精品解析：甘肃临洮县文峰中学2024—2025学年高二下学期中考试生物试题

临洮县文峰中学2024—2025学年度第二学期期中考试 高二生物学 注意事项： 1．本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间75分钟。 2．考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。 3．本试卷命题范围：选择性必修3（第1—3章）。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中只有一项是符合题目要求的。 1. 甜酒酿是用蒸熟的糯米拌上酿酒酵母发酵而成的一种甜米酒，其制作流程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） 浸米→蒸米→凉饭→拌酿酒酵母→发酵→检查→甜酒酿 A. 蒸米既可以将米粒上的微生物杀死，又有利于淀粉的快速糖化 B. 蒸米后凉饭的目的是防止酿酒酵母被高温杀死 C. 发酵时将温度控制在适宜温度以便于酿酒酵母的繁殖 D. 发酵时应将拌有酿酒酵母的凉饭装满密闭的容器，发酵过程中适时排气 2. 生物技术与人们的生活息息相关，在食品制造方面广泛应用。下列有关说法错误的是（ ） A. 在泡菜的腌制过程中，为缩短制作时间可在盐水中加入少量陈泡菜液 B. 与葡萄酒的制作不同，葡萄醋的制作过程需要消耗氧气，且发酵温度更低 C. 利用玉米进行酒精发酵时，添加纤维素酶可以提高酒精的含量 D. 制作腐乳时，酵母、曲霉和毛霉均参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉 3. 有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（　　） A. 是碳源的物质不可能同时是氮源 B. 凡碳源都提供能量 C. 除水以外的无机物只提供无机盐 D. 无机氮源也能提供能量 4. 葡萄酒发酵时可接种人工纯酵母。下列关于酵母菌纯培养的叙述正确的是（　　） A. 用平板划线法分离菌种，划线五个区域，接种环需要灼烧灭菌6次 B. 配制好的培养基转移到锥形瓶后，可采用高压蒸汽灭菌或干热灭菌 C. 在酒精灯火焰附近将冷却至室温的培养基倒入培养皿 D. 配制的培养基主要营养物质包括碳源、氮源、水和维生素 5. 《书经·说命》记载：若作酒醴，尔惟曲蘖。这里的“蘖”，指的便是发芽的麦粒。 “醴”是用蘖酿造的酒。从某种意义上讲，“醴”应该就是中国古代的原始啤酒。啤酒的主要工艺流程一般都包含发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒、终止等，其中发酵过程分为主发酵和后发酵。啤酒花含有重要的α酸和香味物质，一般对α酸直接加热煮沸1~1.5h才能激发它的作用。下列关于啤酒发酵的说法错误的是（　　） A. 大麦发芽产生的淀粉酶最适温度较高，在焙烤时控制温度可以杀死种子胚但不使淀粉酶失活 B. 糖化后期要蒸煮以终止酶的进一步作用，经冷却后加入酿酒酵母和啤酒花进行主发酵 C. 主发酵阶段要适时往外排气，后发酵阶段可以延长排气时间间隔 D. 对发酵后的啤酒进行消毒，杀死其中的大多数微生物，以延长啤酒保质期 6. 下图表示四倍体兰花叶片植物组织培养的过程，下列相关叙述不正确的是（　　） 四倍体兰花叶片愈伤组织胚状体兰花植株 A. 通过消毒和无菌操作避免①②过程发生杂菌污染 B. 需生长调节物质调控①②过程的细胞分裂和分化 C. 细胞全能性表达的前提是①过程，体现在②③过程 D. 此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体植株 7. 植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用。下列相关叙述正确的是（ ） A. 微型繁殖技术因受场地局限难以实现种苗的大量繁殖 B. 由植物茎尖组织培养获得的脱毒苗不会被病毒侵染 C. 单倍体植株是体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料 D. 利用植物细胞培养技术可提高单个细胞中目标产物的含量 8. 关于动物细胞培养，下列叙述错误的是（ ） A. 用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织 B. 将所取的组织用酶等进行处理使其分散成单个细胞 C. 在培养瓶中要定期用酶处理使细胞从瓶壁上脱离，制成细胞悬液 D. 动物细胞培养传至50代左右，所培养的细胞都会衰老死亡 9. 下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 用胰蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞 B. “人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，有利于减轻环境污染 C. 培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长 D. 生物反应器内应控制好适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸 10. 我国科研人员将大鼠孤雄单倍体干细胞和小鼠孤雌单倍体干细胞相互融合， 获得异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），过程如下图。相关叙述正确的是（　　） A. 该项技术说明大鼠和小鼠之间不存在生殖隔离 B. 单倍体囊胚由卵子或精子经体外诱导培养获得 C. 单倍体胚胎干细胞来自于囊胚中的滋养层细胞 D. 体外培参AdESCs需向培养液中添加干扰素等 11. 下列有关基因工程的工具的叙述，正确的是（　　） A. 基因工程的载体只有质粒 B. 天然质粒均可以直接作为载体将目的基因送入受体细胞 C. 噬菌体常作为动物基因工程的载体 D. 限制酶具有专一性，能识别特定的核苷酸序列 12. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ） A. 粗提取的DNA溶于2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后即显蓝色 B. 选用花菜、香蕉等植物细胞提取DNA时，应该先用洗涤剂溶解细胞壁 C. 向溶解DNA的浓盐溶液中加蒸馏水是为了析出DNA D. 析出DNA时，玻璃棒来回向不同方向搅拌可快速获得DNA 13. 下列有关PCR技术的叙述，错误的是（　　） A. PCR技术的原理是DNA半保留复制 B. 变性过程中破坏的是磷酸二酯键 C. 复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的 D. 延伸过程中需要耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸等，无须添加ATP 14. 研究人员将外源鲫鱼Mx基因（该基因产物能抵抗粘液病毒）与质粒相连接构建基因表达载体，利用显微注射的方法将其导入草鱼体内，获得转基因抗病草鱼。下列叙述正确的是（ ） A. 获得抗粘液病毒草鱼方法的原理是基因重组 B. 重组载体的受体细胞一般是已分化的体细胞 C. 转录Mx基因需要解旋酶和DNA连接酶 D. 构建重组载体的质粒一般是天然质粒 15. 基因工程赋予生物新的遗传特性，下面有关基因工程应用的叙述中，正确的是（ ） A. 将某药用蛋白基因导入牛乳腺细胞中获得乳腺生物反应器 B. 用转入抗体基因的微生物生产疫苗 C. 培育青霉菌并从中提取青霉素 D. 向棉花中导入多个杀虫基因提高杀虫活性 16. 已知生物体内有一种转运蛋白Y，如果将蛋白Y 中某一个氨基酸替换，改变后的蛋白质 Y1不但保留了蛋白Y原有的功能，而且具备了酶的催化功能。下列叙述正确的是（ ） A. 蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异 B. 可以通过对 Y 蛋白基因改造或人工合成获得 Y1蛋白基因 C. 蛋白质工程在设计蛋白质结构时的依据是现有基因的脱氧核苷酸序列 D. 蛋白质工程与中心法则的信息流动方向一致，即DNA→mRNA→蛋白质 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17. 乐果是一种广泛使用的有机磷农药，对被乐果污染的土壤进行微生物修复一直是科学家研究的热点。现在从土壤中筛选能有效降解乐果的微生物，请回答下列问题： （1）用于筛选的样品应来自______的土壤。 （2）微生物驯化是指在培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，得到对此种物质耐受或能降解此种物质的微生物的过程。该实验中，所用驯化培养基中含有蛋白胨10g、氯化钠1g、磷酸二氢钾1g、水1L、葡萄糖1g和不同浓度的乐果。请据此回答： ①上述驯化培养基按功能分属于______培养基。培养基配制后需要采用______法进行灭菌。 ②驯化后含有微生物的菌液可通过______法进行接种，从分离得到的单菌落中挑取待筛选的菌株。研究人员通常根据菌落的______特征来初步区分不同种的微生物。若要对菌液中的微生物进行计数，则接种的工具应该选择______。 ③进行微生物的纯培养时，培养基冷凝后要将平板倒置，既可防止______，又可避免______。 （3）若要进一步鉴定不同种的待测菌株对乐果的降解能力，请写出简要的实验思路：______。 18. 学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了矮牵牛—粉蓝烟草植株。为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用绿色荧光和红色荧光分别标记矮牵牛原生质体和粉蓝烟草原生质体上的蛋白质，其培育过程如图。回答下列问题： （1）植物体细胞杂交依据的生物学原理是____。人工诱导原生质体的融合可以采用____和____两种化学方法进行融合。 （2）在鉴定融合的原生质体时可用显微镜进行观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到____种不同的原生质体（只考虑细胞两两融合的情况），其中杂种细胞膜表面有____种颜色的荧光。 （3）矮牵牛—粉蓝烟草植株____（填“可育”或“不可育”），原因是____。 19. “生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼，由单克隆抗体与药物结合而成。单克隆抗体能自动导向，在生物体内与特定细胞或组织结合，并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如图所示，分析回答下列问题： （1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得的______细胞，提取该细胞之前，给小鼠注射的特定物质相当于______；B过程最终得到的杂交瘤细胞的特点是______。 （2）体外培养杂交瘤细胞的培养基与用于植物组织培养的培养基在物理性质上的主要区别是前者要用______，从培养基的成分来看，前者培养基中除了添加必要的营养物质外还需要加入一些天然成分，如______。 （3）特异性抗体也可以通过常规方法来制备：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物的血清中分离所需抗体。与这种常规方法相比，单克隆抗体具有______等优点。 20. BamHⅠ和BclⅠ是两种限制酶，其识别序列及切割位点如下表所示。探究下列问题： 限制酶 BamHⅠ BclⅠ 识别序列及切割位点 （1）限制酶 _______(填“能”或“不能”)切割原核细胞自身的DNA，试推测其理由是_______。 （2）若某链状DNA分子中含有两个BamHⅠ的识别序列，该DNA分子将被切成________个片段，共断裂________个磷酸二酯键。 （3）请画出BclⅠ切割后产生的末端_______。 （4）BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的黏性末端能否被DNA连接酶连接_______？说明你的理由_______。 （5）为什么不同生物的DNA分子能拼接起来_______？ 21. 几种常见的限制酶及切割位点如表所示。在用PCR扩增目的基因时，引物与模板链的结合往往使第一轮循环得到的产物DNA两条链不等长，过程如图所示。回答下列问题： 限制酶 BamH I EcoR I Nco I Nhe I 识别序列 5'-G↓GATCC-3' 5'-G↓AATTC-3' 5'-C↓CATGG-3' 5'-G↓CTAGC-3' （1）引物的作用是______，PCR的每次循环包括三个步骤，其中使引物和模板链结合的步骤是______。 （2）图中的引物甲和引物乙对应的表中的限制酶分别是______和______，其中限制酶BamH I识别的DNA序列______（填“能”或“不能”）被限制酶Nco I识别。 （3）图中PCR中，至少经过______次循环可以获得两条链等长的DNA。理论上，经过4次循环后，两条链等长的DNA在所有DNA中所占的比例为______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 临洮县文峰中学2024—2025学年度第二学期期中考试 高二生物学 注意事项： 1．本试卷分选择题和非选择题两部分。满分100分，考试时间75分钟。 2．考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑；非选择题请用直径0.5毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。 3．本试卷命题范围：选择性必修3（第1—3章）。 一、选择题：本题共16小题，每小题3分，共48分。在每小题给出的四个选项中只有一项是符合题目要求的。 1. 甜酒酿是用蒸熟的糯米拌上酿酒酵母发酵而成的一种甜米酒，其制作流程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） 浸米→蒸米→凉饭→拌酿酒酵母→发酵→检查→甜酒酿 A. 蒸米既可以将米粒上的微生物杀死，又有利于淀粉的快速糖化 B. 蒸米后凉饭的目的是防止酿酒酵母被高温杀死 C. 发酵时将温度控制在适宜温度以便于酿酒酵母的繁殖 D. 发酵时应将拌有酿酒酵母的凉饭装满密闭的容器，发酵过程中适时排气 【答案】D 【解析】 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。 【详解】A、在酿酒时要先将糯米蒸熟，有两个好处，一是熟糯米比生糯米更容易被微生物分解，有利于淀粉的快速糖化，利于发酵，二是蒸熟了可以高温杀菌，避免了其它杂菌的污染，其中主要目的是杀菌，A正确； B、凉饭使温度降低，其目的是防止温度过高使酒曲中的酵母菌死亡，B正确； C、酿酒酵母繁殖的最适温度在28℃，因此发酵时将温度控制在28℃以便于酿酒酵母的繁殖，C正确； D、发酵时应将拌有酿酒酵母的凉饭装在密闭的容器中，但是不能装满容器，应该适当留出一定空间（约1/3），发酵过程中要适时排气，D错误。 故选D。 2. 生物技术与人们的生活息息相关，在食品制造方面广泛应用。下列有关说法错误的是（ ） A. 在泡菜的腌制过程中，为缩短制作时间可在盐水中加入少量陈泡菜液 B. 与葡萄酒的制作不同，葡萄醋的制作过程需要消耗氧气，且发酵温度更低 C. 利用玉米进行酒精发酵时，添加纤维素酶可以提高酒精的含量 D. 制作腐乳时，酵母、曲霉和毛霉均参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉 【答案】B 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其代谢类型是自养需氧型。 2、泡菜发酵过程会产生亚硝酸盐，其含量会随着温度、食盐用量、腌制时间等因素发生改变。 【详解】A、在泡菜的腌制过程中，为缩短制作时间可在盐水中加入少量陈泡菜液，进而增加了乳酸菌的数量，这相当于接种过程，A正确； B、与葡萄酒的制作不同，葡萄醋的制作过程需要消耗氧气，且发酵温度更高，因为葡萄酒的制作过程中涉及的菌种是酵母菌，其代谢类型为兼性厌氧型，且酒精的产生需要无氧条件，而果醋的制作涉及的菌种是醋酸菌，醋酸菌的代谢类型是异养需氧型，因此果醋制作需要消耗氧气，且醋酸菌发酵的适宜温度较高，为30~35℃，B错误； C、利用玉米进行酒精发酵时，添加纤维素酶可以提高酒精的含量，因为纤维素酶可以分解纤维素，植物细胞壁的成分主要是纤维素，纤维素分解后增加了糖的含量，进而能提高酒精的含量，C正确； D、制作腐乳时，酵母、曲霉和毛霉均参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉，即腐乳的制作涉及多种菌种，属于传统发酵技术，D正确。 故选B。 3. 有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（　　） A. 是碳源的物质不可能同时是氮源 B. 凡碳源都提供能量 C. 除水以外的无机物只提供无机盐 D. 无机氮源也能提供能量 【答案】D 【解析】 【分析】培养基是指人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。其基本成分有碳源、氮源、水、无机盐。除此之外，还需满足微生物对 pH、特殊营养物质、氧气的需求。 【详解】A、有的碳源只能是碳源，如二氧化碳，有的碳源可同时是氮源，如 NH4HCO3，A错误； B、有的碳源同时是能源，如葡萄糖，有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨，有的碳源只能是碳源，如二氧化碳，B错误； C、除水以外的无机物种类繁多，功能也多样，如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源，NaHCO3，可作为自养型微生物的碳源和无机盐，而NaCl 则只能提供无机盐，C错误； D、无机氮源也能提供能量，如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源，D正确。 故选D。 4. 葡萄酒发酵时可接种人工纯酵母。下列关于酵母菌纯培养的叙述正确的是（　　） A. 用平板划线法分离菌种，划线五个区域，接种环需要灼烧灭菌6次 B. 配制好的培养基转移到锥形瓶后，可采用高压蒸汽灭菌或干热灭菌 C. 在酒精灯火焰附近将冷却至室温的培养基倒入培养皿 D. 配制的培养基主要营养物质包括碳源、氮源、水和维生素 【答案】A 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、用平板划线法分离菌种，划线五个区域，每次接种前后均需要灼烧灭菌，接种环需要灼烧灭菌6次，A正确； B、配制好的培养基转移到锥形瓶后，可采用高压蒸汽灭菌，为保留培养基中的水分，不可采用干热灭菌法，B错误； C、酒精灯火焰附近为无菌区，在酒精灯火焰附近将冷却至50℃左右的培养基倒入培养皿，C错误； D、配制的培养基主要营养物质包括碳源、氮源、水和无机盐，D错误。 故选A。 5. 《书经·说命》记载：若作酒醴，尔惟曲蘖。这里的“蘖”，指的便是发芽的麦粒。 “醴”是用蘖酿造的酒。从某种意义上讲，“醴”应该就是中国古代的原始啤酒。啤酒的主要工艺流程一般都包含发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒、终止等，其中发酵过程分为主发酵和后发酵。啤酒花含有重要的α酸和香味物质，一般对α酸直接加热煮沸1~1.5h才能激发它的作用。下列关于啤酒发酵的说法错误的是（　　） A. 大麦发芽产生的淀粉酶最适温度较高，在焙烤时控制温度可以杀死种子胚但不使淀粉酶失活 B. 糖化后期要蒸煮以终止酶的进一步作用，经冷却后加入酿酒酵母和啤酒花进行主发酵 C. 主发酵阶段要适时往外排气，后发酵阶段可以延长排气时间间隔 D. 对发酵后的啤酒进行消毒，杀死其中的大多数微生物，以延长啤酒保质期 【答案】B 【解析】 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是异养兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。 【详解】A、大麦发芽产生的淀粉酶最适温度较高，在焙烤时控制温度可以杀死种子胚但不使淀粉酶失活，A正确； B、糖化后期要蒸煮时加入啤酒花，B错误； C、酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，故发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期由于糖类物质不足，产生的二氧化碳减少，可以延长排气时间间隔，C正确； D、消毒能杀死其中大多数微生物（不包括芽孢和孢子），对发酵后的啤酒进行消毒，可以延长啤酒保质期，D正确。 故选B。 6. 下图表示四倍体兰花叶片植物组织培养的过程，下列相关叙述不正确的是（　　） 四倍体兰花叶片愈伤组织胚状体兰花植株 A. 通过消毒和无菌操作避免①②过程发生杂菌污染 B. 需生长调节物质调控①②过程的细胞分裂和分化 C. 细胞全能性表达的前提是①过程，体现在②③过程 D. 此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体植株 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：图示表示将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的过程，其中①阶段表示脱分化，该阶段能形成愈伤组织，其细胞分化程度低，全能性高；②阶段表示再分化过程，该阶段能形成胚状体，进一步发育形成植株。 【详解】A、植物组织培养的过程要求无菌无毒的环境，其中外植体要进行消毒处理，而培养基需灭菌处理，目的都是避免植物组织培养过程中杂菌污染，A正确； B、在植物组织培养过程中需要加入细胞分裂素和生长素，来调控细胞的分裂和分化，B正确； C、高度分化的细胞首先经过脱分化后形成愈伤组织，由于愈伤组织细胞没有分化，全能性较高，然后再分化形成个体的过程就体现了愈伤组织的全能性，C正确； D、由配子经花药离体培养直接发育成的个体是单倍体，D错误。 故选D。 【点睛】 7. 植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用。下列相关叙述正确的是（ ） A. 微型繁殖技术因受场地局限难以实现种苗的大量繁殖 B. 由植物茎尖组织培养获得的脱毒苗不会被病毒侵染 C. 单倍体植株是体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料 D. 利用植物细胞培养技术可提高单个细胞中目标产物的含量 【答案】C 【解析】 【分析】植物细胞工程：植物体的细胞中，含有该植物所有的遗传信息。 在合适的条件下，一个细胞可以独立发育成完整的植物体。 利用细胞的这种全能性，生物学家通过组培来繁殖名贵花卉、消灭果树上的病毒，以及通过对细胞核物质的重新组合，进行植物遗传改造等。这就是人们常说的植物细胞工程。 微型繁殖技术也叫快速繁殖技术，用于快速繁殖优良品种。优点：保持优良品种的遗传特性；周期短，不受季节气候自然灾害等因素的影响，高效快速实现种苗的大量繁殖。 【详解】A、微型繁殖技术可以使用培养液来培养，并人工提供适宜的条件，不会受场地局限，A错误； B、以根尖、茎尖为材料利用组织培养技术获得的脱毒苗是不携带病毒，但不抗病毒，也会被病毒侵染，B错误； C、由于大多数单倍体植株的细胞中只含有一个染色体组，染色体加倍后得到的植株隐性性状容易显现，因此它的体细胞是诱变育种和研究遗传突变的理想材料，C正确； D、利用植物细胞培养技术得到的是与亲本一样的植株个体，多倍体育种得到的多倍体植株，其细胞中目标产物的含量会高与普通二倍体植株，D错误。 故选C。 8. 关于动物细胞培养，下列叙述错误的是（ ） A. 用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织 B. 将所取的组织用酶等进行处理使其分散成单个细胞 C. 在培养瓶中要定期用酶处理使细胞从瓶壁上脱离，制成细胞悬液 D. 动物细胞培养传至50代左右，所培养的细胞都会衰老死亡 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养利用了细胞增殖的原理，培养过程中细胞会出现贴壁生长和接触抑制的现象，需要用胰蛋白酶定期处理，以进行传代培养。 【详解】A、用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织，因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，A正确； B、动物细胞培养时，应用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理组织使其分散成单个细胞，B正确； C、细胞存在接触抑制，因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确； D、动物细胞培养传50代左右，部分细胞可能会出现变异变成不死性细胞，D错误。 故选D。 【点睛】 9. 下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 用胰蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞 B. “人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，有利于减轻环境污染 C. 培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长 D. 生物反应器内应控制好适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 【详解】A、胰蛋白酶处理动物组织，可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，A正确； B、理论上来说，仅来自1只动物的干细胞，可制成的肉品数量比宰杀1头牛多很多倍，有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，B正确； C、动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上，如果想得到大量的产物，可以增大细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长，C正确。 D、动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2（调节pH值），D错误。 故选D。 10. 我国科研人员将大鼠孤雄单倍体干细胞和小鼠孤雌单倍体干细胞相互融合， 获得异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），过程如下图。相关叙述正确的是（　　） A. 该项技术说明大鼠和小鼠之间不存在生殖隔离 B. 单倍体囊胚由卵子或精子经体外诱导培养获得 C. 单倍体胚胎干细胞来自于囊胚中的滋养层细胞 D. 体外培参AdESCs需向培养液中添加干扰素等 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：小鼠的卵细胞体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体胚胎干细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体胚胎干细胞，两种胚胎融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs）。 【详解】A、生殖隔离是指两个类群之间在自然条件下不交配，或者即使能交配也不能产生后代或不能产生可育性后代，题中所述技术不能说明大鼠和小鼠之间不存在生殖隔离，A错误； B、根据题图分析可知，单倍体囊胚可由卵子或精子经体外诱导培养获得，B正确； C、滋养层将发育成胎膜和胎盘，因此，单倍体胚胎干细胞取自囊胚的内 细胞团，C错误； D、体外培参AdESCs不需向培养液中添加干扰素，需加氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等，D错误。 故选B。 11. 下列有关基因工程的工具的叙述，正确的是（　　） A. 基因工程的载体只有质粒 B. 天然质粒均可以直接作为载体将目的基因送入受体细胞 C. 噬菌体常作为动物基因工程的载体 D. 限制酶具有专一性，能识别特定的核苷酸序列 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程的工具包含限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。载体是运载着外源DNA进入宿主细胞的“车子”，即运载工具；除质粒外，基因工程的载体还有λ噬菌体的衍生物、植物病毒和动物病毒。限制性核酸内切酶是能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。DNA连接酶的作用是将具有末端碱基互补的外源基因和载体DNA连接在一起，形成的DNA分子称为重组DNA分子。 【详解】A、目前常用的运载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒，A错误； B、天然质粒往往不能直接作为载体，要根据不同的目的和需求进行人工改造，B错误； C、噬菌体专门侵染大肠杆菌，不可作为动物基因工程的载体，C错误； D、限制酶和其他酶一样具有专一性，只能识别特定的核苷酸序列，D正确。 故选D。 12. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ） A. 粗提取的DNA溶于2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后即显蓝色 B. 选用花菜、香蕉等植物细胞提取DNA时，应该先用洗涤剂溶解细胞壁 C. 向溶解DNA的浓盐溶液中加蒸馏水是为了析出DNA D. 析出DNA时，玻璃棒来回向不同方向搅拌可快速获得DNA 【答案】C 【解析】 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理： ①DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度变化而改变的．当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低．利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出； ②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液．利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA； ③洗涤剂能瓦解细胞膜但是对DNA没有影响； 【详解】A、粗提取的DNA溶于2mol/L的NaCl溶液中，因为在该浓度的溶液中DNA的溶解度较高，二苯胺可用于鉴定DNA，但需要水浴加热，A错误； B、加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜，不是细胞壁，B错误； C、向溶解DNA的浓盐溶液中加蒸馏水会降低DNA的溶解度进而使DNA析出，C正确； D、析出DNA时，玻璃棒应该用同一个方向搅拌，防止DNA被破坏，D错误。 故选C。 13. 下列有关PCR技术的叙述，错误的是（　　） A. PCR技术的原理是DNA半保留复制 B. 变性过程中破坏的是磷酸二酯键 C. 复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的 D. 延伸过程中需要耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸等，无须添加ATP 【答案】B 【解析】 【分析】PCR技术： 1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 2、原理：DNA复制。 3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。 4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。 5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【详解】A、PCR技术是利用 DNA双链半保留复制复制，将基因的核苷酸序列不断地加以复制，使其数量呈指数方式增加，A正确； B、变性过程是目的基因DNA受热变性后解链为单链，破坏的是氢键，B错误； C、引物是一段已知目的基因的核苷酸序列，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的，C正确； D、延伸过程中需要条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）等，无需添加ATP，D正确。 故选B。 14. 研究人员将外源鲫鱼Mx基因（该基因产物能抵抗粘液病毒）与质粒相连接构建基因表达载体，利用显微注射的方法将其导入草鱼体内，获得转基因抗病草鱼。下列叙述正确的是（ ） A. 获得抗粘液病毒草鱼方法的原理是基因重组 B. 重组载体的受体细胞一般是已分化的体细胞 C. 转录Mx基因需要解旋酶和DNA连接酶 D. 构建重组载体的质粒一般是天然质粒 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。其原理是基因重组。 【详解】A、将外源鲫鱼Mx基因与质粒相连接构建基因表达载体，再导入草鱼体内，这属于基因工程，其原理是基因重组，A正确； B、重组载体的受体细胞一般是受精卵，因为受精卵具有全能性，更容易发育成完整的个体，而不是已分化的体细胞，B错误； C、转录Mx基因需要RNA聚合酶，解旋酶用于DNA复制，DNA连接酶用于连接DNA片段，C错误； D、构建重组载体的质粒一般不是天然质粒，而是经过人工改造的质粒，以满足基因工程的需求，D错误。 故选A。 15. 基因工程赋予生物新的遗传特性，下面有关基因工程应用的叙述中，正确的是（ ） A. 将某药用蛋白基因导入牛乳腺细胞中获得乳腺生物反应器 B. 用转入抗体基因的微生物生产疫苗 C. 培育青霉菌并从中提取青霉素 D. 向棉花中导入多个杀虫基因提高杀虫活性 【答案】D 【解析】 【分析】动物基因工程的应用：培育快速生长的转基因动物，如转基因绵羊、转基因鲤鱼；改善畜产品品质的转基因动物 ，如乳汁中含乳糖较少的转基因牛；生产药物的转基因动物，如利用乳腺生物反应器生产药物；作器官移植供体的转基因动物，如无免疫排斥的转基因猪。 【详解】A、将某种药用蛋白基因导入动物受精卵中，再将其培育成转基因动物才可获得乳腺生物反应器，A错误； B、用转入抗原基因的微生物生产疫苗，B错误； C、培育青霉菌并从中提取青霉素，没有采用基因工程技术，C错误； D、利用基因工程技术将多个杀虫基因导入棉花中，使棉花表现抗虫性状，从而提高杀虫活性，D正确。 故选D。 16. 已知生物体内有一种转运蛋白Y，如果将蛋白Y 中某一个氨基酸替换，改变后的蛋白质 Y1不但保留了蛋白Y原有的功能，而且具备了酶的催化功能。下列叙述正确的是（ ） A. 蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异 B. 可以通过对 Y 蛋白基因改造或人工合成获得 Y1蛋白基因 C. 蛋白质工程在设计蛋白质结构时的依据是现有基因的脱氧核苷酸序列 D. 蛋白质工程与中心法则的信息流动方向一致，即DNA→mRNA→蛋白质 【答案】B 【解析】 【分析】蛋白质工程概念及基本原理（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。（2）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。（3）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。（4）基本途径：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。 【详解】A、蛋白质工程和基因工程的根本区别是蛋白质工程可制造出自然界没有的蛋白质，A错误； B、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，因此可以通过对Y蛋白基因改造或人工合成获得Y1蛋白基因，B正确； C、蛋白质工程在设计蛋白质结构时的依据是人类的意愿，C错误； D、蛋白质工程与中心法则的信息流动方向相反，D错误。 故选B。 二、非选择题：本题共5小题，共52分。 17. 乐果是一种广泛使用的有机磷农药，对被乐果污染的土壤进行微生物修复一直是科学家研究的热点。现在从土壤中筛选能有效降解乐果的微生物，请回答下列问题： （1）用于筛选的样品应来自______的土壤。 （2）微生物驯化是指在培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，得到对此种物质耐受或能降解此种物质的微生物的过程。该实验中，所用驯化培养基中含有蛋白胨10g、氯化钠1g、磷酸二氢钾1g、水1L、葡萄糖1g和不同浓度的乐果。请据此回答： ①上述驯化培养基按功能分属于______培养基。培养基配制后需要采用______法进行灭菌。 ②驯化后含有微生物的菌液可通过______法进行接种，从分离得到的单菌落中挑取待筛选的菌株。研究人员通常根据菌落的______特征来初步区分不同种的微生物。若要对菌液中的微生物进行计数，则接种的工具应该选择______。 ③进行微生物的纯培养时，培养基冷凝后要将平板倒置，既可防止______，又可避免______。 （3）若要进一步鉴定不同种的待测菌株对乐果的降解能力，请写出简要的实验思路：______。 【答案】（1）被乐果污染 （2） ①. 选择 ②. 高压蒸汽灭菌 ③. 稀释涂布平板（或平板划线） ④. 形状、大小、隆起程度和颜色等 ⑤. 涂布器 ⑥. 培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基上造成污染 ⑦. 培养基中的水分快速挥发 （3）分别将等量的含不同菌株的培养液涂布在含有一定浓度的乐果的培养基上，在相同且适宜的环境下培养，定时测量各个培养基中乐果的剩余量 【解析】 【分析】1、培养基从功能上可划分为选择培养基和鉴别培养基，从物理性质上可划分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基，从成分上可划分为天然培养基和合成培养基。 2、为了防止培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基上造成污染，且避免培养基中的水分快速挥发，培养基冷凝后要将平板倒置。 【小问1详解】 为了从土壤中筛选能有效降解乐果的微生物，故用于筛选的样品应来自被乐果污染的土壤。 【小问2详解】 ①根据题意可知，通过增加乐果的浓度以得到能降解乐果的微生物，故该驯化培养基按功能分属于选择培养基。高压蒸汽灭菌是一种有效的物理灭菌方法，适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。 ②一般采用稀释涂布平板法或平板划线法将菌液接种到固体培养基上，使菌液中的菌种分散成单个细胞，培养一段时间后获得由一个细胞繁殖来的肉眼可见的子细胞群提，故可将驯化后含有微生物的菌液通过稀释涂布平板（或平板划线）法进行接种，从分离得到的单菌落中挑取待筛选的菌株。由于不同微生物形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等不相同，研究人员通常根据菌落的这些特征来初步区分不同种的微生物。可以用于计数的是稀释涂布平板法，则接种的工具应该选择涂布器。 ③为了防止培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基上造成污染，且避免培养基中的水分快速挥发，培养基冷凝后要将平板倒置。 【小问3详解】 为了进一步鉴定不同种的待测菌株对乐果的降解能力，可分别将等量的含不同菌株的培养液涂布在含有一定浓度的乐果的培养基上，在相同且适宜的环境条件下培养，定时测量各个培养基中乐果的剩余量。乐果剩余量越低，说明待测菌株对乐果的降解能力越强，反之则越弱。 18. 学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了矮牵牛—粉蓝烟草植株。为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用绿色荧光和红色荧光分别标记矮牵牛原生质体和粉蓝烟草原生质体上的蛋白质，其培育过程如图。回答下列问题： （1）植物体细胞杂交依据的生物学原理是____。人工诱导原生质体的融合可以采用____和____两种化学方法进行融合。 （2）在鉴定融合的原生质体时可用显微镜进行观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到____种不同的原生质体（只考虑细胞两两融合的情况），其中杂种细胞膜表面有____种颜色的荧光。 （3）矮牵牛—粉蓝烟草植株____（填“可育”或“不可育”），原因是____。 【答案】（1） ①. 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 ②. PEG（或聚乙二醇）促融 ③. Ca2+-高pH融合法 （2） ①. 3 ②. 2 （3） ①. 可育 ②. 矮牵牛—粉蓝烟草植株能够进行减数分裂产生正常的配子 【解析】 【分析】植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 【小问1详解】 植物体细胞杂交依据的生物学原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。人工诱导原生质体的融合可以采用PEG（或聚乙二醇）促融和高Ca2+-高pH融合法两种化学方法进行融合，植物体细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁。 【小问2详解】 在鉴定融合的原生质体时可用显微镜进行观察，进行原生质体融合时，只考虑细胞两两融合的情况，会出现三种情况，矮牵牛原生质体与矮牵牛原生质体融合，观察细胞膜表面荧光为绿色，粉蓝烟草原生质体与粉蓝烟草原生质体融合，观察细胞膜表面荧光为红色，矮牵牛原生质体与粉蓝烟草原生质体融合，观察细胞膜表面荧光为绿色和红色，所以根据细胞膜表面荧光的不同可观察到3种不同的原生质体，其中杂种细胞膜表面有2种颜色的荧光。 【小问3详解】 理论上矮牵牛—粉蓝烟草植株可育，因为矮牵牛—粉蓝烟草植株含有四套染色体组，能够进行减数分裂产生正常的配子，因而表现为可育。 19. “生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼，由单克隆抗体与药物结合而成。单克隆抗体能自动导向，在生物体内与特定细胞或组织结合，并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如图所示，分析回答下列问题： （1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得的______细胞，提取该细胞之前，给小鼠注射的特定物质相当于______；B过程最终得到的杂交瘤细胞的特点是______。 （2）体外培养杂交瘤细胞的培养基与用于植物组织培养的培养基在物理性质上的主要区别是前者要用______，从培养基的成分来看，前者培养基中除了添加必要的营养物质外还需要加入一些天然成分，如______。 （3）特异性抗体也可以通过常规方法来制备：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物的血清中分离所需抗体。与这种常规方法相比，单克隆抗体具有______等优点。 【答案】（1） ①. B淋巴 ②. 抗原 ③. 既能产生专一抗体，也能无限增殖  （2） ①. 液体培养基 ②. 动物血清 （3）特异性强、灵敏度高、能大量制备 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【小问1详解】 单克隆抗体制备的过程：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体，图中A过程从小鼠的脾脏中取得的是已经免疫的B淋巴细胞，提取之前注射的物质相当于抗原；杂交瘤细胞具有既能产生专一抗体，也能无限增殖 的特点。 【小问2详解】 体外培养杂交瘤细胞的培养基是液体培养基，而用于植物组织培养的培养基是固体培养基；前者还需要加入动物血清等，以保证动物细胞的正常生长。 【小问3详解】 与传统的抗体比，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、能大量制备等特点。 20. BamHⅠ和BclⅠ是两种限制酶，其识别序列及切割位点如下表所示。探究下列问题： 限制酶 BamHⅠ BclⅠ 识别序列及切割位点 （1）限制酶 _______(填“能”或“不能”)切割原核细胞自身的DNA，试推测其理由是_______。 （2）若某链状DNA分子中含有两个BamHⅠ的识别序列，该DNA分子将被切成________个片段，共断裂________个磷酸二酯键。 （3）请画出BclⅠ切割后产生的末端_______。 （4）BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的黏性末端能否被DNA连接酶连接_______？说明你的理由_______。 （5）为什么不同生物的DNA分子能拼接起来_______？ 【答案】（1） ①. 不能 ②. 原核细胞DNA中不存在限制酶的识别序列或能被识别的序列被修饰了 （2） ①. 3 ②. 4 （3） （4） ①. 能 ②. 二者切割后产生的黏性末端相同，可被DNA连接酶连接。 （5）①DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸；②双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构；③DNA分子都遵循碱基互补配对原则。 【解析】 【分析】限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。 【小问1详解】 限制酶能切割外源DNA， 不能切割原核细胞自身的DNA，其可能的原因是原核细胞DNA中不存在限制酶的识别序列或能被识别的序列被修饰了。 【小问2详解】 若某链状DNA分子中含有两个BamHⅠ的识别序列，若用限制酶BamHⅠ识别并切割，则该DNA分子将被切成3个片段，共断裂4个磷酸二酯键，每个识别序列被切割的过程中会断裂2个磷酸二酯键。 【小问3详解】 表中信息可知BclⅠ的识别序列为-TGATCA-，且在T/G之间切开，则切割后产生的序列为 。 【小问4详解】 BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的黏性末端相同，均为-CTAG，可见这两种限制酶切割产生的黏性末端能被DNA连接酶连接。 【小问5详解】 不同生物的DNA具有相同的基本单位，即四种脱氧核苷酸，且双链DNA的空间结构相同，均为双螺旋结构，且不同生物的DNA分子都遵循相同的碱基互补配对原则，因此，不同生物的DNA分子能在相关酶的催化下拼接起来。 21. 几种常见的限制酶及切割位点如表所示。在用PCR扩增目的基因时，引物与模板链的结合往往使第一轮循环得到的产物DNA两条链不等长，过程如图所示。回答下列问题： 限制酶 BamH I EcoR I Nco I Nhe I 识别序列 5'-G↓GATCC-3' 5'-G↓AATTC-3' 5'-C↓CATGG-3' 5'-G↓CTAGC-3' （1）引物的作用是______，PCR的每次循环包括三个步骤，其中使引物和模板链结合的步骤是______。 （2）图中的引物甲和引物乙对应的表中的限制酶分别是______和______，其中限制酶BamH I识别的DNA序列______（填“能”或“不能”）被限制酶Nco I识别。 （3）图中PCR中，至少经过______次循环可以获得两条链等长的DNA。理论上，经过4次循环后，两条链等长的DNA在所有DNA中所占的比例为______。 【答案】（1） ①. 与目的DNA的单链相应互补序列结合，使DNA聚合酶能够从其3'端开始连接脱氧核糖核苷酸 ②. 复性 （2） ①. Nco I ②. Nhe I ③. 不能 （3） ①. 3##三 ②. 1/2 【解析】 【分析】1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸。 【小问1详解】 引物的作用是与目的基因的单链相应互补序列结合，在DNA聚合酶的作用下从其3'端开始链接脱氧核苷酸延伸子链。PCR反应过程是：变性→复性→延伸，复性可使引物和模板链结合。 【小问2详解】 引物与模板链碱基互补配对，由此可知引物甲的碱基序列是5´-CCATGG-3´，引物乙的碱基序列是5´-GCTATGC-3´，结合表格可知，则引物甲和引物乙对应的表中的限制酶分别是NcoI和NheI。酶具有专一性，限制酶BamHI识别的DNA序列是5´-GGATCC-3´，不能被限制酶NcoI识别。 【小问3详解】 根据PCR过程和DNA分子半保留复制特点可知，前两轮循环产生的4个DNA分子的两条链均不等长，第3次循环产生的8个DNA分子存在等长的两条核苷酸链，即仅含两种引物之间的目的基因序列，8个DNA含有16条单链，8条单链只含有目的基因，理论上，经过4次循环后产生24=16个DNA分子，两条链等长的DNA有8个，在所有DNA中所占的比例为1/2。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $