综合测试题-【新课程暑假作业】2024-2025学年高二生物暑假作业

积 累 · 整 合 应 用 · 拓 展 高二生物 第 周 年 月 日 综合测试题 1. 下列有关病毒在生物学和医学领域应用的叙述 ， 错误的是 （ ） A. 灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合 B. 用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体 C. 基因工程中常用噬菌体转化植物细胞 D. 经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防 2. 下列关于泡菜制作的说法 ， 正确的是 （ ） A. 泡菜制作过程可以随时取出食用不同酸味的泡菜 B. 制作泡菜过程中 ， 有机物的干重和种类将减少 C. 若制作的泡菜咸而不酸 ， 最可能的原因是大量的食盐抑制了乳酸菌的发酵过程 D. 泡菜的制作前期需要通入氧气 ， 后期应严格保持无氧条件 3. 下列有关微生物实验室培养的说法不正确的有 （ ） ① 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序 ： 计算 、 称量 、 溶化 、 消毒 、 倒平板 ② 根 据对生存环境的要求 ， 在对应环境中寻找 ， 就一定能寻找到目的菌株 ③ 稀释涂布平板法需 将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面 ④ 灭菌是指杀灭物体内外一切微生物的 细胞 、 芽孢和孢子 ⑤ 平板划线操作第一步 “ 灼烧接种环 ” 是为了避免接种环上可能存在的 微生物感染操作者 ⑥ 稀释涂布平板法进行梯度稀释时 ， 要用移液管吹吸试管中溶液几次 ， 目的是达到足够稀释倍数 ⑦ 平板划线在第二区域内划线时 ， 接种环上的菌种直接来自第一 次划线末端 A. 1 项 B. 2 项 C. 3 项 D. 4 项 4. 下列有关微生物的培养或纯化的叙述 ， 错误的是 （ ） A. 分离自养型微生物时 ， 培养基中加入的琼脂可作为碳源 B. 培养液中溶氧量的变化会影响酵母菌的繁殖和代谢途径 C. 在培养微生物前要先对培养基进行灭菌处理再接种 D. 菌种可接种在斜面固体培养基上 ， 培养后放在 4 ℃ 冰箱中临时保藏 5. 解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用 。 脂肪酸会使醇溶 青琼脂平板变为深蓝色 。 将不能直接吸收脂肪的甲 、 乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平 板上培养 。 甲菌菌落周围呈现深蓝色 ， 乙菌菌落周围不变色 。 下列说法错误的是 （ ） A. 甲菌属于解脂菌 B. 实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源 C. 可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比 D. 该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力 57 暑 假 作 业 新课程 第 周 年 月 日 6. 微生物代谢过程中产生的 CO 2- 3 ， 可与环境中的 Ca 2+ 反应形成碳酸钙沉淀 ， 这种现象称 为微生物诱导碳酸钙沉淀 （ MICP ）。 MICP 形成的机制多种多样 ， 通过细菌分解尿素引起碳 酸钙沉淀是最广泛的方式 。 下列相关说法正确的是 （ ） A. 尿素只有被土壤中的细菌分解成氨后 ， 才能被植物利用 B. 通常用以尿素为唯一碳源的培养基筛选分解尿素的细菌 C. 在培养基中加入酚酞指示剂 ， 可以初步鉴定尿素分解菌 D. 尿素分解菌可以分解碳酸钙质碎石 ， 有效避免土壤板结 7. 下列有关稀释涂布平板法计数和显微镜直接计数法的描述不正确的是 （ ） A. 利用血细胞计数板计数属于显微镜直接计数法 ， 其缺点是不能区分死菌与活菌 B. 两种计数方法 ， 其统计值与实际值相比 ， 均有差异 ， 但差异原因不同 C. 两种计数方法均能在计数的同时观察到所研究微生物的形态特征 D. 当菌落数目稳定时 ， 一般选取菌落在 30～300 的且差异不大的平板进行计数 8. （ 多选 ） 啤酒的工业化生产中 ， 大麦经发芽 、 焙烤 、 碾磨 、 糖化 、 蒸煮 、 发酵 、 消毒 等工序后 ， 最终过滤 、 调节 、 分装 。 下列说法正确的有 （ ） A. 用赤霉素处理大麦 ， 可使大麦种子无须发芽就能产生 α- 淀粉酶 B. 焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌 C. 糖浆经蒸煮 、 冷却后需接种酵母菌进行发酵 D. 通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成 ， 缩短啤酒的发酵周期 9. 紫草素具有抗菌 、 消炎功效 。 在工业化生产中 ， 取紫草植株部分组织诱导形成紫草愈 伤组织 ， 再转入紫草素形成培养基 ， 然后将细胞破碎后提取出紫草素 。 下列相关叙述中错误 的是 （ ） A. 工业化生产过程包括细胞的脱分化和再分化 B. 愈伤组织无法进行光合作用 ， 需从培养基吸收有机物 C. 紫草植株组织诱导形成愈伤组织过程中遗传物质发生改变 D. 紫草的愈伤组织细胞在低渗溶液中不会涨破 10. 植物体细胞杂交所利用的原理包括 （ ） ① 细胞膜的流动性 ② 细胞的全能性 ③ 基因结构的相对独立性 A. ① B. ② C. ①② D. ①②③ 11. 科学家利用植物细胞工程培育出的 “ 白菜 — 甘蓝 ” 同普通白菜相比 ， 具有生长周期 短 、 耐热性强和易于贮藏等优点 。 下列选项对科学家成功培育 “ 白菜 — 甘蓝 ” 新品种影响最 小的是 （ ） A. 白菜和甘蓝的生殖隔离问题 58 积 累 · 整 合 应 用 · 拓 展 高二生物 第 周 年 月 日 B. 选择具有优良性状的白菜和甘蓝 C. 白菜和甘蓝之间的融合技术 D. 杂种细胞 “ 白菜 — 甘蓝 ” 愈伤组织的诱导和再分化 12. 在下列选项中 ， 没有运用植物细胞的全能性的是 （ ） A. 利用植物组织培养获得突变体植株 B. 利用花药离体培养得到单倍体植株 C. 利用作物脱毒培育脱毒马铃薯 D. 利用植物组织培养技术实现细胞产物工厂化生产 13. 对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养 ， 下列叙述错误的是 （ ） A. 在利用肝组织块制备细胞悬液时 ， 可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B. 动物细胞培养应在含 5% CO 2 的恒温培养箱中进行 ， CO 2 的作用是刺激细胞呼吸 C. 为了防止动物细胞培养过程中的污染 ， 可向培养液中加入适量的抗生素 D. 在合成培养基中 ， 通常需加入血清 、 血浆等天然成分 14. 2012 年诺贝尔生理学或医学奖获得者发现 ， 利用逆转录病毒将 Oct4 等 4 个关键基 因导入已分化的体细胞中并表达 ， 可使这个细胞成为类似干细胞的诱导多能干细胞 （ iPS 细 胞 ）。 下图为该技术在人体细胞中的实验示意图 。 下列相关叙述中错误的是 （ ） A. 由图可知 iPS 细胞与 ES 细胞一样不具有组织特异性 B. 利用患者的 iPS 细胞对其自身受损器官进行修复 ， 可以避免免疫排斥反应 C. 研究发现 iPS 细胞的增殖难以控制 ， 即 iPS 细胞具有衰老细胞的特征 D. 利用体细胞核移植技术和诱导 iPS 细胞都能生成干细胞 ， 但过程是完全不同的 15. 骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶 （ HGPRT ）， 在 HAT 筛选培养液中不 能正常合成 DNA ， 无法生长 。 下图为杂交瘤细胞制备示意图 ， 下列相关叙述错误的是 （ ） 4 个关键基因 移植 关键基因 表达 iPS 细胞 ③ ② ① 细胞供体 肌肉细胞 神经细胞 肝脏细胞 心肌细胞 B 淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 HAT 培养液 HGPRT 在 HAT 培养液中死亡 HGPRT 体外长期 培养中死亡 融合的细胞 59 暑 假 作 业 新课程 第 周 年 月 日 A. 可用灭活的仙台病毒和聚乙二醇诱导细胞融合 B. 培养液中的细胞两两融合后都能在 HAT 培养液中生长 C. 杂交瘤细胞需要经过 HAT 培养液筛选才能用于生产 D. 细胞膜的流动性是细胞融合的基础 16. 下列在现代生物科技的应用中 ， 需要进行检测与筛选的是 （ ） ① 对植物的愈伤组织进行诱变处理 ， 培育作物新品种 ② 将鼠的骨髓瘤细胞与 B 淋巴细 胞融合 ， 制备单克隆抗体 ③ 利用植物体细胞杂交技术培育 “ 萝卜 — 甘蓝 ” ④ 将抗虫基因 导入植物细胞 ， 培育具有抗虫特性的新植株 A. ①②③ B. ①②③④ C. ①②④ D. ②③④ 17. 下列关于细胞工程的叙述 ， 错误的是 （ ） A. 动物细胞培养体现了动物细胞的全能性 B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的 B 淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 电融合法可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 18. 利用细胞工程方法 ， 以乙肝病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体 。 下列相关叙 述正确的是 （ ） A. 将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内 ， 产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对乙肝病毒的单克隆抗体 C. 将浆细胞和骨髓瘤细胞混合 ， 经 PEG 诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D. 利用该单克隆抗体与乙肝病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 19. 下列不属于动物细胞工程应用的是 （ ） A. 大规模生产干扰素 ， 用于抵抗病毒引起的感染 B. 为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞 C. 检测有毒物质的毒性 D. 大量生产抗癌物质 —— 紫杉醇 20. 科学家利用小鼠的成纤维细胞成功培育了克隆鼠 ， 培育过程如图所示 。 下列叙述错 误的是 （ ） A. 细胞 A 为培育到 MⅡ 期的卵母细胞 鼠成纤维细胞 细胞培养 去核 细胞 A 克隆鼠 重构胚 重组 细胞 60 积 累 · 整 合 应 用 · 拓 展 高二生物 第 周 年 月 日 B. 克隆鼠的遗传物质主要来自鼠成纤维细胞 C. 利用胚胎干细胞作为核供体更难培育克隆鼠 D. 在培养瓶中培养成纤维细胞时会出现细胞贴壁和接触抑制现象 21. 科学家培育克隆羊时 ， 使用了三种细胞核的供体细胞 ， 分别将这些细胞核移入去核 卵细胞的细胞质中 ， 形成重组细胞 ， 发育成重组胚胎 ， 这些重组胚胎的发育情况如下 。 据此 分析正确的是 （ ） A. 细胞核移植主要在同种动物 、 同种组织的细胞之间进行 B. 重组细胞的发育与去核卵细胞的细胞质无关 C. 早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高 D. 培养动物细胞的培养液中含维生素 、 激素等多种能源物质 22. 科学家通过将大熊猫的细胞核植入去核的兔子卵细胞中 ， 克隆出一批大熊猫胚胎 。 下列有关克隆大熊猫胚胎的叙述 ， 正确的是 （ ） A. 克隆出的早期胚胎 ， 其各细胞的细胞核具有相同的遗传信息 B. 兔子卵细胞的细胞质不能激发大熊猫细胞的细胞核表现出全能性 C. 在形成早期胚胎的过程中 ， 胚胎发育依次经历了卵裂期 、 囊胚 、 桑葚胚 、 原肠胚等 阶段 D. 在重组卵细胞发育成早期胚胎的过程中 ， 细胞进行减数分裂 23. 下列生物技术不需要进行胚胎移植的是 （ ） A. 克隆动物 B. 制备单克隆抗体 C. 培育具有优良品种的试管羊 D. 培育能分泌人的抗体的转基因羊 24. 下列有关胚胎分割的说法错误的是 （ ） A. 一般选用发育良好的桑葚胚或囊胚 B. 对于不同发育阶段的胚胎 ， 分割的具体操作不完全相同 C. 胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一 D. 分割囊胚时 ， 可对内细胞团随机进行分割 25. 人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因 ， 该抗性基因的主要作用 是 （ ） 细胞核供体细胞类型 妊娠数 / 受体母羊数 乳腺上皮细胞 1/13 胚胎成纤维细胞 4/10 早期胚胎细胞 14/27 61 暑 假 作 业 新课程 第 周 年 月 日 A. 提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B. 有利于对目的基因是否导入进行检测 C. 增加质粒分子的分子量 D. 便于与外源基因连接 26. 下列作为基因工程的运载体的说法 ， 错误的是 （ ） A. 要有一至多个限制酶的切割位点 B. 要能够自我复制或同步复制 C. 要有特殊的标记基因以便筛选 D. 要和目的基因有相同的核苷酸序列以便切割 27. 下列有关 PCR 技术的说法 ， 不正确的是 （ ） A. PCR 是一项在生物体外复制特定的 DNA 片段的核酸合成技术 B. PCR 技术的原理是 DNA 双链复制 C. 利用 PCR 技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列 D. PCR 扩增中解旋酶的作用是解开双链 DNA 28. 下列不属于基因工程药物的是 （ ） A. 从酵母菌体内获取的干扰素 B. 从青霉菌体内获取的青霉素 C. 从大肠杆菌体内获取的白细胞介素 D. 从大肠杆菌体内获取的胰岛素 29. 某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶结构和功能很相似 ， 只是热稳定 性较差 ， 进入人体后容易失效 。 现要将此酶开发成一种片剂 ， 临床治疗食物的消化不良 ， 最 佳方案是 （ ） A. 减少此酶在片剂中的含量 B. 将此酶与人蛋白酶拼接 ， 形成新的蛋白酶 C. 替换此酶中的少数氨基酸 ， 改善其功能 D. 重新设计与创造一种全新的蛋白酶 琢 人的生长激素基因 质粒 A 注 ： 抗氨苄青霉素基因 四环素抗性基因 琢 点为目的基因与 质粒 A 的结合点 62 积 累 · 整 合 应 用 · 拓 展 高二生物 第 周 年 月 日 30. 工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料 物质转化为特定产品的过程 。 利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史 。 某企业通过 发酵制作酱油的流程示意图如下 ： 回答下列问题 ： （ 1 ） 米曲霉发酵过程中 ， 加入大豆 、 小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质 ， 大 豆中的 可为米曲霉的生长提供氮源 ， 小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供 。 （ 2 ） 米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖 ， 大量分泌制作酱油过程中所 需的酶类 ， 这些酶中的 、 能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸 收 、 风味独特的成分 ， 如将蛋白质分解为小分子的肽和 。 米曲霉发酵过程需要提供 营养物质 、 通入空气并搅拌 ， 由此可以判断米曲霉属于 （ 填 “ 自养厌氧 ” “ 异养厌 氧 ” 或 “ 异养好氧 ”） 微生物 。 （ 3 ） 在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于 （ 填 “ 真核生物 ” 或 “ 原核生物 ”）； 添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是 。 在该阶段抑制杂菌污染 和繁殖是保证酱油质量的重要因素 ， 据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是 （ 答出一点即可 ）。 31. 微生物合成的油脂是制备生物柴油的新型原料 。 下图为产油脂芽孢杆菌筛选的流程 ， 其中 B 平板上的 5 个菌落是初筛得到的芽孢杆菌 ， C 为 B 平板上菌落的原位影印 ， 利用苏丹 黑 B 可使脂类物质呈黑色的特性 ， 对 C 进行染色 ， 得到结果 D 。 回答下列问题 ： （ 1 ） 图中对土壤菌液进行系列梯度稀释的目的是 。 （ 2 ） 若要使菌落能在 A 平板上生长 ， 下列培养基组分中最合理的是 （ 填 “ 甲 ” “ 乙 ” 或 “ 丙 ”）， 原因是 。 米曲霉发酵 发酵池发酵 提取酱油 食盐 乳酸菌 酵母菌 酱油 大豆 小麦 麦麸 米曲霉 土壤菌液 系列稀释 涂平板 初筛 影 印 染 色 1 2 3 4 5 A B C D E F 63 暑 假 作 业 新课程 第 周 年 月 日 （ 3 ） 培养基配制完成后需要立即进行灭菌 ， 常用的灭菌方法为 。 （ 4 ） 根据 D 的染色结果 ， 可判断 B 平板中的 （ 填图中数字 ） 是产油脂芽孢杆 菌的菌落 。 32. 红曲霉合成的红曲色素是可食用的天然色素 ， 具有防腐 、 降脂等功能 。 研究者进行 了红曲色素的提取及红色素的含量测定实验 ， 流程如下 ： （ 1 ） 取红曲霉菌种斜面 ， 加适量 洗下菌苔 ， 制成菌悬液并培养 ， 解除休眠获 得 菌种 。 经液体发酵 ， 收集红曲霉菌丝体 ， 红曲霉菌丝体与 70% 乙醇溶液混合 ， 经浸提 、 ， 获得的上清液即为红曲色素提取液 。 为进一步提高红曲色素得率 ， 可 将红曲霉细胞进行 处理 。 （ 2 ） 红曲色素包括红色素 、 黄色素和橙黄色素等 ， 红色素在 390 nm 、 420 nm 和 505 nm 波长处均有较大吸收峰 。 用光电比色法测定红曲色素提取液甲的红色素含量时 ， 通常选用 505 nm 波长测定的原因是 。 测定时需用 作空白对照 。 （ 3 ） 生产上提取红曲色素后的残渣 ， 经 处理后作为饲料添加剂或有机肥 ， 这 属于废弃物的无害化和 处理 。 33. M 基因编码的 M 蛋白在动物 A 的肝细胞中特异性表达 。 现设计实验 ， 将外源 DNA 片段 F 插入 M 基因的特定位置 ， 再通过核移植 、 胚胎培养和胚胎移植等技术获得 M 基因失 活的转基因克隆动物 A ， 流程如图所示 。 回答下列问题 ： 甲 葡萄糖 、 牛肉膏 、 蛋白胨 、 NaCl 、 琼脂 、 水 乙 葡萄糖 、 蔗糖 、 NaCl 、 琼脂 、 水 丙 葡萄糖 、 牛肉膏 、 NaCl 、 蔗糖 、 水 培养基 制备 菌种 活化 液体 发酵 菌丝体 制备 红曲色 素提取 红色素含 量测定 卵母细胞 去核卵母细胞 成纤维细胞 F M 基因 质粒 核移植 胚胎培养 早期胚胎 胚胎移植 受体 （ 代孕 ） 母体 克隆动物 A 64 积 累 · 整 合 应 用 · 拓 展 高二生物 第 周 年 月 日 （ 1 ） 在构建含有片段 F 的重组质粒过程中 ， 切割质粒 DNA 的工具酶是 ， 这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的 断开 。 （ 2 ） 在无菌 、 无毒等适宜环境中进行动物 A 成纤维细胞的原代和传代培养时 ， 需要定期 更换培养液 ， 目的是 。 （ 3 ） 与胚胎细胞核移植技术相比 ， 体细胞核移植技术的成功率更低 ， 原因是 。 从早期胚胎中分离获得的胚胎干细胞 ， 在 功能上具有 。 （ 4 ） 鉴定转基因动物 ： 以免疫小鼠的 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合 ， 筛 选融合杂种细胞 ， 制备 M 蛋白的单克隆抗体 。 简要写出利用此抗体确定克隆动物 A 中 M 基 因是否失活的实验思路 ： 。 34. 紫杉醇是红豆杉细胞中产生的一种高效抗癌物质 ， 在植物体中含量极低 。 为取代从 天然植株中提取紫杉醇的方式 ， 可通过植物组织培养和细胞培养技术来获取 ， 其过程为获取 红豆杉外植体 → 消毒 → 诱导愈伤组织 → 细胞培养 → 提取紫杉醇 。 回答下列问题 ： （ 1 ） 获取的外植体首先要通过 过程培养出愈伤组织 。 下表为四种不同外植体 在相同培养条件下诱导愈伤组织的实验结果 ， 由表中结果可知诱导愈伤组织较适宜的两种外 植体分别是 。 注 ： 诱导率 （ % ） = （ 形成的愈伤组织数量 / 接种的外植体数量 ） ×100% （ 2 ） 据下图分析 2 ， 4-D 对细胞生长和紫杉醇合成的作用分别是 ， 为获得最大紫杉醇总产量 ， 最适合的 2 ， 4-D 浓度应为 （ 填 “ 0.5 ” “ 1.0 ” 或 “ 2.0 ”） mg/L 。 外植体 愈伤组织体积 诱导率 /% 不带叶茎段 很大 99．5 带叶茎段 很小 90 叶片 很小 20 成熟胚 较大 80 注 ： 生长速率 = 每天每升培养基中增加的细胞干重克数 0.03 0.02 0.01 0 0.3 0.2 0.1 0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.00 培养液中 2 ， 4-D 浓度 / （ mg/L ） 生 长 速 率 / g · （ L d ） - 1 单 位 重 量 细 胞 中 的 紫 杉 醇 含 量 / % 65 暑 假 作 业 新课程 第 周 年 月 日 （ 3 ） 与从天然植株中提取相比 ， 利用上述技术生产紫杉醇的重要意义是 （ 答出两点即可 ）。 35. 传统的由小鼠杂交瘤细胞产生的单克隆抗体称为鼠源性单抗 。 这种单抗在应用至人 体时 ， 可能被人体当作 “ 异物 ”， 从而引发一些不良反应 。 解决的方案之一是用完全由人类 抗体基因编码的全人源抗体替代鼠源性抗体 。 下图是针对某种病毒的全人源单克隆抗体的制 备技术流程图 ， 结合图示及所学知识 ， 回答下列问题 ： （ 1 ） 从免疫学的角度推测 ， 鼠源性单抗应用至人体时 ， 可能引发的不良反应有 （ 答出一点即可 ）。 （ 2 ） 科学家从康复者而不从未感染者的血液中分离单个 B 细胞 ， 原因是 。 （ 3 ） 从 B 细胞中提取的 mRNA ， 需经过 过程并经 扩增 ， 才能得到大量 的特异性抗体基因 。 （ 4 ） 为达到长期从细胞培养液中获得单克隆抗体的目的 ， 作为目的基因受体的哺乳动 物细胞应具备 的特点 。 转入的全人源单抗基 因能够在其他哺乳动物细胞表达的原因是 。 36. 番茄红素具有一定的抗癌效果 ， 但在番茄红素环化酶的催化作用下 ， 易转化为胡萝 卜素 。 科学家利用基因工程设计了重组 DNA （ 质粒三 ）， 并导入番茄细胞 ， 从而阻止番茄红 素的转化 ， 提高番茄红素的产量 。 下图为利用质粒一和目的基因构建重组质粒三的过程示意 图 ， 请回答下列问题 ： 康复者 的血液 分选 单个 B 细胞 B 细胞 体外培养 提取 mRNA 特异性 抗体基因 质粒 基因 表达 载体 哺乳 动物 细胞 转入 单克 隆抗 体 表达 抗体 功能 实验 目的基因 质粒一 质粒二 开环 酶切 、 去磷酸化 酶切 质粒三 导致 目的基因 导入并 表达 双链 RNA 、 mRNA 被降解 双链 RNA （ 发卡 ） BamHⅠ BamHⅠ BamHⅠ Ecl Ecl 66 积 累 · 整 合 应 用 · 拓 展 高二生物 第 周 年 月 日 （ 1 ） 该过程中用到的工具酶有 ， 图中的 “ 目的基因 ” 是 基因 。 （ 2 ） 先构建 “ 质粒二 ” 的原因主要是利用质粒二中含有 。 利用限制酶 BamHⅠ 开环后去磷酸化的目的是防止自身环化 ， 再用 Ecl 酶切的目 的是 。 （ 3 ） 质粒三导入受体细胞并表达后 ， 形成双链 RNA （ 发卡 ） 的原因是 。 “ 发卡 ” 在受体细胞内可以阻止 过程 ， 从而使基因 “ 沉默 ”。 37. 用 DNA 重组技术可以赋予生物以新的遗传特性 ， 创造出更符合人类需要的生物产 品 。 在此过程中需要使用多种工具酶 ， 其中 4 种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示 。 回答下列问题 ： （ 1 ） 常用的 DNA 连接酶有 E.coli DNA 连接酶和 T4 DNA 连接酶 。 上图中 酶 切割后的 DNA 片段可以用 E.coli DNA 连接酶连接 ， 酶切割后的 DNA 片段可以用 T4 DNA 连接酶连接 。 （ 2 ） DNA 连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是 。 （ 3 ） DNA 重组技术中所用的质粒载体具有一些特征 ， 如质粒 DNA 分子上有复制原点 ， 可以保证质粒在受体细胞中能 ； 质粒 DNA 分子上有 ， 便于外源 DNA 插入 ； 质粒 DNA 分子上有标记基因 （ 如某种抗生素抗性基 因 ）， 利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞 ， 方法是 。 （ 4 ） 表达载体含有启动子 ， 启动子是指 。 38. CRISPR/Cas9 是一种高效的基因编辑技术 ， Cas9 基因表达的 Cas9 蛋白像一把 “ 分子 剪刀 ”， 在单链向导 RNA （ SgRNA ） 引导下 ， 切割 DNA 双链以敲除目标基因或插入新的基 因 。 CRISPR/Cas9 基因编辑技术的工作原理如图所示 。 限制酶 ： EcoRⅠ SmaⅠ PstⅠ EcoRⅤ GAATTC CTTAAG CCCGGG GGGCCC CTGCAG GACGTC GATATC CTATAG 67 暑 假 作 业 新课程 第 周 年 月 日 回答下列问题 ： （ 1 ） 过程 ① 中 ， 为构建 CRISPR/Cas9 重组质粒 ， 需对含有特定 sgRNA 编码序列的 DNA 进行酶切处理 ， 然后将其插入到经相同酶切处理过的质粒上 ， 插入时所需要的酶是 。 （ 2 ） 过程 ② 中 ， 将重组质粒导入大肠杆菌细胞的方法是 。 （ 3 ） 过程 ③~⑤ 中 ， sgRNA 与 Cas9 蛋白形成复合体 ， 该复合体中的 sgRNA 可识别并与 目标 DNA 序列特异性结合 ， 二者结合所遵循的原则是 。 随后 ， Cas9 蛋白可切 割 序列 。 （ 4 ） 利用 CRISPR/Cas9 基因编辑技术敲除一个长度为 1200 bp 的基因 ， 在 DNA 水平上 判断基因敲除是否成功所采用的方法是 ， 基因敲除成功的判断依据是 。 （ 5 ） 某种蛋白酶可高效降解羽毛中的角蛋白 。 科研人员将该蛋白酶基因插入到 CRISPR/ Cas9 质粒中获得重组质粒 ， 随后将其导入到大肠杆菌细胞 ， 通过基因编辑把该蛋白酶基因插 入到基因组 DNA 中 ， 构建得到能大量分泌该蛋白酶的工程菌 。 据图简述 CRISPR/Cas9 重组 质粒在受体细胞内 ， 将该蛋白酶基因插入到基因组 DNA 的编辑过程 ： 。 Cas9 基因 sgRNA 编码序列 表达 转录 Cas9 蛋白 sgRNA ① 构建重组质粒 ② 导入受体细胞 ③ 形成复合体 ④sgRNA 引导识别 目标 DNA 序列 ⑤Cas9 蛋白进行切割 基因组 DNA 敲除目标基因 或插入新的基因 CRISPR/Cas9 重组质粒 CRISPR/Cas9 重组质粒 68 积 累 · 整 合 应 用 · 拓 展 高二生物 11. （ 1 ） 基因组 DNA （ 2 ） 5′ 使 DNA 片段能定向插入表达载体 ， 减少自连 （ 3 ） ② ⑥ （ 4 ） 8 13 （ 5 ） pH 为 8.5 ， 缓冲液为 50 mmol/L Tris-HCl 12. （ 1 ） A （ 2 ） 2 ， 4-D 乙 （ 3 ） 除草剂 （ 4 ） BD （ 5 ） 1/3 （ 6 ） 积累越来越多自交系 B 的遗传物质 / 优良性状 （ 7 ） （ 8 ） x 4 <x 3 <x 2 <x 1 13. （ 1 ） 逆转录 （ 2 ） PvuⅡ EcoRⅠ （ 顺序可颠倒 ） T4 DNA 连接酶 （ 3 ） 能吸收周围环境中 DNA （ 4 ） 3 （ 5 ） G 2 /M 第 4 节 蛋白质工程的原理和应用 积累 · 整合 略 应用 · 拓展 1. C 2. B 3. （ 1 ） 氨基酸序列 （ 或结构 ） （ 2 ） P P1 DNA 和 RNA （ 或遗传物质 ） DNA→RNA 、 RNA→DNA 、 RNA→ 蛋白质 （ 或转录 、 逆转录 、 翻译 ） （ 3 ） 设计蛋白质的结构 推测氨基酸序列 功能 4. （ 1 ） 显微注射 限制性内切酶 DNA 连接酶 感染植物 ， 将目的基因转移到受体细胞中 （ 2 ） 蛋白质 现有蛋白质 新蛋白质 氨基酸 （ 3 ） 同 供 受 第 4 章 生物技术的安全性与伦理问题 积累 · 整合 略 应用 · 拓展 1. D 2. B 3. B 4. A 综合测试题 1. C ２. Ｃ ３. Ｄ ４. Ａ ５. B ６. Ａ 7. Ｃ 8. ACD 9. Ｃ １0. Ｃ １１. Ａ １２. Ｄ １３. Ｂ １４. Ｃ １５. Ｂ １６. Ｂ H 2 100 80 60 40 20 0 F 1 H 3 H 1 含 G 基 因 植 株 比 例 / % H 2 100 80 60 40 20 0 F 1 H 3 H 1 含 G 基 因 植 株 比 例 / % 图 1 筛选处理 图 2 未筛选处理 75 暑 假 作 业 新课程 １7. Ａ １8. Ｄ １9. Ｄ ２0. Ｃ ２１. Ｃ ２２. Ａ ２３. Ｂ ２４. Ｄ ２５. Ｂ ２６. Ｄ ２7. Ｄ ２8. Ｂ ２9. Ｃ 30. （ 1 ） 蛋白质 碳源 （ 2 ） 蛋白酶 脂肪酶 氨基酸 异养好氧 （ 3 ） 原核生物 酒精和二氧化碳 酒精 、 乳酸 、 食盐 （ 答出一点即可 ） 31. （ 1 ） 将微生物分散成单个细胞 ， 进而获得单个的菌落 （ 2 ） 甲 甲培养基含有细菌生长所需的各种主要营养物质和凝固剂 （ 琼脂 ） （ 3 ） 高压蒸汽灭菌 （ 4 ） 3 32. （ 1 ） 无菌水 活化 离心 破碎 （ 2 ） 其他色素对该波长光的吸收相对较少 ， 干扰相对较小 70% 乙醇溶液 （ 3 ） 灭菌 资源化 33. （ 1 ） 限制性内切核酸酶 （ 限制酶 ） 磷酸二酯键 （ 2 ） 清除代谢产物 ， 防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 （ 3 ） 动物胚胎细胞分化程度低 ， 恢复其全能性相对容易 ， 动物体细胞分化程度高 ， 恢复其全能性十分困难 发 育的全能性 （ 4 ） B 用特定抗原刺激小鼠 ， 然后取出已免疫的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 ， 看筛选出的杂交瘤细胞能否产 生 M 蛋白的单克隆抗体 ， 如果不能产生 ， 说明 M 基因在克隆动物 A 中已失活 34. （ 1 ） 脱分化 不带叶茎段 、 成熟胚 （ 2 ） 促进细胞生长 ， 抑制紫杉醇合成 1．0 （ 3 ） 提高了紫杉醇的产量 ； 保护了红豆杉资源 35. （ 1 ） 过敏反应 （ 2 ） 康复者的血液中含有分泌该种病毒的特异性抗体的浆细胞 ， 而未感染者的血液中不含 （ 3 ） 逆转录 PCR （ 4 ） 既能无限增殖 （ 分裂能力强 ）， 又具有分泌能力 几乎所有的生物共用一套遗传密码 36. （ 1 ） 限制酶 、 DNA 连接酶 番茄红素环化酶 （ 2 ） BamHⅠ 和 Ecl 酶的识别序列 （ 和切割位点 ） 确保目的基因反向连接 （ 3 ） 转录后的 RNA 分子中存在互补配对的碱基序列 翻译 37. （ 1 ） EcoRⅠ 、 PstⅠ EcoRⅠ 、 PstⅠ 、 SmaⅠ 和 EcoRⅤ （ 2 ） 磷酸二酯键 （ 3 ） 自我复制 一至多个限制酶切位点 用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞 ， 能够存活的即为含有质粒载 体的宿主细胞 （ 4 ） 位于基因首端的一段特殊 DNA 序列 ， 是 RNA 聚合酶识别及结合的部位 ， 能驱动转录过程 38. （ 1 ） DNA 连接酶 （ 2 ） Ca 2+ 处理 （ 3 ） 碱基互补配对 目标 （ 目的 ） DNA （ 基因 ） （ 4 ） DNA 分子杂交技术 经编辑过的 DNA 片段 （ 从受体细胞中提取的基因组 DNA ） 与标记的目标 （ 对应 ） 基 因 （ 探针 ） 杂交 ， 若无杂交带 ， 则敲除成功 （ 5 ） 表达 Cas9 蛋白和 sgRNA ， 两者形成复合体 ； sgRNA 识别并结合目标 DNA 序列 ； 引导 Cas9 蛋白切割目标 DNA 序列 76