精品解析：天津市和平区天津市第二十一中学2024-2025学年高二下学期期中生物试题

高二年级第二学期生物学科期中质量调查 一、选择题 1. 我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量美味食品，如酱油、腐乳、豆豉等，传承和发扬了中华优秀传统饮食文化。随着科技的发展，现代发酵工程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵的叙述，错误的是（ ） A. 工业化生产啤酒时，酵母菌的繁殖主要在主发酵阶段完成 B. 腐乳和果醋都是在厌氧条件下发酵产生的传统食品 C. 水封泡菜坛的目的是隔绝空气，确保坛内乳酸菌发酵处于无氧环境 D. 泡菜“咸而不酸”是因为盐水浓度过高，抑制乳酸菌发酵所致 2. 伯格首先在体外进行了DNA改造的研究，成功地构建了第一个体外重组DNA分子。下列相关叙述正确的是（ ） A. 不同的DNA分子必须用同一种限制酶切割，才能产生相同的黏性末端 B. DNA连接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶和逆转录酶都能催化形成磷酸二酯键 C. 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是平末端 D. E·coliDNA连接酶能连接DNA片段的黏性末端和平末端，且连接平末端的效率较高 3. 在一些传统食品的制作过程中，灭菌、消毒、防腐等是控制有害微生物的常用方法。下列说法正确的是（　　） A. 葡萄制作果酒过程中，葡萄用清水冲洗后需用70%的酒精消毒 B. 金华火腿制作过程中盐腌等防腐措施能抑制微生物生长繁殖 C. 制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是避免外界杂菌的污染 D. 泡菜腌制过程中，通常用加入抗生素的方法来抑制杂菌 4. 青方腐乳俗称臭豆腐，是北京地区传统小吃。科研工作者发现，耐盐乳酸菌在青方腐乳的腌制和后发酵过程中起着非常重要的作用。下列相关叙述错误的是（ ） A. 耐盐乳酸菌以腐乳中有机物作为发酵原料 B. 耐盐乳酸菌的发酵需要在无氧条件下进行 C. 耐盐乳酸菌的细胞呼吸场所主要是线粒体 D. 耐盐乳酸菌通过乳酸发酵获得细胞所需ATP 5. 下列有关微生物培养的相关叙述错误的是（ ） A. 使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境 B. 在稀释涂布时，涂布器应灼烧灭菌后再蘸取0.1ml菌液均匀地涂布在培养基表面 C. 获得纯培养物的关键是防止杂菌污染，紫外线消毒前喷洒苯酚可加强消毒效果 D. 通过接种环在固体培养基表面连续划线可将聚集的菌种逐步稀释到培养基表面 6. 限量补充培养法可用于营养缺陷型菌株的检出（如下图）。将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落﹐营养缺陷型菌株生长缓慢，不出现菌落或形成微小菌落。基本培养基中补充精氨酸后，营养缺陷型菌株快速生长。下列叙述正确的是（ ） A. 紫外线照射会破坏野生型菌株吸收利用精氨酸的能力 B. 在培养基中添加精氨酸对野生型菌株的增殖没有影响 C. 挑取图乙中菌落②可分离精氨酸营养缺陷型菌株 D. 图乙中菌落①同时含有野生型和突变型两种细菌 7. 某生物兴趣小组完成了“某果园土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，具体操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 通过步骤①～③的处理将土壤稀释了1000倍 B. 步骤②充分振荡的目的是为了增加尿素分解菌的浓度 C. 由图示菌落计数结果可知10克土样中的菌株数约为1.6×107个 D. ④⑤两种接种方法均可用微生物的分离、纯化与计数 8. 我国科研人员构建了一株嗜盐单胞菌H，并以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液）或餐厨垃圾为原料，生产PHA等新型可降解材料，工艺流程如下图。下列分析合理的是（　　） A. 嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养是该发酵工程的中心环节 B. 搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，提高原料利用率 C. PHA是一种单细胞蛋白，发酵结束后用过滤、沉淀等方法获取 D. 嗜盐单胞菌H是厌氧菌，通过无氧呼吸过程获得PHA产品 9. 蜗牛会取食水稻秸秆，野生稻（A）具有耐盐碱特性，栽培稻（B）具有产量高的优势。研究人员通过植物细胞工程技术培育兼具野生稻和栽培稻特性的优良植株，实验流程如下图所示。下列叙述或推测错误的是（ ） A. 用蜗牛消化道提取液进行“处理1”也能获得原生质体 B. “甲→乙”过程和“乙→试管苗”过程不需要更换培养基 C. “乙→试管苗”的培养过程中需要给予适宜光照和温度 D. “乙→目的植株”的培养过程应该在一定浓度的盐碱环境下进行 10. 三白草和鱼腥草因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. ①过程可用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成 B. ②过程通常在略高渗溶液中采用灭活病毒诱导原生质体融合 C. ③过程融合的原生质体需先形成细胞壁再进行有丝分裂 D. ④过程配制培养基时需要添加植物生长调节剂和琼脂 11. 紫草富含一种红色的次生代谢物——紫草宁，具有抗菌、消炎的功效。科研人员利用紫草新生的营养芽经过脱分化获得愈伤组织，再使用液体培养基进行细胞悬浮培养，以获得大量紫草宁。下列和关叙述正确的是（ ） A. 作为外植体的营养芽需要进行高温灭菌处理 B. 愈伤组织悬浮振荡培养时加入胰蛋白酶有利于分散成单细胞 C. 获取紫草宁是利用了植物细胞增殖的原理 D. 紫草宁是紫草生长和生存所必需的物质 12. 下图为某二倍体植株单倍体育种的流程示意图，下列说法正确的是（ ） A. c中各试管苗的核基因组成全部相同 B. d中获得的隐性植株是体细胞诱变育种的理想材料 C. 愈伤组织悬浮培养可获得植物全部次生代谢产物 D. b→c过程培养基中细胞分裂素和生长素的比例不变 13. 小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且贴附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列有关叙述正确的是（ ） A. 使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分 B. 培养基内加入适量的抗生素可以形成无病毒的培养环境 C. 培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象 D. 相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同 14. 下图表示核移植与克隆动物的相关过程，有关叙述不正确的是：（ ） A. 图示过程说明高度分化的动物细胞仍具有发育的全能性 B. 用于核移植的供体细胞①一般都选自优良个体，代孕母体为普通的同种个体 C. 采集的卵母细胞培养到的②时期表示MⅡ期 D. 选用去核卵母细胞的主要原因是其细胞质可使体细胞细胞核的全能性得到表达 15. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ） A. 动物分泌蛋白的规模化生产离不开细胞培养 B. 动物细胞培养基添加胰岛素的目的是调节血糖浓度 C. 细胞分化和细胞癌变过程中，基因突变导致基因组已经不完整 D. 动物细胞利用的培养基属于液体、选择培养基 16. 单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。科学家米尔斯坦和科勒设计了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，下图为其实验流程图。下列叙述或说法中，不正确的是（ ） A. a是骨髓瘤细胞，②表示对杂交瘤细胞培养和筛选的过程 B. 制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是它能分泌多种特异性抗体 C. ③过程如在体外培养，则需要无菌、无毒，营养充足，温度、pH适宜等环境条件 D. 诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇 17. 双特异性抗体，简称双抗，可同时与癌细胞和免疫细胞特异性结合，它一端与癌细胞结合，一端与T细胞结合，将T细胞拉近癌细胞，大大提高了杀灭癌细胞的效率。某些种类癌细胞表面有高表达的银蛋白PSMA；CD28位于T细胞表面，与抗体结合后，其免疫功能得到激活。研究者尝试构建双抗PSMA—CD28，设计流程如图，序号代表过程。下列说法错误的是（　　） A. 过程①使用到特定的选择培养基，过程②进行克隆化培养和抗体检测 B. 过程③注射的抗原A是CD28，目的是使小鼠分泌特定的抗体 C. 图中“筛选①”所获得的细胞为多种杂交瘤细胞 D. 过程⑤提取获得的双抗PSMA—CD28能准确识别并结合两种抗原 18. 研究人员欲采用“异源囊胚补全法”将人源iPS细胞培育出的肾元祖细胞导入囊胚，后移植到去除生肾区即肾元祖细胞的母猪体内，培育出100%人源iPS细胞来源的肾单位并实际应用于移植医疗（如图所示）。下列说法正确的是（　　） A. 培育人源肾元祖细胞需向iPS细胞培养液中加入定向诱导分化剂 B. 过程②需要将荧光蛋白基因标记的人源肾元祖细胞植入原肠胚的内细胞团 C. 过程③操作之前不需要对受孕母猪进行超数排卵和同期发情处理 D. 该技术培育的人源肾脏不必考虑肾移植个体之间的遗传差异 19. 植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术的共性是（ ） A. 均出现贴壁生长现象 B. 融合细胞的染色体组数均增加 C. 均需用胰蛋白酶处理 D. 均可用灭活的病毒诱导细胞融合 20. 2017年，我国科学家培育出轰动世界的体细胞克隆猴“中中”和“华华”，下图为其培育流程。 下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①可将成纤维细胞显微注射到去核卵母细胞中 B. 过程②通常需在液体培养基中加入血清等天然成分 C. 该过程需用到体外受精、细胞培养和胚胎移植技术 D. 体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植 21. 试管牛技术和核移植技术已应用于培育良种牛。下列相关叙述错误的是（ ） A. 试管牛技术和核移植技术均可实现良种牛的大量克隆 B. 试管牛技术和核移植技术培育良种牛均需进行胚胎移植 C. 进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 D. 需要注射促性腺激素促进供卵牛超数排卵 22. 某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（ ） A. 引物不可重复利用，PCR第四次循环时需要消耗15对引物 B. 据图乙可知，进行电泳时，琼脂糖凝胶的加样孔在B端 C. 据图乙可知，2号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子 D. 换用引物1和引物3进行PCR，能更好区分杂合子和纯合子 23. 图1表示某重组质粒的构建过程，质粒P0具有四环素抗性基因（Tetr）和氨苄青霉素抗性基因（Ampr），并且含有限制性内切核酸酶EcoRV的酶切位点。为筛选出含有重组质粒P1的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到甲、乙、丙三类菌落，三类菌落形态相同，其生长情况如图2。下列叙述正确的是（ ） A. 甲类菌落可能同时导入了P0和P1质粒 B. 乙类菌落扩大培养后即可用于生产 C. 丙类菌落可能导入了P0质粒 D. 用玻璃刮刀将无抗生素平板上的菌落按位置接种到其他三个平板上 24. 第三代疫苗——DNA 疫苗是指将编码保护性抗原蛋白的基因（如图甲）插入到适宜的质粒（如图乙）中得到的重组DNA分子，将其导入人体内，在人体细胞内表达的产物可直接诱导机体免疫应答，且可持续一段时间。限制性内切核酸酶的切点分别是BgIⅡ、EcoRI和 Sau3AⅠ。下列分析错误的是（　　） A. 构建DNA 疫苗时，可用BgIⅡ和 Sau3AI切割目的基因和质粒 B. 图乙中只用EcoRI切割后的质粒，含有2个游离的磷酸基团 C. 用EcoRI切割目的基因和质粒，再用DNA 连接酶连接，只产生1种连接产物 D. 抗原基因在体内表达时不需要解旋酶 25. 图1为某种质粒结构简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是（　　） A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRI B. 如果将一个外源DNA 分子和一个质粒分别用 EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA 中 EcoRI酶切点有1个 C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和 Hind Ⅲ两种限制酶同时处理 D. 质粒是一种结构简单的、能自主复制的环状DNA，是基因工程中最常用的载体 二、非选择题： 26. 豆汁是北京独有的、久负盛名的传统风味名吃，以其独特的风味及丰富的营养深受当地居民的喜爱。下图是以绿豆为原料制备豆汁的传统工艺流程。在此过程中，淀粉分离和发酵产酸是豆汁加工的关键工序。 （1）研究人员通过筛选豆汁中的关键发酵菌株，优化发酵工艺。将额外添加了碳酸钙的培养基经________法灭菌后倒平板，将经自然发酵得到的生豆汁采用________法接种于平板上，进行分离和计数。在适宜条件下培养一段时间后，选取培养基上________（选填“有”或“没有”）碳酸钙溶解圈的菌落，进一步纯化和培养。 （2）将得到的乳酸菌分别接种到绿豆液后，在相同条件下，检测相关指标，结果见下表。应优先选取菌株________作为优化发酵工艺的菌种，理由是________。 菌株类型 检测指标 菌株A 菌株B 菌株C 菌株D 絮凝率（%） 51.61 65.42 53.87 61.37 发酵液pH 3.59 4.09 4.15 3.78 豆汁风味 腐味 清香味 清香味 弱清香味 注：絮凝率与淀粉沉降分离速度正相关，淀粉沉降分离速度越快，豆汁品质越佳。 27. 博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列-蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。人感染埃博拉病毒后会引起出血热，治疗该病的有效方法是注射疫苗或者抗体。下图为制备埃博拉病毒的单克隆抗体的过程，据图回答问题： （1）埃博拉病毒侵入人体时，在细胞中以RNA为模板，在________酶的作用下，合成相应的DNA并指导蛋白质合成，进行增殖。 （2）已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有________的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用________诱导融合。筛选后的所需细胞群应具备的特点是________。 （3）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加________等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是________。 28. 育种工作者利用不同的方法进行了如图所示的四组实验。请据图回答下列问题： （1）图Ⅰ过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程要经过________形成愈伤组织，再经过再分化形成幼苗，该过程依据的原理是________。 （2）获得植物体D首先需对番茄和马铃薯的韧皮部细胞用________酶处理以去除细胞壁。 （3）获得植物体D的过程叫________。植物体D与细胞B是否都具有两亲本的遗传物质________（答“是”或“否”），若番茄细胞内有2n=M条染色体，马铃薯细胞内有2n=N条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含有________个染色体。 29. 对微生物或动植物的细胞进行基因改造使他们能够生产药物，是目前基因工程在医药卫生领域的应用。如图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入大肠杆菌并进行筛选，最终生产出重组人生长激素。回答下列问题： （1）构建重组质粒时应选择的限制酶组合为______,原因是______,被切割后的质粒电泳后，可得到______个条带。 （2）使用______可连接目的基因和质粒片段，此过程形成______个磷酸二酯键（只考虑两个DNA片段的连接）。 （3）人生长激素基因在受体菌中是否表达，可检测受体菌中是否含有______（填“人生长激素基因”或“人生长激素基因RNA”或“人生长激素前体物”）;此时的产物______（填“有”或“没有”）生物活性，原因是______。 30. 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒（ASFV）感染家猪和野猪引起的一种高致病性传染病。科研人员在病毒ASFV的K基因（大小为790bp）中间插入荧光聚酶基因（Gluc基因）和增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP基因），从而构建可以进行快速观察及定量检测酶活性的重组病毒（ASFV-Gluc-EGFP）体系，如图1所示。回答下列问题： （1）为了初步鉴定重组病毒是否构建成功，科研人员提取病毒DNA，选用________（引物组合）进行PCR扩增，扩增结果有1、2两种类型，如图2所示。该实验结果表明Gluc基因和EGFP基因________（填“有”或“没有”）插入病毒ASFV的K基因。 （2）为了进一步验证重组病毒是否成功表达，科研人员将猪肺泡巨噬细胞（PAMS）培养一段时间后，平均分成A、B两组，其中A组接种病毒ASFV，B组接种________。支持“重组病毒成功表达”的实验结果为：________。 （3）同时，科研人员又分别测定了A、B两组的病毒数量变化，发现两者无显著差异，该结果表明_______。因此，该重组病毒体系的构建可为后续研究ASFV的致病机制及药物治疗奠定基础。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二年级第二学期生物学科期中质量调查 一、选择题 1. 我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量美味食品，如酱油、腐乳、豆豉等，传承和发扬了中华优秀传统饮食文化。随着科技的发展，现代发酵工程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵的叙述，错误的是（ ） A. 工业化生产啤酒时，酵母菌的繁殖主要在主发酵阶段完成 B. 腐乳和果醋都是在厌氧条件下发酵产生的传统食品 C. 水封泡菜坛的目的是隔绝空气，确保坛内乳酸菌发酵处于无氧环境 D. 泡菜“咸而不酸”是因为盐水浓度过高，抑制乳酸菌发酵所致 【答案】B 【解析】 【分析】与果酒、果醋的生产有关的微生物分别是酵母菌、醋酸菌，泡菜腌制过程中起作用的主要是乳酸菌。 【详解】A、工业化生产啤酒时，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，A正确； B、腐乳制作主要起作用的微生物是毛霉，果醋制作起作用的微生物是醋酸菌，它们都是需氧型微生物，B错误； C、乳酸菌是厌氧菌，水封泡菜坛的目的是隔绝空气，确保坛内乳酸菌发酵处于无氧环境，C正确； D、制作泡菜时，如果盐水浓度过高，乳酸菌会通过渗透作用失水，生长受到抑制，制作的泡菜会“咸而不酸”，D正确。 故选B。 2. 伯格首先在体外进行了DNA改造的研究，成功地构建了第一个体外重组DNA分子。下列相关叙述正确的是（ ） A. 不同的DNA分子必须用同一种限制酶切割，才能产生相同的黏性末端 B. DNA连接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶和逆转录酶都能催化形成磷酸二酯键 C. 当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是平末端 D. E·coliDNA连接酶能连接DNA片段的黏性末端和平末端，且连接平末端的效率较高 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 【详解】A、有些不同的限制酶切割后也可能会产生相同的黏性末端，A错误； B、DNA 连接酶可连接 DNA 片段形成磷酸二酯键，DNA 聚合酶在 DNA 复制时催化形成磷酸二酯键，RNA 聚合酶在转录时催化形成磷酸二酯键，逆转录酶在逆转录过程中催化形成磷酸二酯键，它们都能催化形成磷酸二酯键，B正确； C、当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将 DNA 的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而不是平末端，C错误； D、E・coli DNA 连接酶能连接 DNA 片段的黏性末端和平末端，但连接平末端的效率较低，D错误。 故选B。 3. 在一些传统食品的制作过程中，灭菌、消毒、防腐等是控制有害微生物的常用方法。下列说法正确的是（　　） A. 葡萄制作果酒过程中，葡萄用清水冲洗后需用70%的酒精消毒 B. 金华火腿制作过程中盐腌等防腐措施能抑制微生物生长繁殖 C. 制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是避免外界杂菌的污染 D. 泡菜腌制过程中，通常用加入抗生素的方法来抑制杂菌 【答案】B 【解析】 【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 2、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；反应中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 3、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。 【详解】A、发酵瓶需要用70%的酒精消毒，葡萄制作果酒过程中，葡萄用清水冲洗后沥干即可，A错误； B、金华火腿制作过程中盐腌等防腐措施能抑制微生物生长繁殖，这是因为食盐的主要成分是NaCl，外界环境盐浓度过高导致微生物细胞失水，B正确； C、制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是提供无氧环境，使得乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，C错误； D、制作泡菜时，泡菜水中含有乳酸菌、硝酸盐还原菌和其他杂菌。 乳酸菌可使蔬菜发酵，能有效控制发酵过程，抑制其他菌类和微生物生长，它保存有大量维生素C、L-乳酸菌，使泡好的蔬菜中的营养易被人体吸收利用。 盐浓度高以及酒精可抵制杂菌生长，防止泡菜发霉、变质，所以我们在泡菜水中要加盐和白酒来抑制杂菌而非添加抗生素，D错误。 故选B。 4. 青方腐乳俗称臭豆腐，是北京地区传统小吃。科研工作者发现，耐盐乳酸菌在青方腐乳的腌制和后发酵过程中起着非常重要的作用。下列相关叙述错误的是（ ） A. 耐盐乳酸菌以腐乳中有机物作为发酵原料 B. 耐盐乳酸菌的发酵需要在无氧条件下进行 C. 耐盐乳酸菌的细胞呼吸场所主要是线粒体 D. 耐盐乳酸菌通过乳酸发酵获得细胞所需ATP 【答案】C 【解析】 【分析】参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。 【详解】AB、耐盐乳酸菌属于异养厌氧微生物，其发酵过程需要在无氧条件下进行，且需要消耗腐乳中的有机物，AB正确； C、耐盐乳酸菌属于原核生物，原核生物不含有线粒体，C错误； D、耐盐乳酸菌通过乳酸发酵获得细胞所需ATP，该过程属于无氧呼吸过程，在第一阶段会产生少量ATP，D正确。 故选C。 5. 下列有关微生物培养的相关叙述错误的是（ ） A. 使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境 B. 在稀释涂布时，涂布器应灼烧灭菌后再蘸取0.1ml菌液均匀地涂布在培养基表面 C. 获得纯培养物的关键是防止杂菌污染，紫外线消毒前喷洒苯酚可加强消毒效果 D. 通过接种环在固体培养基表面连续划线可将聚集的菌种逐步稀释到培养基表面 【答案】B 【解析】 【分析】微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵，其中消毒和灭菌室常用的防止杂菌入侵的方法：消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法，适用于接种工具；干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具；高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。 【详解】A、使用后的培养基含有大量微生物，在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，A正确； B、用移液枪吸取0.1ml菌液滴加在培养皿上，再用冷却的涂布器涂抹均匀，B错误； C、获得纯培养物的关键确实是防止杂菌污染，紫外线消毒前喷洒苯酚，苯酚可以使微生物的蛋白质变性等，能加强消毒效果，C正确； D、通过接种环在固体培养基表面连续划线，随着划线的进行，接种环上的菌种数量逐渐减少，可将聚集的菌种逐步稀释到培养基表面，D正确。 故选B。 6. 限量补充培养法可用于营养缺陷型菌株的检出（如下图）。将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落﹐营养缺陷型菌株生长缓慢，不出现菌落或形成微小菌落。基本培养基中补充精氨酸后，营养缺陷型菌株快速生长。下列叙述正确的是（ ） A. 紫外线照射会破坏野生型菌株吸收利用精氨酸的能力 B. 在培养基中添加精氨酸对野生型菌株的增殖没有影响 C. 挑取图乙中菌落②可分离精氨酸营养缺陷型菌株 D. 图乙中菌落①同时含有野生型和突变型两种细菌 【答案】C 【解析】 【分析】结合题图分析，菌落①表示野生型菌株形成的菌落，菌落②表示营养缺陷型菌株形成的菌落。 【详解】A、根据题干信息“将诱变后的菌株接种在基本培养基上，野生型菌株迅速形成较大菌落”说明紫外线照射并不会破坏野生型菌株吸收利用精氨酸的能力，A错误； B、图中①表示野生型菌株形成的菌落，将图乙与图甲对比可知，加入精氨酸后促进了野生型菌株的生长，B错误； C、对比甲和乙可知，加入精氨酸后才出现的菌落②是精氨酸营养缺陷型菌株，所以可以选择菌落②分离获得精氨酸营养缺陷型菌株，C正确； D、图乙中菌落①只含有野生型细菌，D错误。 故选C。 7. 某生物兴趣小组完成了“某果园土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，具体操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 通过步骤①～③的处理将土壤稀释了1000倍 B. 步骤②充分振荡的目的是为了增加尿素分解菌的浓度 C. 由图示菌落计数结果可知10克土样中的菌株数约为1.6×107个 D. ④⑤两种接种方法均可用微生物的分离、纯化与计数 【答案】C 【解析】 【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。 计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞)，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。 【详解】A、步骤①，称取10g土样倒入90mL无菌水中，土样中分解尿素的细菌已被稀释了10倍，取0.5mL土壤悬浮液倒入4.5mL无菌水中，分解尿素的细菌被稀释了10倍，至此分解尿素的细菌被稀释了100倍，同理整个流程结束后分解尿素的细菌被稀释了104倍，A错误； B、步骤②充分振荡培养的目的是为了使土壤颗粒与无菌水充分混匀，B错误： C、由题意可知，每克土壤中的菌数为16÷0.1×104=1.6×106，即10克土样中的菌株数约为1.6×107个，C正确； D、④是稀释涂布平板法，可用以微生物的分离、纯化与计数，⑤是平板划线法，不能用以微生物的计数，D错误。 故选C。 8. 我国科研人员构建了一株嗜盐单胞菌H，并以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液）或餐厨垃圾为原料，生产PHA等新型可降解材料，工艺流程如下图。下列分析合理的是（　　） A. 嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养是该发酵工程的中心环节 B. 搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，提高原料利用率 C. PHA是一种单细胞蛋白，发酵结束后用过滤、沉淀等方法获取 D. 嗜盐单胞菌H是厌氧菌，通过无氧呼吸过程获得PHA产品 【答案】B 【解析】 【分析】在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。 【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵过程，而不是嗜盐单胞菌H的选育和扩大培养。选育和扩大培养是发酵工程的前期准备工作，A错误； B、搅拌器能使菌株H与培养液充分接触，有助于菌株更好地吸收培养液中的营养物质，从而提高原料利用率，B正确； C、PHA不是单细胞蛋白，单细胞蛋白是指通过发酵获得的微生物菌体。发酵结束后，获取PHA可能需要特定的提取和分离方法，而不是简单的过滤、沉淀，C错误； D、由图可知，该发酵过程是有氧条件，所以嗜盐单胞菌H应是好氧菌，通过有氧呼吸过程获得PHA产品，D错误。 故选B。 9. 蜗牛会取食水稻秸秆，野生稻（A）具有耐盐碱特性，栽培稻（B）具有产量高的优势。研究人员通过植物细胞工程技术培育兼具野生稻和栽培稻特性的优良植株，实验流程如下图所示。下列叙述或推测错误的是（ ） A. 用蜗牛消化道提取液进行“处理1”也能获得原生质体 B. “甲→乙”过程和“乙→试管苗”过程不需要更换培养基 C. “乙→试管苗”的培养过程中需要给予适宜光照和温度 D. “乙→目的植株”的培养过程应该在一定浓度的盐碱环境下进行 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：图示为利用植物体细胞杂交技术培育兼具野生稻和栽培稻特性的优良植株的过程，其中的处理1是用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁，甲是杂种细胞，乙是愈伤组织。 【详解】A、蜗牛会取食水稻秸秆，推测蜗牛消化道含纤维素酶和果胶酶，用蜗牛消化道提取液进行“处理1”也能获得原生质体，A正确； B、“甲→乙”过程和“乙→试管苗”过程使用的培养基中的不同成分的含量及比例不同，需要更换培养基，B错误； C、光是合成叶绿素的必要条件，“乙→试管苗”的培养过程中需要给予适宜光照和温度，C正确； D、培养的目的植株应具有耐盐碱和高产的优点，故“乙→目的植株”的培养过程应该在一定浓度的盐碱环境下进行，D正确。 故选B。 10. 三白草和鱼腥草因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. ①过程可用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成 B. ②过程通常在略高渗溶液中采用灭活病毒诱导原生质体融合 C. ③过程融合的原生质体需先形成细胞壁再进行有丝分裂 D. ④过程配制培养基时需要添加植物生长调节剂和琼脂 【答案】C 【解析】 【分析】图示为三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③脱分化形成愈伤组织，④是植物细胞培养并提取代谢产物。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此过程①三白草和鱼腥草体细胞杂交过程中要利用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁获得原生质体，盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液会杀死细胞，A错误； B、过程②通常在等渗或略高渗溶液中，不能用低渗溶液，否则，原生质体会吸水涨破；可以采用化学法（PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法）或物理法诱导原生质体融合，不能灭活病毒诱导，B错误； C、杂种原生质体再生出细胞壁是杂种细胞形成的标志，只有先形成杂种细胞，才能进行有丝分裂，C正确； D、植物细胞培养用的是液体培养基，能够使分散开的植物细胞充分与营养液混合，有利于细胞对营养物质的吸收和利用，D错误。 故选C。 11. 紫草富含一种红色的次生代谢物——紫草宁，具有抗菌、消炎的功效。科研人员利用紫草新生的营养芽经过脱分化获得愈伤组织，再使用液体培养基进行细胞悬浮培养，以获得大量紫草宁。下列和关叙述正确的是（ ） A. 作为外植体的营养芽需要进行高温灭菌处理 B. 愈伤组织悬浮振荡培养时加入胰蛋白酶有利于分散成单细胞 C. 获取紫草宁是利用了植物细胞增殖的原理 D. 紫草宁是紫草生长和生存所必需的物质 【答案】C 【解析】 【分析】植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。 【详解】A、对紫草新生的营养芽进行消毒后可作为外植体，彻底灭菌会使外植体失活，A错误； B、紫草宁为植物细胞，应用纤维素酶或果胶酶处理，B错误； C、获取紫草宁的技术为植物细胞培养，其原理是细胞增殖，C正确； D、紫草宁是次生代谢物，次生代谢物不是植物生长和生存所必需的物质，D错误。 故选C。 12. 下图为某二倍体植株单倍体育种的流程示意图，下列说法正确的是（ ） A. c中各试管苗的核基因组成全部相同 B. d中获得的隐性植株是体细胞诱变育种的理想材料 C. 愈伤组织悬浮培养可获得植物全部次生代谢产物 D. b→c过程培养基中细胞分裂素和生长素的比例不变 【答案】B 【解析】 【分析】a用花药离体培养法获得的是单倍体植株； b愈伤组织未分化，具有较高的全能性； c培养基中至少应有生长素和细胞分裂素，在再分化过程中，生长素高，促进根的分化，细胞分裂素比例高，促进芽的分化； d试管苗的生长发育需要光照，原因是①叶绿素的合成需要光照；②试管苗需要光进行光合作用制造有机物提供营养物质。 【详解】A、c中各试管苗是由花药离体培养所得，核基因组成不完全相同，有几种花药原则上就由几种核基因，A错误； B、d中获得的隐性植株是体细胞诱变育种的理想材料，发生的突变为显性突变，只要发生突变就能从性状上观察出来，B正确； C、愈伤组织悬浮培养可获得植物部分次生代谢产物，C错误; D、b→c过程培养基中细胞分裂素和生长素的比例发生改变，前者细胞分裂素和生长素比例相当，后者诱导芽的形成时细胞分裂素比例较高，诱导根的形成时生长素的比例较高，D错误。 故选B。 13. 小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，细胞周期基本相同，但上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且贴附在培养瓶内壁上；而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列有关叙述正确的是（ ） A. 使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分 B. 培养基内加入适量的抗生素可以形成无病毒的培养环境 C. 培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象 D. 相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同 【答案】C 【解析】 【分析】1、培养条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。 （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。 （3）温度和PH。 （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。 2、当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。 【详解】A、动物细胞培养应在无毒、无菌的环境下进行，由合成培养基提供各种营养成分，但通常还需要添加血清等天然成分，A错误； B、抗生素具有抑菌或杀菌作用，但对病毒无用，培养基内加入适量的抗生素不能形成无病毒的培养环境，B错误； C、上皮细胞在培养时，呈现扁平不规则多角形，且贴附在培养瓶内壁上，消化道上皮细胞是单层柱状上皮细胞，培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象，C正确； D、动物细胞培养时会出现贴壁生长和接触抑制现象，上皮细胞更易出现接触抑制现象，相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目不相同，D错误。 故选C。 【点睛】 14. 下图表示核移植与克隆动物的相关过程，有关叙述不正确的是：（ ） A. 图示过程说明高度分化的动物细胞仍具有发育的全能性 B. 用于核移植的供体细胞①一般都选自优良个体，代孕母体为普通的同种个体 C. 采集的卵母细胞培养到的②时期表示MⅡ期 D. 选用去核卵母细胞的主要原因是其细胞质可使体细胞细胞核的全能性得到表达 【答案】A 【解析】 【分析】图示为利用核移植技术克隆动物的过程，其原理是动物细胞核具有全能性。 【详解】A、供体细胞核移入去核卵母细胞中，能发育成为克隆动物，这说明分化的动物细胞核具有全能性，A错误； B、用于核移植的供体细胞①一般都选自优良个体，以保证克隆所得个体的优良形状，代孕母体为普通的同种个体，只是提供生长、发育环境，不影响遗传特性，B正确； C、采集的卵母细胞培养到的②时期表示减数第二次分裂中期，C正确； D、在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，因为卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达，D正确。 故选A。 15. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ） A. 动物分泌蛋白的规模化生产离不开细胞培养 B. 动物细胞培养基添加胰岛素的目的是调节血糖浓度 C. 细胞分化和细胞癌变过程中，基因突变导致基因组已经不完整 D. 动物细胞利用的培养基属于液体、选择培养基 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、动物分泌蛋白（如抗体、激素）的规模化生产需通过动物细胞培养技术实现，因其依赖细胞的内质网和高尔基体完成加工和分泌，A正确； B、动物细胞培养基中添加胰岛素是为了促进细胞对葡萄糖的摄取和利用，而非调节血糖浓度（体外培养无血糖调节需求），B错误； C、细胞分化是基因选择性表达的结果，基因组保持完整；癌变是原癌基因和抑癌基因突变导致基因组改变，但选项中“分化和癌变均因基因突变导致基因组不完整”表述错误，C错误； D、动物细胞培养基为液体培养基（如培养液），但属于天然培养基（含血清等），而非选择培养基（选择培养基用于筛选特定细胞，如抗生素筛选），D错误。 故选A。 16. 单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。科学家米尔斯坦和科勒设计了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，下图为其实验流程图。下列叙述或说法中，不正确的是（ ） A. a是骨髓瘤细胞，②表示对杂交瘤细胞培养和筛选的过程 B. 制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是它能分泌多种特异性抗体 C. ③过程如在体外培养，则需要无菌、无毒，营养充足，温度、pH适宜等环境条件 D. 诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇 【答案】B 【解析】 【分析】1、单克隆抗体制备流程：（1）对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；（2）得到相应的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）；（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。 2、分析题图：a细胞是小鼠骨髓瘤细胞；b表示诱导细胞融合杂交瘤细胞；c表示筛选出的杂交瘤细胞；①过程是细胞融合，②表示在选择性培养基上进行培养，③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养。 【详解】A、根据单克隆抗体制备的流程判断：a是骨髓瘤细胞、b是杂交瘤细胞；①是诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程；②表示在选择培养基上进行筛选，并对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，最终获得能产生单一抗体的杂交瘤细胞的过程，A正确； B、对于B淋巴细胞来说，每一种B淋巴细胞经特定抗原刺激后只能产生一种特异性抗体，B错误； C、③过程包括体外培养和注入小鼠腹腔内培养。若为体外培养，则应满足动物细胞培养所需条件，即无菌、无毒，营养充足，温度适宜，pH适宜，5%的二氧化碳与95%的空气的气体条件等，C正确； D、诱导动细胞融合与诱导植物原生质体融合时常用聚乙二醇作诱导剂，D正确。 故选B。 17. 双特异性抗体，简称双抗，可同时与癌细胞和免疫细胞特异性结合，它一端与癌细胞结合，一端与T细胞结合，将T细胞拉近癌细胞，大大提高了杀灭癌细胞的效率。某些种类癌细胞表面有高表达的银蛋白PSMA；CD28位于T细胞表面，与抗体结合后，其免疫功能得到激活。研究者尝试构建双抗PSMA—CD28，设计流程如图，序号代表过程。下列说法错误的是（　　） A. 过程①使用到特定的选择培养基，过程②进行克隆化培养和抗体检测 B. 过程③注射的抗原A是CD28，目的是使小鼠分泌特定的抗体 C. 图中“筛选①”所获得的细胞为多种杂交瘤细胞 D. 过程⑤提取获得的双抗PSMA—CD28能准确识别并结合两种抗原 【答案】B 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备：注射特定抗原、从小鼠的脾脏中获得产生特定抗体的B淋巴细胞、将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合、用特定选择培养基筛选出杂交瘤细胞、再利用克隆化培养和抗体检测获得足够多数量的能分泌所需抗体的细胞、将该细胞在体外培养或者注射到小鼠腹腔内增殖、从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量单克隆抗体。 【详解】A、过程①是制备单克隆抗体过程的第一次筛选，需要使用到特定的选择培养基，筛选出融合的杂交瘤细胞；过程②是对上述经选择培养得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能分泌所需抗体的细胞，A正确； B、本过程的目的是获得双特异性抗体PSMA—CD28，故为保证最终双特异性抗体PSMA—CD28的产生，注射的抗原A应是CD28，目的使小鼠产生能分泌特定抗体的B淋巴细胞，B错误； C、给小鼠注射PSMA抗原，诱导小鼠产生特异性免疫应答，可以从小鼠中获得多种针对该种抗原的B淋巴细胞，也能得到针对其它抗原的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞融合后可以产生多种细胞，分别是B-B融合细胞，骨髓瘤-骨髓瘤融合细胞以及多种杂交瘤细胞，筛选①是利用HAT选择培养基进行选择，多种杂交瘤细胞可以保留下来，其它细胞则会被淘汰，C正确； D、过程⑤提取获得的双抗PSMA—CD28有两个不同的抗原识别位点，能同时准确识别PSMA、CD28这两种抗原，并与其发生特异性结合，D正确。 故选B。 18. 研究人员欲采用“异源囊胚补全法”将人源iPS细胞培育出的肾元祖细胞导入囊胚，后移植到去除生肾区即肾元祖细胞的母猪体内，培育出100%人源iPS细胞来源的肾单位并实际应用于移植医疗（如图所示）。下列说法正确的是（　　） A. 培育人源肾元祖细胞需向iPS细胞培养液中加入定向诱导分化剂 B. 过程②需要将荧光蛋白基因标记的人源肾元祖细胞植入原肠胚的内细胞团 C. 过程③操作之前不需要对受孕母猪进行超数排卵和同期发情处理 D. 该技术培育的人源肾脏不必考虑肾移植个体之间的遗传差异 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎工程：是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。胚胎移植：1.概念：是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体叫供体（遗传特性和生产性能优秀），接受胚胎的个体叫受体（有健康的体质和正常繁殖能力）。2.应用：胚胎移植是转基因、核移植、或体外受精等技术的最后一道工序。 【详解】A、培育人源肾元祖细胞需向iPS细胞培养液中加入定向诱导分化剂从而获得肾元祖细胞，A正确； B、过程②需要将荧光蛋白标记的人源肾元祖细胞植入囊胚的内细胞团，从而保证人源肾细胞的正常发育，因为内细胞团会发育成完整胚胎，B错误； C、过程③操作之前需对代孕母猪进行同期发情处理，但不需要进行超数排卵处理，因为代孕母猪不提供卵母细胞，C错误； D、该技术培育的人源肾脏依然需要考虑肾移植个体之间的遗传差异，因为该方法获得的肾脏可能含有囊胚的细胞发育的部分，D错误。 故选A。 19. 植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术的共性是（ ） A. 均出现贴壁生长现象 B. 融合细胞的染色体组数均增加 C. 均需用胰蛋白酶处理 D. 均可用灭活的病毒诱导细胞融合 【答案】B 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术是先用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁，获得原生质体，然后诱导两个原生质体融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术，将杂种细胞培育成杂种植株。 【详解】 A、动物细胞培养过程中会出现贴壁生长现象，而植物体细胞杂交技术过程中不会出现贴壁生长现象，A错误； B、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术得到的融合细胞的染色体组数均增加，B正确； C、植物体细胞杂交技术过程中不需要用胰蛋白酶处理，C错误； D、植物体细胞杂交技术过程中不能用灭活的病毒诱导细胞融合，D错误。 故选B。 20. 2017年，我国科学家培育出轰动世界的体细胞克隆猴“中中”和“华华”，下图为其培育流程。 下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①可将成纤维细胞显微注射到去核卵母细胞中 B. 过程②通常需在液体培养基中加入血清等天然成分 C. 该过程需用到体外受精、细胞培养和胚胎移植技术 D. 体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植 【答案】C 【解析】 【分析】图示的是动物细胞核移植技术，①代表利用显微注射将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，②代表体外早期胚胎培养，③代表胚胎移植。 【详解】A、图示的是动物细胞核移植技术，①代表利用显微注射将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，A正确； B、进行体外动物细胞培养需要在培养基中添加血清等天然成分，培养基物理状态为液体培养基，B正确 C、图中过程需用到细胞培养、胚胎移植等技术，没用到体外受精技术，C错误； D、体细胞分化程度高全能性低，胚胎细胞分化程度低全能性高，因此体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植，D正确。 故选C。 21. 试管牛技术和核移植技术已应用于培育良种牛。下列相关叙述错误的是（ ） A. 试管牛技术和核移植技术均可实现良种牛的大量克隆 B. 试管牛技术和核移植技术培育良种牛均需进行胚胎移植 C. 进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 D. 需要注射促性腺激素促进供卵牛超数排卵 【答案】A 【解析】 【分析】试管动物和克隆动物的比较 试管动物 克隆动物 生殖方式 有性生殖 无性生殖 技术手段 体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植 核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植 遗传物质 来自两个个体 主要来自核供体 遗传规律 遵循 不遵循 【详解】A、试管动物技术是通过人工操作使卵子和精子在体外成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎，再经胚胎移植导入雌性受体的子宫，分娩产生后代的技术。核移植技术是将供体动物的体细胞核移入去核卵母细胞中，使这个重组细胞发育形成早期胚胎，经胚胎移植导入雌性受体的子宫，得到的新个体即为克隆动物。由此可知试管牛技术是有性生殖，不可实现良种牛的大量繁殖，A错误； B、试管牛技术和核移植技术培育良种牛的过程中都需要将早期胚胎经过移植导入雌性受体的子宫，B正确； C、胚胎移植时，供体只是产生具有优良特性的胚胎，妊娠是由雌性受体完成的，大大缩短了供体的繁殖周期，故进行胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，C正确； D、促性腺激素能作用于卵巢，促使卵巢产生更多卵细胞，因此对供体母牛注射促性腺激素后可促使其超数排卵，D正确。 故选A。 22. 某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（ ） A. 引物不可重复利用，PCR第四次循环时需要消耗15对引物 B. 据图乙可知，进行电泳时，琼脂糖凝胶的加样孔在B端 C. 据图乙可知，2号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子 D. 换用引物1和引物3进行PCR，能更好区分杂合子和纯合子 【答案】C 【解析】 【分析】PCR技术是聚合酶链式反应的缩写，是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。 【详解】A、引物不可重复利用，PCR四次循环共需要消耗24-1=15对引物，PCR第四次循环时需要消耗24-23=8对引物，A错误； B、相对分子质量大小会影响物质在电泳时的迁移速率，DNA片段相对分子质量越大，迁移就越慢，分子量越小，迁移速度越快，据图乙可知琼脂糖凝胶的加样孔在A端，B错误； C、整合GFP基因后，核酸片段变长，2号个体只有大片段，所以是Gata3-GFP基因纯合子，4号个体只有小片段，是野生型，C正确； D、若用引物1和引物3进行PCR，杂合子和Gata3-GFP基因纯合子都能扩增出相应的片段则不能区分杂合子和纯合子，D错误。 故选C。 23. 图1表示某重组质粒的构建过程，质粒P0具有四环素抗性基因（Tetr）和氨苄青霉素抗性基因（Ampr），并且含有限制性内切核酸酶EcoRV的酶切位点。为筛选出含有重组质粒P1的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到甲、乙、丙三类菌落，三类菌落形态相同，其生长情况如图2。下列叙述正确的是（ ） A. 甲类菌落可能同时导入了P0和P1质粒 B. 乙类菌落扩大培养后即可用于生产 C. 丙类菌落可能导入了P0质粒 D. 用玻璃刮刀将无抗生素平板上的菌落按位置接种到其他三个平板上 【答案】A 【解析】 【分析】1、从图中看出，添加了氨苄青霉素后，丙菌落无法生长，添加四环素后，乙菌落无法生长，同时见天氨苄青霉素和四环素，只有甲才能生长，说明丙没有抵抗抗生素的能量，乙不抗四环素但抗氨苄青霉素，而甲既抗氨苄青霉素又抗四环素。 2、图中限制性核酸内切酶EcoR V将有四环素抗基因进行切割，所以形成的P1质粒（含有目的基因）将不抗四环素，P0质粒既抗四环素，又抗青霉素。 【详解】A、根据分析：甲既抗氨苄青霉素，又抗四环素，可能转入了P0和P1质粒，也可能只转入了P0质粒，A正确； B、乙类菌落不抗四环素，但抗氨苄青霉素，转入了P1质粒，但还需要进一步的鉴定，例如抗原抗体杂交后，才能进行扩大培养进行生产，B错误； C、丙类菌落既不抗四环素，也不抗氨苄青霉素，不含质粒，C错误； D、应该用接种环将菌落接种到其他平板上，D错误。 故选A。 24. 第三代疫苗——DNA 疫苗是指将编码保护性抗原蛋白的基因（如图甲）插入到适宜的质粒（如图乙）中得到的重组DNA分子，将其导入人体内，在人体细胞内表达的产物可直接诱导机体免疫应答，且可持续一段时间。限制性内切核酸酶的切点分别是BgIⅡ、EcoRI和 Sau3AⅠ。下列分析错误的是（　　） A. 构建DNA 疫苗时，可用BgIⅡ和 Sau3AI切割目的基因和质粒 B. 图乙中只用EcoRI切割后的质粒，含有2个游离的磷酸基团 C. 用EcoRI切割目的基因和质粒，再用DNA 连接酶连接，只产生1种连接产物 D. 抗原基因在体内表达时不需要解旋酶 【答案】C 【解析】 【分析】根据题意和图示分析可知：图甲中可以看出，在目的基因上存在三种酶切位点，只有EcoR I具有两个切点，而BglⅡ和Sau3A I具有只有一个切点。图乙中也具有这三种限制酶的切割位点。 【详解】A、如果用BglⅡ和Sau3A I切割目的基因，目的基因两端将形成不同的黏性末端，同样用BglⅡ和Sau3A I切割质粒也形成这两种相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确； B、质粒为环状DNA，其上只含有一个EcoRI的切点，因此用EcoRI切割后，该环状DNA分子变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团，B正确； C、从图甲看出，用EcoRI切割目的基因后两端各有一切口，与图乙中EcoRI切口对接时，可有两种可能，即可产生两种重组DNA，C错误； D、基因表达包括转录和翻译，转录时不需要解旋酶，在RNA聚合酶的作用下，DNA即可解旋，D正确。 故选C。 25. 图1为某种质粒结构简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是（　　） A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRI B. 如果将一个外源DNA 分子和一个质粒分别用 EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA 中 EcoRI酶切点有1个 C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和 Hind Ⅲ两种限制酶同时处理 D. 质粒是一种结构简单的、能自主复制的环状DNA，是基因工程中最常用的载体 【答案】B 【解析】 【分析】限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，限制酶切割DNA后会使DNA片段形成黏性末端或平末端。 【详解】A、在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ，因为EcoRⅠ在质粒和外源DNA上都有酶切位点，A正确； B、如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，而不是1个，B错误； C、为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，这样可以使质粒和目的基因两端的黏性末端不同，避免自身环化，C正确； D、质粒是一种结构简单的、能自主复制的环状DNA，是基因工程中最常用的载体，D正确。 故选B。 二、非选择题： 26. 豆汁是北京独有的、久负盛名的传统风味名吃，以其独特的风味及丰富的营养深受当地居民的喜爱。下图是以绿豆为原料制备豆汁的传统工艺流程。在此过程中，淀粉分离和发酵产酸是豆汁加工的关键工序。 （1）研究人员通过筛选豆汁中的关键发酵菌株，优化发酵工艺。将额外添加了碳酸钙的培养基经________法灭菌后倒平板，将经自然发酵得到的生豆汁采用________法接种于平板上，进行分离和计数。在适宜条件下培养一段时间后，选取培养基上________（选填“有”或“没有”）碳酸钙溶解圈的菌落，进一步纯化和培养。 （2）将得到的乳酸菌分别接种到绿豆液后，在相同条件下，检测相关指标，结果见下表。应优先选取菌株________作为优化发酵工艺的菌种，理由是________。 菌株类型 检测指标 菌株A 菌株B 菌株C 菌株D 絮凝率（%） 51.61 65.42 53.87 61.37 发酵液pH 3.59 4.09 4.15 3.78 豆汁风味 腐味 清香味 清香味 弱清香味 注：絮凝率与淀粉沉降分离速度正相关，淀粉沉降分离速度越快，豆汁品质越佳。 【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌（湿热灭菌法） ②. 稀释涂布平板 ③. 有 （2） ①. B ②. 菌株B的发酵液酸味柔和有清香味，且絮凝率高 【解析】 【分析】乳酸菌是厌氧型细菌，其参加的发酵过程需在无氧条件下进行。 【小问1详解】 对培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌。微生物计数时常用稀释涂布平板法接种，故灭菌后倒平板，将经自然发酵得到的生豆汁采用稀释涂布平板法接种于平板上，进行分离和计数。产酸菌能在含CaCO3的培养基上产生溶解圈，故需选取有碳酸钙溶解圈的单菌落作为目的菌种，采用稀释涂布平板法进一步纯化，挑选出碳酸钙溶解圈大的菌落作为目标菌株扩大培养。 【小问2详解】 根据题意信息可知，絮凝率与淀粉沉降分离速度正相关，淀粉沉降分离速度越快，豆汁品质越佳。对比表中A、B、C、D四种菌株，菌株B发酵液中酸味柔和、有清香味，絮凝率最高，可作为优化发酵工艺的菌种。 27. 博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列-蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。人感染埃博拉病毒后会引起出血热，治疗该病的有效方法是注射疫苗或者抗体。下图为制备埃博拉病毒的单克隆抗体的过程，据图回答问题： （1）埃博拉病毒侵入人体时，在细胞中以RNA为模板，在________酶的作用下，合成相应的DNA并指导蛋白质合成，进行增殖。 （2）已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有________的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用________诱导融合。筛选后的所需细胞群应具备的特点是________。 （3）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加________等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是________。 【答案】（1）逆转录 （2） ①. 一定的流动性 ②. 灭活的病毒 ③. 既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体 （3） ①. 血清、血浆 ②. 95%的空气和5%的CO2 【解析】 【分析】单克隆抗体制备的主要步骤有：抗原的制备、免疫动物、免疫脾细胞与骨髓瘤细胞的制备、细胞融合、杂交瘤细胞的选择培养、筛选杂交瘤细胞、杂交瘤细胞的克隆化、单克隆抗体的检定、抗体的大量制备等。 【小问1详解】 分析题图可知，埃博拉病毒(EBO)侵入人体时，在细胞中以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，合成相应的DNA并指导蛋白质合成，进行增殖。以GP蛋白作为疫苗比较安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留抗原性。 【小问2详解】 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程均体现了细胞膜具有一定的流动性的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用灭活的病毒融合。筛选后的所需细胞群应具备的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。 【小问3详解】 在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清、血浆等天然成分，同时为了维持培养液的pH值，需要提供含95%的空气和5%的CO2的气体环境。 28. 育种工作者利用不同的方法进行了如图所示的四组实验。请据图回答下列问题： （1）图Ⅰ过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程要经过________形成愈伤组织，再经过再分化形成幼苗，该过程依据的原理是________。 （2）获得植物体D首先需对番茄和马铃薯的韧皮部细胞用________酶处理以去除细胞壁。 （3）获得植物体D的过程叫________。植物体D与细胞B是否都具有两亲本的遗传物质________（答“是”或“否”），若番茄细胞内有2n=M条染色体，马铃薯细胞内有2n=N条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含有________个染色体。 【答案】（1） ①. 脱分化 ②. 植物细胞具有全能性 （2）纤维素酶和果胶 （3） ①. 植物体细胞杂交 ②. 是 ③. 2(M + N) 【解析】 【分析】植物组织培养技术是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞等培养在人工配制的培养基上，使其发育成完整植株的技术。利用的原理是植物细胞具有全能性。 【小问1详解】 植物组织培养过程中，已分化的细胞（如番茄韧皮部细胞）形成愈伤组织的过程叫脱分化。而植物组织培养依据的原理是植物细胞具有全能性，即已分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。 【小问2详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶可以去除植物细胞的细胞壁，获得原生质体，为后续的细胞融合等操作做准备。 【小问3详解】 获得植物体D是将番茄和马铃薯的体细胞融合形成杂种细胞，再经植物组织培养获得杂种植株，这个过程叫植物体细胞杂交。 ②细胞B是番茄和马铃薯的体细胞融合形成的杂种细胞，植物体D是由细胞B经植物组织培养形成的，植物组织培养属于无性繁殖，遗传物质不变，所以植物体D与细胞B都具有两亲本的遗传物质。 ③番茄细胞内有2n = M条染色体，马铃薯细胞内有2n = N条染色体，“番茄 - 马铃薯”细胞是两者体细胞融合形成的，其染色体数为M + N。在有丝分裂后期，着丝点分裂，染色体数目加倍，所以含有2(M + N)条染色体。 29. 对微生物或动植物的细胞进行基因改造使他们能够生产药物，是目前基因工程在医药卫生领域的应用。如图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入大肠杆菌并进行筛选，最终生产出重组人生长激素。回答下列问题： （1）构建重组质粒时应选择的限制酶组合为______,原因是______,被切割后的质粒电泳后，可得到______个条带。 （2）使用______可连接目的基因和质粒片段，此过程形成______个磷酸二酯键（只考虑两个DNA片段的连接）。 （3）人生长激素基因在受体菌中是否表达，可检测受体菌中是否含有______（填“人生长激素基因”或“人生长激素基因RNA”或“人生长激素前体物”）;此时的产物______（填“有”或“没有”）生物活性，原因是______。 【答案】（1） ①. 酶F和酶G ②. 可同时切割含目的基因的DNA和pBR322质粒且又不破坏质粒上的标记基因 ③. 3 （2） ①. DNA连接酶 ②. 4 （3） ①. 人生长激素前体物 ②. 没有 ③. 大肠杆菌内无内质网、高尔基体等细胞器，不能对多肽进行加工 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 为避免切割质粒后出现自身环化，同时保留质粒上的标记基因，切割时应选择的限制酶组合是酶F和酶G；酶F和酶G同时切割环状质粒会得到2种质量不同的DNA片段，酶F或酶G单独切割时，会得到1种相同质量的DNA片段，因此被酶切割后会得到3种质量不同的DNA片段，电泳后得到3个条带。 【小问2详解】 DNA连接酶可连接目的基因和质粒片段，连接两个缺口形成4个磷酸二酯键。 【小问3详解】 人生长激素基因在受体菌中是否表达，可检测受体菌中是否含有人生长激素基因表达的产物，即人生长激素前体物；此时的产物没有生物活性，原因是大肠杆菌是原核细胞，没有内质网、高尔基体等细胞器，不能对多肽进行加工。 30. 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒（ASFV）感染家猪和野猪引起的一种高致病性传染病。科研人员在病毒ASFV的K基因（大小为790bp）中间插入荧光聚酶基因（Gluc基因）和增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP基因），从而构建可以进行快速观察及定量检测酶活性的重组病毒（ASFV-Gluc-EGFP）体系，如图1所示。回答下列问题： （1）为了初步鉴定重组病毒是否构建成功，科研人员提取病毒DNA，选用________（引物组合）进行PCR扩增，扩增结果有1、2两种类型，如图2所示。该实验结果表明Gluc基因和EGFP基因________（填“有”或“没有”）插入病毒ASFV的K基因。 （2）为了进一步验证重组病毒是否成功表达，科研人员将猪肺泡巨噬细胞（PAMS）培养一段时间后，平均分成A、B两组，其中A组接种病毒ASFV，B组接种________。支持“重组病毒成功表达”的实验结果为：________。 （3）同时，科研人员又分别测定了A、B两组的病毒数量变化，发现两者无显著差异，该结果表明_______。因此，该重组病毒体系的构建可为后续研究ASFV的致病机制及药物治疗奠定基础。 【答案】（1） ①. 引物1和引物4##引物4和引物1 ②. 有 （2） ①. 重组病毒 ②. B组可观察到绿色荧光，检测到荧光素酶有活性；A组无荧光，荧光素酶无活性 （3）Gluc基因和EGFP基因的插入不影响病毒的复制 【解析】 【分析】基因工程表达载体的构建是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 【小问1详解】 重组病毒中K基因内部插入了Gluc基因和EGFP基因，分析图1可知：选用引物组合引物l和引物4进行PCR扩增可获得完整的Gluc基因和EGFP基因序列；扩增结果有1、2两种类型，如图2所示，由于K基因大小约790bp (类型1)，而目的基因插入成功的应大于790bp(类型2，约1758)。因此该实验结果表明Gluc基因和EGFP基因应该插入了病毒ASFV的K基因内。 【小问2详解】 为了进一步验证重组病毒是否成功表达，科研人员将猪肺泡巨噬细胞（PAMS）培养一段时间后，平均分成A、B两组，根据对照原则，其中A组接种病毒ASFV，B组接种重组病毒。因重组病毒中含有荧光聚酶基因（Gluc基因）和增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP基因），因此B组可观察到绿色荧光，检测到荧光素酶有活性；而A组无荧光，荧光素酶无活性，若能出现上述结果，则可说明“重组病毒成功表达”。 【小问3详解】 同时，科研人员又分别测定了A、B两组的病毒数量变化，发现两者无显著差异，该结果表明Gluc基因和EGFP基因的插入不影响病毒的复制。因此，该重组病毒体系的构建可为后续研究ASFV的致病机制及药物治疗奠定基础。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $