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微专题6
分子机制控制细胞周期
1.细胞周期调控蛋白
⑤MPF的周期蛋白
①周期蛋白的合成CDK:周
分解,而CDK成分
在S期后期开始.
期蛋白依
再循环利用
G,期完成
赖激酶
MPF:M期
④在后期
促进因子
MPF的周
期蛋白开
②周期蛋
始分解,
白与CDR
使M期结
细整CDK
蛋白结合
束,细胞
成MPF,
进人G期
MPF
当足够多
的MPF分
③MPF使多种蛋白质磷酸化而启动
子积累,
有丝分裂,其活性在中期最高
细胞得以
通过G,细
胞检验点
细胞开始
有丝分裂
2.细胞周期检验点
G,检验点
检验DNA
G,检验点:
是否损伤
又称有丝
生长因子
分裂检验
是否具备
点,检验
营养物质
DNA是否
是否充足
M检验点:纺锤体组
正确复制
装检验点,检验染色
体是否正确排列
3.细胞周期同步化
(Q)营养限制性培养,如:降低培养基血清含量。
(2)秋水仙素阻断法。
(3)DNA合成双阻断法的原理:利用TR可以抑制DNA合成,而不影响其他时期细胞的运
转,最终可将细胞群阻断在S期或G1S交界处,使细胞同步化。
DNA合成双阻断法的过程:
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A.处于对数生长期的细胞。B.第一次加入TdR,所有处于S期的细胞立即被抑制,其他细
胞运行到G1S期交界处被抑制。C将TdR洗脱,解除抑制,被抑制的细胞沿细胞周期运行。
D.在解除抑制的细胞到达G1期终点前,第二次加入TR并继续培养,所有的细胞被抑制在
G1/S期交界处。
[例1]细胞周期可分为间期和分裂期@M期),间期又分为DNA合成前期(G1期)、DNA合成
期(S期)、DNA合成后期(G2期。如表所示为体外培养的某种细胞的细胞周期各阶段所需时
间(单位:小时),若在细胞的培养液中加入过量的DNA合成抑制剂,则()
细胞周期
G
G2
M
合计
时长
10
>
3.5
1.5
22
AM期的全部细胞需要11.5小时才能达到G1期和S期的交界处
B.G2期的细胞数月将保持不变
C.至少22小时之后,所有的细胞才能都停留在G1期和S期的交界处
D.加入过量的DNA合成抑制剂之前,处于S期的细胞数目将是最多的
答案:A
解析:题中加入过量DNA合成抑制剂,抑制了S期的DNA复制,需要11.5小时M期(1.5
小时)十G1期(10小时)小M期全部细胞才能到达G1期和S期交界处,A正确:由于细胞的培
养液中加入过量的DNA合成抑制剂,所以细胞停止在S期之前,G2期细胞会逐渐减少,B
错误:由于G2期细胞到G1期和S期的交界处所爵时问最长,所以15小时后,大部分细胞
停留在G1期和S期的交界处,还有部分处于S期的细胞,C错误:由图表可以观察到,细
胞周期中G1期的时长是最长的,则处于G,期的细胞占细胞周期的比例最大,所以加入过量
的DNA合成抑制剂之前,处于G1期的细胞数量将是最多的,D错误。
[例2]细胞周期的调控关键在分裂间期。有2个起决定作用的控制点,从G,期进入S期和
从G2期进入M期。这2个转变过程都是由一
种称为成熟促进因子QMPF)的蛋白质复合体所触发的。组成PF的是两种蛋白:cdc2的激酶
和细胞周期蛋白(cyelin)。细胞周期蛋白有2种:S一cyclin和M一cyclin。其调控过程如图所
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示,下列说法错误的是(
MPF触发系列酵促反
应,导致有丝分裂
M一cyelin与ele2结合
M-cyelin解
形成MP
月
无活性
无活Eclr2
S一evelin与
S-eyelin所销
d2结合
形成MPF
PF触发系列酵促反
应,导致DNA合成
A.M一cyclin与cdc2结合发挥作用导致细胞进入有丝分裂过程
B.细胞周期循环往复的过程中需要核糖体不断地合成细胞周期蛋白
C.cdc2可以反复起作用,所以细胞周期过程中不需要重新合成
D.受精卵分裂时PF转化的速度明显快于造血干细胞
答案:C
解析:据图分析,M一cyclin和cdc2结合成具活性的MPP会触发系列酶促反应,使细胞从
G2期进入M期,导致细胞进入有丝分裂过程,A正确;从图中可看出,细胞周期循环往复
的过程中需不断地合成细胞周期蛋白,蛋白质的合成需要核糖体的参与,B正确:cdc2可以
反复起作用,但是蛋白质需要不断地更新,所以细胞周期过程中需要重新合成,C错误;从
G1期进入S期和从G2期进入M期,这2个转变过程都是由MP℉的蛋白质复合体所触发的,
受精卵分裂速度快于造血干细胞,所以受精卵分裂时MPF转化的速度明显快于造血干细胞,
D正确。
[例3](2020江苏高考改编)细胞周期可分为分裂间期和分裂期M期),根据DNA合成情况,
分裂间期又分为G1期、S期和G2期。为了保证细胞周期的正常运转,细胞自身存在着一系
列监控系统(检验点),对细胞周期的过程是否发生异常加以检测,部分检验点如图所示。只
有当相应的过程正常完成,细胞周期才能进入下一个阶段运行。请据图回答下列问题:
检验点5
检脸点4
险验点3
检验点1
检验点2
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(1)与G1期细胞相比,G2期细胞中染色体及核DNA数量的变化是
(2)细胞有丝分裂的重要意义在于通过
保持亲子代细胞之
间的遗传稳定性。图中检验点1、2和3的作用在于检验DNA分子是否
(填序号:①
损伤和修复、②完成复制):检验发生分离的染色体是否正确到达细胞两极,从而决定细胞质
是否分裂的检验点是
(3)细胞癌变与细胞周期调控异常有关,癌细胞的主要特征是
有些
癌症采用放射性治疗效果较好,放疗前用药物使癌细胞同步化,治疗效果会更好。诱导细胞
同步化的方法主要有两种:DNA合成阻断法、秋水仙素阻断法。前者可用药物特异性抑制
DNA合成,主要激活检验点
,将癌细胞阻滞在S期:后者可用秋水仙碱抑制
的形成,主要激活检验点
答案:(1)染色体数不变,核DNA数加倍
(2)染色体正确复制和平均分配①②检验点5
(3)细胞无限增殖2纺锤体4
解析:(1)分裂间期分为G1期、S期和G2期,G1期为DNA合成前期(完成相关RNA和蛋白
质合成),S期为DNA合成期(完成DNA复制),G2期为DNA合成后期,所以G2期与G1期
相比,染色体数不变,核DNA数加倍。
(2)检验点1、2和3分别分布在G1期结束处、S期和G2期结束处,其作用在于检验DNA分
子是否损伤、修复和完成复制。分离的染色体正确到达细胞两极发生在分裂期QM期)的后期,
所以决定细胞质是否分裂的检验点是检验点5。
(3)DNA合成发生在S期,药物特异性抑制DNA合成,主要激活检验点2,可将癌细胞阻滞
在S期:秋水仙碱作用于正在分裂的细胞,能够抑制纺锤体的形成,纺锤体的形成发生在分
裂期的前期,因此应主要激活检验点4。
[例4细胞周期受到一系列分子的精确调控,调控异常会引起细胞增殖异常,从而导致肿瘤
的发生。S蛋白与肿瘤的发生发展密切相关,为研究$蛋白对肿瘤细胞有丝分裂是否具有调
控作用,实验人员做了以下探索:
(I)获得能表达融合蛋白(GFP-H2B)的人宫颈癌Hela)细胞:
染色体(质)的主要成分是
和蛋白质,HB是染色体中的一种蛋白;GFP是一种绿色
荧光蛋白(利用荧光显微镜可以观察活组胞中GFP发出的荧光)。
将含融合基因的
导入Hela细胞,使其能表达GFP一HB,用于连续观察活细胞中
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从而判断细胞所处的时期,进而得出分裂各时期持续的时间。
(2)干扰癌细胞中S蛋白的表达:
将Hla一GFP一HB细胞接种在细胞培养板的2个孔中,实验组加入能与S基因mRNA互补
配对的sRNA,对照组应加入
:24
h后,检测S蛋白的含量,结果如图。实验结果表明:
对照组实验组
S蛋白
Tubulin
注:Tlim在各知胞中表达童移定
(3)Hela细胞的同步化处理:
将(②)中的两组细胞进行如下图所示的处理。
阳断1
解除
阻斯口
M G
M G
M G2
M Ga
图b
图e
图d
一:表示细胞分布的时期
G:DNA复制前期
S:DNA复制期G:DNA复解后期M:分裂期
阻断【:培养在含有过量的TdR(DNA复制抑制剂)的培养液中,培养时间不短于(G2十M+
G)的时间总和,使细胞停留在S期和GS期交界处:
解除:更换正常的新鲜培养液,培养的时间应控制在
范围之间:
阻断Ⅱ:处理与阻断I相同。
经过以上处理后,所有细胞都停留在细胞周期的某一时刻,请用“T”在图中标出,从而
实现细胞周期的同步化。
(4)活细胞成像,测定细胞分裂期的时间:
对上述同步化处理的两组细胞放入正常培养液中培养7,再用荧光显微镜对各组细胞的有丝
分裂期进程进行图像采集,5min采集一次图像,部分结果如下:
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核膜破裂
中期开始后期开始
B
D
图中A细胞处于
期,D细胞发生的主要变化是
由图可知,
由此表明S蛋白的功能
是
(⑤)请你提出一个进一步研究的课题:
答案:(I)DNA表达载体染色体存在状态
(2)碱基数目相同但不能与S蛋白mRNA互补配对的RNA(或无关的RNA)实验组中的s基
因的表达干扰成功
(3)大于S,小于(G2+M+G)
(4)前着丝粒分裂,姐妹染色单体分离从前期到中期持续时间实验组比对照组长对细胞
周期有调控作用,能明显缩短前期到中期的时间
(⑤)S蛋白调控细胞周期的机理(或利用S蛋白研究抗肿瘤的靶向药物或利用S蛋白对细胞周期
的调控作用,抑制肿瘤生长的研究或探究$蛋白治疗癌症的途径)
解析:(2)干扰癌细胞中S蛋白的表达:将Hla一GFP-HB细胞接种在细胞培养板的2个孔
中,实验组加入能与S基因mRNA互补配对的sRNA,对照组应加入碱基数目相同但不能与
S蛋白mRNA互补配对的RNA,24h后,检测S蛋白的含量,实验结果表明,实验组没有S
蛋白的电泳条带,对照组有S蛋白的电泳条带,说明实验组中的S基因的表达干扰成功。
(3)Hla细胞的同步化处理:阻断I:培养在含有过量的TdR(DNA复制抑制剂)的培养液中,
培养时问不短于(G2+M十G)的时间总和,使细胞停留在S期和G1/S期交界处:
解除:培养时间大于S,保证S期的细胞进入分裂期,小于(G2十M十G),确保细胞不会再
次进入S期这样使所有细胞都不进入S期。
阻断Ⅱ:处理与阻断I相同。
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经过以上处理后,所有细胞都停留在细胞周期的GS期,如答案图。
(4)图中A细胞核膜解体,因此属于有丝分裂的前期,D细胞是有丝分裂后期,发生的主要变
化是着丝粒分裂,姐妹染色单体分离:由图中染色体随着时间的变化可知,从前期到中期,
实验组持续时间比对照组的长,由此表明S蛋白对细胞周期具有调控作用,能明显缩短前期
到中期的时间。
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