精品解析：2025届江苏省南通市海安高级中学高三模拟考试生物试题

2025届高三模拟考试 生物 一、单选题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。 1. “盐水鸭”是南京的著名特产，以中秋前后桂花盛开季节制作的盐水鸭色味最佳，又名桂花鸭，是中国地理标志产品。下列叙述正确的是（　　） A. 做南京盐水鸭的鸭子吃水草、螺、蚌等长大，是初级消费者 B. 做南京盐水鸭的鸭子体内核酸初步水解和彻底水解产物分别为5种和8种 C. 南京盐水鸭采用“低温熟煮”烹饪工艺，含量最多的化合物是水 D. 南京盐水鸭严控NaCl用量，主要有利于细胞内液渗透压的维持 2. 酶可以为生活添姿彩，亦可助力科技发展，下列相关叙述正确的是（　　） A. 酶的元素组成是C、H、O、N，可以降低化学反应的活化能 B. 溶菌酶属于免疫的第一道防线，亦可与抗生素联合使用增强抗生素疗效 C. DNA酶、蛋白酶、RNA酶等助力了DNA是肺炎链球菌主要遗传物质的发现 D. 中国台湾科学家钱嘉韵分离到耐高温DNA聚合酶助力了PCR的大规模应用 3. 科学的选材，实验便成功了一半。下列关于选材的叙述错误的是（　　） A. 鸡血细胞是制备细胞膜和粗提取DNA的好材料 B. 雄性不育系水稻是水稻杂交育种和杂种优势保持的好材料 C. 白眼雄果蝇、平衡致死系等突变体都可作为遗传学研究的好材料 D. 物质组成简单的T2噬菌体是研究遗传物质的好材料 4. 某校课外兴趣小组进行相关实验，操作合理的是（　　） A. 用黑藻进行光合色素的提取和细胞质流动的观察都应优先选择成熟叶 B. 酸奶制作时先集中加热除菌，后接种搅拌，最后分装到相应容器（可基本装满容器） C. 用血细胞计数板模拟血细胞计数白细胞和红细胞所用的计数室应相同 D. 探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用时，花盆宜放置在有散射光的地方培养 5. 分析黑斑蛙的核型，需制备染色体标本，流程如下。相关叙述错误的是（　　） A. 可用蛙红细胞替代骨髓细胞制备染色体标本 B. 秋水仙素处理的目的是为了让细胞同步化在中期 C. 低渗处理的目的是为了让细胞适度吸水膨胀（便于染色体分散和滴片） D. 镜检后需要对细胞中染色体进行计数、归类和排列 6. 制备蛙的坐骨神经-腓肠肌标本，将其置于任氏液中进行实验。下列叙述正确的是（　　） A. 任氏液渗透压和化学成分与蛙的细胞内液接近 B. 神经纤维末梢释放的神经递质作用于腓肠肌引起的信号转变是“电信号→化学信号” C. 刺激腓肠肌，在肌肉和神经纤维上都可能会检测到电位变化 D. 刺激腓肠肌，在肌肉和坐骨神经上都可能会检测到电位变化 7. 每年4～5月盛花期石楠（Photinia serratifolia）因释放出“腥臭味”而背上了“最臭之花”的恶名，这其实是其挥发成分中三甲胺等胺类化合物相互作用产生的，浓度低时类似于鱼腥味，高浓度时则呈现氨的气味（腐臭味）。《本草纲目》记载，石楠“生于石间向阳之处”，故得名“石南”，后古人认为“南”字缺少草木偏旁，遂改为“石楠”。下列叙述错误的是（　　） A. 石楠可作土农药防治蚜虫、抑制马铃薯病菌孢子发芽，这属于生物防治 B. 石楠可降尘、驱虫，是抗霾“神器”，这体现了生物多样性的间接价值 C. 石楠盛花期释放“腥臭味”主要是为了吸引蜜蜂来帮助其传花授粉的 D. 石楠盛花期释放“腥臭味”的生存智慧，是长期共同进化的结果 8. 荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针，与染色体上对应的DNA片段结合，从而将特定的基因在染色体上定位。下来叙述正确的是（　　） A. 图1中的DNA酶I是一种随机性的外切核酸酶 B. DNA酶I随机切割后产生的缺口由DNA聚合酶I从5不断延伸补齐 C. 图2中的两条姐妹染色单体最多会有2条荧光标记的DNA片段 D. 该技术可用于21三体综合征和猫叫综合征的诊断 9. 国家卫健委联合16个部门发布《“体重管理年”活动实施方案》，期待通过三年行动（2024～2026年），构建全民体重管理支持性环境，提升居民体重管理意识和技能，普及健康生活方式，降低超重和肥胖率，减少慢性病发生风险。下列相关叙述错误的是（　　） A. 肥胖的人群一般不会出现“营养不良”的症状 B. 肥胖是Ⅱ型糖尿病的常见诱因之一，导致出现胰岛素抵抗 C. “减肥难”的主要原因是糖类转化为脂肪容易，但脂肪转化为糖不容易 D. 一定的脂肪有利于维持内脏器官正常的结构和功能，也可增强人体抗逆境能力 10. 贵州茅台、张裕干红、蒙牛酸奶、海安臭干（真菌发酵）等食品都离不开微生物发酵和独特气候条件。下列相关叙述错误的是（　　） A. 贵州茅台酒的品质离不开当地的特殊气候环境和菌种，为长期收藏灌装前需严格灭菌 B. 张裕干红发酵所接种特定微生物有助于控制酒品，主发酵后还有后发酵和陈化过程 C. 蒙牛酸奶发酵接种的乳酸菌一般是复合菌种，发酵结束后需迅速使其冷却到10℃以下 D. 海安臭干臭味主要来自发酵时蛋白质等变质所产物质，炸制可产生香味物质，也可控菌 11. 海安市雅周镇集中优势力量打造了“万亩良田”工程，一个合作社，三万亩耕地，水稻小麦轮作，从播种、施有机肥到收割，从秸秆离田、处置到销售，我们全产业链服务。下列相关叙述错误的是（　　） A. 土壤的微生物可能属于生产者、消费者、分解者 B. 万亩良田不但提高了经济效益，还具有深远的环保效益 C. 水稻和小麦的轮作，有利于充分利用土壤矿质元素，减少病虫害发生 D. 有机肥为生产者和分解者提供的是物质和能量，提高了能量利用率 12. 在脊髓中央灰质区，神经元a、b、c通过两个突触传递信息（突触前抑制主要参与感觉传入系统的精细调节，抑制非主要信号的传递），如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 静息状态维持时，神经细胞会发生大量的K+外流 B. a兴奋则会引起b、c之间的兴奋传递受抑制 C. b兴奋使c内Na+快速外流产生动作电位 D. 与突触前抑制相比，突触后抑制是突触后膜直接被抑制性递质作用引起去极化 13. 下列关于细胞工程的叙述，错误的是（　　） A. 利用茎尖组织培养技术得到的脱毒苗，能有效提高无性繁殖的农作物的产量和品质 B. 植物细胞培养过程中可使用振荡来分散细胞，因为愈伤组织细胞壁薄且排列疏松 C. 动物细胞培养时需要添加适量的抗生素，以实现动物细胞培养的无菌和无毒 D. 单克隆抗体不但可以用于治疗和诊断，还可用于定向运载药物 14. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 为获得更多的囊胚，可给雌性动物口服适量的促性腺激素 B. 细胞a和细胞b内含有的核基因相同，全能性高低也相同 C. 用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞 D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养，都需要在培养液中添加营养成分 二、多选题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对的得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 15. 图示普通韭菜（2n=16）花药结构。为了快速获得普通韭菜的纯系，科研人员利用其花药进行单倍体育种。下列相关叙述正确的有（　　） A. 花粉细胞和花药壁细胞均含有全套遗传物质 B. 花药离体培养的脱分化阶段使用的是液体培养基 C. 花药离体培养得到的植株不一定是单倍体 D. 花药离体培养得到的单倍体经低温加倍后，细胞染色体数目不一定是16 16. 胸腺嘧啶脱氧核苷（简称胸苷）在细胞内可转化为胸腺嘧啶脱氧核苷酸，后者是合成DNA原料，用含有3H—胸苷的营养液，处理活的小肠黏膜层，半小时后洗去游离的3H—胸苷。连续48小时检测小肠绒毛的被标记部位，结果如下图（黑点表示放射性部位），下列叙述正确的有（　　） A. 处理后开始几小时，只有a处能检测到放射性，说明只有a处细胞是活细胞 B. 处理后24h和48h，在b和c处检测到放射性，原因是细胞连续分裂将有放射性标记的细胞推向b处和c处 C. 若继续跟踪检测，小肠黏膜层上的放射性将会消失 D. 若用3H—尿苷代替3H—胸苷其余相同，一段时间后小肠黏膜层各处都可检测到放射性 17. 某同学用光学显微镜对4种实验材料进行观察并记录，下表实验现象合理的是（　　） 选项 试验材料 实验现象 A 用苏丹Ⅲ染液染色的花生子叶切片 子叶细胞中可出现大小不同的橘黄色颗粒 B 用0.3g/mL蔗糖溶液处理紫色洋葱鳞片叶外表皮装片 紫色液泡逐渐变小，颜色逐渐变深，单个细胞体积显著变小 C 用甲紫染液染色的洋葱根尖装片 染色体在细胞中移动并平均分配到两极，不易在一个视野中找到分裂期各时期细胞 D 用台盼蓝染液染色处于指数期的酵母菌涂片 少部分酵母菌被染成蓝色 A. A B. B C. C D. D 18. 下列关于“提取”和“分离”的叙述，正确的是（　　） A. 提取叶绿素可以用无水乙醇、丙酮或无水乙醇与丙酮的混合物 B. 提取DNA需同时兼顾DNA的完整性、纯度和含量 C. 光合色素用不同的层析液可能会得到不同的色素排列顺序 D. DNA和蛋白质分离常采用琼脂糖凝胶电泳，但用的标准参照物是统一的 19. 苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因如何在棉花（真核生物）细胞中有效表达，科学家需要考量的因素有（　　） A. 原核细胞的启动子和终止子无法被真核细胞的RNA聚合酶有效识别 B. 原核细胞基因与真核细胞基因的空间结构不同，影响转录 C. 原核细胞与真核细胞对密码子的使用频率不同，导致翻译效率低下 D. 原核细胞基因转录产生的mRNA真核细胞的核糖体无法翻译 三、非选择题：本部分包括5题，共计57分。 20. 小球藻是常用的光合作用实验材料。请回答下列相关问题。 （1）小球藻可进行叶绿体分离实验将小球藻暗处理24小时，置于研钵中，研磨前加入适量的0．35mol/LNaCl溶液和pH7.8的缓冲液；研磨后进行_______，得到离体的叶绿体悬液。实验中NaCl溶液的作用是_______。暗处理是为了消耗淀粉，防止离心时淀粉颗粒使_______。 （2）20世纪40年代，卡尔文及其同事进行如下实验：向小球藻悬浮液中通入14CO2→用14CO2同化处理不同的时间→用沸腾的酒精处理→蒸发浓缩→双向纸层析→放射自显影。其中隔5s和隔30s的层析结果分别如图1所示（注：图中阴影面积越大、颜色越深，表示放射性物质越多）。据图分析，回答下列问题： ①用沸腾的酒精处理的目的是_______；双向纸层析是第一次层析后，将滤纸旋转90°进行第二次层析的方法，纸层析法分离不同物质的原理是______。 ②根据双向层析结果推测图1中最先合成的化合物是______。 ③为了确定光合作用暗反应中固定CO2所形成第一种化合物，应进一步进行的实验处理是______。 （3）卡尔文对C3的分子结构进行分析后发现，形成的C3中只有一个碳原子带有放射性，另外两个碳原子则不带放射性，这说明C3不是由3个14CO2生成的，而是由一个14CO2和其它物质结合生成的（X物质+CO2→C3）。为了进一步探究14CO2和什么物质结合生成C3，卡尔文在反应中将1%浓度的14CO2突然降低到0.003%浓度检测部分物质的含量变化，结果如图2所示。据图分析，这个X物质是_______，判断依据是_______。 21. 白血病是一类由骨髓造血干细胞恶性增殖引起的疾病，目前通过骨髓配型进行的人类异体造血干细胞移植是治疗白血病的关键手段，移植后的急性移植物抗宿主病（aGVHD）是其常见的并发症。为了降低患者产生aGVHD的风险，显著提升患者长期生存率，科学家展开了一系列相关研究。 （1）临床发现，慢性炎症是白血病的重要驱动因素。正常人体通过“炎症反射”以防止促炎因子的过量产生，其部分作用机理如下左图所示。该反射弧中的效应器是______。促炎因子产生过多时会刺激机体产生“炎症反射”，可以抑制促炎因子的过量产生，这是机体的一种________调节。 （2）移植前，供、受者间要进行严格的组织配型，需要供体与受体的_________有一半以上相同。移植后，为了减少免疫排斥现象，常使用______（填激素名称）等免疫抑制药物进行干预。人体内该激素的分泌受________轴调节。 （3）研究人员通过小鼠实验数据发现，同一天内干细胞回输给受体的不同时间点显著影响aGVHD的发生。为了验证动物中观察到的现象，研究人员对患者（志愿者）进行分组临床实验，该实验的自变量是______，跟踪对比两组患者的aGVHD发生率，得出结果如下图所示。 （4）为了探究上述现象的机制，研究人员检测了其他患者移植前体内血清中包括IL-1α在内的多种促炎因子的日变化水平。检测结果显示，人体早晨时血清中的IL-1α浓度较弱，下午时较高。结合上述临床实验结果，说明：______。进一步细胞实验发现，患者刚苏醒时血清中较弱的促炎环境，能够降低_______的早期活化、增殖，降低机体免疫排斥水平。小鼠体内实验也同样证实上述结果。 （5）根据以上实验结果解释IL-1α受体拮抗剂能够降低aGVHD发生率的原理：______。 22. 南京雨花茶，因状如松针，与安化松针、恩施玉菡一起，被称“中国三针”。为更好的提高茶叶的品质，有关专家对茶园生态系统进行了调查研究。 （1）茶园生态系统不同地段分布有不同的生物类群，体现了群落的_____结构，其生态系统的结构包括_____。 （2）蜘蛛在茶园生态系统中发挥着重要作用。在不同类型的茶园中对蜘蛛的相关指数进行了调查，得到下表数据，据此回答问题：（已知有机茶园不喷洒除草剂，每年采茶1次；无公害茶园每年喷洒除草剂2次，采茶4次；普通茶园每年喷洒除草剂2次，采茶6次。） 项目 有机茶园 无公害茶园 普通茶园 个体数 1615 982 601 物种数 57 48 34 丰富度指数 7.72 6.83 5.22 调查蜘蛛个体数的方法是_____，与其它两种茶园相比，有机茶园中蜘蛛的个体数、物种数、丰富度指数均明显增多，一定程度上防止了虫害的发生，其依据的生态工程原理是_____。普通和无公害茶园都使用除草剂，从能量流动的角度分析，除草的目的是_____。据研究结果，从茶园管理角度分析，有机茶园中蜘蛛数目最高的原因可能有_____。 （3）下图为该生态系统的部分能量流动示意图，M、N表示营养级。 图中M用于生长、发育和繁殖的能量为_____kJ/（m2·a）。由M到N的能量传递效率为_____ %（保留一位小数）。 （4）防治虫害是提高茶园产量的重要一环，为此有关专家开发了一种新型的生物防治手段——“载体植物系统”，由载体植物、天敌昆虫和替代猎物构成。该系统是一种天敌饲养和释放系统。替代猎物在载体植物上繁衍，可作为天敌昆虫的食物，以维持天敌昆虫的数量。为研究茶园中载体植物系统对茶蚜等害虫的防治效果，研究人员进行了如下实验： 选取茶树植株健康、长势一致的茶园，均分为甲、乙、丙三组，甲组茶园内种植适量蚕豆苗，然后在每株蚕豆苗上接入5头蚕豆蚜成虫，3天后按2.5头/m2的比例在甲、乙两个茶园中释放南方小花蝽，丙组茶园不做处理。回答下列问题： ①_____是该茶园载体植物系统中的天敌昆虫。 ② 3周后调查各组茶园内茶蚜等目标害虫的种群数量并作出比较，正常情况下甲、乙、丙三组中，目标害虫的种群数量关系大小应该为_____。 23. 控制果蝇性状基因可位于线粒体、常染色体和性染色体等。现有野生型（灰身长翅刚毛）纯合雌雄果蝇若干，科研小组培育出突变体：黑身长翅截毛雄蝇（甲）、灰身残翅刚毛雌蝇（乙）和雄蝇（丙）。甲乙杂交，F1雌雄果蝇都为灰身长翅刚毛，再让F1雌蝇与丙交配，F2统计结果如下表所示。表中数据与理论上比例相同；杂交过程中不存在致死和突变现象：各种配子及受精后活力相同。黑身灰身、长翅残翅和刚毛截毛三对相对性状的基因分别用A/a、B/b和D/d表示。 表型 雌蝇 雄蝇 表型 雌蝇 雄蝇 灰身长翅刚毛 16 8 灰身长翅截毛 0 8 灰身残翅刚毛 84 42 灰身残翅截毛 0 42 黑身长翅刚毛 84 42 黑身长翅截毛 0 42 黑身残翅刚毛 16 8 黑身残翅截毛 0 8 （1）雄蝇丙表型是______。截毛遗传方式可能是______。 （2）已知雌果蝇同源染色体之间互换形成重组型配子的比例小于非重组型配子的比例。画出F1雌蝇A/a、B/b这两对基因在染色体上相对位置关系图：______（注：用“”形式表示，其中横线表示染色体，圆点表示基因在染色体上的位置）。仅考虑体色和翅形遗传，F1雌蝇与另一品系基因型相同雄蝇交配，子代中黑身残翅的概率为1/25，已知雄果蝇同源染色体之间不互换，则子代中灰体长翅概率为______。 （3）F1中某只雌蝇产生一个AABb的卵，推测最可能原因是______。 （4）截毛基因和刚毛基因cDNA中转录的非模板链部分测序如下（“_”表示缺少一个碱基）：由此可知刚毛基因突变成截毛基因发生了碱基对的______，造成蛋白质翻译在第________位氨基酸后提前终止（终止密码子：UAA、UAG、UGA，起始密码子：AUG）。 24. M蛋白与“记忆”的形成密切相关。科研人员制备了M基因表达可控的实验模型小鼠，主要制备流程见下图。实验模型小鼠通过特异性表达Cre重组酶来敲除两个LoxP位点间的序列，同时利用体内表达的蛋白A激活诱导型T启动子。利用融合绿色荧光蛋白基因的M基因（M-GFP）的表达，恢复小鼠自身被敲除的M基因功能，同时便于示踪。回答下列问题： 【注】基因型A/+指的是A基因被整合在细胞一对同源染色体中的某一条染色体上，即可看成基因型为Aa；两端添加上LoxP位点的M基因称为floxM。 （1）在PCR扩增片段①和②时，通常会在所用引物的一端添加被限制酶识别序列，该序列添加的位置不能位于引物的______（选填“3'端”或“5'端”），目的是避免_______。 （2）在构建载体1时，为了阻断A基因在模型鼠构建成功之前的表达，从转录水平考虑，连接的片段①可以是两端含LoxP位点的______；而从翻译水平考虑，连接的片段①可以是_______。为了鉴定载体2是否构建成功，需要限制酶切割载体2后，再进行______。 （3）培养小鼠胚胎干细胞需定时更换培养液，其主要目的是_______；添加血清的主要作用是________。 （4）为了快速高效繁育出含有4对基因（遵循自由组合定律）的实验模型小鼠，应将培育出的基因型Cre/+A/+小鼠和M-GFP/+floxM/+小鼠分别与基因型foxM/floxM小鼠杂交，杂交获得的子代，再进行一代杂交后最终获得基因型为______的实验模型小鼠，在一定的条件下Cre重组酶表达，将两端含有同向LoxP位点的DNA序列均切除。 （5）为实现M基因的表达可控，在实验模型小鼠喂食时，可添加竞争性结合A蛋白的四环素，抑制T启动子的活性。添加四环素与未添加相比，目的是______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2025届高三模拟考试 生物 一、单选题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。 1. “盐水鸭”是南京的著名特产，以中秋前后桂花盛开季节制作的盐水鸭色味最佳，又名桂花鸭，是中国地理标志产品。下列叙述正确的是（　　） A. 做南京盐水鸭的鸭子吃水草、螺、蚌等长大，是初级消费者 B. 做南京盐水鸭的鸭子体内核酸初步水解和彻底水解产物分别为5种和8种 C. 南京盐水鸭采用“低温熟煮”烹饪工艺，含量最多的化合物是水 D. 南京盐水鸭严控NaCl用量，主要有利于细胞内液渗透压的维持 【答案】C 【解析】 【分析】细胞内含量最多的化合物是水，有机化合物是蛋白质。 【详解】A、做南京盐水鸭的鸭子吃水草、螺、蚌等长大，是初级消费者和次级消费者，A错误； B、鸭子体内核酸有2种，分别是DNA和RNA，因此初步水解的产物有8种，四种脱氧核苷酸和四种核糖核苷酸，彻底水解产物也有8种，分别是A、T、C、G、U、脱氧核糖、核糖、磷酸，B错误； C、细胞内含量最多的化合物是水，C正确； D、南京盐水鸭严控NaCl用量，并不是有利于细胞内液渗透压的维持，此时细胞已经死亡，主要是要让细胞失水和调味，D错误。 故选C。 2. 酶可以为生活添姿彩，亦可助力科技发展，下列相关叙述正确的是（　　） A. 酶的元素组成是C、H、O、N，可以降低化学反应的活化能 B. 溶菌酶属于免疫的第一道防线，亦可与抗生素联合使用增强抗生素疗效 C. DNA酶、蛋白酶、RNA酶等助力了DNA是肺炎链球菌主要遗传物质的发现 D. 中国台湾科学家钱嘉韵分离到耐高温DNA聚合酶助力了PCR的大规模应用 【答案】D 【解析】 【分析】酶是由活细胞产生的具有催化作用的有机物，绝大多数酶是蛋白质，少数酶是RNA。酶的特性：高效性、专一性和作用条件较温和。 【详解】A、酶的本质是蛋白质或RNA，酶的元素组成是C、H、O、N或P，可以降低化学反应的活化能，A错误； B、体液中的溶菌酶属于第二道防线，泪液和唾液中的溶菌酶属于第一道防线，B错误； C、在肺炎链球菌转化实验中，DNA酶可降解DNA（证明DNA是遗传物质），但蛋白酶和RNA酶的作用是排除蛋白质和RNA的干扰，DNA酶、蛋白酶、RNA酶等助力了DNA是肺炎链球菌的遗传物质的发现，C错误； D、钱嘉韵（Alice Chien）从嗜热菌中分离的Taq DNA聚合酶耐高温，助力了PCR的大规模应用，D正确。 故选D。 3. 科学的选材，实验便成功了一半。下列关于选材的叙述错误的是（　　） A. 鸡血细胞是制备细胞膜和粗提取DNA的好材料 B. 雄性不育系水稻是水稻杂交育种和杂种优势保持的好材料 C. 白眼雄果蝇、平衡致死系等突变体都可作为遗传学研究的好材料 D. 物质组成简单的T2噬菌体是研究遗传物质的好材料 【答案】A 【解析】 【分析】细胞膜的制备通常用的是哺乳动物成熟的红细胞；T2噬菌体是由DNA和蛋白质外壳组成。 【详解】A、鸡血细胞可用于DNA粗提取，但含有细胞核等成分，不适合制备纯净的细胞膜，A错误； B、雄性不育系水稻在杂交育种中可避免自交，保持杂种优势，B正确； C、白眼雄果蝇和平衡致死系突变体是遗传学研究的良好材料，C正确； D、T2噬菌体结构简单，仅由DNA和蛋白质外壳组成，是研究遗传物质的理想材料，D正确。 故选A。 4. 某校课外兴趣小组进行相关实验，操作合理的是（　　） A. 用黑藻进行光合色素的提取和细胞质流动的观察都应优先选择成熟叶 B. 酸奶制作时先集中加热除菌，后接种搅拌，最后分装到相应容器（可基本装满容器） C. 用血细胞计数板模拟血细胞计数白细胞和红细胞所用的计数室应相同 D. 探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用时，花盆宜放置在有散射光的地方培养 【答案】D 【解析】 【分析】1、叶绿体色素的提取和分离实验： (1)提取色素原理：色素能溶解在酒精或丙酮等有机溶剂中，所以可用无水酒精等提取色素。 (2)分离色素原理：各色素随层析液在滤纸上扩散速度不同，从而分离色素。溶解度大，扩散速度快；溶解度小，扩散速度慢。 2、酸奶制作时，先将牛奶加热煮沸，然后冷却至40℃左右，再按照1：5的比例将准备好的酸奶加入牛奶中，充分摇匀，然后倒入已消毒的保温杯中，保温1h即可。 3、探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用时，花盆宜放置在有散射光的地方培养。 【详解】A、成熟叶叶绿素含量高，适合提取色素；黑藻幼叶细胞更薄，叶绿体分布稀疏且流动更清晰，利于观察，因此，观察细胞质流动应优先选择幼叶，A错误； B、酸奶制作时分装装满容器，可减少空气进入，创造厌氧环境，利于乳酸菌发酵，但对原料灭菌后，需冷却至 40℃左右再接种乳酸菌，否则高温会杀死菌种，B错误； C、血细胞计数板的计数室分为不同区域，红细胞数量多，常用中央大方格内的小方格计数；白细胞数量少，常用四角的大方格计数，两者计数区域不同，C错误； D、扦插枝条在生根过程中，若置于强光下，会因蒸腾作用过强导致失水枯萎；散射光既能提供一定光照（利于微弱光合作用），又能避免强光伤害，同时维持适宜的温度和湿度，有利于枝条生根，操作合理，D正确。 故选D。 5. 分析黑斑蛙的核型，需制备染色体标本，流程如下。相关叙述错误的是（　　） A. 可用蛙红细胞替代骨髓细胞制备染色体标本 B. 秋水仙素处理的目的是为了让细胞同步化在中期 C. 低渗处理的目的是为了让细胞适度吸水膨胀（便于染色体分散和滴片） D. 镜检后需要对细胞中染色体进行计数、归类和排列 【答案】A 【解析】 【分析】分析黑斑蛙的核型，需制备染色体标本，培养细胞并用秋水仙素处理，秋水仙素的作用是抑制纺锤体的形成，使细胞分裂停滞于中期，便于染色体的观察分析；低渗处理的目的是使组织细胞充分吸水膨胀，染色体分散；染色体易被碱性染料染成深色，如龙胆紫溶液等。 【详解】A、蛙红细胞只能进行无丝分裂，分裂过程中没有染色体的出现，因此不能用蛙红细胞替代骨髓细胞制备染色体标本，A错误； B、该实验目是分析黑斑蛙的核型，加秋水仙素目的是抑制纺锤体的形成，让大量细胞处于有丝分裂中期，便于染色体的观察和分析，B正确； C、低渗处理的目的是使组织细胞充分吸水膨胀，染色体分散，C正确； D、分析黑斑蛙的核型，需要观察细胞内染色体的数量、形态和排布，因此镜检后需要对细胞中染色体进行计数、归类和排列，D正确。 故选A。 6. 制备蛙的坐骨神经-腓肠肌标本，将其置于任氏液中进行实验。下列叙述正确的是（　　） A. 任氏液的渗透压和化学成分与蛙的细胞内液接近 B. 神经纤维末梢释放的神经递质作用于腓肠肌引起的信号转变是“电信号→化学信号” C. 刺激腓肠肌，在肌肉和神经纤维上都可能会检测到电位变化 D. 刺激腓肠肌，在肌肉和坐骨神经上都可能会检测到电位变化 【答案】D 【解析】 【分析】静息状态时，神经细胞膜对钾离子的通透性大，钾离子大量外流，形成内负外正的静息电位；受到刺激后，神经细胞膜的通透性发生改变，对钠离子的通透性增大，钠离子内流，形成内正外负的动作电位。兴奋部位和非兴奋部位形成电位差，产生局部电流，兴奋就以电信号的形式传递下去。 【详解】A、任氏液是一种比较接近动物内环境的液体，其渗透压和化学成分与蛙的细胞外液接近，而不是细胞内液，A错误； B、神经纤维末梢释放的神经递质作用于腓肠肌引起的信号转变是“化学信号→电信号”，神经递质属于化学信号，使腓肠肌产生电位变化（电信号），B错误； C、 因为兴奋在神经 - 肌肉突触处可以单向传递（从神经到肌肉），刺激腓肠肌，在神经纤维上不会检测到电位变化，C错误； D、刺激腓肠肌，肌肉产生电位变化。坐骨神经与腓肠肌相连，虽然神经肌肉接头单向传递，但在实验标本中，刺激肌肉引发的电位变化可能被检测到，且题目未严格限定单向传递的绝对影响，由此综合判断，D正确。 故选D。 7. 每年4～5月盛花期的石楠（Photinia serratifolia）因释放出“腥臭味”而背上了“最臭之花”的恶名，这其实是其挥发成分中三甲胺等胺类化合物相互作用产生的，浓度低时类似于鱼腥味，高浓度时则呈现氨的气味（腐臭味）。《本草纲目》记载，石楠“生于石间向阳之处”，故得名“石南”，后古人认为“南”字缺少草木偏旁，遂改为“石楠”。下列叙述错误的是（　　） A. 石楠可作土农药防治蚜虫、抑制马铃薯病菌孢子发芽，这属于生物防治 B. 石楠可降尘、驱虫，是抗霾“神器”，这体现了生物多样性的间接价值 C. 石楠盛花期释放“腥臭味”主要是为了吸引蜜蜂来帮助其传花授粉 D. 石楠盛花期释放“腥臭味”的生存智慧，是长期共同进化的结果 【答案】C 【解析】 【分析】生物多样性的价值： (1)直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的。 (2)间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值(生态功能)。 (3)潜在价值：目前人类不清楚的价值。 【详解】A、石楠通过其挥发性物质(如三甲胺)发挥驱虫和抑菌作用，这里的三甲胺是石楠产生的化学物质，属于化学信息，利用化学信息防治害虫属于生物防治范畴，A正确； B、石楠的降尘、驱虫等功能属于生态功能，属于间接价值，“抗震”可能指其根系稳固土壤、减少水土流失等作用，也属于间接价值，B正确； C、根据题目，石楠释放的“腥臭味”是三甲胺等胺类化合物的作用，这种气味更可能吸引食腐性昆虫(如苍蝇、甲虫等)，而非蜜蜂，蜜蜂通常被芳香或甜味吸引，而不会被腐臭味吸引，C错误； D、植物通过释放特定气味吸引传粉者，是植物与传粉者长期协同进化的结果，D正确。 故选C。 8. 荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针，与染色体上对应的DNA片段结合，从而将特定的基因在染色体上定位。下来叙述正确的是（　　） A. 图1中的DNA酶I是一种随机性的外切核酸酶 B. DNA酶I随机切割后产生的缺口由DNA聚合酶I从5不断延伸补齐 C. 图2中的两条姐妹染色单体最多会有2条荧光标记的DNA片段 D. 该技术可用于21三体综合征和猫叫综合征诊断 【答案】D 【解析】 【分析】1、基因探针是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子作为探针，原理是DNA分子杂交。 2、DNA分子是一个独特的双螺旋结构，是由两条平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成，外侧由脱氧核糖和磷酸交替连接构成基本骨架，内侧是碱基对（A-T；C-G）通过氢键连接。 【详解】A、观察图1可知，DNA酶Ⅰ作用后将DNA切割成片段，但它不是外切核酸酶（外切核酸酶是从核酸链的一端逐个水解下核苷酸），而是一种可以随机切割DNA的内切核酸酶，A错误； B、从图1看到，DNA酶Ⅰ随机切割后，DNA聚合酶Ⅰ是从3' - 端不断延伸补齐缺口，而不是从5' - 端，B错误； C、图中两条姐妹染色单体中含有2个DNA分子共有4条链，所以最多可有4条荧光标记的DNA片段，C错误； D、 21 - 三体综合征是染色体数目变异（多了一条21号染色体，基因数量增多），猫叫综合征是染色体结构变异（5号染色体部分缺失，基因数量减少），该技术是将特定基因在染色体上定位，可用于21三体综合征和猫叫综合征的诊断，D正确。 故选D。 9. 国家卫健委联合16个部门发布《“体重管理年”活动实施方案》，期待通过三年行动（2024～2026年），构建全民体重管理支持性环境，提升居民体重管理意识和技能，普及健康生活方式，降低超重和肥胖率，减少慢性病发生风险。下列相关叙述错误的是（　　） A. 肥胖的人群一般不会出现“营养不良”的症状 B. 肥胖是Ⅱ型糖尿病的常见诱因之一，导致出现胰岛素抵抗 C. “减肥难”的主要原因是糖类转化为脂肪容易，但脂肪转化为糖不容易 D. 一定的脂肪有利于维持内脏器官正常的结构和功能，也可增强人体抗逆境能力 【答案】A 【解析】 【分析】糖类和脂肪之间可以相互转化。 【详解】A、肥胖的人群体内可能缺少某些特定的微量元素，A错误； B、肥胖患者体内长时间血糖浓度高，是Ⅱ型糖尿病的常见诱因之一，导致出现胰岛素抵抗，B正确； C、糖类和脂肪之间可以相互转化，糖类转化为脂肪容易，但脂肪不易转化为糖，所以减肥难，C正确； D、脂肪是良好的储能物质，还具有缓冲和减压的作用，一定的脂肪有利于维持内脏器官正常的结构和功能，也可增强人体抗逆境能力，D正确。 故选A。   10. 贵州茅台、张裕干红、蒙牛酸奶、海安臭干（真菌发酵）等食品都离不开微生物发酵和独特气候条件。下列相关叙述错误的是（　　） A. 贵州茅台酒的品质离不开当地的特殊气候环境和菌种，为长期收藏灌装前需严格灭菌 B. 张裕干红发酵所接种特定微生物有助于控制酒品，主发酵后还有后发酵和陈化过程 C. 蒙牛酸奶发酵接种的乳酸菌一般是复合菌种，发酵结束后需迅速使其冷却到10℃以下 D. 海安臭干臭味主要来自发酵时蛋白质等变质所产物质，炸制可产生香味物质，也可控菌 【答案】A 【解析】 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。发酵工程在医药、食品、农业、冶金、环境保护等许多领域都得到广泛应用。 【详解】A、贵州茅台酒在发酵过程中，独特的菌种和当地特殊气候环境造就了其独特品质。如果在灌装前严格灭菌，会杀死这些对酒品质有重要作用的微生物，反而影响酒的风味和品质，A 错误； B、张裕干红发酵接种特定微生物（酵母菌），主发酵后还有后发酵和陈化过程，这些过程有助于进一步提升酒的品质和风味，B 正确； C、蒙牛酸奶发酵接种复合乳酸菌菌种，发酵结束后迅速冷却到10℃以下，可以抑制微生物的生长，防止酸奶变质，C 正确； D、 海安臭干臭味主要来自发酵时蛋白质等变质所产生的物质，炸制过程中一方面可产生香味物质，另一方面高温可以起到一定的杀菌作用，D 正确。 故选A。 11. 海安市雅周镇集中优势力量打造了“万亩良田”工程，一个合作社，三万亩耕地，水稻小麦轮作，从播种、施有机肥到收割，从秸秆离田、处置到销售，我们全产业链服务。下列相关叙述错误的是（　　） A. 土壤的微生物可能属于生产者、消费者、分解者 B. 万亩良田不但提高了经济效益，还具有深远的环保效益 C. 水稻和小麦的轮作，有利于充分利用土壤矿质元素，减少病虫害发生 D. 有机肥为生产者和分解者提供的是物质和能量，提高了能量利用率 【答案】D 【解析】 【分析】生态系统的组成成分：非生物的物质和能量、生产者、消费者、分解者。①生产者在生物学分类上主要是各种绿色植物，也包括化能合成细菌与光合细菌，它们都是自养生物，植物与光合细菌利用太阳能进行光合作用合成有机物，化能合成细菌利用某些物质氧化还原反应释放的能量合成有机物，比如，硝化细菌通过将氨氧化为硝酸盐的方式利用化学能合成有机物。②消费者指以动植物为食的异养生物，消费者的范围非常广，包括了几乎所有动物和部分微生物（主要有真细菌），它们通过捕食和寄生关系在生态系统中传递能量。③分解者又称“还原者”它们是一类异养生物，以各种细菌（寄生的细菌属于消费者，腐生的细菌是分解者）和真菌为主，也包含屎壳郎、蚯蚓等腐生动物。 【详解】A、土壤中微生物类型多样，如硝化细菌（生产者）、寄生细菌（消费者）、腐生细菌（分解者），A正确； B、“万亩良田”全产业链服务，既通过农业生产提升经济效益，又通过秸秆处理等环节减少污染，具环保效益，B正确； C、水稻和小麦轮作，可利用不同作物对矿质元素需求差异，充分利用土壤矿质元素，同时破坏病虫害生存环境，减少危害，C正确； D、有机肥需分解者分解后，释放无机物供生产者利用，生产者的能量主要来自光能，而非有机肥。有机肥为分解者提供物质和能量，但未直接为生产者提供能量，D错误。 故选D。 12. 在脊髓中央灰质区，神经元a、b、c通过两个突触传递信息（突触前抑制主要参与感觉传入系统的精细调节，抑制非主要信号的传递），如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 静息状态维持时，神经细胞会发生大量的K+外流 B. a兴奋则会引起b、c之间的兴奋传递受抑制 C. b兴奋使c内Na+快速外流产生动作电位 D. 与突触前抑制相比，突触后抑制是突触后膜直接被抑制性递质作用引起去极化 【答案】B 【解析】 【分析】兴奋在神经元之间的传递：①突触：包括突触前膜、突触间隙、突触后膜；②突触小泡释放的递质：乙酰胆碱、单胺类物质等；③信号转换：电信号→化学信号→电信号；④兴奋传递特点：单向性（神经递质只存在于突触前膜的突触小泡中，只能由突触前膜释放，作用于突触后膜）；⑤神经递质作用效果有两种：兴奋或抑制。 【详解】A、静息电位的产生原因K+外流，静息状态维持时，神经细胞会发生K+外流，A错误； B、突触前抑制主要参与感觉传入系统的精细调节，抑制非主要信号的传递，a兴奋后产生抑制性神经递质，a兴奋可能会引起b、c抑制，B正确； C、产生动作电位的原因是Na＋内流，而且b兴奋可能会使突触前膜释放抑制性神经递质，阴离子内流，进而使静息电位的绝对值增大，C错误； D、与突触前抑制相比，突触后抑制是突触后膜直接被抑制性递质作用引起超极化，而非“去极化”，D错误。 故选B。 13. 下列关于细胞工程的叙述，错误的是（　　） A. 利用茎尖组织培养技术得到的脱毒苗，能有效提高无性繁殖的农作物的产量和品质 B. 植物细胞培养过程中可使用振荡来分散细胞，因为愈伤组织细胞壁薄且排列疏松 C. 动物细胞培养时需要添加适量的抗生素，以实现动物细胞培养的无菌和无毒 D. 单克隆抗体不但可以用于治疗和诊断，还可用于定向运载药物 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养的过程：取动物组织块--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养。植物组织培养过程：外植体经过脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成胚状体，最终发育成新植株。 【详解】A、利用茎尖（病毒很少，甚至无病毒）组织培养技术得到的脱毒苗，能有效提高无性繁殖的农作物的产量和品质，A正确； B、植物细胞培养过程中可使用振荡来分散细胞，因为愈伤组织细胞壁薄且排列疏松，使得细胞充分利用营养物质，B正确； C、动物细胞培养时需要添加适量的抗生素，以实现动物细胞培养的无菌，定期更换培养液才能实现无毒，C错误； D、单克隆抗体不但可以用于治疗和诊断，还可用于定向运载药物，将药物和单克隆抗体偶联，使得药物只能作用与特定的癌细胞等，D正确。 故选C。 14. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 为获得更多的囊胚，可给雌性动物口服适量的促性腺激素 B. 细胞a和细胞b内含有的核基因相同，全能性高低也相同 C. 用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞 D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养，都需要在培养液中添加营养成分 【答案】D 【解析】 【分析】1、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。 2、ES细胞在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。 【详解】A、为了获得更多的囊胚，可以使用促性腺激素促进成熟雌性个体超数排卵，但促性腺激素本质是多肽，饲喂会导致其分解，不能发挥作用，A错误； B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的，故核基因相同；细胞 a 为囊胚的内细胞团细胞（胚胎干细胞），具有发育的全能性，细胞 b 是经定向诱导后的功能细胞，全能性已显著降低，所以全能性高低不同，B错误； C、运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞，首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，不是消化分解膜蛋白，C错误； D、动物细胞培养时需要在5% CO2的培养箱中进行培养，以维持培养液的pH，因此胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养，D正确。 故选D。 二、多选题：本部分包括5题，每题3分，共计15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对的得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 15. 图示普通韭菜（2n=16）的花药结构。为了快速获得普通韭菜的纯系，科研人员利用其花药进行单倍体育种。下列相关叙述正确的有（　　） A. 花粉细胞和花药壁细胞均含有全套遗传物质 B. 花药离体培养的脱分化阶段使用的是液体培养基 C. 花药离体培养得到的植株不一定是单倍体 D. 花药离体培养得到的单倍体经低温加倍后，细胞染色体数目不一定是16 【答案】ACD 【解析】 【分析】单倍体育种常用花药离体培养的方法获得单倍体植株，然后进过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。单倍体育种与常规育种比较明显的优点是能够明显缩短育种年限。 【详解】A、花粉细胞是减数分裂产生的配子，含韭菜的一个染色体组（n=8），而花药壁细胞是体细胞，含两个染色体组（2n=16）；“全套遗传物质”指控制该物种生长发育的全部遗传信息，一个染色体组已包含全套遗传信息，因此无论花粉还是花药壁细胞，均含全套遗传物质，A正确； B、植物组织培养的脱分化和再分化阶段通常使用固体培养基（含琼脂），以便固定外植体并提供稳定的营养环境。液体培养基多用于细胞悬浮培养，不适用于脱分化阶段，B错误； C、若培养过程中花药壁等体细胞增殖分化，会直接形成二倍体植株；只有花粉细胞发育时才形成单倍体。因此，花药离体培养的后代可能为单倍体或二倍体，故 “不一定是单倍体”，C正确； D、经低温处理单倍体幼苗，可能有些细胞染色体数目没有加倍，只含有8条，D正确。 故选ACD。 16. 胸腺嘧啶脱氧核苷（简称胸苷）在细胞内可转化为胸腺嘧啶脱氧核苷酸，后者是合成DNA的原料，用含有3H—胸苷的营养液，处理活的小肠黏膜层，半小时后洗去游离的3H—胸苷。连续48小时检测小肠绒毛的被标记部位，结果如下图（黑点表示放射性部位），下列叙述正确的有（　　） A. 处理后开始几小时，只有a处能检测到放射性，说明只有a处细胞是活细胞 B. 处理后24h和48h，在b和c处检测到放射性，原因是细胞连续分裂将有放射性标记的细胞推向b处和c处 C. 若继续跟踪检测，小肠黏膜层上的放射性将会消失 D. 若用3H—尿苷代替3H—胸苷其余相同，一段时间后小肠黏膜层各处都可检测到放射性 【答案】BCD 【解析】 【分析】1、DNA复制是指细胞在分裂前，以亲代DNA分子为模板，以脱氧核苷酸为原料，合成两个完全相同的子代DNA分子的过程。 2、转录是指以DNA分子的一条链为模板，在RNA聚合酶的催化下，以核糖核苷酸为原料，合成RNA分子的过程。 【详解】A、处理后开始几小时，只有a处能检测到放射性，说明小肠黏膜层只有a处的细胞能进行DNA复制和细胞分裂，a、b、c三处的细胞都是活细胞，A错误； B、处理后24h和48h，a处的细胞连续分裂将有放射性标记的细胞推向b处和c处，B正确； C、小肠黏膜细胞上的放射性将会因为细胞的衰老、死亡脱落而消失，C正确； D、a、b、c三处的细胞都可进行转录，都能利用3H-尿苷合成mRNA，一段时间后小肠黏膜层各处都可检测到放射性，D正确。 故选BCD。 17. 某同学用光学显微镜对4种实验材料进行观察并记录，下表实验现象合理的是（　　） 选项 试验材料 实验现象 A 用苏丹Ⅲ染液染色的花生子叶切片 子叶细胞中可出现大小不同的橘黄色颗粒 B 用0.3g/mL蔗糖溶液处理紫色洋葱鳞片叶外表皮装片 紫色的液泡逐渐变小，颜色逐渐变深，单个细胞体积显著变小 C 用甲紫染液染色的洋葱根尖装片 染色体在细胞中移动并平均分配到两极，不易在一个视野中找到分裂期各时期细胞 D 用台盼蓝染液染色处于指数期的酵母菌涂片 少部分酵母菌被染成蓝色 A. A B. B C. C D. D 【答案】AD 【解析】 【分析】高中生物学中的颜色反应： 1、斐林试剂检测可溶性还原糖：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀。 2、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色；苏丹Ⅳ+脂肪→红色。 3、双缩脲试剂检测蛋白质：蛋白质+双缩脲试剂→紫色。 4、碘液检测淀粉：淀粉+碘液→蓝色。 5、DNA的染色与鉴定：DNA+甲基绿→绿色 、DNA+二苯胺→蓝色。        6、吡罗红使RNA呈现红色：RNA+吡罗红→红色。  7、台盼蓝使死细胞染成蓝色。        8、线粒体的染色：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。 9、酒精的检测：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。 10、CO2的检测：CO2可以使澄清的石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。 11、染色体（或染色质）的染色：染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液）染成深色。 【详解】A、苏丹Ⅲ染液可将脂肪染成橘黄色，A正确； B、在0.3g/mL蔗糖溶液中的紫色洋葱外表皮细胞会失水，液泡逐渐减小，颜色变深，但由于细胞壁的伸缩性很小，所以细胞的体积几乎不变，B错误； C、观察植物细胞有丝分裂的实验中，制片后细胞已死亡，不能观察到染色体的动态变化，C错误； D、处于指数期的酵母菌涂片中有少部分酵母菌已死亡，故用台盼蓝染色后，少部分被染成蓝色，D正确。 故选AD。 18. 下列关于“提取”和“分离”的叙述，正确的是（　　） A. 提取叶绿素可以用无水乙醇、丙酮或无水乙醇与丙酮的混合物 B. 提取DNA需同时兼顾DNA的完整性、纯度和含量 C. 光合色素用不同的层析液可能会得到不同的色素排列顺序 D. DNA和蛋白质分离常采用琼脂糖凝胶电泳，但用的标准参照物是统一的 【答案】ABC 【解析】 【分析】叶绿体色素的提取和分离实验：①提取色素原理：色素能溶解在酒精或丙酮等有机溶剂中，所以可用无水酒精等提取色素；②分离色素原理：各色素随层析液在滤纸上扩散速度不同，从而分离色素溶解度大，扩散速度快；溶解度小，扩散速度慢；③各物质作用：无水乙醇或丙酮：提取色素；层析液：分离色素；二氧化硅：使研磨得充分；碳酸钙：防止研磨中色素被破坏；④结果：滤纸条从上到下依次是：胡萝卜素（最窄）、叶黄素、叶绿素a（最宽）、叶绿素b（第2宽），色素带的宽窄与色素含量相关。 【详解】A、叶绿素易溶于有机溶剂，几乎不溶于水，根据其性质，可以用无水乙醇、丙酮或无水乙醇与丙酮的混合物等有机溶剂进行提取，A正确； B、在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，纯度和含量，B正确； C、不同的色素在不同的层析液中溶解度不同，所以光合色素用不同的层析液可能会得到不同的色素排列顺序，C正确； D、PCR产物常用琼脂糖凝胶电泳鉴定，依据条带位置、大小等判断产物，利用琼脂糖凝胶电泳技术，将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的带电性质差异、形状差异以及本身的大小等，可见两者的标准参照物不统一，D错误。 故选ABC。 19. 苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因如何在棉花（真核生物）细胞中有效表达，科学家需要考量的因素有（　　） A. 原核细胞的启动子和终止子无法被真核细胞的RNA聚合酶有效识别 B. 原核细胞基因与真核细胞基因的空间结构不同，影响转录 C. 原核细胞与真核细胞对密码子的使用频率不同，导致翻译效率低下 D. 原核细胞基因转录产生的mRNA真核细胞的核糖体无法翻译 【答案】AC 【解析】 【分析】1、基因通常是具有遗传效应的DNA片段。 2、密码子简并性意味着同一个氨基酸可以由一个或多个密码子编码。 3、核糖体的功能是识别mRNA上的密码子并招募相应的tRNA来合成蛋白质。 【详解】A、启动子和终止子是调控基因转录起始和终止的关键序列。原核生物（如苏云金芽孢杆菌）的启动子和终止子的序列特征与真核生物（如棉花）的启动子和终止子完全不同，真核生物的RNA聚合酶无法识别原核生物的调控序列，反之亦然，A正确； B、原核细胞和真核细胞的基因都是具有遗传效应的DNA片段，空间结构并无不同，B错误； C、密码子简并性意味着同一个氨基酸可以由多个密码子编码。如果Bt基因的密码子使用频率与棉花基因的密码子使用频率差异很大，那么棉花细胞内的tRNA可能无法高效地与之匹配，导致翻译速度减慢，甚至提前终止，最终导致蛋白产量低，C正确； D、核糖体的功能是识别mRNA上的密码子并招募相应的tRNA来合成蛋白质。原核和真核的核糖体虽然大小和组成略有不同，但它们识别mRNA密码子的机制是基于相同的遗传密码表。因此，只要mRNA的序列是正确的，并且有合适的起始信号，真核核糖体是可以翻译原核来源的mRNA的，D错误。 故选AC。 三、非选择题：本部分包括5题，共计57分。 20. 小球藻是常用的光合作用实验材料。请回答下列相关问题。 （1）小球藻可进行叶绿体分离实验将小球藻暗处理24小时，置于研钵中，研磨前加入适量的0．35mol/LNaCl溶液和pH7.8的缓冲液；研磨后进行_______，得到离体的叶绿体悬液。实验中NaCl溶液的作用是_______。暗处理是为了消耗淀粉，防止离心时淀粉颗粒使_______。 （2）20世纪40年代，卡尔文及其同事进行如下实验：向小球藻悬浮液中通入14CO2→用14CO2同化处理不同的时间→用沸腾的酒精处理→蒸发浓缩→双向纸层析→放射自显影。其中隔5s和隔30s的层析结果分别如图1所示（注：图中阴影面积越大、颜色越深，表示放射性物质越多）。据图分析，回答下列问题： ①用沸腾的酒精处理的目的是_______；双向纸层析是第一次层析后，将滤纸旋转90°进行第二次层析的方法，纸层析法分离不同物质的原理是______。 ②根据双向层析结果推测图1中最先合成的化合物是______。 ③为了确定光合作用暗反应中固定CO2所形成第一种化合物，应进一步进行的实验处理是______。 （3）卡尔文对C3的分子结构进行分析后发现，形成的C3中只有一个碳原子带有放射性，另外两个碳原子则不带放射性，这说明C3不是由3个14CO2生成的，而是由一个14CO2和其它物质结合生成的（X物质+CO2→C3）。为了进一步探究14CO2和什么物质结合生成C3，卡尔文在反应中将1%浓度的14CO2突然降低到0.003%浓度检测部分物质的含量变化，结果如图2所示。据图分析，这个X物质是_______，判断依据是_______。 【答案】（1） ①. 过滤或离心 ②. 维持渗透压 ③. 叶绿体破裂 （2） ①. ①杀死细胞，提取产生的有机物 ②. 溶解度高的物质随层析液在滤纸上扩散快，反之则慢 ③. PGA ④. 缩短小球藻利用14C同化的时间 （3） ①. RuBP（C5） ②. 当CO2浓度突然下降时，RuBP（C5）即刻呈现上升趋势，随后随着C3含量下降而下降直到同步稳定 【解析】 【分析】光合作用的过程包括 光反应阶段和暗反应阶段。光反应阶段（场所：类囊体薄膜）物质变化：①水的光解，生成氧气和NADPH② 利用光能将ADP和Pi结合形成ATP；能量变化：将光能转化为ATP和NADPH中的化学能。暗反应阶段（场所：叶绿体基质）物质变化：①二氧化碳的固定：二氧化碳与五碳化合物结合形成三碳化合物C3碳的还原： 利用光反应所提供的ATP和NADPH，将三碳化合物还原成糖类有机物和五碳化合物；能量变化将ATP和NADPH中的化学能转化为有机物中稳定的化学能。 【小问1详解】 研磨后要进行过滤和离心，通过过滤去除杂质，离心将叶绿体分离出来得到离体的叶绿体悬液。 实验中 NaCl 溶液的作用是维持渗透压，保持叶绿体的正常形态。 暗处理是为了消耗淀粉，防止离心时淀粉颗粒使叶绿体受损伤。 【小问2详解】 ①用沸腾的酒精处理的目的是杀死细胞，终止光合作用，同时提取细胞内的有机物 ；纸层析法分离不同物质的原理是不同物质在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢。 ②从图中可以看出，在 5s 和 30s 的层析结果中，3 - 磷酸甘油酸（PGA）都有放射性，且相对出现较早，所以推测图 1 中最先合成的化合物是 3 - 磷酸甘油酸（PGA）。 ③为了确定光合作用暗反应中固定CO2所形成第一种化合物，应进一步进行的实验处理是缩短同化处理的时间，观察放射性最先出现在哪种化合物中。 【小问3详解】 由题图可以看出，当CO2浓度突然下降时，RuBP（C5）即刻呈现上升趋势，随后随着C3含量下降而下降直到同步稳定，故这个X物质是RuBP（C5）。 21. 白血病是一类由骨髓造血干细胞恶性增殖引起的疾病，目前通过骨髓配型进行的人类异体造血干细胞移植是治疗白血病的关键手段，移植后的急性移植物抗宿主病（aGVHD）是其常见的并发症。为了降低患者产生aGVHD的风险，显著提升患者长期生存率，科学家展开了一系列相关研究。 （1）临床发现，慢性炎症是白血病的重要驱动因素。正常人体通过“炎症反射”以防止促炎因子的过量产生，其部分作用机理如下左图所示。该反射弧中的效应器是______。促炎因子产生过多时会刺激机体产生“炎症反射”，可以抑制促炎因子的过量产生，这是机体的一种________调节。 （2）移植前，供、受者间要进行严格组织配型，需要供体与受体的_________有一半以上相同。移植后，为了减少免疫排斥现象，常使用______（填激素名称）等免疫抑制药物进行干预。人体内该激素的分泌受________轴调节。 （3）研究人员通过小鼠实验数据发现，同一天内干细胞回输给受体的不同时间点显著影响aGVHD的发生。为了验证动物中观察到的现象，研究人员对患者（志愿者）进行分组临床实验，该实验的自变量是______，跟踪对比两组患者的aGVHD发生率，得出结果如下图所示。 （4）为了探究上述现象的机制，研究人员检测了其他患者移植前体内血清中包括IL-1α在内的多种促炎因子的日变化水平。检测结果显示，人体早晨时血清中的IL-1α浓度较弱，下午时较高。结合上述临床实验结果，说明：______。进一步细胞实验发现，患者刚苏醒时血清中较弱的促炎环境，能够降低_______的早期活化、增殖，降低机体免疫排斥水平。小鼠体内实验也同样证实上述结果。 （5）根据以上实验结果解释IL-1α受体拮抗剂能够降低aGVHD发生率的原理：______。 【答案】（1） ①. 传出神经末梢及其支配的巨噬细胞 ②. 负反馈 （2） ①. 主要HLA（主要组织相容性抗原） ②. 糖皮质激素（肾上腺皮质激素） ③. 下丘脑-垂体-肾上腺皮质 （3）干细胞移植（回输）时间（下午2点前、下午2点后）和移植后天数 （4） ①. 回输前患者体内IL-1α浓度与aGVHD严重程度呈正相关 ②. T细胞 （5）IL-1α受体拮抗剂结合IL-1α受体，阻断IL-1α的作用，降低机体免疫排斥水平，降低aGVHD发生 【解析】 【分析】1、根据图中箭头方向可判断信息流动方向为促炎因子→③→②→①→B，由此可判断③为传入神经，①为传出神经。 2、分析曲线可知，自变量为干细胞移植（回输）时间（下午2点前、下午2点后）和移植后天数；因变量为aGVHD发生率，并可得出如下结论：①随着移植后天数的增加，aGVHD发生率增加；②下午2点前移植比下午2点后移植aGVHD发生率要低。 【小问1详解】 反射弧的效应器由传出神经末梢及其所支配的肌肉或腺体组成。由图分析可知，效应器为传出神经末梢及其支配的巨噬细胞，通过释放抗炎物质抑制促炎因子过量产生；促炎因子过量时触发的调节机制，通过抑制自身过度产生，维持内环境稳定，属于负反馈调节。 【小问2详解】 骨髓移植需供、受者的 HLA至少一半相同，以降低免疫排斥风险；糖皮质激素（如泼尼松）可抑制T细胞活化，常用于移植后抗排斥治疗；人体内糖皮质激素的分泌受下丘脑→垂体→肾上腺皮质轴调节。 【小问3详解】 由曲线分析可知，该实验的自变量是干细胞移植（回输）时间（下午2点前、下午2点后）和移植后天数。 【小问4详解】 临床数据显示，人体早晨 IL-1α 浓度低，下午高，而早晨回输干细胞的 aGVHD 发生率更低。这表明回输前患者体内IL-1α浓度与aGVHD严重程度呈正相关；促炎因子（如 IL-1α）可激活T细胞，引发免疫排斥。早晨较弱的促炎环境能抑制供体T细胞的早期活化和增殖，从而降低 aGVHD 风险。 【小问5详解】 IL-1α通过与靶细胞（如T细胞）表面的受体结合，启动促炎信号通路，促进T细胞活化。拮抗剂与IL-1α受体结合后，竞争性抑制IL-1α的作用，阻断炎症反应，进而减弱供体T细胞对受体组织的攻击，降低aGVHD发生风险。 22. 南京雨花茶，因状如松针，与安化松针、恩施玉菡一起，被称“中国三针”。为更好的提高茶叶的品质，有关专家对茶园生态系统进行了调查研究。 （1）茶园生态系统不同地段分布有不同的生物类群，体现了群落的_____结构，其生态系统的结构包括_____。 （2）蜘蛛在茶园生态系统中发挥着重要作用。在不同类型的茶园中对蜘蛛的相关指数进行了调查，得到下表数据，据此回答问题：（已知有机茶园不喷洒除草剂，每年采茶1次；无公害茶园每年喷洒除草剂2次，采茶4次；普通茶园每年喷洒除草剂2次，采茶6次。） 项目 有机茶园 无公害茶园 普通茶园 个体数 1615 982 601 物种数 57 48 34 丰富度指数 7.72 6.83 5.22 调查蜘蛛个体数的方法是_____，与其它两种茶园相比，有机茶园中蜘蛛的个体数、物种数、丰富度指数均明显增多，一定程度上防止了虫害的发生，其依据的生态工程原理是_____。普通和无公害茶园都使用除草剂，从能量流动的角度分析，除草的目的是_____。据研究结果，从茶园管理角度分析，有机茶园中蜘蛛数目最高的原因可能有_____。 （3）下图为该生态系统的部分能量流动示意图，M、N表示营养级。 图中M用于生长、发育和繁殖的能量为_____kJ/（m2·a）。由M到N的能量传递效率为_____ %（保留一位小数）。 （4）防治虫害是提高茶园产量的重要一环，为此有关专家开发了一种新型的生物防治手段——“载体植物系统”，由载体植物、天敌昆虫和替代猎物构成。该系统是一种天敌饲养和释放系统。替代猎物在载体植物上繁衍，可作为天敌昆虫的食物，以维持天敌昆虫的数量。为研究茶园中载体植物系统对茶蚜等害虫的防治效果，研究人员进行了如下实验： 选取茶树植株健康、长势一致的茶园，均分为甲、乙、丙三组，甲组茶园内种植适量蚕豆苗，然后在每株蚕豆苗上接入5头蚕豆蚜成虫，3天后按2.5头/m2的比例在甲、乙两个茶园中释放南方小花蝽，丙组茶园不做处理。回答下列问题： ①_____是该茶园载体植物系统中的天敌昆虫。 ② 3周后调查各组茶园内茶蚜等目标害虫的种群数量并作出比较，正常情况下甲、乙、丙三组中，目标害虫的种群数量关系大小应该为_____。 【答案】（1） ①. 水平 ②. 组成成分和营养结构 （2） ①. 样方法 ②. 自生原理 ③. 调整能量流动关系，使能量更多流向对人类最有益的部分 ④. 有机茶园不喷洒除草剂，蜘蛛的食物来源多(或蜘蛛不会被除草剂毒杀)；采摘次数少，茶园为蜘蛛提供良好的生存环境 （3） ①. 2488 ②. 6.3% （4） ①. 南方小花蝽 ②. 甲＜乙＜丙 【解析】 【分析】1、生态系统的结构包括生态系统的组成成分和营养结构，组成成分又包括非生物的物质和能量，生产者、消费者和分解者，营养结构就是指食物链和食物网。生产者主要指绿色植物和化能合成作用的生物，消费者主要指动物，分解者指营腐生生活的微生物和动物。 2、样方法适用于植物和活动能力弱、活动范围小的动物。 【小问1详解】 茶园生态系统不同地段分布有不同的生物类群，体现了群落的水平结构，其生态系统的结构包括组成成分和营养结构。 【小问2详解】 蜘蛛个体较小，活动力较弱，应利用样方法进行其种群密度的调查；与其它两种茶园相比，有机茶园中蜘蛛的个体数、物种数、丰富度指数均明显增多，一定程度上防止了虫害的发生，其依据的生态工程原理是自生原理。普通和无公害茶园都使用除草剂，从能量流动的角度分析，除草的目的是帮助合理调整生态系统中的能量流动关系，使能量持续高效地流向对人类最有益的部分。根据研究结果，从管理茶园的角度分析，有机茶园中蜘蛛个体数最高的原因可能是有机茶园不喷洒除草剂，所以蜘蛛的食物来源多且不会被除草剂毒杀；采摘次数少，茶园为蜘蛛提供良好的生存环境。 【小问3详解】 图中M从生产者和遗体残骸中同化的能量为3281+2826=6107kJ/（m2·a），M呼吸作用消耗的能量为3619kJ/（m2·a），图中M用于生长、发育和繁殖的能量=6107-3619=2488kJ/（m2·a）.由M到N的能量传递效率为386➗（3281+2826）✖100％=6.3%。 【小问4详解】 ①为研究茶园中载体植物系统对茶蚜等害虫的防治效果，甲、乙两个茶园中释放南方小花蝽，丙组茶园不做处理。则说明南方小花蝽是该茶园载体植物系统中的天敌昆虫。 ②甲组茶园中含有载体植物（南方小花蝽的食物来源）和南方小花蝽（茶蚜的天敌），乙组茶园没有载体植物，有南方小花蝽（茶蚜的天敌），丙组没有载体植物，也没有南方小花蝽（茶蚜的天敌），则甲、乙、丙三组中目标害虫的种群数量关系大小为甲＜乙＜丙。 23. 控制果蝇性状基因可位于线粒体、常染色体和性染色体等。现有野生型（灰身长翅刚毛）纯合雌雄果蝇若干，科研小组培育出突变体：黑身长翅截毛雄蝇（甲）、灰身残翅刚毛雌蝇（乙）和雄蝇（丙）。甲乙杂交，F1雌雄果蝇都为灰身长翅刚毛，再让F1雌蝇与丙交配，F2统计结果如下表所示。表中数据与理论上比例相同；杂交过程中不存在致死和突变现象：各种配子及受精后活力相同。黑身灰身、长翅残翅和刚毛截毛三对相对性状的基因分别用A/a、B/b和D/d表示。 表型 雌蝇 雄蝇 表型 雌蝇 雄蝇 灰身长翅刚毛 16 8 灰身长翅截毛 0 8 灰身残翅刚毛 84 42 灰身残翅截毛 0 42 黑身长翅刚毛 84 42 黑身长翅截毛 0 42 黑身残翅刚毛 16 8 黑身残翅截毛 0 8 （1）雄蝇丙表型是______。截毛遗传方式可能是______。 （2）已知雌果蝇同源染色体之间互换形成重组型配子的比例小于非重组型配子的比例。画出F1雌蝇A/a、B/b这两对基因在染色体上相对位置关系图：______（注：用“”形式表示，其中横线表示染色体，圆点表示基因在染色体上的位置）。仅考虑体色和翅形遗传，F1雌蝇与另一品系基因型相同雄蝇交配，子代中黑身残翅的概率为1/25，已知雄果蝇同源染色体之间不互换，则子代中灰体长翅概率为______。 （3）F1中某只雌蝇产生一个AABb的卵，推测最可能原因是______。 （4）截毛基因和刚毛基因cDNA中转录的非模板链部分测序如下（“_”表示缺少一个碱基）：由此可知刚毛基因突变成截毛基因发生了碱基对的______，造成蛋白质翻译在第________位氨基酸后提前终止（终止密码子：UAA、UAG、UGA，起始密码子：AUG）。 【答案】（1） ①. 黑体残翅刚毛 ②. 伴X染色体隐性遗传或XY同源区段的隐性遗传 （2） ①. ②. 54% （3）减数分裂I前期含有B和b基因的染色体片段发生互换，在减数第二次分裂后期着丝粒分裂后形成的两条染色体进入同一个子细胞 （4） ①. 缺失和替换 ②. 448 【解析】 【分析】甲乙杂交，子一代雌雄果蝇都为灰身长翅刚毛，说明灰身、长翅、刚毛为显性性状，再让子一代雌蝇与丙交配，子二代统计结果为：雌果蝇中灰身：黑身=1：1，长翅：残翅=1：1，全为刚毛；雄果蝇中灰身：黑身=1：1，长翅：残翅=1：1，刚毛：截毛=1：1，说明控制体色和翅形的基因位于常染色体上，而控制刚毛和截毛的基因位于性染色体上。 【小问1详解】 甲乙杂交，子一代雌雄果蝇都为灰身长翅刚毛，说明灰身、长翅、刚毛为显性性状，再让子一代雌蝇与丙交配，子二代统计结果为：雌果蝇中灰身：黑身=1：1，长翅：残翅=1：1，全为刚毛；雄果蝇中灰身：黑身=1：1，长翅：残翅=1：1，刚毛：截毛=1：1，说明控制体色和翅形的基因位于常染色体上，且是测交类型，而控制刚毛和截毛的基因位于性染色体上（伴X染色体隐性遗传或伴XY染色体隐性遗传），由于雌果蝇的刚毛基因来自亲本的雄果蝇，所以丙的表型是灰体残翅刚毛。 【小问2详解】 由于子二代灰身：黑身=1：1，长翅：残翅=1：1，但是两对性状组合之后的比例不是1：1：1：1，说明控制体色和翅形的基因位于同一对常染色体上，由于雌果蝇中灰身长翅刚毛：灰身残翅刚毛：黑身长翅刚毛：黑身残翅刚毛=16：84：84：16，说明子一代的基因型是AaBb，Ab在一条染色体上、aB在另一条染色体上。如图   。根据信息判断，子一代的基因型是AaBb（子一代的基因型是AaBb，Ab在一条染色体上、aB在另一条染色体上），另一品系基因型相同雄蝇交配，后代出现黑身残翅的概率为1/25，说明虽然它们的基因型相同，但是由于雄果蝇的同源染色体的非姐妹染色单体之间不发生互换，且后代出现黑身残翅，所以雄果蝇是AB在一条染色体上、ab在另一条染色体上，只产生AB、ab两种雄配子，配子概率是1/2，据此计算ab雌配子的概率：1/2×ab雌配子的概率=1/25，得出ab雌配子的概率是2/25，进而推出AB雌配子的概率是2/25，Ab雌配子=aB雌配子的概率=21/50，雌雄配子随机结合，后代灰体长翅的概率是21/50×1/2+21/50×1/2+2/25×1/2+2/25×1/2+2/25×1/2=27/50。 【小问3详解】 子一代中某只雌蝇产生一个AABb的卵，推测该果蝇形成该卵最可能的原因是在四分体时期含有B和b基因的片段发生互换，在减数第二次分裂后期着丝粒分裂后形成的两条染色体进入同一个细胞。 【小问4详解】 据图判断，刚毛基因突变成截毛基因发生了碱基对的缺失和替换，造成蛋白质翻译在第448位氨基酸后提前终止。图中的从第7位碱基开始编码氨基酸，1351—1353位碱基对应的是终止密码子。所以编码氨基酸的碱基一共是1350-6=1344，据此推断mRNA上的碱基一共是1344，三个碱基是一个密码子，编码一种氨基酸，1344÷3=448。 24. M蛋白与“记忆”的形成密切相关。科研人员制备了M基因表达可控的实验模型小鼠，主要制备流程见下图。实验模型小鼠通过特异性表达Cre重组酶来敲除两个LoxP位点间的序列，同时利用体内表达的蛋白A激活诱导型T启动子。利用融合绿色荧光蛋白基因的M基因（M-GFP）的表达，恢复小鼠自身被敲除的M基因功能，同时便于示踪。回答下列问题： 【注】基因型A/+指的是A基因被整合在细胞一对同源染色体中的某一条染色体上，即可看成基因型为Aa；两端添加上LoxP位点的M基因称为floxM。 （1）在PCR扩增片段①和②时，通常会在所用引物的一端添加被限制酶识别序列，该序列添加的位置不能位于引物的______（选填“3'端”或“5'端”），目的是避免_______。 （2）在构建载体1时，为了阻断A基因在模型鼠构建成功之前的表达，从转录水平考虑，连接的片段①可以是两端含LoxP位点的______；而从翻译水平考虑，连接的片段①可以是_______。为了鉴定载体2是否构建成功，需要限制酶切割载体2后，再进行______。 （3）培养小鼠胚胎干细胞需定时更换培养液，其主要目的是_______；添加血清的主要作用是________。 （4）为了快速高效繁育出含有4对基因（遵循自由组合定律）的实验模型小鼠，应将培育出的基因型Cre/+A/+小鼠和M-GFP/+floxM/+小鼠分别与基因型foxM/floxM小鼠杂交，杂交获得的子代，再进行一代杂交后最终获得基因型为______的实验模型小鼠，在一定的条件下Cre重组酶表达，将两端含有同向LoxP位点的DNA序列均切除。 （5）为实现M基因的表达可控，在实验模型小鼠喂食时，可添加竞争性结合A蛋白的四环素，抑制T启动子的活性。添加四环素与未添加相比，目的是______。 【答案】（1） ①. 3’端 ②. 引物的3’端与模板不能严格互补配对，阻碍子链的正常延伸 （2） ①. 终止子 ②. 两端含LoxP位点的能转录出终止密码子的DNA序列 ③. 电泳和测序分析 （3） ①. 补充营养物质、清除有害代谢废物 ②. 提供细胞生长增殖所需的未知营养物质 （4）Cre/+A/+M-GFP/+FloxM/FloxM （5）添加了四环素，可与A蛋白竞争结合位点，T启动子无法被激活，M基因无法表达，看不到绿色荧光；不添加四环素，则A蛋白可激活T启动子，通过M-GFP表达恢复基因作用，形成自身对照 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 PCR扩增DNA时，子链的合成方向是5'→3'，故应在引物的5'端添加被限制酶识别的序列，而不能位于引物的3'端，避免引物的3’端与模板不能严格互补配对，阻碍子链的正常延伸。 小问2详解】 转录是以DNA为模板合成RNA的过程，其中终止子控制转录的结束过程，故从转录水平考虑，为阻断A基因的表达，连接的片段可以是两端包含LoxP序列的终止子；而翻译过程中，终止密码子调控翻译的结束，故从翻译水平考虑，为了阻断A基因的表达，连接的片段可以是两端包含LoxP序列的可转录出终止密码子相应的DNA序列；为鉴定载体2是否构建成功，需利用限制酶切割载体后进行电泳和测序分析，观察是否出现预期大小的目标条带。 【小问3详解】 细胞培养液需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，且定期更换培养液还可补充营养物质，满足动物细胞生长所需；为提供细胞生长增殖所需的未知营养物质，需要在动物细胞培养时添加血清。 【小问4详解】 分析题意，实验的目的是制备M基因表达可控的实验模型小鼠，对M基因的控制是通过蛋白A激活诱导型T启动子来调控的。为了便于追踪，构建了带绿色荧光蛋白基因的M基因，方便观察 M基因的表达情况，而自身所带的M基因则需要被敲除，已知两端添加LoxP位点的M基因可被Cre重组酶敲除，所以需要构建两端添加了LoxP 位点的M 基因纯合小鼠，相关基因型为foxM/1oxM。该小鼠体内需要有Cre重组酶来切除自身的M基因，同时还要有表达蛋白A的基因以及融合了绿色荧光蛋白基因的M基因来替换被敲除的M基因。综上分析，需进行如下杂交： ，最终获得基因型为cre/+A/+M-GFP/+floxM/floxM的实验模型小鼠。 【小问5详解】 分析题意，添加四环素与未添加相比，添加四环素会竞争性结合A蛋白，无法激活T启动子，导致M-GFP基因不能表达，从而不能恢复被敲除的M基因的功能；不添加四环素，A蛋白基因表达激活T启动子，启动M-GFP基因表达，从而恢复被敲除的M基因的功能。通过添加和不添加四环素的自身对照，增加实验的准确性。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$