精品解析：宁夏回族自治区石嘴山市第三中学2024-2025学年高二下学期5月月考生物试题

石嘴山三中2024——2025学年第二学期高二年级生物第二次月考试题 一.单项选择题(1-40小题，每小题1分，41-45小题，每小题2分，共50分) 1. 下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（　　） A. 用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异 B. 植物组织培养的培养基中不需要添加有机物 C. 植物组织培养利用了细胞的全能性，动物细胞培养也利用了该原理 D. 植物组织培养在再分化时需在有光条件下进行，动物细胞培养对光照无要求 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养： ①原理：植物细胞的全能性； ②培养基：MS培养基（固体），通常需要加入生长素和细胞分裂素诱导； ③主要过程：脱分化和再分化； ④培养目的：快速繁殖或获得脱毒苗等。 【详解】A、用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗可能出现变异，如在愈伤组织的培养过程中可能发生基因突变等，A错误； B、在分化形成叶片之前植物细胞不能进行光合作用，因此植物组织培养的培养基中需要加入糖类等有机物，B错误； C、植物组织培养利用了细胞的全能性，但动物细胞培养利用的原理是细胞增殖，C错误； D、植物组织培养再分化阶段必须给予光照，但愈伤组织的形成一般不需要光照，动物细胞培养对光照无要求，D正确。 故选D。 2. 我国首例克隆猫“大蒜”的培育过程:从供体猫大腿部采集一块皮下组织,提取体细胞与去核的卵母细胞融合,构建重组胚胎,再植入代孕猫的子宫内,直至分娩。下列说法正确的是（ ） A. 体细胞的分化程度比胚胎细胞的高,但不影响通过核移植获得克隆动物的难度 B. 去除卵母细胞的细胞核时,可通过显微操作技术,用吸管吸出细胞核 C. 用电融合法使体细胞与卵母细胞融合后,不需要再对重组胚胎进行激活 D. 克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞有全能性,其遗传物质全部来自供体细胞 【答案】B 【解析】 【分析】1、动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，继而发育成动物个体的技术。2、利用核移植技术克隆动物时，其基本操作为获取去核卵细胞→构建重构胚→激活重构胚→胚胎移植→获得克隆个体。 【详解】A、体细胞比胚胎细胞的分化程度高，恢复其全能性十分困难，故体细胞核移植获得克隆动物的难度明显高于胚胎细胞核移植，A错误； B、在核移植过程中，可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，获得去核卵母细胞，B正确； C、用电融合法使体细胞与卵母细胞融合后，还需要再对重组胚胎进行激活，其目的是使其完成细胞分裂和发育进程，C错误； D、通过核移植方法培育的克隆动物，其细胞核的遗传物质全部来自供体细胞核，但细胞质中的遗传物质则来自提供去核卵细胞的雌性，D错误。 故选B。 3. 中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术，人们喜欢的果酒、果醋都是发酵食品。下列关于果酒和果醋制作的叙述，错误的是（　　） A. 家庭酿造果酒时，发酵液装瓶时要留约1/3空间 B. 果酒制作完成后，可以通过改变发酵条件继续进行果醋发酵 C. 先酿制果酒再酿制果醋，其发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率 D. 果酒制作过程中发酵液pH逐渐升高，果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低 【答案】D 【解析】 【分析】1、果酒制作菌种是酵母菌，是一种单细胞真菌，真核生物，代谢类型为异养兼性厌氧型，适宜条件下进行出芽生殖。酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖，无氧条件下进行酒精发酵产生酒精。2、果醋制作菌种是醋酸菌，原核生物，代谢类型为异养需氧型，以二分裂方式增殖。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸。当氧气充足，缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再变为醋酸。 【详解】A、葡萄汁装入发酵瓶时，要留约1/3 空间，不能装满，目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽O2后再进行酒精发酵，这样还可防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出，A正确； B、果酒制作完成后，可通入氧气，并提高发酵温度进行果醋发酵，B正确； C、酒精发酵产生的酒精能抑制杂菌的生长，且酒精发酵时的无氧环境也能抑制需氧菌的繁殖，因此先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率，C正确； D、果醋制作过程中，醋酸菌有氧呼吸产生CO2和水，CO2溶于水形成碳酸，随着CO2浓度的增加，溶液的pH逐渐降低；同时产生的醋酸也会使培养液的pH降低。果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生CO2与酒精，CO2溶于水形成碳酸，随着CO2浓度的增加，溶液的pH逐渐降低，因此果酒、果醋制作过程中溶液的pH都是逐渐降低的，D错误。 故选D。 4. 下列有关微生物培养与应用技术的叙述，正确的是（ ） A. 培养微生物所用的培养基中都必须含有水、无机盐、碳源和氮源等基本营养成分 B. 若要检测饮水机的直饮水中大肠杆菌是否超标，待检测水样需要经过灭菌后再检测 C. 采用稀释涂布平板法接种后，不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单菌落 D. 从土壤中分离分解尿素的微生物后，利用含酚红的尿素培养基可作进一步鉴定 【答案】D 【解析】 【分析】无菌技术的主要内容①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 【详解】A、自养型微生物不需要提供碳源，A错误； B、若要检测饮水机的直饮水中大肠杆菌是否超标，待检测水样需要直接进行检测，待检测水样不能进行灭菌处理，B错误； C、采用稀释涂布平板法接种后，稀释到合适的浓度的菌液才可在培养基表面形成单菌落，C错误； D、分解尿素的细菌能合成脲酶，催化尿素分解产生的NH3可以作为细菌生长的氮源。如果培养基中加入了酚红指示剂，尿素分解的产物 NH3会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，因此，可用酚红指示剂对分解尿素的微生物进行鉴定，D正确。 故选D。 5. 在集市上，摆满了各种传统发酵食品。色泽诱人的果酒散发着醉人的香气，果醋透着淡淡的果香与醋酸味。还有腐乳散发着独特的酱香，泡菜则有着清爽的酸辣口感。这些都是传统发酵技术的成果，下列叙述正确的是（　　） A. 泡菜腌制时间越长，亚硝酸盐含量越高，宜尽早食用 B. 腐乳味道鲜美，主要是毛霉等原核生物产生的脂肪酶发挥了作用 C. 传统发酵以混合菌种的液体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的 D. 家庭制作果酒、果醋、泡菜这三种产品时，发酵后期均为酸性环境 【答案】D 【解析】 【分析】传统发酵是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。 【详解】A、泡菜腌制时亚硝酸盐含量先升高后降低，一般两周后食用为宜，A错误； B、毛霉是真核生物，腐乳味道鲜美主要是毛霉等真核生物产生的脂肪酶、蛋白酶等发挥作用，B错误； C、传统发酵以混合菌种的固体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的，C错误； D、果酒发酵会产生二氧化碳，二氧化碳溶于水形成碳酸，果醋发酵产物是醋酸，泡菜发酵产生乳酸，因此家庭制作的果酒、果醋、泡菜三种产物发酵后期均为酸性环境，D正确。 故选D。 6. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是（　　） A. 细胞工程均以细胞生物学或分子生物学为基本原理进行操作 B. 人们可以有目的地通过在分子水平上进行操作，从而获得相应的细胞产品 C. 将植物细胞的叶绿体导入酵母菌细胞中，这属于细胞工程的研究范畴 D. 细胞工程的最终目的都是获得相应的特定细胞、组织、器官或个体 【答案】C 【解析】 【分析】细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法，通过细胞器、细胞或组织水平上的操作，有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其他产品的一门综合性生物工程。 【详解】A、细胞工程不只应用细胞生物学、分子生物学的原理和方法，还运用了发育生物学的原理和方法，A错误； B、细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理与方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术，利用细胞工程可以有目的地获得特定的细胞、组织、器官等，B错误； C、细胞工程可以通过在细胞水平或细胞器水平上的操作，因此，将叶肉细胞的细胞器叶绿体移入酵母菌细胞属于细胞工程，C正确； D、细胞工程是通过细胞生物学和分子生物学的原理和方法，在细胞水平或细胞器水平上进行操作，有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合科学技术‌，D错误。 故选C。 7. 研究者从酵母菌中获取控制细胞色素氧化酶（存在于线粒体）的某一段肽合成的DNA片段，将其与小鼠的二氢叶酸还原酶（只存在于细胞质基质）基因融合。重组基因在酵母菌表达后，在线粒体中发现了二氢叶酸还原酶。该研究的目的是（ ） A. 获得融合蛋白 B. 研究该段肽的作用 C. 引导二氢叶酸还原酶进入线粒体 D. 研究重组基因的功能 【答案】D 【解析】 【分析】基因是有遗传效应的DNA片段，基因的表达包括转录和翻译两个阶段。染色体是基因的主要载体，核基因在染色体上呈线性排列。 【详解】A、重组基因在酵母菌表达后，在线粒体中发现了二氢叶酸还原酶，该酶不是新融合蛋白，A错误； B、获得的是二氢叶酸还原酶，它由二氢叶酸还原酶基因指导合成，跟段肽没有关联，该研究的目的并不是研究该段肽的作用，B错误； C、该实验没有体现引导二氢叶酸还原酶直接进入线粒体的过程，C错误； D、该实验从酵母菌中获取控制细胞色素氧化酶（存在于线粒体）的某一段肽合成的DNA片段，将其与小鼠的二氢叶酸还原酶（只存在于细胞质基质）基因融合，得到重组基因，重组基因在酵母菌表达后，在线粒体中发现了二氢叶酸还原酶，可以体现基因的表达过程，该研究的目的就是研究重组基因的功能，或者是表达情况，D正确。 故选D。 8. 天然β-淀粉酶耐热性较差，难以满足工业化生产需求。通过PCR对天然β-淀粉酶基因进行改造，将其导入大肠杆菌表达后，获得了一种耐高温的β-淀粉酶。与天然酶相比，改造后的酶在第476位发生了氨基酸替换，由天冬氨酸改变为天冬酰胺。下列叙述错误的是（ ） A. 天冬酰胺与天冬氨酸的R基不同，该替换导致酶的空间结构改变 B. 根据新的氨基酸序列可逆推出唯一对应的基因编码序列 C. PCR技术在此过程中实现了对β-淀粉酶基因的定点突变 D. 这种通过设计并合成新蛋白质的技术属于蛋白质工程 【答案】B 【解析】 【分析】蛋白质工程：指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。 【详解】A、不同氨基酸的差异在于R基不同，氨基酸的改变会影响蛋白质的空间结构，天冬酰胺与天冬氨酸的R基不同，该替换会导致酶的空间结构改变，A正确； B、由于密码子的简并性，根据新的氨基酸序列推导出的基因编码序列不是唯一的，B错误； C、通过PCR技术可以对基因进行定点突变，从而实现对天然β - 淀粉酶基因的改造，C正确； D、蛋白质工程是通过设计并合成新蛋白质或对现有蛋白质进行改造的技术，题中通过对天然β - 淀粉酶基因改造获得耐高温的β - 淀粉酶属于蛋白质工程，D正确。 故选B。 9. 生物技术与工程学相结合，可研究、设计和加工生产各种生物工程产品。下列有关叙述正确的是（ ） ①由于外植体在植物组织培养过程中不感染病毒，用任何外植体都可制备脱毒苗 ②由 iPS 细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用 ③用转基因动物作为器官移植的供体时，由于导入调控基因表达的DNA序列，而不是目的基因，因此无法抑制抗原的合成 ④动物细胞培养应定期更换培养液，以便清除代谢产物，保证无毒环境 ⑤利用基因工程技术的乳腺生物反应器，可以让哺乳动物批量生产相应的药物 ⑥蛋白质工程仅以蛋白质结构为基础逆中心法则进行，就可以改造或制造新的蛋白质 A. ①③ B. ②④⑤ C. ②④⑥ D. ①④⑤⑥ 【答案】B 【解析】 【分析】PCR技术是对体内DNA复制过程的模仿，也需要模板、原料、酶和引物等。待扩 增的DNA分子是模板，原料是4种脱氧核苷三磷酸，即dNTP，N代表A、T、G、C四种碱基。PCR过程包括多次循环，每个循环分为3个步骤。①变性：模板DNA 双链在高温下 （90～95 ℃） 氢键断裂，解旋成2条 DNA 单链，这个过程称为变性。 ②退火：温度降低（50～60 ℃）后，2个引物分别与各自互补的DNA单链结合，称为退火。③延伸：分别以两条DNA单链为模板，4种脱氧核苷三磷酸为原料，耐高温的 Taq DNA 聚合酶在适宜的温度（约72 ℃）下，以引物与模板形成的小段DNA双链区为 起点，催化合成一条新的DNA互补链。 【详解】①虽然外植体在植物组织培养过程中不感染病毒，但外植体可能本身携带病毒，因此不是用任何外植体都可制备脱毒苗，一般用茎尖制备脱毒苗，①错误； ②iPS细胞为多功能干细胞，能分裂分化产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用，②正确； ③用转基因动物作为器官移植的供体时，将供体器官基因组导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，③错误； ④动物细胞培养应定期更换培养液，以便清除代谢产物，保证无毒环境，加入抗生素，保证无菌，④正确； ⑤利用基因工程技术的乳腺生物反应器，可以利用哺乳动物源源不断地批量生产相应的药物，⑤正确； ⑥蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，⑥错误。 故选B。 10. CRISPR/Cas 9是一种基因组编辑系统，能够通过“剪切和粘贴”脱氧核糖核酸（DNA）序列的机制来编辑基因组。这套系统源自细菌的防御机制，是一种对任何生物基因组均有效的基因编辑工具。RISPR/Cas 9基因组编辑系统由向导RNA（也叫sgRNA）和Cas 9蛋白组成，向导RNA识别并结合靶基因DNA，Cas 9蛋白切断双链DNA形成两个末端。这两个末端通过“断裂修复”重新连接时通常会有个别碱基对的插入或缺失，从而实现基因编辑，如图所示。CRISPR/Cas 9基因组编辑技术有时也会存在编辑出错而造成脱靶。下列叙述不正确的是（ ） A. 可以利用CRISPR/Cas 9基因组编辑技术，改造现有蛋白质或制造一种新的蛋白质 B. sgRNA的序列与目的基因特定碱基序列部分结合，结合区域最多含8种核苷酸 C. 若其他DNA中含有与sgRNA互补的序列，则可能造成sgRNA错误结合而脱靶 D. Cas 9蛋白相当于限制酶，能作用于脱氧核糖和碱基之间的磷酸二酯键 【答案】D 【解析】 【分析】由题意可知，CRISPR/Cas9基因编辑系统是由靶基因的向导RNA和Cas9蛋白构成的复合体。向导RNA在基因组中负责寻找靶基因并与其结合，Cas9蛋白在向导RNA的引导下切割靶基因，使DNA双链断裂产生平末端。在随后DNA自我修复的过程中，容易随机引起一些碱基对的插入或缺失，导致基因功能改变。 【详解】A、CRISPR/Cas 9基因组编辑技术，可以定向改造基因，从而改造现有蛋白质或制造一种新的蛋白质，A正确； B、sgRNA与目的基因结合区域最多含8种核苷酸（4种脱氧核苷酸和4种核糖核苷酸），B正确； C、CRISPR/Cas9基因组编辑系统有时存在编辑出错而造成脱靶，其最可能的原因是其他DNA序列也含有与向导RNA（sgRNA）互补配对的序列，造成向导RNA（sgRNA）错误结合而脱靶，C正确； D、Cas9蛋白识别并切断双链DNA形成两个末端，相当于限制酶，能作用于磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键，D错误。 故选D。 11. 下图为利用定点突变技术改造基因的过程示意图，相关叙述错误的是（　　） A. 需要设计并合成一段含有突变碱基的DNA引物 B. 该技术能够实现特异性地替换任何一个特定碱基 C. 通过电泳检测产物大小，即可确认基因突变是否成功 D. 利用上述技术能够改造蛋白质的结构和功能 【答案】C 【解析】 【分析】PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。 【详解】A、定点突变技术通常需要设计并合成一段含有突变碱基的DNA引物，用于引导DNA合成过程中的特定碱基替换，A正确； B、定点突变技术能够实现特异性地替换任何一个特定碱基，这是该技术的主要优势之一，B正确； C、通过电泳检测产物大小不能直接确认基因突变是否成功。电泳主要用于检测DNA片段的大小，而确认突变是否成功通常需要进一步的测序分析，C错误； D、定点突变技术可以通过改变基因的碱基序列来改变蛋白质的结构和功能，这是该技术的重要应用之一，D正确。 故选C。 12. 科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，其中V5编码序列表达标签短肽V5。图乙表示重组质粒正确表达后用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白的结果。相关叙述正确的是（　　） A. 若用PCR法确定J基因是否正确连接到质粒中，选择的引物组合只能为F2和R1 B. 若b链是J基因转录模板链，则可推知引物F1与J基因b链相应部分的序列相同 C. 若导入受体细胞的启动子发生甲基化修饰，则可以抑制DNA聚合酶对启动子的识别和结合 D. 图乙条带1表明细胞内表达了J-V5融合蛋白，条带2所检出的蛋白不是由重组质粒上的J基因表达的 【答案】D 【解析】 【分析】基因表达载体的结构：①启动子：RNA聚合酶识别和结合的位点，用于驱动RNA转录；②终止子：使转录停止的“信号灯”；③标记基因：便于重组DNA分子的筛选；④目的基因；复制原点。 【详解】A、引物F2和R1或F1和R2结合部位包含J基因的碱基序列，因此若用PCR 法确定J基因是否正确连接到质粒中，应选择的引物组合为F2和R1或F1与R2，A错误； B、b是模板链，而根据图上启动子和终止子的位置可知转录方向是图上从左向右，对应的模板链方向应该是3’-5'，非模板链（也就是a链）是5'-3'；考虑到DNA复制的方向是子链的5’-3'，引物基础上延伸的方向肯定是5'-3'，所以引物结合的单链其方向是3'-5'；图中F1是前引物，在左侧，所以其配对的单链是3’-5'的b链，故其序列应该与a链相应部分的序列相同，B错误； C、启动子是转录时RNA聚合酶的识别和结合位点，因此若导入受体细胞的启动子发生甲基化修饰，则可以抑制 RNA 聚合酶对启动子的识别和结合，C错误； D、图乙条带1可以和抗J蛋白抗体和抗 V5 抗体结合，表明细胞内表达了J-V5融合蛋白，条带2只能和抗J蛋白抗体结合，不能和抗 V5 抗体结合，说明条带2所检出的蛋白不是由重组质粒上的融合基因表达的，D正确。 故选D。 13. 斑点印迹杂交是一种简单的DNA分子杂交技术，其技术流程如图。据此分析，下列说法正确的是（ ） A. p和q片段能够杂交的主要原因是两单链的碱基排列顺序相同 B. 放射性自显影技术可显示原培养皿中含目的基因的菌落位置 C. p和q片段的杂交双链区域形成过程中有氢键和磷酸二酯键生成 D. 斑点印迹杂交技术可用于检测目的基因是否在受体细胞中成功表达放射性自显影结果 【答案】B 【解析】 【分析】目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。 【详解】A、p和q杂交是因为两单链的碱基可以互补配对，A错误； B、斑点印迹杂交技术是将目的基因片段用放射性同位素或荧光进行标记，与受体细胞的基因组DNA进行杂交，如果目的基因整合到受体细胞上，那么标记基因就会与其结合，通过放射性自显影就可以检测出整合有目的基因的受体细胞。所以该技术可以显示原培养基中含目的基因的菌落位置，B正确； C、在杂交过程中，双链区域会有氢键形成，但不会形成磷酸二酯键，C错误； D、斑点印迹杂交是一种简单的DNA分子杂交技术，该技术可以检测目的基因的导入和转录，但无法用于检测目的基因是否在受体细胞中表达，目的基因是否在受体细胞中表达常用抗原-抗体杂交法，D错误。 故选B。 14. 基因工程中常用的标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。现将某细菌分别接种于下列培养基中：对照组（不添加抗生素）、实验组1（添加一定浓度的四环素）、实验组2（添加一定浓度的氨苄青霉素）、实验组3（添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素），适宜条件下培养一段时间后，观察到对照组和实验组2中有菌落形成。则该细菌中标记基因的分布情况是（ ） A. 含抗四环素基因，不含抗氨苄青霉素基因 B. 含抗氨苄青霉素基因，不含抗四环素基因 C. 既含抗四环素基因，也含抗氨苄青霉素基因 D. 不含抗四环素基因，也不含抗氨苄青霉素基因 【答案】B 【解析】 【分析】选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基，利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。 【详解】根据题意可知，对照组（不添加抗生素）、实验组1（添加一定浓度的四环素）、实验组2（添加一定浓度的氨苄青霉素）、实验组3（添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素），适宜条件下培养一段时间后，观察到对照组和实验组2中有菌落形成，而含有四环素的实验组1和3没有形成菌落，说明该细菌的标记基因含有抗氨苄青霉素基因，不含抗四环素基因，B正确，ACD错误。 故选B。 15. 利用植物组织或细胞培养进行药用次生代谢物的生产可以采用不同的技术流程如下图。毛状根是植物感染发根农杆菌后在感染部位或附近产生的副产物，在生产某些药用次生代谢物方面具有独特的优势。下列说法正确的是（　　） A. 外植体用质量分数5%的次氯酸钠溶液和体积分数为70%的酒精混合处理后应立即用无菌水清洗 B. 培养体系1中的外源基因导入前需用Ca2+处理受体细胞 C. 培养体系3的获得不需要添加外源植物激素 D. 培养体系1、2、3中都含有外源基因 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养过程中，整个过程应严格无菌无毒，外植体需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。这样既考虑了药剂的消毒效果，又考虑了植物的耐受能力。 【详解】A、外植体用酒精消毒后应立即用无菌水清洗2-3次，在用质量分数5%的次氯酸钠溶液处理后，立即用无菌水清洗，以防止杀死细胞，A错误； B、培养体系1中的外源基因导入前需用Ca2+处理农杆菌，再用农杆菌处理受体细胞，B错误； C、培养体系3的毛状根用于获取次生代谢物，不需要培育成植株，故不需要添加外源植物激素，C正确； D、图中仅培养体系1，利用了转基因技术，所以仅培养系1中含有外源基因，D错误。 故选C。 16. 实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B. 二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C. 若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D. 图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A 、从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质能与小鼠产生的抗体发生特异性结合，所以该蛋白质相当于抗原，A正确。 B 、由图可知，二抗是与一抗结合的，且带有特殊标记，所以二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体，B正确。 C 、若未显示出杂交带，有可能是目的基因导入了受体细胞，但目的基因没有表达，而不是目的基因未导入受体细胞，C错误。 D 、图示操作是通过抗原 - 抗体杂交技术来检测转基因棉花是否产生了 Bt 毒蛋白，D正确。 故选C。 17. 为了利用基因工程技术改造牙鲆（一种鱼类），科学家计划将构建好的载体转化至大肠杆菌内扩增，再将大肠杆菌中扩增的载体纯化后导入牙鲆细胞。此实验构建的重组质粒上包含目的基因和氨苄青霉素抗性基因。下列关于此实验的相关说法，错误的是（ ） A. 为了避免外部杂菌污染培养基，接种过大肠杆菌的培养基应灭菌后进行培养 B. 为了使牙鲆细胞在培养瓶中增殖，培养牙鲆细胞的培养基中通常需要加入血清 C. 为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应含有凝固剂 D. 为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应加入氨苄青霉素 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程基本操作顺序：目的基因获取、表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。过程①是基因表达载体构建，过程②是目的基因导入受体细胞。 【详解】A、接种过大肠杆菌的培养基不能灭菌，否则接种的大肠杆菌也会被杀死，A错误； B、牙鲆属于动物，培养动物细胞的培养基中通常需要加入血清，B正确； C、为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应含琼脂等凝固剂，只有在固体培养基上才有可能形成菌落，C正确； D、此实验构建的重组质粒上包含氨苄青霉素抗性基因，因此为了筛选成功导入重组质粒的大肠杆菌，培养基中应加入氨苄青霉素，D正确。 故选A。 18. 心脏移植是挽救终末期心脏病患者生命唯一有效的手段，然而心脏移植过程中会发生缺血再灌注损伤（IRI），可能导致心脏坏死。研究发现，IRI通过促进Caspase8等一系列凋亡基因的表达，导致细胞凋亡最终引起器官损伤。而Caspase8基因合成的小干扰RNA（siRNA）可以使Caspase8基因沉默，从而能有效抑制IRI所致的器官损伤。下图1是利用猪的心肌细胞开展siRNA作用研究的示意图。研究人员根据Caspase8基因的碱基序列设计了三种序列分别导入猪心肌细胞，通过测定靶基因Caspase8的mRNA含量来确定最优序列，结果如图2所示。下列说法错误的是（ ） A. 构建重组质粒用于siRNA研究时，需使用的工具酶是限制酶和DNA连接酶 B. 与直接导入siRNA相比，通过重组质粒将siRNA对应DNA序列导入细胞的优点是直接降解靶基因 C. 根据图2结果，最优siRNA序列是序列2 D. 解决猪心脏移植人体的免疫排斥问题，可利用基因工程技术将免疫排斥有关的抗原基因敲除 【答案】B 【解析】 【分析】1、限制酶（切割目的基因和运载体）、DNA连接酶（连接切合后的目的基因和运载体）是构建重组质粒需要的工具酶； 2、分析题图：根据Caspase 8基因合成的小干扰RNA（siRNA），最终生成基因沉默复合物，该复合物与Gaspase 8 mRNA结合，影响其正常翻译，从而有效抑制IRI所致的器官损伤。 【详解】A、构建重组质粒需用限制酶切割目的DNA片段和质粒，再用DNA连接酶连接两者，A正确； B、siRNA通过沉默基因表达发挥作用，不直接降解DNA，且重组质粒可在宿主细胞内转录生成siRNA，实现长期、持续的表达，B错误； C、据图可知，在序列2作用下，PCR产物量最少，说明其抑制效果最好，是最优序列，C正确； D、通过基因编辑（如CRISPR）敲除猪细胞表面的人类免疫识别抗原，可减少排斥反应，D正确。 故选B。 19. 我国科学家屠呦呦因发现青蒿素而获得诺贝尔奖。下图中的实线方框表示青蒿细胞中青蒿素的合成途径，虚线方框表示酵母细胞中 FPP 合成酶及固醇的合成过程。由此可见，酵母细胞也能够产生合成青蒿酸的中间产物FPP。科学家向酵母菌导入相关基因培育产青蒿素酵母菌。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①需要RNA聚合酶催化，并以4种游离的核糖核苷酸为原料 B. 培育能产生青蒿素的酵母菌，必须导入FPP合成酶基因和ADS 酶基因 C. 由于ERG9酶等的影响，培育的产青蒿素酵母合成的青蒿素仍可能很少 D. 过程①②都遵循碱基互补配对原则，但碱基互补配对的方式不完全相同 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：图中实线方框中表示青蒿细胞中青蒿素的合成途径，青蒿素的合成需要FPP合成酶、ADS酶和CYP71AV1酶。虚线方框表示酵母细胞合成FPP合成酶及固醇的过程，酵母细胞只能合成FPP 合成酶，因此其不能合成青蒿素。 【详解】A、过程①是FPP合成酶基因转录形成mRNA，需要RNA聚合酶催化，并以4种游离的核糖核苷酸为原料，A正确； B、由图可知，酵母细胞能合成FPP合成酶，但不能合成ADS酶和CYP71AV1酶，即酵母细胞缺乏ADS酶基因和CYP71AV1酶基因，可见，要培育能产生青蒿素的酵母细胞，需要向酵母细胞中导入ADS酶基因、CYP71AV1酶基因，B错误； C、图示可知，由于ERG9酶等的影响，培育的产青蒿素酵母合成的青蒿素仍可能很少（细胞中有一部分FPP转化成固醇），C正确； D、过程①是转录，过程②是翻译，两者都遵循碱基互补配对，但碱基互补配对方式不完全相同，转录有A-U、T-A等，翻译有A-U、U-A等，D正确。 故选B。 20. 基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述正确的是（　　） A. 若某基因是从人的细胞内提取RNA经逆转录形成的，则该基因中含有内含子序列 B. 扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3'端进行子链合成 C. 利用DNA分子杂交技术可检测目的基因是否整合到植物受体细胞的染色体DNA上 D. 为了让目的基因在乳腺细胞中特异性表达，需用绵羊的乳腺细胞作为受体细胞 【答案】C 【解析】 【分析】将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因、启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 【详解】A、从人的细胞内提取RNA经逆转录形成的基因是cDNA，cDNA是去除了内含子等非编码序列的，所以该基因中不含有内含子序列，A错误； B、扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'端进行子链合成，而不是DNA连接酶，DNA连接酶是连接DNA片段的，B错误； C、检测目的基因是否整合到植物受体细胞的染色体DNA上，常用DNA分子杂交技术，C正确； D、为了让目的基因在乳腺细胞中特异性表达，需将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，受体细胞应该是绵羊的受精卵，而不是乳腺细胞，因为乳腺细胞是高度分化的细胞，全能性低，受精卵全能性高，可发育为完整的个体，D错误。 故选C。 21. 如图，科研人员发现，酵母菌的液泡膜上含有镉转运蛋白（YCF1），于是利用转基因技术将酵母菌的YCF1基因整合到杨树的染色体上，培育出能高效富集镉（Cd）的转基因杨树，种植在镉污染的土地上对土壤进行修复。下列相关叙述正确的是（ ） A. 利用PCR技术获取并克隆YCF1基因，需要设计2种碱基序列互补的引物 B. 利用图1中的质粒和YCF1基因构建目的基因表达载体，需要3种工具酶 C. 将含有YCF1基因的重组载体导入杨树组织细胞最常用的方法是显微注射法 D. 将YCF1基因导入杨树植株后，只需要在分子水平上检测其表达情况即可 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术。②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术。③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、利用PCR技术获取并克隆YCF1基因，需要两种引物，但两种引物不互补，A错误； B、构建基因表达载体需要2种限制酶（形成了黏性末端和平末端）、一种DNA连接酶等，B正确； C、将重组载体导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，而不是显微注射法，显微注射法通常用于动物细胞，C错误； D、在转基因植物的研究中，除了在分子水平上检测基因的表达情况外，还需要在个体和生态水平上进行检测，以确保转基因植物在实际环境中的功能和安全性，D错误。 故选B。 22. 下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是（　　） ①一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列； ②限制性核酸内切酶的活性受温度影响； ③限制性核酸内切酶能识别和切割RNA； ④限制性核酸内切酶可从原核生物中提取； ⑤限制性核酸内切酶的操作对象是原核细胞。 A. ②③ B. ③④ C. ③⑤ D. ①⑤ 【答案】C 【解析】 【详解】①限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，因此一种限制酶只能识别特定的碱基序列和切割一定的位点，①正确； ②酶活性通常受温度和PH值的影响，②正确； ③限制性核酸内切酶只能识别和切割DNA，不能识别和切割单链RNA，③错误； ④限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离纯化出来的，④正确； ⑤限制性核酸内切酶的操作对象是DNA，⑤错误。 故选C。 23. 抗体药物偶联物（ADC）是采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞精准的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如下图，有关叙述不正确的是（　　） A. ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合 B. ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡 C. 将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体 D. 对特定抗原筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养可获得单克隆抗体 【答案】C 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。 【详解】A、由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，故ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合，A正确； B、从图中可以看出，ADC与肿瘤细胞表面的抗原结合后，在受体介导下进入肿瘤细胞，然后在溶酶体的作用下被裂解，释放出具有生物活性的小分子药物，进而使肿瘤细胞死亡，B正确； C、将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得抗体，获得的抗体可能有多种，不是单克隆抗体，C错误； D、对特定抗原筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养可获得单克隆抗体，该种细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生所需抗体，D正确。 故选C。 24. 同源重组是两个DNA分子之间的同源序列进行交换的现象。研究人员借助单链DNA退火蛋白（SSAP）在细菌DNA复制过程中，将单链DNA（ssDNA）同源重组到细菌基因组上，其过程如图所示。 下列叙述错误的是（ ） A. SSAP和ssDNA的结合遵循碱基互补配对原则 B. SSAP发挥作用的过程中伴随着氢键的断裂和重新形成 C. SSAP可将外源基因整合到细菌基因组的特定位置上 D. 可利用同源重组的原理对细菌基因组进行改造 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质-一抗原抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、SSAP是单链DNA退火蛋白，它和ssDNA（单链DNA）的结合是蛋白质与DNA的结合，不是DNA与DNA的结合，不遵循碱基互补配对原则，A错误； B、在细菌DNA复制过程中进行同源重组时，需要将原有的DNA双链解开（涉及氢键断裂），然后单链DNA（ssDNA）在SSAP作用下同源重组到细菌基因组上（会有新的氢键形成），所以SSAP发挥作用的过程中伴随着氢键的断裂和重新形成，B正确； C、由题意知，可以借助SSAP将单链DNA（ssDNA）同源重组到细菌基因组上，若该单链DNA（ssDNA）为外源基因，可将其整合到细菌基因组的特定位置上，C正确； D、由于同源重组是两个DNA分子之间的同源序列进行交换，所以可利用这个原理对细菌基因组进行改造，D正确。 故选A。 25. 烟草在种植过程中易发生虫害。科研人员通过构建双价抗虫基因表达载体（如下图所示），将抗草地贪夜蛾基因（VIP3a）和抗褐飞虱基因（Bph14）转入烟草中，以期获得具有增强抗虫性的转基因烟草。下列有关培育转基因抗虫烟草的叙述，错误的是（　　） 注：Bar为除草剂抗性基因；P1、P2、P3为启动子；LB和RB为DNA的左右边界 A. 成功导入了双价抗虫基因表达载体的烟草，都具有很强的抗虫性 B. 在表达载体中的启动子P1、P2、P3上有RNA聚合酶识别的位点 C. 从基因表达载体的组成角度分析，T1、T2、T3的作用是终止转录 D. 可用PCR技术检测基因VIP3a和Bph14是否导入受体基因组中 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因应用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA应用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质应用抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、成功导入了双价抗虫基因表达载体，但并不意味着所有转基因烟草都具有很强抗虫性。基因表达受到多种因素的影响，如基因的整合位置、表达水平、环境条件等，A错误； B、启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点，启动转录过程，B正确； C、基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、标记基因和复制原点等，据此可推知，T1、T2、T3表示终止子，作用是终止转录，C正确； D、PCR技术可以用于检测特定基因是否存在于基因组中，因此可以用来检测VIP3a和Bph14是否成功导入受体基因组，D正确。 故选A。 26. PCR和琼脂糖凝胶电泳是基因工程中常用的两种技术，下列对其中所用试剂和操作的说法正确的是（　　） A. PCR所用微量离心管、微量移液器、枪头都要进行高压蒸汽灭菌 B. PCR扩增前，应根据待扩增DNA片段的长度设置合适的延伸温度 C. 需将扩增得到的PCR产物与内含核酸染料的缓冲液混合后进行加样 D. DNA分子较大时，可适当降低凝胶浓度来提高DNA分子的迁移速率 【答案】D 【解析】 【分析】PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。 【详解】A、微量移液器不需要进行高压蒸汽灭菌，微量离心管、枪头都要进行高压蒸汽灭菌，A错误； B、利用PCR技术进行扩增时，退火温度设定是成败的关键，退火温度过高会使引物无法与模板的碱基配对，所以退火温度的设定与引物有关；延伸时间的设定与扩增片段的长度有关，B错误； C、将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液（内含指示剂）混合，再用微量移液器将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内，C错误； D、DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比，分子越大则所受阻力越大，也越难于在凝胶孔隙中蠕行，因而迁移得越慢。当DNA分子较大时，可适当降低凝胶浓度来提高DNA分子的迁移速率，D正确。 故选D。 27. 如图为一种常用的大肠杆菌质粒pUC18的结构示意图，其中ori为复制原点，AmpR为氨苄青霉素抗性基因，lacZ基因能指导合成酶1，该酶能将无色染料X-gal变成蓝色。若目的基因插入的位点如下图所示，且将含有重组质粒的大肠杆菌用含有氨苄青霉素和无色染料X-gal的培养基培养，下列分析正确的是（　　） A. 所用限制酶的切割位点一般位于质粒的启动子和终止子之间 B. 插入目的基因时，破坏了lacZ基因，不利于后续筛选目的菌株 C. 含有该重组质粒的大肠杆菌在上述培养基上生长出的菌落呈蓝色 D. 若大肠杆菌细胞内导入了不含目的基因的空质粒，则不会形成菌落 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、启动子和终止子用于调控基因的表达，所用限制酶的切割位点一般位于质粒的启动子和终止子之间以保证目的基因正常表达，A正确； BC、插入目的基因时，通常会破坏lacZ基因，导致lacZ基因无法正常表达，lacZ基因编码的酶能将无色染料X-gal变成蓝色，因此破坏lacZ基因后，含有重组质粒的菌落将呈现白色，而不是蓝色。这有助于筛选出成功插入目的基因的菌株，BC错误； D、由于质粒含有氨苄青霉素抗性基因，这些菌落仍然能够在含有氨苄青霉素的培养基上生长，D错误。 故选A。 28. 科学家把从小鼠胚胎干细胞中分离获得的4个基因通过支原体导入已分化的小鼠成熟细胞中，发现成熟细胞返回到了未成熟的干细胞状态。这种干细胞（iPS细胞）又能在不同条件下分化形成神经细胞等多种细胞。下列叙述正确的是（　　） A. 可以通过花粉管通道法将重组DNA分子导入小鼠成熟细胞中 B. 该实验中支原体的作用是提供目的基因 C. iPS细胞分化为神经细胞的过程说明iPS细胞可以形成一个新的个体 D. iPS细胞分化形成的多种细胞所含核基因相同 【答案】D 【解析】 【分析】细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程．细胞分化的实质是基因的选择性表达。 【详解】A、花粉管通道法是将目的基因导入植物细胞的方法，不能用于将重组 DNA 分子导入小鼠成熟细胞中，A错误； B、该实验中支原体是作为载体，其作用是将目的基因导入受体细胞，而不是提供目的基因，B错误； C、iPS 细胞分化为神经细胞的过程只是细胞分化，没有形成完整的个体，不能说明 iPS 细胞可以形成一个新的个体，C错误； D、细胞分化的实质是基因的选择性表达，遗传物质不变，iPS 细胞分化形成的多种细胞所含核基因相同，D正确。 故选D。 29. 蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的DNA片段。在基因工程中可通过PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（　　） A. PCR过程中为了减少非特异性扩增，可考虑调节引物长度适当提高退火温度 B. 用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ C. 科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 D. 若电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，则用抗原-抗体结合法可在其乳汁检测到蛛丝蛋白 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程的主要步骤：①获取目的基因；②目的基因与运载体的结合；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、较短的引物可以更快地与模板结合，但可能降低特异性，较长的引物特异性较高，退火温度较高，A正确； B、据题图分析可知，磷酸基团为DNA的5'端，羟基为DNA的3'端，由于DNA聚合酶只能从5'→3'延伸子链，所以在PCR扩增中引物与DNA模板链的3'端结合进行延伸，故选择图中引物②和引物③，B错误； C、为了使蛛丝蛋白基因在羊的乳腺中特异性表达，科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，这样启动子可以启动蛛丝蛋白基因在乳腺细胞中表达，C正确； D、电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，意味着在其乳腺细胞中蛛丝蛋白基因可能会表达，用抗原 - 抗体结合法可能在其乳汁中检测到蛛丝蛋白，D正确。 故选B。 30. 某同学以新鲜菠菜叶作为材料，进行DNA的粗提取与鉴定实验。下列叙述错误的是（ ） A. 在研磨液中加入一定量的纤维素酶可提高研磨效率 B. 在漏斗中垫上纱布过滤菠菜叶研磨液，滤液静置后取上清液 C. 将粗提取的DNA在冷酒精中反复溶解、析出，可提高DNA纯度 D. 提取的DNA遇二苯胺沸水浴后呈现较深的蓝色，说明提取的DNA较多 【答案】C 【解析】 【分析】DNA的粗提取和鉴定的原理是：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质可以溶液酒精。（3）DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。（4）DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺反应生产蓝色。 【详解】A、植物细胞细胞壁的组成成分是纤维素和果胶，加入纤维素酶可溶解细胞壁，使细胞更易裂解释放内容物，A正确； B、过滤时，需在漏斗中垫上纱布，纱布孔径比滤纸大，可允许DNA分子通过，阻止其他杂质（如细胞碎片、蛋白质等）通过，B正确； C、DNA不溶于冷酒精，可溶于2mol/L的NaCl溶液中，分别在这两种溶液中反复析出和溶解DNA，可提高DNA的纯度，C错误； D、DNA遇二苯胺在沸水浴条件下呈现较深的蓝色，说明提取的DNA较多、纯度较高，D正确。 故选C。 31. 下图为不同限制酶的识别序列及切割位点（↓表示切割位点），下列叙述错误的是（　　） A. 用EcoRI切割DNA分子中部获得一个目的基因时，需断开的磷酸二酯键有2个 B. 用BglII切出的目的基因与BamHI切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开 C. 酶切时需要控制好温度、酶浓度、PH等因素 D. 图示4种限制酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列 【答案】A 【解析】 【分析】1、常用的运载体：质粒（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子）、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 2、作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。 3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的、粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 【详解】A、用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有4个，A错误； B、用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamHⅠ切割的质粒重组后，6个脱氧核苷酸对序列既不能被限制酶BglⅡ识别，也不能被BamHⅠ识别，所以不可能被这两种酶切开 ，B正确； C、酶的活性受温度、pH等因素影响，酶促反应需要适宜的条件，所以酶切时需要控制好温度、酶浓度、pH等因素，C正确； D、酶具有专一性，限制酶是专门切割DNA序列中一定部位的酶，所以图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列，D正确。 故选A。 32. 生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ） A. 生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等 B. 治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆个体，且需要严格的监管 C. “设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于前者需要在植入前对胚胎进行遗传学诊断 D. 转基因植物进入自然生态系统后可能因具有较强的“选择优势”而影响生物多样性 【答案】B 【解析】 【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。 生物武器的传播是把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。 【详解】A、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，它可以直接或者通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，A正确； B、治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的，需要在严格的监管下进行，B错误； C、“设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于前者在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断，C正确； D、转基因植物进入自然生态系统后可能因其具有较强的“选择优势”而占有较多的环境资源，使得其他物种的生存受到影响，从而严重影响生物多样性，D正确。 故选B。 33. 基因工程技术在迅猛发展，为人类的生产生活带来很多便利，但同时也带来了一些安全性问题，下列说法正确的是（　　） A. 乳腺生物反应器是将药用蛋白基因与药用蛋白启动子重组后导入动物的受精卵中 B. 将外源生长素基因导入鲤鱼中可提高鲤鱼的生长速度 C. 通过基因组编辑技术可以设计完美试管婴儿 D. 在转基因研究中，科学家通过阻断淀粉储藏使花粉失去活性来防止基因污染 【答案】D 【解析】 【分析】1、动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称； 2、乳腺生物反应器是最理想的生物反应器，它的优点：（1）药物蛋白只在乳腺内，对动物的生理活动不影响；（2）长期收集也不会对动物造成伤害；（3）产品成本低；（4）无论纯化还是使用都很方便。 【详解】A、乳腺生物反应器是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法导入哺乳动物的受精卵中，A错误； B、生长素是植物激素，对动物不起作用。将外源生长激素基因导入鲤鱼中，可提高鲤鱼的生长速度，B错误； C、目前的技术水平还无法通过基因组编辑技术设计出完美的试管婴儿，且“设计试管婴儿”存在伦理争议等诸多问题，C错误； D、在转基因研究中，科学家通过阻断淀粉储藏使花粉失去活性，这样花粉就不能正常受精，从而防止基因污染，D正确。 故选D。 34. 孤雌激活处理的实质是通过模拟精子进入次级卵母细胞时释放的信号，激活卵母细胞使其增殖分化，进而发育成早期胚胎。如图为通过孤雌激活处理和核移植处理获得的克隆猪过程。下列叙述错误的是（　　） A. 孤雌激活和重构胚激活采用的方法可能相同，激活的目的也相同 B. 孤雌激活处理获得的克隆猪与核移植获得的克隆猪遗传信息不同 C. 核移植中需将发育成熟的卵母细胞用微型吸管吸出细胞核和第二极体 D. 为获得多个克隆猪，可将发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚分割后移植 【答案】C 【解析】 【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。 2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。 3、胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症，如帕金森综合征.还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。 【详解】A、孤雌激活和重构胚激活均可采用物理或化学方法，激活的目的均是使细胞完成细胞分裂和发育进程，A正确； B、孤雌激活处理获得的克隆猪只有卵母细胞中的遗传信息，核移植获得的克隆猪具有父方细胞核中的遗传信息，遗传信息不同，B正确； C、体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞，需要选择发育至减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞，并用微型吸管吸出细胞核和第一极体，C错误； D、为获得多个克隆猪，可采用胚胎分割技术将发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚均分为几份后再进行移植，D正确。 故选C。 35. 研究人员将猴胚胎细胞（a）中的细胞核取出，移植入一雌猴的去核卵母细胞（b）中，得到重构胚（c），经培养获得胚胎并移植到另一雌猴（d）体内进一步发育，获得克隆猴（e）。 下列叙述正确的是（　　） A. e的细胞内的全部基因都来自a，b不提供基因 B. c经一系列增殖和分化形成e的过程中，细胞核起控制作用 C. d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件 D. e的形成过程中没经过受精作用，其体细胞中无同源染色体 【答案】B 【解析】 【分析】根据题意，克隆猴的获得过程不经过两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，其中猴的胚胎细胞（a）提供细胞核，去核的卵母细胞（b）提供细胞质。 【详解】A、重构胚（c）细胞核来自猴胚胎细胞（a），细胞核中含有大量基因；而去核卵母细胞（b）虽然去除了细胞核，但细胞质中也含有少量的基因（如线粒体DNA上的基因），这些基因也会进入重构胚（c）中。所以重构胚（c）的细胞内的基因并非全部来自a，b也提供少量基因，A错误； B、细胞核是细胞代谢和遗传的控制中心。在重构胚（c）经一系列增殖和分化形成克隆猴（e）的过程中，细胞核中的遗传物质决定了细胞的分裂、分化等生命活动的进程，对整个发育过程起控制作用，B正确； C、d为胚胎发育提供了适宜的环境等条件，但遗传物质主要来自重构胚（c）中的细胞核（即a提供的细胞核），d并不提供遗传物质，C错误； D、e的形成过程没有经过受精作用，属于无性生殖。但猴是二倍体生物，其体细胞中原本就存在同源染色体，克隆过程并没有改变细胞中染色体的组成，所以e的体细胞中有同源染色体，D错误。 故选B。 36. 下列关于植物组织培养、微生物培养、动物细胞培养过程的描述，正确的是（　　） A. 马铃薯琼脂培养基的碳源一般是马铃薯滤液和葡萄糖，MS培养基的碳源通常是蔗糖 B. 哺乳动物细胞培养的温度在36.5℃左右，多数动物细胞生存的适宜pH为7.1-7.4 C. 纯化微生物、植物组织培养和动物细胞培养所用的都是固体培养基 D. 植物组织培养过程中，愈伤组织细胞的代谢类型为自养需氧型 【答案】A 【解析】 【分析】1、动物细胞培养在培养过程中要求一定的培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌，②添加一定量的抗生素，③定期更换培养液，以清除代谢废物；（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；（3）适宜的温度和PH；（4）气体环境。 2、植物组织培养培养条件：①在无菌条件下进行人工操作。②保证水、无机盐、碳源（常用蔗糖）、氮源（含氮有机物）、生长因子（维生素）等营养物质的供应。③需要添加一些植物生长调节物质，主要是生长素和细胞分裂素。④愈伤组织再分化到一定阶段，形成叶绿体，能进行光合作用，故需光照。 3、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A、马铃薯琼脂培养基常用于真菌的培养，其碳源一般是马铃薯滤液和葡萄糖；MS培养基是植物组织培养常用的培养基，其碳源通常是蔗糖，A正确； B、微生物细胞培养的温度因微生物种类不同而有所差异，并不都是在36.5℃左右；多数动物细胞生存的适宜pH为7.2 - 7.4，B错误； C、纯化微生物所用的是固体培养基，以便于分离单菌落；植物组织培养所用的一般是固体培养基；但动物细胞培养所用的是液体培养基，因为动物细胞在液体环境中才能更好地生长和代谢，C错误； D、植物组织培养过程中，愈伤组织细胞没有叶绿体，不能进行光合作用，其代谢类型为异养需氧型，而不是自养需氧型，D错误。 故选A。 37. 鱼腥草中的次生代谢物萜类物质具有抗过敏的作用，可用于治疗过敏性荨麻疹，实验人员通过植物细胞悬浮培养技术可大量获取鱼腥草细胞中的萜类化合物。下列说法正确的是（ ） A. 鱼腥草中的萜类化合物不是细胞代谢所必需的营养物质 B. 培养过程中所用的外植体一般取自鱼腥草的成熟区细胞 C. 培养过程中悬浮细胞的密度越大越有利于获得更多萜类化合物 D. 该过程体现出植物细胞具有全能性，培养基中需要添加适量激素 【答案】A 【解析】 【分析】植物代谢会产生一些一般认为不是植物基本的生命活动所必需的产物—次生代谢物。次生代谢物是一类小分子有机化合物（如酚类、萜类和含氮化合物等），在植物抗病、抗虫等方面发挥作用，也是很多药物、香料和色素等的重要来源。 【详解】A、萜类化合物属于植物的次生代谢产物，它们不是细胞生长和维持基本生命活动所必需的营养物质，而是在特定条件下由植物产生的，A正确； B、在植物细胞培养中，通常会选择具有高分裂活性的分生组织作为外植体，因为这些细胞更容易在体外培养条件下增殖和分化，而不是选择鱼腥草的成熟区细胞，B错误； C、在植物细胞悬浮培养中，如果细胞密度过大，会导致营养物质和氧气的供应不足，从而限制细胞的增殖，C错误； D、该过程属于植物细胞培养，没有体现植物细胞全能性，D错误。 故选A。 38. 科研人员通过改良发酵工艺“把玉米变成衣服”，即利用大肠杆菌将玉米转化为戊二胺，再将戊二胺转化为尼龙布，流程如图所示。其中，戊二胺不能从大肠杆菌体内排出，且对细胞有毒害作用。下列相关分析错误的是（　　） A. 该工业生产中要使用淀粉酶、纤维素酶等酶制剂 B. 发酵过程中，应将培养液置于pH中性或接近中性的条件下培养 C. 发酵时定期更换培养液，能降低戊二胺对大肠杆菌的毒害 D. 发酵结束后，可采用提取、分离和纯化措施来获得戊二胺 【答案】C 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。 【详解】A、玉米籽粒主要含淀粉，非粮原料(秸秆、玉米芯)主要含纤维素和果胶，淀粉酶、果胶酶和纤维素酶等酶制剂可以帮助分解玉米原料为葡萄糖，以利于后续发酵过程的进行，A正确； B、发酵过程利用的菌种是大肠杆菌(一种细菌)，大肠杆菌适宜在pH中性或接近中性的条件下培养，B正确； C、根据题意，戊二胺因不能排出大肠杆菌而对其有毒害作用，所以可能需要通过基因工程改造大肠杆菌，使其能够耐受或排出戊二胺，仅定期更换培养液不能解决戊二胺对大肠杆菌的毒害作用，C错误； D、 根据题意，发酵产品是大肠杆菌的代谢产物，不是大肠杆菌细胞本身，所以需根据戊二胺的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得戊二胺，D正确。 故选C。 39. 流行病学调查结果显示，我国胃病患者人数众多，这与幽门螺杆菌（Hp）密切相关。Hp的脲酶活性较高，这种酶能够将尿素水解成氨和二氧化碳，产生的氨可以中和胃酸，从而为细菌提供一个更适宜的生长环境。研究人员在胃病患者体内采集样本并制成菌液后，对其进行分离培养。实验基本步骤如下：配制培养基→灭菌→倒平板→接种→培养→观察。下列叙述错误的是（ ） A. 常见的灭菌方法有湿热灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌 B. 培养基灭菌后不能立即倒平板，待平板冷凝后应将其倒置 C. 以尿素为唯一氮源的培养基可以初步筛选出Hp D. 脲酶分解尿素后会使培养基pH降低 【答案】D 【解析】 【分析】实验室常用的灭菌方法： ①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。 ②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。 ③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。 【详解】A、常见的灭菌方法确实有湿热灭菌（如高压蒸汽灭菌）、灼烧灭菌和干热灭菌，A正确； B、培养基灭菌后不能立即倒平板，因为温度过高无法操作，且温度过高可能会影响培养基中的成分，待平板冷凝后将其倒置，这样可以防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，B正确； C、Hp 能产生脲酶将尿素分解，所以以尿素为唯一氮源的培养基可以初步筛选出能利用尿素的 Hp，C正确； D、脲酶分解尿素产生氨，使培养基pH升高，D错误。 故选D。 40. 如图为哺乳动物受精过程示意图，据图分析，下列说法错误的是（　　） A. 甲图中卵子已经成熟到MII期，精子已经获能 B. 图中①是透明带，精子接触透明带后会引起透明带反应 C. ②是卵细胞膜，卵细胞膜反应可以防止多精入卵 D. ⑤是雄原核，⑦是雌原核，充分发育后，其核膜会消失 【答案】B 【解析】 【分析】题图分析：①表示透明带，②表示卵细胞膜，③表示核，④表示第一极体，⑤表示雄原核，⑥表示第一极体，⑦表示雌原核，⑧表示放出第二极体。 【详解】A、据图可知，甲图中精子已经穿越透明带，说明精子和卵子已经具备了受精的能力，也说明了卵子已经成熟到MII期，且精子也已经获能，A正确； B、甲图中①表示透明带，精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带会迅速发生生理反应，即透明带反应，B错误； C、②是卵细胞膜，精子入卵，会发生卵细胞膜反应，可以拒绝其他精子进入卵内，C正确； D、⑤是雄原核，⑦是雌原核，雌、雄原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，D正确。 故选B。 41. 2023年11月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌合猴，该研究部分过程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各种组织中，高达 90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。下列有关叙述正确的是（　　） （注：GFP 指表达绿色荧光标记蛋白，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织中的分化、分布情况。） A. 代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理 B. 图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术 C. 具有清晰 GFP 信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴 D. 由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 【详解】A、促性腺激素是蛋白质，饲喂含促性腺激素的饲料时促性腺激素会被消化，失去其功能，A错误； B、据图可知，图示过程没有涉及体外受精技术，B错误； C、具有清晰GFP信号的囊胚，说明此囊胚被成功导入供体猴ES细胞，才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴，C正确； D、据图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中既有供体猴的细胞、也有受体猴的细胞，故细胞中的核遗传物质源于受体猴或源于供体猴，D错误。 故选C。 42. 双抗体夹心法是医学上常用的检测抗原含量的方法，流程如图所示。其中固相抗体是经由固相载体连接后的单克隆抗体，酶标抗体是一种具酶活性的抗体，二者可与抗原的不同部位特异性结合。下列有关分析错误的是（ ） A. 固相抗体的使用量应明显多于待测抗原的数量 B. 酶标抗体作用是与待测抗原结合并催化指示底物分解 C. 制备相应单克隆抗体时需要使用动物细胞培养技术 D. 若不洗去游离的酶标抗体会导致测量结果偏低 【答案】D 【解析】 【分析】由图可知，酶标抗体可与抗原特异性结合，并催化指示底物分解。 【详解】A、固相载体连接后的单克隆抗体，具有特异性，故其使用种类（量）应明显多于待测抗原的数量才能识别并结合更多的抗原，A正确； B、由图可知，酶标抗体可与抗原特异性结合，并催化指示底物分解，B正确； C、制备相应单克隆抗体时需要使用动物细胞培养技术，培养杂交瘤细胞，C正确； D、若不洗去游离的酶标抗体，酶标抗体持续催化底物分解，会导致测量结果偏高，D错误。 故选D。 43. 细胞内DNA复制时，一条新子链按5′→3′方向进行连续复制，而另1条链也按5′→3′方向合成新链片段一冈崎片段(如图所示)。已知DNA聚合酶不能直接起始DNA新链或冈崎片段的合成，需先借助引物酶以DNA为模板合成RNA引物，DNA聚合酶再在引物的3′—OH上聚合脱氧核苷酸。当DNA整条单链合成完毕或冈崎片段相连后，DNA聚合酶再把RNA引物去掉，换上相应的DNA片段。人体细胞内的DNA复制过程(如图)和体外进行PCR过程(如图)分别如下，则下列叙述中错误的是（ ） A. 引物酶、DNA聚合酶、连接酶都会催化磷酸二酯键的形成 B. 上述两个过程中的DNA聚合酶都只能从子链的5′端→3′端延伸 C. 细胞内DNA复制时只有一条子链可以连续复制，而PCR时所有子链都是连续复制 D. 细胞内DNA复制所需引物是细胞自行合成的，PCR过程需要加入引物，子链合成后引物都会被切掉 【答案】D 【解析】 【分析】DNA复制需要模板、原料、能量、酶等条件。DNA复制是边解旋边复制、半保留复制。DNA复制时，子链只能从5’端向3’端延伸，两条子链的延伸方向相反。 【详解】A、引物酶能合成 RNA 引物，其本质是形成磷酸二酯键连接核糖核苷酸；DNA 聚合酶连接脱氧核苷酸，也是形成磷酸二酯键；连接酶连接冈崎片段，同样是催化磷酸二酯键的形成，因此引物酶、DNA聚合酶、连接酶都会催化磷酸二酯键的形成，A正确； B、DNA聚合酶催化DNA的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸，B正确； C、在细胞内 DNA 复制时，只有一条子链可以连续复制，另一条不连续，在 PCR 过程中，两条子链都是连续复制的，C正确； D、细胞内 DNA 复制所需引物是细胞自行合成的，PCR 过程需要加入引物，引物是不会被切掉的，D错误。 故选D。 44. 免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述错误的是（ ） A. 图示抗原检测过程发生两次抗原与抗体的结合 B. 图中标记抗体2的DNA一般是牛细胞中的DNA片段 C. 图示过程中三次冲洗的目的均不同 D. 免疫PCR技术间接放大了微量抗生素，以达到可检测水平 【答案】B 【解析】 【分析】免疫PCR是一种抗原检测系统，将一段已知序列的DNA片段标记到抗体2上，通过抗原抗体的特异性识别并结合，抗体2会和固定抗体1、抗生素形成复合物“固定抗体1—抗生素—抗体2”，再用PCR方法将这段DNA进行扩增，通过检测PCR产物的量，即可推知固定抗体1上吸附的抗生素的量。 【详解】A、首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，此处发生第一次抗原与抗体的结合（牛乳与抗体1的结合），再加入DNA标记的抗体2，抗体2与牛乳进行第二次抗原与抗体的结合，A正确； B、抗生素主要是由微生物产生的，图中标记抗体2的DNA一般是微生物中与抗生素相关的DNA片段，B错误； C、第一次冲洗是洗去未结合的抗体1，第二次冲洗是洗去未结合的牛乳，第三次冲洗是洗去未结合的抗体2，C正确； D、微量抗原抗体反应，是通过PCR技术扩增抗体2上连接的DNA，最后通过检测扩增产物—DNA的量来确定抗生素的量的方法，因此抗原、抗体的数量可通过PCR技术间接扩增放大，D正确。 故选B。 45. 花椰菜(2n=18)种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰(2n=14)具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列有关叙述正确的是（ ） 注：1为花椰菜，Ⅱ为紫罗兰：1、2、3、4、5为待测植株 A. 图1培育杂种植株所用的技术体现了细胞膜具有一定流动性原理和基因突变原理 B. ②过程可用电融合法或灭活病毒诱导细胞融合，杂种细胞再生出细胞壁是成功的标志 C. 只考虑细胞两两融合，图1培育出的植株体细胞中最多含有72条染色体，减数分裂时最多可形成18个四分体 D. 可将病菌悬浮液均匀喷施于图2中的3和5植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株 【答案】C 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质；植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍。 【详解】A、植物体细胞杂交技术将杂种细胞培养成完整植株，体现了植物细胞全能性；两个物种细胞的融合体现了细胞膜流动性原理和染色体变异原理，A错误； B、植物细胞不能用灭活病毒诱导细胞融合，杂交细胞再生出新的细胞壁是植物细胞融合成功的标志之一，发育成完整植株是植物体细胞杂交技术成功的标志，B错误； C、由于细胞随机融合，只考虑细胞两两融合，若两个花椰菜细胞融合则最多有36条染色体，在有丝分裂后期最多有72条染色体，减数分裂时最多可形成18个四分体，C正确； D、根据图谱分析4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，是杂种植株，可将病菌悬浮液均匀喷施于4、5号杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株，D错误。 故选C。 二、非选择题(共50分) 46. 如图表示果酒和果醋生产过程中的物质变化情况，请回答下列与果酒和果醋制作相关的问题。 （1）过程①②均发生在酵母菌的_______________________中。 （2）过程④是醋酸菌在____________________时，将酒精变成乙醛，再将乙醛变成醋酸；过程⑤是醋酸菌在_________时，将葡萄糖转变成醋酸。 （3）果酒的制作离不开酵母菌，家庭制作葡萄酒时，菌种主要来自________________。制作果酒时，温度应该控制在___________________。 （4）制作果酒的条件是先通气后密封。先通入无菌空气的目的是___________________；能分解尿素的细菌属于__________________(填“自养“或“异养”)型微生物 （5）若要提高果酒的品质，发酵过程中关键要控制好哪些条件?_________________。(答出2点) （6）在酵母菌实验中，盛有水或培养基的摇瓶通常采用___________________的方法进行灭菌。 【答案】（1）细胞质基质 （2） ①. 缺少糖源、氧气充足 ②. 氧气、糖源充足 （3） ①. 附着在葡萄皮上的野生型酵母菌 ②. 18～30℃ （4） ①. 让酵母菌在有氧条件下大量繁殖 ②. 异养 （5）适宜的温度、pH、通气量等 （6）高压蒸汽灭菌法 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、分析题图：图示为果酒和果醋生产过程中的物质变化情况，其中①表示细胞呼吸的第一阶段；②表示无氧呼吸的第二阶段；③表示有氧呼吸的第二和第三阶段；④⑤表示醋酸发酵。 【小问1详解】 过程①为细胞呼吸的第一阶段，发生在酵母菌的细胞质基质中；过程②为无氧呼吸的第二阶段，也发生在酵母菌的细胞质基质中。 【小问2详解】 过程④是醋酸菌在缺少糖源，氧气充足时，将酒精变成乙醛，再将乙醛变成醋酸；过程⑤是醋酸菌在氧气，糖源充足时，将葡萄糖转变成醋酸。 【小问3详解】 家庭制作葡萄酒时，菌种主要是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌，酵母菌的最适生长温度为18～30℃，故制作果酒时，温度应该控制在18～30℃。 【小问4详解】 在制作果酒时，先通气的目的是让酵母菌在有氧条件下大量繁殖，后密封的目的是让酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精，故制作果酒时要先通气后密封；能分解尿素的细菌属于异养型微生物，只能利用现成的有机物，不能将无机物转变为有机物。 【小问5详解】 若要提高果酒的产量，发酵过程中要控制好适宜的温度、pH、通气量等。 【小问6详解】 盛有水或培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，高压蒸汽灭菌，用高温加高压灭菌，不仅可杀死一般的细菌、真菌等微生物，对芽孢、孢子也有杀灭效果，是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。 47. 紫杉醇是一种从红豆杉树皮中分离提纯的天然抗癌药物。为快速检测紫杉醇，研究人员利用细胞工程技术制备了抗紫杉醇单克隆抗体，制备过程如图所示。回答下列问题： （1）抗紫杉醇单克隆抗体的获得所涉及的生物技术有__________________(答出两种)。 （2）过程①用化学方法诱导融合时可选用____________，能得到___________类两两融合的细胞。 （3）为获得杂交瘤细胞，应用特定的选择培养基对细胞甲进行筛选，然后通过专一抗体检测和克隆化培养获得______________的杂交瘤细胞。若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO₂的培养箱中培养，CO₂的作用是__________。单克隆抗体的优点有___________________。 （4）紫杉醇是红豆杉产生的一种代谢产物，欲利用植物细胞培养获得大量的紫杉醇，应将红豆杉的外植体培育到愈伤组织阶段，原因是____________________________________。 （5）研究人员用少量果胶酶处理红豆杉愈伤组织获取单细胞，由愈伤组织培养阶段转入细胞悬浮培养阶段。按照物理性质划分，悬浮培养基为_______________培养基，更有利于细胞的生长。 【答案】（1）动物细胞培养和动物细胞融合 （2） ①. 聚乙二醇##PEG ②. 3##三 （3） ①. 既能大量增殖，又能产生抗紫杉醇抗体 ②. 维持培养液的pH ③. 特异性强、灵敏度高、可大量制备 （4）愈伤组织的细胞分裂快，代谢旺盛 （5）液体 【解析】 【分析】制备单克隆抗体的过程，首先要通过融合获得杂交瘤细胞，后需要两次对细胞进行筛选：第一次是在特定的选择性培养基上，将杂交瘤细胞筛选出来；由于筛选出的杂交瘤细胞有很多种，因此第二次筛选的目的是通过专一抗体检测阳性和克隆化培养，从很多种杂交瘤细胞中将既能大量增殖、又能产生抗紫杉醇的抗体的杂交瘤细胞筛选出来。 最终筛选出来的杂交瘤细胞，可以将其注射到小鼠腹腔内进行体内培养，也可以在体外培养液中进行大规模培养。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点。 【小问1详解】 据图分析，取免疫小鼠的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合，采用的是动物细胞融合技术，在融合前和筛选杂交瘤细胞的过程中均需要采用动物细胞培养技术来培养相应的细胞，故抗紫杉醇单克隆抗体的获得所涉及的生物技术有动物细胞培养和动物细胞融合。 【小问2详解】 过程①用化学方法诱导细胞融合时可选用聚乙二醇（PEG），由于融合具有随机性，故能得到3类融合细胞，即瘤-瘤融合、B-B融合和B-瘤融合。 【小问3详解】 制备单克隆抗体的过程中至少需要两次对细胞进行筛选：第一次是在特定的选择性培养基上，将杂交瘤细胞筛选出来；由于筛选出的杂交瘤细胞有很多种，因此第二次筛选的目的是通过专一抗体检测阳性和克隆化培养，从很多种杂交瘤细胞中将既能大量增殖、又能产生抗紫杉醇的抗体的杂交瘤细胞筛选出来。在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，CO2的作用是维持培养液的pH。单克隆抗体的优点有特异性强、灵敏度高、可大量制备。 【小问4详解】 紫杉醇是红豆杉产生的一种代谢产物。由于愈伤组织的细胞分裂快，代谢旺盛，所以，欲利用植物组织培养获得大量的紫杉醇，应将红豆杉的外植体培育到愈伤组织阶段。 【小问5详解】 按照物理性质划分，悬浮培养基为液体培养基，更有利于细胞的生长，原因是细胞容易从液体培养基中获取营养，排出代谢产物。 48. 如图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题。 （1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别是方法Ⅰ涉及的生殖方式为__________________________生殖，方法Ⅱ涉及的生殖方式为________________________生殖。 （2）过程①应用的技术是________。克隆牛F的核基因来源于____________________(填“奶牛B”“奶牛C”或“奶牛D”)。 （3）过程②常用________________________(激素名称)处理，目的是使奶牛B______________________，从奶牛B体内获得的卵母细胞需要培养到_____________________(时期)才能与获能的精子结合。 （4）方法Ⅰ中，B牛和D牛需进行___________________，以确保供体和受体母牛具有相同的生理状态。 （5）为了提高早期胚胎的利用率，可以对早期胚胎进行_______________________________，若欲在胚胎移植前进行性别鉴定，需取_________________________细胞进行检测。 【答案】（1） ①. 有性 ②. 无性 （2） ①. 核移植技术 ②. 奶牛C （3） ①. 促性腺激素 ②. 超数排卵 ③. 减数第二次分裂中期（M Ⅱ中期） （4）同期发情处理  （5） ①. 胚胎分割  ②. 滋养层 【解析】 【分析】分析题图：图示是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法．方法Ⅰ是采用体外受精技术获得试管牛E的过程，因此试管牛E属于有性生殖产物；方法Ⅱ是采用核移植技术获得克隆牛F的过程，因此克隆牛F属于无性生殖产物。 【小问1详解】 采用方法I培育试管牛时采用了体外受精技术，因此属于有性生殖；采用方法Ⅱ培育克隆动物时采用了核移植技术，因此属于无性生殖。 【小问2详解】 图中①过程采用核移植技术；据图可知，克隆牛F的细胞核来自奶牛C的乳腺细胞，故克隆牛F的核基因来源于奶牛C。 【小问3详解】 过程②用促性腺激素处理可使B牛超数排卵，以获得更多卵子；从B牛体内获得的卵母细胞不能直接与精子结合，需要培养到减数第二次分裂中期才能与获能的精子结合。 【小问4详解】 方法Ⅰ中，B牛（核受体）和D牛（代孕母牛）需进行同期发情处理，以达到相同的状态。 【小问5详解】 为了提高优质胚胎利用率，可以采用胚胎分割的方法将早期胚胎分割成若干等份，增加子代数量。内细胞团将会发育成完整的胚胎，若欲在胚胎移植前进行性别鉴定，需取滋养层细胞进行检测，避免对内细胞团细胞进行破坏。 49. 幽门螺杆菌(HP)与胃炎、胃食管反流病等多种疾病有关。Ipp20基因作为幽门螺杆菌的核心功能基因，在疫苗研发中具有重要价值。实验人员以Ipp20基因为目的基因，通过基因工程制备HP疫苗的过程如图所示。回答下列问题： （1）据图分析，使用限制酶切割质粒时_______________________(填“能”或“不能”)选择限制酶BamHⅠ，理由是__________________。 （2）过程①需要的原料是_____________________。为了使质粒和Ipp20基因正确连接，在设计引物时需要在引物的_______________(填“5”或“3””)端添加__________________两种限制酶的识别序列，便于过程②构建基因表达载体和后续筛选。 （3）PCR扩增目的基因需在一定的缓冲溶液中进行，PCR 反应缓冲溶液中一般要添加Mg²⁺,作用是________________。 （4）为了筛选成功导入重组质粒的大肠杆菌，过程④将大肠杆菌培养在含有___________________的培养基A中，能在其中生长的大肠杆菌即可能导入了重组质粒的大肠杆菌。初步筛选出的大肠杆菌存在导入空质粒(不含有Ipp20基因)或导入重组质粒的情况。实验人员用影印培养法(将培养基A上的菌落全部转移到丝绒面上，再将丝绒面印在培养基B上)来进行筛选。结合图中信息分析，培养基B添加了____________________，能用于制备HP疫苗的大肠杆菌菌落是_____________________(填图中数字)。 【答案】（1） ①. 不能 ②. 图中质粒至少存在两个BamHI的切割位点，使用BamHI切割质粒，会导致质粒被切割成多个片段，破坏质粒的完整性和功能 （2） ①. 脱氧核苷酸 ②. 5' ③. Xho Ⅰ和Xba Ⅰ (或Pst Ⅰ和Xba Ⅰ) （3）激活耐高温的DNA聚合酶（Taq酶） （4） ① 潮霉素 ②. 氯霉素 ③. 3、5 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： (1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定：可利用PCR技术进行分子水平的检测，还可以进行个体水平的检测。 【小问1详解】 结合图示质粒分析，图中质粒至少存在两个BamHI位点，使用BamHI切割质粒，会导致质粒被切割成多个片段，破坏质粒的完整性和功能，因此不能使用BamHI切割质粒。 【小问2详解】 过程①为PCR扩增，扩增产物是DNA，合成DNA所需的原料是脱氧核苷酸。PCR扩增是是从引物的3'开始的，限制酶的识别序列应该在引物的5'。BamH I会破坏质粒，不能选择该酶来切割，XhoⅠ和PstⅠ不能同时选，会保留两个标记基因，不方便筛选，故必须选择XbaⅠ，因此应选择限制酶组合为XhoⅠ和XbaⅠ或PstⅠ和XbaⅠ，这样既能检测质粒进入受体细胞还能判断目的基因正确插入质粒，所以在引物序列中增加XhoⅠ和XbaⅠ或PstⅠ和XbaⅠ两种限制酶的识别序列，便于过程②构建基因表达载体和后续筛选。 【小问3详解】 PCR反应缓冲溶液中添加 Mg2+的作用是激活耐高温的DNA聚合酶（Taq酶），使Taq酶能够发挥催化作用，以解开的单链DNA为模板，利用四种脱氧核苷酸合成新的DNA链。 【小问4详解】 根据培养基A、B呈现菌落的差异可知，选择限制酶切割质粒时的组合可能是XhoI、XbaI或PstI、XbaI（若选择XhoI、PstI，则质粒上的潮霉素抗性基因和氯霉素抗性基因均未被破坏，在培养基A、B上添加潮霉素、氯霉素的结果相同，无法起到筛选的作用）。因此潮霉素抗性基因得以保留，氯霉素抗性基因被破坏，培养基A上添加潮霉素，培养基B上添加氯霉素，其中成功导入了目的基因的表达载体的大肠杆菌在培养基A上能生存，在培养基B上不能生存，能用于制备HP疫苗的大肠杆菌菌落是3和5。 50. 从正常人的血浆中提取的血清白蛋白（HSA）在临床上应用很广泛，有重要的医用价值。下图是通过相关技术获取重组HSA示意图，其中报告基因表达的产物能催化无色物质K呈现蓝色。据图回答下列问题： （1）若要体外获得大量的人血清白蛋白基因，采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系中需加入引物，引物的作用是______，若目的基因扩增3代，则共用引物______个。PCR完成以后，常采用________法来鉴定PCR的产物。 （2）过程①中需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让_______进入植物细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含______的培养基上筛选出转化的植物细胞。 （3）为检测HSA基因的表达情况，可提取受体细胞的蛋白质，用_______进行抗原—抗体杂交实验。 （4）科学家培养出一种转基因山羊，其膀胱上皮细胞可以合成人血清白蛋白并分泌到尿液中。其培育方法中将重组质粒通过_______法导入山羊的受体细胞时，常选用受精卵作为受体细胞的主要原因是_______，人血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮细胞中表达的原因是______。 【答案】（1） ①. 使DNA聚合酶能够从引物的 3'端开始连接脱氧核苷酸 ②. 14 ③. 琼脂糖凝胶电泳 （2） ①. T—DNA ②. 无色物质K （3）抗人血清白蛋白的抗体 （4） ①. 显微注射 ②. 受精卵具有发育的全能性 ③. 生物界共用一套遗传密码子 【解析】 【分析】1、基因工程技术的基本步骤是：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 2、利用PCR技术扩增DNA时所需的条件：引物、模板DNA（目的基因）、原料（4种脱氧核糖核苷酸）和耐热性的DNA聚合酶等。 【小问1详解】 在PCR反应体系中需加入引物，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，若目的基因扩增3代，DNA有23=8个，DNA单链有8×2=16个，去除两条模板链，则共用引物14个。PCR完成以后，常采用琼脂糖凝胶电泳法来鉴定PCR的产物。 【小问2详解】 该方法为农杆菌转化法，过程①中需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在通过农杆菌的转化作用，让T-DNA进入植物细胞；由于报告基因表达的产物能催化无色物质K呈现蓝色，所以除尽农杆菌后，还须转接到含无色物质K的培养基上筛选出转化的植物细胞。 【小问3详解】 为检测HSA基因是否成功表达，可提取受体细胞的蛋白质（相当于抗原，能与特定的抗体结合），用抗人血清白蛋白的抗体进行杂交实验，若呈阳性，则说明HSA基因成功表达。 【小问4详解】 将重组质粒通过显微注射法导入动物的受体细胞时，常选用受精卵作为受体细胞，主要原因是动物受精卵具有发育的全能性，由于生物界共用一套遗传密码子，所以人血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮细胞中表达出相应的蛋白质。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 石嘴山三中2024——2025学年第二学期高二年级生物第二次月考试题 一.单项选择题(1-40小题，每小题1分，41-45小题，每小题2分，共50分) 1. 下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（　　） A. 用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异 B. 植物组织培养的培养基中不需要添加有机物 C. 植物组织培养利用了细胞的全能性，动物细胞培养也利用了该原理 D. 植物组织培养在再分化时需在有光条件下进行，动物细胞培养对光照无要求 2. 我国首例克隆猫“大蒜”的培育过程:从供体猫大腿部采集一块皮下组织,提取体细胞与去核的卵母细胞融合,构建重组胚胎,再植入代孕猫的子宫内,直至分娩。下列说法正确的是（ ） A. 体细胞的分化程度比胚胎细胞的高,但不影响通过核移植获得克隆动物的难度 B. 去除卵母细胞的细胞核时,可通过显微操作技术,用吸管吸出细胞核 C. 用电融合法使体细胞与卵母细胞融合后,不需要再对重组胚胎进行激活 D. 克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞有全能性,其遗传物质全部来自供体细胞 3. 中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术，人们喜欢的果酒、果醋都是发酵食品。下列关于果酒和果醋制作的叙述，错误的是（　　） A. 家庭酿造果酒时，发酵液装瓶时要留约1/3空间 B. 果酒制作完成后，可以通过改变发酵条件继续进行果醋发酵 C. 先酿制果酒再酿制果醋，其发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率 D. 果酒制作过程中发酵液pH逐渐升高，果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低 4. 下列有关微生物培养与应用技术的叙述，正确的是（ ） A. 培养微生物所用的培养基中都必须含有水、无机盐、碳源和氮源等基本营养成分 B. 若要检测饮水机的直饮水中大肠杆菌是否超标，待检测水样需要经过灭菌后再检测 C. 采用稀释涂布平板法接种后，不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单菌落 D. 从土壤中分离分解尿素的微生物后，利用含酚红的尿素培养基可作进一步鉴定 5. 在集市上，摆满了各种传统发酵食品。色泽诱人的果酒散发着醉人的香气，果醋透着淡淡的果香与醋酸味。还有腐乳散发着独特的酱香，泡菜则有着清爽的酸辣口感。这些都是传统发酵技术的成果，下列叙述正确的是（　　） A. 泡菜腌制时间越长，亚硝酸盐含量越高，宜尽早食用 B. 腐乳味道鲜美，主要是毛霉等原核生物产生的脂肪酶发挥了作用 C. 传统发酵以混合菌种的液体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的 D. 家庭制作果酒、果醋、泡菜这三种产品时，发酵后期均为酸性环境 6. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是（　　） A. 细胞工程均以细胞生物学或分子生物学为基本原理进行操作 B. 人们可以有目的地通过在分子水平上进行操作，从而获得相应的细胞产品 C. 将植物细胞的叶绿体导入酵母菌细胞中，这属于细胞工程的研究范畴 D. 细胞工程的最终目的都是获得相应的特定细胞、组织、器官或个体 7. 研究者从酵母菌中获取控制细胞色素氧化酶（存在于线粒体）的某一段肽合成的DNA片段，将其与小鼠的二氢叶酸还原酶（只存在于细胞质基质）基因融合。重组基因在酵母菌表达后，在线粒体中发现了二氢叶酸还原酶。该研究的目的是（ ） A. 获得融合蛋白 B. 研究该段肽的作用 C. 引导二氢叶酸还原酶进入线粒体 D. 研究重组基因的功能 8. 天然β-淀粉酶耐热性较差，难以满足工业化生产需求。通过PCR对天然β-淀粉酶基因进行改造，将其导入大肠杆菌表达后，获得了一种耐高温的β-淀粉酶。与天然酶相比，改造后的酶在第476位发生了氨基酸替换，由天冬氨酸改变为天冬酰胺。下列叙述错误的是（ ） A. 天冬酰胺与天冬氨酸的R基不同，该替换导致酶的空间结构改变 B. 根据新的氨基酸序列可逆推出唯一对应的基因编码序列 C. PCR技术在此过程中实现了对β-淀粉酶基因的定点突变 D. 这种通过设计并合成新蛋白质的技术属于蛋白质工程 9. 生物技术与工程学相结合，可研究、设计和加工生产各种生物工程产品。下列有关叙述正确的是（ ） ①由于外植体在植物组织培养过程中不感染病毒，用任何外植体都可制备脱毒苗 ②由 iPS 细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用 ③用转基因动物作为器官移植的供体时，由于导入调控基因表达的DNA序列，而不是目的基因，因此无法抑制抗原的合成 ④动物细胞培养应定期更换培养液，以便清除代谢产物，保证无毒环境 ⑤利用基因工程技术的乳腺生物反应器，可以让哺乳动物批量生产相应的药物 ⑥蛋白质工程仅以蛋白质结构为基础逆中心法则进行，就可以改造或制造新的蛋白质 A. ①③ B. ②④⑤ C. ②④⑥ D. ①④⑤⑥ 10. CRISPR/Cas 9是一种基因组编辑系统，能够通过“剪切和粘贴”脱氧核糖核酸（DNA）序列的机制来编辑基因组。这套系统源自细菌的防御机制，是一种对任何生物基因组均有效的基因编辑工具。RISPR/Cas 9基因组编辑系统由向导RNA（也叫sgRNA）和Cas 9蛋白组成，向导RNA识别并结合靶基因DNA，Cas 9蛋白切断双链DNA形成两个末端。这两个末端通过“断裂修复”重新连接时通常会有个别碱基对的插入或缺失，从而实现基因编辑，如图所示。CRISPR/Cas 9基因组编辑技术有时也会存在编辑出错而造成脱靶。下列叙述不正确的是（ ） A. 可以利用CRISPR/Cas 9基因组编辑技术，改造现有蛋白质或制造一种新的蛋白质 B. sgRNA序列与目的基因特定碱基序列部分结合，结合区域最多含8种核苷酸 C. 若其他DNA中含有与sgRNA互补的序列，则可能造成sgRNA错误结合而脱靶 D. Cas 9蛋白相当于限制酶，能作用于脱氧核糖和碱基之间的磷酸二酯键 11. 下图为利用定点突变技术改造基因的过程示意图，相关叙述错误的是（　　） A. 需要设计并合成一段含有突变碱基的DNA引物 B. 该技术能够实现特异性地替换任何一个特定碱基 C. 通过电泳检测产物大小，即可确认基因突变是否成功 D. 利用上述技术能够改造蛋白质的结构和功能 12. 科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，其中V5编码序列表达标签短肽V5。图乙表示重组质粒正确表达后用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白的结果。相关叙述正确的是（　　） A. 若用PCR法确定J基因是否正确连接到质粒中，选择的引物组合只能为F2和R1 B. 若b链是J基因转录的模板链，则可推知引物F1与J基因b链相应部分的序列相同 C. 若导入受体细胞的启动子发生甲基化修饰，则可以抑制DNA聚合酶对启动子的识别和结合 D. 图乙条带1表明细胞内表达了J-V5融合蛋白，条带2所检出的蛋白不是由重组质粒上的J基因表达的 13. 斑点印迹杂交是一种简单的DNA分子杂交技术，其技术流程如图。据此分析，下列说法正确的是（ ） A. p和q片段能够杂交的主要原因是两单链的碱基排列顺序相同 B. 放射性自显影技术可显示原培养皿中含目的基因的菌落位置 C. p和q片段的杂交双链区域形成过程中有氢键和磷酸二酯键生成 D. 斑点印迹杂交技术可用于检测目的基因是否在受体细胞中成功表达放射性自显影结果 14. 基因工程中常用的标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。现将某细菌分别接种于下列培养基中：对照组（不添加抗生素）、实验组1（添加一定浓度的四环素）、实验组2（添加一定浓度的氨苄青霉素）、实验组3（添加一定浓度的四环素和氨苄青霉素），适宜条件下培养一段时间后，观察到对照组和实验组2中有菌落形成。则该细菌中标记基因的分布情况是（ ） A. 含抗四环素基因，不含抗氨苄青霉素基因 B. 含抗氨苄青霉素基因，不含抗四环素基因 C. 既含抗四环素基因，也含抗氨苄青霉素基因 D. 不含抗四环素基因，也不含抗氨苄青霉素基因 15. 利用植物组织或细胞培养进行药用次生代谢物的生产可以采用不同的技术流程如下图。毛状根是植物感染发根农杆菌后在感染部位或附近产生的副产物，在生产某些药用次生代谢物方面具有独特的优势。下列说法正确的是（　　） A. 外植体用质量分数5%的次氯酸钠溶液和体积分数为70%的酒精混合处理后应立即用无菌水清洗 B. 培养体系1中的外源基因导入前需用Ca2+处理受体细胞 C. 培养体系3的获得不需要添加外源植物激素 D. 培养体系1、2、3中都含有外源基因 16. 实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B. 二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C. 若未显示出杂交带，则说明目基因未导入受体细胞 D. 图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 17. 为了利用基因工程技术改造牙鲆（一种鱼类），科学家计划将构建好的载体转化至大肠杆菌内扩增，再将大肠杆菌中扩增的载体纯化后导入牙鲆细胞。此实验构建的重组质粒上包含目的基因和氨苄青霉素抗性基因。下列关于此实验的相关说法，错误的是（ ） A. 为了避免外部杂菌污染培养基，接种过大肠杆菌的培养基应灭菌后进行培养 B. 为了使牙鲆细胞在培养瓶中增殖，培养牙鲆细胞的培养基中通常需要加入血清 C. 为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应含有凝固剂 D. 为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应加入氨苄青霉素 18. 心脏移植是挽救终末期心脏病患者生命唯一有效的手段，然而心脏移植过程中会发生缺血再灌注损伤（IRI），可能导致心脏坏死。研究发现，IRI通过促进Caspase8等一系列凋亡基因的表达，导致细胞凋亡最终引起器官损伤。而Caspase8基因合成的小干扰RNA（siRNA）可以使Caspase8基因沉默，从而能有效抑制IRI所致的器官损伤。下图1是利用猪的心肌细胞开展siRNA作用研究的示意图。研究人员根据Caspase8基因的碱基序列设计了三种序列分别导入猪心肌细胞，通过测定靶基因Caspase8的mRNA含量来确定最优序列，结果如图2所示。下列说法错误的是（ ） A. 构建重组质粒用于siRNA研究时，需使用的工具酶是限制酶和DNA连接酶 B. 与直接导入siRNA相比，通过重组质粒将siRNA对应DNA序列导入细胞的优点是直接降解靶基因 C. 根据图2结果，最优siRNA序列是序列2 D. 解决猪心脏移植人体的免疫排斥问题，可利用基因工程技术将免疫排斥有关的抗原基因敲除 19. 我国科学家屠呦呦因发现青蒿素而获得诺贝尔奖。下图中的实线方框表示青蒿细胞中青蒿素的合成途径，虚线方框表示酵母细胞中 FPP 合成酶及固醇的合成过程。由此可见，酵母细胞也能够产生合成青蒿酸的中间产物FPP。科学家向酵母菌导入相关基因培育产青蒿素酵母菌。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①需要RNA聚合酶催化，并以4种游离的核糖核苷酸为原料 B. 培育能产生青蒿素的酵母菌，必须导入FPP合成酶基因和ADS 酶基因 C. 由于ERG9酶等的影响，培育的产青蒿素酵母合成的青蒿素仍可能很少 D. 过程①②都遵循碱基互补配对原则，但碱基互补配对的方式不完全相同 20. 基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等多方面的应用发展迅速，如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述正确的是（　　） A. 若某基因是从人的细胞内提取RNA经逆转录形成的，则该基因中含有内含子序列 B. 扩增目的基因时，利用耐高温的DNA连接酶从引物a、b的3'端进行子链合成 C. 利用DNA分子杂交技术可检测目的基因是否整合到植物受体细胞的染色体DNA上 D. 为了让目的基因在乳腺细胞中特异性表达，需用绵羊的乳腺细胞作为受体细胞 21. 如图，科研人员发现，酵母菌的液泡膜上含有镉转运蛋白（YCF1），于是利用转基因技术将酵母菌的YCF1基因整合到杨树的染色体上，培育出能高效富集镉（Cd）的转基因杨树，种植在镉污染的土地上对土壤进行修复。下列相关叙述正确的是（ ） A. 利用PCR技术获取并克隆YCF1基因，需要设计2种碱基序列互补的引物 B. 利用图1中的质粒和YCF1基因构建目的基因表达载体，需要3种工具酶 C. 将含有YCF1基因的重组载体导入杨树组织细胞最常用的方法是显微注射法 D. 将YCF1基因导入杨树植株后，只需要在分子水平上检测其表达情况即可 22. 下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是（　　） ①一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列； ②限制性核酸内切酶的活性受温度影响； ③限制性核酸内切酶能识别和切割RNA； ④限制性核酸内切酶可从原核生物中提取； ⑤限制性核酸内切酶的操作对象是原核细胞。 A. ②③ B. ③④ C. ③⑤ D. ①⑤ 23. 抗体药物偶联物（ADC）是采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞精准的选择性杀伤。ADC的结构及其发挥作用的机理如下图，有关叙述不正确的是（　　） A. ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合 B. ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡 C. 将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体 D. 对特定抗原筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养可获得单克隆抗体 24. 同源重组是两个DNA分子之间的同源序列进行交换的现象。研究人员借助单链DNA退火蛋白（SSAP）在细菌DNA复制过程中，将单链DNA（ssDNA）同源重组到细菌基因组上，其过程如图所示。 下列叙述错误的是（ ） A. SSAP和ssDNA的结合遵循碱基互补配对原则 B. SSAP发挥作用的过程中伴随着氢键的断裂和重新形成 C. SSAP可将外源基因整合到细菌基因组的特定位置上 D. 可利用同源重组的原理对细菌基因组进行改造 25. 烟草在种植过程中易发生虫害。科研人员通过构建双价抗虫基因表达载体（如下图所示），将抗草地贪夜蛾基因（VIP3a）和抗褐飞虱基因（Bph14）转入烟草中，以期获得具有增强抗虫性的转基因烟草。下列有关培育转基因抗虫烟草的叙述，错误的是（　　） 注：Bar为除草剂抗性基因；P1、P2、P3为启动子；LB和RB为DNA的左右边界 A. 成功导入了双价抗虫基因表达载体的烟草，都具有很强的抗虫性 B. 在表达载体中的启动子P1、P2、P3上有RNA聚合酶识别的位点 C. 从基因表达载体的组成角度分析，T1、T2、T3的作用是终止转录 D. 可用PCR技术检测基因VIP3a和Bph14是否导入受体基因组中 26. PCR和琼脂糖凝胶电泳是基因工程中常用两种技术，下列对其中所用试剂和操作的说法正确的是（　　） A. PCR所用微量离心管、微量移液器、枪头都要进行高压蒸汽灭菌 B. PCR扩增前，应根据待扩增DNA片段的长度设置合适的延伸温度 C. 需将扩增得到的PCR产物与内含核酸染料的缓冲液混合后进行加样 D. DNA分子较大时，可适当降低凝胶浓度来提高DNA分子的迁移速率 27. 如图为一种常用的大肠杆菌质粒pUC18的结构示意图，其中ori为复制原点，AmpR为氨苄青霉素抗性基因，lacZ基因能指导合成酶1，该酶能将无色染料X-gal变成蓝色。若目的基因插入的位点如下图所示，且将含有重组质粒的大肠杆菌用含有氨苄青霉素和无色染料X-gal的培养基培养，下列分析正确的是（　　） A. 所用限制酶的切割位点一般位于质粒的启动子和终止子之间 B. 插入目的基因时，破坏了lacZ基因，不利于后续筛选目的菌株 C. 含有该重组质粒的大肠杆菌在上述培养基上生长出的菌落呈蓝色 D. 若大肠杆菌细胞内导入了不含目的基因的空质粒，则不会形成菌落 28. 科学家把从小鼠胚胎干细胞中分离获得的4个基因通过支原体导入已分化的小鼠成熟细胞中，发现成熟细胞返回到了未成熟的干细胞状态。这种干细胞（iPS细胞）又能在不同条件下分化形成神经细胞等多种细胞。下列叙述正确的是（　　） A. 可以通过花粉管通道法将重组DNA分子导入小鼠成熟细胞中 B. 该实验中支原体的作用是提供目的基因 C. iPS细胞分化为神经细胞的过程说明iPS细胞可以形成一个新的个体 D. iPS细胞分化形成的多种细胞所含核基因相同 29. 蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的DNA片段。在基因工程中可通过PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（　　） A. PCR过程中为了减少非特异性扩增，可考虑调节引物长度适当提高退火温度 B. 用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ C. 科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 D. 若电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，则用抗原-抗体结合法可在其乳汁检测到蛛丝蛋白 30. 某同学以新鲜菠菜叶作为材料，进行DNA的粗提取与鉴定实验。下列叙述错误的是（ ） A. 在研磨液中加入一定量的纤维素酶可提高研磨效率 B. 在漏斗中垫上纱布过滤菠菜叶研磨液，滤液静置后取上清液 C. 将粗提取的DNA在冷酒精中反复溶解、析出，可提高DNA纯度 D. 提取的DNA遇二苯胺沸水浴后呈现较深的蓝色，说明提取的DNA较多 31. 下图为不同限制酶的识别序列及切割位点（↓表示切割位点），下列叙述错误的是（　　） A. 用EcoRI切割DNA分子中部获得一个目的基因时，需断开的磷酸二酯键有2个 B. 用BglII切出的目的基因与BamHI切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开 C. 酶切时需要控制好温度、酶浓度、PH等因素 D. 图示4种限制酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列 32. 生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ） A. 生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等 B. 治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆个体，且需要严格的监管 C. “设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于前者需要在植入前对胚胎进行遗传学诊断 D. 转基因植物进入自然生态系统后可能因具有较强的“选择优势”而影响生物多样性 33. 基因工程技术在迅猛发展，为人类的生产生活带来很多便利，但同时也带来了一些安全性问题，下列说法正确的是（　　） A. 乳腺生物反应器是将药用蛋白基因与药用蛋白启动子重组后导入动物的受精卵中 B. 将外源生长素基因导入鲤鱼中可提高鲤鱼的生长速度 C. 通过基因组编辑技术可以设计完美试管婴儿 D. 在转基因研究中，科学家通过阻断淀粉储藏使花粉失去活性来防止基因污染 34. 孤雌激活处理的实质是通过模拟精子进入次级卵母细胞时释放的信号，激活卵母细胞使其增殖分化，进而发育成早期胚胎。如图为通过孤雌激活处理和核移植处理获得的克隆猪过程。下列叙述错误的是（　　） A. 孤雌激活和重构胚激活采用的方法可能相同，激活的目的也相同 B. 孤雌激活处理获得的克隆猪与核移植获得的克隆猪遗传信息不同 C. 核移植中需将发育成熟的卵母细胞用微型吸管吸出细胞核和第二极体 D. 为获得多个克隆猪，可将发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚分割后移植 35. 研究人员将猴胚胎细胞（a）中的细胞核取出，移植入一雌猴的去核卵母细胞（b）中，得到重构胚（c），经培养获得胚胎并移植到另一雌猴（d）体内进一步发育，获得克隆猴（e）。 下列叙述正确的是（　　） A. e的细胞内的全部基因都来自a，b不提供基因 B. c经一系列增殖和分化形成e的过程中，细胞核起控制作用 C. d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件 D. e的形成过程中没经过受精作用，其体细胞中无同源染色体 36. 下列关于植物组织培养、微生物培养、动物细胞培养过程的描述，正确的是（　　） A. 马铃薯琼脂培养基的碳源一般是马铃薯滤液和葡萄糖，MS培养基的碳源通常是蔗糖 B. 哺乳动物细胞培养的温度在36.5℃左右，多数动物细胞生存的适宜pH为7.1-7.4 C. 纯化微生物、植物组织培养和动物细胞培养所用的都是固体培养基 D. 植物组织培养过程中，愈伤组织细胞的代谢类型为自养需氧型 37. 鱼腥草中的次生代谢物萜类物质具有抗过敏的作用，可用于治疗过敏性荨麻疹，实验人员通过植物细胞悬浮培养技术可大量获取鱼腥草细胞中的萜类化合物。下列说法正确的是（ ） A. 鱼腥草中的萜类化合物不是细胞代谢所必需的营养物质 B. 培养过程中所用的外植体一般取自鱼腥草的成熟区细胞 C. 培养过程中悬浮细胞的密度越大越有利于获得更多萜类化合物 D. 该过程体现出植物细胞具有全能性，培养基中需要添加适量激素 38. 科研人员通过改良发酵工艺“把玉米变成衣服”，即利用大肠杆菌将玉米转化为戊二胺，再将戊二胺转化为尼龙布，流程如图所示。其中，戊二胺不能从大肠杆菌体内排出，且对细胞有毒害作用。下列相关分析错误的是（　　） A. 该工业生产中要使用淀粉酶、纤维素酶等酶制剂 B. 发酵过程中，应将培养液置于pH中性或接近中性的条件下培养 C. 发酵时定期更换培养液，能降低戊二胺对大肠杆菌的毒害 D. 发酵结束后，可采用提取、分离和纯化措施来获得戊二胺 39. 流行病学调查结果显示，我国胃病患者人数众多，这与幽门螺杆菌（Hp）密切相关。Hp的脲酶活性较高，这种酶能够将尿素水解成氨和二氧化碳，产生的氨可以中和胃酸，从而为细菌提供一个更适宜的生长环境。研究人员在胃病患者体内采集样本并制成菌液后，对其进行分离培养。实验基本步骤如下：配制培养基→灭菌→倒平板→接种→培养→观察。下列叙述错误的是（ ） A. 常见的灭菌方法有湿热灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌 B. 培养基灭菌后不能立即倒平板，待平板冷凝后应将其倒置 C. 以尿素为唯一氮源的培养基可以初步筛选出Hp D. 脲酶分解尿素后会使培养基pH降低 40. 如图为哺乳动物受精过程示意图，据图分析，下列说法错误的是（　　） A. 甲图中卵子已经成熟到MII期，精子已经获能 B. 图中①是透明带，精子接触透明带后会引起透明带反应 C. ②是卵细胞膜，卵细胞膜反应可以防止多精入卵 D. ⑤是雄原核，⑦是雌原核，充分发育后，其核膜会消失 41. 2023年11月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌合猴，该研究部分过程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各种组织中，高达 90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。下列有关叙述正确的是（　　） （注：GFP 指表达绿色荧光标记蛋白，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织中的分化、分布情况。） A. 代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理 B. 图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术 C. 具有清晰 GFP 信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴 D. 由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴 42. 双抗体夹心法是医学上常用的检测抗原含量的方法，流程如图所示。其中固相抗体是经由固相载体连接后的单克隆抗体，酶标抗体是一种具酶活性的抗体，二者可与抗原的不同部位特异性结合。下列有关分析错误的是（ ） A. 固相抗体的使用量应明显多于待测抗原的数量 B. 酶标抗体作用是与待测抗原结合并催化指示底物分解 C. 制备相应单克隆抗体时需要使用动物细胞培养技术 D. 若不洗去游离的酶标抗体会导致测量结果偏低 43. 细胞内DNA复制时，一条新子链按5′→3′方向进行连续复制，而另1条链也按5′→3′方向合成新链片段一冈崎片段(如图所示)。已知DNA聚合酶不能直接起始DNA新链或冈崎片段的合成，需先借助引物酶以DNA为模板合成RNA引物，DNA聚合酶再在引物的3′—OH上聚合脱氧核苷酸。当DNA整条单链合成完毕或冈崎片段相连后，DNA聚合酶再把RNA引物去掉，换上相应的DNA片段。人体细胞内的DNA复制过程(如图)和体外进行PCR过程(如图)分别如下，则下列叙述中错误的是（ ） A. 引物酶、DNA聚合酶、连接酶都会催化磷酸二酯键的形成 B. 上述两个过程中的DNA聚合酶都只能从子链的5′端→3′端延伸 C. 细胞内DNA复制时只有一条子链可以连续复制，而PCR时所有子链都是连续复制 D. 细胞内DNA复制所需引物是细胞自行合成的，PCR过程需要加入引物，子链合成后引物都会被切掉 44. 免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述错误的是（ ） A. 图示抗原检测过程发生两次抗原与抗体的结合 B. 图中标记抗体2的DNA一般是牛细胞中的DNA片段 C. 图示过程中三次冲洗的目的均不同 D. 免疫PCR技术间接放大了微量抗生素，以达到可检测水平 45. 花椰菜(2n=18)种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰(2n=14)具有一定抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列有关叙述正确的是（ ） 注：1为花椰菜，Ⅱ为紫罗兰：1、2、3、4、5为待测植株 A. 图1培育杂种植株所用的技术体现了细胞膜具有一定流动性原理和基因突变原理 B. ②过程可用电融合法或灭活病毒诱导细胞融合，杂种细胞再生出细胞壁是成功的标志 C. 只考虑细胞两两融合，图1培育出的植株体细胞中最多含有72条染色体，减数分裂时最多可形成18个四分体 D. 可将病菌悬浮液均匀喷施于图2中的3和5植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株 二、非选择题(共50分) 46. 如图表示果酒和果醋生产过程中的物质变化情况，请回答下列与果酒和果醋制作相关的问题。 （1）过程①②均发生在酵母菌的_______________________中。 （2）过程④是醋酸菌在____________________时，将酒精变成乙醛，再将乙醛变成醋酸；过程⑤是醋酸菌在_________时，将葡萄糖转变成醋酸。 （3）果酒的制作离不开酵母菌，家庭制作葡萄酒时，菌种主要来自________________。制作果酒时，温度应该控制在___________________。 （4）制作果酒的条件是先通气后密封。先通入无菌空气的目的是___________________；能分解尿素的细菌属于__________________(填“自养“或“异养”)型微生物 （5）若要提高果酒的品质，发酵过程中关键要控制好哪些条件?_________________。(答出2点) （6）在酵母菌实验中，盛有水或培养基的摇瓶通常采用___________________的方法进行灭菌。 47. 紫杉醇是一种从红豆杉树皮中分离提纯的天然抗癌药物。为快速检测紫杉醇，研究人员利用细胞工程技术制备了抗紫杉醇单克隆抗体，制备过程如图所示。回答下列问题： （1）抗紫杉醇单克隆抗体的获得所涉及的生物技术有__________________(答出两种)。 （2）过程①用化学方法诱导融合时可选用____________，能得到___________类两两融合的细胞。 （3）为获得杂交瘤细胞，应用特定的选择培养基对细胞甲进行筛选，然后通过专一抗体检测和克隆化培养获得______________的杂交瘤细胞。若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO₂的培养箱中培养，CO₂的作用是__________。单克隆抗体的优点有___________________。 （4）紫杉醇是红豆杉产生的一种代谢产物，欲利用植物细胞培养获得大量的紫杉醇，应将红豆杉的外植体培育到愈伤组织阶段，原因是____________________________________。 （5）研究人员用少量果胶酶处理红豆杉愈伤组织获取单细胞，由愈伤组织培养阶段转入细胞悬浮培养阶段。按照物理性质划分，悬浮培养基为_______________培养基，更有利于细胞的生长。 48. 如图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题。 （1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别是方法Ⅰ涉及的生殖方式为__________________________生殖，方法Ⅱ涉及的生殖方式为________________________生殖。 （2）过程①应用的技术是________。克隆牛F的核基因来源于____________________(填“奶牛B”“奶牛C”或“奶牛D”)。 （3）过程②常用________________________(激素名称)处理，目的是使奶牛B______________________，从奶牛B体内获得的卵母细胞需要培养到_____________________(时期)才能与获能的精子结合。 （4）方法Ⅰ中，B牛和D牛需进行___________________，以确保供体和受体母牛具有相同的生理状态。 （5）为了提高早期胚胎的利用率，可以对早期胚胎进行_______________________________，若欲在胚胎移植前进行性别鉴定，需取_________________________细胞进行检测。 49. 幽门螺杆菌(HP)与胃炎、胃食管反流病等多种疾病有关。Ipp20基因作为幽门螺杆菌的核心功能基因，在疫苗研发中具有重要价值。实验人员以Ipp20基因为目的基因，通过基因工程制备HP疫苗的过程如图所示。回答下列问题： （1）据图分析，使用限制酶切割质粒时_______________________(填“能”或“不能”)选择限制酶BamHⅠ，理由是__________________。 （2）过程①需要的原料是_____________________。为了使质粒和Ipp20基因正确连接，在设计引物时需要在引物的_______________(填“5”或“3””)端添加__________________两种限制酶的识别序列，便于过程②构建基因表达载体和后续筛选。 （3）PCR扩增目的基因需在一定的缓冲溶液中进行，PCR 反应缓冲溶液中一般要添加Mg²⁺,作用是________________。 （4）为了筛选成功导入重组质粒的大肠杆菌，过程④将大肠杆菌培养在含有___________________的培养基A中，能在其中生长的大肠杆菌即可能导入了重组质粒的大肠杆菌。初步筛选出的大肠杆菌存在导入空质粒(不含有Ipp20基因)或导入重组质粒的情况。实验人员用影印培养法(将培养基A上的菌落全部转移到丝绒面上，再将丝绒面印在培养基B上)来进行筛选。结合图中信息分析，培养基B添加了____________________，能用于制备HP疫苗的大肠杆菌菌落是_____________________(填图中数字)。 50. 从正常人的血浆中提取的血清白蛋白（HSA）在临床上应用很广泛，有重要的医用价值。下图是通过相关技术获取重组HSA示意图，其中报告基因表达的产物能催化无色物质K呈现蓝色。据图回答下列问题： （1）若要体外获得大量的人血清白蛋白基因，采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系中需加入引物，引物的作用是______，若目的基因扩增3代，则共用引物______个。PCR完成以后，常采用________法来鉴定PCR的产物。 （2）过程①中需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让_______进入植物细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含______的培养基上筛选出转化的植物细胞。 （3）为检测HSA基因的表达情况，可提取受体细胞的蛋白质，用_______进行抗原—抗体杂交实验。 （4）科学家培养出一种转基因山羊，其膀胱上皮细胞可以合成人血清白蛋白并分泌到尿液中。其培育方法中将重组质粒通过_______法导入山羊的受体细胞时，常选用受精卵作为受体细胞的主要原因是_______，人血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮细胞中表达的原因是______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $