贵州省毕节市第一中学2024-2025学年高二下学期4月月考生物试卷

毕节市第一中学2025学年高二下学期4月月考生物试卷 一、单选题 1．关于图中DNA分子片段的说法，正确的是（　　） A．限制性内切酶作用于③部位，DNA连接酶作用于①部位 B．②处的碱基对缺失、替换或增添，则导致基因突变 C．该DNA的特异性表现在碱基种类和（A+C）/（T+G）的比例上 D．把此DNA放在引物含15N标记的PCR仪扩增2代，子代DNA全含15N 2．植物生物反应器主要以整株植物、植物组织或植物悬浮细胞为加工场所，生产药物蛋白。叶绿体遗传转化体系是近年发展起来的一种新的植物生物反应器，是以叶绿体为外源 DNA受体的安全性极高的一种转化方式。下列叙述不正确的是（　　） A．构建叶绿体遗传转化体系时，需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶 B．构建的基因表达载体中含有叶绿体特异启动子，使得目的基因只能在叶绿体中表达 C．植物叶绿体表达体系可以防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散 D．把目的基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中一定含有此目的基因 3． 驱蚊草散发的气味可驱除一定范围内的蚊子，驱蚊草是由天竺葵体细胞和香茅草体细胞杂交得到的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（　　） A．培育方法属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍 B．培育过程中要用纤维素酶、果胶酶、PEG、高—高pH试剂等 C．培育手段是植物体细胞杂交，它不同于植物组织培养，无愈伤组织和试管苗的形成 D．驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草的有性杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离 4．重构胚是指人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力。(　　) 5．英国科学家维尔穆特首次用羊的体细胞（乳腺细胞）成功地培育出一只小母羊，取名“多利”，这一方法被称之为“克隆”，以下四项中与此方法在本质上最相近的是（　　） A．将兔的早期胚胎分割后，分别植入两只母兔子宫内，并最终发育成两只一样的兔子 B．将人抗病毒基因嫁接到烟草DNA分子上，培育出具有抗病毒能力的烟草新品种 C．将鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合成杂交瘤细胞 D．将人的精子与卵细胞在体外受精，待受精卵在试管内发育到囊胚期时，再植入女性子宫内发育成“试管婴儿” 6．将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞，可以提高玉米中的赖氨酸含量；更换赖氨酸形成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，使两种酶的活性提高，也可以提高玉米中的赖氨酸含量。以上两种技术分别属于(　　) A．基因工程、基因工程 B．蛋白质工程、蛋白质工程 C．基因工程、蛋白质工程 D．蛋白质工程、基因工程 7．下列对蛋白质的改造，操作正确的是（　　） A．直接改造蛋白质的空间结构 B．对相应的基因进行改造 C．直接对氨基酸序列进行改造 D．直接改造相应的mRNA 8．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（　　） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物细胞培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 9．紫杉醇是一种高效抗癌的药物。国内某团队研究光照条件对红豆杉愈伤组织生长和紫杉醇含量的影响，实验结果如下表： 光照条件 接种干重/(g·L－1) 收获干重/(g·L－l) 紫杉醇含量/%(干重) 光照 4.33 9.13 0.007 0 黑暗 4.38 12.10 0.016 4 下列叙述正确的是(　　) A．愈伤组织生长的原理是植物细胞具有全能性 B．愈伤组织培养过程要在无菌条件下进行 C．光照能促进愈伤组织的生长并提高紫杉醇含量 D．培养基中的有机物仅能为愈伤组织提供能量 10．植物组织培养利用了植物细胞全能性的原理，可利用灭活的病毒诱导原生质体融合。(　　) 11．羊奶的脂肪颗粒体积为牛奶的三分之一，更利于人体吸收，其维生素及微量元素含量明显高于牛奶。欲利用胚胎工程技术加快高产奶的萨能山羊的繁殖，下列说法正确的是（　　） A．在桑葚胚阶段，胚胎内部开始出现有液体的腔 B．卵裂期的细胞数量增加，但细胞的体积和细胞内有机物的种类会减少 C．胚胎发育阶段中，在桑葚胚以前，每个细胞都属于全能干细胞 D．生产上可选用原肠胚细胞进行性别鉴定 12． 土壤盐渍化是目前制约农业生产的全球性问题，我国科学家用普通小麦（2N=42）与耐盐偃麦草（2N=70）体细胞杂交获得耐盐新品种“山融3号”，培育过程如下图所示，序号代表过程或结构。下列分析正确的是（　　） A．“山融3号”与普通小麦为同一物种 B．①和“山融3号”体细胞均含有两个染色体组，每个染色体组含56条染色体 C．由愈伤组织到②适当提高培养基中生长素/细胞分裂素的比例有利于促进芽的形成 D．偃麦草出现耐盐性状是由于变异导致的，土地盐渍化只是起到选择作用 13．珠江口海域受聚乙烯微塑料污染严重，研究发现，某些细菌能分泌聚乙烯降解酶，这些酶可分解聚乙烯长链为小分子物质，为筛选高效降解菌，研究人员从红树林沉积物中分离细菌并进行如下实验：红树林沉积物→富集培养（以聚乙烯为唯一碳源）→梯度稀释→涂布接种→筛选透明圈大的菌落→酶活性测定。下列关于该实验的叙述，正确的是（　　） A．富集培养前需对沉积物样品进行彻底灭菌，避免杂菌干扰 B．选择培养基中需添加琼脂和聚乙烯，并加入刚果红染料便于观察 C．应选择透明圈直径与菌落直径比值最大的菌落进行扩大培养 D．酶活性测定时需设置以葡萄糖为碳源的对照组 14．目前研究混杂DNA群体中的特异性DNA序列，一般采用两种不同的方法，即DNA克隆和DNA分子杂交，方法如图所示。下列有关叙述不正确的是（　　） A．方法①需要用到限制酶和DNA连接酶 B．方法②即PCR技术，需要用到解旋酶和DNA聚合酶 C．方法③需要用到被标记的DNA探针 D．方法①②③都遵循碱基互补配对原则 15．动物细胞培养是动物克隆的基础，如下图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③分别表示其结果，请据图回答，下列说法正确的是（　　） A．a如果是核移植技术，则①体现了动物细胞的全能性 B．b如果是体外受精技术，②的产生属于有性生殖，该技术为良种家畜快速大量繁殖提供了可能 C．c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表型一定相同 D．①②③中的受体(代孕母体)均需经过一定的激素处理，以达到超数排卵和同期发情的目的 16．多个高中生物学实验中都用到了酒精，下表是对几个相关实验的部分总结，正确的有（　　） 实验名称 试剂 原理 观察 名称 作用 检测生物组织中的脂肪（颗粒） 50%的酒精 洗去浮色 酒精能溶解苏丹Ⅲ染液、绿叶中的色素等 ④都需要借助显微镜观察 提取绿叶中的色素 ①95%酒精+无水碳酸钠 提取叶绿体中色素 土壤中小动物类群丰言度的研究 70%的酒精 ②及时固定收集的小动物，防止腐烂 酒精能杀死小动物和微生物 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 ③100%的酒精 解离 杀死细胞，分解胞间层物质 A．①② B．①③ C．①②④ D．③④ 17．波尔山羊具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述正确的是（　　） A．生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 B．选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 C．卵裂期细胞数目增多，体积变小，有机物含量和种类不断减少 D．胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割 18．胚胎工程技术挖掘了动物的繁殖潜力，为优良牲畜的大量繁殖提供了有效方法。下列有关胚胎工程的叙述，错误的是（　　） A．胚胎工程可用于稀有动物的种族延续和培育生物制药的反应器 B．人工受精需要对精子进行获能处理但不需要对卵母细胞进行培养 C．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液都需要加入血清或血浆 D．同期发情处理使受体和供体生理状态相同利于移植胚胎继续发育 19． 某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关说法错误的（　　） a酶切割产物(bp) b酶再次切割产物(bp) 2100： 1400： 1000： 500 1900： 200： 800： 600： 1000： 500 A．限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的 B．a酶与b酶切割后形成的黏性末端不相同 C．a酶与b酶切断的化学键都是磷酸二酯键 D．在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个 20．根据实验目的，下列实验的对照设置不合理的是（　　） 　 实验目的 对照设置 A 使用稀释涂布平板法计数酵母菌 不接种酵母菌的灭菌平板 B 探究淀粉酶是否具有专一性 在淀粉溶液中加入适量的蔗糖酶 C 粗提取DNA的鉴定 将二苯胺试剂加入2mol/LNaCl溶液中，沸水浴加热 D 观察洋葱鳞片叶外表皮细胞的质壁分离 滴加蔗糖溶液前观察中央液泡的大小，以及原生质层的位置 A．A B．B C．C D．D 21．马铃薯在进行无性繁殖过程中，感染的病毒会在体内逐年积累，导致产量降低、品质变差。培育高品质马铃薯的流程如下：接种马铃薯幼嫩的茎段→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。下列相关叙述正确的是（　　） A．该过程的原理是植物细胞核的全能性 B．生芽、生根过程中细胞内基因存在选择性表达 C．幼嫩茎段接种前用95%的酒精和次氯酸钠进行消毒处理 D．利用诱变因素处理愈伤组织细胞使其发生基因重组，从而获得新类型个体 22．珠江三角洲地区在明清时期就探索出一种桑基鱼塘的农业生产模式：陆基种桑、桑叶饲蚕、蚕沙喂鱼、塘泥培桑，使陆地植物和鱼塘养殖结合起来，形成有机整体。下列叙述错误的是（　　） A．桑基鱼塘的建设体现了生态工程的循环、整体等原理 B．流入该生态系统的能量部分来自桑树固定的太阳能 C．碳元素在桑树、蚕和鱼之间的循环主要以的形式进行 D．桑基鱼塘生态系统为人类提供鱼类，体现了生态多样性的直接价值 23．宁夏渝河一度因生活污水、工业废水随意排放导致水质恶化，生态系统功能失调成为制约当地农业可持续发展的重要因素。通过综合养殖、发展生态农业等途径对渝河流域的生态进行治理和恢复，物种多样性逐渐增加。以下叙述错误的是（　　） A．该生态系统可利用的能量包括太阳能和排放的工业废水、生活污水中的化学能 B．该举措恢复环境的同时提高了经济效益，体现了生态工程的整体原理 C．随治理的进行，生态系统功能逐步恢复，体现了生物多样性的直接价值 D．生态治理和恢复过程中，栽种的杨、柳等植物一般都是当地原有物种 24．下列关于植物组织培养和植物体细胞杂交的叙述，正确的是（　　） A．用纤维素酶和蛋白酶处理植物细胞可以获得原生质体 B．同一绿色开花植物不同部位的细胞经培养可获得基因不同的愈伤组织 C．再分化过程中，细胞的结构和遗传物质发生了稳定性差异 D．利用人工种子繁育后代属于有性生殖，后代一定可育 25．下列关于如图模型的分析，错误的是（　　） A．若模型表示食物网，则D可能是次级消费者、第二营养级 B．若模型表示物种形成，则A可以是可遗传变异，D可以是生殖隔离 C．若模型表示试管婴儿技术，则C→D过程中包括早期胚胎培养 D．若模型表示核移植技术，则B可能是具有优良性状的供体细胞 二、非选择题 26．条件性基因敲除小鼠：为构建肝特异性CD36基因敲除小鼠模型，研究人员利用Cre-loxP系统开展实验。 【实验原理】 如图1所示，该系统中的Cre可识别DNA分子中特定的loxP序列，当DNA分子上存在两个同向loxP序列时，Cre可将两个loxP序列之间的DNA序列剪除，切口连接形成的环化产物被降解，从而达到敲除特定基因的目的。 （1）Cre的作用类似于基因工程中的________，DNA切口环化连接的过程需要________。（编号选填） ①质粒 ②DNA连接酶 ③DNA聚合酶 ④限制性内切核酸酶 【实验过程】 图2显示两类工具鼠，区别于未经人工改造的野生型小鼠，其中A鼠成对的CD36基因两侧均分别引入一个同向loxP序列（基因型表示为L+L+，野生型为L-L-），B鼠中含一个外源导入的Cre编码序列（基因型表示为C +C -，野生型为C -C -），Alb表示肝脏组织特异性启动子。研究人员利用A、B两类工具鼠作为亲本，选用合适的杂交策略，即可获得基于Cre-loxP系统的肝特异性CD36基因敲除目标小鼠。 （2）目标小鼠的基因型应为______。（单选） A. L+L+C +C - B. L+L+C -C - C. L-L-C+C+ D. L+L-C+C - （3）选择合适的杂交策略，目标小鼠最早可出现在______。（单选） A. 子一代 B. 子二代 C. 子三代 D. 子四代 （4）杂交产生目标小鼠过程中，基因L+/L-、C+/C -发生的行为包括______。（多选） A. 突变 B. 重组 C. 分离 D. 复制 【实验结果】 研究人员取鼠尾细胞通过琼脂糖凝胶电泳鉴定子代1~8号小鼠的基因型，结果如图3。并对鉴定出的目标小鼠不同组织中CD36蛋白相对表达量进行了检测，结果如图4。 （5）已知A鼠、B鼠的基因型检测结果分别与图3中子代6号、1号小鼠相同，则图3中代表目标小鼠的是________号。 （6）为检验目标小鼠体内CD36基因的敲除效果，图4中对照小鼠应选择________（野生型小鼠/A鼠/B鼠）。 （7）下列①~④表示对小鼠不同组织细胞基因检测的结果，+表示存在，-表示缺失，其中符合目标小鼠情况的是________。（编号选填） 编号 细胞类型 Cre编码序列 CD36基因 ① 肝脏细胞 + - ② 肾脏细胞 + + ③ 脂肪细胞 + - ④ 心肌细胞 - + （8）据题意和图4，描述Cre-loxP系统在目标小鼠体内发挥作用的机制________。 27．2023年8月24日，日本政府启动核污水排海。据悉，日本福岛核污水中含有60多种放射性核素（如：氚、碳-14、碘-129等）、重金属、有机物等，核素排海后将对我国渔业经济和沿海居民生活产生影响。回答下列问题。 （1）碳-14可参与生态系统的碳循环过程，其形成的CO2可通过光合作用和　 　作用进入生物群落。海洋生物能从周围环境吸收、积蓄碳-14等核素，从而出现生物富集现象。由于生物富集现象具有　 　性，所以日本核污水排海后将会对我国渔业经济和沿海居民生活产生一定影响。 （2）流入被污染的海洋生态系统中的总能量为　 　。鱼类同化的能量除了用于自身生长发育繁殖外，还会通过　 　散失。离排污口较近的海洋区域溶解氧较低，原因是藻类等植物数量减少，　 　。 （3）海洋生态系统受到污染后可通过自我调节来达到生态平衡，处于生态平衡的生态系统具有结构平衡、功能平衡和　 　三大特征。生态系统自我调节能力的基础是负反馈调节，负反馈是指　 　。我国核污水的处理方法之一是选择合适的植物进行合理布设，从而对废水进行修复或降解，这体现出生态工程的　 　原理。 28．如图所示为发酵工程生产产品的流程图，请据图回答下列问题。 （1）若能生产人生长激素的工程菌是通过①培养的，①应该是　 　；若高产青霉素菌种是通过②培育的，②应该是　 　。 （2）根据培养基的用途，可以将它们分为　 　培养基和　 　培养基。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有　 　等营养成分。培养基在使用之前要用　 　进行灭菌。 （3）整个过程的中心阶段是　 　，在该时期要随时取样检测培养基中的　 　等。同时，要严格控制　 　等发酵条件，因为环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物　 　的形成。 （4）发酵产品分离、提纯时要根据产品的类型不同选择合适的方法。如果发酵产品是菌体本身，常常采用　 　等方法分离、提纯。 29． 甲胎蛋白（AFP） 是癌细胞表面的一种特异性糖蛋白，可以用来进行肝癌的早期诊断。现用单克隆抗体技术生产抗AFP单克隆抗体，过程如下图一，请据图回答： （1）制备单克隆抗体过程中要用到的动物细胞工程技术是　 　和　 　，要生产抗AFP单克隆抗体，首先需要向小鼠体内注入　 　作为抗原。 （2）细胞①是　 　，它与骨髓瘤细胞融合时使用的化学试剂是　 　。 （3）细胞融合是随机的，为将需要的杂交瘤细胞筛选出来，利用的选择培养基原理是：细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。淋巴细胞中有两条DNA合成途径，而骨髓瘤细胞中只有D途径，如图二。如果只考虑细胞两两融合，融合的细胞有　 　类。根据上述原理将杂交瘤细胞分离出来，使用的选择培养基里面应加入　 　 （4）制备单克隆抗体需要进行两次筛选，其中第二次筛选的方法为　 　技术。 （5）通过此过程生产的单克隆抗体和氟尿嘧啶结合后制成生物导弹来治疗肝癌，其中能对癌细胞起到杀伤作用的是　 　 30．人乳铁蛋白（hLTF）是一种铁结合的糖蛋白，具有抑菌、提高免疫力等重要功能。研究者通过转基因技术培育能生产hLTF的奶牛，从牛奶中分离提纯hLTF。回答下列问题。 （1）从原核生物中获取的质粒不适用于直接构建真核生物的表达载体，其启动子需要进行替换才有可能在真核细胞中表达，主要原因是　 　。 （2）研究人员采用小鼠乳清酸蛋白基因的启动子和终止子来替换pA质粒中的部分序列，再拼接hLTF基因，最终形成pW2-hLTF重组质粒，过程如下图： 通过PCR扩增小鼠乳清酸蛋白基因的启动子、终止子和hLTF基因时，均需引入限制酶的识别序列和切割位点，以便剪接到质粒的指定位置。据图分析，PCR扩增小鼠乳清酸蛋白基因的启动子所需的两种引物应分别包含　 　、　 　（限制酶）的识别序列。将修饰后的hLTF基因插入到重组质粒的启动子和终止子之间后，不一定能获得所需要的基因表达载体，原因是　 　。 （3）经检测筛选所获得的基因表达载体pW2-hLTF通过　 　的方法导入到奶牛的受精卵细胞中，以获得能产生hLTF的转基因奶牛。 答案解析部分 1．【答案】D 2．【答案】D 3．【答案】C 【解析】【解答】A、培育方法属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确； B、培育过程中要用纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电激、离心等方法，B正确； C、驱蚊草是通过天竺葵体细胞和香茅草体细胞杂交而得到的，在此技术中仍需要利用植物组织培养技术，有愈伤组织和试管苗的形成过程，C错误； D、驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草的有性杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离，D正确。 故答案为：C 【分析】 4．【答案】正确 【解析】【解答】重构胚是通过特定的技术手段人工重新构建的胚胎，它在合适的条件下是具有发育成完整个体的能力的。 故答案为：正确。 【分析】重构胚是指人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力。 5．【答案】A 【解析】【解答】A、胚胎分割技术实质上是动物克隆的一种特殊形式，由于源自同一胚胎的后代个体具有完全一致的遗传组成，这种繁殖方式在遗传学本质上等同于无性繁殖。通过将早期胚胎进行人工分割，可以获得多个基因型完全相同的个体，这一过程体现了动物无性生殖的核心特征，A正确； B、将抗病毒基因整合到烟草DNA分子中的过程属于典型的转基因技术，其本质是通过基因重组实现外源基因的跨物种转移，B错误； C、鼠骨髓瘤细胞与免疫脾细胞通过细胞融合技术形成的杂交瘤细胞，其基因组整合了两种亲本细胞的遗传信息，C错误； D、"试管婴儿"技术是通过体外受精结合胚胎移植实现的生殖辅助手段。该技术的核心环节包括：将精子和卵子在体外人工环境中完成受精过程，随后将形成的早期胚胎移植至母体子宫内继续发育。从生殖方式来看，这一过程本质上仍属于有性生殖范畴，因为其保持了精卵结合的基本特征，与克隆技术（无性生殖）存在根本性区别，D错误。 故选A。 【分析】克隆这一概念最初特指通过营养繁殖方式培育植物的过程，包括扦插、嫁接等利用幼苗或嫩枝进行无性繁殖的技术。在现代生物学中，克隆的定义已扩展为：生物体通过体细胞进行无性繁殖，形成与亲本基因型完全一致的个体或种群。从分子生物学角度而言，克隆特指应用生物技术手段，通过无性生殖方式产生与供体具有完全相同基因组结构的后代个体的过程。 6．【答案】C 【解析】【解答】将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞属于基因工程，富含赖氨酸的蛋白质是自然界中已有的蛋白质，基因工程只是把该蛋白质基因从一种生物转入玉米体内，并使之合成该蛋白质；更换赖氨酸合成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，是对自然界中已有的蛋白质进行改造，属于蛋白质工程。故答案为：C。 【分析】 蛋白质工程和基因工程的关系： 蛋白质工程 基因工程 区别 过程 蛋白质过程基本步骤：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列，基因表达 基因工程基本步骤：获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质 定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品 结果 可产生自然界没有的蛋白质 只能生产自然界已有的蛋白质 联系 （1）蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程（2）基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质进行修饰、改造 7．【答案】B 8．【答案】B 【解析】【解答】A、细胞工程中，利用酶的专一性原理，用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，用胰蛋白酶处理动物组织得到单个细胞，A正确； B、植物组织培养的原理是细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞增殖，B错误； C、利用生物膜的流动性原理，采用诱导技术可以诱导原生质体融合和动物细胞融合，C正确； D、紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养的原理都是细胞增殖（分裂），D正确。 故答案为：B。 【分析】1、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较： 细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合 理论基础 细胞的全能性、细胞膜的流动性 细胞增殖、细胞膜的流动性 融合前处理 酶解法去除细胞壁（纤维素酶、果胶酶） 注射特定抗原，免疫处理正常小鼠 诱导手段 物理法： 离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG） 物理法： 离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG） 生物法：灭活的病毒（灭活的仙台病毒） 诱导过程 第一步：原生质体的制备（酶解法） 第二步：原生质体融合（物、化法） 第三步：杂种细胞的筛选和培养 第四步：杂种植株的诱导与鉴定 正常小鼠免疫处理动物细胞的融合（物、化、生法）杂交瘤细胞的筛选与培养专一抗体检验阳性细胞培养单克隆抗体的提纯 用途和意义 克服远缘杂交的不亲和障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围 应用：克服远缘杂交的不亲和障碍 制备单克隆抗体。诊断、治疗、预防疾病，例如“生物导弹”治疗癌症 2、动物细胞培养： （1）定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，原理细胞增殖。 （2）动物细胞培养过程：取动物组织块→用机械方法或胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 9．【答案】B 【解析】【解答】A、植物组织培养过程中，愈伤组织主要进行细胞生长和分裂，不能体现植物细胞的全能性，A错误； B、愈伤组织培养过程要在无菌条件下进行，以避免微生物的污染，B正确； C、根据题干信息和表格信息分析，该实验研究光照条件对红豆杉愈伤组织生长和紫杉醇含量的影响，自变量是光照的有无，因变量是愈伤组织生长和紫杉醇含量，表格数据显示，两组接种干重相似，但光照条件下收获的愈伤组织干重和紫杉醇含量均低于黑暗条件，C错误； D、植物组织培养过程中，有机物可以为植物细胞提供必需的营养物质和能量，此外还可以调节渗透压，D错误。 故选D。 【分析】1、细胞全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。 2、植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。愈伤组织是高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织，细胞分化程度低，全能性较高。 10．【答案】错误 【解析】【解答】植物组织培养利用植物细胞全能性原理是正确的，但诱导原生质体融合是用聚乙二醇等方法，灭活的病毒是诱导动物细胞融合的方法，不能用于植物原生质体融合。 故答案为：错误。 【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。 11．【答案】C 12．【答案】D 【解析】【解答】A、“山融3号”是有四个染色体组（异源四倍体）， 普通小麦是二倍体，它们之间存在生殖隔离，属于不同物种。A项错误。 B、据题意，①是普通小麦（2N=42)的原生质体和耐盐偃麦草（2N=70)的原生质体融合而成的，有四个染色体组、112条染色体，①是异源四倍体，“山融3号”是融合后的原生质体经植物组织培养得到的，遗传物质不发生改变，其体细胞也含有四个染色体组（异源四倍体），一个染色体组含21或35条染色体。B项错误。 C、由愈伤组织到②幼苗是再分化过程，适当提高培养基中生长素／细胞分裂素的比例，有利于根的形成。C项错误。 D、偃麦草出现耐盐性状是由于变异的原因，土地盐渍化作为环境条件只起选择作用。D项正确。 故答案为：D。 【分析】1、植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成杂种植株的技术； 2、植物体细胞杂交技术：（1）原理：细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。（2）过程：去壁-诱导融合-再生壁-植物组织培养。（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。 13．【答案】C 14．【答案】B 15．【答案】B 【解析】【解答】A、a如果是核移植技术，则①体现了动物细胞核的全能性，A不符合题意； B、b如果是体外受精技术，即涉及了精子与卵细胞的结合，那么②的产生属于有性生殖，使得后代继承了两个亲本的优良性状，即该技术为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，B符合题意； C、c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型一定相同，但表型不一定相同，因为表型由基因型和环境共同控制，C不符合题意； D、①②③都涉及了胚胎移植，需要对受体和供体经过一定的激素处理，以达到同期发情的目的，在胚胎移植之前需要对供、受体的母畜进行同期发情处理和对供体母畜进行超数排卵处理，D不符合题意。 故答案为：B。 【分析】1、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。利用的原理是动物细胞核具有全能性。 2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一。 3、胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术，在胚胎移植之前需要对供、受体的母畜进行同期发情处理和对供体母畜进行超数排卵处理。 16．【答案】A 【解析】【解答】①光合色素能溶解于有机溶剂，用95%酒精+无水碳酸钠提取叶绿体中色素，①正确；②70%酒精能使小动物和微生物因为脱水死亡，及时固定收集的小动物，便于统计，②正确；③解离的目的是使细胞相互分离开，解离液的成分是体积分数95%的酒精和15%的盐酸比例1：1配制而成，③错误；④“土壤中小动物类群丰富度的研究“这个实验都不需要显微镜观察，④错误。A符合题意，B、C、D不符合题意。 故答案为：A 。 【分析】（1）苏丹Ⅲ可以将脂肪染成橘黄色，实验过程中可用体积分数50%的酒精洗去浮色。 （2）在证明光合作用产生淀粉的实验中，用碘液给淀粉染色前，先用75%的酒精进行脱色处理。 （3）在“土壤中小动物类群丰富度的研究“中，用70%酒精能杀死小动物和微生物，防止腐烂。 （4）在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂“中，用体积分数95%的酒精和15%的盐酸制成解离液，可以使细胞分散开。 17．【答案】B 18．【答案】B 19．【答案】B 【解析】【解答】A， 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的 ，A正确； B、a酶与b酶切出的黏性末端相同，用DNA连接酶可以将它们连接起来，B错误； C、限制酶切割的化学键都是磷酸二酯键，C正确； D、a酶可以把原有DNA切成4段，说明a酶的识别序列有3个，b酶把大小是2100的DNA切成大小分别为1900和200两个片段，把大小是1400的DNA切成大小分别为800和600两个片段，说明有2个位点，在该 DNA分子中，a酶和b酶的识别序列分别有3个和2个，D正确。 故答案为：B。 【分析】限制酶切割是基因工程中的重要步骤，它可以将DNA分子切割成特定的片段，以便进行基因重组和克隆。限制酶是一种特殊的酶，能够识别特定的DNA序列，并在特定的位置切割DNA分子。 在进行限制酶切割时，需要注意以下几点： - 选择适当的限制酶：根据目的基因两端的限制酶切割位点和质粒的特点，选择适当的限制酶。应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，但要确保质粒上也有这两种酶的切割位点。 - 控制酶切条件：限制酶的活性受到多种因素的影响，如温度、pH值、离子强度等。在进行限制酶切割时，需要根据不同的限制酶和DNA分子，优化酶切条件，以确保酶切的效率和特异性。 - 避免过度酶切：过度酶切会导致DNA分子的断裂和降解，影响后续的基因重组和克隆。因此，在进行限制酶切割时，需要控制酶切时间和酶的用量，以避免过度酶切。 限制酶切割是一项复杂的技术，需要严格控制酶切条件和避免过度酶切，以确保切割的效率和特异性。同时，需要选择适当的限制酶，并根据目的基因两端的限制酶切割位点和质粒的特点，优化酶切条件，以确保酶切的效率和特异性。 20．【答案】B 21．【答案】B 22．【答案】C 23．【答案】C 24．【答案】B 25．【答案】A 【解析】【解答】A、若模型表示食物网，则D可能是次级消费者、第三营养级，A错误； B、 若模型表示物种形成，则A可以是可遗传变异，D可以是生殖隔离，B正确； C、若模型表示试管婴儿技术，C为早期胚胎培养，D为胚胎移植，C正确； D、若模型表示核移植技术，则A可能为去核卵母细胞，此时B可能是细胞核供体细胞，D正确。 故答案为：A。 【分析】1、新物种的形成过程：隔离是新物种形成的必要条件。 （1）地理隔离 ：①不同种群出现不同的突变和基因重组；②不同种群间不发生基因交流 。 （2）自然选择：①食物和栖息条件互不相同；②自然选择对不同种群基因频率的改变所起的作用不同。 ​​​​​​​（3）生殖隔离：基因库形成明显的差异，并逐步出现生殖隔离，从而形成不同物种 。 2、试管婴儿需要体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植。 3、体细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 26．【答案】(1) ④② (2) A (3) B (4) A，B，C，D (5) 8 (6) A鼠 (7) ①② (8) 目标小鼠体内既含有Cre编码序列，又含有成对的、被同向loxP序列改造过的CD36基因。Cre编码序列可在肝脏组织特异性启动子Alb的调控下，于肝脏组织中特异性表达，产生Cre；Cre可识别CD36基因两侧的同向loxP序列，将两个loxP序列之间的CD36基因序列剪除。因此造成目标小鼠仅肝脏组织中CD36基因表达量下降 27．【答案】（1）化能合成；全球 （2）生产者固定的总能量及污水中的化学能；呼吸作用以热能的形式；植物通过光合作用产生并释放的氧气量也减少 （3）收支平衡；在一个系统中，系统工作的效果，反过来又作为信息调节该系统的工作，并且使系统工作的效果减弱或受到限制；自生 28．【答案】（1）基因工程；诱变育种 （2）选择；鉴别；碳源、氮源、水、无机盐；高压蒸汽灭菌法 （3）发酵过程；微生物数量、产物浓度；溶氧量、pH和温度；代谢物 （4）过滤、沉淀 【解析】【解答】（1）工程菌自身原本不能合成人生长激素，若其能生产人生长激素，说明该工程菌被导入了人生长激素基因，所以①应该是基因工程。工程菌若能高产青霉素，则说明该工程发生诱变，表现出了高产青霉素菌的性状。②应该是诱变育种。 故填：基因工程；诱变育种。 （2）根据培养基的用途，可以将它们分为选择培养基和鉴别培养基；培养基一般都含有碳源、氮源、水、无机盐等营养成分；培养基一般使用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。 故填：选择；鉴别；碳源、氮源、水、无机盐；高压蒸汽灭菌法。 （3）发酵工程中的中心阶段是发酵过程，在该时期一般会检测微生物数量、产物浓度来判断发酵过程到了哪个阶段。同时，由于环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成，所以在发酵过程中要严格控制溶解氧、pH和温度等发酵条件。 故填：发酵过程；微生物数量、产物浓度；溶解氧、pH和温度；代谢物。 （4）如果发酵产品是菌体本身，常常采用过滤、沉淀等方法分离、提纯。 故填：过滤、沉淀。 【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面，其中发酵过程是发酵工程的中心环节。 29．【答案】（1）动物细胞培养；动物细胞融合；特定的抗原蛋白 （2）淋巴B细胞；聚乙二醇 （3）三类；氨基蝶呤 （4）抗原-抗体杂交 （5）氟尿嘧啶 【解析】【解答】（1）制备单克隆抗体过程中要用到的动物细胞工程技术是动物细胞培养和动物细胞融合，要生产抗AFP单克隆抗体，首先需要向小鼠体内注入特定的抗原蛋白作为抗原。 （2）细胞①是淋巴B细胞，它与骨髓瘤细胞融合时使用的化学试剂是聚乙二醇。 （3）如果只考虑细胞两两融合，融合的细胞有三类，分别为B淋巴细胞-B淋巴细胞、B淋巴细胞骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞。淋巴细胞中有两条DNA合成途径，但不能增殖，而骨髓瘤细胞中只有D途径，却可以无限增殖，为了将杂交瘤细胞分离出来，应该在选择培养基里面应加入氨基蝶呤，阻断细胞增殖的D途径，从而使骨髓瘤细胞不能合成DNA，而杂交瘤细胞由于含有D和S两条途径，D途径被阻断后，依然可以通过S途径合成DNA。 （4）制备单克隆抗体需要进行两次筛选，其中第二次筛选的目的是筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因此所用的方法为抗原-抗体杂交技术。 （5）单克隆抗体和氟尿嘧啶结合后制成的生物导弹中，单克隆抗体起到的作用是识别癌细胞表面的甲胎蛋白，从而识别癌细胞，氟尿嘧啶起到的作用是杀伤癌细胞。 【分析】单克隆抗体的制备流程：先向小鼠体内注射特定的抗原，接着从小鼠体内分离得到B淋巴细胞，然后将所得到的B淋巴细胞和体外培养的骨髓瘤细胞相融合，经过筛选后获得杂交瘤细胞，获得的杂交瘤还需要经克隆化培养和抗体阳性检测，最后将所得到的杂交瘤细胞注入到小鼠的腹腔或者在体外进行培养，从小鼠的腹水或者从培养液中收集单克隆抗体。 30．【答案】（1）原核生物和真核生物的RNA聚合酶所识别和结合的启动子有所不同 （2）NruⅠ；MluⅠ；hLTF基因两端被同一种限制酶切割成相同的末端，可能会反向连接到质粒上 （3）显微注射 【解析】【解答】（1）由于原核生物和真核生物的RNA聚合酶所识别和结合的启动子有所不同，因此从原核生物中获取的质粒不适用于直接构建真核生物的表达载体，其启动子需要进行替换才有可能在真核细胞中表达。 故填： 原核生物和真核生物的RNA聚合酶所识别和结合的启动子有所不同 。 （2）据图可知，启动子插入了NruⅠ和MluⅠ序列之间，因此PCR扩增小鼠乳清酸蛋白基因的启动子所需的两种引物应分别包含NruⅠ和MluⅠ（限制酶）的识别序列。从图中看出，hLTF基因和表达载体均采用MluⅠ切割，hLTF基因两端被同一种限制酶切割成相同的末端，可能会反向连接到质粒上，因此将修饰后的hLTF基因插入到重组质粒的启动子和终止子之间后，不一定能获得所需要的基因表达载体。 故填： NruⅠ； MluⅠ； hLTF基因两端被同一种限制酶切割成相同的末端，可能会反向连接到质粒上。 （3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法， 因此经检测筛选所获得的基因表达载体pW2-hLTF通过显微注射的方法导入到奶牛的受精卵细胞中，以获得能产生hLTF的转基因奶牛。 故填：显微注射法。 【分析】1、基因工程的步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 2、目的基因的获取方法： 从基因文库中获取，包括基因组文库和cDNA文库；人工合成，包括利用mRNA合成cDNA和通过DNA合成仪用化学方法人工合成；利用PCR技术获取和扩增。 3、目的基因导入生物的方法： 将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 ​​​​​ （1）由于原核生物和真核生物的RNA聚合酶所识别和结合的启动子有所不同，因此从原核生物中获取的质粒不适用于直接构建真核生物的表达载体，其启动子需要进行替换才有可能在真核细胞中表达。 （2）启动子插入了NruⅠ和MluⅠ序列之间，因此PCR扩增小鼠乳清酸蛋白基因的启动子所需的两种引物应分别包含NruⅠ和MluⅠ（限制酶）的识别序列。从图中看出，hLTF基因和表达载体均采用MluⅠ切割，hLTF基因两端被同一种限制酶切割成相同的末端，可能会反向连接到质粒上，因此将修饰后的hLTF基因插入到重组质粒的启动子和终止子之间后，不一定能获得所需要的基因表达载体。 （3）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 因此经检测筛选所获得的基因表达载体pW2-hLTF通过显微注射的方法导入到奶牛的受精卵细胞中，以获得能产生hLTF的转基因奶牛。 第 1 页 共 21 页 学科网（北京）股份有限公司 $$