算出大肠杆菌的数量 D．为防止杂菌污染，应向培养基中添加适量抗生素 17．尿素[CO（NH2）2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，会被土壤中的某些好氧微生物分解。为分离土壤中能分解尿素的细菌，操作过程如图，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示。下列叙述错误的是（　　） KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4g 2.1g 0.2g 10g 1g 15g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，调pH为7.2 A．目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的葡萄糖和尿素 B．若接种菌种的培养基pH升高，则说明该菌种能够分解尿素 C．将细菌转到固体培养基上时，应采用稀释涂布平板法接种获得单个菌落 D．为满足目的菌对氧气的需求，应对锥形瓶进行振荡或搅拌 18．下列实践活动包含基因工程技术的是（　　） A．将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株 B．抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦 C．水稻F1花药经培养和染色体数目加倍，获得基因型纯合新品种 D．用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆 19．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，请分析下列操作，正确的有几项（　　） ①培养基、锥形瓶都要进行干热灭菌 ②家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌处理 ③干热灭菌可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ④平板划线时所用的接种环需灼烧灭菌 ⑤家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节，发酵中期乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物生长 A．1 B．2 C．3 D．4 20．培养皿、培养基、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是（　　） ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③⑤②①④⑥ 21．培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。如图是某培养基配方，下列说法错误的是（　　） 组分 用量（克） 纤维素粉 15.0 （NH4）3PO4 1.0 酵母膏（提供生长因子） 1.0 MgSO4·7H2O 0.5 K2HPO4 1.0 琼脂 18.0 H2O 定容至1000mL A．根据配方可知，这是分离分解纤维素微生物的选择培养基 B．培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质 C．可根据平板划线法得到的平板菌落数推测样品中的活菌数 D．操作无误培养基上也可能出现大小、形状、颜色不同的菌落 22．中国科学家利用与克隆“多莉”羊类似的核移植方法，结合表观遗传学修饰技术，促进体细胞核重新编程，从而成功培育出两只体细胞克隆猕猴“中中”和“华华”，这意味着可以产生遗传背景上相同的大批猕猴群来研究人类疾病与健康。下列叙述正确的是（　　） A．体细胞克隆猕猴的遗传物质与核供体相同 B．克隆猕猴利用了体外受精、细胞培养、胚胎移植技术 C．表观遗传学修饰的作用是促进体细胞核基因的表达 D．克隆猕猴的遗传背景相同，可以提高实验研究的可信度 23．科研人员分离了天山雪莲（2n = 32）和莴苣（2n = 18）的原生质体并将其融合，为天山雪莲新种选育奠定了基础，培育过程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．过程②可以用PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法等 B．过程④诱导形成愈伤组织期间一般不需要光照 C．经过程②得到的c细胞只有1种类型，因此不需要筛选 D．最后得到的试管苗体细胞中含有25条染色体 24．“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（　　） A．胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选 B．制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生多种抗体的杂交瘤细胞 C．培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选 D．发酵生产中，性状优良的菌种可以从自然界中筛选 25．6-苄基腺嘌呤（6-BA）是一种植物生长调节剂。某小组研究了不同浓度的6-BA对三种油茶花粉萌发的影响，结果如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A．6-BA诱导油茶C花粉萌发的最适浓度为5mg/L B．该实验的自变量是不同浓度的6-BA，因变量是花粉的萌发率 C．6-BA对油茶B花粉萌发表现出低浓度促进、高浓度抑制作用 D．与对照组相比，实验中最佳诱导浓度下花粉萌发率增加倍数最大的是油茶A 二、非选择题 26．如图为某同学设计的酿制苹果醋的基本流程图和发酵装置示意图。回答下列问题： 　 （1）过程①需要先清洗后切块，以减少　 　。 （2）过程③发酵所需的微生物是　 　，产生的酒精可以与　 　(试剂)发生显色反应。 （3）过程④在变酸的酒的表面，观察到的菌膜是　 　在液面大量繁殖而形成的。若要对该菌进行初步分离纯化，比较便捷的操作是：采用　 　法(填“平板划线”或“稀释涂布平板”)将其接种到固体培养基上，经培养得到肉眼可见的菌落。 （4）在发酵装置示意图中，过程④需要将装置中的充气口开关　 　。果醋的制作是否成功，除了观察菌膜的形成、嗅味和品尝进行初步鉴定，还可以通过检测和比较醋酸发酵前后的　 　作进一步鉴定。 27．在公共场合佩戴口罩已经成为一种习惯，而大量已使用的口罩成为了新型污染，为保护地球环境，提倡使用可降解口罩。我国科学家设计合成以聚酯纤维为材料的可降解口罩。科学家对制造的全生物降解口罩的降解性能进行了评价，该口罩储存稳定，在普通环境下不会发生降解或性能下降，只有在堆肥的土壤中才会进行降解。 （1）现欲提取可降解口罩的微生物应该到　 　中去寻找。 （2）纯化该微生物的培养基从物理性质来说属于　 　培养基。 （3）稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，它的计数原理是　 　。为什么用稀释涂布平板法统计的菌落数比活菌数偏低？　 　。 （4）在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取　 　时的记录作为结果，以防止因　 　而导致遗漏菌落的数目。 （5）某同学在107稀释倍数下涂布了一个平板，统计得到菌落数为190。该数据是否具有说服力？并说明原因。　 　。 28．现代科技的发展加快了作物育种的进程，利用高新技术可以培育出以前不可能培育出来的杂交作物新品种。下图示意植物体细胞杂交过程，请据图回答： （1）植物体细胞杂交技术依据的原理是　 　和　 　。 （2）植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用　 　（填两种酶）分解植物细胞的细胞壁。 （3）②过程的发生，必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的化学方法一般是用　 　作为诱导剂诱导细胞融合。 （4）④⑤过程为　 　和　 　的过程。可通过控制培养基中　 　（填两种激素名称）的含量与比例影响⑤过程的结果。 （5）植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是　 　。 29． 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（即免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性抗体的部分过程；图2是某双特异性抗体的作用示意图。请分析回答下列问题： （1）图1中过程①需多次注射癌胚抗原，目的是　 　。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是　 　，过程②选用的骨髓瘤细胞　 　（填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 （2）如图1所示，杂交瘤杂交法是将单克隆杂交瘤和经长春碱免疫后的B淋巴进行融合，目的是获得　 　的抗体。 （3）体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为　 　、　 　等因素而导致分裂受阻，需进行传代培养。 （4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是　 　。 30．新冠疫情过后很多人养成了佩戴口罩的习惯，这是预防病原体感染的有效措施之一。使用过的口罩，如果没有妥善处理会对生态环境造成巨大威胁。某科研团队欲从不同环境的土壤中筛选出能高效降解一次性口罩（主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维）的细菌。请据下图回答下列问题： （1）该科研团队分离纯化目的菌时，培养基除以　 　作为唯一碳源外，还需加入的营养成分有　 　。 （2）若需进一步对土样中的细菌计数，可以通过上图2中采用的方法　 　，该方法的原理是　 　。在图2中3个平板上分别滴加0.1mL稀释液，经适当培养后，平板上菌落数分别是102、116和97，则1g土壤中的活菌数约为　 　个。 （3）该科研团队又采用平板划线法进一步纯化降解菌，接种培养一段时间后，发现第一划线区不间断长满菌落，第二划线区上几乎无菌落，产生此种情况的最可能原因是　 　。 答案解析部分 1．【答案】B 2．【答案】A 3．【答案】B 【解析】【解答】A、传统发酵过程中使用的菌种主要是天然菌种，这些菌种的差异以及发酵过程中可能存在的杂菌，导致发酵产品的品质存在一定的不稳定性，往往造成传统发酵食物品质不一，A不符合题意； B、筛选酵母菌菌种时，可在培养基中加入一定量的青霉素来抑制细菌的生长，青霉素是一种抗生素，可以抑制细菌细胞壁的形成，从而抑制其生长，防止细菌的干扰，B符合题意； C、稀释涂布平板法计算获得的菌落数往往少于实际活菌数，原因是当两个或多个细胞连在一起时，观察到的只是一个菌落；而细菌计数板统计法获得的菌落数可能会大于实际活菌数，原因是细菌计数板统计出的菌体数目是活菌和死菌的数目之和，C不符合题意； D、灼烧接种环的目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，确保下一次划线时接种环上的菌种来自本次划线，并且，最开始划线前也需要对接种环进行灼烧，因此，灼烧5次，操作员实际划线次数可能只有4次，D不符合题意。 故答案为：B。 【分析】（1）传统发酵技术一般选用天然菌种，由于菌种不单一，所以产品品质不稳定。 （2）微生物接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法两种。 4．【答案】A 5．【答案】D 6．【答案】A 7．【答案】C 【解析】【解答】A、在自然界中寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。按海水的成分和浓度添加相应的无机盐配制的培养基具有选择作用，目的是选择海洋微生物，A不符合题意； B、分离和纯化最常用固体培养基，固体培养基上接种的方法通常是平板划线法和稀释涂布平板法，即用接种环在培养基表面对样品连续划线、逐步稀释，可得到海洋微生物的单菌落，B不符合题意； C、获得代谢产物需要借助液体培养基，即用液体培养基培养微生物，可从培养液汇总获得次级代谢产物，用于抗真菌活性检测，C符合题意； D、利用基因工程的手段可以定向改造生物获得符合人类需要的产品，故获得目的微生物后，可进一步利用基因工程方法调节代谢途径提高生产量，D不符合题意。 故答案为：C。 【分析】（1）在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 （2）从混杂的微生物中分离微生物的一般步骤是：称量取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株，整个实验过程要保证无菌操作。 8．【答案】A 【解析】【解答】A、腐乳制作过程中用到了曲霉、酵母菌和毛霉等微生物，其中毛霉是制作腐乳过程中的主要微生物，是霉菌。其为真菌，属于真核生物，不是细菌。A符合题意； B、果酒制作是在无氧条件下，利用酵母菌的无氧呼吸实现的，酵母菌是真菌，为真核生物，B不符合题意； C、果醋制作利用醋酸杆菌进行发酵，醋酸杆菌是一种细菌，其为原核生物，C不符合题意； D、制泡菜利用的微生物是乳酸菌，其为原核生物，属于细菌，D不符合题意。 故答案为：A。 【分析】（1）果酒制作的原理：在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 （2）果醋制作的原理：当氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 （3）腐乳是好氧发酵，主要用的是毛霉，是霉菌。它是利用毛霉产生的蛋白酶分解豆制品中的蛋白质，使不易消化吸收的大分子蛋白质分解为易于吸收的多肽，并产生多种风味物质。 （4）泡菜是厌氧发酵，主要用的是乳酸菌，是细菌。它是利用乳酸菌在厌氧条件下产生乳酸，使蔬菜产生酸味，同时产生多种风味物质。 9．【答案】C 10．【答案】D 【解析】【解答】A、通过观察A同学培养基上长出的菌落比较，确定是否为固氮菌，故A正确； B、其他同学用A同学的土壤液进行再次实验，重复多次试验，减少偶然性，使更有说服力，故B正确； C、将A同学得到的菌落接种到新的选择培养基上，查看是否成活，确定得到的菌落是否为固氮菌，故C正确； D、无论A同学得到的菌落是否是目标菌落，分离提纯后都有氮，所以不能用分离提纯确定是否有氮，故D错误； 故答案为：D。 【分析】稀释涂布平板法：将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液涂布到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞；统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是，由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2～3或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果准确度往往偏低。不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。 11．【答案】D 【解析】【解答】A 、烘干会导致种子失去活性而死亡，保存种子最适宜的环境条件并不是低温、低氧、干燥，A错误； B、遮光条件下萌发的种子不进行光合作用，会进行细胞呼吸消耗有机物的总量，增加有机物的种类，B错误； C、因为单倍体往往高度不育、难以形成种子，单倍体育种过程中不会通过秋水仙素处理种子，只会通过秋水仙素处理单倍体幼苗，C错误； D、受粉的植物可通过用生长素类似物刺激子房发育获得无子果实，D正确。 故答案为：D。 【分析】种子萌发的条件： 12．【答案】A 13．【答案】D 14．【答案】D 15．【答案】B 【解析】【解答】A、动物细胞融合的原理是细胞膜具有流动性和细胞增殖；植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜具有流动性和植物细胞一般具有全能性。故动物细胞融合和植物体细胞杂交依赖细胞膜的流动性实现，A不符合题意； B、图中的杂交细胞是动物体细胞融合获得的，该杂种细胞不能发育成新个体，B符合题意； C、动物细胞融合和植物体细胞杂交技术中诱导融合的方法不完全相同，动物细胞融合的方法有物理法(电激)、化学法(PEG)和生物法(灭活病毒)，而植物体细胞杂交中诱导融合的方法只有物理法和化学法，即动物细胞融合特有的诱导方法是灭活病毒诱导法，C不符合题意； D、单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和B细胞形成的杂交瘤细胞产生的，获得的杂交瘤细胞既具有B细胞能产生抗体的特征，也具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点，故单克隆抗体的制备利用了动物细胞融合技术，D不符合题意。 故答案为：B。 【分析】（1）植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 （2）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 16．【答案】C 【解析】【解答】A、该培养基中含伊红-亚甲蓝显色剂，根据用途划分该培养基属于鉴别培养基，A错误； B、在配制培养基时应先调节pH值，再灭菌后倒平板，B错误； C、在该培养基上生长的大肠杆菌，其菌落颜色为具有金属光泽的紫黑色，可以根据培养基上的紫黑色菌落数计算出大肠杆菌的数量，C正确； D、不可以在培养基中添加抗生素，以免影响大肠杆菌的生长，D错误。 故答案为：C。 【分析】选择性培养基是指根据某种（类）微生物特殊的营养要求或对某些特殊化学、物理因素的抗性而设计的，能选择性区分这种（类）微生物的培养基。利用选择性培养基，可以使混合菌群中的某种（类）微生物变成优势种群，从而提高该种（类）微生物的筛选效率。 选择性培养基的种类有很多，常见的弱选择性培养基有EMB、中国蓝、MAC、SMAC等；强选择性培养基包括SS、CCFA、GC、BCYEα、SDA、改良L-J、choc-V、BHI-V、CIN（耶尔森菌）、庆大琼脂、TCBs、PLET（炭疽芽孢杆菌）、庆大霉素血琼脂等；选择性增菌培养基则包括碱性蛋白胨水、高盐肉汤等。 制备选择性培养基的方法主要有两种： 1. 投毒法：在选择性培养基中加入非目的菌生长的抑制剂，而待选细菌对抑制剂有抗性，能正常生长。常用的抑制剂包括染料、胆汁酸盐、金属盐类、酸、碱和抗生素等。 2. 投其所好法：提供待选细菌专门需要的某种碳源或氮源等营养源，或特殊的温度、氧气、pH、盐度等环境条件，从而富集和筛选出目的细菌。 选择性培养基在多个领域都有重要的应用。在食品科学中，它可以用于筛查食物样品中的致病菌或食源性病原菌；在临床医学中，它被广泛用于快速、准确地检测致病菌；在环境科学中，它可以用于筛查水样、土壤样本中的一些特定细菌或真菌；在微生物学研究中，它则被用于分离、培养和鉴定特定细菌群落。 17．【答案】A 18．【答案】A 19．【答案】B 20．【答案】D 21．【答案】C 22．【答案】D 【解析】【解答】A、克隆猕猴的细胞核遗传物质与受体细胞相同，但是部分细胞质基因来自于去掉细胞核的卵母细胞，所以不完全相同，故A错误； B、克隆猕猴培育过程中运用了细胞核移植技术，胚胎培养，胚胎移植等技术，没有用体外受精，故B错误； C、表观遗传会促进和抑制体细胞基因的表达，故C错误； D、成功培育出两只体细胞克隆猕猴“中中”和“华华”，证明克隆猕猴的遗传背景相同，可以提高实验研究的可信度，故D错误； 故答案为：D。 【分析】1、细胞核移植技术：就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使后者不经过有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体，使得核供体的基因得到完全复制。以供体核的来源不同可分为胚细胞核移植与体细胞核移植两种。细胞核移植，就是将一个细胞核用显微注射的方法放进另一个细胞里去。前者为供体，可以是胚胎的干细胞核，也可以是体细胞的核。 2、胚胎移植：生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。可以充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。大大缩短了供体本身的繁殖周期，增加了供体一生繁殖后代的数量。 23．【答案】B 24．【答案】B 【解析】【解答】A、胚胎移植前，对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选是很有必要的，这样可以选择发育良好、质量较高的胚胎进行移植，提高移植成功率，A不符合题意； B、制备单克隆抗体时，需要从分子水平筛选能产生特定抗体（而不是多种抗体）的杂交瘤细胞，因为最终目的是获得单一特异性抗体，B符合题意； C、培育转基因抗虫棉时，在分子水平要筛选出含有目的基因且能正确表达的受体细胞，在个体水平要筛选出具有抗虫特性的棉花植株，C不符合题意； D、发酵生产中，自然界存在着各种各样的微生物，可从中筛选出性状优良的菌种，如能高效产生某种产物的菌种等，D不符合题意。 故答案为：B。 【分析】（1）胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 （2）制备单克隆抗体的流程主要有：抗原准备及动物免疫、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选、杂交瘤细胞的增殖及抗体提取等。 （3）培育转基因抗虫棉主要需要四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 （4）在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 25．【答案】D 26．【答案】（1）杂菌的污染 （2）酵母菌；酸性重铬酸钾 （3）醋酸菌；平板划线 （4）开启；pH 27．【答案】（1）堆肥的土壤 （2）固体 （3）稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌；两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 （4）菌落数目稳定；因培养时间不足 （5）否，没有重复实验 【解析】【解答】（1）现欲提取可降解口罩的微生物，应该在含有口罩的土壤中寻找，根据题干信息可知口罩储存稳定，在普通环境下不会发生降解或性能下降，只有在堆肥的土壤中才会进行降解。故填：堆肥的土壤。 （2）纯化该微生物的培养基从物理性质来说属于固体培养基。故填：固体。 （3）稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，它的计数原理是稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，若两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。故填：稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌；两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。（意思相近即可） （4）在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。故填：菌落数目稳定；因培养时间不足。 （5）某同学在107稀释倍数下涂布了一个平板，统计得到菌落数为190，没有进行多次重复实验，缺乏普遍性没有说服力。故填：否，没有重复实验。 【分析】（1）平板划线分离法 由接种环以菌作沾取少待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。一般多用于从菌株的纯化，简便快速，可以观察菌落特征，不能用于计数。 （2）稀释涂布平板法 先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 1：10、1：100 、1：1000、1：10000 …)，然后分别取不同稀释液少，与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保培养一定时间即可出出菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散。一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。 28．【答案】细胞膜的流动性；植物细胞的全能性；纤维素酶、果胶酶；聚乙二醇；脱分化；再分化；生长素、细胞分裂素；可克服远缘杂交不亲的障碍 29．【答案】（1）刺激小鼠产生更多的能产生特定抗体的B淋巴细胞；灭活的病毒诱导；不能 （2）既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合 （3）营养物质缺乏；有害代谢物积累 （4）双特异性单克隆抗体能特异性结合肿瘤细胞，实现长春碱对肿瘤细胞的选择性杀伤 【解析】【解答】（1）图1中过程①步骤多次注射癌胚抗原，目的是让小鼠体内发生多次免疫反应，以产生更多的已免疫的B淋巴细胞。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同。诱导植物体细胞杂交的方法有两大类：物理法和化学法。而诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法。小鼠B淋巴细胞在HAT培养基上可正常存活，但不能繁殖，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞具有骨髓瘤细胞无限增殖的特点，并具有B淋巴细胞能在HAT培养基上正常生存活的特点。 故答案为：刺激小鼠产生更多的能产生特定抗体的B淋巴细胞 灭活的病毒诱导 不能 （2）将单克隆杂交瘤和经长春碱免疫后的B淋巴进行融合，目的是获得既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合的抗体。 故答案为：既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合 （3）体外培养单克隆杂交瘤细胞时，到一定阶段会由于营养物质缺乏、有害代谢物的积累等因素而导致分裂受阻，需进行传代培养。 故答案为：营养物质缺乏 有害代谢物积累 （4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原 因是双特异性单克隆抗体能特异性结合肿瘤细胞膜表面抗原，将长春碱靶向运输至肿瘤细胞所在位置，在原位杀死肿瘤细胞，不对其他正常细胞造成损伤。 故答案为：双特异性单克隆抗体能特异性结合肿瘤细胞，实现长春碱对肿瘤细胞的选择性杀伤 【分析】制备单克隆抗体的流程大致为：先给小鼠注射特定抗原以获得已免疫的B淋巴细胞。然后诱导以免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；再把杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，以得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终获得所需单克隆抗体。 30．【答案】（1）聚丙烯纤维；氮源、水和无机盐 （2）稀释涂布平板法；当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌；1.05×109 （3）第一次划线后接种环灼烧后没有冷却，高温杀死了菌种 【解析】【解答】（1）本实验的目的是从不同环境的土壤中筛选出能高效降解一次性口罩（主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维）的细菌，所以在配制培养基时，需要以聚丙烯纤维作为唯一碳源，培养基中的一般成分除了碳源外，还包括氮源、水和无机盐。 （2）若要对细菌进行计数，一般采用的接种方式是稀释涂布平板法，该方法的原理是当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌；由图2可知，接种的菌液稀释倍数为106，所以1g土壤中的活菌数约为（102+116+97）÷3÷0.1×106＝1.05×109个。 （3）在利用平板划线法进行接种时，每一次划完平板，都需要灼烧灭菌，且需要冷却后进行下一次划线，保证下一次划线得到的菌来自于上一次划线的末端，所以若发现第一划线区不间断长满菌落，第二划线区上几乎无菌落，产生此种情况的最可能原因是第一次划线后接种环灼烧后没有冷却，高温杀死了菌种。 【分析】1、培养基中一般都含有碳源、氮源、水和无机盐，除此之外，培养基还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。例如在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时需要将培养机调至酸性；在培养细菌时需要将培养基调至中性或弱碱性，在培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件等。 2、微生物的分离纯化一般可用平板划线法或稀释涂布平板法，其中平板划线法不能用于微生物的计数，而稀释涂布平板法可用于微生物的计数。 3、1mL中的微生物个体数＝某稀释倍数下培养基的菌落平均值÷涂布于培养基的菌液体积×稀释倍数。 4、平板划线法注意事项 ①在利用平板划线法进行接种时，每一次划完平板，都需要灼烧灭菌，且需要冷却后进行下一次划线，保证下一次划线得到的菌来自于上一次划线的末端，注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连，否则无法得到单菌落实验失败。 ②接种完成后，需要将平板倒置，放入培养箱中培养，倒置的目的是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基中造成污染。 第 1 页 共 19 页 学科网（北京）股份有限公司 $$