专题14 细胞工程-【好题汇编】2025年高考生物三模试题分类汇编（新高考通用）

专题14 细胞工程 考点概览 考点01 植物细胞工程 考点02 动物细胞工程 考点03 胚胎工程 植物细胞工程考点01 一、单选题 1．（2025·山西·三模）紫杉醇是一种具有抗癌活性的化合物，紫杉醇的工厂化生产流程为：红豆杉器官→愈伤组织→悬浮细胞培养→筛选稳定高产紫杉醇的细胞群→利用搅拌式生物反应器进行培养→提取紫杉醇。下列叙述正确的是（　　） A．红豆杉幼嫩器官易被诱导形成愈伤组织，该过程不会发生基因的选择性表达 B．一般用果胶酶和纤维素酶处理愈伤组织，获得原生质体后再进行悬浮细胞培养 C．生产次生代谢产物紫杉醇的过程中，利用了植物细胞具有全能性的原理 D．利用搅拌式生物反应器培养，有利于细胞进行有氧呼吸和充分利用营养物质 【答案】D 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，其过程是为，离体的植物组织、器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。 【详解】A、红豆杉幼嫩器官被诱导形成愈伤组织的过程是脱分化，该过程有基因的选择性表达，细胞从已分化状态转变为未分化状态，需要特定基因表达来调控，A错误； B、用果胶酶和纤维素酶处理愈伤组织，目的是分解植物细胞之间的胞间层，获得分散的植物细胞，再进行悬浮细胞培养，B错误； C、生产次生代谢产物紫杉醇，只是利用植物细胞增殖来生产代谢产物，不需要发育成完整植株，没有利用植物细胞全能性原理，C错误； D、搅拌式生物反应器进行培养，可使培养液中氧气分布更均匀，有利于细胞有氧呼吸，同时能让细胞与营养物质充分接触，充分利用营养物质，D正确。 故选D。 2．（2025·山西·三模）我国科研人员以高产、抗病性弱的小麦细胞（鲁麦22）和抗逆性强、营养高的燕麦细胞（白燕2号）为实验材料，通过优化原生质体制备、融合等流程，获得了杂种小麦新品系。下列分析错误的是（　　） A．鲁麦22和白燕2号原生质体制备前应去除细胞壁 B．聚乙二醇、高Ca2+—高pH溶液均能促进原生质体融合 C．诱导融合后的细胞即为杂种小麦细胞 D．杂种小麦细胞可能具有高产、优质、抗逆性强等优势 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。 【详解】A、鲁麦22和白燕2号原生质体制备前，需先用纤维素酶和果胶酶去除两种细胞的细胞壁，A正确； B、诱导原生质体融合的方法有聚乙二醇融合法、高Ca2+-高pH融合法等，B正确； C、诱导融合后的细胞存在多种类型，还需要经过筛选才能获得符合生产需求的杂种小麦细胞，C错误； D、根据题干信息可知，杂种小麦细胞可能具有高产、优质、抗逆性强等优势，D正确。 故选C。 3．（2025·甘肃白银·三模）睡茄内酯是催眠睡茄（茄科）产生的次生代谢物，具有重要的药用价值。科研人员利用植物细胞悬浮培养生物反应器培养催眠睡茄细胞以大量获得睡茄内酯。下列叙述正确的是（    ） A．该培养过程体现了细胞的全能性 B．适度搅拌有利于供应 C．该培养过程中会出现接触抑制现象 D．睡茄内酯是催眠睡茄生长所必需的 【答案】B 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，其过程是为，离体的植物组织、器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。 【详解】A、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能，而该培养过程只是诱导催眠睡茄细胞脱分化形成愈伤组织，并进行大量增殖，该过程不能体现细胞的全能性，A错误； B、适度搅拌有利于细胞悬浮和供应氧气，从而提高细胞对培养液中营养物质的利用率，进而提高产物量，B正确； C、接触抑制现象是指在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖，而该培养过程中植物细胞处于悬浮状态，不会出现细胞贴壁现象，也就不会出现接触抑制现象，C错误； D、睡茄内酯是催眠睡茄的次生代谢物，次生代谢不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或器官中且在一定的环境和时间条件下才进行，而初生代谢是催眠睡茄生长和生存所必需的代谢活动，初生代谢物有糖类、脂质、蛋白质和核酸等，D错误。 故选B。 4．（2025·山东泰安·三模）在不同纬度、海拔、气候和不同土质条件下，植物体内次生代谢物含量有很大差异。例如，金鸡纳树皮中产生奎宁，而在雨季土壤湿度高时金鸡纳树皮不产奎宁。若通过植物组织培养技术生产奎宁，下列说法正确的是（    ） A．奎宁是金鸡纳生长和生存所必需的一种代谢活动的产物 B．植物组织培养过程中，对外植体用酒精消毒后立即用清水清洗 C．接种了外植体的培养基中会先后发生脱分化和再分化 D．植物组织培养过程中有可能出现奎宁分泌量增多的突变体 【答案】D 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，诱导其生成完整植株的技术。 【详解】A、由题意可知，奎宁属于次生代谢物，不是金鸡纳生长和生存所必需的，A错误； B、植物组织培养过程中，对外植体用酒精消毒后立即用无菌水清洗，B错误； C、接种外植体的培养基中发生脱分化后，需要更换培养基进行再分化，C错误； D、基因突变具有不定向性，植物组织培养过程中细胞不断分裂，有可能发生基因突变而出现奎宁分泌量增多的突变体，D正确。 故选D。 5．（2025·山东滨州·二模）关于植物组织培养和动物细胞培养过程，下列说法正确的是（    ） A．培养基都需要进行灭菌处理并需要定期更换 B．应用的培养基都属于固体培养基且需要加入糖类 C．二者都在完全密封的条件下进行且对温度、pH和渗透压有要求 D．培养过程都体现了细胞的全能性且存在基因的选择性表达 【答案】A 【分析】1、植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；生长素和细胞分裂素能促进细胞分裂分化，在培养的不同时期对两者的比例会有不同要求，在再分化过程中，生长素高，促进根的分化，细胞分裂素比例高，促进芽的分化。植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。   2、动物细胞培养的条件：①无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素，定期更换培养液，以清除代谢废物；②营养物质：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；③温度和pH；④气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）5%的CO2（维持培养液的pH）。   【详解】A、植物组织培养与动物细胞培养都需要无菌的环境，培养基都需要进行灭菌处理并需要定期更换，A正确；   B、植物组织培养的培养基是固体培养基，动物细胞培养需要液体培养基，B错误；   C、植物组织培养和动物细胞培养的培养基中的细胞需要进行有氧呼吸，不能完全密封，C错误；   D、植物组织培养最终形成完整植物体，体现了植物细胞全能性，动物细胞培养没有体现全能性，D错误。   故选A。 6．（2025·安徽阜阳·三模）紫草素是从我国传统中药植物紫草中提取出来的一种脂溶性萘醌类化合物。多项研究表明紫草素具有抗炎、免疫抑制作用。下图为紫草素的提取流程图，有关叙述错误的是（    ） 紫草外植体愈伤组织单个细胞高产细胞群紫草素 A．①过程中需要在培养基中加入一定比例的植物激素才能获得愈伤组织 B．紫草素能够从愈伤组织细胞中获得，因此判断紫草素是次生代谢产物 C．在工厂化生产紫草素的过程中，无须培养出完整的紫草植株 D．该流程主要通过促进细胞增殖来提高紫草素的产量 【答案】B 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织、器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。 【详解】A、①(脱分化)过程中，需要在培养基中加入一定比例的生长素和细胞分裂素等植物激素才能获得愈伤组织，A正确； B、在工程技术操作中，可以通过设计让愈伤组织生产次生代谢产物，但愈伤组织中产生的物质不一定是次生代谢产物，B错误； C、根据题干信息可知，在工厂化生产紫草素的过程中，只需要把细胞培养到愈伤组织阶段，再扩大培养即可，C正确； D、依据题图可以发现，该流程主要通过促进细胞增殖来提高紫草素的产量，D正确。 故选B。 7．（2025·四川乐山·三模）某研究小组进行微型月季的快速繁殖研究，结果如表所示。 流程 最佳措施或最适培养基 ①外植体腋芽消毒 75%乙醇浸泡30s+5%NaClO浸泡6min ②诱导出丛生苗 MS+3.0mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA ③丛生苗的扩增 MS+2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA ④丛生苗的生根 1/2MS+0.25mg·L-1IBA+0.25mg·L-1NAA 注：从生苗为丛状生长的幼苗，IBA（吲哚丁酸）为生长素类物质 下列叙述错误的是（    ） A．流程①的效果受消毒剂浓度、消毒时间等因素的影响 B．本实验中流程②无需经过脱分化形成愈伤组织的阶段 C．与流程②相比，流程③培养基中NAA与IBA比值更大 D．适当提高流程④培养基中IBA浓度更利于从生苗生根 【答案】C 【分析】植物组织培养过程中，激素的比例影响其分化的方向，当细胞分裂素与生长素比例相当时，产生愈伤组织，生长素浓度较高时，诱导根的形成，细胞分裂素浓度较高时，诱导芽的形成。 【详解】A、流程①中，消毒效果不仅取决于消毒剂浓度，还取决于消毒时间和消毒剂种类，A正确； B、流程②不需要经过脱分化形成愈伤组织的阶段，直接经腋芽直接分化为丛生苗，B正确； C、流程②中需要诱导出丛生苗，而流程③中是扩增丛生苗，故与流程②相比，流程③培养基中NAA与IBA比值更小，C错误； D、与流程③相比，提高流程④培养基的IBA浓度有利于从生苗的生根，D正确。 故选C。 8．（2025·陕西咸阳·三模）下图是利用甲、乙两种植物的各自优势，通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的实验流程图。下列相关叙述错误的是（    ） A．科研人员用蜗牛消化道提取液进行a处理来制备原生质体，说明该提取液中含有胰蛋白酶 B．b是诱导融合后的杂种细胞，其细胞内的染色体数目比任何一方亲本细胞中染色体数目多 C．具有耐盐性状的c需要先移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土 D．在高盐环境中进行d选择获得的目的植株，其形态特征、生理特性等表型与双亲存在差异 【答案】A 【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。 【详解】A、利用蜗牛消化酶制备植物原生质体时，主要利用其所含纤维素酶和果胶酶来降解细胞壁，并非利用胰蛋白酶，A错误； B、b是诱导融合后的杂种细胞，其细胞内的染色体数目应该是两种亲本细胞染色体数目的总和，因此比任何一方亲本细胞中染色体数目多，B正确； C、具有耐盐性状的c需要先移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，这是为了确保植株在移植过程中能够适应环境并健康成长，C正确； D、在高盐环境中进行d选择获得的目的植株，其形态特征、生理特性等表型与双亲存在差异，这是因为杂种植株结合了两种亲本的特性，并且在高盐环境中进行了选择，D正确。 故选A。 9．（2025·重庆·三模）图为利用植物组织培养技术繁殖菊花的示意图。相关叙述正确的是（    ） A．只有培养脱毒菊花试管苗才需要对分离的外植体进行消毒处理 B．再分化阶段提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根 C．再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 D．刚培育出的试管苗弱小，应携带培养基炼苗后再移栽至花盆 【答案】B 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、植物组培过程均需无毒无菌，均要对分离的外植体进行消毒处理，A错误； B、再分化阶段提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根，B正确； C、再分化过程，愈伤组织细胞分化时进行有丝分裂，可能会发生基因突变，不会有基因重组，C错误； D、刚培育出的试管苗弱小，抗病能力差，携带培养基炼苗易被微生物污染，需要用流水清洗掉根部的培养基，D错误。 故选B。 10．（2025·江苏·三模）紫花苜蓿（2n=32）是利用最广泛的豆科牧草，但青饲易造成家畜臌胀病。百脉根（2n=24）富含缩合单宁，能防止反刍动物臌胀病的发生。为了改良苜蓿饲用品质，研究人员采用植物体细胞杂交技术培育抗臌胀病型苜蓿，过程如下图。相关叙述正确的是（    ）    A．过程①需选择合适的酶并控制酶的浓度，可调控渗透压防止原生质体吸水涨破 B．过程②降低了紫花苜蓿和百脉根原生质体的活性，其目的是降低杂种愈伤组织细胞的活力 C．与单一PEG诱导融合相比，过程③使用PEG-高Ca2+-高pH法可提高原生质体融合的特异性 D．过程⑤获得的杂种植物功效有差异的可能原因有染色体组成不同、遗传物质表达差异等 【答案】D 【分析】植物体细胞杂交技术： 1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 2、过程：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，过程①需选择纤维素酶和果胶酶，也需要控制酶浓度，且由于原生质体没有细胞壁的支持和保护，需要调控原生质体存在的溶液的渗透压防止原生质体吸水涨破，A错误； B、IOA抑制细胞有氧呼吸第一阶段，R-6G抑制线粒体的功能，可知过程②降低了紫花苜蓿和百脉根原生质体的活性，并未降低杂种愈伤组织细胞的活力，B错误； C、PEG-高 Ca²⁺‑高 pH 法的主要作用是提高融合率，并不能提高原生质体融合的特异性，C错误； D、杂种细胞经愈伤组织再分化为杂种植株后，可能因染色体组成的差异（如部分丢失）、基因表达水平不同等原因，导致所获得的杂种植株在抗臌胀病等方面的性状表现不尽相同，D正确。 故选D。 11．（2025·江苏·三模）发菜既能光合自养又能异养，其分泌的胞外多糖具有增强免疫抗癌等功效。为了给生产发菜多糖提供理论基础，研究人员发明了两阶段摇瓶培养法能快速生产发菜多糖，第一阶段采用光合自养培养获得足量的发菜细胞，第二阶段采用混合营养培养（光合自养+异养培养）合成发菜多糖。相关叙述错误的是（    ） A．采用摇瓶培养的目的是增加培养液中的溶氧量与营养物质的利用 B．与第二阶段培养相比，第一阶段培养不易被杂菌污染，有利于发菜细胞增殖 C．第二阶段培养中，光合作用和葡萄糖氧化代谢可相互影响促进多糖的合成 D．发菜分泌的胞外多糖属于发菜的次级代谢产物，可通过工厂化生产获得 【答案】A 【分析】次级代谢产物是指生物生长到一定阶段后通过次级代谢合成的分子结构十分复杂、对该生物无明显生理功能，或并非是该生物生长和繁殖所必需的小分子物质，如抗生素、毒素、激素、色素等。 【详解】A、在第一阶段（光合自养培养），发菜通过光合作用释放氧气，此时培养液中的溶氧量已较高，无需通过摇瓶额外增加。摇瓶的主要目的是保持细胞悬浮状态，使细胞均匀分布并充分接触光照和营养物质，而非单纯增加溶氧，在第二阶段（混合营养培养），虽然异养代谢（葡萄糖氧化）需要氧气，但题目中未明确摇瓶的主要目的是针对溶氧，A错误； B、第一阶段培养基以无机物为主（光合自养），杂菌难以在低有机营养条件下繁殖，因此污染风险低，B正确； C、混合营养阶段，光合作用提供ATP和碳源（二氧化碳固定），葡萄糖氧化提供额外能量和中间产物，二者协同促进多糖合成，C正确； D、发菜分泌的胞外多糖具有增强免疫抗癌等功效，属于次级代谢产物，可通过工厂化生产获得，D正确。 故选A。 12．（2025·浙江温州·三模）研究小组探究不同浓度植物生长调节剂对离体榛子带芽茎段的腋芽诱导和生根诱导的影响，腋芽增殖倍数反映腋芽生长情况，实验结果如表所示。 腋芽诱导MS培养基+蔗糖30 生根诱导1/2MS培养基+蔗糖15 6-BA浓度（mg/L） NAA浓度（mg/L） 腋芽增殖倍数 NAA浓度（mg/L） 生根率（%） 愈伤组织情况（mg/L） 0 0 0 0.08 88.5 无愈伤组织 0 1.5 0 0.1 94.2 无愈伤组织 0.1 0 1.1 0.12 75.5 无愈伤组织 0.1 1.5 3.2 0.14 70.8 愈伤组织较多 据表分析，下列叙述错误的是（    ） A．为降低杂菌污染，可加入适宜的抗生素 B．培养基中含有6-BA可明显提高腋芽增殖倍数 C．生根诱导时较高浓度的NAA可促进细胞脱分化 D．提高培养基的渗透压有利于诱导榛子茎段生根 【答案】D 【分析】植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 【详解】A、抗生素可以杀菌，为降低杂菌污染，可加入适宜的抗生素，A正确； B、NAA浓度为0时，培养基中含有6-BA可明显提高腋芽增殖倍数，当6-BA浓度为0.1mg/L时，腋芽增殖倍数可从0→1.1，B正确； C、愈伤组织是脱分化形成的，结合表格可知，随着NAA浓度的增大，愈伤组织形成从无到较多，说明生根诱导时较高浓度的NAA可促进细胞脱分化，C正确； D、与腋芽诱导MS培养基+蔗糖30g⋅L−1相比，生根培养基的营养物质为一半，有利于生根，说明降低营养物质浓度有利于诱导榛子茎段生根，D错误。 故选D。 13．（2025·四川内江·三模）白菜和甘蓝为两种常见的二倍体蔬菜。我国科学家用植物体细胞杂交技术成功地培育出了“白菜—甘蓝”杂种植株，培育过程如下图所示，其中①~⑤表示过程，a~f表示相关结构或植株。下列相关叙述错误的是（　　） A．①过程可用蜗牛消化道提取液处理，②过程可用聚乙二醇诱导 B．④过程一般不需要光照，⑤过程需要给予适当时间和强度的光照 C．⑤过程诱导生根时，应适当提高培养基中细胞分裂素的比例 D．杂种植物具有两种生物的遗传物质，理论上能产生可育的后代 【答案】C 【分析】分析题图：过程①是通过酶解法去除细胞壁获得原生质体a和b，过程②通过物理或化学方法诱导原生质体融合成c，过程③是再生细胞壁形成杂种细胞d，过程④是脱分化过程形成愈伤组织e，过程⑤是再分化生成完整植株。 【详解】A、去除细胞壁常用的酶液（如蜗牛酶）含有纤维素酶、果胶酶，处理后可得到原生质体；②原生质体融合一般用PEG（聚乙二醇）诱导，A正确； B、④为脱分化过程不需要光照，⑤为再分化过程需要给予适当时间和强度的光照，有利于叶绿素的合成，B正确； C、⑤过程诱导生根时，应适当提高培养基中生长素的比例，促进根的生成，C错误； D、杂种植物具有两种生物的遗传物质，属于四倍体，理论上能产生可育的后代，D正确。 故选C。 14．（2025·青海西宁·三模）研究人员通过植物细胞工程技术利用野生型马铃薯（A）和抗青枯病的茄子（B）进行体细胞杂交，培育抗青枯病马铃薯，实验流程如图。在进行“处理1”时，有时会使用到蜗牛消化道提取液。下列相关叙述错误的是（　　） A．蜗牛消化道提取液中可能含有果胶酶和纤维素酶 B．获得的A、B两种原生质体在清水中进行诱导融合 C．“甲→乙”过程和“乙→试管苗”过程需要更换培养基 D．为确定目的植株是否符合育种要求，还需对其进行青枯病抗性检测 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，“处理1”是利用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁。据题意可推知蜗牛消化道提取液中可能含有纤维素酶和果胶酶，A正确； B、获得的两种原生质体要在等渗溶液中进行融合，防止原生质体过度吸水或者失水，B错误； C、由图可知“甲→乙”过程是脱分化，“乙→试管苗”过程是再分化，由于诱导愈伤组织的形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同，所以“甲→乙”过程和“乙→试管苗”过程需要更换培养基，C正确； D、该技术的目的是培养抗青枯病马铃薯，为确定目的植株是否符合育种要求，还需进行个体生物学水平的检测，即需要对其进行青枯病抗性检测，D正确。 故选B。 15．（2025·福建泉州·三模）紫杉醇具有高抗癌活性。生产紫杉醇传统的方法是从红豆杉的树皮和树叶提取。但野生红豆杉是濒危植物，这种方法不利于红豆杉的保护。为兼顾保护和利用红豆杉，下列措施中，获取紫杉醇的最合理的是（　　） A．建立自然保护区，从自然凋落的枝叶中提取紫杉醇 B．推广人工种植红豆杉，直接提取树皮中的紫杉醇 C．利用植物细胞培养技术，工厂化生产紫杉醇 D．建立种子库，保存高产紫杉醇的红豆杉种质资源 【答案】C 【分析】利用植物组织培养获得愈伤组织，抑制细胞分化，促进细胞分裂，并进行大规模悬浮培养，从细胞培养液中提取紫杉醇。 【详解】A、生产紫杉醇传统的方法是从红豆杉的树皮和树叶提取，从自然凋落的枝叶中提取紫杉醇，含量较低，A错误； B、推广人工种植红豆杉，直接提取树皮中的紫杉醇，不利于红豆杉的保护，B错误； C、利用植物细胞培养技术，工厂化生产紫杉醇，可以在保护红豆杉的前提下获得紫杉醇，C正确； D、保存高产紫杉醇的红豆杉种质资源没有提取紫杉醇，D错误。 故选C。 16．（2025·黑龙江齐齐哈尔·三模）青蒿素是治疗疟疾的特效药物，主要从黄花蒿的茎叶中提取，图是利用黄花蒿叶片大量繁殖黄花蒿植株的部分过程。下列分析正确的是（　　） A．青蒿叶片切成小块前需要用体积分数95%的酒精和次氯酸钠进行消毒处理 B．青蒿素是黄花蒿生长和生存所必需的物质，属于植物体产生的初生代谢物 C．①过程表示诱导细胞脱分化形成愈伤组织的过程，期间一般不需要光照 D．与①过程相比，降低②培养基中生长素与细胞分裂素比值有利于生根 【答案】C 【分析】植物组织培养过程：外植体（离体的植物细胞、组织或器官）→愈伤组织→胚状体→新植体。 【详解】A、消毒需要用体积分数70%的酒精和次氯酸钠进行处理，A错误； B、青蒿素属于植物体产生的次生代谢物，一般在特定的组织或器官中，并在一定的环境和时间条件下才产生，B错误； C、①过程分别表示脱分化形成愈伤组织的过程，形成愈伤组织的过程一般不需要光照，C正确； D、植物激素中生长素和细胞分裂素是启动脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向，②培养过程是再分化促进根形成过程，生长素/细胞分裂素的比值应升高，D错误。 故选C。 17．（2025·广东惠州·三模）研究人员利用杏鲍菇（具有双核，AA）和秀珍菇（具有单核，B）进行体细胞杂交，以期培养食用菌新品种，流程如图。已知异源融合子因异源基因相混合而获得新的遗传特性，表现出对亲株的拮抗作用，能够在培养基上观察到一条拮抗带。融合后的菌丝，在进行细胞分裂时，会形成一个喙状结构，而单核菌丝不会。 注：高温灭活使原生质体AA仅能生存而无法繁殖。 下列叙述正确的是（    ） A．可用灭活病毒诱导法诱导原生质体AA和原生质体B融合 B．促融后形成的融合菌株可能为AAAA、AAB、BB、AB C．步骤②中原生质体应在等渗溶液中进行培养并处理 D．若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带，步骤③应选择无喙状结构的菌丝 【答案】C 【分析】高温灭活使原生质体A仅能生存而无法繁殖，因此，培养基上不会有A的菌落。 【详解】A、灭活的病毒用于动物细胞的融合，不能用于原生质体AA和原生质体B融合，A错误； B、高温灭活使原生质体AA仅能生存而无法繁殖，因此不会形成AAAA、AA、AB的融合菌株，B错误； C、步骤②中原生质体应在等渗溶液中进行培养并处理，可以保证原生质体的活性，C正确； D、融合后的菌丝，在进行细胞分裂时，会形成一个喙状结构，而单核菌丝不会，因此若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带，步骤③应选择有喙状结构的菌丝，D错误。 故选C。 18．（2025·河南郑州·三模）萦草宁具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性，是世界上首例药用植物细胞工程产品，生产流程如下图所示，下列相关叙述错误的是（    ） 外植体→愈伤组织→单细胞→高产细胞株→ A．可使用酒精和次氯酸钠溶液对外植体进行消毒 B．诱导愈伤组织形成时通常需加入生长素和细胞分裂素 C．紫草宁是紫草的次生代谢产物，并不是紫草生长所必需的 D．外植体形成愈伤组织的过程不涉及基因的选择性表达 【答案】D 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。 【详解】A、进行植物组织培养时，需用酒精（体积分数70%）和次氯酸钠（5%）溶液对外植体进行消毒处理，A正确； B、愈伤组织的形成需要调节植物激素比例，生长素和细胞分裂素是常用激素，B正确； C、紫草宁属于次生代谢产物，这类物质对植物基本生长非必需，通常在特定阶段产生，C正确； D、外植体脱分化为愈伤组织的过程涉及细胞基因选择性表达（如关闭分化相关基因，激活分裂相关基因），D错误。 故选D。 19．（2025·贵州遵义·三模）紫杉醇是一种天然的抗癌药物，采用如图所示流程可提高紫杉醇生产的效率。下列相关叙述错误的是（　　）    A．紫杉醇是红豆杉细胞产生的次生代谢物 B．①为红豆杉外植体脱分化形成的愈伤组织 C．②过程利用胰蛋白酶将组织分散成单个细胞 D．真菌诱导因子可能增强紫杉醇合成酶基因的表达 【答案】C 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，其过程是：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。 【详解】A、次生代谢物是指生物生长到一定阶段后通过次生代谢合成的分子结构十分复杂、对该生物无明显生理功能，或并非是该生物生长和繁殖所必需的小分子有机化合物。紫杉醇是红豆杉细胞产生的次生代谢物，A正确； B、植物组织培养过程中，外植体（离体的植物组织、器官或细胞）经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织是一种高度液泡化的、无定形状态的薄壁细胞团。所以①为红豆杉外植体脱分化形成的愈伤组织，B正确； C、胰蛋白酶是用于动物细胞培养中将动物组织分散成单个细胞的酶，而植物细胞有细胞壁，②过程是将愈伤组织分散成单个细胞，通常使用纤维素酶和果胶酶，因为植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，C错误； D、真菌诱导因子能促使红豆杉细胞产生紫杉醇，可能是增强了紫杉醇合成酶基因的表达，从而使紫杉醇合成酶的合成量增加，进而促进紫杉醇的合成，D正确。 故选C。 20．（2025·福建三明·三模）铁皮石斛是珍贵中药材，野生资源稀缺，植物组织培养可用于铁皮石斛快速繁殖和脱毒。下列叙述正确的是（    ） A．铁皮石斛外植体应该用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒 B．选取幼嫩茎段为外植体时，接种时注意外植体不要倒插 C．利用铁皮石斛茎尖作为外植体，通过植物组织培养可获得抗毒苗 D．细胞分裂素与生长素的比值在生根培养基中比生芽培养基中更大 【答案】B 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、铁皮石斛外植体先用70%乙醇，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗，A错误； B、植物组织培养时，常需要诱导外植体生根发芽，故接种时要将外植体的形态学下端插入培养基中，即接种时注意外植体不要倒插，B正确； C、利用铁皮石斛茎尖作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗，因为茎尖中几乎不带毒，但不抗毒，C错误； D、细胞分裂素与生长素的比值在生根培养基中比生芽培养基中更小，因为生长素比例较高时能促进生根，D错误。 故选B。 21．（2025·广西·三模）如图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产次级代谢产物生物碱的实验流程。下列说法正确的是（    ）    A．过程①需要先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁形成原生质体 B．过程②属于再分化，受生长素和细胞分裂素比例的影响 C．培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量值大的PLBs D．生物碱不是铁皮石斛生长所必需的物质 【答案】D 【分析】在一定的激素和营养等条件的诱导下，外植体可脱分化形成愈伤组织。在脱分化过程中，植物细胞的分化程度逐渐降低，全能性逐渐升高。脱分化形成的愈伤组织由一些排列疏松而无规则，高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞组成。 【详解】A、过程①不需要去除细胞壁，A错误； B、PLBs类似愈伤组织，因此，图中过程①为脱分化形成PLBs，过程②为植物细胞培养过程，不属于再分化，B错误； C、该实验目的是要生产生物碱，故需要选择生物碱产量/细胞数量的值大的PLBs作为高产细胞系，C错误； D、生物碱是铁皮石斛的次生代谢物，不是细胞进行正常生命活动必需的物质，D正确。 故选D。 22．（2025·浙江·三模）某校学生在实验室用紫外线作为诱变剂，欲筛选抗盐突变体。下列操作不合理的是（　　） A．可用其他性状优良的品种，对其萌发的种子进行诱变 B．与处理个体相比，处理细胞或原生质体的突变率较高 C．对愈伤组织进行诱变，在高盐培养基中筛选存活细胞 D．随着紫外线强度的增大，获得突变体的概率逐渐增加 【答案】D 【分析】诱变育种一般选其他性状优良的品种进行诱变，使其发生基因突变，以期改良所需性状；利用细胞或原生质体培养可提高突变率。 【详解】A、对种子进行诱变处理后可能产生抗盐突变体，A正确； B、处理细胞或者原生质体的突变率高于处理个体的突变率，B正确； C、对愈伤组织进行诱变处理后，需要进行筛选出抗盐突变体，需要用高盐培养基进行筛选，存活下来的细胞才具有抗盐的特性，C正确； D、诱变过程需要选择合适诱变剂量，一定范围内提高紫外线强度可提高突变率，但过高会导致DNA和蛋白质等断裂导致细胞死亡，D错误。 故选D。 23．（2025·四川成都·三模）下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（    ） A．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 D．生长素与细胞分裂素比值低时有利于愈伤组织的形成 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交过程：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体，A错误； B、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞，得到原生质体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，故融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织，B正确； C、体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的遗传物质，只有1个细胞核，C错误； D、生长素与细胞分裂素比值低时有利于芽的分化，D错误。 故选B。 24．（2025·吉林长春·三模）许多植物病毒的衣壳蛋白和酶系统在高温（35—45℃）下会发生变性。在通过组织培养生产切花菊脱毒苗的过程中，常取高温处理后的切花菊茎尖分生区为外植体。下列叙述错误的是（    ） A．选取茎尖分生区为外植体是因为其中病毒含量低 B．高温处理的主要目的是使组织中的病毒失去活性 C．高温处理后的外植体接种前不需再进行消毒处理 D．再分化过程通常需要给予适当时间和强度的光照 【答案】C 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。 【详解】A、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，所以切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，A正确； B、高温处理的主要目的是使组织中的病毒失去活性，有利于获得脱毒苗，B正确； C、高温处理后的外植体接种前需再进行消毒处理，否则会引起杂菌污染，C错误； D、脱分化过程不需要光照条件，再分化过程通常需要给予适当时间和强度的光照，D正确。 故选C。 （2025·浙江嘉兴·三模）药用植物当归常用根入药，体内活性赤霉素（GA4）含量明显升高时，抽薹开花，根开始木质化，药用价值下降。研究人员利用植物快速繁殖技术培育了D1、D2两个品种，培育流程如图。D1在种植第二年春季高表达M酶基因，并抽薹开花；D2在种植第二年春季高表达N酶基因，继续营养生长。阅读材料完成下列小题：    25．下列关于当归快速繁殖过程的叙述，错误的是（    ） A．过程1一般需要对幼芽消毒 B．过程2一般需要给予光照 C．与过程2相比，过程3的培养基浓度较高 D．与过程3相比，过程4的环境湿度较低 26．当归体内有多种赤霉素，其中GA4具有生物活性。促进GA4合成的酶、药用价值较高的品种分别是（    ） A．N酶、D1 B．N酶、D2 C．M酶、D1 D．M酶、D2 【答案】25．C 26．D 【分析】赤霉素合成部位在幼芽，幼根和未成熟的种子。主要作用是促进细胞伸长，从而引起植株增高。促进细胞分裂与分化，促进种子萌发、植株开花和果实发育。 25．A、过程1是脱分化，一般需要对幼芽消毒，A正确； B、过程2是再分化，一般需要给予光照，B正确； C、组织培养中，从愈伤组织诱导丛芽（过程2）到长成试管苗（过程3）往往要降低培养基中植物激素等成分的浓度，C错误； D、试管苗移栽(过程4)时外界环境湿度通常低于试管内，D正确。 故选C。 26．D1是第二年春季高表达 M 酶基因，导 GA4不断合成、抽薹开花，根早期木质化，药用价值降低， D2是第二年春季高表达 N 酶基因，继续营养生长，根不易木质化，药用价值较高。可见，促进GA4 合成的酶是 M 酶，药用价值较高的品种是D2，D正确，ABC错误。 故选 D。 27．（2025·河南·三模）白菜的线粒体上具有控制其雄性不育的基因，科学家对白菜的原生质体用紫外线照射使其染色体失活，与甘蓝的原生质体融合，培育出47个个体，其中4个个体是雄性不育的甘蓝植株。下列相关叙述正确的是（    ） A．用紫外线照射白菜的原生质体时一定会导致白菜的核基因全部失活 B．可用纤维素酶和果胶酶处理白菜的下胚轴得到单个的完整细胞 C．采用PEG诱导原生质体融合时，得到的两两融合的杂种细胞有1种 D．将融合细胞培育为完整个体时，通常需要在培养液中添加葡萄糖为植物细胞供能 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。 【详解】A、据题干信息分析，该技术中47个个体只有4个个体是雄性不育的甘蓝植株，说明紫外线照射过程中不一定导致所有的染色体和核基因失活，A错误； B、纤维素酶和果胶酶处理白菜的下胚轴得到的是单个的原生质体，而不是完整的植物细胞，B错误； C、诱导原生质体融合后得到的两两融合细胞为3种，两两融合的杂种细胞是白菜和甘蓝的原生质体融合后培育的细胞，只有一种，C正确； D、植物组织培养过程中培养基中所用的糖通常是蔗糖，D错误。 故选C。 28．（2025·四川达州·三模）野天麻是一种名贵的药用植物，具有镇静、抗癫痫等作用，对神经系统疾病有很好的治疗效果，其主要活性成分是天麻素。利用植物细胞工程可以生产天麻素，相关过程如图所示。下列叙述正确的是（    ）    A．可以用野天麻幼嫩的茎段作为外植体，外植体插入培养基时方向可以颠倒 B．诱导愈伤组织的培养基中需要添加无机盐、维生素、蔗糖等物质，并置于黑暗中培养 C．诱导生根培养基与诱导生芽培养基相比较，需要提高培养基中细胞分裂素的占比 D．图中两种生产天麻素的途径均体现出植物细胞的全能性，其中途径②更加高效 【答案】B 【分析】 植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。 【详解】 A、接种时应注意外植体的方向，不能倒插，A错误； B、植物组织培养的培养基中需要添加无机盐、维生素、蔗糖等物质，诱导愈伤组织的过程中应该置于黑暗中培养，B正确； C、诱导生根培养基与诱导生芽培养基相比较，需要提高培养基中生长素的占比，C错误； D、途径②没有培养出完整植株，不能体现植物细胞的全能型，D错误。 故选B。 29．（2025·陕西商洛·三模）藿香长期种植会出现种质退化和容易感病的问题，研究人员对藿香进行辐射处理以获得性状优良的突变林，过程如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．过程①应选择分生组织、其分裂能力强，携带病毒少，甚至没有 B．过程②③④所用培养基添加的植物激素种类的比例不同 C．图中辐射处理不同阶段的组织或幼苗均会出现优良突变株 D．上述繁殖技术可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖 【答案】C 【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，主要包括脱分化和再分化两个步骤。 【详解】A、过程①是选择并接种外植体，过程①应选择分生组织、其分裂能力强，携带病毒少，甚至没有病毒，能够获得脱毒苗，A正确； B、②③④过程添加的植物激素种类相同，都主要是生长素和细胞分裂素，但浓度和比例不同，B正确； C、辐射处理 会使组织或幼苗发生不定向突变，不一定会出现优良突变株，C错误； D、上述繁殖技术属于无性生殖，可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，D正确。 故选C。 二、多选题 30．（2025·江西·三模）天然橡胶被誉为“黑色黄金”，花药离体培养是橡胶树育种的主要途径，基本流程如图。中国热科院为了提高橡胶树胚状体的数量，取培养35天后的愈伤组织2g，在不同浓度AgNO₃溶液的诱导作用下，统计各组胚状体总数，结果如表。下列分析错误的是（    ） AgNO₃浓度（mg·L⁻¹） 愈伤组织接种量（g） 胚状体总数（个） 0 2 4 2.5 2 13 5 2 35 10 2 21    A．花药离体培养要对花药进行灭菌，体现了植物生殖细胞的全能性 B．对普通橡胶树愈伤组织进行紫外线诱变处理，也可能获得高产橡胶树品种 C．探究 AgNO₃最适诱导浓度应在5~10 mg·L⁻¹之间设置更小梯度进行实验 D．诱导形成胚状体的培养基植物激素的比例与a试管中的培养基不同 【答案】AC 【分析】植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素与细胞分裂素比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。 【详解】A、花药离体培养要对花药进行消毒，不能灭菌，体现了植物生殖细胞的全能性，A错误； B、愈伤组织具有很强的分裂分化能力，对愈伤组织紫外线诱变处理，会发生基因突变，也可能获得高产橡胶树品种，B正确； C、AgNO₃浓度为5mg·L⁻¹时，胚状体总数最多为35个，为了探究诱导胚状体的AgNO₃最适浓度，可在2.5~10mg·L⁻¹之间设置更小浓度梯度进行实验，C错误； D、a试管中的培养基是诱导愈伤组织形成的培养基和诱导胚状体形成的培养基成分不同，主要体现在生长素和细胞分裂素的比例不同，D正确。 故选AC。 动物细胞工程考点02 一、单选题 1．（2025·甘肃天水·三模）研究发现，采用2次克隆来制备转基因克隆动物，无论在重构胚的融合率、发育率还是移植受体妊娠率方面均明显高于传统的体细胞核移植。如图为2次克隆的简易流程图。下列有关叙述正确的是（    ）    A．胎羊X、Y的性状均完全取决于甲羊的遗传物质 B．制备供体细胞前可用胰蛋白酶消化胎羊的组织 C．胎羊Y细胞中线粒体DNA只来源于丙羊 D．2次克隆的重构胚融合成功率高是因为胎羊细胞的分化程度高 【答案】B 【分析】1、动物细胞核移植：是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成一个新的个体。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。 2、动物体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。 【详解】A、胎羊X的细胞质由乙羊提供，胎羊Y的细胞质由丙羊提供，细胞质中含有部分遗传物质，因此胎羊X、Y的性状均主要取决于甲羊的遗传物质，也和乙、丙羊有关，A错误； B、制备供体细胞前可用胰蛋白酶消化胎羊的组织，胰蛋白酶的作用是消化动物细胞之间的胶原纤维，从而得到单个细胞，B正确； C、胎羊Y的形成是将胎羊X的体细胞注射到丙羊去核的卵母细胞中，因此胎羊Y细胞中线粒体DNA来源于丙羊和胎羊X，C错误； D、2次克隆的重构胚融合成功率高是因为胎羊细胞的分化程度低，细胞核的全能性相对容易表达，D错误。 故选B。 2．（2025·陕西咸阳·三模）科学家利用动物体细胞核移植（SCNT）技术成功克隆了一只存活到3岁的健康恒河猴ReTro。这是第一只活到成年的克隆恒河猴，标志着灵长类动物克隆技术取得了重大突破。下列叙述错误的是（    ） A．SCNT操作过程中注入受体细胞的可以是细胞核，也可以是细胞 B．可用物理或化学法激活重构胚，使其完成分裂和发育进程 C．恒河猴ReTro的性别是由卵母细胞的遗传物质决定的 D．SCNT技术在畜牧业、医药卫生以及其他领域有着广泛的应用前景 【答案】C 【分析】动物体细胞核移植技术和克隆动物的原理：已分化的动物细胞的细胞核具有全能性；哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。 【详解】A、注入受体细胞的可以是细胞核，为减少取核过程对细胞核的伤害也可以是注入整个供体细胞，A正确； B、可用物理（电刺激）或化学（Ca2+载体）方法激活受体细胞，使其完成分裂和发育，B正确； C、恒河猴ReTro的性别是由供核细胞的遗传物质决定的，C错误； D、SCNT技术在畜牧业（如繁殖优良品种的家畜）、医药卫生（如研究人类疾病模型）以及其他领域（如保护濒危物种、研究细胞分化和发育机制等）有着广泛的应用前景，D正确。 故选C。 3．（2025·甘肃白银·三模）北极狼起源于30万年前的冰河时期，世界首例体细胞克隆北极狼在北京诞生，这是保护与培育濒危物种的新尝试与重要突破，其技术流程如图所示，①②③代表部分过程。下列叙述正确的是（    ） A．过程①是利用显微操作法去除细胞DNA和中心体 B．过程②可以将供体细胞植入处理后的卵母细胞 C．过程③可用载体激活重构胚的发育 D．该技术说明北极狼和比格犬不存在生殖隔离 【答案】B 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【详解】A、过程①是去除卵母细胞的细胞核，利用显微操作法去除的是减数分裂Ⅱ中期的纺锤体一染色体复合物，A错误； B、从流程图可以看出，过程②的供体细胞可以不需要去核，实际上研究者通过实验不断摸索出对供体细胞和卵母细胞损伤较小的方法，即利用细胞膜具有一定流动性的特点，将供体细胞注入透明带内，通过PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法等方法，使供体细胞和去核卵母细胞的细胞膜融合，形成一个细胞，从而实现将供体细胞核注入去核卵母细胞的目的，B正确； C、过程③可以用物理或化学方法（如电刺激、 Ca2+ 载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）来激活重构胚的发育，C错误； D、不同物种之间一般不能相互交配，即使交配成功，也不能产生可育后代的现象叫作生殖隔离，而克隆北极狼利用的是动物体细胞核移植技术，属于无性生殖，因此无法确定北极狼和比格犬是否存在生殖隔离，D错误。 故选B。 （2025·天津滨海新·三模）阅读下列材料，完成下面小题。 腺相关病毒（AAV）是动物病毒中最简单的一类单链DNA病毒，可感染特定脑区特定神经细胞，并将基因整合到特定染色体上，当与腺病毒（ADV）同时感染时才能完成病毒的繁殖。 将M4基因或M3基因与绿色荧光蛋白基因（GFP）连接在特异性启动子后面，然后载入腺相关病毒（AAV）中；对小鼠进行转染，并进行药物相关实验。 在神经细胞中，钠离子的内流是动作电位去极化阶段的关键因素，可引发膜电位从静息状态（约-70mV）迅速上升至正值，从而触发神经冲动的传导；而氯离子的内流通常导致细胞膜超极化（膜电位进一步降低），抑制动作电位的产生，降低神经细胞的兴奋性。 4．下列培养基中，能用于腺相关病毒（AAV）培养的是（　　） A．动物细胞培养液+动物细胞+腺病毒 B．动物细胞培养液+动物细胞 C．LB液体培养基+大肠杆菌+腺病毒 D．LB液体培养基+大肠杆菌 5．利用AAV为载体，可实现对体内神经细胞的遗传改造。下列叙述错误的是（　　） A．与ADV相比，利用AAV做载体进行基因治疗安全性较高 B．体外扩增AAV病毒单链DNA 时加入的引物仅需一种 C．体外扩增DNA 所用的DNA 聚合酶能耐受90℃高温 D．可利用荧光显微镜观察鉴别神经细胞是否被遗传改造 6．药物CNO能与M3蛋白（Na⁺通道）、M4蛋白 （Cl⁻通道）特异性结合，并打开相应离子通道。下列叙述错误的是（　　） A．M3通道蛋白激活引起神经细胞膜电位变化 B．M4通道蛋白激活引起的神经细胞膜电位变化不能传导 C．利用药物CNO激活M3蛋白，可研究特定脑区域功能 D．利用药物CNO 激活M4 蛋白，不能研究特定脑区域功能 【答案】4．A 5．B 6．D 【分析】病毒属于非细胞生物，主要由核酸和蛋白质外壳构成，依赖活的宿主细胞才能完成生命活动。病毒的复制方式属于繁殖，自身只提供核酸作为模板，合成核酸和蛋白质的原料及酶等均有宿主细胞提供。 4．腺相关病毒（AAV）只能以动物细胞作为宿主细胞，而且与腺病毒（ADV）同时感染时才能完成病毒的繁殖。因此可以用动物细胞培养液+动物细胞+腺病毒（ADV）培养腺相关病毒（AAV），A正确，BCD错误。 故选A。 5．A、由题意“腺相关病毒（AAV）可感染特定脑区特定神经细胞，并将基因整合到特定染色体上，当与腺病毒（ADV）同时感染时才能完成病毒的繁殖”可知，与ADV相比，利用AAV做载体进行基因治疗安全性较高，A正确； B、AAV的遗传物质是一类单链DNA病毒，以此链为模板扩增时需要一种引物，再以合成的子链为模板合成DNA（才与AAV的DNA链相同），需要另一种引物，故体外扩增AAV病毒单链DNA 时加入的引物2种，B错误； C、PCR技术中常用的耐高温的DNA聚合酶能耐受90℃以上的高温，C正确； D、如果对神经细胞进行了遗传改造，往往会导入带有标记基因（如荧光蛋白基因等）的基因，所以可利用荧光显微镜观察鉴别神经细胞是否被遗传改造，D正确； 故选B。 6．A、M3通道蛋白为Na+通道，Na+通道激活会引起Na+内流，Na⁺通道打开，Na⁺内流，会引起神经细胞膜电位变化，由外正内负变为外负内正，A 正确； B、M4蛋白为Cl⁻通道，Cl⁻通道激活会引起Cl⁻内流，导致细胞膜超极化（膜电位进一步降低），抑制动作电位的产生，降低神经细胞的兴奋性，因此，M4通道蛋白激活引起的神经细胞膜电位变化不能传导，B正确； C、利用药物CNO激活M3蛋白，可以影响神经细胞的膜电位变化等，进而研究特定脑区域功能，C正确； D、利用药物CNO激活M4蛋白，可以改变与M4蛋白相关的生理功能等，能用于研究特定脑区域功能，D错误。 故选D。 7．（2025·山东泰安·三模）CTLA4分子（含有多个抗原决定簇）通常表达于T细胞表面，能够与抗原呈递细胞上的受体高亲和力结合，产生抑制T细胞活化的信号，减少细胞因子产生，降低机体抗肿瘤免疫反应。使用CTLA4单克隆抗体可以解除CTLA4对T细胞的抑制作用，提高T淋巴细胞对肿瘤应答水平，增强机体免疫细胞的抗肿瘤效应。下列有关CTLA4单克隆抗体制备的说法，正确的是（    ） A．用CTLA4分子对小鼠进行免疫，从脾中得到一种B淋巴细胞 B．用96孔板培养和筛选时，每一个孔中需接种多个杂交瘤细胞 C．将细胞因子与CTLA4单克隆抗体结合使用可增强抗肿瘤效应 D．体外培养杂交瘤细胞时，培养箱中加入CO₂的目的是刺激细胞呼吸 【答案】C 【分析】单克隆抗体的制备过程：①给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，然后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；②诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合；③利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；④进行克隆化培养和专一抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤用培养基培养筛选出来的杂交瘤细胞或将其注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、CTLA4分子含有多个抗原决定簇，用CTLA4分子对小鼠进行免疫，从脾中得到多种B淋巴细胞，A错误； B、用96孔板培养和筛选时，每一个孔中尽量接种一个杂交瘤细胞，B错误； C、细胞因子可促进细胞毒性T细胞增殖分化，将细胞因子与CTLA4单克隆抗体结合使用可增强抗肿瘤效应，C正确； D、体外培养杂交瘤细胞时，培养箱中加入CO2的目的是维持培养液的PH，D错误。 故选C。 8．（2025·湖南湘西·三模）肝癌为临床上常见的恶性肿瘤之一，研究发现，诸多基因包含原癌基因和抑癌基因，可能与肝癌的发生、细胞增殖和转移密切相关。在某些因素影响下，原癌基因和抑癌基因表达异常，致使正常细胞癌变。下列叙述说法正确的是（    ） A．癌细胞体外培养时需要加入胰蛋白酶处理，解除接触抑制 B．原癌基因和抑癌基因发生突变就会引起细胞癌变 C．癌细胞与正常细胞相比，细胞周期更短，并且容易分散转移 D．肝癌的发生只与原癌基因和抑癌基因突变有关 【答案】C 【分析】1、细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变，其中原癌基因负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的过程，抑癌基因主要是阻止细胞不正常的增殖； 2、癌细胞的主要特征：无限增殖、形态结构发生显著改变、细胞表面发生变化，细胞膜上的糖蛋白等物质减少，易转移。 【详解】A、癌细胞具有无限增殖的特点，不存在接触抑制现象，所以癌细胞体外培养时不需要加入胰蛋白酶处理来解除接触抑制，A错误； B、细胞癌变是多个原癌基因和抑癌基因发生累积性突变的结果，并非原癌基因和抑癌基因发生一次突变就会引起细胞癌变，B错误； C、癌细胞代谢旺盛，与正常细胞相比，细胞周期更短；癌细胞表面的糖蛋白等物质减少，使得细胞间的黏着性降低，容易分散转移，C正确； D、肝癌的发生与原癌基因和抑癌基因突变有关，但不是只与它们有关，还可能与其他因素如环境因素等有关，D错误。 故选C。 9．（2025·山西晋中·三模）新生物学技术的涌现，正深刻改变着我们的生产与生活。下列相关叙述错误的是（　　） A．利用保幼激素干扰害虫的正常发育，可解决某些仓储害虫的防治问题 B．利用溶菌酶溶解细菌的细胞壁，适量添加可以延长乳制品的保质期 C．利用PCR技术检测微生物的DNA，可筛查食品中是否存在致病菌 D．利用动物细胞培养技术培养肌细胞，可替代传统畜牧业生产肉类 【答案】D 【分析】在从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起彼此限制了生长和增殖。因此，在进行细胞培养时，首先要对新鲜取材的动物组织进行处理，或用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酬等处理一段时间，将组织分散成单个细胞。然后，用培养液将细胞制成细胞悬液，再将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内，置于适宜环境中进行原代培养。 【详解】A、利用保幼激素推迟作茧，可以干扰害虫的正常发育，解决某些仓储害虫的防治问题，A正确； B、利用溶菌酶溶解细菌的细胞壁，可以杀死食品中的细菌，适量添加可以延长乳制品的保质期，B正确； C、利用PCR技术检测微生物的DNA，根据DNA序列的特异性，可筛查食品中是否存在致病菌，C正确； D、利用动物细胞培养技术培养肌细胞，可以一定程度上用于肉类生产，但无法替代传统畜牧业生产，D错误。 故选D。 10．（2025·安徽合肥·三模）丙肝病毒是单链RNA病毒，利用丙肝病毒的抗原蛋白作为病原体制备抗体的过程如图所示。下列有关说法正确的是（    ） A．表面糖蛋白被破坏的灭活病毒能诱导Ⅱ中两种细胞融合 B．Ⅱ中特定杂交瘤细胞的培养过程中会出现接触抑制现象 C．Ⅰ制备的抗体比Ⅱ制备的抗体诊断丙肝病毒感染更精准 D．若丙肝病毒发生变异，  Ⅰ制备的抗体仍可能有治疗作用 【答案】D 【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体；诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）；单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；两次抗体检测：专一抗体检验阳性。 【详解】A、灭活病毒促进细胞融合是利用了病毒表面含有的糖蛋白和一些酶，使细胞膜上的蛋白质和脂质分子发生重排的特性，A错误； B、杂交瘤细胞在适宜条件下能无限增殖，不会出现接触抑制的现象，B错误； C、Ⅰ制备的抗体纯度低，因而比Ⅱ制备的抗体（纯度高）诊断丙肝病毒感染准确度更低，C错误； D、若丙肝病毒发生变异， Ⅰ制备的抗体没有经过筛选属于多克隆抗体，但仍可能有治疗作用，但治疗效果应该比较差，D正确。 故选D。 11．（2025·四川德阳·三模）单倍体胚胎干细胞取自孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞，具有极大的应用前景。下列叙述正确的是（　　） A．培养液中通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B．细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C．单倍体胚胎干细胞可取自孤雌或孤雄发育至囊胚中的任何一个细胞 D．单倍体胚胎干细胞通常不含等位基因，有利于研究隐性基因的功能 【答案】D 【分析】胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 【详解】A、动物细胞不能直接吸收蔗糖，因此动物细胞培养液中通常含有的糖类是葡萄糖，A错误； B、动物细胞培养中CO2的主要作用是维持培养液的pH，B错误； C、单倍体胚胎干细胞可取自于孤雌或孤雄发育至桑葚胚中任何一个细胞或囊胚的内细胞团的细胞，C错误； D、单倍体胚胎干细胞取自于孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞，其细胞中通常只有一个染色体组，因此不含等位基因，有利于研究隐性基因的功能，D正确。 故选D。 12．（2025·甘肃白银·三模）体细胞核移植时胚胎发育率低下的原因与胚胎染色体组蛋白甲基化修饰密切相关。BRG1是染色体重塑复合物，参与染色体组蛋白去甲基化。科学家对BRG1进行如下研究，发现猪核移植胚胎发育率显著提高。下列说法正确的是（    ） A．常用显微操作法去除由核膜包被的卵母细胞的细胞核 B．克隆猪的性别常需要取囊胚的滋养层细胞进行鉴定 C．染色体组蛋白发生去甲基化修饰后将有利于胚胎中相关基因的表达 D．猪成纤维细胞等应在CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 【答案】C 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微直接去除法还有人采用密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法。 【详解】A、常用显微操作法去除MⅡ期卵母细胞的细胞核，其实质是去除纺锤体—染色体复合物，MⅡ期的卵母细胞无核膜包被的细胞核，A错误； B、克隆猪是通过核移植技术获得的，其性别与供核个体的性别相同，无须鉴定，B错误； C、据题干和题图可知，猪成纤维细胞中导入BRG1基因后，猪核移植胚胎发育率显著提高，故推测染色体组蛋白发生去甲基化修饰后将有利于胚胎中相关基因的表达，C正确； D、猪成纤维细胞等应在CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液pH，D错误。 故选C。 13．（2025·山西晋城·三模）卵子细胞质中隐藏着某些神奇的因子，这些因子能使成熟体细胞的细胞核“返老还童”，并重新赋予其发育成完整个体的能力，过程如图a所示。将小鼠的胸腺细胞和胚胎干细胞、人成纤维细胞和胚胎干细胞相融合，发现融体细胞去核卵母细胞重组卵细胞合的杂合细胞也具有胚胎干细胞的特征，过程如图b所示。研究发现“年轻因子”可影响基因的甲基化修饰。下列相关说法错误的是（　　）    A．可用紫外线短时间照射卵母细胞，使其DNA变性，从而获得去核卵母细胞 B．卵母细胞的细胞质中的“年轻因子”可能会改变体细胞核基因的甲基化修饰，从而激活全能性相关基因的表达 C．胚胎干细胞的细胞质中也存在着某些“年轻因子”，能够帮助成熟体细胞实现“返老还童” D．图b过程获得的杂合细胞有四个染色体组，体细胞和胚胎干细胞中的全部基因在杂合细胞中均能表达 【答案】D 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。 【详解】A、紫外线短时间照射卵母细胞，可使 DNA 变性，抑制其发挥作用，从而获得去核卵母细胞，该方法可行，A正确； B、已知 “年轻因子” 可影响基因的甲基化修饰，卵母细胞的细胞质中的 “年轻因子” 可能通过改变体细胞核基因的甲基化修饰，激活全能性相关基因表达，使体细胞重新获得发育成完整个体的能力 ，B正确； C、从 “将小鼠的胸腺细胞和胚胎干细胞、人成纤维细胞和胚胎干细胞相融合，杂合细胞具有胚胎干细胞的特征” 可推测，胚胎干细胞的细胞质中存在 “年轻因子”，能帮助成熟体细胞 “返老还童” ，C正确； D、图b过程获得的融合成的杂合细胞有四个染色体组，由于基因的选择性表达，体细胞和胚胎干细胞中的全部基因在杂合细胞中不会都表达 ，D错误。 故选D。 14．（2025·广西·三模）我国科学家经过多年的反复试验，在2017年成功培育出体细胞克隆猴“中中”和“华华”，轰动全世界。体细胞克隆猴的培育流程如图，①、②、③表示不同的技术操作。为提高相关基因的表达，研究人员在重构胚中注入Kdm4d（组蛋白去甲基化酶基因）的mRNA，同时用TSA（组蛋白脱乙酰酶抑制剂）处理。下列相关叙述正确的是（    ）    A．操作②是对刚采集的卵母细胞进行去核处理，避免其核基因干扰实验结果 B．操作①用有活性的仙台病毒进行短暂处理，能使两种细胞混合培养时相互融合 C．操作③是胚胎移植，将胚胎移入受体母猴的体内后还需要对母猴进行妊娠检查 D．两种物质处理重构胚，能使组蛋白去甲基化或去乙酰化，有利于胚胎的发育 【答案】C 【分析】由图可知，操作①②是动物体细胞核移植技术，操作③是胚胎移植。 【详解】A、操作②包含卵母细胞的培养和去核两个步骤，刚采集的卵母细胞先要培养到MII期才能进行去核处理，去核是为了避免卵母细胞核基因对实验结果的干扰，A错误； B、灭活仙台病毒能使两种细胞混合培养时相互凝聚而诱导融合，是动物细胞融合常采用的方法，B错误； C、操作③是胚胎移植，移植后胚胎发育成功率并非百分之百，所以还需进行妊娠检查，C正确； D、重构胚中注入Kdm4d的mRNA，会通过翻译合成组蛋白去甲基化酶，该酶可使组蛋白去甲基化，用TSA处理重构胚，会使细胞中组蛋白脱乙酰酶无法发挥作用，进而使组蛋白处于乙酰化状态，根据题意，使用两种物质是为了提高相关基因的表达，故推测组蛋白的去甲基化或乙酰化，都能促进基因表达，有利于胚胎发育，D错误。 故选C。 15．（2025·河南周口·三模）2024至2025年，科研人员在开发成分明确的无血清培养基方面取得进展，提高了干细胞产品稳定性与安全性；同时利用重组蛋白和小分子化合物精细调节培养环境，提升了干细胞增殖效率和稳定性；此外，机器学习在诱导多能干细胞培养中的应用逐渐深入，可预测分化路径、优化诱导条件，AI驱动的自动化培养系统上线，有效提升了分化效率。下列叙述错误的是（    ） A．干细胞移植到患者体内可以分化为任何一种类型的细胞 B．使用无血清培养基的前提是明确细胞生长、增殖所需的生长因子等成分 C．自动化的移液换液可以减少细胞代谢物的积累对细胞自身造成的危害 D．除重组蛋白和小分子化合物外，外源基因也可以诱导多能干细胞 【答案】A 【分析】胚胎干细胞全能性最高，但分化能力需特定条件诱导；成体干细胞分化能力局限，但更易获取和定向诱导。 【详解】A、干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞，前者具有分化为任何一种类型细胞的能力，后者具有组织特异性，A错误； B、动物细胞培养时，因促进细胞生长和增殖的一些成分未知，所以培养液中要加入动物血清，而弄清楚这些成分，就可以使用无血清培养基，B正确； C、移液换液更新了培养液，可以防止细胞代谢物的积累对细胞自身造成危害，C正确； D、在体细胞中导入调节基因可以诱导多能干细胞，某些蛋白质和小分子化合物也能诱导多能干细胞，D正确。 故选A。 16．（2025·江苏·三模）发菜既能光合自养又能异养，其分泌的胞外多糖具有增强免疫抗癌等功效。为了给生产发菜多糖提供理论基础，研究人员发明了两阶段摇瓶培养法能快速生产发菜多糖，第一阶段采用光合自养培养获得足量的发菜细胞，第二阶段采用混合营养培养（光合自养+异养培养）合成发菜多糖。相关叙述错误的是（    ） A．采用摇瓶培养的目的是增加培养液中的溶氧量与营养物质的利用 B．与第二阶段培养相比，第一阶段培养不易被杂菌污染，有利于发菜细胞增殖 C．第二阶段培养中，光合作用和葡萄糖氧化代谢可相互影响促进多糖的合成 D．发菜分泌的胞外多糖属于发菜的次级代谢产物，可通过工厂化生产获得 【答案】A 【分析】次级代谢产物是指生物生长到一定阶段后通过次级代谢合成的分子结构十分复杂、对该生物无明显生理功能，或并非是该生物生长和繁殖所必需的小分子物质，如抗生素、毒素、激素、色素等。 【详解】A、在第一阶段（光合自养培养），发菜通过光合作用释放氧气，此时培养液中的溶氧量已较高，无需通过摇瓶额外增加。摇瓶的主要目的是保持细胞悬浮状态，使细胞均匀分布并充分接触光照和营养物质，而非单纯增加溶氧，在第二阶段（混合营养培养），虽然异养代谢（葡萄糖氧化）需要氧气，但题目中未明确摇瓶的主要目的是针对溶氧，A错误； B、第一阶段培养基以无机物为主（光合自养），杂菌难以在低有机营养条件下繁殖，因此污染风险低，B正确； C、混合营养阶段，光合作用提供ATP和碳源（二氧化碳固定），葡萄糖氧化提供额外能量和中间产物，二者协同促进多糖合成，C正确； D、发菜分泌的胞外多糖具有增强免疫抗癌等功效，属于次级代谢产物，可通过工厂化生产获得，D正确。 故选A。 17．（2025·河南·三模）分泌抗PEDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株已适应无血清培养，通过添加生长因子和细胞因子可维持正常的细胞生长与增殖。科研人员在培养体系中加入不同浓度的谷氨酰胺（0～10 mmol/mL），探究其对杂交瘤细胞生长的影响，结果如图所示。下列分析错误的是（    ） A．随着培养时间的延长，杂交瘤细胞会因为接触抑制而停止分裂 B．选择能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞需经过克隆化培养和抗体检测 C．在不添加谷氨酰胺的无血清培养条件下，杂交瘤细胞无法正常生长增殖 D．4d时，4 mmol/mL谷氨酰胺添加组的细胞密度最大，其增殖速度可能最快 【答案】A 【分析】动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 【详解】A、杂交瘤细胞具有无限增殖的能力，不会出现接触抑制的现象，A错误； B、在制备单克隆抗体过程中，要获得能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，需经过克隆化培养以得到大量单一细胞，再通过抗体检测筛选出能分泌所需抗体的细胞，B正确； C、由图可知，在不添加谷氨酰胺（0 mmol/mL谷氨酰胺组）时，随着培养天数增加，细胞密度一直维持在0，说明在不添加谷氨酰胺的无血清培养条件下，杂交瘤细胞无法正常生长增殖，C正确； D、由图可知，4d时，4 mmol/mL谷氨酰胺添加组的细胞密度最大，说明在该时间点该组细胞数量最多，其增殖速度可能最快，D正确。 故选A。 18．（2025·甘肃甘南·三模）动物细胞培养是细胞工程的基础。下列叙述正确的是（　　） A．制备的iPS细胞培养过程中通常会发生接触抑制而影响细胞增殖 B．将制备的单克隆抗体与药物结合，可增强抗体杀伤癌细胞的能力 C．从牛卵巢中采集的卵母细胞，可通过传代培养获得大量的卵细胞 D．克隆动物繁殖过程中，PEG可促进供体细胞核和卵细胞的融合 【答案】A 【分析】动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 【详解】A、iPS细胞类似胚胎干细胞，可以进行增殖，培养过程中通常会发生接触抑制而影响细胞增殖，A正确； B、单克隆抗体与药物结合后，单克隆抗体识别癌细胞，而药物对癌细胞才有杀伤作用，B错误； C、卵细胞是卵母细胞进行减数分裂产生的，而体外培养卵母细胞进行的是有丝分裂，故卵母细胞不能进行传代培养获得卵细胞，C错误； D、克隆动物繁殖过程中，PEG可促进供体细胞核和卵母细胞（不是卵细胞）的融合，D错误。 故选A。 19．（2025·湖南永州·三模）为研究供体细胞RNAm6A修饰（RNA的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者比较了猪骨髓间充质干细胞（甲组，属于多能干细胞）和猪胎儿成纤维细胞（乙组，属于高度分化的细胞）内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如下图。下列相关叙述正确的是（　　）    A．分化程度越高的细胞中RNAm6A修饰水平越高 B．核供体细胞的分化程度越低，核移植重构胚的发育效率越高 C．抑制重构胚的RNAm6A修饰水平，可提高早期胚胎的发育效率 D．该研究涉及动物细胞培养、细胞核移植和胚胎移植等操作技术 【答案】B 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。 【详解】A、从图中可知，甲组（多能干细胞，分化程度低）的RNAm⁶A修饰水平高于乙组（高度分化的细胞）。 这表明分化程度越高的细胞中RNAm⁶A修饰水平越低，A错误； B、观察图中数据，在卵裂期和囊胚期，甲组（分化程度低）作为核供体时重构胚的发育效率均高于乙组（分化程度高）。 由此可以得出核供体细胞的分化程度越低，核移植重构胚的发育效率越高，B正确； C、题干及图中仅展示了不同分化程度细胞的RNAm⁶A修饰水平以及对应的重构胚发育效率情况，并没有关于抑制重构胚的RNAm⁶A修饰水平对早期胚胎发育效率影响的相关信息。 所以无法得出抑制重构胚的RNAm⁶A修饰水平可提高早期胚胎发育效率的结论，C错误； D、该研究只是比较了不同细胞的RNAm⁶A修饰水平和作为核供体时重构胚的发育效率，未提及胚胎移植操作技术。 D错误。 故选B。 20．（2025·广西·三模）为了利用基因工程技术改造牙鲆（一种鱼类），科学家计划将构建好的载体转化至大肠杆菌内扩增，再将大肠杆菌中扩增的载体纯化后导入牙鲆细胞。此实验构建的重组质粒上包含目的基因和氨苄青霉素抗性基因。下列关于此实验的相关说法，错误的是（    ） A．为了避免外部杂菌污染培养基，接种过大肠杆菌的培养基应灭菌后进行培养 B．为了使牙鲆细胞在培养瓶中增殖，培养牙鲆细胞的培养基中通常需要加入血清 C．为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应含有凝固剂 D．为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应加入氨苄青霉素 【答案】A 【分析】基因工程基本操作顺序：目的基因获取、表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。过程①是基因表达载体构建，过程②是目的基因导入受体细胞。 【详解】A、接种过大肠杆菌的培养基不能灭菌，否则接种的大肠杆菌也会被杀死，A错误； B、牙鲆属于动物，培养动物细胞的培养基中通常需要加入血清，B正确； C、为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应含琼脂等凝固剂，只有在固体培养基上才有可能形成菌落，C正确； D、此实验构建的重组质粒上包含氨苄青霉素抗性基因，因此为了筛选成功导入重组质粒的大肠杆菌，培养基中应加入氨苄青霉素，D正确。 故选A。 21．（2025·吉林白城·三模）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列相关说法正确的是（    ） A．诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要是利用细胞膜的功能特点 B．与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的 B细胞不需要通过原代培养扩大细胞数量 C．在杂交瘤细胞筛选过程中，发生融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖 D．将待筛选抗体与该病毒基因A 进行杂交，呈阳性的就是所需的抗体 【答案】B 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要利用的是细胞膜的流动性，即细胞膜的结构特点，A错误； B、已免疫的B细胞是高度分化的细胞，不能分裂，故不需要进行原代培养，B正确； C、诱导细胞融合时，同种核型融合的细胞（即B细胞相互融合、骨髓瘤细胞相互融合）不能在选择培养基上正常增殖，只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞才能在选择培养基上正常增殖，C错误； D、待筛选的抗体是蛋白质，无法与基因A 进行杂交，应与蛋白A进行杂交，D错误。 故选B。 22．（2025·河北沧州·三模）下列关于单克隆抗体制备过程中相关操作的叙述，错误的是（　　） A．注射抗原后，从小鼠体内分离到的B细胞的纯度不影响单克隆抗体的纯度 B．克隆化培养和抗体检测是保证最终获得的抗体具有高度特异性和一致性的关键 C．使用PEG、灭活病毒等均可诱导骨髓瘤细胞和B细胞的专一性融合 D．骨髓瘤细胞会因培养液中营养物质缺乏和有害物质积累而增殖减慢 【答案】C 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞；利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，用特定的选择培养基进行筛选，得到杂交瘤细胞；再进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞；最后将所需的杂交瘤细胞在体外或小鼠腹腔内培养，从细胞培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。 【详解】A、从小鼠体内分离到的B细胞与骨髓瘤细胞融合后，得到的杂交瘤细胞还需经过抗原一抗体检测，筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞再进行克隆化培养，因此B细胞的纯度不影响单克隆抗体的纯度，A正确； B、完成抗体检测后，对特定杂交瘤细胞的克隆化培养是保证最终获得的抗体具有高度特异性和一致性的关键，B正确； C、使用PEG、灭活病毒等无法诱导骨髓瘤细胞和B细胞专一性融合，可诱导同种细胞的融合，还需进行筛选，C错误； D、骨髓瘤细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而增殖减慢，需进行传代培养，D正确。 故选C。 23．（2025·四川南充·三模）培养肉是指通过体外培养动物细胞的方式生产可供食用的肉制品。培养肉的生产流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．可用于培养肉的种子细胞包括胚胎干细胞、成体干细胞等 B．将特定基因导入牛的成熟红细胞中，可诱导其形成种子细胞 C．为缓解细胞接触抑制，向细胞培养液中加入胰蛋白酶即可 D．配制大规模培养液时，可直接使用生理盐水作为溶剂 【答案】A 【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、胚胎干细胞具有全能性，能分化为各种细胞类型，成体干细胞则能分化为特定组织或器官中的细胞类型。在培养肉的生产中，这些干细胞都可以作为种子细胞，通过体外培养增殖并诱导分化为肌肉细胞等，最终制成肉制品，A正确； B、成熟红细胞没有细胞核和各种细胞器，无法导入外源基因并进行表达。通常，我们会选择具有分裂能力的细胞，如受精卵、胚胎干细胞或成体干细胞等，作为基因导入的受体细胞，B错误； C、细胞接触抑制是指细胞在培养过程中，当相互接触时就会停止分裂增殖的现象。为了缓解细胞接触抑制，通常的做法是进行细胞传代培养，即将已经贴壁的细胞用胰蛋白酶等处理成单个细胞后，再按一定比例接种到新的培养液中继续培养。而不是直接向原培养液中加入胰蛋白酶，这样做会破坏已经贴壁的细胞，C错误； D、生理盐水虽然与动物细胞内的液体环境相似，但其成分和浓度并不完全满足细胞大规模培养的需求。大规模培养液通常需要根据细胞类型和生长阶段进行特殊配制，以满足细胞生长、增殖和分化的各种需求，D错误。 故选A。 24．（2025·甘肃·二模）体外动物细胞培养制造出的细胞培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细胞生长基质，其表面能使细胞贴附。下列叙述错误的是（    ） A．①过程可用机械方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶处理获得细胞悬液 B．③④过程需使用经灭菌处理的培养液，富含细胞生长所需的营养物质 C．③过程加入微载体为细胞提供更大附着面积，延迟接触抑制出现，可增加产量 D．动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，培养过程中细胞通过有丝分裂增加细胞数目 【答案】A 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、①过程为制备细胞悬液的过程，可用机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理的方法获得细胞悬液，胃蛋白酶最适pH为2，在7.2~7.4的环境中会失活，A错误； B、③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细胞时提供95%空气+5%CO2，B正确； C、③过程中加入微载体为细胞提供了更大的附着面积，为生物提供了更多的空间，延迟接触抑制出现，可增加产量，C正确； D、动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，培养过程中细胞通过有丝分裂增加细胞数目，D正确。 故选A。 25．（2025·吉林·三模）下列有关动物细胞培养和胚胎发育的叙述，正确的是（    ） A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 B．体外培养的大多数细胞能够悬浮在培养液中生长 C．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 D．桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” 【答案】A 【分析】1、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始； 2、胚胎发育过程： （1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加； （2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）； （3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）； （4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。（细胞分化在胚胎期达到最大限度）。 【详解】A、动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，而胚胎细胞分化程度低，全能性容易表达，所以动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，A正确； B、体外培养的大多数细胞需要贴附在某些基质表面才能生长增殖，称为贴壁生长，而不是悬浮在培养液中生长，B错误； C、卵裂期胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎总体积基本不变或略有减小，由于细胞呼吸不断消耗有机物，所以有机物总量在不断减少，C错误； D、囊胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”，而不是桑葚胚，D错误。 故选A。 26．（2025·山西·三模）双特异性抗体（BsAb）含有两个独立的抗原结合位点。科学家用大鼠（2n）细胞和小鼠（2N）细胞制备出抗T细胞标志物（CD3）和抗肿瘤标志物（EpCAM）的BsAb，用于治疗EpCAM阳性肿瘤，部分过程如下图所示。下列分析错误的是（　　） A．通过细胞克隆化培养和抗体检测，可获得产生特定抗体的杂交瘤细胞 B．同时用CD3和EpCAM免疫小鼠，能获得产生BsAb的B淋巴细胞 C．可用灭活病毒诱导法获得四源杂交瘤细胞，该细胞最多含16个染色体组 D．BsAb通过同时结合EpCAM和CD3，招募并激活T细胞来杀伤肿瘤细胞 【答案】B 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、通过细胞克隆化培养（将杂交瘤细胞单个分离培养）和抗体检测（筛选出能产生特定抗体的细胞），可获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，A正确； B、一种B淋巴细胞只能产生一种特定的抗体，同时用CD3和EpCAM免疫小鼠，小鼠的免疫系统会针对这两种抗原产生两种B淋巴细胞，B错误； C、用灭活病毒诱导法可获得四源杂交瘤细胞，大鼠杂交瘤细胞以及小鼠杂交瘤细胞均是由骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成，均含4个染色体组，融合后的四源杂交瘤细胞含8个染色体组，在有丝分裂后期最多含16个染色体组，C正确； D、BsAb含有两个独立抗原结合位点，可同时结合EpCAM和CD3，招募并激活细胞毒性T细胞，利用细胞毒性T细胞杀伤肿瘤细胞，D正确。 故选B。 27．（2025·重庆·三模）为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC）靶向治疗，治疗机理如图，下列说法错误的是（　　） A．单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B细胞与骨髓瘤细胞融合 B．用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体 C．理论上接头和药物的结合在血浆中的稳定性高于在溶酶体中的稳定性 D．ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞后被溶酶体裂解，从而丧失药物活性 【答案】D 【分析】分析题图，抗体药物偶联物(ADC) 通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，被肿瘤细胞特异性识别，通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，导致溶酶体裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。 【详解】A、效应B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，利用该细胞制备单克隆抗体，A正确； B、单克隆抗体制备过程中至少经过两次筛选，一次是用特定的选择培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，即用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，就可获得既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、由图可知，ADC与乳腺癌细胞结合后，通过胞吞进入细胞，在溶酶体中接头被裂解，释放出药物发挥作用，说明接头和药物的结合在血浆中的稳定性高于在溶酶体中的稳定性，否则在血浆中就会释放药物，对正常细胞造成伤害，C正确； D、从图中可以看出，ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞后，被溶酶体裂解，释放出药物，药物作用于DNA，并没有丧失药物活性，D错误。 故选D。 28．（2025·湖南湘西·三模）科研人员利用杂交瘤技术制备抗新冠病毒单克隆抗体，过程如下：将新冠病毒S蛋白免疫小鼠，获取B淋巴细胞后与骨髓瘤细胞在聚乙二醇或灭活病毒诱导下融合，经HAT培养基筛选获得杂交瘤细胞，再通过有限稀释法克隆化培养和抗体检测筛选得到能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。下列叙述正确的是（    ） A．HAT培养基中，未融合的B淋巴细胞因缺乏增殖能力而死亡 B．细胞融合后需要用特定的选择培养基筛选出能分泌抗体的杂交瘤细胞 C．通过抗原-抗体杂交实验可检测杂交瘤细胞培养上清液中的目标抗体 D．该技术制备的抗体可用于新冠病毒的检测，但用于治疗时需进行人源化改造 【答案】B 【分析】单克隆抗体制备过程中，先将经特定抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；融合后用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，后期还需要进行克隆化培养和抗体检测；杂交瘤细胞进行体内或体外培养，是为了获得单克隆抗体。 【详解】A、HAT培养基中，未融合的B淋巴细胞因缺乏无限增殖能力而死亡，A错误； B、细胞融合后用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，后期还需要进行克隆化培养和抗体检测，进而筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、通过抗原-抗体杂交的原理，可从克隆化培养的细胞群中筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、该技术制备的抗体可用于新冠病毒的检测，但用于治疗的单克隆抗体在制备前需要通过基因工程实现人源化改造，D错误。 故选B。 29．（2025·山西临汾·三模）羊乳价格比牛乳价格高，为防范市场上以牛乳冒充羊乳销售的行为，研究人员以羊乳酪蛋白为抗原，制备了单克隆抗体。下列相关叙述错误的是（    ） A．可以利用动物细胞融合技术和动物细胞培养技术生产单克隆抗体 B．从小鼠脾中得到的B细胞与骨髓瘤细胞融合后产生的杂交瘤细胞有多种 C．用抗羊乳酪蛋白的单克隆抗体可以检测羊乳中是否掺杂了牛乳 D．杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖后，可以在小鼠腹水中获取单克隆抗体 【答案】C 【分析】1、单克隆抗体的制备过程：获得免疫的小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞形成杂交瘤细胞，筛选出既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，将不同杂交瘤细胞分开，并克隆专一性抗体，检测阳性细胞，呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠体内或进行体外培养，获得单克隆抗体。 2、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、并可能大量制备。 3、单克隆抗体的用途：作为诊断试剂；利用同位素标记的单克隆抗体，在特定的组织中成像的技术，可以诊断肿瘤、心血管畸形疾病；用于治疗疾病和运载药物；最广泛的用途是用作体外诊断的试剂。 【详解】A、单克隆抗体制备过程中需要利用动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，A正确； B、从小鼠脾中得到的B细胞不是单一的一种B细胞，而是多种B细胞，将B细胞与骨髓瘤细胞用PEG（聚乙二醇）诱导融合会形成多种融合细胞以及未融合的细胞，经过筛选（如用特定的选择培养基筛选）才获得杂交瘤细胞（B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的细胞）B正确； C、抗羊乳蛋白的单克隆抗体是以羊乳蛋白为抗原制得的，不能检测羊乳中是否掺杂了牛乳，C错误； D、将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体，D正确。 故选C。 30．（2025·安徽·三模）下图所示是人、鼠细胞融合实验：将人和小鼠细胞放入细胞培养液中，混匀后诱导融合，同时将带有绿色荧光的抗体、红色荧光的抗体放入细胞培养液中，筛选出杂种融合细胞。在37℃下培养40min后，两种颜色的荧光在杂种细胞膜上均匀分布。下列叙述错误的是（　　） A．诱导人细胞与鼠细胞融合时可以选用灭活病毒诱导法 B．可以根据细胞膜上荧光颜色的种类筛选杂种融合细胞 C．若两种细胞等量混合，则融合后的细胞均为杂种细胞 D．结果显示膜蛋白能运动，推测构成膜的磷脂也能运动 【答案】C 【分析】实验中，带有绿色荧光的抗体标记人细胞膜蛋白，红色荧光的抗体标记鼠细胞膜蛋白。杂种融合细胞同时含有人和鼠的膜蛋白，因此细胞膜上会呈现绿色和红色两种荧光；而未融合的人细胞或鼠细胞仅含单一颜色荧光，可通过荧光种类筛选出杂种融合细胞。 【详解】A、动物细胞融合的常用诱导方法包括物理法（如电融合）、化学法（如聚乙二醇PEG）和生物法（如灭活的病毒）。灭活病毒（如仙台病毒）能通过吸附细胞表面受体，促进细胞膜融合，是经典的动物细胞融合诱导手段，A正确； B、实验中，带有绿色荧光的抗体标记人细胞膜蛋白，红色荧光的抗体标记鼠细胞膜蛋白。杂种融合细胞同时含有人和鼠的膜蛋白，因此细胞膜上会呈现绿色和红色两种荧光；而未融合的人细胞或鼠细胞仅含单一颜色荧光，可通过荧光种类筛选出杂种融合细胞，B正确； C、细胞融合过程中，可能出现以下情况：同核融合细胞如人细胞与人细胞融合（含绿色荧光）、鼠细胞与鼠细胞融合（含红色荧光）。异核融合细胞（杂种细胞），人细胞与鼠细胞融合（含绿色和红色荧光）。即使两种细胞等量混合，融合后的细胞也可能是同核融合细胞或异核融合细胞，并非均为杂种细胞，C错误； D、实验中，初始时两种荧光分别分布在人、鼠细胞膜上，培养后均匀分布，直接证明膜蛋白具有流动性。根据细胞膜的流动镶嵌模型，膜蛋白的运动依赖于磷脂双分子层的流动性，因此可推测磷脂分子也能运动，D正确。 故选C。 31．（2025·浙江温州·三模）人正常乳腺细胞与人乳腺癌细胞表面有部分相同的膜蛋白。为生产针对人乳腺癌细胞的单克隆抗体，基本流程如图所示。 下列叙述正确的是（    ） A．过程①从小鼠体内分离得到的是一种抗体 B．过程②使用固体培养基筛选杂交瘤细胞 C．该单克隆抗体可提高乳腺癌治疗的靶向性 D．该单克隆抗体可检测各种癌细胞 【答案】C 【分析】题意分析，过程①表示人体正常乳腺细胞作为抗原产生免疫反应，而后取相应的抗体与人乳腺癌细胞进行混合获得二者特异性结合产生的复合物作为抗原注射到第二组小鼠体内进行免疫反应，从该组小鼠体内获得B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞，通过筛选获得能产生目标抗体的杂交瘤细胞，进而对其进行大量培养获得单克隆抗体。 【详解】A、过程①从小鼠体内分离得到的是多种抗体，因为人正常乳腺细胞不仅仅提供一种抗原，A错误； B、过程②使用选择培养基筛选杂交瘤细胞，其物理状态为液体培养基，B错误； C、单克隆抗体的高度特异性使其能够精准靶向乳腺癌细胞的表面的特定膜蛋白，减少对正常细胞的损伤，提高治疗的靶向性，C正确； D、该单克隆抗体仅针对特定抗原，无法识别所有癌细胞的标记物，D错误。 故选C。 32．（2025·河南·三模）抗体-细胞毒素药物偶联物（T-DM1）是治疗乳腺癌的靶向药物，由曲妥珠单克隆抗体、细胞毒素药物DM1偶联形成。曲妥珠单抗与乳腺癌细胞表面的HER2具有很高的亲和性，DM1进入乳腺癌细胞后能有效抑制微管蛋白聚合，导致细胞凋亡。下列叙述错误的是（    ） A．曲妥珠单抗制备时可选择DM1作为抗原刺激小鼠产生免疫应答 B．在乳腺癌细胞内，DM1可能抑制纺锤丝的形成而抑制癌细胞增殖 C．经过选择培养基筛选出的杂交瘤细胞不可直接用于生产单克隆抗体 D．利用同位素或荧光标记的曲妥珠单抗可用于定位乳腺癌患者肿瘤的位置 【答案】A 【分析】由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”。借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞。疗效高，副作用小，位置准确。 【详解】A、曲妥珠单抗是针对乳腺癌细胞表面的HER2制备的，制备时应选择HER2作为抗原刺激小鼠产生免疫应答，A错误； B、纺锤丝的主要成分是微管蛋白，DM1进入乳腺癌细胞后能有效抑制微管蛋白聚合，因此可能抑制纺锤丝的形成。 纺锤丝在细胞分裂过程中对染色体的分离等起着重要作用，其形成受抑制会抑制癌细胞增殖，B正确； C、经过选择培养基筛选出的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，才能获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，才可用于生产单克隆抗体，C正确； D、曲妥珠单抗与乳腺癌细胞表面的HER2具有很高的亲和性，利用同位素或荧光标记的曲妥珠单抗，可与乳腺癌细胞特异性结合，从而用于定位乳腺癌患者肿瘤的位置，D正确。 故选A。 33．（2025·四川内江·三模）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用来检测早孕。下图为抗HCG单克隆抗体制备流程示意图。下列叙述错误的是（　　）    A．①过程通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合 B．②过程培养基筛选出的为融合的多种杂交瘤细胞 C．③过程抗体筛选的原理是抗体与抗原特异性结合 D．④过程若在小鼠腹腔内进行则无需保证无菌环境 【答案】A 【分析】分析题图：给小鼠注射HCG，从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞；①过程将该B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合；②过程为杂交瘤细胞的筛选与培养；③过程为专一抗体检验并筛选出能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞；④过程为体外培养。 【详解】A、①过程将B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，A错误； B、②过程为用特定的选择性培养基筛选杂交瘤细胞，基筛选出的为融合的多种杂交瘤细胞，B正确； C、③过程是对筛选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，进而筛选出能产生抗HCG抗体的杂交瘤细胞，此过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合，C正确； D、④过程为体外培养，将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，可从小鼠腹水中提取出大量的单克隆抗体，且在小鼠腹腔内进行则无需保证无菌环境，D正确。 故选A。 34．（2025·福建泉州·三模）人体发生应激反应后，唾液中的嗜铬粒蛋白A(CHGA)迅速达到峰值。研究人员通过制备两种CHGA单克隆抗体用于检测唾液中CHGA含量，作为评估应激反应程度的指标之一。检测原理如图(其中一种附着在基质上为固相抗体，另一种是连接上能催化底物发生显色反应的酶为酶标抗体)。下列有关叙述错误的是（　　） A．向小鼠多次注射CHGA可诱导其产生用于制备单克隆抗体的B淋巴细胞 B．单克隆抗体较强的特异性可排除唾液中其他成分对结果的干扰 C．固相抗体与酶标抗体需识别并结合在CHGA的不同区域 D．洗脱的目的是为了使CHGA从固相抗体脱离从而有利于发生显色反应 【答案】D 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 3、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 【详解】A、向小鼠多次注射CHGA（抗原）可诱导其发生体液免疫产生用于制备单克隆抗体的B淋巴细胞，A正确； B、单克隆抗体具有特异性强灵敏度高的特点，可排除唾液中其他成分对结果的干扰，B正确； C、由图可知，固相抗体与酶标抗体需识别并结合在CHGA的不同区域，C正确； D、洗脱的目的是清除未结合或游离的酶标抗体，而不是将CHGA从固相抗体上洗脱下来，D错误。 故选D。 35．（2025·湖北十堰·三模）单克隆抗体在病原体鉴定、疾病治疗等方面有广泛的应用。下表中关于制备病原体A的单克隆抗体的相关操作及目的或结果，都正确的是（　　） 选项 操作 目的或结果 A 注射灭活的抗原结构均被破坏的病原体A 获得能产生特定抗体的B淋巴细胞 B 利用PEG诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 获得的都是既能产生单一抗体，又能大量增殖的杂交瘤细胞 C 筛选出杂交瘤细胞后，再利用96孔板培养和筛选 培养和筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D 将所得杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内 使杂交瘤细胞在小鼠体内大量增殖，从而提高该小鼠抵御病原体A的能力 A．A B．B C．C D．D 【答案】C 【分析】单克隆抗体制备过程需要2次筛选：第一次 筛选出杂交瘤细胞；第二次筛选出能够产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、注射灭活的抗原结构均被破坏的病原体A，若抗原结构被破坏，就无法刺激机体产生特异性免疫反应，也就不能获得能产生特定抗体的B淋巴细胞，A错误； B、融合后会形成多种类型的细胞，包括未融合的细胞、自身融合的细胞以及B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞，并非获得的都是既能产生单一抗体，又能大量增殖的杂交瘤细胞，还需要经过筛选等后续步骤，B错误； C、筛选出杂交瘤细胞后，再用96孔板培养和筛选，可以进一步培养和筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，该操作和目的表述均正确，C正确； D、将所得杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内，其目的是使杂交瘤细胞在小鼠腹腔内大量增殖，从而获得大量单克隆抗体，而不是提高该小鼠抵御病原体A的能力，D错误。 故选C。 36．（2025·广西南宁·三模）一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成双杂交瘤细胞AB，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．若双特异性抗体应用于肿瘤治疗，则α、β抗原中至少有一种为癌细胞表面抗原 B．诱导杂交瘤细胞A、B融合后利用选择培养基筛选出双杂交瘤细胞AB C．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，无需使用胰蛋白酶处理 D．将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，腹水能为细胞提供所需的营养条件 【答案】B 【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 2、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞，疗效高，副作用小，位置准确。 【详解】A、若双功能抗体应用于肿瘤治疗，则α和β抗原中至少有一种为癌细胞表面抗原，这样才能保证药物定向作用于癌细胞，A正确； B、双杂交瘤细胞AB本身就是由杂交瘤细胞A、B融合而成，利用选择培养基无法筛选出双杂交瘤细胞AB，B错误； C、杂交瘤细胞是悬浮培养的细胞，细胞之间并未接触，若要传代培养，细胞培养液直接离心，去除上清液，加入新鲜培养基即可，不用胰蛋白酶处理，C正确； D、将杂交瘤细胞注射到小鼠腹水中培养，腹水作为天然培养基，为细胞提供各种生长条件，D正确。 故选B。 37．（2025·青海海东·三模）单克隆抗体在病原体鉴定、疾病治疗等方面有广泛的应用。下表中关于制备病原体A的单克隆抗体的相关操作及目的或结果，都正确的是（　　） 选项 操作 目的或结果 A 注射灭活的抗原结构均被破坏的病原体A 获得能产生特定抗体的B淋巴细胞 B 利用PEG诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 获得的都是既能产生单一抗体，又能大量增殖的杂交瘤细胞 C 筛选出杂交瘤细胞后，再利用96孔板培养和筛选 培养和筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D 将所得杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内 使杂交瘤细胞在小鼠体内大量增殖，从而提高该小鼠抵御病原体A的能力 A．A B．B C．C D．D 【答案】C 【分析】1、动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃士0.5℃；适宜的pH：7.2~7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 2、单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，能大量制备。可以搭载药物，清除癌细胞。 【详解】A、注射灭活的抗原结构均被破坏的病原体A。若抗原结构被破坏，就无法刺激机体产生特异性免疫反应，也就不能获得能产生特定抗体的B淋巴细胞，A错误； B、融合后会形成多种类型的细胞，包括未融合的细胞、自身融合的细胞以及B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞，并非获得的都是既能产生单一抗体，又能大量增殖的杂交瘤细胞，还需要经过筛选等后续步骤，B错误； C、筛选出杂交瘤细胞后，再用96孔板培养和筛选。通过这一步骤可以进一步培养和筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，该操作和目的表述均正确，C正确； D、将所得杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内。其目的是使杂交瘤细胞在小鼠腹腔内大量增殖，从而获得大量单克隆抗体，而不是提高该小鼠抵御病原体A的能力，D错误。 故选C。 38．（2025·四川眉山·三模）Her2 是乳腺癌等肿瘤细胞的表面蛋白，传统鼠源抗 Her2 单克隆抗体可被人体免疫系统识别而产生免 疫反应，导致单抗的治疗效果下降。科研人员将小鼠自身的抗 Her2 抗体基因敲除后，经过一系列改造，制备了人源化的抗 Her2 单抗，过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A．①过程农杆菌的T-DNA 整合到受精卵染色体 DNA 上的原理是基因重组 B．③是将 Her2 注射到小鼠体内，b 表示从小鼠脾中获得的多种 B 淋巴细胞 C．④过程使用的病毒需要灭活是为了保证细胞膜分子排布不发生改变 D．⑤过程需进行两次筛选，第一次筛选的原理是抗原抗体特异性结合 【答案】B 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选。 【详解】A、①过程是将基因敲除后的小鼠受精卵培育成转基因小鼠，该过程一般采用显微注射技术将目的基因导入受精卵，而农杆菌的T - DNA整合到植物细胞染色体DNA上的原理是基因重组，这里并非农杆菌介导的转化，所以①过程不是农杆菌的T - DNA整合到受精卵染色体DNA上，A错误； B、③过程是将Her2注射到小鼠体内，目的是刺激小鼠的免疫系统产生免疫反应，b表示从小鼠脾中获得的多种B淋巴细胞，因为一种抗原可以刺激机体产生多种B淋巴细胞，这些B淋巴细胞能产生不同的抗体，B正确； C、④过程使用的病毒需要灭活，目的是保证病毒失去感染能力，避免对细胞造成伤害，但又要保留其诱导细胞融合的能力，而不是保证细胞膜分子排布不发生改变，C错误； D、⑤过程需进行两次筛选，第一次筛选是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，原理是在选择培养基上只有杂交瘤细胞能存活；第二次筛选是利用抗原 - 抗体特异性结合的原理，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，D错误。 故选B。 39．（2025·四川眉山·三模）下列关于细胞工程的叙述，错误的是（    ） A．电刺激可以诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶的处理 C．小鼠骨髓瘤细胞和经免疫小鼠的 B 淋巴细胞融合可以制备单克隆抗体 D．某种植物甲乙两品种的体细胞杂种和甲乙两品种的杂交后代的染色体数目相同 【答案】D 【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞。 【详解】A、电刺激（物理方法）可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合，A正确； B、去除植物细胞壁需用纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需用胰蛋白酶处理，B正确； C、小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可无限增殖又可制备单克隆抗体，C正确； D、某种植物甲乙两品种杂交后代是通过减数分裂再受精作用，子代染色体的数目与甲乙都相同，原生质体杂交是细胞融合，后代的染色体数目加倍，D错误。 故选D。 40．（2025·浙江嘉兴·三模）犬肾上皮连续细胞系（MDCK细胞）可用于制备流感疫苗。传统的培养过程采用添加胎牛血清贴壁培养，研究人员尝试使用无血清悬浮培养技术培养MDCK单克隆细胞株，并获得成功。下列叙述正确的是（    ） A．无血清培养液中只需添加碳源和氮源 B．卡氏瓶在培养过程中需严格密封 C．悬浮培养技术可提高培养空间的利用率 D．单克隆细胞株培养过程中需诱导细胞发生分化 【答案】C 【分析】植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。动物细胞培养需要保证培养基的营养（通常要加动物血清）、无菌和无毒的环境、适宜的温度和PH（多数中性）和渗透压、气体条件（95%空气和5%CO2）。 【详解】A、无血清培养液还需要水和无机盐，A错误； B、卡氏瓶的瓶盖上是有孔的透气的，因此是开放式培养，B错误； C、悬浮细胞培养技术是一种在液体培养基中培养非贴壁依赖性细胞的方法，可提高培养空间的利用率，C正确； D、单克隆细胞株培养过程中无需诱导细胞发生分化，D错误。 故选C。 二、多选题 41．（2025·内蒙古通辽·三模）利用动物体细胞核移植技术可培育高产奶牛，流程如图所示，下列有关叙述正确的是（    ） A．对卵母细胞X去核的实质是去除纺锤体—染色体复合物 B．母牛Y的体细胞分化程度低，细胞核更易恢复全能性 C．可用电刺激激活重构胚、使之完成细胞分裂和发育过程 D．早期胚胎移植前，要对代孕母牛Z进行同期发情处理 【答案】ACD 【分析】动物体细胞核移植技术基本过程：从供体身体的某一部位上取体细胞，并通过体细胞培养技术对该体细胞进行增殖；采集卵母细胞，体外培养到减数第二次分裂中期，通过显微操作去除卵母细胞中的核，由于减数第二次分裂中期细胞核的位置靠近第一极体，用微型吸管可以一并吸出细胞核和第一极体；细胞促融将供体细胞注入去核卵母细胞通过电刺激使两细胞融合，供体细胞进入受体卵母细胞内构建重组胚胎，通过物理或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。植入代孕母体体外完成早期胚胎培养后，将胚胎移植入代孕母体内，使其继续发育为新个体。 【详解】A、在核移植过程中，对卵母细胞去核的实质就是去除纺锤体 - 染色体复合物，因为纺锤体 - 染色体复合物中含有卵母细胞的细胞核遗传物质，A正确； B、体细胞的分化程度较高，其细胞核恢复全能性相对较难。通常胚胎干细胞等分化程度低的细胞全能性容易表达，而母牛 Y 的体细胞是高度分化的细胞，分化程度高，细胞核不易恢复全能性，B错误； C、在核移植过程中，可用电刺激等方法激活重构胚，使之完成细胞分裂和发育过程，C正确； D、在早期胚胎移植前，要对代孕母牛 Z 进行同期发情处理，使供体和受体母牛的生理状态相同，为胚胎移入受体提供相同的生理环境，D正确。 故选ACD。 42．（2025·吉林长春·三模）人外周血淋巴细胞（N23）和小鼠骨髓瘤细胞融合后得到的人—鼠杂交瘤细胞（NJ84）可用于制备单克隆抗体。N23和人纤维母细胞（CRL）均可释放白细胞介素6（IL—6）．为研究不同来源的IL—6对NJ84克隆化能力及抗体分泌的影响，科研人员进行了相关实验，部分结果如表所示。下列叙述正确的是（    ） 培养细胞 条件培养液 细胞生长孔数/细胞培养孔数 抗体分泌量（pg/mL） NJ84 不含IL—6 12/48 11 NJ84 含CRL—IL—6 21/48 48 NJ84 含N23—IL—6 25/48 45 注：CRL—IL—6、N23—IL—6分别来源于对CRL、N23培养72小时后的上清液。 A．N23和NJ84均具有既能体外大量增殖又能产生专一抗体的特点 B．IL—6属于细胞因子，能参与细胞间的信号传导 C．在NJ84培养的不同阶段，可添加不同来源的IL—6以提高生产效率 D．单克隆抗体既可用于癌症的靶向治疗，又可作为诊断试剂检测疾病 【答案】BCD 【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、外周血淋巴细胞（N23）不能大量增殖，A错误； B、白细胞介素6（IL—6）属于细胞因子，能参与细胞间的信号传导，B正确； C、结合表格可知，在NJ84培养的不同阶段，可添加不同来源的IL—6以提高生产效率，C正确； D、单克隆抗体可以与抗原特异性结合，既可用于癌症的靶向治疗，又可作为诊断试剂检测疾病，D正确。 故选BCD。 三、解答题 43．（2025·四川内江·三模）金纳米棒（AuNR）是一种光热材料，常用于局部肿瘤治疗，也可用于某些癌症早期筛查。回答下列问题： (1)研究人员构建了一种基于粒径为50-60nm左右的金纳米棒（GNR）的免疫层析试纸条，用于检测前列腺特异性抗原（PSA）。当肿瘤、增生或炎症发生时，正常腺管结构遭到破坏，血清中PSA浓度升高。GNR免疫层析试纸条检测原理如图1，试纸条上GNR-dAb可移动且数量很多，cAb、羊抗鼠IgG分别固定在T线、C线。GNR在T线或C线聚集时，T线、C线会显色。 ①制备鼠源抗PSA单克隆抗体（cAb）时，给小鼠注射的PSA作为 ，能引发小鼠特异性免疫，其中激活B细胞的第二信号是 。 ②试纸条上采用两种针对PSA的单克隆抗体进行检测，其优点是 。若待测样品来自前列腺癌患者，T线、C线的显色情况为 。 (2)金纳米棒（AuNR）在808nm的激光照射下，会产生光热效应，使肿瘤细胞快速死亡。研究人员构建了一种金纳米棒复合材料（AuNR-PPR-PEG），并进行了相关指标检测，如图2. 注：HeLa细胞为癌细胞。 ①研究人员认为，AuNR-PPR-PEG可代替AuNR用于肿瘤治疗，理由是 。 ②已知癌细胞表面会过表达叶酸受体，为了增强AuNR-PPR-PEG对癌细胞的靶向性杀伤，你认为可采取的方法是 。 【答案】(1) 抗原 辅助性T细胞表面的特定分子发生变化并与B细胞结合 提高试纸检测的准确度（和灵敏度） 均显色 (2) 相较于AuNR，AuNR-PPR-PEG仍能产生较好的光热效应，对癌细胞的光热细胞毒性较强，且对于正常细胞的毒性明显较低 将AuNR-PPR-PEG材料偶联叶酸 【分析】体液免疫过程：①一些病原体可以和B细胞接触，为激活B细胞提供第一个信号；②树突状细胞、B细胞等抗原呈递细胞摄取病原体，而后对抗原进行处理，呈递在细胞表面，然后传递给辅助性T细胞；③辅助性T细胞表面特定分子发生变化并与B细胞结合，这是激活B细胞的第二个信号；辅助性T细胞开始分裂、分化，并分泌细胞因子；④B细胞受到两个信号的刺激后开始分裂、分化，大部分分化为浆细胞，小部分分化为记忆B细胞。细胞因子能促进B细胞的分裂、分化过程。⑤浆细胞产生和分泌大量抗体，抗体可以随体液在全身循环并与病原体结合。抗体与病原体的结合可以抑制病原体的增殖或对人体细胞的黏附。 【详解】（1）①制备鼠源抗PSA单克隆抗体（cAb）时，给小鼠注射的PSA作为抗原，引发小鼠特异性免疫，使小鼠产生相应的B淋巴细胞。一些病原体可以和B细胞接触，为激活B细胞提供第一个信号；辅助性T细胞表面特定分子发生变化并与B细胞结合，是激活B细胞的第二个信号。 ②用两种针对PSA不同表位的单克隆抗体同时检测，可提高检测的特异性和灵敏度；若样品来自前列腺癌患者，则T线和C线均显色。 单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等特点，试纸条上采用两种针对PSA的单克隆抗体进行检测，其优点是提高试纸检测的准确度（和灵敏度）。由题意可知，GNR在T线或C线聚集时，T线、C线会显色。因此若待测样品来自前列腺癌患者，血清中PSA浓度升高，T线、C线的均显色。 （2）①由图可知，与AuNR相比，AuNR-PPR-PEG仍能产生较好的光热效应，对癌细胞的光热细胞毒性较强，且对于正常细胞的毒性明显较低，因此可替代AuNR用于肿瘤治疗。 ②在AuNR-PPR-PEG表面偶联（修饰）叶酸，使其能与癌细胞表面过表达的叶酸受体特异结合，从而增强对癌细胞的靶向性杀伤。 44．（2025·辽宁·三模）请回答细胞工程的相关问题： I.利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，用以制造单克隆抗体，单克隆抗体在医药领域占有重要的地位，图1为单克隆抗体的制备过程。 (1)A抗原注入小鼠后，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是 。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得 ，再将其注入小鼠体内培养，从小鼠腹水中提取到大量的抗A抗原的单克隆抗体。 (3)抗体药物偶联物（ADC）通常是由单克隆抗体和细胞毒性药物共价连接形成，能够实现对癌细胞的精确高效清除而不伤害正常细胞，成为抗癌药物研发的热点之一。图2为ADC杀伤癌细胞过程的示意图，据图分析，ADC发挥作用的过程中，抗体的作用是 ，药物使癌细胞死亡的机理是 。 Ⅱ.百岁兰是一种独特的裸子植物，依据现有的植物学分类没有近亲，它被誉为植物界的“活化石”，已被列入《濒危物种公约》。现在可通过一定的方法实现百岁兰的快速与稳定繁殖。 (4) 技术成为植物种质资源保存和快速繁殖的重要工具，该技术依据的生物学原理是 。 (5)以消毒的外植体为材料获得愈伤组织的过程称为 ；该过程中通常需要向MS培养基中加入一定浓度的 这两类植物激素，并通过调整其比例来调控培育过程；同时愈伤组织的形成和生长还受到外界环境因素的影响。图3、图4为两种处理因素对愈伤组织生长状况的影响曲线，实验结果表明： 。 【答案】(1)聚乙二醇/PEG (2) 乙、丙 能产生所需（或抗A抗原的）抗体的杂交瘤细胞 (3) 特异性识别癌细胞 诱导了癌细胞内与凋亡相关基因的表达 (4) 植物组织培养 植物细胞具有全能性 (5) 脱分化 生长素和细胞分裂素 昼夜节律显著促进了愈伤组织的生长 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。 【详解】（1）诱导动物细胞融合常用的化学诱导因素是聚乙二醇（PEG）。 （2）甲过程是融合细胞，①是选择培养基筛选，②是克隆化培养和专一抗体检验阳性，故通过筛选只含杂交瘤细胞的是乙和丙；②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，目的是筛选获得能产生特异性抗体（或抗A抗原的抗体）的杂交瘤细胞。 （3）抗体的作用是特异性识别并结合癌细胞表面抗原，发挥靶向定位功能，引导ADC精准结合癌细胞；药物使癌细胞死亡的机理是诱导了癌细胞内与凋亡相关基因的表达。 （4）植物组织培养依据的生物学原理是植物细胞的全能性，根本原因是植物细胞具有该物种生长发育的全部遗传信息。 （5）植物组织培养通过离体的植物组织、器官或细胞，在无菌条件下经脱分化、再分化等过程，发育成完整植株，该过程中通常需要向培养基中加入一定浓度的生长素和细胞分裂素来调控培育过程；对比图3（暗处理）和图4（昼夜节律处理），相同时间下，昼夜节律处理的愈伤组织质量增幅更大，表明昼夜节律更利于愈伤组织的生长。 45．（2025·湖南·三模）纳米抗体是天然存在的最小的免疫球蛋白功能片段，具有高亲和力、高稳定性、可溶性、低生产成本且能结合多种表位等优势，在疾病的预防、诊断和治疗方面有着广阔的应用前景。利用噬菌体展示技术制备纳米抗体的流程如图甲，回答下列问题。 (1)收集骆驼科动物的外周血淋巴细胞并提取总 RNA，经 过程获得 cDNA，以 cDNA 为模板进行 PCR 扩增获得纳米抗体基因片段。PCR 反应原理是 ，向其缓冲溶液中加入 Mg2+的作用是 。 (2)将获得的纳米抗体基因片段插入噬菌体的 基因中，使纳米抗体随该基因的表达而展示在噬菌体表面。该过程使用的工具酶是 。 (3)构建好噬菌体文库后，需进行特异性噬菌体的筛选，其依据的原理是 。 (4)制备的纳米抗体重链可变区（VHH）与传统单克隆抗体重链可变区（VH）结构域的比较如图乙。 从空间结构分析，VHH 与 VH的结构域类似，均由 个框架区和 3 个互补决定区组成。从互补决定区来看，与 VH相比，VHH 具有更长的 （填“CDR1”“CDR2”或“CDR3”）区，形成了适合目标蛋白空腔的“手指状”延伸，这种结构特征使能够结合传统抗体无法识别的隐藏或凹形表位，因而具有更高的 （填“亲和力”或“稳定性”）。 【答案】(1) 逆转录（或反转录） DNA 半保留复制 激活真核细胞和细菌的 DNA 聚合酶 (2) 外壳蛋白 限制酶和 DNA 连接酶 (3)抗原与抗体特异性结合 (4) 4 CDR3 亲和力 【分析】基因工程的基本步骤包括目的基因的获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【详解】（1）收集骆驼科动物的外周血淋巴细胞并提取总 RNA，经逆转录过程获得 cDNA，以 cDNA 为模板进行 PCR 扩增获得纳米抗体基因片段。PCR 反应的原理是 DNA 半保留复制，向其缓冲溶液中加入Mg2+的作用是激活真核细胞和细菌的 DNA 聚合酶。 （2）将获得的纳米抗体基因片段插入噬菌体的外壳蛋白基因中，使纳米抗体随该基因的表达而展示在噬菌体表面。该过程使用的工具酶是限制酶和 DNA 连接酶。 （3）构建好噬菌体文库后，需进行特异性噬菌体的筛选，其依据的原理是抗原与抗体特异性结合。 （4）据题图乙分析可知，从空间结构分析，VHH与VH的结构域类似，均由 4 个框架区（FR）和 3 个互补决定区（CDR）组成。从互补决定区来看，与VH相比，VHH具有更长的 CDR3 区，形成了适合目标蛋白空腔的“手指状”延伸，因而具有更高的亲和力。 胚胎工程考点03 一、单选题 1．（2025·江西·三模）mTOR是一种对细胞生长和增殖有调节作用的胞内蛋白激酶。抑制mTOR活性可使小鼠囊胚的内细胞团增殖减慢，进而导致胚胎发育停滞；当mTOR被重新激活时，囊胚发育恢复正常。下列叙述错误的是（    ） A．通过体外受精和胚胎培养技术可获得小鼠囊胚 B．受体母鼠接受移植的囊胚前需进行同期发情处理 C．移植前用mTOR抑制剂处理囊胚可提高移植成功率 D．该研究可为体外培养胚胎的非冷冻保存提供依据 【答案】C 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括： （1）对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理； （2）配种或人工授精； （3）对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫冲卵)。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存； （4）对胚胎进行移植； （5）移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。 【详解】A、体外受精技术可以获得受精卵，再通过胚胎培养技术能够将受精卵培养至囊胚阶段，A正确； B、在胚胎移植过程中，受体母鼠接受移植的囊胚前需进行同期发情处理，这样可以使受体与供体的生理状态相同，为胚胎移入受体提供相同的生理环境，提高胚胎移植的成功率，B正确； C、因为抑制mTOR活性会使小鼠囊胚的内细胞团增殖减慢，导致胚胎发育停滞，所以移植前用mTOR抑制剂处理囊胚会不利于胚胎的正常发育，不能提高移植成功率，C错误； D、根据题干中mTOR活性对胚胎发育的影响，我们可以通过调节mTOR活性来控制胚胎发育的进程，这就为体外培养胚胎的非冷冻保存提供了依据，例如可以在需要时抑制mTOR活性使胚胎发育停滞，从而实现非冷冻保存，D正确。 故选C。 2．（2025·山西晋中·三模）亚洲狮是世界上濒危的大型猫科动物之一，体外受精与胚胎移植在狮类动物保护方面已有成功案例。下列有关说法正确的是（　　） A．采集到的卵母细胞和精子可以直接用于体外受精 B．经胚胎移植产生的后代，其遗传特性与受体保持一致 C．体外受精和胚胎移植在一定程度上可规避自然繁殖的局限性 D．为确保移植胚胎的成活率，发育程度越高的胚胎移植效果越好 【答案】C 【分析】试管动物的培育，需要经过精子获能和卵细胞在体外受精，体外早期培育的培育，一般需培育至桑椹胚或囊胚阶段再进行胚胎移植；经胚胎移植产生的后代，其遗传特性与供体保持一致。 【详解】A、采集到的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才具备与精子受精的能力，采集到的精子也需要进行获能处理才可以受精，A错误； B、经胚胎移植产生的后代，其遗传物质来自供体胚胎，而不是受体。受体只是提供孕育胚胎的场所等条件，所以后代遗传特性与供体胚胎有关，与受体不一致，B错误； C、在自然繁殖中，可能受多种因素限制，比如某些濒危物种数量稀少、环境不适宜等，导致繁殖困难。 体外受精可以在实验室内创造适宜的条件使精卵结合，胚胎移植则可以将早期胚胎移植到适宜的受体母体中孕育，在一定程度上突破了自然繁殖在时间、空间以及个体数量等方面的局限性，C正确； D、一般来说，发育至桑葚胚或囊胚阶段的胚胎移植成功率较高，而发育程度过高的胚胎，其细胞分化程度高，移植后与受体子宫的相容性可能变差等，不利于胚胎的存活和进一步发育，D错误。 故选C。 3．（2025·四川乐山·三模）我国科学家通过敲除猪的糖抗原合成基因（β4GalNT2），并转入相应的调节基因后，将基因编辑猪的单个肾移植给切除自体双肾的猕猴，最终移植肾存活184天。在移植后的前五个月里，猕猴的移植肾功能完全正常，之后出现逐渐加重的蛋白尿，下列说法错误是（    ） A．基因编辑猪的成功体现了动物细胞的全能性 B．出现蛋白尿的原因可能是肾脏功能障碍导致 C．猪和猕猴肾脏差异的根本原因是基因的不同 D．敲除猪β4GalNT2基因能降低免疫排斥反应 【答案】A 【分析】①细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整生物体的潜能，在多细胞生物中，每个体细胞的细胞核都含有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体； ②器官移植是将一个个体的某一器官整体或部分地转移到另一个体（或本体的另一位置，如自体皮肤移植）的过程，器官移植存在的主要问题：免疫排斥反应和供体器官不足，针对免疫排斥反应，可采用免疫抑制剂来提高移植器官的成活率。 【详解】A、基因编辑猪的成功属于基因工程的应用范畴（其原理为基因重组），其原理不是细胞的全能性，A错误； B、出现蛋白尿主要是肾小球通透性增强导致的，由此可推测原因可能是肾脏功能障碍，B正确； C、猪和猕猴不是同一物种，遗传物质不同，因此其肾脏的差异体现了不同遗传物质对性状的决定，根本原因是基因的不同，C正确； D、根据题目信息可知，β4GalNT2是糖抗原合成基因，因而敲除β4GalNT2能改变膜蛋白种类，进而降低免疫排斥反应，D正确。 故选A。 4．（2025·四川德阳·三模）单倍体胚胎干细胞取自孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞，具有极大的应用前景。下列叙述正确的是（　　） A．培养液中通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B．细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C．单倍体胚胎干细胞可取自孤雌或孤雄发育至囊胚中的任何一个细胞 D．单倍体胚胎干细胞通常不含等位基因，有利于研究隐性基因的功能 【答案】D 【分析】胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 【详解】A、动物细胞不能直接吸收蔗糖，因此动物细胞培养液中通常含有的糖类是葡萄糖，A错误； B、动物细胞培养中CO2的主要作用是维持培养液的pH，B错误； C、单倍体胚胎干细胞可取自于孤雌或孤雄发育至桑葚胚中任何一个细胞或囊胚的内细胞团的细胞，C错误； D、单倍体胚胎干细胞取自于孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞，其细胞中通常只有一个染色体组，因此不含等位基因，有利于研究隐性基因的功能，D正确。 故选D。 5．（2025·甘肃白银·三模）体细胞核移植时胚胎发育率低下的原因与胚胎染色体组蛋白甲基化修饰密切相关。BRG1是染色体重塑复合物，参与染色体组蛋白去甲基化。科学家对BRG1进行如下研究，发现猪核移植胚胎发育率显著提高。下列说法正确的是（    ） A．常用显微操作法去除由核膜包被的卵母细胞的细胞核 B．克隆猪的性别常需要取囊胚的滋养层细胞进行鉴定 C．染色体组蛋白发生去甲基化修饰后将有利于胚胎中相关基因的表达 D．猪成纤维细胞等应在CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 【答案】C 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微直接去除法还有人采用密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法。 【详解】A、常用显微操作法去除MⅡ期卵母细胞的细胞核，其实质是去除纺锤体—染色体复合物，MⅡ期的卵母细胞无核膜包被的细胞核，A错误； B、克隆猪是通过核移植技术获得的，其性别与供核个体的性别相同，无须鉴定，B错误； C、据题干和题图可知，猪成纤维细胞中导入BRG1基因后，猪核移植胚胎发育率显著提高，故推测染色体组蛋白发生去甲基化修饰后将有利于胚胎中相关基因的表达，C正确； D、猪成纤维细胞等应在CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液pH，D错误。 故选C。 6．（2025·广西·三模）我国科学家经过多年的反复试验，在2017年成功培育出体细胞克隆猴“中中”和“华华”，轰动全世界。体细胞克隆猴的培育流程如图，①、②、③表示不同的技术操作。为提高相关基因的表达，研究人员在重构胚中注入Kdm4d（组蛋白去甲基化酶基因）的mRNA，同时用TSA（组蛋白脱乙酰酶抑制剂）处理。下列相关叙述正确的是（    ）    A．操作②是对刚采集的卵母细胞进行去核处理，避免其核基因干扰实验结果 B．操作①用有活性的仙台病毒进行短暂处理，能使两种细胞混合培养时相互融合 C．操作③是胚胎移植，将胚胎移入受体母猴的体内后还需要对母猴进行妊娠检查 D．两种物质处理重构胚，能使组蛋白去甲基化或去乙酰化，有利于胚胎的发育 【答案】C 【分析】由图可知，操作①②是动物体细胞核移植技术，操作③是胚胎移植。 【详解】A、操作②包含卵母细胞的培养和去核两个步骤，刚采集的卵母细胞先要培养到MII期才能进行去核处理，去核是为了避免卵母细胞核基因对实验结果的干扰，A错误； B、灭活仙台病毒能使两种细胞混合培养时相互凝聚而诱导融合，是动物细胞融合常采用的方法，B错误； C、操作③是胚胎移植，移植后胚胎发育成功率并非百分之百，所以还需进行妊娠检查，C正确； D、重构胚中注入Kdm4d的mRNA，会通过翻译合成组蛋白去甲基化酶，该酶可使组蛋白去甲基化，用TSA处理重构胚，会使细胞中组蛋白脱乙酰酶无法发挥作用，进而使组蛋白处于乙酰化状态，根据题意，使用两种物质是为了提高相关基因的表达，故推测组蛋白的去甲基化或乙酰化，都能促进基因表达，有利于胚胎发育，D错误。 故选C。 7．（2025·安徽·三模）中国科研团队采用新的胚胎植入前诊断技术（PGD）阻断Leri—Weill软骨发育不良综合征的遗传，使健康婴儿顺利诞生。婴儿的母亲是含显性致病基因（S基因）的杂合子，且S基因位于染色体交换频率高的区域。故为确保PGD检测结果的准确性，分别对第一极体、第二极体（仅来自次级卵母细胞）、囊胚进行检测。下列叙述错误的是（　　） A．在操作过程中所用的细胞培养液需加入一定量的动物血清 B．若第一极体中检出S基因，则第二极体和囊胚都不含S基因 C．若第一极体中未检出S基因，则第二极体和囊胚都含S基因 D．通常取囊胚的滋养层细胞对胚胎进行性别鉴定和遗传病筛查 【答案】B 【分析】在减数第一次分裂后期，等位基因会随同源染色体的分开而分离，在减数第二次分裂的过程中不存在同源染色体。若在减数第一次分裂前期，发生同源染色体的非姐妹染色单体的互换，则在减数第二次分裂后期会发生等位基因的分离。 【详解】A、为在所用细胞培养液中添加一些天然成分，需加入一定量的动物血清，A正确； B、因为母亲是含致病基因（S基因）的杂合子，且S基因位于染色体交换频率高的区域，若第一极体中检测出S基因，则第二极体或卵细胞中，可能有一个含有S基因，卵细胞受精发育成的囊胚可能含S基因，也可能不含S基因，B错误； C、若第一极体不含S基因，则次级卵母细胞含S基因。减数第二次分裂时，若S基因所在染色体发生交换，则第二极体和囊胚都含S基因，C正确； D、胚胎植入前诊断通常选取囊胚的滋养层细胞进行检测，以避免损伤胚胎发育的关键细胞，同时滋养层细胞与内细胞团的遗传物质一致，可用于性别鉴定和遗传病筛查，D正确。 故选B。 8．（2025·河南·三模）2018年3月，北方白犀牛仅剩下两头雌性。在此之前，研究人员设法保存了雄性北方白犀牛的精子。研究人员利用胚胎工程技术辅助人工繁育北方白犀牛的具体流程如图所示。下列说法正确的是（    ） A．需对精液离心处理，去除抑制获能的物质，放入专用的获能溶液中使精子获得能量 B．将受精卵培养至早期胚胎，移植到受体母牛体内并产下牛犊的过程属于无性繁殖 C．胚胎移植之前需对胚胎质量和发育时期进行检查，胚胎移植后还需进行妊娠检查 D．胚胎分割可以提高胚胎的利用率，胚胎分割次数越多，胚胎移植成功率越高 【答案】C 【分析】无性繁殖是指不经生殖细胞结合的生殖过程，由母体的一部分（也就是说体细胞）直接产生子代的方式。 【详解】A、精子获能的本质是解除精液中的抑制因子（通过离心去除），并激活其受精能力（如顶体反应），而非直接“获得能量”，A错误； B、体外受精后移植胚胎的过程属于有性繁殖，因为受精卵由精子和卵子结合形成，保留了双亲的遗传物质。选项B将其归为“无性繁殖”是对概念的误解，B错误； C、胚胎移植前需检查胚胎质量（如发育阶段、细胞均一性）和发育时期（如囊胚期是否合适）。移植后通过妊娠检查（如B超或激素检测）确认是否成功着床。此描述完全符合胚胎移植流程，C正确； D、胚胎分割虽可提高胚胎利用率，但分割次数越多（如四分胚、八分胚），单个胚胎的细胞数目减少，可能导致发育潜能下降，移植成功率反而降低，D错误。 故选C。 9．（2025·福建三明·三模）某研究团队运用基因编辑技术，针对小鼠卵母细胞实施了DNA甲基化重写操作，随后将一个极体注入经修饰的次级卵母细胞中，成功培育出孤雌小鼠，具体操作流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．甲基化重写没有改变卵母细胞的遗传信息，属于不可遗传的变异 B．体外培养卵母细胞时，需要在95%O2和5%CO2的气体环境中培养 C．移植的囊胚进一步扩大，导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来 D．孤雌小鼠一定为雌性，基因型不一定与提供卵母细胞的雌鼠相同 【答案】D 【分析】表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变，即基因型未发生变化而表型却发生了改变，如DNA的甲基化，甲基化的基因不能与RNA聚合酶结合，故无法进行转录产生mRNA，也就无法进行翻译，最终无法合成相应蛋白，从而抑制了基因的表达。 【详解】A、上述甲基化重写没有改变DNA的序列，则小鼠体内的遗传信息不会改变，但甲基化使得DNA无法转录，影响基因的表达，属于可遗传变异，A错误； B、体外培养卵母细胞时，需要在95%空气和5%CO2的气体环境中培养，B错误； C、囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化，C错误； D、“孤雌小鼠”是由两个生殖细胞（修饰后的次级卵细胞和另一个卵子的极体）结合后发育形成，同时由于配子在形成过程中会经历减数分裂的基因重组，或发生基因突变，将导致两个生殖细胞结合后的“孤雌小鼠”其基因型不一定与提供卵母细胞的雌鼠相同，但一定为雌性，D正确。 故选D。 10．（2025·湖南·三模）被称为“沙漠之舟”的单峰骆驼在野外几乎灭绝，科研人员为拯救濒危野化单峰骆驼，利用现代生物技术尝试进行人工培育，流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．过程①通常对B驯养单峰骆驼注射性腺激素使其超数排卵 B．野化单峰骆驼C可以选择雌性个体，也可以选择雄性个体 C．可用蛋白酶合成促进剂激活重构胚使其完成细胞分裂和发育进程 D．过程④为胚胎移植，需对受体注射免疫抑制剂使胚胎顺利植入 【答案】B 【分析】题图分析：图中①为卵母细胞采集，该过程常用促性腺激素处理B诱导其超数排卵；②为受精作用；③为体细胞和去核的卵母细胞形成重构胚；④为胚胎移植。 【详解】A、过程①通常对 B 驯养单峰骆驼注射外源促性腺激素使其超数排卵，A 错误； B、野化单峰骆驼 C 为提供细胞核的个体，可以选择雌性个体，也可以选择雄性个体，B 正确； C、可用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C 错误； D、过程④为胚胎移植，无须对受体注射免疫抑制剂，D 错误。 故选B。 11．（2025·河南·三模）科学家收集了来自5个捐赠者的干细胞，浸泡在一种精确配制的混合溶液中，培育出首个包含多人细胞的3D大脑模型。下列相关叙述错误的是（    ） A．3D大脑模型的建立说明干细胞具有发育的全能性 B．精确配制的混合溶液中含有定向诱导分化的物质 C．用干细胞培育出脑部细胞的过程需在无菌无毒环境中进行 D．该研究可探索大脑发育机制及人脑对新药物和新疗法的反应等 【答案】A 【分析】动物细胞培养条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物； （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质； （3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4； （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【详解】A、全能性是指发育为完整个体或分化为各种细胞的潜能，3D大脑模型的建立不能说明干细胞具有发育的全能性，A错误； B、干细胞能分化成脑细胞，说明培养液中含有定向诱导分化的物质，B正确； C、用干细胞培育出脑部细胞的过程需在无菌无毒环境中进行，故培养液需要有定期更换培养液等操作，C正确； D、科学家利用这种干细胞技术获得大脑模型后，可加深对脑科学的研究，例如，探索大脑的发育机制，预测人脑对新药物和新疗法的反应等等，D正确。 故选A。 12．（2025·陕西咸阳·三模）我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，性染色体组成为YY的胚胎不能发育。实验流程如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．卵细胞转化成phESC相当于植物组织培养中的脱分化过程 B．利用胚胎分割的方法对甲进行处理得到了多只遗传物质不同的孤雌小鼠 C．将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚来培育孤雄小鼠 D．图中方式得到的孤雄小鼠性染色体组成为XX、XY 【答案】B 【分析】1、卵细胞激活转化成phFSC，通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC，获得甲，从而得到孤雌小鼠； 2、精子激活转化成ahFSC，通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC，获得乙，从而得到孤雄小鼠。 【详解】A、卵细胞是高度分化的细胞，转化为孤雌胚胎干细胞phFSC，相当于植物组织培养中的脱分化阶段，A正确； B、利用胚胎分割的方法对甲进行处理得到了多只孤雌小鼠遗传物质一般相同，B错误； C、据图可知，要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，随后进一步发育为孤雄小鼠乙，C正确； D、孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以其性染色体可能是XX、XY或YY（致死），D正确。 故选B。 13．（2025·甘肃白银·三模）自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过如图所示的流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类的保护。下列叙述错误的是（　　） A．该实验没有运用胚胎移植技术 B．该实验说明物种甲和物种乙不存在生殖隔离 C．该实验中，子一代的遗传物质大部分来源于M鱼 D．M鱼的iPGCs在N鱼体内分化时，其基因表达会受N鱼生理环境影响 【答案】B 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。 【详解】A、本实验是将M鱼的诱导型原始生殖细胞(iPGCs)移植到N鱼胚胎中，并非将整个胚胎移植到另一母体内，因此没有运用胚胎移植技术，A正确； B、实验仅说明M鱼的iPGCs能在N鱼的生殖腺中分化并产生M鱼的配子，并不代表M、N两物种可直接杂交产生可育后代，因而并不能说明二者之间不存在生殖隔离，B错误； C、由于产生子一代的配子由M鱼的iPGCs发育而来，故子一代的遗传物质主要来自M鱼，C正确； D、M鱼的iPGCs在N鱼体内生长发育时受到N鱼生理环境的影响，其基因表达会发生相应调节，D正确。 故选B。 14．（2025·四川成都·三模）单倍体胚胎干细胞是研究基因功能的理想细胞模型，它只含一个染色体组，但具有类似于胚胎干细胞的分裂分化能力。研究人员利用小鼠细胞建立单倍体胚胎干细胞的操作流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．体外受精前，卵母细胞和精子都需要在获能液中培养使其获能 B．体外受精时，精子形成雄原核与卵子完成减数分裂Ⅱ同时进行 C．培养得到的单倍体胚胎干细胞，遗传物质来自精子和卵母细胞 D．单倍体胚胎干细胞不含等位基因，常用于研究隐性基因的功能 【答案】D 【分析】哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。 【详解】A、体外受精前需要对精子进行获能处理，需要将卵母细胞培养至减数分裂Ⅱ中期。“获能”这一术语通常用于描述精子，而非卵母细胞，A错误； B、精子进入卵母细胞后，会刺激卵母细胞完成减数分裂Ⅱ（排出第二极体），随后精子的细胞核逐渐形成雄原核。这两个过程是连续的，但并非严格同步进行，雄原核的形成发生在卵母细胞完成减数分裂Ⅱ之后，B错误； C、单倍体胚胎干细胞的遗传物质仅来源于精子或卵母细胞中的一个亲本。例如，图中操作流程通过去除雄原核保留雌原核的方式获得单倍体，则遗传物质来自卵母细胞，C错误； D、单倍体细胞仅含有一个染色体组，不存在同源染色体，因此不含等位基因（除非发生突变）。这使得隐性基因能够直接表型化，无需考虑显性等位基因的掩盖效应，因此单倍体胚胎干细胞是研究隐性基因功能的理想模型，D正确。 故选D。 15．（2025·吉林白城·三模）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列相关说法正确的是（    ） A．诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要是利用细胞膜的功能特点 B．与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的 B细胞不需要通过原代培养扩大细胞数量 C．在杂交瘤细胞筛选过程中，发生融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖 D．将待筛选抗体与该病毒基因A 进行杂交，呈阳性的就是所需的抗体 【答案】B 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要利用的是细胞膜的流动性，即细胞膜的结构特点，A错误； B、已免疫的B细胞是高度分化的细胞，不能分裂，故不需要进行原代培养，B正确； C、诱导细胞融合时，同种核型融合的细胞（即B细胞相互融合、骨髓瘤细胞相互融合）不能在选择培养基上正常增殖，只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞才能在选择培养基上正常增殖，C错误； D、待筛选的抗体是蛋白质，无法与基因A 进行杂交，应与蛋白A进行杂交，D错误。 故选B。 16．（2025·安徽·三模）科学家通过核移植技术成功培育了克隆猴等克隆动物。关于体细胞核移植过程，以下操作错误的是（    ） A．从卵巢中采集的卵母细胞需体外培养到MⅡ期，并尽快去除其纺锤体—染色体复合物 B．将体细胞注入去核的卵母细胞中并形成重构胚，该过程利用了细胞膜的流动性特点 C．卵母细胞可做显微操作，也可用紫外线照射等方法使卵母细胞去核或使其DNA变性 D．培养出早期胚胎，选择同种受体母畜进行胚胎免疫检查和发情处理，并做胚胎移植 【答案】D 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【详解】A、卵母细胞需体外培养到MⅡ期，去核是指去掉其纺锤体—染色体复合物，A正确； B、将体细胞注入去核的卵母细胞后，要用电融合法使两细胞融合，利用了细胞膜的流动性原理，B正确； C、卵母细胞可用显微操作去核，也可用紫外线短时间照射等方法在没有穿过卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性，C正确； D、胚胎移植过程中，受体几乎不会对来自供体的胚胎发生免疫排斥反应，所以无需对受体母畜进行胚胎免疫检查，D错误。 故选D。 17．（2025·吉林白城·三模）单倍体胚胎干细胞是指只含一套染色体，但拥有类似于正常干细胞分裂分化能力的细胞群。利用小鼠建立单倍体胚胎干细胞的操作如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．体外受精前应将卵母细胞培养至减数分裂Ⅰ中期 B．建立的单倍体胚胎干细胞中只含一条性染色体X或Y C．上述过程涉及动物细胞培养、体外受精等操作 D．理论上可用物质激活卵母细胞完成MⅡ实现由①直接转变为④ 【答案】C 【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来； 2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。 【详解】A、体外受精前应将卵母细胞培养至减数分裂Ⅱ中期，A错误； B、精子中含有的性染色体为X染色体或Y染色体，卵细胞中含有的性染色体为X染色体，由图可知，在建立单倍体胚胎干细胞过程中，是去除雄原核，所以获得的单倍体干细胞中含有的性染色体是X染色体，而不含Y染色体，B错误； C、由图可知，在培养单倍体胚胎干细胞的过程中，首先发生体外受精，然后通过核移植去除雄原核，再对去除雄原核的细胞进行培养，C正确； D、激活卵母细胞完成MⅡ得到的是卵细胞和极体，二者都不具备分裂能力，所以不能实现由①直接转变成④，D错误。 故选C。 18．（2025·重庆·三模）藏羊是高寒牧区的优良品种，繁殖率较低。为促进畜牧业发展，研究人员通过胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如下图。下列叙述错误的是（    ）      A．以观察到两个极体作为受精的标志 B．用外源促性腺激素促进甲超数排卵 C．胚胎移植前可采集外胚层细胞进行遗传筛选 D．筛选出的优质胚胎可在囊胚期，对内细胞团进行分割 【答案】C 【分析】1、胚胎工程是指对生殖细胞、受精卵或早期胚胎细胞进行多种显微操作和处理，然后将获得的胚胎移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。胚胎工程技术包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割等； 2、胚胎移植基本程序主要包括： （1）对供、受体的选择和处理； （2）配种或人工授精； （3）对胚胎的收集、检查、培养或保存； （4）对胚胎进行移植； （5）移植后的检查。 【详解】A、在受精过程中，当在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时，说明卵子已经完成了受精，所以以观察到两个极体作为受精的标志，A正确； B、在胚胎工程中，通常用外源促性腺激素处理供体母羊（甲），来促进其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞，B正确； C、胚胎移植前一般采集滋养层细胞进行遗传筛选，而不是外胚层细胞。因为采集滋养层细胞不会对胚胎的发育造成较大影响，且可以进行遗传物质的检测等操作，C错误； D、对于筛选出的优质胚胎，在囊胚期可以对内细胞团进行分割，因为内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，分割时需注意将内细胞团均等分割，以保证分割后胚胎的正常发育，D正确。 故选C。 19．（2025·吉林长春·三模）体细胞核移植技术在推动我国肉牛遗传育种发展上起到关键作用，下列有关叙述错误的是（    ） A．供体细胞需来自遗传性状优良的个体 B．采用紫外线短时间照射卵母细胞可达到去核的目的 C．利用Ca2+载体或电刺激可激活重构胚 D．选择原肠胚进行胚胎分割可提高胚胎利用率 【答案】D 【分析】动物细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞核的全能性。 【详解】A、体细胞核移植中，供体细胞的遗传性状决定了克隆个体的主要遗传特征，因此供体细胞需来自优良个体，A正确； B、卵母细胞的去核通常采用显微操作法（物理去除细胞核），此外采用紫外线短时间照射卵母细胞也可达到去核的目的，B正确； C、激活重构胚的常用方法包括电刺激和Ca2+载体，这些方法模拟精子入卵后的激活过程，C正确； D、胚胎分割应选择桑葚胚或囊胚阶段，此时细胞全能性高，分割后成活率高。原肠胚细胞已分化，分割后难以发育为完整个体，因此选择原肠胚无法提高胚胎利用率，D错误。 故选D。 20．（2025·四川达州·三模）我国研究人员以小鼠（2n=40）和大鼠（2n=42）为材料，通过细胞融合技术创造出一种新型干细胞——异种杂合二倍体胚胎干细胞，并通过胚胎移植产生子代，技术路线如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．单倍体胚胎①②均发育到囊胚阶段，其中的滋养层具有发育成胎盘和胎膜的能力 B．可以利用灭活病毒使细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，诱导细胞融合 C．接受胚胎移植的受体鼠需要被注射外源促性腺激素进行超数排卵处理 D．用甲紫溶液染色后可统计出子代鼠染色体共41条，其中有2条性染色体 【答案】C 【分析】 分析题图：小鼠的卵细胞体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体胚胎干细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体胚胎干细胞，两种胚胎融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞。 【详解】 A、胚胎①②均发育到囊胚阶段，该时期细胞出现分化，有内细胞团和滋养层，其中的滋养层具有发育成胎盘和胎膜的能力，A正确； B、可以利用灭活病毒使细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，诱导细胞融合，B正确； C、接受胚胎移植的受体鼠需要进行同期发情处理，不需要超数排卵处理，C错误； D、据图可知，异种杂合二倍体干细胞的染色体数为（40+42）/2=41条，其中有来自小鼠和大鼠的性染色体各一条，D正确。 故选C。 21．（2025·吉林·三模）下列有关动物细胞培养和胚胎发育的叙述，正确的是（    ） A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 B．体外培养的大多数细胞能够悬浮在培养液中生长 C．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 D．桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” 【答案】A 【分析】1、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始； 2、胚胎发育过程： （1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加； （2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）； （3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）； （4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。（细胞分化在胚胎期达到最大限度）。 【详解】A、动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，而胚胎细胞分化程度低，全能性容易表达，所以动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，A正确； B、体外培养的大多数细胞需要贴附在某些基质表面才能生长增殖，称为贴壁生长，而不是悬浮在培养液中生长，B错误； C、卵裂期胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎总体积基本不变或略有减小，由于细胞呼吸不断消耗有机物，所以有机物总量在不断减少，C错误； D、囊胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”，而不是桑葚胚，D错误。 故选A。 22．（2025·福建福州·三模）第三代试管婴儿技术也称为胚胎植入前遗传学检测（PGT），其原理是在胚胎植入子宫前，进行遗传学检测，挑选出健康的胚胎进行移植。下列叙述错误的是（　　） A．获能的精子能与刚采集到的卵母细胞受精 B．PGT可将胚胎培养至含内细胞团的囊胚期 C．胚胎移植前可取滋养层细胞做遗传学检测 D．移植后健康胚胎的发育受母体激素的影响 【答案】A 【分析】试管婴儿（体外受精联合胚胎移植技术）的培育过程是：体外受精→试管中发育→胚胎移植→母体中发育 【详解】A、刚采集到的卵母细胞需培养成熟至MI期才能与获能的精子受精，A错误； B、囊胚期是胚胎发育的一个阶段，包含内细胞团和滋养层细胞，其中内细胞团具有全能性，故PGT可将胚胎培养至含内细胞团的囊胚期，B正确； C、滋养层将来发育为胎儿的胎膜和胎盘，胚胎移植前可取滋养层细胞做遗传学检测，C正确； D、胚胎移植后，其发育过程会受到母体激素（如雌激素等）的调节，这些激素对胚胎的着床和发育至关重要，D正确。 故选A。 23．（2025·陕西商洛·三模）乳糖不耐受症是由人体肠道内缺乏乳糖酶，无法有效分解牛奶中的乳糖（一种双糖）所导致的消化系统问题。我国某科研团队成功培育出转基因“低乳糖奶牛”，相关技术流程如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．与植物细胞培养不同，动物细胞培养的培养基中需要添加血清等天然成分 B．将乳糖酶基因导入胚胎成纤维细胞的常用方法是显微注射法 C．可以使用蛋白酶合成抑制剂法激活重构胚，使重构胚完成细胞分裂和发育进程 D．激活的重构胚需要移入受体母牛体内培养，生出的犊牛的遗传性状与受体母牛的相似 【答案】D 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。 【详解】A、与植物细胞培养不同，动物细胞培养的培养基中需要添加血清等天然成分，以保证动物细胞的正常生长，A正确； B、将乳糖酶基因导入胚胎成纤维细胞（动物细胞）的常用方法是显微注射法，B正确； C、重组细胞2在培养液中培养成的重组胚胎需激活才能移入受体母牛体内，可以使用蛋白酶合成抑制剂法激活重构胚，使重构胚完成细胞分裂和发育进程，C正确； D、生出的犊牛的遗传性状与图中的黑白花奶牛 的相似，D错误。 故选D。 二、多选题 24．（2025·江苏盐城·三模）科学家通过培育小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞，成功获得了“1母亲0父亲”的雌性小鼠，且该雌性小鼠能正常生殖产生后代，有关技术如图所示。下列相关叙述正确的是（    ）    A．用雌激素对母鼠进行超数排卵处理可以获得更多的卵母细胞 B．图中过程①②的分裂方式分别为减数分裂和有丝分裂 C．用于过程③的细胞取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团 D．第2阶段的卵子为次级卵母细胞，过程④为减数分裂II的部分过程 【答案】BCD 【分析】分析图示，图示是科学家通过培育小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞，获得“1母亲0父亲”的雌性小鼠的过程，共包括两个阶段。 【详解】A、促性腺激素可促进生殖细胞的形成，因此应用促性腺激素处理母鼠进行超数排卵，以获得更多的卵母细胞，A错误； B、过程①是由处理过的卵母细胞形成卵细胞，为减数分裂，过程②是由卵细胞形成孤雌单倍体囊胚，为有丝分裂，B正确； C、囊胚的内细胞团具有全能性，可形成胚胎干细胞，因此用于过程③的细胞应取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团，C正确； D、卵母细胞发育到减数第二次分裂时才具有受精能力，将孤雌单倍体胚胎干细胞注入卵子内，模拟的是受精过程，因此第2阶段的卵子为次级卵母细胞，经过④过程可看到两个极体，说明过程④为减数分裂II的部分过程，D正确。 故选BCD。 25．（2025·黑龙江大庆·三模）线粒体置换技术可用于预防母系线粒体遗传疾病。次级卵母细胞减数分裂Ⅱ中期（MI中期）形成的纺锤体-染色体复合体（X）可用于该技术以获得正常个体，过程如图。下列说法错误的是（    ） A．患者卵母细胞提供的X与供体卵母细胞去除的“细胞核”结构相同 B．胚胎的遗传物质来自三个亲本，供体携带的色盲基因会遗传给胎儿 C．重组次级卵母细胞可与获得能量后的精子完成受精作用 D．图示获得子代个体的生殖方式与动物克隆的生殖方式相同 【答案】BCD 【分析】1、分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、体外受精、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。 2、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。原理是动物细胞核具有全能性，克隆动物的遗传物质来自双亲，其核遗传物质来自供核生物，而细胞质基因来自提供细胞质的生物。 【详解】A、患者卵母细胞提供的X为纺锤体-染色体复合体，供体卵母细胞去除的“细胞核”也是纺锤体-染色体复合体，因此两者结构相同，A正确； B、胚胎的遗传物质来自三个亲本，细胞质基因来自供体，细胞核基因分别来自患者和精子，色盲基因位于X染色体上，由于供体只提供细胞质基因，因此供体携带的色盲基因不会遗传给胎儿，B错误； C、精子获能是指精子在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力，并非获得能量，使精子获能的方法有直接利用雌性动物的生殖道使精子获能；将精子培养在人工配制的获能液中使其获能等，C错误； D、动物克隆属于无性生殖，图示获得子代个体经过了受精作用，属于有性生殖，因此两者生殖方式不同，D错误。 故选BCD。 26．（2025·辽宁·三模）科学家通过培育小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞，成功获得了“1母亲0父亲”的雌性小鼠，且该雌性小鼠能正常生殖产生后代，有关技术如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．用雌激素对母鼠进行超数排卵处理可以获得更多的卵母细胞 B．图中过程①②的分裂方式分别为减数分裂和有丝分裂 C．用于过程③的细胞取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团 D．第2阶段的卵子为次级卵母细胞，过程④为减数分裂II的部分过程 【答案】BCD 【分析】分析图示，图示是科学家通过培育小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞，获得“1母亲0父亲”的雌性小鼠的过程，共包括两个阶段，据此分析作答。 【详解】A、促性腺激素可促进生殖细胞的形成，因此应用促性腺激素处理母鼠进行超数排卵，以获得更多的卵母细胞，A错误； B、过程①是由处理过的卵母细胞形成卵细胞，为减数分裂，过程②是由卵细胞形成孤雌单倍体囊胚，为有丝分裂，B正确； C、囊胚的内细胞团具有全能性，可形成胚胎干细胞，因此用于过程③的细胞应取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团，C正确； D、卵母细胞发育到减数第二次分裂时才具有受精能力，将孤雌单倍体胚胎干细胞注入卵子内，模拟的是受精过程，因此第2阶段的卵子为次级卵母细胞，经过④过程可看到两个极体，说明过程④为减数分裂II的部分过程，D正确。 故选BCD。 三、实验题 27．（2025·福建泉州·三模）科研人员制备双父源(遗传物质来自两个雄原核)小鼠，以期为濒危动物保护提供新思路。在研究过程中，发现双父源小鼠胚胎过度生长、器官畸形，无法形成功能性胎盘，这与基因组印记有关。已知印记基因是一类对生物个体发育具有重要调控作用的基因，这类基因表达与否取决于它们所在染色体的来源(父源或母源)，父源的印记基因能促进胚胎生长发育，母源的印记基因能抑制胚胎过度生长并促进胎盘生长。我国科研人员利用相关工程技术成功培育出双父源小鼠，相关技术流程如图所示。请回答： (1)培育单倍体胚胎干细胞(haESCs)。对雌鼠注射 使其超数排卵，选择 期的卵母细胞去核，并与精子甲完成受精；进而将获得的单倍体胚胎干细胞置于95%空气和 气体条件下进行培养。 (2)编辑haESCs印记基因。研究人员运用CRISPR/Cas9编辑系统对相关印记基因进行编辑，该编辑系统由一个具有剪切DNA链的蛋白质(Cas9)和一段将Cas9精确地引导到基因组中的特定位置的RNA(gRNA)结合而成。为精确对印记基因进行编辑，应制备 的gRNA。 (3)培育胚胎干细胞a。将精子乙和编辑印记基因的haESCs共注射到去核卵母细胞2中，经诱导培育得到二倍体的胚胎干细胞a。其中对haESCs进行印记基因编辑的目的是 。 (4)培育印记基因编辑小鼠。 ①从代孕小鼠中收集一个2细胞胚，经 处理获得四倍体胚胎，体外培养至囊胚阶段，其作用一方面是四倍体囊胚无法正常发育成个体，从而保证培育出工程小鼠的细胞核遗传物质来自 ；另一方面，为胚胎干细胞a提供 。 ②将胚胎干细胞a注入四倍体囊胚中，运用 技术送入代孕小鼠，进而培育出印记基因编辑小鼠。 【答案】(1) 促性腺激素/外源促性腺激素 MⅡ期/减Ⅱ中/减数分裂Ⅱ中期 5%CO2/5%二氧化碳 (2)与印记基因相应序列碱基互补配对/与印记基因一条链特异性结合 (3)使胚胎干细胞a能正常发育/避免胚胎发育时过度生长、器官畸形，无法形成功能性胎盘 (4) 诱导细胞融合（写具体的物理方法，化学方法或者灭活病毒） 精子甲和精子乙 发育所需的营养等条件 胚胎移植 【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 2、培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值）。 【详解】（1）超数排卵是指应用外源促性腺激素，诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子；成熟的卵母细胞处于减数第二次分裂中期，可以选用该时期的卵母细胞去核；体外培养动物细胞应置于含有95%空气和5% CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 （2）研究人员运用CRISPR/Cas9编辑系统对相关印记基因进行编辑，应制备与印记基因相应序列碱基互补配对的gRNA，以准确确定基因组中的特定位置的基因。 （3）父源的印记基因能促进胚胎生长发育，母源的印记基因能抑制胚胎过度生长并促进胎盘生长，对haESCs进行印记基因编可使胚胎干细胞a能正常发育。 （4）①2细胞胚融合能形成四倍体胚胎；母源的印记基因能抑制胚胎过度生长并促进胎盘生长，培育印记基因编辑小鼠，体外培养至囊胚阶段，其作用一方面是四倍体囊胚无法正常发育成个体，从而保证培育出工程小鼠的细胞核遗传物质来自精子甲和精子乙；另一方面，为胚胎干细胞a提供发育所需的营养等条件。②胚胎移植可以将体外发育的胚胎移植到子宫中。 四、解答题 28．（2025·宁夏银川·三模）“TK-GCV”系统是一种特异性自杀基因系统。TK基因导入宿主细胞产生的TK酶可将无毒的前体药物更昔洛韦（GCV）转化为有毒性的物质，阻断DNA链的延伸，抑制细胞分裂，最终使细胞凋亡。某研究团队将“TK-GCV”应用于奶山羊育种中，操作流程如图所示。 回答下列问题： (1)TK酶通过抑制 酶的活性而影响细胞分裂。为了获得更多的卵母细胞，需对奶山羊乙注射促性腺激素，并将获得的卵母细胞培养至 期去核，早期胚胎移植前需对奶山羊丙进行 处理。 (2)为了检测图中转基因奶山羊TK基因是否成功表达，可采用的检测方法是 ，检测结果显示细胞中TK基因正常表达，但细胞仍能正常分裂，原因是 。 (3)研究者将TK基因插入奶山羊的Y染色体上，分析此研究中“TK-GCV”自杀基因系统在奶山羊育种中的意义是 。 【答案】(1) DNA聚合 减数第二次分裂中 同期发情 (2) 抗原-抗体杂交 未使用无毒的前体药物更昔洛韦（GCV） (3)使含Y染色体的受精卵不能发育，从而筛选出雌性胚胎 【分析】克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】（1）TK酶可将无毒的前体药物更昔洛韦（GCV）转化为有毒性的物质，阻断DNA链的延伸，抑制细胞分裂，DNA复制时，DNA聚合酶的作用就是形成磷酸二酯键，从而延伸DNA链，故TK酶通过抑制DNA聚合酶的活性而影响细胞分裂。为了获得更多的卵母细胞，需对奶山羊乙注射促性腺激素，并将获得的卵母细胞培养至减数第二次分裂中期去核。对早期胚胎移植前需对奶山羊丙进行同期发情处理，便于移植胚胎的正常发育。 （2）TK基因成功表达的产物是蛋白质，可采用的检测方法是抗原-抗体杂交技术。TK酶可将无毒的前体药物更昔洛韦（GCV）转化为有毒性的物质，阻断DNA链的延伸，抑制细胞分裂，最终使细胞凋亡。检测结果显示细胞中TK基因正常表达，但细胞仍能正常分裂，原因是未使用无毒的前体药物更昔洛韦（GCV），从而缺少有毒性的物质。 （3）将TK基因插入奶山羊的Y染色体上，含Y染色体的受精卵会因为TK酶的存在而无法分裂，不含Y染色体的受精卵则能正常完成胚胎发育，因此此研究中“TK-GCV”自杀基因系统在奶山羊育种中的意义是使含Y染色体的受精卵不能发育，从而筛选出雌性胚胎。 29．（2025·湖南郴州·三模）2019年我国科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和体细胞核移植（SCNT）技术，成功构建了世界首例体细胞BMAL1基因（产生昼夜节律必需的基因）敲除的生物节律紊乱猕猴，为相关疾病研究提供了新型动物模型，其基本构建流程如图所示。CRISPR/Cas9基因编辑系统能在DNA特定位置进行切割，被切割的DNA修复时会发生基因突变而导致靶基因失活，第一代BMAL1基因敲除猴的5只个体表现出不同程度的节律紊乱症状。为进一步获得理想动物模型，研究团队采集A6个体的成纤维细胞，经SCNT后最终获得多只第二代BMAL1基因敲除猕猴模型。请回答下列相关问题：    (1)在猕猴各级神经中枢中，与生物节律控制有关的中枢在 。 (2)经CRISPR/Cas9基因编辑和胚胎移植获得的第一代BMAL1基因敲除猴的不同个体表现出不同程度的节律紊乱症状，原因是 。 (3)实验中采集的卵母细胞通常在体外培养至 期，进行动物成纤维细胞体外培养时置于含有 气体的培养箱中。核移植成功后，用 （填具体方法，写出2种即可）去激活重构胚。 (4)为提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员还将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重组融合细胞，推测Kdm4d的mRNA的作用是 。 (5)与第一代BMAL1基因敲除猴模型相比，第二代猕猴模型用于研究生物节律紊乱及相关药物研发的优势是 （写出1点即可）。 【答案】(1)下丘脑 (2)CRISPR/Cas9对不同个体的DNA特定位置进行切割，被切割的DNA修复时最终导致不同位点的基因突变 (3) MⅡ 95％空气和5％的CO2的混合 电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等 (4)降低组蛋白的甲基化程度，有利于与细胞分裂和分化相关基因的表达 (5)遗传背景一致 【分析】动物细胞培养的条件营养：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。（通常需要加入血清等一些天然成分）无菌、无毒的环境：添加抗生素温度、pH和渗透压：36.5±0.5℃ 7.2~7.4。气体环境：O2是细胞代谢所需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱进行培养。动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 【详解】（1）在猕猴各级神经中枢中，与生物节律控制有关的中枢在下丘脑。 （2）CRISPR/Cas9对不同个体的DNA特定位置进行切割，被切割的DNA修复时最终导致不同位点的基因突变，所以不同个体表现出不同程度的节律紊乱症状。 （3）由于MII期卵母细胞具备受精能力，细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质核营养条件，实验中采集的卵母细胞通常在体外培养至MⅡ期，进行动物成纤维细胞体外培养时置于含有95％空气和5％的CO2的混合气体的培养箱中。核移植成功后，用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等去激活重构胚。 （4）去甲基化酶Kdm4d的mRNA，翻译产生去甲基化酶，可以降低组蛋白的甲基化程度，有利于与细胞分裂和分化相关基因的表达。 （5）根据提示，第二代基因敲除猴是由A6的成纤维细胞进行克隆获得，因此他们的基因型应该相同，因此将第二代猕猴模型用于研究生物节律紊乱及相关药物研发的优势是遗传背景一致。 30．（2025·陕西宝鸡·三模）目前，我国每年试管婴儿数量逾20万例。试管婴儿的培育过程大致是：…促排卵→监测卵泡→取卵→取精→体外受精→胚胎体外培养→基因检测、染色体检测→胚胎移植后补充黄体酮→确定是否妊娠→B超检查胎儿……。结合课本回答下列问题： (1)试管婴儿的培育过程中，获取的新鲜精液所含精清中有抑制精子获能的物质，可以通过 除去以利于精子获能。精子、卵细胞、受精卵的体外培养有严格要求，必需满足无菌、无毒的环境，一定的营养物质，以及温度、pH和气体等条件，该气体条件指的是 。 (2)如果想得到同卵双胞胎，应采用的技术是 。如果处理的是囊胚阶段的胚胎，要注意 。 (3)胚胎在植入前会进行基因检测。若要筛查血友病基因，可以使用 作探针进行检测。胚胎在植入前还要进行染色体检查，请分析该技术对人口优生的益处与对性别比例的潜在影响：①对优生的益处是 ；②对性别比例的潜在影响是 。 (4)试管婴儿技术中胚胎工程的最后一道“工序”是胚胎移植，该操作的实质是 。 【答案】(1) 离心处理 含95%空气和5%的CO2 (2) 胚胎分割 将内细胞团均等分割 (3) 放射性同位素（荧光分子）标记血友病基因的DNA片段 规避染色体病 可能用于选择胎儿性别 (4)早期胚胎在相同生理环境下空间位置的转移 【分析】1、试管动物技术--是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。 2、胚胎分割时，一般采用发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。对囊胚期的胚胎进行分割时，要特别注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。来自同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，因此，胚胎分割可以看作动物无性繁殖（或克隆）的方法之一。 【详解】（1）获取的新鲜精液所含精清中有抑制精子获能的物质，因为精子与精清所含重量不同，所以可以通过离心处理除去以利于精子获能。精子、卵细胞、受精卵的体外培养有严格要求，必需满足无菌、无毒的环境，一定的营养物质，以及温度、pH和气体等条件，该气体条件指的是​​95%空气（细胞代谢必需的）和5% CO₂（维持培养液的pH）。​​ （2）如果想得到同卵双胞胎，应采用的技术是​​胚胎分割​​。胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。如果处理的是囊胚阶段的胚胎，要注意​​将内细胞团均等分割​​，因为内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，如果分割不均，会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 （3）若要筛查血友病基因，由于血友病是伴X染色体隐性遗传病，可以使用​​放射性同位素（荧光分子）标记血友病基因的DNA片段进行检测，通过DNA分子杂交技术来检测是否存在血友病基因。 ①对优生的益处是：​​避免一些遗传病患儿的出生，提高人口素质​​。通过染色体检查可以筛选出染色体异常的胚胎，规避染色体病的遗传病患儿的出生。 ②对性别比例的潜在影响是：​​可能会破坏人类正常的性别比例​​。如果在染色体检查时，可能用于选择胎儿性别，可能会导致出生婴儿的性别比例失衡。 （4）试管婴儿技术中胚胎工程的最后一道“工序”是胚胎移植，该操作的实质是​​早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移​​。胚胎移植后，在受体子宫内继续发育，最终诞生新个体。 31．（2025·四川眉山·三模）以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a～h为操作过程，请据图回答有关问题：    (1)图中c的操作名称是 ，d、f的操作名称是 。 (2)图中的精子获取之后要进行 处理，良种奶牛用 激素处理后获得了更多的卵母细胞，卵母细胞受精后发育可得到早期胚胎；图中早期胚胎属于胚胎发育的 期，其中胚胎干细胞来源于 （填数字标号）。 (3)图中A、B牛的性别 （填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。 【答案】(1) 胚胎分割 胚胎移植 (2) 获能 促性腺 囊胚 ③ (3)相同 【分析】分析题图：a表示体外受精、b是胚胎发育过程、c是胚胎分割、d和f表示胚胎移植、e和g是妊娠、h表示将目的基因导入受体细胞的过程。b过程形成的是囊胚，其中①是滋养层细胞、②是囊胚腔、③是内细胞团细胞。 【详解】（1）图中c的操作名称是胚胎分割，需将内细胞团均等分割。d、f的操作名称是胚胎移植，即将早期胚胎移植到母体子宫内。 （2）图中的精子获取之后要进行获能处理，然后才具备与卵细胞受精的能力。良种奶牛用促性腺激素处理后可获得更多的卵母细胞。图中早期胚胎属于胚胎发育的囊胚期，②是囊胚腔。其中胚胎干细胞来源于③内细胞团细胞，具有全能性。 （3）图中A、B牛是胚胎分割移植获得的，是由同一个受精卵发育而来的，性别相同。 32．（2025·河北秦皇岛·三模）中国科学家培育出的转基因瘦肉猪比正常猪脂肪少24%，这可大量减少甚至杜绝养殖户对瘦肉精的使用，其培养过程如图所示。请回答下列问题： (1)将UCP1基因其导入到猪胎儿成纤维细胞之前，最关键的步骤是 。将重组质粒导入成纤维细胞常用的方法是 。 (2)图中空白方框为 细胞（包含具体时期），选用该细胞的理由是其含有 的物质。 (3)进行胚胎移植时胚胎应发育到 阶段，为了同时获得多个转基因猪，可采用胚胎分割技术进行分割时应注意 ，以免影响分割胚胎的恢复和进一步发育。 (4)囊胚能在代孕母猪体内存活的生理学基础是 。进行胚胎移植时需对代孕母猪进行同期发情处理的目的是 。 【答案】(1) 构建UCP1基因的表达载体 显微注射法 (2) MII期的卵母 激发供体核表达全能性 (3) 桑葚胚或囊胚 将囊胚时期的内细胞团进行均等分割 (4) 受体对移入的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应 为胚胎移入受体提供相同的生理环境，确保胚胎移植后能正常发育 【分析】基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 【详解】（1）UCP1基因是本题的目的基因，将其导入猪胎儿成纤维细胞之前最关键的步骤是构建UCP1基因的表达载体。将重组质粒导入成纤维细胞常用的方法是显微注射法。 （2）核移植过程中一般选卵母细胞去核后做受体细胞，故图中空白方框中一般选用处于减数第二次分裂中期(MII)的卵母细胞，这是因为MII期的卵母细胞中含有激发供体核表达全能性的物质。 （3）胚胎移植一般选择发育到桑葚胚或囊胚时期的胚胎进行移植，胚胎分割时，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，以免影响胚胎的恢复和进一步发育。 （4）囊胚能在代孕母猪体内存活的生理学基础是受体对移入的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。同期发情处理可以使供体和受体生理状态达到一致，为胚胎移植的成功提供关键条件，因此进行胚胎移植时需对代孕母猪进行同期发情处理。 33．（2025·河南·三模）人溶菌酶（HLZ）是一种人体内天然存在的具有抗菌、抗病毒、抗炎、增强免疫力等特性的蛋白质，它能水解细菌的细胞壁而将其杀死，细菌对其完全不存在耐受性，也无免疫原性。科学家培育出转基因HLZ山羊，从其乳汁中提取HLZ。请回答下列问题： (1)要获得大量的HLZ需要采用PCR技术对HLZ基因进行扩增，在该技术中复性的目的是 。 (2)切割质粒时最好选用两种不同的限制酶切割。若HLZ基因两端不存在这两种限制酶的识别序列，则在扩增前需要在基因模板链的 端加入两种限制酶的识别序列。选择两种不同的限制酶切割目的基因和质粒 （填“一定”或“不一定”）能防止目的基因自身环化。 (3)若用细菌的质粒构建HLZ基因的表达载体，需将其启动子替换后，目的基因才能在真核细胞中表达，主要原因是 。 (4)将构建的基因表达载体常采用 的方法导入注入山羊的受精卵中，发育成早期胚胎后移植到受体羊的子宫内，胚胎在受体中存活的基础是 。 【答案】(1)使两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合（使引物与单链相应互补序列结合） (2) 3′ 不一定 (3)真核生物和原核生物的RNA聚合酶识别和结合的启动子有所不同（启动子具有物种特异性） (4) 显微注射 受体对外来胚胎不发生免疫排斥反应 【分析】PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。 【详解】（1）PCR扩增时复性的目的是使两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 （2）扩增目的基因前需在目的基因模板链的3′端添加限制酶的识别序列；用两种不同的限制酶切割质粒及目的基因可能产生平末端或相同黏性末端，不一定能防止质粒和目的基因自身环化。 （3）由于真核生物和原核生物的RNA聚合酶识别和结合的启动子有所不同，因此从原核细胞中获取的质粒不适用于直接构建真核细胞中的表达载体，其启动子需要进行替换才有可能在真核细胞中表达。 （4）将基因表达载体导入动物细胞常采用显微注射法；早期胚胎在受体中成活的原因是受体对外来胚胎不发生免疫排斥反应。 试卷第1页，共3页 2 / 2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题14 细胞工程 考点概览 考点01 植物细胞工程 考点02 动物细胞工程 考点03 胚胎工程 植物细胞工程考点01 一、单选题 1．（2025·山西·三模）紫杉醇是一种具有抗癌活性的化合物，紫杉醇的工厂化生产流程为：红豆杉器官→愈伤组织→悬浮细胞培养→筛选稳定高产紫杉醇的细胞群→利用搅拌式生物反应器进行培养→提取紫杉醇。下列叙述正确的是（　　） A．红豆杉幼嫩器官易被诱导形成愈伤组织，该过程不会发生基因的选择性表达 B．一般用果胶酶和纤维素酶处理愈伤组织，获得原生质体后再进行悬浮细胞培养 C．生产次生代谢产物紫杉醇的过程中，利用了植物细胞具有全能性的原理 D．利用搅拌式生物反应器培养，有利于细胞进行有氧呼吸和充分利用营养物质 2．（2025·山西·三模）我国科研人员以高产、抗病性弱的小麦细胞（鲁麦22）和抗逆性强、营养高的燕麦细胞（白燕2号）为实验材料，通过优化原生质体制备、融合等流程，获得了杂种小麦新品系。下列分析错误的是（　　） A．鲁麦22和白燕2号原生质体制备前应去除细胞壁 B．聚乙二醇、高Ca2+—高pH溶液均能促进原生质体融合 C．诱导融合后的细胞即为杂种小麦细胞 D．杂种小麦细胞可能具有高产、优质、抗逆性强等优势 3．（2025·甘肃白银·三模）睡茄内酯是催眠睡茄（茄科）产生的次生代谢物，具有重要的药用价值。科研人员利用植物细胞悬浮培养生物反应器培养催眠睡茄细胞以大量获得睡茄内酯。下列叙述正确的是（    ） A．该培养过程体现了细胞的全能性 B．适度搅拌有利于供应 C．该培养过程中会出现接触抑制现象 D．睡茄内酯是催眠睡茄生长所必需的 4．（2025·山东泰安·三模）在不同纬度、海拔、气候和不同土质条件下，植物体内次生代谢物含量有很大差异。例如，金鸡纳树皮中产生奎宁，而在雨季土壤湿度高时金鸡纳树皮不产奎宁。若通过植物组织培养技术生产奎宁，下列说法正确的是（    ） A．奎宁是金鸡纳生长和生存所必需的一种代谢活动的产物 B．植物组织培养过程中，对外植体用酒精消毒后立即用清水清洗 C．接种了外植体的培养基中会先后发生脱分化和再分化 D．植物组织培养过程中有可能出现奎宁分泌量增多的突变体 5．（2025·山东滨州·二模）关于植物组织培养和动物细胞培养过程，下列说法正确的是（    ） A．培养基都需要进行灭菌处理并需要定期更换 B．应用的培养基都属于固体培养基且需要加入糖类 C．二者都在完全密封的条件下进行且对温度、pH和渗透压有要求 D．培养过程都体现了细胞的全能性且存在基因的选择性表达 6．（2025·安徽阜阳·三模）紫草素是从我国传统中药植物紫草中提取出来的一种脂溶性萘醌类化合物。多项研究表明紫草素具有抗炎、免疫抑制作用。下图为紫草素的提取流程图，有关叙述错误的是（    ） 紫草外植体愈伤组织单个细胞高产细胞群紫草素 A．①过程中需要在培养基中加入一定比例的植物激素才能获得愈伤组织 B．紫草素能够从愈伤组织细胞中获得，因此判断紫草素是次生代谢产物 C．在工厂化生产紫草素的过程中，无须培养出完整的紫草植株 D．该流程主要通过促进细胞增殖来提高紫草素的产量 7．（2025·四川乐山·三模）某研究小组进行微型月季的快速繁殖研究，结果如表所示。 流程 最佳措施或最适培养基 ①外植体腋芽消毒 75%乙醇浸泡30s+5%NaClO浸泡6min ②诱导出丛生苗 MS+3.0mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA ③丛生苗的扩增 MS+2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA ④丛生苗的生根 1/2MS+0.25mg·L-1IBA+0.25mg·L-1NAA 注：从生苗为丛状生长的幼苗，IBA（吲哚丁酸）为生长素类物质 下列叙述错误的是（    ） A．流程①的效果受消毒剂浓度、消毒时间等因素的影响 B．本实验中流程②无需经过脱分化形成愈伤组织的阶段 C．与流程②相比，流程③培养基中NAA与IBA比值更大 D．适当提高流程④培养基中IBA浓度更利于从生苗生根 8．（2025·陕西咸阳·三模）下图是利用甲、乙两种植物的各自优势，通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植株的实验流程图。下列相关叙述错误的是（    ） A．科研人员用蜗牛消化道提取液进行a处理来制备原生质体，说明该提取液中含有胰蛋白酶 B．b是诱导融合后的杂种细胞，其细胞内的染色体数目比任何一方亲本细胞中染色体数目多 C．具有耐盐性状的c需要先移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土 D．在高盐环境中进行d选择获得的目的植株，其形态特征、生理特性等表型与双亲存在差异 9．（2025·重庆·三模）图为利用植物组织培养技术繁殖菊花的示意图。相关叙述正确的是（    ） A．只有培养脱毒菊花试管苗才需要对分离的外植体进行消毒处理 B．再分化阶段提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根 C．再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 D．刚培育出的试管苗弱小，应携带培养基炼苗后再移栽至花盆 10．（2025·江苏·三模）紫花苜蓿（2n=32）是利用最广泛的豆科牧草，但青饲易造成家畜臌胀病。百脉根（2n=24）富含缩合单宁，能防止反刍动物臌胀病的发生。为了改良苜蓿饲用品质，研究人员采用植物体细胞杂交技术培育抗臌胀病型苜蓿，过程如下图。相关叙述正确的是（    ）    A．过程①需选择合适的酶并控制酶的浓度，可调控渗透压防止原生质体吸水涨破 B．过程②降低了紫花苜蓿和百脉根原生质体的活性，其目的是降低杂种愈伤组织细胞的活力 C．与单一PEG诱导融合相比，过程③使用PEG-高Ca2+-高pH法可提高原生质体融合的特异性 D．过程⑤获得的杂种植物功效有差异的可能原因有染色体组成不同、遗传物质表达差异等 11．（2025·江苏·三模）发菜既能光合自养又能异养，其分泌的胞外多糖具有增强免疫抗癌等功效。为了给生产发菜多糖提供理论基础，研究人员发明了两阶段摇瓶培养法能快速生产发菜多糖，第一阶段采用光合自养培养获得足量的发菜细胞，第二阶段采用混合营养培养（光合自养+异养培养）合成发菜多糖。相关叙述错误的是（    ） A．采用摇瓶培养的目的是增加培养液中的溶氧量与营养物质的利用 B．与第二阶段培养相比，第一阶段培养不易被杂菌污染，有利于发菜细胞增殖 C．第二阶段培养中，光合作用和葡萄糖氧化代谢可相互影响促进多糖的合成 D．发菜分泌的胞外多糖属于发菜的次级代谢产物，可通过工厂化生产获得 12．（2025·浙江温州·三模）研究小组探究不同浓度植物生长调节剂对离体榛子带芽茎段的腋芽诱导和生根诱导的影响，腋芽增殖倍数反映腋芽生长情况，实验结果如表所示。 腋芽诱导MS培养基+蔗糖30 生根诱导1/2MS培养基+蔗糖15 6-BA浓度（mg/L） NAA浓度（mg/L） 腋芽增殖倍数 NAA浓度（mg/L） 生根率（%） 愈伤组织情况（mg/L） 0 0 0 0.08 88.5 无愈伤组织 0 1.5 0 0.1 94.2 无愈伤组织 0.1 0 1.1 0.12 75.5 无愈伤组织 0.1 1.5 3.2 0.14 70.8 愈伤组织较多 据表分析，下列叙述错误的是（    ） A．为降低杂菌污染，可加入适宜的抗生素 B．培养基中含有6-BA可明显提高腋芽增殖倍数 C．生根诱导时较高浓度的NAA可促进细胞脱分化 D．提高培养基的渗透压有利于诱导榛子茎段生根 13．（2025·四川内江·三模）白菜和甘蓝为两种常见的二倍体蔬菜。我国科学家用植物体细胞杂交技术成功地培育出了“白菜—甘蓝”杂种植株，培育过程如下图所示，其中①~⑤表示过程，a~f表示相关结构或植株。下列相关叙述错误的是（　　） A．①过程可用蜗牛消化道提取液处理，②过程可用聚乙二醇诱导 B．④过程一般不需要光照，⑤过程需要给予适当时间和强度的光照 C．⑤过程诱导生根时，应适当提高培养基中细胞分裂素的比例 D．杂种植物具有两种生物的遗传物质，理论上能产生可育的后代 14．（2025·青海西宁·三模）研究人员通过植物细胞工程技术利用野生型马铃薯（A）和抗青枯病的茄子（B）进行体细胞杂交，培育抗青枯病马铃薯，实验流程如图。在进行“处理1”时，有时会使用到蜗牛消化道提取液。下列相关叙述错误的是（　　） A．蜗牛消化道提取液中可能含有果胶酶和纤维素酶 B．获得的A、B两种原生质体在清水中进行诱导融合 C．“甲→乙”过程和“乙→试管苗”过程需要更换培养基 D．为确定目的植株是否符合育种要求，还需对其进行青枯病抗性检测 15．（2025·福建泉州·三模）紫杉醇具有高抗癌活性。生产紫杉醇传统的方法是从红豆杉的树皮和树叶提取。但野生红豆杉是濒危植物，这种方法不利于红豆杉的保护。为兼顾保护和利用红豆杉，下列措施中，获取紫杉醇的最合理的是（　　） A．建立自然保护区，从自然凋落的枝叶中提取紫杉醇 B．推广人工种植红豆杉，直接提取树皮中的紫杉醇 C．利用植物细胞培养技术，工厂化生产紫杉醇 D．建立种子库，保存高产紫杉醇的红豆杉种质资源 16．（2025·黑龙江齐齐哈尔·三模）青蒿素是治疗疟疾的特效药物，主要从黄花蒿的茎叶中提取，图是利用黄花蒿叶片大量繁殖黄花蒿植株的部分过程。下列分析正确的是（　　） A．青蒿叶片切成小块前需要用体积分数95%的酒精和次氯酸钠进行消毒处理 B．青蒿素是黄花蒿生长和生存所必需的物质，属于植物体产生的初生代谢物 C．①过程表示诱导细胞脱分化形成愈伤组织的过程，期间一般不需要光照 D．与①过程相比，降低②培养基中生长素与细胞分裂素比值有利于生根 17．（2025·广东惠州·三模）研究人员利用杏鲍菇（具有双核，AA）和秀珍菇（具有单核，B）进行体细胞杂交，以期培养食用菌新品种，流程如图。已知异源融合子因异源基因相混合而获得新的遗传特性，表现出对亲株的拮抗作用，能够在培养基上观察到一条拮抗带。融合后的菌丝，在进行细胞分裂时，会形成一个喙状结构，而单核菌丝不会。 注：高温灭活使原生质体AA仅能生存而无法繁殖。 下列叙述正确的是（    ） A．可用灭活病毒诱导法诱导原生质体AA和原生质体B融合 B．促融后形成的融合菌株可能为AAAA、AAB、BB、AB C．步骤②中原生质体应在等渗溶液中进行培养并处理 D．若有喙状结构和无喙状结构同时出现在拮抗带，步骤③应选择无喙状结构的菌丝 18．（2025·河南郑州·三模）萦草宁具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性，是世界上首例药用植物细胞工程产品，生产流程如下图所示，下列相关叙述错误的是（    ） 外植体→愈伤组织→单细胞→高产细胞株→ A．可使用酒精和次氯酸钠溶液对外植体进行消毒 B．诱导愈伤组织形成时通常需加入生长素和细胞分裂素 C．紫草宁是紫草的次生代谢产物，并不是紫草生长所必需的 D．外植体形成愈伤组织的过程不涉及基因的选择性表达 19．（2025·贵州遵义·三模）紫杉醇是一种天然的抗癌药物，采用如图所示流程可提高紫杉醇生产的效率。下列相关叙述错误的是（　　）    A．紫杉醇是红豆杉细胞产生的次生代谢物 B．①为红豆杉外植体脱分化形成的愈伤组织 C．②过程利用胰蛋白酶将组织分散成单个细胞 D．真菌诱导因子可能增强紫杉醇合成酶基因的表达 20．（2025·福建三明·三模）铁皮石斛是珍贵中药材，野生资源稀缺，植物组织培养可用于铁皮石斛快速繁殖和脱毒。下列叙述正确的是（    ） A．铁皮石斛外植体应该用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒 B．选取幼嫩茎段为外植体时，接种时注意外植体不要倒插 C．利用铁皮石斛茎尖作为外植体，通过植物组织培养可获得抗毒苗 D．细胞分裂素与生长素的比值在生根培养基中比生芽培养基中更大 21．（2025·广西·三模）如图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产次级代谢产物生物碱的实验流程。下列说法正确的是（    ）    A．过程①需要先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁形成原生质体 B．过程②属于再分化，受生长素和细胞分裂素比例的影响 C．培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量值大的PLBs D．生物碱不是铁皮石斛生长所必需的物质 22．（2025·浙江·三模）某校学生在实验室用紫外线作为诱变剂，欲筛选抗盐突变体。下列操作不合理的是（　　） A．可用其他性状优良的品种，对其萌发的种子进行诱变 B．与处理个体相比，处理细胞或原生质体的突变率较高 C．对愈伤组织进行诱变，在高盐培养基中筛选存活细胞 D．随着紫外线强度的增大，获得突变体的概率逐渐增加 23．（2025·四川成都·三模）下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（    ） A．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 D．生长素与细胞分裂素比值低时有利于愈伤组织的形成 24．（2025·吉林长春·三模）许多植物病毒的衣壳蛋白和酶系统在高温（35—45℃）下会发生变性。在通过组织培养生产切花菊脱毒苗的过程中，常取高温处理后的切花菊茎尖分生区为外植体。下列叙述错误的是（    ） A．选取茎尖分生区为外植体是因为其中病毒含量低 B．高温处理的主要目的是使组织中的病毒失去活性 C．高温处理后的外植体接种前不需再进行消毒处理 D．再分化过程通常需要给予适当时间和强度的光照 （2025·浙江嘉兴·三模）药用植物当归常用根入药，体内活性赤霉素（GA4）含量明显升高时，抽薹开花，根开始木质化，药用价值下降。研究人员利用植物快速繁殖技术培育了D1、D2两个品种，培育流程如图。D1在种植第二年春季高表达M酶基因，并抽薹开花；D2在种植第二年春季高表达N酶基因，继续营养生长。阅读材料完成下列小题：    25．下列关于当归快速繁殖过程的叙述，错误的是（    ） A．过程1一般需要对幼芽消毒 B．过程2一般需要给予光照 C．与过程2相比，过程3的培养基浓度较高 D．与过程3相比，过程4的环境湿度较低 26．当归体内有多种赤霉素，其中GA4具有生物活性。促进GA4合成的酶、药用价值较高的品种分别是（    ） A．N酶、D1 B．N酶、D2 C．M酶、D1 D．M酶、D2 27．（2025·河南·三模）白菜的线粒体上具有控制其雄性不育的基因，科学家对白菜的原生质体用紫外线照射使其染色体失活，与甘蓝的原生质体融合，培育出47个个体，其中4个个体是雄性不育的甘蓝植株。下列相关叙述正确的是（    ） A．用紫外线照射白菜的原生质体时一定会导致白菜的核基因全部失活 B．可用纤维素酶和果胶酶处理白菜的下胚轴得到单个的完整细胞 C．采用PEG诱导原生质体融合时，得到的两两融合的杂种细胞有1种 D．将融合细胞培育为完整个体时，通常需要在培养液中添加葡萄糖为植物细胞供能 28．（2025·四川达州·三模）野天麻是一种名贵的药用植物，具有镇静、抗癫痫等作用，对神经系统疾病有很好的治疗效果，其主要活性成分是天麻素。利用植物细胞工程可以生产天麻素，相关过程如图所示。下列叙述正确的是（    ）    A．可以用野天麻幼嫩的茎段作为外植体，外植体插入培养基时方向可以颠倒 B．诱导愈伤组织的培养基中需要添加无机盐、维生素、蔗糖等物质，并置于黑暗中培养 C．诱导生根培养基与诱导生芽培养基相比较，需要提高培养基中细胞分裂素的占比 D．图中两种生产天麻素的途径均体现出植物细胞的全能性，其中途径②更加高效 29．（2025·陕西商洛·三模）藿香长期种植会出现种质退化和容易感病的问题，研究人员对藿香进行辐射处理以获得性状优良的突变林，过程如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．过程①应选择分生组织、其分裂能力强，携带病毒少，甚至没有 B．过程②③④所用培养基添加的植物激素种类的比例不同 C．图中辐射处理不同阶段的组织或幼苗均会出现优良突变株 D．上述繁殖技术可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖 二、多选题 30．（2025·江西·三模）天然橡胶被誉为“黑色黄金”，花药离体培养是橡胶树育种的主要途径，基本流程如图。中国热科院为了提高橡胶树胚状体的数量，取培养35天后的愈伤组织2g，在不同浓度AgNO₃溶液的诱导作用下，统计各组胚状体总数，结果如表。下列分析错误的是（    ） AgNO₃浓度（mg·L⁻¹） 愈伤组织接种量（g） 胚状体总数（个） 0 2 4 2.5 2 13 5 2 35 10 2 21    A．花药离体培养要对花药进行灭菌，体现了植物生殖细胞的全能性 B．对普通橡胶树愈伤组织进行紫外线诱变处理，也可能获得高产橡胶树品种 C．探究 AgNO₃最适诱导浓度应在5~10 mg·L⁻¹之间设置更小梯度进行实验 D．诱导形成胚状体的培养基植物激素的比例与a试管中的培养基不同 动物细胞工程考点02 一、单选题 1．（2025·甘肃天水·三模）研究发现，采用2次克隆来制备转基因克隆动物，无论在重构胚的融合率、发育率还是移植受体妊娠率方面均明显高于传统的体细胞核移植。如图为2次克隆的简易流程图。下列有关叙述正确的是（    ）    A．胎羊X、Y的性状均完全取决于甲羊的遗传物质 B．制备供体细胞前可用胰蛋白酶消化胎羊的组织 C．胎羊Y细胞中线粒体DNA只来源于丙羊 D．2次克隆的重构胚融合成功率高是因为胎羊细胞的分化程度高 2．（2025·陕西咸阳·三模）科学家利用动物体细胞核移植（SCNT）技术成功克隆了一只存活到3岁的健康恒河猴ReTro。这是第一只活到成年的克隆恒河猴，标志着灵长类动物克隆技术取得了重大突破。下列叙述错误的是（    ） A．SCNT操作过程中注入受体细胞的可以是细胞核，也可以是细胞 B．可用物理或化学法激活重构胚，使其完成分裂和发育进程 C．恒河猴ReTro的性别是由卵母细胞的遗传物质决定的 D．SCNT技术在畜牧业、医药卫生以及其他领域有着广泛的应用前景 3．（2025·甘肃白银·三模）北极狼起源于30万年前的冰河时期，世界首例体细胞克隆北极狼在北京诞生，这是保护与培育濒危物种的新尝试与重要突破，其技术流程如图所示，①②③代表部分过程。下列叙述正确的是（    ） A．过程①是利用显微操作法去除细胞DNA和中心体 B．过程②可以将供体细胞植入处理后的卵母细胞 C．过程③可用载体激活重构胚的发育 D．该技术说明北极狼和比格犬不存在生殖隔离 （2025·天津滨海新·三模）阅读下列材料，完成下面小题。 腺相关病毒（AAV）是动物病毒中最简单的一类单链DNA病毒，可感染特定脑区特定神经细胞，并将基因整合到特定染色体上，当与腺病毒（ADV）同时感染时才能完成病毒的繁殖。 将M4基因或M3基因与绿色荧光蛋白基因（GFP）连接在特异性启动子后面，然后载入腺相关病毒（AAV）中；对小鼠进行转染，并进行药物相关实验。 在神经细胞中，钠离子的内流是动作电位去极化阶段的关键因素，可引发膜电位从静息状态（约-70mV）迅速上升至正值，从而触发神经冲动的传导；而氯离子的内流通常导致细胞膜超极化（膜电位进一步降低），抑制动作电位的产生，降低神经细胞的兴奋性。 4．下列培养基中，能用于腺相关病毒（AAV）培养的是（　　） A．动物细胞培养液+动物细胞+腺病毒 B．动物细胞培养液+动物细胞 C．LB液体培养基+大肠杆菌+腺病毒 D．LB液体培养基+大肠杆菌 5．利用AAV为载体，可实现对体内神经细胞的遗传改造。下列叙述错误的是（　　） A．与ADV相比，利用AAV做载体进行基因治疗安全性较高 B．体外扩增AAV病毒单链DNA 时加入的引物仅需一种 C．体外扩增DNA 所用的DNA 聚合酶能耐受90℃高温 D．可利用荧光显微镜观察鉴别神经细胞是否被遗传改造 6．药物CNO能与M3蛋白（Na⁺通道）、M4蛋白 （Cl⁻通道）特异性结合，并打开相应离子通道。下列叙述错误的是（　　） A．M3通道蛋白激活引起神经细胞膜电位变化 B．M4通道蛋白激活引起的神经细胞膜电位变化不能传导 C．利用药物CNO激活M3蛋白，可研究特定脑区域功能 D．利用药物CNO 激活M4 蛋白，不能研究特定脑区域功能 7．（2025·山东泰安·三模）CTLA4分子（含有多个抗原决定簇）通常表达于T细胞表面，能够与抗原呈递细胞上的受体高亲和力结合，产生抑制T细胞活化的信号，减少细胞因子产生，降低机体抗肿瘤免疫反应。使用CTLA4单克隆抗体可以解除CTLA4对T细胞的抑制作用，提高T淋巴细胞对肿瘤应答水平，增强机体免疫细胞的抗肿瘤效应。下列有关CTLA4单克隆抗体制备的说法，正确的是（    ） A．用CTLA4分子对小鼠进行免疫，从脾中得到一种B淋巴细胞 B．用96孔板培养和筛选时，每一个孔中需接种多个杂交瘤细胞 C．将细胞因子与CTLA4单克隆抗体结合使用可增强抗肿瘤效应 D．体外培养杂交瘤细胞时，培养箱中加入CO₂的目的是刺激细胞呼吸 8．（2025·湖南湘西·三模）肝癌为临床上常见的恶性肿瘤之一，研究发现，诸多基因包含原癌基因和抑癌基因，可能与肝癌的发生、细胞增殖和转移密切相关。在某些因素影响下，原癌基因和抑癌基因表达异常，致使正常细胞癌变。下列叙述说法正确的是（    ） A．癌细胞体外培养时需要加入胰蛋白酶处理，解除接触抑制 B．原癌基因和抑癌基因发生突变就会引起细胞癌变 C．癌细胞与正常细胞相比，细胞周期更短，并且容易分散转移 D．肝癌的发生只与原癌基因和抑癌基因突变有关 9．（2025·山西晋中·三模）新生物学技术的涌现，正深刻改变着我们的生产与生活。下列相关叙述错误的是（　　） A．利用保幼激素干扰害虫的正常发育，可解决某些仓储害虫的防治问题 B．利用溶菌酶溶解细菌的细胞壁，适量添加可以延长乳制品的保质期 C．利用PCR技术检测微生物的DNA，可筛查食品中是否存在致病菌 D．利用动物细胞培养技术培养肌细胞，可替代传统畜牧业生产肉类 10．（2025·安徽合肥·三模）丙肝病毒是单链RNA病毒，利用丙肝病毒的抗原蛋白作为病原体制备抗体的过程如图所示。下列有关说法正确的是（    ） A．表面糖蛋白被破坏的灭活病毒能诱导Ⅱ中两种细胞融合 B．Ⅱ中特定杂交瘤细胞的培养过程中会出现接触抑制现象 C．Ⅰ制备的抗体比Ⅱ制备的抗体诊断丙肝病毒感染更精准 D．若丙肝病毒发生变异，  Ⅰ制备的抗体仍可能有治疗作用 11．（2025·四川德阳·三模）单倍体胚胎干细胞取自孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞，具有极大的应用前景。下列叙述正确的是（　　） A．培养液中通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B．细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C．单倍体胚胎干细胞可取自孤雌或孤雄发育至囊胚中的任何一个细胞 D．单倍体胚胎干细胞通常不含等位基因，有利于研究隐性基因的功能 12．（2025·甘肃白银·三模）体细胞核移植时胚胎发育率低下的原因与胚胎染色体组蛋白甲基化修饰密切相关。BRG1是染色体重塑复合物，参与染色体组蛋白去甲基化。科学家对BRG1进行如下研究，发现猪核移植胚胎发育率显著提高。下列说法正确的是（    ） A．常用显微操作法去除由核膜包被的卵母细胞的细胞核 B．克隆猪的性别常需要取囊胚的滋养层细胞进行鉴定 C．染色体组蛋白发生去甲基化修饰后将有利于胚胎中相关基因的表达 D．猪成纤维细胞等应在CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 13．（2025·山西晋城·三模）卵子细胞质中隐藏着某些神奇的因子，这些因子能使成熟体细胞的细胞核“返老还童”，并重新赋予其发育成完整个体的能力，过程如图a所示。将小鼠的胸腺细胞和胚胎干细胞、人成纤维细胞和胚胎干细胞相融合，发现融体细胞去核卵母细胞重组卵细胞合的杂合细胞也具有胚胎干细胞的特征，过程如图b所示。研究发现“年轻因子”可影响基因的甲基化修饰。下列相关说法错误的是（　　）    A．可用紫外线短时间照射卵母细胞，使其DNA变性，从而获得去核卵母细胞 B．卵母细胞的细胞质中的“年轻因子”可能会改变体细胞核基因的甲基化修饰，从而激活全能性相关基因的表达 C．胚胎干细胞的细胞质中也存在着某些“年轻因子”，能够帮助成熟体细胞实现“返老还童” D．图b过程获得的杂合细胞有四个染色体组，体细胞和胚胎干细胞中的全部基因在杂合细胞中均能表达 14．（2025·广西·三模）我国科学家经过多年的反复试验，在2017年成功培育出体细胞克隆猴“中中”和“华华”，轰动全世界。体细胞克隆猴的培育流程如图，①、②、③表示不同的技术操作。为提高相关基因的表达，研究人员在重构胚中注入Kdm4d（组蛋白去甲基化酶基因）的mRNA，同时用TSA（组蛋白脱乙酰酶抑制剂）处理。下列相关叙述正确的是（    ）    A．操作②是对刚采集的卵母细胞进行去核处理，避免其核基因干扰实验结果 B．操作①用有活性的仙台病毒进行短暂处理，能使两种细胞混合培养时相互融合 C．操作③是胚胎移植，将胚胎移入受体母猴的体内后还需要对母猴进行妊娠检查 D．两种物质处理重构胚，能使组蛋白去甲基化或去乙酰化，有利于胚胎的发育 15．（2025·河南周口·三模）2024至2025年，科研人员在开发成分明确的无血清培养基方面取得进展，提高了干细胞产品稳定性与安全性；同时利用重组蛋白和小分子化合物精细调节培养环境，提升了干细胞增殖效率和稳定性；此外，机器学习在诱导多能干细胞培养中的应用逐渐深入，可预测分化路径、优化诱导条件，AI驱动的自动化培养系统上线，有效提升了分化效率。下列叙述错误的是（    ） A．干细胞移植到患者体内可以分化为任何一种类型的细胞 B．使用无血清培养基的前提是明确细胞生长、增殖所需的生长因子等成分 C．自动化的移液换液可以减少细胞代谢物的积累对细胞自身造成的危害 D．除重组蛋白和小分子化合物外，外源基因也可以诱导多能干细胞 16．（2025·江苏·三模）发菜既能光合自养又能异养，其分泌的胞外多糖具有增强免疫抗癌等功效。为了给生产发菜多糖提供理论基础，研究人员发明了两阶段摇瓶培养法能快速生产发菜多糖，第一阶段采用光合自养培养获得足量的发菜细胞，第二阶段采用混合营养培养（光合自养+异养培养）合成发菜多糖。相关叙述错误的是（    ） A．采用摇瓶培养的目的是增加培养液中的溶氧量与营养物质的利用 B．与第二阶段培养相比，第一阶段培养不易被杂菌污染，有利于发菜细胞增殖 C．第二阶段培养中，光合作用和葡萄糖氧化代谢可相互影响促进多糖的合成 D．发菜分泌的胞外多糖属于发菜的次级代谢产物，可通过工厂化生产获得 17．（2025·河南·三模）分泌抗PEDV单克隆抗体的杂交瘤细胞株已适应无血清培养，通过添加生长因子和细胞因子可维持正常的细胞生长与增殖。科研人员在培养体系中加入不同浓度的谷氨酰胺（0～10 mmol/mL），探究其对杂交瘤细胞生长的影响，结果如图所示。下列分析错误的是（    ） A．随着培养时间的延长，杂交瘤细胞会因为接触抑制而停止分裂 B．选择能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞需经过克隆化培养和抗体检测 C．在不添加谷氨酰胺的无血清培养条件下，杂交瘤细胞无法正常生长增殖 D．4d时，4 mmol/mL谷氨酰胺添加组的细胞密度最大，其增殖速度可能最快 18．（2025·甘肃甘南·三模）动物细胞培养是细胞工程的基础。下列叙述正确的是（　　） A．制备的iPS细胞培养过程中通常会发生接触抑制而影响细胞增殖 B．将制备的单克隆抗体与药物结合，可增强抗体杀伤癌细胞的能力 C．从牛卵巢中采集的卵母细胞，可通过传代培养获得大量的卵细胞 D．克隆动物繁殖过程中，PEG可促进供体细胞核和卵细胞的融合 19．（2025·湖南永州·三模）为研究供体细胞RNAm6A修饰（RNA的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响，研究者比较了猪骨髓间充质干细胞（甲组，属于多能干细胞）和猪胎儿成纤维细胞（乙组，属于高度分化的细胞）内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率，结果如下图。下列相关叙述正确的是（　　）    A．分化程度越高的细胞中RNAm6A修饰水平越高 B．核供体细胞的分化程度越低，核移植重构胚的发育效率越高 C．抑制重构胚的RNAm6A修饰水平，可提高早期胚胎的发育效率 D．该研究涉及动物细胞培养、细胞核移植和胚胎移植等操作技术 20．（2025·广西·三模）为了利用基因工程技术改造牙鲆（一种鱼类），科学家计划将构建好的载体转化至大肠杆菌内扩增，再将大肠杆菌中扩增的载体纯化后导入牙鲆细胞。此实验构建的重组质粒上包含目的基因和氨苄青霉素抗性基因。下列关于此实验的相关说法，错误的是（    ） A．为了避免外部杂菌污染培养基，接种过大肠杆菌的培养基应灭菌后进行培养 B．为了使牙鲆细胞在培养瓶中增殖，培养牙鲆细胞的培养基中通常需要加入血清 C．为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应含有凝固剂 D．为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应加入氨苄青霉素 21．（2025·吉林白城·三模）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列相关说法正确的是（    ） A．诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要是利用细胞膜的功能特点 B．与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的 B细胞不需要通过原代培养扩大细胞数量 C．在杂交瘤细胞筛选过程中，发生融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖 D．将待筛选抗体与该病毒基因A 进行杂交，呈阳性的就是所需的抗体 22．（2025·河北沧州·三模）下列关于单克隆抗体制备过程中相关操作的叙述，错误的是（　　） A．注射抗原后，从小鼠体内分离到的B细胞的纯度不影响单克隆抗体的纯度 B．克隆化培养和抗体检测是保证最终获得的抗体具有高度特异性和一致性的关键 C．使用PEG、灭活病毒等均可诱导骨髓瘤细胞和B细胞的专一性融合 D．骨髓瘤细胞会因培养液中营养物质缺乏和有害物质积累而增殖减慢 23．（2025·四川南充·三模）培养肉是指通过体外培养动物细胞的方式生产可供食用的肉制品。培养肉的生产流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．可用于培养肉的种子细胞包括胚胎干细胞、成体干细胞等 B．将特定基因导入牛的成熟红细胞中，可诱导其形成种子细胞 C．为缓解细胞接触抑制，向细胞培养液中加入胰蛋白酶即可 D．配制大规模培养液时，可直接使用生理盐水作为溶剂 24．（2025·甘肃·二模）体外动物细胞培养制造出的细胞培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细胞生长基质，其表面能使细胞贴附。下列叙述错误的是（    ） A．①过程可用机械方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶处理获得细胞悬液 B．③④过程需使用经灭菌处理的培养液，富含细胞生长所需的营养物质 C．③过程加入微载体为细胞提供更大附着面积，延迟接触抑制出现，可增加产量 D．动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，培养过程中细胞通过有丝分裂增加细胞数目 25．（2025·吉林·三模）下列有关动物细胞培养和胚胎发育的叙述，正确的是（    ） A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 B．体外培养的大多数细胞能够悬浮在培养液中生长 C．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 D．桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” 26．（2025·山西·三模）双特异性抗体（BsAb）含有两个独立的抗原结合位点。科学家用大鼠（2n）细胞和小鼠（2N）细胞制备出抗T细胞标志物（CD3）和抗肿瘤标志物（EpCAM）的BsAb，用于治疗EpCAM阳性肿瘤，部分过程如下图所示。下列分析错误的是（　　） A．通过细胞克隆化培养和抗体检测，可获得产生特定抗体的杂交瘤细胞 B．同时用CD3和EpCAM免疫小鼠，能获得产生BsAb的B淋巴细胞 C．可用灭活病毒诱导法获得四源杂交瘤细胞，该细胞最多含16个染色体组 D．BsAb通过同时结合EpCAM和CD3，招募并激活T细胞来杀伤肿瘤细胞 27．（2025·重庆·三模）为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC）靶向治疗，治疗机理如图，下列说法错误的是（　　） A．单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B细胞与骨髓瘤细胞融合 B．用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体 C．理论上接头和药物的结合在血浆中的稳定性高于在溶酶体中的稳定性 D．ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞后被溶酶体裂解，从而丧失药物活性 28．（2025·湖南湘西·三模）科研人员利用杂交瘤技术制备抗新冠病毒单克隆抗体，过程如下：将新冠病毒S蛋白免疫小鼠，获取B淋巴细胞后与骨髓瘤细胞在聚乙二醇或灭活病毒诱导下融合，经HAT培养基筛选获得杂交瘤细胞，再通过有限稀释法克隆化培养和抗体检测筛选得到能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株。下列叙述正确的是（    ） A．HAT培养基中，未融合的B淋巴细胞因缺乏增殖能力而死亡 B．细胞融合后需要用特定的选择培养基筛选出能分泌抗体的杂交瘤细胞 C．通过抗原-抗体杂交实验可检测杂交瘤细胞培养上清液中的目标抗体 D．该技术制备的抗体可用于新冠病毒的检测，但用于治疗时需进行人源化改造 29．（2025·山西临汾·三模）羊乳价格比牛乳价格高，为防范市场上以牛乳冒充羊乳销售的行为，研究人员以羊乳酪蛋白为抗原，制备了单克隆抗体。下列相关叙述错误的是（    ） A．可以利用动物细胞融合技术和动物细胞培养技术生产单克隆抗体 B．从小鼠脾中得到的B细胞与骨髓瘤细胞融合后产生的杂交瘤细胞有多种 C．用抗羊乳酪蛋白的单克隆抗体可以检测羊乳中是否掺杂了牛乳 D．杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖后，可以在小鼠腹水中获取单克隆抗体 30．（2025·安徽·三模）下图所示是人、鼠细胞融合实验：将人和小鼠细胞放入细胞培养液中，混匀后诱导融合，同时将带有绿色荧光的抗体、红色荧光的抗体放入细胞培养液中，筛选出杂种融合细胞。在37℃下培养40min后，两种颜色的荧光在杂种细胞膜上均匀分布。下列叙述错误的是（　　） A．诱导人细胞与鼠细胞融合时可以选用灭活病毒诱导法 B．可以根据细胞膜上荧光颜色的种类筛选杂种融合细胞 C．若两种细胞等量混合，则融合后的细胞均为杂种细胞 D．结果显示膜蛋白能运动，推测构成膜的磷脂也能运动 31．（2025·浙江温州·三模）人正常乳腺细胞与人乳腺癌细胞表面有部分相同的膜蛋白。为生产针对人乳腺癌细胞的单克隆抗体，基本流程如图所示。 下列叙述正确的是（    ） A．过程①从小鼠体内分离得到的是一种抗体 B．过程②使用固体培养基筛选杂交瘤细胞 C．该单克隆抗体可提高乳腺癌治疗的靶向性 D．该单克隆抗体可检测各种癌细胞 32．（2025·河南·三模）抗体-细胞毒素药物偶联物（T-DM1）是治疗乳腺癌的靶向药物，由曲妥珠单克隆抗体、细胞毒素药物DM1偶联形成。曲妥珠单抗与乳腺癌细胞表面的HER2具有很高的亲和性，DM1进入乳腺癌细胞后能有效抑制微管蛋白聚合，导致细胞凋亡。下列叙述错误的是（    ） A．曲妥珠单抗制备时可选择DM1作为抗原刺激小鼠产生免疫应答 B．在乳腺癌细胞内，DM1可能抑制纺锤丝的形成而抑制癌细胞增殖 C．经过选择培养基筛选出的杂交瘤细胞不可直接用于生产单克隆抗体 D．利用同位素或荧光标记的曲妥珠单抗可用于定位乳腺癌患者肿瘤的位置 33．（2025·四川内江·三模）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用来检测早孕。下图为抗HCG单克隆抗体制备流程示意图。下列叙述错误的是（　　）    A．①过程通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合 B．②过程培养基筛选出的为融合的多种杂交瘤细胞 C．③过程抗体筛选的原理是抗体与抗原特异性结合 D．④过程若在小鼠腹腔内进行则无需保证无菌环境 34．（2025·福建泉州·三模）人体发生应激反应后，唾液中的嗜铬粒蛋白A(CHGA)迅速达到峰值。研究人员通过制备两种CHGA单克隆抗体用于检测唾液中CHGA含量，作为评估应激反应程度的指标之一。检测原理如图(其中一种附着在基质上为固相抗体，另一种是连接上能催化底物发生显色反应的酶为酶标抗体)。下列有关叙述错误的是（　　） A．向小鼠多次注射CHGA可诱导其产生用于制备单克隆抗体的B淋巴细胞 B．单克隆抗体较强的特异性可排除唾液中其他成分对结果的干扰 C．固相抗体与酶标抗体需识别并结合在CHGA的不同区域 D．洗脱的目的是为了使CHGA从固相抗体脱离从而有利于发生显色反应 35．（2025·湖北十堰·三模）单克隆抗体在病原体鉴定、疾病治疗等方面有广泛的应用。下表中关于制备病原体A的单克隆抗体的相关操作及目的或结果，都正确的是（　　） 选项 操作 目的或结果 A 注射灭活的抗原结构均被破坏的病原体A 获得能产生特定抗体的B淋巴细胞 B 利用PEG诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 获得的都是既能产生单一抗体，又能大量增殖的杂交瘤细胞 C 筛选出杂交瘤细胞后，再利用96孔板培养和筛选 培养和筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D 将所得杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内 使杂交瘤细胞在小鼠体内大量增殖，从而提高该小鼠抵御病原体A的能力 A．A B．B C．C D．D 36．（2025·广西南宁·三模）一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成双杂交瘤细胞AB，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．若双特异性抗体应用于肿瘤治疗，则α、β抗原中至少有一种为癌细胞表面抗原 B．诱导杂交瘤细胞A、B融合后利用选择培养基筛选出双杂交瘤细胞AB C．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，无需使用胰蛋白酶处理 D．将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，腹水能为细胞提供所需的营养条件 37．（2025·青海海东·三模）单克隆抗体在病原体鉴定、疾病治疗等方面有广泛的应用。下表中关于制备病原体A的单克隆抗体的相关操作及目的或结果，都正确的是（　　） 选项 操作 目的或结果 A 注射灭活的抗原结构均被破坏的病原体A 获得能产生特定抗体的B淋巴细胞 B 利用PEG诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 获得的都是既能产生单一抗体，又能大量增殖的杂交瘤细胞 C 筛选出杂交瘤细胞后，再利用96孔板培养和筛选 培养和筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 D 将所得杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内 使杂交瘤细胞在小鼠体内大量增殖，从而提高该小鼠抵御病原体A的能力 A．A B．B C．C D．D 38．（2025·四川眉山·三模）Her2 是乳腺癌等肿瘤细胞的表面蛋白，传统鼠源抗 Her2 单克隆抗体可被人体免疫系统识别而产生免 疫反应，导致单抗的治疗效果下降。科研人员将小鼠自身的抗 Her2 抗体基因敲除后，经过一系列改造，制备了人源化的抗 Her2 单抗，过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A．①过程农杆菌的T-DNA 整合到受精卵染色体 DNA 上的原理是基因重组 B．③是将 Her2 注射到小鼠体内，b 表示从小鼠脾中获得的多种 B 淋巴细胞 C．④过程使用的病毒需要灭活是为了保证细胞膜分子排布不发生改变 D．⑤过程需进行两次筛选，第一次筛选的原理是抗原抗体特异性结合 39．（2025·四川眉山·三模）下列关于细胞工程的叙述，错误的是（    ） A．电刺激可以诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶的处理 C．小鼠骨髓瘤细胞和经免疫小鼠的 B 淋巴细胞融合可以制备单克隆抗体 D．某种植物甲乙两品种的体细胞杂种和甲乙两品种的杂交后代的染色体数目相同 40．（2025·浙江嘉兴·三模）犬肾上皮连续细胞系（MDCK细胞）可用于制备流感疫苗。传统的培养过程采用添加胎牛血清贴壁培养，研究人员尝试使用无血清悬浮培养技术培养MDCK单克隆细胞株，并获得成功。下列叙述正确的是（    ） A．无血清培养液中只需添加碳源和氮源 B．卡氏瓶在培养过程中需严格密封 C．悬浮培养技术可提高培养空间的利用率 D．单克隆细胞株培养过程中需诱导细胞发生分化 二、多选题 41．（2025·内蒙古通辽·三模）利用动物体细胞核移植技术可培育高产奶牛，流程如图所示，下列有关叙述正确的是（    ） A．对卵母细胞X去核的实质是去除纺锤体—染色体复合物 B．母牛Y的体细胞分化程度低，细胞核更易恢复全能性 C．可用电刺激激活重构胚、使之完成细胞分裂和发育过程 D．早期胚胎移植前，要对代孕母牛Z进行同期发情处理 42．（2025·吉林长春·三模）人外周血淋巴细胞（N23）和小鼠骨髓瘤细胞融合后得到的人—鼠杂交瘤细胞（NJ84）可用于制备单克隆抗体。N23和人纤维母细胞（CRL）均可释放白细胞介素6（IL—6）．为研究不同来源的IL—6对NJ84克隆化能力及抗体分泌的影响，科研人员进行了相关实验，部分结果如表所示。下列叙述正确的是（    ） 培养细胞 条件培养液 细胞生长孔数/细胞培养孔数 抗体分泌量（pg/mL） NJ84 不含IL—6 12/48 11 NJ84 含CRL—IL—6 21/48 48 NJ84 含N23—IL—6 25/48 45 注：CRL—IL—6、N23—IL—6分别来源于对CRL、N23培养72小时后的上清液。 A．N23和NJ84均具有既能体外大量增殖又能产生专一抗体的特点 B．IL—6属于细胞因子，能参与细胞间的信号传导 C．在NJ84培养的不同阶段，可添加不同来源的IL—6以提高生产效率 D．单克隆抗体既可用于癌症的靶向治疗，又可作为诊断试剂检测疾病 三、解答题 43．（2025·四川内江·三模）金纳米棒（AuNR）是一种光热材料，常用于局部肿瘤治疗，也可用于某些癌症早期筛查。回答下列问题： (1)研究人员构建了一种基于粒径为50-60nm左右的金纳米棒（GNR）的免疫层析试纸条，用于检测前列腺特异性抗原（PSA）。当肿瘤、增生或炎症发生时，正常腺管结构遭到破坏，血清中PSA浓度升高。GNR免疫层析试纸条检测原理如图1，试纸条上GNR-dAb可移动且数量很多，cAb、羊抗鼠IgG分别固定在T线、C线。GNR在T线或C线聚集时，T线、C线会显色。 ①制备鼠源抗PSA单克隆抗体（cAb）时，给小鼠注射的PSA作为 ，能引发小鼠特异性免疫，其中激活B细胞的第二信号是 。 ②试纸条上采用两种针对PSA的单克隆抗体进行检测，其优点是 。若待测样品来自前列腺癌患者，T线、C线的显色情况为 。 (2)金纳米棒（AuNR）在808nm的激光照射下，会产生光热效应，使肿瘤细胞快速死亡。研究人员构建了一种金纳米棒复合材料（AuNR-PPR-PEG），并进行了相关指标检测，如图2. 注：HeLa细胞为癌细胞。 ①研究人员认为，AuNR-PPR-PEG可代替AuNR用于肿瘤治疗，理由是 。 ②已知癌细胞表面会过表达叶酸受体，为了增强AuNR-PPR-PEG对癌细胞的靶向性杀伤，你认为可采取的方法是 。 44．（2025·辽宁·三模）请回答细胞工程的相关问题： I.利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，用以制造单克隆抗体，单克隆抗体在医药领域占有重要的地位，图1为单克隆抗体的制备过程。 (1)A抗原注入小鼠后，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是 。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是 ，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得 ，再将其注入小鼠体内培养，从小鼠腹水中提取到大量的抗A抗原的单克隆抗体。 (3)抗体药物偶联物（ADC）通常是由单克隆抗体和细胞毒性药物共价连接形成，能够实现对癌细胞的精确高效清除而不伤害正常细胞，成为抗癌药物研发的热点之一。图2为ADC杀伤癌细胞过程的示意图，据图分析，ADC发挥作用的过程中，抗体的作用是 ，药物使癌细胞死亡的机理是 。 Ⅱ.百岁兰是一种独特的裸子植物，依据现有的植物学分类没有近亲，它被誉为植物界的“活化石”，已被列入《濒危物种公约》。现在可通过一定的方法实现百岁兰的快速与稳定繁殖。 (4) 技术成为植物种质资源保存和快速繁殖的重要工具，该技术依据的生物学原理是 。 (5)以消毒的外植体为材料获得愈伤组织的过程称为 ；该过程中通常需要向MS培养基中加入一定浓度的 这两类植物激素，并通过调整其比例来调控培育过程；同时愈伤组织的形成和生长还受到外界环境因素的影响。图3、图4为两种处理因素对愈伤组织生长状况的影响曲线，实验结果表明： 。 45．（2025·湖南·三模）纳米抗体是天然存在的最小的免疫球蛋白功能片段，具有高亲和力、高稳定性、可溶性、低生产成本且能结合多种表位等优势，在疾病的预防、诊断和治疗方面有着广阔的应用前景。利用噬菌体展示技术制备纳米抗体的流程如图甲，回答下列问题。 (1)收集骆驼科动物的外周血淋巴细胞并提取总 RNA，经 过程获得 cDNA，以 cDNA 为模板进行 PCR 扩增获得纳米抗体基因片段。PCR 反应原理是 ，向其缓冲溶液中加入 Mg2+的作用是 。 (2)将获得的纳米抗体基因片段插入噬菌体的 基因中，使纳米抗体随该基因的表达而展示在噬菌体表面。该过程使用的工具酶是 。 (3)构建好噬菌体文库后，需进行特异性噬菌体的筛选，其依据的原理是 。 (4)制备的纳米抗体重链可变区（VHH）与传统单克隆抗体重链可变区（VH）结构域的比较如图乙。 从空间结构分析，VHH 与 VH的结构域类似，均由 个框架区和 3 个互补决定区组成。从互补决定区来看，与 VH相比，VHH 具有更长的 （填“CDR1”“CDR2”或“CDR3”）区，形成了适合目标蛋白空腔的“手指状”延伸，这种结构特征使能够结合传统抗体无法识别的隐藏或凹形表位，因而具有更高的 （填“亲和力”或“稳定性”）。 胚胎工程考点03 一、单选题 1．（2025·江西·三模）mTOR是一种对细胞生长和增殖有调节作用的胞内蛋白激酶。抑制mTOR活性可使小鼠囊胚的内细胞团增殖减慢，进而导致胚胎发育停滞；当mTOR被重新激活时，囊胚发育恢复正常。下列叙述错误的是（    ） A．通过体外受精和胚胎培养技术可获得小鼠囊胚 B．受体母鼠接受移植的囊胚前需进行同期发情处理 C．移植前用mTOR抑制剂处理囊胚可提高移植成功率 D．该研究可为体外培养胚胎的非冷冻保存提供依据 2．（2025·山西晋中·三模）亚洲狮是世界上濒危的大型猫科动物之一，体外受精与胚胎移植在狮类动物保护方面已有成功案例。下列有关说法正确的是（　　） A．采集到的卵母细胞和精子可以直接用于体外受精 B．经胚胎移植产生的后代，其遗传特性与受体保持一致 C．体外受精和胚胎移植在一定程度上可规避自然繁殖的局限性 D．为确保移植胚胎的成活率，发育程度越高的胚胎移植效果越好 3．（2025·四川乐山·三模）我国科学家通过敲除猪的糖抗原合成基因（β4GalNT2），并转入相应的调节基因后，将基因编辑猪的单个肾移植给切除自体双肾的猕猴，最终移植肾存活184天。在移植后的前五个月里，猕猴的移植肾功能完全正常，之后出现逐渐加重的蛋白尿，下列说法错误是（    ） A．基因编辑猪的成功体现了动物细胞的全能性 B．出现蛋白尿的原因可能是肾脏功能障碍导致 C．猪和猕猴肾脏差异的根本原因是基因的不同 D．敲除猪β4GalNT2基因能降低免疫排斥反应 4．（2025·四川德阳·三模）单倍体胚胎干细胞取自孤雌或孤雄发育至囊胚的细胞，具有极大的应用前景。下列叙述正确的是（　　） A．培养液中通常含有蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B．细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C．单倍体胚胎干细胞可取自孤雌或孤雄发育至囊胚中的任何一个细胞 D．单倍体胚胎干细胞通常不含等位基因，有利于研究隐性基因的功能 5．（2025·甘肃白银·三模）体细胞核移植时胚胎发育率低下的原因与胚胎染色体组蛋白甲基化修饰密切相关。BRG1是染色体重塑复合物，参与染色体组蛋白去甲基化。科学家对BRG1进行如下研究，发现猪核移植胚胎发育率显著提高。下列说法正确的是（    ） A．常用显微操作法去除由核膜包被的卵母细胞的细胞核 B．克隆猪的性别常需要取囊胚的滋养层细胞进行鉴定 C．染色体组蛋白发生去甲基化修饰后将有利于胚胎中相关基因的表达 D．猪成纤维细胞等应在CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 6．（2025·广西·三模）我国科学家经过多年的反复试验，在2017年成功培育出体细胞克隆猴“中中”和“华华”，轰动全世界。体细胞克隆猴的培育流程如图，①、②、③表示不同的技术操作。为提高相关基因的表达，研究人员在重构胚中注入Kdm4d（组蛋白去甲基化酶基因）的mRNA，同时用TSA（组蛋白脱乙酰酶抑制剂）处理。下列相关叙述正确的是（    ）    A．操作②是对刚采集的卵母细胞进行去核处理，避免其核基因干扰实验结果 B．操作①用有活性的仙台病毒进行短暂处理，能使两种细胞混合培养时相互融合 C．操作③是胚胎移植，将胚胎移入受体母猴的体内后还需要对母猴进行妊娠检查 D．两种物质处理重构胚，能使组蛋白去甲基化或去乙酰化，有利于胚胎的发育 7．（2025·安徽·三模）中国科研团队采用新的胚胎植入前诊断技术（PGD）阻断Leri—Weill软骨发育不良综合征的遗传，使健康婴儿顺利诞生。婴儿的母亲是含显性致病基因（S基因）的杂合子，且S基因位于染色体交换频率高的区域。故为确保PGD检测结果的准确性，分别对第一极体、第二极体（仅来自次级卵母细胞）、囊胚进行检测。下列叙述错误的是（　　） A．在操作过程中所用的细胞培养液需加入一定量的动物血清 B．若第一极体中检出S基因，则第二极体和囊胚都不含S基因 C．若第一极体中未检出S基因，则第二极体和囊胚都含S基因 D．通常取囊胚的滋养层细胞对胚胎进行性别鉴定和遗传病筛查 8．（2025·河南·三模）2018年3月，北方白犀牛仅剩下两头雌性。在此之前，研究人员设法保存了雄性北方白犀牛的精子。研究人员利用胚胎工程技术辅助人工繁育北方白犀牛的具体流程如图所示。下列说法正确的是（    ） A．需对精液离心处理，去除抑制获能的物质，放入专用的获能溶液中使精子获得能量 B．将受精卵培养至早期胚胎，移植到受体母牛体内并产下牛犊的过程属于无性繁殖 C．胚胎移植之前需对胚胎质量和发育时期进行检查，胚胎移植后还需进行妊娠检查 D．胚胎分割可以提高胚胎的利用率，胚胎分割次数越多，胚胎移植成功率越高 9．（2025·福建三明·三模）某研究团队运用基因编辑技术，针对小鼠卵母细胞实施了DNA甲基化重写操作，随后将一个极体注入经修饰的次级卵母细胞中，成功培育出孤雌小鼠，具体操作流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．甲基化重写没有改变卵母细胞的遗传信息，属于不可遗传的变异 B．体外培养卵母细胞时，需要在95%O2和5%CO2的气体环境中培养 C．移植的囊胚进一步扩大，导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来 D．孤雌小鼠一定为雌性，基因型不一定与提供卵母细胞的雌鼠相同 10．（2025·湖南·三模）被称为“沙漠之舟”的单峰骆驼在野外几乎灭绝，科研人员为拯救濒危野化单峰骆驼，利用现代生物技术尝试进行人工培育，流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．过程①通常对B驯养单峰骆驼注射性腺激素使其超数排卵 B．野化单峰骆驼C可以选择雌性个体，也可以选择雄性个体 C．可用蛋白酶合成促进剂激活重构胚使其完成细胞分裂和发育进程 D．过程④为胚胎移植，需对受体注射免疫抑制剂使胚胎顺利植入 11．（2025·河南·三模）科学家收集了来自5个捐赠者的干细胞，浸泡在一种精确配制的混合溶液中，培育出首个包含多人细胞的3D大脑模型。下列相关叙述错误的是（    ） A．3D大脑模型的建立说明干细胞具有发育的全能性 B．精确配制的混合溶液中含有定向诱导分化的物质 C．用干细胞培育出脑部细胞的过程需在无菌无毒环境中进行 D．该研究可探索大脑发育机制及人脑对新药物和新疗法的反应等 12．（2025·陕西咸阳·三模）我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，性染色体组成为YY的胚胎不能发育。实验流程如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．卵细胞转化成phESC相当于植物组织培养中的脱分化过程 B．利用胚胎分割的方法对甲进行处理得到了多只遗传物质不同的孤雌小鼠 C．将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚来培育孤雄小鼠 D．图中方式得到的孤雄小鼠性染色体组成为XX、XY 13．（2025·甘肃白银·三模）自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过如图所示的流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类的保护。下列叙述错误的是（　　） A．该实验没有运用胚胎移植技术 B．该实验说明物种甲和物种乙不存在生殖隔离 C．该实验中，子一代的遗传物质大部分来源于M鱼 D．M鱼的iPGCs在N鱼体内分化时，其基因表达会受N鱼生理环境影响 14．（2025·四川成都·三模）单倍体胚胎干细胞是研究基因功能的理想细胞模型，它只含一个染色体组，但具有类似于胚胎干细胞的分裂分化能力。研究人员利用小鼠细胞建立单倍体胚胎干细胞的操作流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．体外受精前，卵母细胞和精子都需要在获能液中培养使其获能 B．体外受精时，精子形成雄原核与卵子完成减数分裂Ⅱ同时进行 C．培养得到的单倍体胚胎干细胞，遗传物质来自精子和卵母细胞 D．单倍体胚胎干细胞不含等位基因，常用于研究隐性基因的功能 15．（2025·吉林白城·三模）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列相关说法正确的是（    ） A．诱导已免疫的B细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，主要是利用细胞膜的功能特点 B．与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的 B细胞不需要通过原代培养扩大细胞数量 C．在杂交瘤细胞筛选过程中，发生融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖 D．将待筛选抗体与该病毒基因A 进行杂交，呈阳性的就是所需的抗体 16．（2025·安徽·三模）科学家通过核移植技术成功培育了克隆猴等克隆动物。关于体细胞核移植过程，以下操作错误的是（    ） A．从卵巢中采集的卵母细胞需体外培养到MⅡ期，并尽快去除其纺锤体—染色体复合物 B．将体细胞注入去核的卵母细胞中并形成重构胚，该过程利用了细胞膜的流动性特点 C．卵母细胞可做显微操作，也可用紫外线照射等方法使卵母细胞去核或使其DNA变性 D．培养出早期胚胎，选择同种受体母畜进行胚胎免疫检查和发情处理，并做胚胎移植 17．（2025·吉林白城·三模）单倍体胚胎干细胞是指只含一套染色体，但拥有类似于正常干细胞分裂分化能力的细胞群。利用小鼠建立单倍体胚胎干细胞的操作如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．体外受精前应将卵母细胞培养至减数分裂Ⅰ中期 B．建立的单倍体胚胎干细胞中只含一条性染色体X或Y C．上述过程涉及动物细胞培养、体外受精等操作 D．理论上可用物质激活卵母细胞完成MⅡ实现由①直接转变为④ 18．（2025·重庆·三模）藏羊是高寒牧区的优良品种，繁殖率较低。为促进畜牧业发展，研究人员通过胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如下图。下列叙述错误的是（    ）      A．以观察到两个极体作为受精的标志 B．用外源促性腺激素促进甲超数排卵 C．胚胎移植前可采集外胚层细胞进行遗传筛选 D．筛选出的优质胚胎可在囊胚期，对内细胞团进行分割 19．（2025·吉林长春·三模）体细胞核移植技术在推动我国肉牛遗传育种发展上起到关键作用，下列有关叙述错误的是（    ） A．供体细胞需来自遗传性状优良的个体 B．采用紫外线短时间照射卵母细胞可达到去核的目的 C．利用Ca2+载体或电刺激可激活重构胚 D．选择原肠胚进行胚胎分割可提高胚胎利用率 20．（2025·四川达州·三模）我国研究人员以小鼠（2n=40）和大鼠（2n=42）为材料，通过细胞融合技术创造出一种新型干细胞——异种杂合二倍体胚胎干细胞，并通过胚胎移植产生子代，技术路线如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．单倍体胚胎①②均发育到囊胚阶段，其中的滋养层具有发育成胎盘和胎膜的能力 B．可以利用灭活病毒使细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，诱导细胞融合 C．接受胚胎移植的受体鼠需要被注射外源促性腺激素进行超数排卵处理 D．用甲紫溶液染色后可统计出子代鼠染色体共41条，其中有2条性染色体 21．（2025·吉林·三模）下列有关动物细胞培养和胚胎发育的叙述，正确的是（    ） A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 B．体外培养的大多数细胞能够悬浮在培养液中生长 C．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 D．桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” 22．（2025·福建福州·三模）第三代试管婴儿技术也称为胚胎植入前遗传学检测（PGT），其原理是在胚胎植入子宫前，进行遗传学检测，挑选出健康的胚胎进行移植。下列叙述错误的是（　　） A．获能的精子能与刚采集到的卵母细胞受精 B．PGT可将胚胎培养至含内细胞团的囊胚期 C．胚胎移植前可取滋养层细胞做遗传学检测 D．移植后健康胚胎的发育受母体激素的影响 23．（2025·陕西商洛·三模）乳糖不耐受症是由人体肠道内缺乏乳糖酶，无法有效分解牛奶中的乳糖（一种双糖）所导致的消化系统问题。我国某科研团队成功培育出转基因“低乳糖奶牛”，相关技术流程如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．与植物细胞培养不同，动物细胞培养的培养基中需要添加血清等天然成分 B．将乳糖酶基因导入胚胎成纤维细胞的常用方法是显微注射法 C．可以使用蛋白酶合成抑制剂法激活重构胚，使重构胚完成细胞分裂和发育进程 D．激活的重构胚需要移入受体母牛体内培养，生出的犊牛的遗传性状与受体母牛的相似 二、多选题 24．（2025·江苏盐城·三模）科学家通过培育小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞，成功获得了“1母亲0父亲”的雌性小鼠，且该雌性小鼠能正常生殖产生后代，有关技术如图所示。下列相关叙述正确的是（    ）    A．用雌激素对母鼠进行超数排卵处理可以获得更多的卵母细胞 B．图中过程①②的分裂方式分别为减数分裂和有丝分裂 C．用于过程③的细胞取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团 D．第2阶段的卵子为次级卵母细胞，过程④为减数分裂II的部分过程 25．（2025·黑龙江大庆·三模）线粒体置换技术可用于预防母系线粒体遗传疾病。次级卵母细胞减数分裂Ⅱ中期（MI中期）形成的纺锤体-染色体复合体（X）可用于该技术以获得正常个体，过程如图。下列说法错误的是（    ） A．患者卵母细胞提供的X与供体卵母细胞去除的“细胞核”结构相同 B．胚胎的遗传物质来自三个亲本，供体携带的色盲基因会遗传给胎儿 C．重组次级卵母细胞可与获得能量后的精子完成受精作用 D．图示获得子代个体的生殖方式与动物克隆的生殖方式相同 26．（2025·辽宁·三模）科学家通过培育小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞，成功获得了“1母亲0父亲”的雌性小鼠，且该雌性小鼠能正常生殖产生后代，有关技术如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．用雌激素对母鼠进行超数排卵处理可以获得更多的卵母细胞 B．图中过程①②的分裂方式分别为减数分裂和有丝分裂 C．用于过程③的细胞取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团 D．第2阶段的卵子为次级卵母细胞，过程④为减数分裂II的部分过程 三、实验题 27．（2025·福建泉州·三模）科研人员制备双父源(遗传物质来自两个雄原核)小鼠，以期为濒危动物保护提供新思路。在研究过程中，发现双父源小鼠胚胎过度生长、器官畸形，无法形成功能性胎盘，这与基因组印记有关。已知印记基因是一类对生物个体发育具有重要调控作用的基因，这类基因表达与否取决于它们所在染色体的来源(父源或母源)，父源的印记基因能促进胚胎生长发育，母源的印记基因能抑制胚胎过度生长并促进胎盘生长。我国科研人员利用相关工程技术成功培育出双父源小鼠，相关技术流程如图所示。请回答： (1)培育单倍体胚胎干细胞(haESCs)。对雌鼠注射 使其超数排卵，选择 期的卵母细胞去核，并与精子甲完成受精；进而将获得的单倍体胚胎干细胞置于95%空气和 气体条件下进行培养。 (2)编辑haESCs印记基因。研究人员运用CRISPR/Cas9编辑系统对相关印记基因进行编辑，该编辑系统由一个具有剪切DNA链的蛋白质(Cas9)和一段将Cas9精确地引导到基因组中的特定位置的RNA(gRNA)结合而成。为精确对印记基因进行编辑，应制备 的gRNA。 (3)培育胚胎干细胞a。将精子乙和编辑印记基因的haESCs共注射到去核卵母细胞2中，经诱导培育得到二倍体的胚胎干细胞a。其中对haESCs进行印记基因编辑的目的是 。 (4)培育印记基因编辑小鼠。 ①从代孕小鼠中收集一个2细胞胚，经 处理获得四倍体胚胎，体外培养至囊胚阶段，其作用一方面是四倍体囊胚无法正常发育成个体，从而保证培育出工程小鼠的细胞核遗传物质来自 ；另一方面，为胚胎干细胞a提供 。 ②将胚胎干细胞a注入四倍体囊胚中，运用 技术送入代孕小鼠，进而培育出印记基因编辑小鼠。 四、解答题 28．（2025·宁夏银川·三模）“TK-GCV”系统是一种特异性自杀基因系统。TK基因导入宿主细胞产生的TK酶可将无毒的前体药物更昔洛韦（GCV）转化为有毒性的物质，阻断DNA链的延伸，抑制细胞分裂，最终使细胞凋亡。某研究团队将“TK-GCV”应用于奶山羊育种中，操作流程如图所示。 回答下列问题： (1)TK酶通过抑制 酶的活性而影响细胞分裂。为了获得更多的卵母细胞，需对奶山羊乙注射促性腺激素，并将获得的卵母细胞培养至 期去核，早期胚胎移植前需对奶山羊丙进行 处理。 (2)为了检测图中转基因奶山羊TK基因是否成功表达，可采用的检测方法是 ，检测结果显示细胞中TK基因正常表达，但细胞仍能正常分裂，原因是 。 (3)研究者将TK基因插入奶山羊的Y染色体上，分析此研究中“TK-GCV”自杀基因系统在奶山羊育种中的意义是 。 29．（2025·湖南郴州·三模）2019年我国科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和体细胞核移植（SCNT）技术，成功构建了世界首例体细胞BMAL1基因（产生昼夜节律必需的基因）敲除的生物节律紊乱猕猴，为相关疾病研究提供了新型动物模型，其基本构建流程如图所示。CRISPR/Cas9基因编辑系统能在DNA特定位置进行切割，被切割的DNA修复时会发生基因突变而导致靶基因失活，第一代BMAL1基因敲除猴的5只个体表现出不同程度的节律紊乱症状。为进一步获得理想动物模型，研究团队采集A6个体的成纤维细胞，经SCNT后最终获得多只第二代BMAL1基因敲除猕猴模型。请回答下列相关问题：    (1)在猕猴各级神经中枢中，与生物节律控制有关的中枢在 。 (2)经CRISPR/Cas9基因编辑和胚胎移植获得的第一代BMAL1基因敲除猴的不同个体表现出不同程度的节律紊乱症状，原因是 。 (3)实验中采集的卵母细胞通常在体外培养至 期，进行动物成纤维细胞体外培养时置于含有 气体的培养箱中。核移植成功后，用 （填具体方法，写出2种即可）去激活重构胚。 (4)为提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员还将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重组融合细胞，推测Kdm4d的mRNA的作用是 。 (5)与第一代BMAL1基因敲除猴模型相比，第二代猕猴模型用于研究生物节律紊乱及相关药物研发的优势是 （写出1点即可）。 30．（2025·陕西宝鸡·三模）目前，我国每年试管婴儿数量逾20万例。试管婴儿的培育过程大致是：…促排卵→监测卵泡→取卵→取精→体外受精→胚胎体外培养→基因检测、染色体检测→胚胎移植后补充黄体酮→确定是否妊娠→B超检查胎儿……。结合课本回答下列问题： (1)试管婴儿的培育过程中，获取的新鲜精液所含精清中有抑制精子获能的物质，可以通过 除去以利于精子获能。精子、卵细胞、受精卵的体外培养有严格要求，必需满足无菌、无毒的环境，一定的营养物质，以及温度、pH和气体等条件，该气体条件指的是 。 (2)如果想得到同卵双胞胎，应采用的技术是 。如果处理的是囊胚阶段的胚胎，要注意 。 (3)胚胎在植入前会进行基因检测。若要筛查血友病基因，可以使用 作探针进行检测。胚胎在植入前还要进行染色体检查，请分析该技术对人口优生的益处与对性别比例的潜在影响：①对优生的益处是 ；②对性别比例的潜在影响是 。 (4)试管婴儿技术中胚胎工程的最后一道“工序”是胚胎移植，该操作的实质是 。 31．（2025·四川眉山·三模）以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a～h为操作过程，请据图回答有关问题：    (1)图中c的操作名称是 ，d、f的操作名称是 。 (2)图中的精子获取之后要进行 处理，良种奶牛用 激素处理后获得了更多的卵母细胞，卵母细胞受精后发育可得到早期胚胎；图中早期胚胎属于胚胎发育的 期，其中胚胎干细胞来源于 （填数字标号）。 (3)图中A、B牛的性别 （填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。 32．（2025·河北秦皇岛·三模）中国科学家培育出的转基因瘦肉猪比正常猪脂肪少24%，这可大量减少甚至杜绝养殖户对瘦肉精的使用，其培养过程如图所示。请回答下列问题： (1)将UCP1基因其导入到猪胎儿成纤维细胞之前，最关键的步骤是 。将重组质粒导入成纤维细胞常用的方法是 。 (2)图中空白方框为 细胞（包含具体时期），选用该细胞的理由是其含有 的物质。 (3)进行胚胎移植时胚胎应发育到 阶段，为了同时获得多个转基因猪，可采用胚胎分割技术进行分割时应注意 ，以免影响分割胚胎的恢复和进一步发育。 (4)囊胚能在代孕母猪体内存活的生理学基础是 。进行胚胎移植时需对代孕母猪进行同期发情处理的目的是 。 33．（2025·河南·三模）人溶菌酶（HLZ）是一种人体内天然存在的具有抗菌、抗病毒、抗炎、增强免疫力等特性的蛋白质，它能水解细菌的细胞壁而将其杀死，细菌对其完全不存在耐受性，也无免疫原性。科学家培育出转基因HLZ山羊，从其乳汁中提取HLZ。请回答下列问题： (1)要获得大量的HLZ需要采用PCR技术对HLZ基因进行扩增，在该技术中复性的目的是 。 (2)切割质粒时最好选用两种不同的限制酶切割。若HLZ基因两端不存在这两种限制酶的识别序列，则在扩增前需要在基因模板链的 端加入两种限制酶的识别序列。选择两种不同的限制酶切割目的基因和质粒 （填“一定”或“不一定”）能防止目的基因自身环化。 (3)若用细菌的质粒构建HLZ基因的表达载体，需将其启动子替换后，目的基因才能在真核细胞中表达，主要原因是 。 (4)将构建的基因表达载体常采用 的方法导入注入山羊的受精卵中，发育成早期胚胎后移植到受体羊的子宫内，胚胎在受体中存活的基础是 。 试卷第1页，共3页 2 / 2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$