第59课时 动物细胞工程-【金榜题名】2026年高考生物一轮总复习

金榜题名创新高考总复习生物 第59课时动物细胞工程 1,阐明动物细胞培养的条件和过程。2.阐明动物细胞核移植的原理和过程。3.阐明动物细 高考目 标定位 胞融合的概念。4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。5.简述干细胞在生物 医学工程中有广泛的应用价值。 核心考点突破 考点一 动物细胞培养 知识储备·夯基 (1)细胞贴壁：体外培养的大多数动物细胞 往往 在培养瓶的瓶壁上。 1.动物细胞培养的概念 (2)接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面 从动物体中取出相关的组织，将它分散成 时，细胞通常会停止 然后在适宜的培养条件下，让 (3)原代培养： 之前的细胞培养，即动 这些细胞 的技术。 物组织经处理后的 2.动物细胞培养的条件 (4)传代培养： 后的细胞培养。 营养条件：糖类、氨基酸、无机盐、维生 4.干细胞培养及其应用 素、促生长因子、微量元素等营养物质。 此外通常还需等一些天然成分 诱导多能 进行灭菌 胚胎干细胞 成体干细胞 干细胞 无菌、无 处理 培 毒的环境 在无菌环境下操作 养 定期更换培养液，清除代谢物 温度、pH和渗透压：哺乳动物细胞培养 素 骨髓、脐带血和体细胞（如成纤 件 外周血 维细胞等) 的温度多以(36.5±0.5)℃为宜，多数动 物细胞生存的适宜pH为 95%的空气：其中02是细胞 能分化为成年 气体环境 代谢所必需的 动物体内的任 5%的C02: 何一种类型的 能诱导分化成 特 分化成 细胞，并进 类似 3.动物细胞培养的过程 点 步形成机体的 的细胞 取动物组织块 组织和器官甚 酶或 机械法 分散成 加人 培养液 造血干细胞用于 制成 治疗小鼠的镰 分化成心肌细治疗白血病等； 装瓶 应 状细胞贫血、阿 用 胞、神经元和 神经干细胞用于 培养 尔茨海默病、心 造血干细胞等 治疗帕金森病、 血管疾病等 阿尔茨海默病等 细胞密度过 生长 大有害代谢 生长 物积累，营养 物质缺乏等 接触 判断正误 抑制 (1)在进行细胞培养时，通常采用培养皿或打 分加 开培养瓶盖的方式以获取新陈代谢所必需的 02 320 第10章生物技术与工程 (2)将动物细胞置于含有95%O2和5%CO2 (2)根据表格中的结果可以得出的结论是 的混合气体的CO2培养箱中进行培养( 什么？ (3)动物细胞在培养过程中都具有细胞贴壁的 现象 (4)培养动物细胞的第一代（即第一次细胞增 殖)被称为原代培养 ( 典型例题·研磨 (5)干细胞都能分化成多种类型的细胞( (6)胚胎干细胞是发现最早、研究最多、应用也 考向一 动物细胞培养 最为成熟的一类成体干细胞 【例1】(2024·吉林高考)从小鼠胚胎中分离 获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代 3家关键考能·提升 后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。 为研究长春新碱(VCR)对肝癌细胞调亡的 下列叙述正确的是 影响，科研人员进行了相关研究。 指数增长期平台期 ①将等量的小鼠肝癌Hepa1一6细胞悬液， 10 ② 分别接种于若干个含有等量培养液的培养 瓶中； ②将培养瓶放于37℃、5%CO2培养箱中 10 期 ① 景 培养24h,静置、去除上清液； ③分别加入等量但含不同浓度VCR的培养 23 4 5 时间/d 液，置于37℃、5%的C02培养箱中继续 A.传代培养时，培养皿需密封防止污染 培养； ④分别在24h、36h、48h时吸取培养液，观 B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理 察结果，得到不同浓度VCR作用于肝癌细 C.直接用离心法收集细胞进行传代培养 胞不同时间的抑制率(%)如表所示。 D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过 大有关 浓度 24h 36h 48h 【例2】(2024·浙江高考)某动物细胞培养过 0.5 mg/mL 12.5 17.2 26 程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装 1.0 mg/mL 20.5 31 42 培养，实验操作过程如图。 2.0 mg/ml 31.5 38.8 47 ③制造细胞 悬液，分装 请回答下列问题： ①吸除培养 ②吸除消化液， (1)步骤③中需要设置对照组，对照组的处 液，加消花液加培养液 理方法为 下列叙述错误的是 步骤③中每个实验组设置5个培养瓶同时 A.①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离 进行培养，计数后统计平均值，目的是什么？ B.②加培养液的日的是促进细胞增殖 C.③分装时需调整到合适的细胞密度 D.整个过程需要在无菌、无毒条件下进行 321 金榜题名创新高考总复习生物 考点二 动物细胞融合技术与单克隆抗体 ②单克隆抗体的优点 知识储备·夯基 a.能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗 1.动物细胞融合技术 原发生 结合（特异性强、灵敏度高）。 b.可以 制备。 概念：使两个或多个动物细胞结合形成一 (3)单克隆抗体的应用 个细胞的技术 ①被广泛用作 试剂，在多种疾病的诊 ,方法： 断和病原体鉴定中发挥重要的作用。 动 ②运载 ,形成抗体一药物偶联物，实 物 细 现对肿瘤细胞的 杀伤。 结构基础： 胞 ③用于 融 ,结果：形成具有原来两个或多个细胞遗传 判断正误 合 信息的杂交细胞 (1)动物细胞融合过程中既有细胞膜的融合也 技 有核的融合 术 ①突破了有性杂交的局限，使远缘 杂交成为可能：②成为研究细胞 (2)动物细胞融合的结果是形成单核的杂交细 意义 遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物 胞，植物体细胞杂交的结果是得到杂种植株 新品种等的重要手段，为制造单克 ( 隆抗体开辟了新途径 (3)动物体细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍 2.单克隆抗体的制备 体细胞 () (1)传统抗体的获得 (4)将抗原注入小鼠体内，是为了获得能产生 相应抗体的B淋巴细胞 () ①方法 (5)将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融 抗反复动物形成多种B淋 产生 多种 从 中 合，培养液中融合后的细胞即杂交瘤细胞 原注射体内 巴细胞 分离抗体 ②缺点：产量低 低、 差。 (6)单克隆抗体诊断试剂提高了诊断的准确 性、灵敏性 (2)单克隆抗体的制备及优点 ①制备过程 3关键考能·提升 注射特定 培养骨髓瘤细胞 长春新碱(VCR)能够干扰肿瘤细胞的有丝 的抗原 免疫小鼠 68 分裂，也会影响正常细胞的增殖和分裂，导 致药物副作用的发生。H18杂交瘤细胞产 多种 诱导，融合 骨髓瘤细胞 生的抗人肝癌单克隆抗体HAb18对于人体 c G00 肝癌的诊断和靶向治疗具有重要的意义。 多种杂 回答下列问题： 交细胞<⊙⊙O:。⊙>自身脸合细胞 (1)抗人肝癌单克隆抗体HAb18的制备过 用特定的 培养基筛选，↓未融合或同种融合的细胞死亡 ⊙ 程中，需要向小鼠体内注射肝癌细胞悬液， !克隆上述杂交细胞 其目的是什么？ DDDa 一专一抗体检测阳性 将不同种杂交细胞分开，！并克隆专一抗体检测呈阳性的细胞 (2)单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因 注射到 体外培养 小鼠腹心 6的 是什么？ 腔内 总龙单克隆抗体 单克隆抗体 322 第10章生物技术与工程 (3)资料：①细胞合成DNA包括D和S两条 途径，其中D途径能被氨基蝶吟阻断。 典型例题·研磨 ②免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA的合 考向二动物细胞融合技术与单克隆抗体 成途径，但它不能分裂增殖，其本身也不能 【例3】(2023·北京高考)甲状旁腺激素(PTH) 在体外长期存活。 水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途 究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH, 径，但它能不断分裂增殖。如果它的D途径 有关制备过程的叙述不正确的是( 被阻断的话，它会因不能合成DNA而死亡。 A.需要使用动物细胞培养技术 抗人肝癌单克隆抗体HAb18的制备过程 B.需要制备用PTH免疫的小鼠 中，需要两次筛选，请根据上述资料提出第1 C.利用抗原一抗体结合的原理筛选杂交瘤 次筛选的目的和具体方法。 细胞 D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞 【例4】（不定项）(2024·江西高考)某病毒颗 粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S(含 有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定 基能够刺激机体产生一种抗体)。为了建立 (4)将VCR与抗人肝癌单克隆抗体HAb18 一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人 通过接头连接形成抗体一药物偶联物 员采用杂交瘤技术制备了抗一S单克隆抗 (ADC),可实现对肝癌细胞的特异性杀伤， 体（如图）。下列说法正确的是 ADC的作用机制如图。据图分析，ADC的 筛选单一 类型杂交 抗体和药物(VCR)各具有什么作用？ 瘤细胞 VCR一接头 单克隆 注射抗原B淋巴羽一 抗体A 抗体 细胞调亡 免疫小鼠细胞 的 细胞杂交瘤 8。融合 筛选单 纳 抑制微管 细胞 单克隆 ,蛋白聚合 培养骨随分散骨髓 类型杂交 瘤细胞 抗体B 释放药物1 米米 瘤细胞 瘤细胞 A.利用胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的 骨髓瘤细胞 溶酶体 B.制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是 相同的单克隆抗体 C.用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传 代培养，但不能冻存 D.单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特 异性识别S蛋白 考点三 动物体细胞核移植技术和克隆动物 成 ,继而发育为 的 知识储备·夯基 技术。 1.动物细胞核移植技术的概念和类型 (2)原理： (1)概念 (3)类型：哺乳动物核移植可分为 将动物一个细胞的 移入去核的 核移植和 核移植，其中 中，使这个重新组合的细胞发育 核移植较易成功。 323 金榜题名创新高考总复习 生物 2.体细胞核移植的过程 判断正误 卵巢 采集 一卵母细胞 (1)通过克隆技术形成重组细胞并发育成一个 体外培养 新个体，体现了动物细胞的全能性 () 供体细胞 期卵母细胞 (2)核移植中MⅡ期卵母细胞“去核”其实是去 去核 除纺锤体一染色体复合物 供体细胞培养 去核卵母细胞 (3)核移植过程中供体理论上是提供细胞核， 将供体细胞 ①通过电融合法使两细胞融合 但操作过程中可以把整个细胞注入去核的卵 注人去核卵 供体核进入卵母细胞形成重构胚： 母细胞 2用物理或化学方法（如电刺激 母细胞中 ( C载体、乙醇、蛋白酶合成卸制 剂等)激活重构胚，使其完成细 (4)重构胚是指人工重新构建的胚胎，具有发 胞分裂和发育进程 育成完整个体的能力 () 带代孕好困一克隆动物 (5)可用Ca2+载体激活重构胚，使其完成细胞 【提醒】 目前动物细胞核移植技术中普遍 分裂和发育进程 ( 使用的去核方法是显微操作法。也有人采 (6)克隆动物的性状与供核动物完全相同 用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质 ( 处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母 关键考能·提升 细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA 变性。 癌症早中期的患者往往通过相应的组织或 3.体细胞核移植技术的应用前景和存在的 者器官摘除来进行治疗，但是组织和器官摘 问题 除往往严重影响患者的正常生活和身心健 康，如图是利用体细胞核移植技术生产器官 加速家畜 进程、促进优良畜 畜牧业 的过程。分析并回答下列问题： 群繁育 患者正常 体细胞 ①作为 →肝细胞 生产医用蛋白： ② 的细胞、组织或器 →心肌细胞 移植给患 0- →胰岛细胞 者本人 医药 官可以用于异种移植： 胚胎干 卫生 ③人核移植 经过诱导分化 细胞A 细胞 一神经细胞一 形成相应的细胞、组织或器官，可用于器 (1)细胞A一般选用卵母细胞，为什么？ 官移植 景 ①研究克隆动物可使人类更深人地了解 及衰老过程； (2)在将体细胞的核移植到细胞A之前，为 ②克隆一批遗传背景相同的动物，可以 科学 什么必须先对细胞A进行去核操作？ 通过它们之间的对比来分析 研究 ③克隆特定疾病模型的动物，为研究 和开发相应的药物提供帮助 典型例题·研磨 保护濒 增加濒危物种的存活数量 考向三 动物体细胞核移植技术和克隆 危物种 动物 ①成功率 :②绝大多数克隆动物存在 【例5】下图是利用体细胞核移植来克隆高产 题 问题，表现出 奶牛的大致流程示意图。下列相关叙述错 误的是 324 第10章生物技术与工程 牛卵巢中采 MⅡ期卵① 患者卵 集卵母细胞 母细胞 去核卵母细胞 ③ 母细胞 ② 重构胚 ① ● 高产奶生 体细胞 供体细胞 受精 父亲 雕雄 早期胚胎④ 受体母牛中一犊牛 的精子 ●◆原核 1④卵裂 (囊胚) ②去雌 ③移核 ① A.体外培养至MⅡ期的卵母细胞要先经过 雄原核 ●◆ 受精 重组受精卵 获能处理才能用于后续操作 捐献者卵 ◆● 捐献者去 B.图中过程①常用显微操作法去除细胞中 母细胞 核受精卵 的纺锤体和染色体的复合物 A.透明带反应和卵细胞膜反应是过程①形 C.图中过程③是将供体细胞整个注入去核 成二倍体受精卵的保障 卵母细胞中 B.捐献者卵母细胞受精更有利于重组受精 D.图中的重构胚中含有卵母细胞和供体细 卵的分裂分化 胞的细胞质 C.雌雄原核的融合发生在受精卵第一次有 【例6】（不定项）(2025·南通模拟)下图是 丝分裂过程中 “三亲婴儿”培育过程示意图，相关叙述正确 D.应用该技术可阻断血友病女性患者致病 的是 基因遗传给后代 教材查漏补缺 1.(选择性必修3P4)动物细胞培养时，一般 行了100%的复制，原因是 置于含有 的混 合气体的CO2培养箱中进行培养。CO2的 此外，动物的一些行为、习性的形成与所处 主要作用是 环境有很大关系。 2.(选择性必修3P4)细胞贴壁： 10.(2020·全国I,38节选)为研制抗病毒A 的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材 3.(选择性必修3P44)接触抑制： 料设计了以下实验流程。 筛选1筛选？ 制备单细胞悬液 4.(选择性必修3P44)细胞在培养过程中分裂 能产生抗 小鼠甲 B淋巴细胞 融合细胞 杂交瘤细胞 病毒A的 受阻的原因： 单克隆抗 骨髓瘤细胞 体的杂交 瘤细胞 5.(选择性必修3P18)诱导动物细胞融合的常 回答下列问题： 用方法有 和 (1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A, 等。 该处理的目的是 6.(选择性必修3P19)杂交瘤细胞的特点是 (2)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗 7.(选择性必修3Po)单克隆抗体的优点是 体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛 选1所采用的培养基属于 8.(选择性必修3P54)核移植技术中必须先去 使用该培养基进行细胞培养的结果是 掉受体卵母细胞的细胞核的原因是 。图中筛选2含多 次筛选，筛选所依据的基本原理是 9.(选择性必修3P54)通过体细胞核移植技术 培育的克隆动物，不是对体细胞供体动物进 请完成课时提分集训59 325判断正误 (5)×提示胚胎千朝胞能分化产生多种类型的组织或细胞， (1) 成依干细胞一般只能分化成特定的细胞或组织 (2)×提示葡萄的扦插，桃树的嫁接、石榴的压条繁殖方式 (6)×提示造血千细胞是发现最早，研究最多、应用也最为 部属于无性繁殖，不需要利用植物组织培养技术，故不属于鞭型 成熟的一臭成体干如胞。 繁殖 关键考能 (3)×提示植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至 (1)加入等量不含VCR的培养液（或只加等量培养液） 无病毒。因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植林 提示目的是减小误差，使实验结果更准确 就有可能不帝病毒，从而就得脱毒苗，不能成得杭病毒的新 (2)提示VCR对肝寤如胞的柳制率与VCR的浓度和作用时间 物种。 星正相美 (4)×提示二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到单 典型例题 停体幼苗，再经过秋水仙素诱导后得到稳定遗传的纯合子。 【例1】D[A、传代培养时需要营造无菌、无毒以及95%空气十 (5)X提示基周突变是不定向的，故利用组织培养技术产生 5%CO的气体环境，而非密封，A错误：B、选取②的细胞进行传 突变体，还雾要进行筛选，才能培育出具有优良性状的新品种 代培养比①更合理，②时细胞增长开始变得缓授，B错误：C,对 (6) 于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用陵蛋白酶等处理， 关键考能 使之分散为单个细胞，然后再用离心法收集，C错误：D、细胞增 (1)愈伤组织细胞产物 长进入平台期可能与细胞密度过大，细胞间产生接触料制有关， (2)提示要提取细胞产物，应培养到念伤组织阶段。 D正确。故选D,] 典型例题 【例2】B[A、①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离，A正确： B、②加培养液，多次加培养液先洗去残留的消化酶，然后终止消 【例5】B[A,植物细胞壁的主要成分是针筑素和果胶，欲利用 化液的消化作用，并对细龍加以稀释，B辑误：C、③分装时需调 愈伤组织制备悬浮细胞，可用纤雏素酶和果胶酶进行处理愈伤 整到合近的朝胞密度，因为若密度过大细胞直接仿存在楼触柳 组织，A正确：B、装置中的充气管应置于液面下方，以利于培养 制，C正确：D,动物加胞培养雾要无菌无毒环境，因此整个过程 液中的溶氧量的增加，接管不能间时作为排气管，B错误：C、为 需要在无菌、无毒条件下进行，D正确。故选B。 了防止杂苗污染培养液，装置充气口需要增设无茵滤器，C正确： 考点二知识储备 D、细胞培养时需要保证适宜的温度，因此装置需增设温度监测 1,PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等细胞膜的流动性 和控制设备，D正确。故选B门 2.(1)①抗体血1清②纯度特异性(2)①B淋巴细胞选择 【例6】BD[A、植物铜胞壁的主要成分是纤雄素和果胶，故用果 杂交瘤细胞②a.特异性b.大量(3)①诊断②药物选 胶酶和针维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体，A错误： 择性③治疗疾病 B、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞，得到原生质 判断正误 体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用 (1) (2) 械物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，故釉合的原生 (3)×提示 两个二倍体动物细胞融合形成的杂交细胞具有 质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织，B正确：C,体细胞杂 四个兼色体组，是四倍体细胞。 变获得的杂种植株如胞中具有来自亲本的遗传物质，只有1个 (4) 朗胞核，C错误：D,通过念伤组织序生出多个完整植林的过程属 (5)X提示将骨髓骗制胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合 于植物的组织培养，从繁殖看属于无性繁殖，D正确。故选BD] 的细胞不都是杂交霜如胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨藏痛 教材查漏补缺 细胞自身融合的加胞等，需要进行铺选。 1.特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会选择性地表达 (6)、/ 2.指将离体的植物器官，组织或细胞等，培养在人工配制的培养基 关键考能 上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术 (1)提示 刺激机体发生免疫应答，从而得到能产生特定杭体的 3.在一定的激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞失去其 B淋巴细胞 特有的结构和功能，转变成未分化的细胞的过程 (2)提示单克隆抗休能准确地识别抗原的细微差并，与特定抗 4.愈伤组织重新分化成芽，根等器官的过程 原发生特异性结合，并且可以大量制各， 5.生殖隔离远缘杂交植物新品种 (3)提示第1次精选的目的是蝽选出杂文寤刺胞：第1次筛迭 6.电融合法 离心法聚乙二醇(PEG)融合法高Cm2+一高pH 的具体方法是利用加入氨基蝶吟的选择培养基塘选。 融合法 (4)提示ADC的抗体主要发辉靶向运输作用，携带VCR与肝 7,在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的 癌细胞特异性结合：药物(VCR)发挥治疗效应，通过抑制微管蛋 技术 白聚合坊碍筋经体的形成，从而阻新肝癌细胞分裂，诱导肝病细 8.全能性：脱分化细胞分裂素与生长素 袍洞亡 9,随着高CK诱导时间的延长，野生型的W基因表达量显著升高 典型例题 随着高CK诱导时间的延长，突变体的W基因表达量低于野 【例3】D[A,单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行 生型 培养，即需要使用动物细胞培养技术，A正确：B、孩操作的目的 是制备单克隆抗体用于快速检涮PTH,故应用PTH刺激小鼠， 第59课时 动物细胞工程 使其产生相应的B细胞，B正确：C、抗原与抗体的结合具有特异 考点一 知识储备 性，可利用抗原一抗体结合的原理筛选杂交瘤细跑，C正确 D、由于一种B细胞经分化形成聚绍胞后通常只能产生一种就 1,单个细胞生长和增殖 体，故博选出的单个杂变瘤加胞无法分泌多种抗体，D错误。故 2.血清培养液和培养用具7.2~7.4维持培养液的pH 选D.] 3.胰蛋白胶原蛋白单个细胞细胞悬液原代悬浮贴壁 【例】AD[A、胶原蛋白酶可以猴化分解细胞外的股原蛋白，因 分裂受阻或停止传代培养(1)贴附(2》相互接触分裂增 此利用胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的骨醢瘤细胞，A正 殖(3)分瓶初次培养(4)分瓶 确：B,由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定 4.早期胚胎个体 特定的细胞或组织胚胎干细胞 基能够刺激机体产生一种抗体，单克隆杭体A和单克隆抗体B 判断正误 来自不同的杂交溶细肥，因此制备的单克隆抗体A和单克隆抗 (1)× 提示动物细隐培养时通常采用培养显或松盖培养瓶 体B不是相同的单克隆抗体，B错误：C,用于生产单克隆杭体的 (2)×提示将动物细胞置于含有95%空气和5%C0,的混 杂交暗细胞可传代培养，也可以冷冻保存，C错误：D、单克隆杭 合气体的C),培养箱中进行培养 体A和单克隆就体B郁来自药选出的杂交病胞，因此都能够 (3)X提示体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类细胞 特异性识别S蛋白上的抗原决定族，D正响。故选AD,门 能够悬浮在培养液中生长增殖，不具有细胞贴壁的现象：另一类 考点三知识储备 则需要贴附于某些基质表而才能生长增殖，大多数细胞属于这 1.(1)细胞核卵母细胞新胚胎动物个体(2)动物细胞核具 种类型。 有全能性(3)胚胎细胞体细胞胚胎细胞 (4)×提示人们道常将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经 2.MⅡ重构胚 处理后的初次培养称为原代培养，原代培养时细胞增殖不止 3.遗传改良生物反应器转基因克隆动物胚胎干细胞胚胎 一代 发育致病基因致病机制非常低健康遗传和生理缺陷 635 判断正误 (2)提示不具有。卵子在受精前也要经历类似精子茂能的过 (1)X提示动物体细胞核移植的原理是动物体细胞核的全 程，要在输卵管内进一步成熟，到MⅡ期时，才具务与精子受精 能性，而不是动物细胞的全能性 的能力。 (2)√(3)√(4)/(5)/ (3)提示有两道屏障，一是透明带发生生理反应，二是卵翻胞 (6)X提示克隆动物细胞质中的道传物质来自卵母细胞，与 膜发生生理反应。防止多精入卵，保证受精卵中遗传物质与亲 供核轴胞不完全相同，且克隆动物与供核动物的生活环境可能 代体细胞一致，从而保证境传的稳定性 有差异，因此二者的性秋不完全相同。 2.(1)提示有机物的总量不断减少，但有机物的种类增加。 关键考能 (2)提示胚胎中总DNA含量逐渐增多，但每个知胞中核DNA (1)提示因为卵母细胞体积大，易摸作：营养丰富：卵母细胞中 含量保持相对稳定 含有激发细胞核全能性的物质。 (3)提示桑茸胚期及之前的时期 (2)提示为了使核移植的胚胎或核遗传物质全郎来自患者提 供的正常体加胞。 典型例题 典型例题 【例1】A[A、由表可知，甲低浓度时促进卵裂，高浓度时抑制卵 【例5】A[A、体外培养至MⅡ期的卵母细胞不需要进行获能处 裂，A错误：B、对照组第一极体静出个数为70个，甲次度过高 理就可进行后续操作，A错误：B、卵母细胞去核通常是用显微操 (>10g/ml,第一极体排出个数<70)抑制第一极体的排出，B 作法去徐细胞中的舫锤体和兼色体的复合物，B正确：CD,过程 正确：C,添加1g/ml的甲，卵驳数增大，即该条件可提高受精 ③构建重构胚时是将供体如胞整个注入去核卵母细弛中，国此 后胚胎发育能力，C正确D,卵母细胞成熟的判断标准是第一极 图中的重构胚中含有卵肆细胞和供体细胞的细胞质，CD正确。 体的排出，D正确。故选A。 故选A。门 【例2】B[A,在自然条件下，哺乳动物的受精过程在输卵管中 【例6】AB[A,为防止多精子入卵的两道屏障时透明带反应和 完成，A错误：B,受精卵形成后即在输卵管内细胞开始进行有丝 卵细胞膜反应，A正确：B、捐献者卵母细胞受精过程形成受精 分乳，胚胎开始发育，B正确：C、胎膜，胎盘不属于母体组织，C错 卵，营养物质为卵细胞中的卵黄，为后期重组受精卵的营养物质 误：D、早期胚胎发育过程中，细胞数日增多，但胚胎总体积并不 的供应提供前提条件，故有利于重姐受精卵的分裂分化，B正确： 增加，甚至略微缩小，D错误。故选B,] C、雌雄原接的融合发生在受精作用时，此时不属于有丝分裂过 考点二知识储备 程中，C错误：D,血友病时伴X隐性遗传病，该基因位于细胞核 1.(1)MⅡ获能获能的精子适当的培养液(2)①动物繁殖 内的柒色体上，惠者的细胞核仍然保留，国此孩基因能遗传给后 能力②胚胎移植 代，D错误。故选AB。 教材查漏补缺 2.(1)转基因、核移植和体外受精同种的、生理状态相同遗传 性状优良，生产能力强健康的体质和正常繁殖能力(2)人工 1.95%空气和5%C0,维持培养液的pH 2.细胞贴附在培养瓶的瓶壁上的现象 授精收集培养胚胎的移植(3)①繁殖潜力②繁殖周 3.当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂 期③超数排卵 增殖的现象 3.(1)同卵双胎相同的遗传物质(2)显微操作仪(3)桑葚胚 4.悬浮培养的细胞会因细胞密度过大，有害代谢物积累和培养液 或囊胚将内细胞团均等分割(4)优良动物品种相同性 中营养物质缺乏等因素而分裂受阻：对于贴壁细胞来说，除上述 别鉴定 遗传病筛查动物性别 因素外，还会因为接触抑制而停止分裂增殖 判断正误 5.PEG融合法电融合法灭活病毒诱导法 (1)×提示采集的卵母细胞培养至MⅡ期，即可用于受精。 6.既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体 (2)×提示 超数排卵是指应用外源促性腺激素，诗发卵巢排 7,能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并 出比自然情况下更多的成熟卵子 且可以大量制备 (3)×提示 胚胎分割移植时应选取发有良好、形态正常的桑 8.保证核移植动物的核遗传物质全部来自供体细胞 幕胚或食胚。 9,克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，其核外还有少量的 (4)X提示进行胚胎性别鉴定时应取溢养层的如胞。 DNA,即线粒体中的DNA来自受体卵母细胞 (5)×提示 在对量胚选行分割时，要将内细胞团均等分割。 10.(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞 (6)、/ (2)选择培养基只有杂交瘤细胞能够生存抗原与抗体的反 应具有特异性 关键考能 1,(1)提示使它们的生理条件达到同步或一致，这样才能使供体 第60课时 胚胎工程 的胚胎移入受体后有相似的生理环境。 考点一知识储备 (2)提示第一次用孕激素对受，供体进行同期发情处理，第二 1.早期胚胎细胞雌性动物自然受精早期胚胎发有 次用促性豫激素处理使供体超教排卵，第一次是对改朵的胚胎 2.(1)合子(2)输卵管(3)获能MⅡ期透明带透明带卵 进行质量检查，第二次是对受体母富是否妊姬进行检查 细胞膜卵细胞膜雄、维原核 (3)提示可以发挥帅性优良个体的繁殖能力 3.有丝分裂增多并不增加子细胞形成致密的细胞团胎儿 (4)提示体外受精、转基因技术或者细胞核移植技术等方式莪 的各种组织胎膜和胎盘表面的细胞层向内迁移的细胞 得的胚胎都可供胚胎移植。 4.(1)透明带(2)无法继续发有 2.(1)提示常用来做DNA分析，鉴定性别 判断正误 (2)提示不是，来自同一胚胎分割产生的后代其有相同的遗传 (1)/ 物质，因此胚胎分割移杭可以看作动物无性繁殖或克隆的方法 (2)X提示动物排出的卵子可能是初级卵母细抱或次级卵 母如胞，都需在輸卵管中进一步成熟。 (3)提示胚胎分割可提高胚胎利用率。选择桑善胚期或常胚 (3)X提示在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵轴胞膜外的透明 期进行分制，是因为处于桑喜胚期的如胞和囊胚期的内细艳团 带会迅逸发生生理反应·阻止后来的精子进入透明带，然后精子 细胞具有全能性，可以发育成究整个体。 入卵。精子入卵后，卵铜胞膜会立即发生生理反应，拒绝其他精 典型例题 子再进入聊内。 (4) 【例3】B[A、促性腺激素能作用于卵巢·藏羊甲需用促性腺激 (5)×提示卵裂阶段胚胎的总体积并不增加，但细袍数目增 素处理使其卵果卵泡发有和超数排卵，A正痛：B、从卵果中刚采 多，每个细胞中有机物含量减少，DNA的含量基本不变，细胞体 集的卵母细胞需培养成熟（减数第二次分裂中期》后才可与获能 积减小。 的精子选行体外受精，B错误；C、在胚胎移植前要对接受胚胎的 (6)×提示胚胎发有过程中加胞开始出现分化的阶段是袁 受体和供体进行同期发情处理，使受体的生理状况相同，周此受 胚期。 体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理，C正确：D、后代丁是由 关键考能 藏羊甲的卵细胞和藏羊乙的精子站合形成的受精卵发育而采， 1.(1)提示不能。刚采集到的特子不具有受精能力，必须先对糊 因此后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙，D正确。故 子进行获能处理，才能进一步与卵子结合完成受精。 选B.] 636