第60课时 胚胎工程-【金榜题名】2026年高考生物一轮总复习

金榜题名创新高考总复习 生物 第60课时 胚胎工程 高考目 1.简述胚胎形成经过了受精及早期发育等过程。2.简述胚胎工程包括体外受精、胚胎移植 标定位 和胚胎分割等技术。 核心考点突破 考点一 胚胎工程的理论基础 4.孵化 知识储备·夯基 (1)概念：囊胚进一步扩大，会导致 1.胚胎工程的概念 破裂，胚胎从其中伸展出来的过程。 黎作对象牛殖细胞、受梢卵或 (2)意义：如果不能正常孵化，胚胎就 怀 技术手段体外受精、胚胎移梢和胚脸分时 口的 将款得的胚胎移梢到 休内 1 产牛后代，以满足人类的各种需求 判断正误 (1)精子获能液常见的有效成分有肝素、Ca2+ 程 实烟 作体外条什下，对动物 和 条件进模拟操作 载体等 () 2.受精 (2)动物排出的卵子都是次级卵母细胞，需进 (1)概念：精子与卵子结合形成 (即受 一步成熟 ( ) 精卵)的过程。 (3)当精子入卵后，透明带立即发生生理反应， (2)场所：在自然条件下，哺乳动物的受精在 阻止后来的精子进入 () 内完成。 (4)胚胎工程中常以观察到两个极体或雌、雄 (3)过程 原核作为受精的标志 ( 准备「精了：在雌性动物的生殆道内完成 阶段 (5)卵裂阶段细胞中有机物、DNA的含量增 卵子的准备：在输剛管内发育到 才具备 受精能力 多，细胞体积增大 ( 精子好越 发生牛见反成 (6)胚胎发育过程中细胞开始出现分化的阶段 是原肠胚期 逃人 发生生理反应 受精 阶段 关键考能·提升 形成 我国对奶类的总需求量很大，但与奶业发 烨、雄原核融合 达的国家相比，我国奶牛的单产水平还存在一 3.胚胎早期发育 定差距。胚胎工程的迅猛发展实现了人们大 受精卵一胚胎发育的起点 量繁殖优良家畜品种的愿望。在此过程中，了 解哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律十分 细胞分裂方式为 卵裂 重要。 细胞数量 ,胚胎总体积 1.受精是精子和卵子结合形成受精卵的过程 卵裂产生的 包括受精前的准备阶段和受精阶段。受精 桑葚胚 形似桑赛 卵形成后进行有丝分裂，通过细胞分裂和分 内如胞团：发育成 義脉 化，形成新个体 滋养层：发有成 (1)刚采集到的精子是否能与卵子立即结合 外胚层：原肠胚 完成受精作用？为什么？ 原肠胚 内胚层：由原肠胚 形成 巾胚层：出一部分细胞在内、外两个胚 层之间形成 326 第10章生物技术与工程 (2)刚排出的卵子具有受精能力吗？为什么？ 甲的浓度 卵母细 第一极体成熟率卵裂数卵裂率 (gg/mL.) 胞（个） 排出（个） (%) (个) (%) (3)防止多精入卵受精的生理反应有哪些？ 0 106 70 66.0 28 40.0 有什么意义？ 120 79 65.8 46 58.2 10 113 53 46.9 15 28.3 2.思考回答以下有关胚胎早期发育的问题： (1)受精卵早期分裂时胚胎中有机物的总量 100 112 48 42.8 10.4 和种类是如何变化的？ A.实验结果说明甲抑制卵裂过程 B.甲浓度过高抑制第一极体的排出 C.添加1ug/mL的甲可提高受精后胚胎发 (2)受精卵早期分裂时胚胎中DNA总量和 育能力 每个细胞中核DNA含量有何变化？ D.本实验中，以第一极体的排出作为卵母细 胞成熟的判断标准 【例2】(2025·贵州毕节模拟)胚胎工程的许 多技术，实际上是在体外条件下，对动物自 (3)胚胎早期发育过程中，具有全能性的时 然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操 期有哪些？ 作。以下有关哺乳动物的受精和胚胎早期 发育的说法，正确的是 ( A.自然条件下，哺乳动物的受精是在子宫里 典型例题·研磨 完成的 B.受精卵形成后即在输卵管内进行有丝分 考向一 胚胎工程的理论基础 裂，开始发育 【例1】(2024·湖北高考)研究者探究不同浓 C.滋养层细胞将来发育成的胎盘和胎膜，属 度的雌激素甲对牛的卵母细胞和受精卵在 于母体组织 体外发育的影响，实验结果如下表所示。 D.早期胚胎发育过程中，细胞数目增多，胚 根据实验数据，下列叙述错误的是( 胎体积增大 考点二 胚胎工程技术及其应用 2.胚胎移植 知识储备·夯基 (1)概念 1.体外受精 ①对象： 获得的胚胎 (1)过程 ②过程：移楨到 胚胎 ⑤结果：发 卵母细胞的采 采集到的卵母细咆要培养到 的濉性动 移梢 育为新个体 集和培养 期才能成熟 物休内 ③供体：提供胚胎的是 精子的采集和 采集到的精子要进行 处理才 的个体 获能 能受精 ④受体：接受怀胎的是其有 的个休 和培养成熟的卵子在 受精 中完成受精作用 (2)基本程序 (2)意义 供、受体的选择 配种或 ①提高 和处理 胚胎的 的有效措施。 检查、 ②为 提供可用的胚胎。 移植后的检查 或保存 327 金榜题名创新高考总复习生物 (3)胚胎移植的意义 1.胚胎移植技术在畜牧生产中占有重要的位 ①充分发挥雌性优良个体的 置，且胚胎移植技术是胚胎工程不可缺少的 ②大大缩短了供体本身的。 终端环节。思考讨论下列问题： ③对供体施行 处理后，增加后代 (1)为什么应对供体和受体母畜进行同期发 数量。 情处理？ 3.胚胎分割 (1)概念 对象 早期胚胎 (2)在胚胎移植过程中有两次使用激素、两 方法 机械方法 次检查，其目的分别是什么？ 目的 获得 或多胎 特点 来自同一胚胎的后代具有 (3)胚胎移植的优势是什么？ 实质 可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之 (2)仪器设备：体视显微镜和 (3)材料：发育良好、形态正常的 (4)胚胎移植中的胚胎有哪些来源？ 。 若分割囊胚阶段的胚胎时，要注意 (4)意义：促进 的繁殖，产生 的遗传性状 的后代是进行遗传学研 究的宝贵材料：在胚胎移植前，进行 2.通过胚胎分割技术，进一步提高荷斯坦奶牛 等，对于人工控制 的繁殖率。如图为哺乳动物胚胎分割和性 、动物繁育健康后代具有重要 别鉴定示意图，请据图思考讨论下列问题： 意义。 分割钊 取样滋养层 判断正误 透明带囊胚控 D (1)采集的卵母细胞需在体外培养使其分裂为 滋养层 卵细胞才能与获能的精子受精 () 、胚胎 (2)超数排卵是指应用外源性激素，诱发卵巢 移柏 排出比自然情况下更多的成熟卵子( 分制针 (3)胚胎分割移植时应选取发育良好、形态正 (1)图示①过程分割出的少量滋养层细胞常 常的囊胚或原肠胚 ( (4)做DNA分析、鉴定性别要取内细胞团处 用来做什么？ 的细胞 ( (⑤)在对囊胚进行分割时，要将滋养层细胞均 等分割 () (2)图示②过程得到的两个a经过胚胎移植 (6)利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完 产生后代的生殖方式是有性生殖吗？ 全相同的胚胎 ( 关键老能·提升 母牛其实是有很强的生殖潜能的，只是没 (3)胚胎分割有什么意义？为什么要在桑甚 有激发出来。借助体外受精、胚胎移植和胚胎 胚或囊胚期进行分割？ 分割等技术，可以进一步挖掘优良家畜的繁殖 潜力。 328 第10章生物技术与工程 【归纳总结】 胎移植等胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率， 1.比较自然受精、人工授精和体外受精 流程如下图。下列叙述错误的是 项目 自然受精 人工授精 体外受精 母藏羊甲 超数 卵母 排卵 细胞 受粘卵 早期 用人工的方法 培养 胚胎 人工获取精 公藏羊乙 精子 通过雌雄动 将公畜的精液 过程 物交配完成注入母畜生殖 子、卵子，在体 不同 植入受体 妊娠 受精 道内，完成 外培养液中完 母藏羊丙 分娩 后代丁 成受精过程 点 受精 A.藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵 场所雌性动物输雌性动物输卵 泡发育和超数排卵 不同卵管中 体外培养液中 管中 B.藏羊乙的获能精子能与刚采集到的藏羊 甲的卵母细胞受精 (1)精子获能、卵子成熟后才能完成受精 C.受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情 相同点 过程： 处理 (2)都是有性生殖 D.后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏 2.胚胎移植的生理学基础 羊乙 生琪学基鸦 【例4】(2024·北京高考)我国科学家体外诱 导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结 胚胎移 胚胎存 胚胎发 既胎收 构（类囊胚），为研究灵长类胚胎发育机制提 入基础 活基础 育基础 集基础 供了实验体系（如图）。相关叙述错误的是 肩乳动物排明 受体子常 俟体胚胎可与 兼还胎在一 后，在一爱时 对外来晒 受体子官建立 定时问内不会 间为同种动物 险荟本上 正常的生理和 与母体子宫建 的伏、受体兰 不发兰免 组织联系，早供 立组织上的联 苑器官约生理 疫排斥反 体胚胎的这传 系，处于游离 支化是相同釣 应 转红不受影响 洗态 食蟹猴 胚胎干细胞 类龚胚 典型例题·研磨 A.实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有分化 考向二 胚胎工程技术及其应用 潜能 【例3】(2024·甘肃高考)甘加藏羊是甘肃高 B.实验过程中使用的培养基含有糖类 寒牧区的优良品种，是季节性发情动物，每 C.类囊胚的获得利用了核移植技术 年产羔一次，每胎一羔，繁殖率较低。为促 D.可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续 进畜牧业发展，研究人员通过体外受精、胚 发育 教材查漏补缺 1.(选择性必修3P61)胚胎移植是指 4.(选择性必修3P62)胚胎移植的优势是 2.(选择性必修3P61)供体母牛和受体母牛的 5.(选择性必修3P62)在进行胚胎分割时，应选 选择标准为 择发育良好、形态正常的 6.杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，成 为受广大消费者喜欢的绵羊品种。科研工 3.(选择性必修3P62)胚胎移植的实质是 作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程 如图所示，据图回答下列问题： 329 金榜题名 创新高考总复习 生物 卵 7.(2022·全国甲，38节选)某牧场引进一只产 雌性① 鉴定 肉性能优异的良种公羊，为了在短时间内获 杜泊羊 胞 性别 体外 得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场 二分胚 受粘 受精卵 当地 利用胚胎工程技术进行了相关操作。回答 雄性 普通 杜泊羊 下列问题： 绵羊 (1)在体外受精前要对精子进行获能处理， 多只 其原因是 杜泊羊 (1)为了获得更多的卵母细胞，需用 精子体外获能可采用化学诱导法，诱导精子 对雌性杜泊羊进行 处理， 获能的药物是 (答出 过程②中产生的精子需进行获能处理，目的 一点即可)。利用该公羊的精子进行体外受 是 精需要发育到一定时期的卵母细胞，因为卵 (2)在实际胚胎工程操作中，常以观察到 母细胞达到 时才具备与精子受精 或 作为受精的标志。 的能力。 (3)图中移植的胚胎处于 期。为获得 (2)请以保存的囊胚和相应数量的非繁殖期 雌性杜泊羊，胚胎移植前需取 鉴定 受体母羊为材料进行操作，以获得具有该公 为提高胚胎的利用率，尽快获得数 羊优良性状的后代。主要的操作步骤是 量较多的子代杜泊羊，图中过程⑤使用 技术对胚胎进行处理，处理时要注意 请完成课时提分集训60 第61课时 基因工程的基本工具和基本操作程序 高考目 1.概述基因工程是在微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展起来的。2.阐明 标定位 重组DNA技术的三种基本工具。3.阐明基因工程的基本操作程序。 核心考点奥破 考点一 基因工程的基本工具 (2)DNA双螺旋结构的提出和 知识储备·夯基 的证明。 1.基因工程的概念 (3)中心法则的确立。 挨作环境 (4) 的破译。 生物体外 挨作水平 (5)基因转移载体的发现。 水平 士要技术 的发现为DNA的切割、 基因工程 等技术 连接以及功能基因的获得创造了条件。 操作结果赋予生物新的 创造史符合 人需要的新的 和尘物产品 (6) 体外重组的实现。 变异原埋 (7)重组DNA表达实验的成功。 2.基因工程的诞生和发展 (8)DNA测序和合成技术的发明。 (1)肺炎链球菌转化实验不仅证明了DNA (9) 技术的发明。 是遗传物质，还证明了DNA可在同种生物 (10) 技术可以实现对特定基 不同个体之间 因的定点插人、敲除或替换。 330判断正误 (2)提示不具有。卵子在受精前也要经历类似精子获能的过 (1)×提示动物体细胞核移植的原理是动物体细胞核的全 程，要在输卵管内进一步成熟，到MⅡ期时，才具各与精子受精 能性而不是动物细胞的全能性 的能力。 (2)/(3)/(4)/(5)/ (3)提示有两道屏障，一是透明带发生生理反应，二是聊细胞 (6)X提示克登动物细胞质中的连传物质来自聊母细胞，与 膜发生生理反应。防止多精入卵，保证受精卵中遗传物质与亲 供核细胞不完全相同，且克隆动物与供核动物的生活环境可能 代体细隐一致，从而保证遵传的稳定性 有差异，因此二者的性状不完全相月。 2.(1)提示有机物的总量不断减少，但有机物的种类增加。 关键考能 (2)提示胚胎中总DNA含量逐渐增多，但每个御胞中核DNA (1)提示因为卯母细胞体积大，易操作：营养丰富：卵母细胞中 含量保持相对稳定 含有教发细胞核全能性的物质。 (3)提示桑葚胚期及之前的时期。 (2)提示为了使核移植的胚胎或核遗传物质全部来自患者提 供的正常体细胞 典型例题 典型例题 【例1】A[A、由表可知，甲低浓度时促进卵裂，高浓度时抑制卵 【例5】A[A,体外培养至MⅡ期的卵母细胞不需要进行获能处 梨，A错误：B、对都组第一规体排出个数为70个，甲求度过高 理就可进行后续操作，A错误：B、卵母细胞去核通常是用显薇操 (>104g/mL,第一极体排出个数<70)抑制第一规体的排出，B 作法去徐细胞中的纺锤体和染色体的复合物，B正确：CD、过程 正确C,添加1ug/mL的甲，卵裂数增大，即该条件可提高受精 ③构建重构胚时是将供体如胞整个注入去核卵母细胞中，国此 后胚胎发育能力，C正确：D、聊母细胞成熟的判断标准是第一极 图中的重构胚中含有卵母细胞和供体细胞的细胞质，CD正确， 体的排出，D正确，故选A,门 故选A。] 【例2】B[A,在自然条件下，情乳动物的受精过程在榆卵管中 【例6】AB[A、为防止多精子入卵的两道屏障时透明带反应和 完成，A错误：B,受精卵形成后即在输卵管内细胞开始进行有丝 卵细胞膜反应，A正确：B、捐献者卵母如胞受精过程形成受精 分裂·胚胎开始发育，B正确：C、胎膜、胎盘不属于母体组织，C错 卵，营养物质为卵细胞中的卵黄，为后期重组受精卵的营养物质 误：D、早期胚胎发育过程中，细胞数目增多，但胚胎总体积并不 的供应提供前提条件，故有利于重组受精卵的分裂分化，B正确： 增加，甚至略微编小，D错误。故选B。 C、牌雄原核的融合发生在受精作用时，此时不属于有丝分裂过 考点二知识储备 程中，C错误：D、血友病时伴X隐性道传病，该基因位于细胞核 1.(1)MⅡ获能获能的精子适当的培养液(2)①动物繁殖 内的柒色体上，患者的知龍桩仍然保留，国此该基因能遗传给后 能力②胚胎移植 代，D错误。故选AB。] 教材查漏补缺 2.(1)转基因、核移植和体外受精同种的，生理状态相同遗传 性状优良、生产能力强健康的体质和正常繁殖能力(2)人工 1.95%空气和5%CO,维特培养液的pH 2,细胞贴附在培养瓶的瓶壁上的现象 授精收集培养胚胎的移植(3)①繁殖潜力②繁殖周 3.当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂 期③超数排卵 增殖的现象 3,(1)同卵双胎相同的遗传物质(2)显微操作仪(3)桑进胚 4.悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液 或囊胚将内细胞团均等分割()优良动物品种相同性 中营养物质缺乏等因素而分裂受阻：对于贴壁细胞来说，除上述 别鉴定 遗传病筛查动物性别 因素外，还会因为接触抑制而停止分裂增殖 判断正误 5.PEG融合法电融合法灭活病毒诱导法 (1)×提示 采集的卵母细胞培养至MⅡ期，即可用于受精。 6.既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体 (2)×提示 超数排卵是指应用外源促性腺激素，诱发卵巢排 7.能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并 出比自然情况下更多的成熟卵子 且可以大量制备 (3)×提示 胚胎分割移植时应选取发有良好，彩态正常的桑 8.保证核移植动物的核遗传物质全部来自供体细胞 其胚或蒙胚。 9.克降动物绝大部分DNA来自供体细胞核，其核外还有少量的 ()×提示进行胚胎性别鉴定时应取滋养层的细胞 DNA,即线粒体中的DNA来自受体卵母细胞 (5)×提示 在对案胚进行分割时，要将内如胞圆均等分制 10.(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞 (6)/ (2)选择培养基 只有杂交瘤细胞能够生存抗原与抗体的反 应具有特异性 关键考能 1.(1)提示使它们的生理条件达到同步或一政，这样才能使供体 第60课时 胚胎工程 的胚胎移入受体后有相似的生理环晓。 考点一知识储备 (2)提示第一次用孕激素对受、供体进行同期发情处理，第二 1.早期胚胎细胞雌性动物自然受精早期胚胎发有 次用促性腺滋素处理使供体延数排卵。第一次是对收集的胚胎 2.(1)合子(2)输卵管(3)获能MⅡ期透明带透明带卵 透行质量检查，第二次是对受体母高是否妊级避行检查。 细胞膜卵细胞膜雄、维原核 (3)提示可以发挥雠性优良个体的繁殖能力 3.有丝分裂增多并不增加子细胞形成致密的细胞团胎儿 (4)提示体外受精、转基因技术或者翻胞核移植技术等方式获 的各种组织胎膜和胎盘表面的细胞层向内迁移的细胞 得的胚胎都可供胚胎移植。 4,(1)透明带(2)无法继续发有 2.(1)提示常用来做DNA分析，鉴定性别。 判断正误 (2)提示不是，来自同一胚胎分料产生的后代具有相同的遗传 (1)/ 物质，因此胚胎分割移植可以看作动物无性繁殖或克隆的方法 (2)X提示动物排出的卵子可能是初级卵母细胞戏次级卵 之一 母如跑，都需在输卵管中进一步成熟。 (3)提示胚胎分割可提高胚胎利用率。选择桑葚胚期或食胚 (3)X提示在特子融及卵知胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明 期进行分制，是国为处于桑葚胚期的细胞和象胚期的内御胞团 带会迅递发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带，然后精子 细胞具有全能性，可以发有成完整个体。 入卵。精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应，拒绝其他精 典型例题 子再进入卵内。 (4)/ 【例3】B[A,促性豫激素能作用于卵巢，藏羊甲需用促性腺激 (5)×提示卵裂阶段胚胎的总体积并不增加，但知艷数目增 素处理使其卵果卵泡发有和超数排卵，A正确：B、从卵果中刚采 多，每个钿胞中有机物含量减少，DNA的含量基本不变，御胞体 集的卵母细胞需培养成熟（减数第二次分裂中期）后才可与获能 积减小 的精子进行体外受精，B错误：C,在胚胎移植前要对接受胚胎的 (6)X提示胚胎发育过程中如胞开始出现分化的阶段是囊 受体和供体避行同期发情处理，使受体的生理状况相同，因此受 胚期。 体藏羊丙需和藏羊甲进行月期发情处理，C正确：D、后代丁是由 关键考能 藏羊甲的卵翻胞和藏羊乙的精子结合形成的受精卵发育而来， 1.(1)提示不能。侧采集到的精子不具有受精能力，必须先对精 因此后代丁的造传物质来源于藏羊甲和藏羊乙，D正确。故 子进行获能处理，才能进一步与卵子结合完成受精， 选B,门 636 【例4】C[A、体外诱导食景猴胚胎千细跑，形成了类似囊胚的： 【例2】B[A、细胞内的Ca9酶在配对区战定点剪切，引起果蝇 结构（类囊胚），证实了食蟹猴胚胎千细胞具有分化潜能，A正 发生基因突变，A错误：B、该过程中，sgRNA和C=9酶共同剪切 确：B、实验过程中使用的培养基需含有糖类，糖类可为细胞培养 DNA,SERNA和Cas9酶类似于限制醉的作用，B正确：C、敲除后 提供能源物质，B正确：C、类囊胚的获得利用了动物细胞培养技 需要DNA连接醉对DNA上的切口进行修复，C错误：D、SERNA 术，并没有近行核移植，C错误：D、可借助胚胎移植技术将类囊 与红眼基因B的部分序列配对，碱基互补配对方式中A一T可 能会出现，D错误。故送B门 胚移植到相应的雌性受体中继续胚胎发育，从而可以用来研究 类囊胚的后续发有，D正确，故选C。门 考点二 知识储备 1.(1)性状表达产物(2)①结构和功能清晰序列数据库 教材查漏补缺 (3)②获取a.DNA半保留复制组分大量复制b.缓冲蹈 1.将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状 液引物脱缄核苷酸耐高温的温度心，90℃单链 态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术 50℃引物72耐高温的DNA聚合酶d琼脂糖凝胶电泳 2.供体是遗传性状优良、生产能力强的个体，受体是有健康的体质 ③基因文库 和正常繁殖能力的个体，且二者必须是同一物种 2.(1)在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代(2)启动子 3.早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 标记基因 4.可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 3.花粉管通道法Ca+体细胞或受精卵受精卵 5,桑甚胚或囊胚 判断正误 提示目的基因主要是指编码蛋白质的基周，也可以是 6.(1)促性腺藏素超数排卵使其具有与卵细胞受精的能力 (1)× 一些具有调控作用的因子。 (2)两个极体、雌、雄原核(3)囊胚滋养层性别胚胎分 (2)/ 割将内细胞团均等分制 (3)× 提示启动子和终止子决定着转录的开始与结来： 7,(1)刚排出的精子必须在堆性动物的生殖道内发生相应生理变 (4) 化后才能受精肝索或Ca3+载体MⅡ期(2)对受体母羊进 (5)×提示为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基 行同期发情处理，将保存的囊胚进行胚脂胎移植，对受体母羊进行 因时能以受精卵为受体，也能以体翻胞为受体 是否妊振的检查，一段时回后受体母羊产下具有该公羊优良性 (6)×提示检测目的基因是否导入受体细胞的方法是PCR 状的后代 等技术 关键考能 第61课时基因工程的基本工具和基本操作程序 1,(1)提示引物是指一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补 配对的短单链核酸。在DNA扩增时，DNA聚合酶不能从头开 考点一知识储备 始合成DNA,只能从引物的3'端延仲DNA链，因此复制DNA 1.DNA分子转基因遗传特性生物类型基因重组 时应加入两种引物。 2.(1)转移(2)半保留复制(4)遗传密码(5)限制酶，DNA连 (2)提示不需要，只要知道B1基因两端的郎分核苷酸序列即 接醇和逆转录醇(6)DNA(9)PCR(10)基因组编辑 可（以便根据这部分序列合成两种引物） 3,(1)原核生物。数千特定核苷酸序列磷酸二酯键磷酸二 (3)提示引物是依据B1毒蛋白基图的一段已知序列设计合成 酯键(2)磷酸二酯键大肠杆菌酷性末端黏性末端 的（或引物能与B1基因的cDNA特异性结合）。 (3)环状双链DNA分子噬菌体有一个至多个自我复制 (4)提示经过#轮循环，得到2个DNA分子，含引物的DNA 受体DNA标记 分子2"个，含其中一种引物的DNA分子数(2"一1)个，同时含 判断正误 两种引物的DNA分子(2"一2)个，共需要消耗(2+1一2)个引 (1)X提示基周工程是人工操作导致的基因重组，变异是定 物，含不等长脱氧核苷酸链的DNA分子2个，含等长脱氧核 向的 苷酸链的DNA分子(2一2m)个 (2)×提示DNA连接酶可以将双链DNA片段“缝合”起来， (5)提示不需要解旋酶，因为PCR过程中，DNA双链在高温下 恢复被很制酶切开的碎酸二酯键。 即可完成解旋。由于(CR过程温度较高，故所需要的DNA聚 合酶应具有时高温的特点。 (3)×提示限制性内初核酸醉，DNA连接酶和质粒是基图 2.(1)B1基因Ti质粒 工程中常用的三种工具，前两者属于工具酶，质粒属于载体。 (2)提示为了避免目的基因和载体的自身环化和反向连接。 (4)×提示质粒上的抗生素抗性基周常作为标记基因，便于 (3)提示目的基国应插入启动子与终止子之间。 重组DNA分子的琉选 (4)农杆菌转化法 关键考能 提示由于Ti质粒上的T一DNA可转移到受体细胞且能整合 (1)提示限制醉EwRI: 到受体细胞的臻色体DNA上，而目的基因又插入T一DNA,所 以目的基因可以整合到受体细胞的染色体DNA上： (5)提示一般不能。如果仅把目的基因整合到线粒体DNA残 GAATTC 一G AATTC- L→-CTTAA + 叶绿体DNA上，由于细胞分裂可能导数目的基因丢失，无法稳 -CTTAAG- G 定遗传 (6)提示 抗原一抗体泰交、用棉叶饲喂棉龄虫 跟制醉Nhe I: 典型例题 【例3】【答案】(1)蔗糖参与蔗糖分解代谢，将蔗糖分解生成 -GCTAGC一 -G CTAGC- 葡萄糖单位时间内葡萄糖的生成量（或蔗糖的减少量等） -CGATCG- -CGATC + G (2)NV基因大于TDNA插人导致NV基因增加部分碱基 序列 (2)提示用限制酶MnI和SpeI切割目的基图。限制酶 (3)突变体便于筛选出成功导人NV基因的细胞 MunI和EoRI切制后形成的站性末端相同，限制酶NheI 【解析】(1)根据表格，野生型菌林加入燕糖就会合成NV醉，不 和SpI切制后形成的黏性未端相同，实验人萸使用限制酶 加就不会合成，推测蔗糖语导了NV基因表达。分析表可知有 EcoR I和Nhe1切割质粒，应选用MunL和SpeI切制目的 NV酶，苗林就能将蔗糖分解出萄萄糖，因此NV酶可能参与蔗 排的分解代谢过程，将蔗糖分解生成葡萄檐。检测NV酶活性 基因。 时，可以测定单位时间内萄萄糖的生成量或蔗排的减少量等。 典型例题 (2)从题目中可知，突变体是通过TDNA随杭插入野生型菌株 【例I】B[A、限制酶失活会使DNA完全不被酶切，此时应更换 基图组DNA筛选获得的。在进行PCR扩增时，使用的引物需 斯的限制酶，A正确：B、酶切条件不合透通常会使切割效果下 要与特定的DNA序列配对结合，才能启动DNA的扩增。野生 降，调整反应条件如温度和PH等，调整酶的用量没有作用，B错 型苗株的基周组DNA中没有TDNA的插入，所以用与NV基 误：C、质粒DNA突变会导数限制醉识别位点缺失，进而造成限 因配对的引物进行扩增时，可以扩增出完整的V基因片段。 而哭变体由于TDNA的随机插入，导致NV基因中增加部分序 制醉无法进行切割，此时应更换为正常质粒，C正确：D、质翘 列。这样一来，使用同样的引物进行扩增时，扩增片段的长度就 DNA上酶切位点被甲基化修饰，会导致对DNA甲基化敏感的 会大于野生型扩增片段的长度。因此若突变体扩增片段长度> 限制酶无法进行醉切，此时应换用对DNA甲基化不敏感的限制 野生型扩增片段长度，则表明突变体构建成功。从基因序列分析 酶，D正确。故选B。门 其原因是T-DNA插入导致NV基国增加部分序列 637