海南省部分中学2024-2025学年高二下学期第三次模拟考试生物试题

海南省部分中学2024-2025学年高二年级下学期 第三次模拟考试生物试题 以2025年海南省高考试卷模式命题 一、选择题：本题共15小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1．下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法操作结果。下列叙述中错误的是（    ） A．为避免空气中杂菌的污染，进行甲操作时不可转动培养皿 B．甲图中将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽冷却后才能涂布 C．乙中第二次以及以后划线的起点均是上一次划线的末端 D．完成整个乙操作过程需蘸取菌种1次、灼烧接种环6次 2．HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，研究人员将两株不同的杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞。该细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生具有CD3和CD87结合位点的双特异性抗体，如图所示。CD87是一种癌细胞膜上的受体蛋白，研发针对CD87的抗体类药物能提高癌症的治愈率；CD3是所有T细胞表面均有表达的特异性抗原，该抗原被激活后，能极大促进T细胞的免疫效力。下列叙述正确的是（　　） A．双杂交瘤细胞受到CD87和CD3两种抗原刺激后才能产生双特异性抗体 B．培养双杂交瘤细胞的培养基中应加入水、无机盐、琼脂和血清等 C．双特异性单克隆抗体使T细胞更精准接触并杀伤癌细胞 D．将两株不同的杂交瘤细胞融合后，可利用HAT选择培养基筛选出双杂交瘤细胞 3．通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述错误的是（    ） A．在PCR反应体系中还需要加入4种游离核苷酸、解旋酶、耐高温的DNA聚合酶等 B．第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4 C．引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入运载体 D．复性温度过高会导致引物不能与模板牢固结合，PCR扩增效率下降 4．生物技术的安全性和伦理问题已经成为广受关注的社会热点。下列技术或要求不符合安全与伦理规范的是（　　） A．将目的基因导入农作物的叶绿体基因组，可以有效防止基因污染 B．利用基因组编辑技术设计试管婴儿，解决不孕不育问题 C．生物武器具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止 D．生殖性克隆涉及细胞核移植技术，中国政府不接受任何生殖性克隆人实验 5．有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌，用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分。A菌通常被用作溶菌对象，研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体平板上，待其凝固形成薄层后，培养一段时间，薄层变浑浊（如图）。下列有关叙述错误的是（　　） A．蛋白胨主要为细菌提供氮源、碳源和维生素等 B．若薄层变浑浊，表明A菌不能在平板上生长繁殖 C．应将含菌量较高的湖泊水样稀释涂布于浑浊薄层上 D．培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现溶菌圈 6．猪体内隐藏的病毒少，是人类器官移植的优质供体。为避免免疫排斥，科研人员培育了用于器官移植的基因编辑猪，具体流程如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．可用电刺激、Ca2+载体、蛋白酶等方法激活重构胚 B．从1号收集的卵母细胞需培养到MII期再去除细胞核 C．CMAH基因和β4GalNT2基因可能是猪的抗原决定基因 D．胚胎移植前需用促性腺激素对3号进行同期发情处理 7．质粒K中含有β-半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解X-gal，产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体，采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（    ） A．使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数 B．如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的菌株 C．因质粒K中含两个标记基因，筛选平板中长出的白色菌落即为表达目标蛋白的菌株 D．若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌 8．体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，正确的是（    ） A．精子触及卵细胞膜的瞬间，会发生卵细胞膜反应，防止多精子入卵 B．“设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 C．对优良供体母牛进行人工授精，收集胚胎后即可移植到受体母牛体内进行繁殖 D．对胚胎进行移植时，需要将胚胎移植到同种的、遗传性状优良的雌性体内 9．石油对土壤的污染不仅给周边生态环境带来严重的损害，还严重影响居民的健康生活，且污染物含量越多，降解难度越大。为解决石油污染问题，某科研小组用了将近1年的时间，从长庆油田中被石油污染最严重的土壤中分离出了高效分解石油的细菌，如图所示。小明用该法进行了过程④的操作，将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为46、58和52。下列说法中错误的是（    ）    A．步骤③培养基中以石油为唯一碳源，使用高压蒸汽灭菌法灭菌 B．平板冷却后倒置可防止皿盖上的水珠落回污染培养基和防止培养基中的水分过快挥发 C．采用稀释涂布平板法对石油分解菌进行分离和计数 D．根据小明的实验结果，可得出每升该样品中的活菌数为5.2×106个 10．黄曲霉素（AFB）是黄曲霉（真菌）产生的具有极强致癌力的代谢产物。科研人员为准确检测食品中残留的AFB，利用动物细胞融合技术制备AFB的单克隆抗体，过程如图所示。下列叙述正确的是（　　）    A．推测体内大量的AFB可能诱发人体的抑癌基因突变成原癌基因 B．制备AFB单克隆抗体需骨髓瘤细胞和T细胞融合获得杂种细胞 C．制备的AFB单克隆抗体可使人体内癌变的细胞发生裂解死亡 D．阳性的杂交瘤细胞通过在体外大规模培养可获得大量单克隆抗体 11．农杆菌是一种土壤中的常见微生物，可在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物。农科院的研究员利用农杆菌这一特性成功将耐盐基因导入烟草细胞，最终获得了转基因耐盐烟草植株。下列相关叙述错误的是（    ） A．用该方法也可将目的基因导入单子叶植物 B．构建表达载体时需要使用限制酶和DNA连接酶 C．构建表达载体时应将耐盐基因插入到T-DNA序列之后 D．利用该方法可将耐盐基因整合到烟草细胞染色体DNA中 12．如图表示植株A(杂合子 Dd)和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（　　） A．培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子 B．植株⑤的获得可以证明该技术能克服远缘杂交不亲和性，获得新品种 C．采用化学法、物理法或灭活的病毒诱导原生质体融合 D．正常情况下，植株②④与植株A 基因型相同的概率分别是1/4、1 13．如图是“DNA的粗提取和鉴定”实验中几个重要操作的示意图，下列叙述正确的是（    ）    A．本实验正确的操作顺序应是③①②④ B．图中④用到的NaCl溶液浓度为2mol/L C．图中①的原理是DNA溶于酒精，而某些蛋白质不溶于酒精 D．将二苯胺试剂加入含DNA的烧杯中即可观察到颜色变蓝 14．转基因抗虫棉在我国的种植面积已占全国棉花种植面积的90%。研究者利用PCR技术检测杂草中有无转基因成分，得到如图所示结果。相关分析错误的是（　　） A．空白实验是未加入DNA模板得到的电泳结果 B．推测棉田杂草6、7与抗虫棉的亲缘关系较近 C．结果说明校园杂草与棉花间一定存在生殖隔离 D．转基因成分进入杂草体内可能会引发生态问题 15．啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法不正确的是（    ） A．用赤霉素处理大麦，可使大麦种子无须发芽就能产生a-淀粉酶 B．焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌 C．糖浆经蒸煮、冷却后需接种酵母菌进行发酵 D．蒸煮可产生风味组分，终止酶的进一步作用 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 16．制作泡菜时，为什么泡菜坛只能装八成满? ，用水密封泡菜坛的目的是什么? ，制作的泡菜“咸而不酸”,可能的原因是什么? ，分析泡菜在腌制过程中亚硝酸盐的含量变化的原因？ ，泡菜发酵时间是不是越长越好? ，制作泡菜时,为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加人少量陈泡菜液,其原因是什么? 。 17．抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”具有诊断早、准确率高的特点。下图表示抗HCG单克隆抗体制备流程的示意图。 (1)注射的物质X为 ，该技术主要利用了Y细胞 的特点，为了得到融合细胞采用不同于植物体细胞杂交的融合方法是 。 (2)正常细胞的DNA合成有D和S两条途径，而瘤细胞只有D途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。在HAT培养基中加入了氨基嘌呤可以从多种融合细胞中筛选获得能连续增殖的杂交瘤细胞，原因是 。 (3)Z处理包括 ，所获得的杂交瘤细胞的特点是 。 18．水稻是重要的粮食作物，病虫害严重影响水稻产量。研究人员为了育好“中国种”，利用转基因技术培育抗虫、抗除草剂水稻。回答下列问题： (1)将抗虫基因导入水稻优质品种，获得抗虫水稻甲。水稻甲自交得到的F1中，抗虫水稻约占3/4，推测可能是水稻染色体上导入了一个抗虫基因，该抗虫性状的遗传遵循孟德尔 的 定律。 (2)检测转基因抗虫水稻乙，发现其染色体上含两个相同的抗虫基因，则抗虫基因在染色体上的位置有 种可能，研究人员欲通过杂交实验确定抗虫基因的位置。 ①水稻雌雄同花，花小且多，进行杂交时 操作十分困难，因此研究人员培育了不抗虫的光温敏感型雄性不育水稻（如图所示），以方便进行杂交操作。但操作过程需精准控制温度和日照时间，以防止在 时其育性发生紊乱。 ②让乙和不抗虫光温敏雄性不育的水稻进行杂交，若后代全为抗虫水稻，则两个抗虫基因位于 上；若两个抗虫基因位于非同源染色体，则后代的表型及比例为 。 (3)科研人员将抗虫基因和抗除草剂同时转入水稻，获得若干转基因植株，从中选择抗虫抗除草剂的单株S1和S2，让其分别进行自交获得子代，子代性状表现如图所示。 ①基因在染色体上所在的位置称为 ，请根据上述子代性状表现，试在下图细胞内染色体上标出S1和S2中抗虫基因（D）及抗除草剂（T）的插入位点 。 ②若给S1自交子代植株喷施适量的除草剂，让存活植株再自交，得到的子代群体中不抗虫抗除草剂的个体占 。 (4)转基因安全性问题不容忽视，为防止抗性基因通过基因漂移扩散到杂草，可以考虑的解决方案是 （写两点）。 19．角蛋白酶能降解角蛋白，在饲料工业中具有广阔的应用前景。某实验小组将角蛋白酶基因（KerA）导人大肠杆菌中，获得了能高效表达角蛋白酶的工程菌，下图为含KerA基因的外源DNA和质粒，EcoR I、BamH I、Sal I、Xho I均为限制酶，其切割位点如图所示。Kanr、Tcr分别为卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因。请回答下列相关问题：    (1)据图可知，构建重组质粒时选用的工具酶包括 和DNA连接酶，这些工具酶作用的化学键 （填“相同”或“不同”）。 (2)利用PCR技术扩增KerA基因时，需根据其两端序列设计引物。若KerA两端部分序列为一5'AATGGA……ATTCTC-3'，则需要设计的一对引物序列是 ，若一个KerA基因扩增了4次，则需要 个引物，同时含两种引物的DNA分子所占的比例为 ，KerA基因扩增过程可以在PCR仪中自动完成，完成以后，常采用 来鉴定PCR的产物。 (3)将构建的重组质粒导入大肠杆菌时，需使用 处理大肠杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。将目的基因导入大肠杆菌时，常出现三种情况：未转化的细菌、含空载体（普通质粒）的细菌、含重组质粒的细菌。可在添加有 的培养基中进行初步筛选，能在该培养基上生长的是 。 (4)转基因技术除了在微生物领域取得广泛的成果，在动植物领域也取得了巨大的成果。下列有关转基因技术的叙述，正确的是 。 ①我国对农业转基因生物实行了标识制度 ②只要有证据表明转基因产品有害，就应该禁止转基因技术的应用 ③转基因技术本身是中性的，应理性看待该技术 ④转基因植物的基因来自自然界，不会产生安全性问题 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 答案解析 1．A 【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分微生物往往连在一起生长， 随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；（2） 稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀，A错误； B、甲图中的接种方法为稀释涂布平板法，采用的工具是涂布器，涂布前要将沾有少量酒精的涂布器引燃、灼烧，冷却后才能将菌液涂布均匀，B正确； C、乙中除第一次外，第二次以及以后的连续划线的起点均是上一次划线的末端（末端的菌种数目更少）， 这样能使菌种的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细胞繁殖而来的菌落，C正确； D、利用平板划线法接种时需要蘸取菌液1次，乙培养基中有5个划线区域，蘸取菌液之前以及每次划线后均需要灼烧灭菌，一共需要灼烧接种环6次，D正确。 故选A。 2．C 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、杂交瘤细胞无需抗原刺激就能产生单克隆抗体，双杂交瘤细胞也一样，并非受到CD87和CD3两种抗原刺激后才产生双特异性抗体，A错误； B、双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，说明是在液体培养基中培养，而琼脂是制作固体培养基的凝固剂，不需要加入，B错误； C、CD87是癌细胞膜上受体蛋白，CD3激活后能促进T细胞免疫效力，双特异性单克隆抗体一端与癌细胞上CD87结合，一端与T细胞上CD3结合，能使T细胞更精准接触并杀伤癌细胞，C正确； D、HAT选择培养基是用于筛选融合成功的杂交瘤细胞，而将两株不同杂交瘤细胞融合后，不能再用HAT选择培养基筛选双杂交瘤细胞，D错误。 故选C。 3．A 【分析】1、PCR的原理是DNA双链复制，步骤包括高温变性、复性、延伸。该过程需要耐高温的DNA聚合酶催化，需要四种游离的脱氧核苷酸做原料。 2、分析图示可知：表示基因工程中获取突变基因的过程，引物的一个碱基在不影响与模板链整体配对的前提下不与目的基因配对，再利用PCR技术实现了目的基因的定点诱变。该技术原理是碱基互补配对原则。 【详解】A、在PCR反应体系中不需要解旋酶，A错误； B、第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA只有2个，而子代DNA有23=8个，故含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4，B正确； C、引物中设计两种限制酶识别位点，可以配合载体的限制酶识别位点，帮助目的基因定向定点插入运载体，避免发生自身环化，C正确； D、复性温度过高会导致引物不能与模板牢固结合，PCR扩增效率下降，D正确。 故选A。 4．B 【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全(滞后效应、过敏源、营养成分改变)、生物安全(对生物多样性的影响)、环境安全(对生态系统稳定性的影响)。 【详解】A、将目的基因导入农作物的叶绿体基因组，可以有效防止基因污染，因为花粉中几乎不含有细胞质基因，进而可避免目的基因进入到近缘物种中，A正确； B、基因编辑技术存在安全风险，我们不反对试管婴儿技术，但滥用设计试管婴儿技术设计婴儿性别，不符合生物技术的安全与伦理规范，B错误； C、生物武器是指有意识地利用微生物、毒素、昆虫侵袭敌人的军队、人口、农作物或者牲畜等目标，以达到战争目的的一类武器，有致病能力强、攻击范围广等特点，应严格禁止，C正确； D、生殖性克隆涉及细胞核移植技术，中国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验，D正确。 故选B。 5．B 【分析】微生物接种的两种常见的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、蛋白胨中含有丰富的营养成分，主要为细菌提供氮源、碳源和维生素等，A正确； B、若薄层变浑浊，这表明A菌能够在平板上生长繁殖，使得平板上细菌数量增多而变浑浊，B错误； C、将含菌量较高的湖泊水样稀释涂布于浑浊薄层上，这样可以保证在平板上形成单个菌落，便于分离出有溶菌特性的细菌，C正确； D、由于A菌会被溶解，培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围不会出现菌体（菌体被破坏），会出现透明的溶菌圈，D正确。 故选B。 6．C 【分析】动物细胞核移植技术的一般步骤：①采集卵母细胞，体外培育到MⅡ期，并进行去核操作；②将供体细胞注入去核的卵母细胞；③通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚；④用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程；⑤将胚胎移入受体（代孕母动物）体内，并发育成与供体遗传物质基本相同的个体。 【详解】A、可用电刺激、Ca2+载体、乙醇或蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，A错误； B、从1号收集的卵母细胞需体外培养到M Ⅱ期再利用显微操作进行去核处理，这里的核是指染色体-纺锤体复合物，B错误； C、由图可知，为防止免疫排斥，在去细胞核时需敲出CMAH基因和β4GalNT2基因，由此可知二者可能是抗原决定基因，C正确； D、胚胎移植前需用孕激素对3号进行同期发情处理，需要用促性腺激素对1号进行超数排卵处理，D错误。 故选C。 7．C 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、使用氯化钙处理大肠杆菌，可使其处于感受态，提高转化效率，即更多的大肠杆菌能吸收质粒，无论吸收的是含目的基因的重组质粒（可能形成白色菌落）还是未重组的质粒K（形成蓝色菌落），都可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数，A正确； B、由于仅含卡那霉素，未添加X-gal，无论导入的是重组质粒还是空白质粒，因不含X-gal，无法产生蓝色物质，故生长出的菌落均为白色，B正确； C、筛选平板中长出的白色菌落，可能是导入了重组质粒（含目的基因），但也可能是虽然导入了质粒但目的基因没有成功表达目标蛋白，不能仅仅因为是白色菌落就判定为表达目标蛋白的菌株，C错误； D、若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌，因为自身环化的质粒K中β - 半乳糖苷酶基因完整，能表达活性β - 半乳糖苷酶，分解X - gal形成蓝色菌落，D正确。 故选C。 8．B 【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。 【详解】A、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入，A错误； B、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前，根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测， 设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，B正确； C、收集胚胎后要先进行质量检查，才能进行移植，C错误； D、进行胚胎移植时，代孕个体不需要具有优良的遗传性状，D错误。 故选B。 9．D 【分析】统计菌落数目的方法： （1）显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。 （2）间接计数法（活菌计数法） ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数；③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。 【详解】A、配制好的培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌；由题干信息分析可知，该实验的目的是分离和纯化高效分解石油的细菌，故步骤③培养基为选择培养基，培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是培养基中以石油为唯一碳源，A正确； B、平板冷却后需要倒置，目的有两个：一是防止皿盖上的水珠落回培养基造成污染；二是防止培养基中的水分过快挥发，B正确； C、稀释涂布平板法统计的是活菌数目，常采用稀释涂布平板法对石油分解菌进行分离和计数，C正确； D、将1mL样品稀释100倍在3个平板上分别接种0.1mL稀释液；经适当培养后3个平板上的菌落数分别为46、58和52，据此可得出每升样品中的活菌数为（46+58+52）÷3÷0.1×1000×100=5.2×107（个），D错误。 故选D。 10．D 【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、原癌基因和抑癌基因是人体的正常基因，原癌基因和抑癌基因发生突变可能导致人体细胞癌变，AFB诱发原癌基因和抑癌基因突变可能导致细胞癌变，A错误； B、制备AFB单克隆抗体需要骨髓瘤细胞和经过免疫的B淋巴细胞融合获得杂种细胞，B错误； C、AFB单克隆抗体只能识别抗原，不能使靶细胞裂解死亡，C错误； D、阳性的杂交瘤细胞能产生特定的抗体，且能无限增殖，故阳性的杂交瘤细胞通过在体外大规模培养可获得大量单克隆抗体，D正确。 故选D。 11．C 【分析】农杆菌转化法的原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上； 【详解】A、农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力，但通过人工改造用该方法也可将目的基因导入单子叶植物，A正确； B、构建表达载体时需要使用限制酶和DNA连接酶，前者被称为基因的剪刀，后者被称为基因针线，B正确； C、构建表达载体时应将耐盐基因插入到T-DNA序列之中，因为T-DNA是可转移的DNA，能将目的基因与受体细胞的染色体整合到一起，C错误； D、利用农杆菌转化法可将耐盐基因整合到烟草细胞染色体DNA中，因为农杆菌质粒中含有T-DNA，D正确。 故选C。 12．B 【分析】分析题图可知，对植株A的花粉经过离体培养得到的植株①单倍体植株，而后对该单倍体幼苗经秋水仙素处理得到的植物②是纯合二倍体，该过程属于单倍体育种；植株③的获得采用了植物组织培养技术，该植株的获得利用了诱变育种方法；植株④采用了植物组织培养技术，属于细胞工程育种；植株⑤的培育采用了植物体细胞杂交技术。 【详解】A、单倍体育种包括花药离体培养和秋水仙素处理两个环节，对植株A（杂合子Dd）的花粉（D或d）经过离体培养得到的植株①为单倍体植株（D或d），秋水仙素处理单倍体植株①，获得的植株②（DD或dd）为纯合子，A错误； B、植株⑤植物体细胞杂交技术打破了生殖隔离，实现了远缘杂交，通过植物体细胞杂交技术能克服远缘杂交的不亲和性，B正确； C、诱导原生质体融合可以采用化学法、物理法，但灭活的病毒用于诱导动物细胞融合，C错误； D、植株A的花粉粒是D或d，秋水仙素处理得到植株②（DD或dd），植株④是通过植物组织培养获得的，其基因型为Dd，故植株②④与植株A基因型相同的概率分别是0、1，D错误。 故选B。 13．B 【分析】DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 【详解】A、图中“DNA的粗提取和鉴定”的正确的实验操作顺序是③破碎细胞→②获取含DNA的滤液→①DNA析出→④DNA的鉴定，A正确； B、图④用到的 NaCl溶液浓度为2mol/L，其目的是溶解DNA，B正确； C、图①的原理是DNA不溶于酒精，而某些蛋白质可溶于酒精，这样可以进一步纯化DNA，C错误； D、图④操作后加入二苯胺试剂充分振荡，经过沸水浴加热可观察到颜色变蓝，D错误。 故选B。 14．C 【分析】由图可知，2转基因抗虫棉和棉田杂草6和7均含有转基因成分。转基因抗虫棉是指棉花细胞染色体上整合有外源抗虫基因的棉花品种。抗虫基因通常为来源于苏云金芽孢杆菌的Bt基因。 【详解】A、空白对照是为了消除或减少实验误差，提高实验结果的准确性和可靠性；未加入DNA模板得到的电泳结果是空白实验，作为空白对照，A正确； B、根据杂草6和7含有转基因成分可以推测，杂草6和7可能与抗虫棉的亲缘关系较近，获得了转基因特性，B正确； C、由题图可知，棉田杂草（6号和7号）含有转基因成分，校园杂草不含有转基因成分，但不能说明两者存在生殖隔离，C错误； D、转基因成分进入杂草内，可能导致杂草获得转基因特性，可能会引发生态问题，D正确。 故选C。 15．B 【分析】啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。 【详解】A、用赤霉素处理大麦，可诱导α-淀粉酶相关基因的表达，促进α-淀粉酶的合成，进而使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶，A正确； B、焙烤可以杀死大麦种子的胚，但不使淀粉酶失活，没有进行灭菌，B错误； C、糖浆经蒸煮，其作用是终止酶的进一步作用，并对糖浆灭菌、冷却后再接种酵母菌进行发酵，防止高温杀死菌种，C正确； D、蒸煮过程中可以产生一些风味组分，同时高温能使酶失活，终止酶的进一步作用，D正确。 故选B。 16． 发酵过程中产生较多的CO2，如果泡菜坛装得太满，发酵液可能会溢出坛外。另外，泡菜坛装得太满，会使盐水不太容易完全浸没菜料，从而导致坛内菜料变质腐烂。泡菜坛留有一定的空间，也更方便拿取泡菜 保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境 可能是食盐浓度过高、发酵温度过低 发酵初期，乳酸菌数量和乳酸含量都比较少，而由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量逐渐增加；发酵后期，由于硝酸盐还原菌的活动受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，所以亚硝酸盐含量下降 不是 增加乳酸菌数量，加速乳酸的产生 【详解】在泡菜发酵初期，由蔬菜表面带入的大肠杆菌、酵母菌等较为活跃，它们可进行发酵，发酵过程中产生较多的CO2，如果泡菜坛装得太满，发酵液可能会溢出坛外。另外，泡菜坛装得太满，会使盐水不太容易完全浸没菜料，从而导致坛内菜料变质腐烂。泡菜坛留有一定的空间，也更方便拿取泡菜。 乳酸菌为厌氧菌，用水密封泡菜坛的目的是保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。 制作的泡菜“咸而不酸”可能的原因是可能是食盐浓度过高（乳酸菌失水过多活性降低）、发酵温度过低导致泡菜未能正常发酵。 发酵初期，乳酸菌数量和乳酸含量都比较少，而由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量逐渐增加；发酵后期，由于硝酸盐还原菌的活动受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，所以亚硝酸盐含量下降。 泡菜发酵时间并不是越长越好，泡菜的发酵时间长，亚硝酸盐含量低，但是发酵时间过长会产生其他有害物质；泡菜发酵时间过长，乳酸含量过高，口味不佳。 加入陈泡菜液的作用是增加乳酸菌数量，加速乳酸的产生，从而缩短发酵时间。 17．(1) HCG（或人绒毛膜促性腺激素） 无限增殖 灭活病毒 (2)杂交瘤细胞具有S途径可以进行DNA合成，瘤细胞的DNA合成被阻断，B淋巴细胞不能连续增殖 (3) 克隆化培养、抗体检测 既能大量增殖又能分泌所需抗体（或HCG抗体） 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再通过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】（1）在抗HCG单克隆抗体制备过程中，注射物质X的目的是获得能产生抗HCG抗体的B淋巴细胞，因此物质X是HCG（或人绒毛膜促性腺激素）。Y细胞是骨髓瘤细胞，该技术主要利用了Y细胞无限增殖的特点。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，其中，不同于植物体细胞杂交的融合方法是灭活病毒诱导法。 （2）氨基嘌呤能阻断D途径，在HAT培养基中加入氨基嘌呤后，B细胞只存在S途径，但不能连续增殖，因此B淋巴细胞和B淋巴细胞的融合细胞在培养基存活一段时间后死亡；骨髓瘤细胞的DNA合成途径被阻断，骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞因无法合成DNA，也不能存活。而杂交瘤细胞既有B淋巴细胞的S途径进行DNA合成，又有骨髓瘤细胞无限增殖的能力，因此可以在培养基中存活下来。 （3）在单克隆抗体制备过程中，有两次筛选：第一次筛选是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次培养是通过克隆化培养和抗体检测，筛选出既能无限增殖又能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 18．(1)分离 (2) 三 人工去雄 气候异常 一对同源染色体 抗虫：不抗虫=3：1 (3) 基因座位 1/2 (4)将抗虫、抗除草剂基因导入线粒体，避免通过花粉扩散；将花粉致死或不育基因和抗性基因紧密连锁，使含有抗性基因的花粉致死或不育 【分析】基因自由组合定律的实质：控制不同性状的遗传因子的分离和组合是互不干扰的；在形成配子时，决定同一性状的成对的遗传因子彼此分离，决定不同性状的遗传因子自由组合。 【详解】（1）抗虫水稻甲自交，后代性状分离比为3：1，推测可能导入了一个抗虫基因，该抗虫性状的遗传遵循孟德尔的分离定律。 （2）导入两个相同的抗虫基因，在染色体上的位置可能有3种，分别是两个抗虫基因在同一条染色体上、在一对同源染色体上、在非同源染色体上。 ①水稻雌雄同花，花小且多，人工杂交时去雄非常困难。光温敏感型雄性不育水稻在气候异常时会发生育性混乱，需要精准控制温度和日照时间。 ②若两个抗虫基因位于一对同源染色体，则和不抗虫光温敏雄性不育的水稻进行杂交，后代全为抗虫水稻。若两个抗虫基因位于非同源染色体，则符合自由组合定律，后代的表型及比例为抗虫：不抗虫=3：1。 （3）①基因在染色体上所在的位置称为基因座位。根据S1、S2自交后代比例，抗虫基因和抗除草剂基因的位置如下 ②S1自交子代植株喷施适量的除草剂，去除不抗除草剂的品种，则存活的植株基因型为DdTt：ddTT=2：1，让存活植株再自交，得到的子代群体中不抗虫抗除草剂的个体占1/2。 （4）抗性基因可通过花粉扩散造成基因漂移，可通过将抗虫、抗除草剂基因导入线粒体，避免通过花粉扩散，或将花粉致死或不育基因和抗性基因紧密连锁，使含有抗性基因的花粉致死或不育加以解决。 19．(1) BamH I、Xho I 相同 (2) 引物I5'-AATGGA-3'，引物Ⅱ5'-GAGAAT-3' 30 7/8 琼脂糖凝胶电泳 (3) Ca2+ 四环素 含空载体（普通质粒）的细菌、含重组质粒的细菌 (4)①③ 【分析】基因工程技术的基本步骤: 1、目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 2、基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 3、将目的基因导入受体细胞∶根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 4、目的基因的检测与鉴定: (1)分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。 (2)个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】（1）Sal I会破坏KerA基因，因此获取KerA基因时不能用限制酶Sal I进行切割；为了防止目的基因和载体切割后自身环化、不定向连接，应该选用两种限制酶进行切割，可以选择限制酶BamH I和Xho I或限制酶EcoR I和Xho I，若选择限制酶EcoR I和Xho I会破坏质粒上的两个标记基因，因此不能选用该组限制酶；限制酶和DNA连接酶作用的化学键相同，都是磷酸二酯键。 （2）使用PCR技术扩增目的基因时需要一对特异性的引物，引物能与目的基因两端的核苷酸序列碱基互补配对，子链延伸时是从引物的5'端向3'端延伸，若KerA两端部分序列为-5'AATGGA……ATTCTC-3'，利用PCR技术扩增KerA基因，根据其两端序列，则需要设计的一对引物序列是引物I5'-AATGGA-3'，引物Ⅱ5'-GAGAAT-3'。利用PCR技术扩增目的基因时，扩增4次共产生24=16个DNA分子，16个DNA分子共具有32条链，其中有2条链不含有引物，因此一个KerA基因扩增4次，则需要32-2=30个引物。这16个DNA分子中，只有2个DNA分子各含有一种引物，因此一个KerA基因扩增4次，同时含两种引物的DNA分子所占的比例为1-2/16=7/8。常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物。 （3）将构建的重组质粒导入大肠杆菌时，需使用Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。将目的基因导入大肠杆菌时，常出现三种情况：未转化的细菌、含空载体（普通质粒）的细菌、含重组质粒的细菌。由于选用的限制酶是BamH I、Xho I，所以含有该重组质粒的细菌在添加四环素的培养基中能生长，而含空载体（普通质粒）的细菌也含有四环素抗性基因，二者都可在添加有四环素的培养基中生长。 （4）①我国对农业转基因生物实行了标识制度，为保障转基因生物安全提供了重要的技术支撑，①正确； ②我们应持有的正确做法是趋利避害，不能因噎废食，②错误； ③转基因作为一项技术，本身是中性的，面对转基因技术的利弊，我们不能人云亦云，应理性看待该技术，③正确； ④转基因植物的基因来自自然界，也可能产生安全性问题，④错误。 故选①③。 $$