专题13 发酵工程-【好题汇编】2025年高考生物三模试题分类汇编（新高考通用）

专题13 发酵工程 考点概览 考点01 传统发酵技术 考点02 微生物培养及计数 传统发酵技术考点01 一、单选题 1．（2025·河南许昌·三模）研究者用酸笋开发具有降低胆固醇功能的益生菌。先将酸笋发酵液接种到含有CaCO3的固体培养基上，筛选出乳酸菌，然后将乳酸菌接种到含有胆固醇的培养液中，筛选出能够降解胆固醇的乳酸菌。下列叙述正确的是（    ） A．乳酸菌和酵母菌的细胞壁、细胞膜的成分都是相同的 B．与酸笋风味形成相关的乳酸菌为厌氧型，所以不会分布在空气中 C．培养基上生长的菌落直径与溶钙圈直径比值小的菌落即为目标菌落 D．胆固醇既可为乳酸菌的生长提供氮源，也可参与动物细胞膜的组成 【答案】C 【分析】酸笋制作的原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。 【详解】A、酵母菌细胞壁的主要成分是葡聚糖、甘露聚糖，而乳酸菌细胞壁的主要成分是肽聚糖，A错误； B、在自然界中，乳酸菌分布广泛，空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内都分布有乳酸菌，B错误； C、乳酸菌发酵产生的乳酸能与CaCO3发生反应，使CaCO3分解成可溶性物质乳酸钙和CO2，导致菌落周围出现溶钙圈，故溶钙圈直径与菌落直径的比值可代表微生物溶解CaCO3的能力大小，比值越大微生物溶解CaCO3的能力越大，培养基上生长的菌落直径与溶钙圈直径比值小的菌落即为目标菌落，C正确； D、胆固醇属于脂质，含有C、H、O元素，主要为微生物的生长提供碳源，胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，D错误。 故选C。 2．（2025·陕西咸阳·三模）百香果一火龙果复合果酒制作流程：火龙果汁与百香果汁混合→酶解→糖度调整→接种活性酵母菌→主发酵→过滤→后发酵→澄清→过滤→口感优化→巴氏灭菌→百香果—火龙果复合果酒。下列叙述错误的是（    ） A．在酶解环节，可以向混合果汁中添加适量纤维素酶和果胶酶 B．在糖度调整环节加入适量蔗糖，可以提高复合果酒的酒精含量 C．接种的活性酵母菌的代谢类型是异养需氧型，接种量会影响发酵时长 D．酿制好的果酒经过巴氏灭菌后密封保存，可以延长果酒的保质期 【答案】C 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 【详解】A、果汁中的纤维素和果胶是植物细胞壁的主要成分，会降低出汁率和澄清度。 ​​纤维素酶​​分解纤维素，​​果胶酶​​分解果胶，两者协同作用可提高出汁率，并使果汁更澄清，有利于后续发酵，A正确； B、酵母菌通过发酵糖类（如蔗糖、葡萄糖）产生酒精和CO₂。 若原料果汁的初始糖度不足，可通过添加蔗糖提高总糖量，从而为酵母提供更多底物，最终生成更多酒精，B正确； C、接种的活性酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，接种量会影响发酵时长，C错误； D、酿制好的果酒经过巴氏灭菌后密封保存，减少杂菌的污染，可以延长果酒的保质期，D正确。 故选C。 3．（2025·甘肃天水·三模）传统发酵技术促进了中华民族特有的饮食文化的形成，下列关于传统发酵技术的叙述正确的是（    ） A．传统发酵技术需要进行严格的灭菌操作才能成功 B．传统发酵要求人们在严格控制的环境条件下大规模生产发酵产品 C．发酵产物要通过化学纯化才能食用 D．传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 【答案】D 【分析】 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。 【详解】A、传统发酵（如制作泡菜、腐乳、米酒等）无需严格灭菌，主要依赖天然菌种或环境微生物（如乳酸菌、酵母菌等），A错误； B、传统发酵无需严格控制环境条件（如温度、pH 精确调控），且规模较小，现代工业发酵才需精密控制和大规模生产，B错误； C、传统发酵产物（如泡菜、酸奶、果酒）可直接食用，无需化学纯化，C错误； D、传统发酵以混合菌种（天然微生物群落）为主，发酵形式多为固体发酵（如制曲、腐乳）或半固体发酵（如泡菜、豆豉），D正确。 故选D。 4．（2025·甘肃白银·三模）豆酱是我国传统豆制品，历史悠久，其制作流程如图所示，米曲霉是传统酿造食品酱常用的主要真菌菌种。下列叙述正确的是（    ） 浸豆→蒸豆→（米曲霉等）发酵→天然照晒→高温煮酱→装酱 A．浸豆时，要对黄豆去皮，并用适量酒精浸泡 B．蒸豆时，要加过量盐，以杀死可能存在的微生物 C．发酵过程主要利用米曲霉等产生的蛋白酶 D．高温煮酱后立即装酱即可出售或长期保存 【答案】C 【分析】传统发酵技术是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术，以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，通常是家庭式或者作坊式。 【详解】A、浸豆时需要用适量清水浸泡以对黄豆去皮，不能使用酒精浸泡，否则会影响后期微生物的活动和产品品质，A错误； B、蒸豆时加过量盐，可能会造成豆酱过咸，也可能会造成后续的发酵微生物不能正常进行生命活动，B错误； C、黄豆中的蛋白质含量较高，发酵过程主要利用米曲霉等微生物产生的蛋白酶，将黄豆中的蛋白质分解成肽和氨基酸，从而使豆酱具有独特的风味，C正确； D、高温煮酱后，要冷却并检查后才可进行装酱，再经过质量把关后才能流入消费市场出售，D错误。 故选C。 5．（2025·山西晋中·三模）制醋工艺通常包括“酒精发酵”和“乙酸发酵”两阶段，现代工业制醋采用连续发酵工艺：先密封培养一段时间，随后通入无菌空气并搅拌。下列相关叙述正确的是（　　） A．传统制醋“酒精发酵”阶段所用菌种来源于原材料表面附着的多种酵母菌 B．与现代工业制醋相比较，传统制醋工艺不需要考虑消毒、灭菌等繁琐的操作 C．密封阶段中，微生物无氧呼吸产生的酒精可作为底物促进醋酸菌快速繁殖 D．通入无菌空气进行“乙酸发酵”时，需要适当降低发酵罐中的温度 【答案】A 【分析】酒精发酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通气使酵母菌进行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密封使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，醋酸发酵起主要作用的菌种是醋酸菌，在有氧的条件下发酵形成醋酸。 【详解】A、传统制醋“酒精发酵”阶段所用菌种来源于原材料表面附着的多种酵母菌， 传统制作过程中，所利用的菌种一般来自自然界的天然菌种，A正确； B、传统工艺也需要尽量避免杂菌污染，也有消毒和灭菌的操作，B错误； C、 醋酸菌是好氧菌，在有氧条件下才能将酒精转化为醋酸，C错误； D、 酒精发酵温度为18-30℃，醋酸发酵温度为30-35℃，为了保证醋酸菌的活性，在进行乙酸发酵时，不需要降低温度，D错误。 故选A。 6．（2025·山西晋城·三模）鸭梨醋是以鸭梨为主要原料，利用发酵技术酿制而成的一种新型果醋，具有开胃、调节肠道有益菌群等功能。鸭梨醋的发酵流程如图所示，下列叙述正确的是（　　） 材料准备→酒精发酵→醋酸发酵→过滤与澄清→陈酿→成品 A．准备材料时，发酵瓶、榨汁机需要用70%的酒精灭菌，而鸭梨不需要 B．酒精发酵结束后，打开瓶盖，将培养温度升高到28℃才能进行醋酸发酵 C．酒精发酵和醋酸发酵所需要的菌种的细胞结构的主要区别是有无以核膜包被的细胞核 D．醋酸发酵阶段是通过检测醋酸菌产生二氧化碳的情况来推测发酵程度的 【答案】C 【分析】酒精发酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通气使酵母菌进行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密封使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，醋酸发酵起主要作用的菌种是醋酸菌，在有氧的条件下发酵形成醋酸。 【详解】A、准备材料时，发酵瓶、榨汁机等需用 70% 的酒精消毒，鸭梨也需要进行清洗、消毒等处理，防止杂菌污染，A 错误； B、酒精发酵结束后，打开瓶盖，盖上一层纱布，醋酸发酵的适宜温度为30～35℃，B错误； C、酒精发酵利用的是酵母菌，属于真核生物；醋酸发酵利用的是醋酸菌，属于原核生物。真核细胞和原核细胞结构的主要区别是有无以核膜包被的细胞核，C正确； D、醋酸发酵阶段主要是通过检测醋酸的含量来推测发酵程度，而不是检测二氧化碳，因为糖源不足时的醋酸发酵不产生二氧化碳 ，D错误。 故选C。 7．（2025·甘肃白银·三模）独流老醋为中国三大名醋之一，其由高粱等原料经蒸煮、糖化、酒精发酵、醋酸发酵、过滤等工序酿造而成。下列说法错误的是（    ） A．在酒精发酵、醋酸发酵阶段，发酵液pH均会下降 B．在酒精发酵的基础上进行醋酸发酵需升高温度，增加通气量 C．若醋酸菌以酒精发酵的产物作为碳源，其发酵过程会产生大量气泡 D．在醋酸发酵阶段的发酵液中，液面处醋酸菌密度大于瓶底处的醋酸菌密度 【答案】C 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。醋酸发酵的主要菌种是醋酸菌。 【详解】A、酒精发酵阶段会产生CO2，使发酵液pH下降，醋酸发酵阶段会产生醋酸，也会使发酵液pH下降，故在酒精发酵、醋酸发酵阶段，发酵液pH均会下降，A正确； B、醋酸菌是好氧细菌，且其最适生长温度高于酵母菌的，故在酒精发酵的基础上进行醋酸发酵需升高温度，增加通气量，B正确； C、若醋酸菌以酒精发酵的产物作为碳源，其发酵过程无CO2产生，不会产生大量气泡，C错误； D、醋酸菌是好氧细菌，故在醋酸发酵阶段的发酵液中，液面处醋酸菌密度大于瓶底处的醋酸菌密度，D正确。 故选C。 8．（2025·浙江·三模）腐乳是一类受到人们喜爱的发酵食品，参与发酵的微生物有酵母、曲霉和毛霉等，其中红曲霉可用于生产红腐乳。下列叙述错误的是（    ） A．优良的红曲霉菌种可从自然中筛选或通过诱变育种获得 B．腐乳的制作过程是混合菌种的固体发酵过程 C．菌种类型、豆腐的含水量、环境条件等可影响腐乳的风味 D．发酵结束后可用萃取、离心等手段获得发酵产品 【答案】D 【分析】参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，腐乳制作的原理是：蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。 【详解】A、优良的菌种可从自然中筛选或通过诱变育种获得，A正确； B、由题干信息可知，腐乳的制作过程是混合菌种的固体发酵过程，B正确； C、影响腐乳风味的因素有菌种类型、豆腐的含水量、环境条件等，C正确； D、腐乳制作，发酵结束后不可用萃取、离心等手段获得发酵产品，因为一块块发酵后的豆腐乳就是发酵产品，D错误。 故选D。 9．（2025·河南·三模）关于传统发酵技术的应用，下列叙述正确的是（    ） A．多种微生物参与了泡菜的发酵，起主要作用的是毛霉 B．传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主 C．当氧气和糖源不足时，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸 D．制作葡萄酒时，每隔12h左右需将瓶盖打开一次，以排出CO2 【答案】B 【分析】泡菜主要是靠乳酸菌的发酵生成大量乳酸而不是靠盐的渗透压来抑制腐败微生物的。泡菜使用低浓度的盐水，或用少量食盐来腌渍各种鲜嫩的蔬菜，再经乳酸菌发酵，制成一种带酸味的腌制品，只要乳酸含量达到一定的浓度，并使产品隔绝空气，就可以达到久贮的目的。 【详解】A、泡菜发酵的主要菌种是乳酸菌，而非毛霉。毛霉主要用于腐乳制作，其产生的蛋白酶分解蛋白质，A错误； B、传统发酵技术依赖自然菌群，通常采用固体（如腐乳）或半固体（如泡菜）基质，混合菌种共同作用，符合传统工艺特点，B正确； C、醋酸菌在氧气充足的条件下将乙醇转化为乙酸。若氧气不足，醋酸菌无法进行该代谢过程。题目中“氧气不足”的条件描述错误，C错误； D、制作葡萄酒时，每隔12h左右需将瓶盖拧松一次，以排出CO2，不能打开，防止杂菌污染，D错误。 故选B。 10．（2025·江苏·三模）酸笋具有独特的酸味和香气，是乳酸菌、酵母菌、醋酸菌等多种微生物发酵而成的传统食品，主要流程如下图。相关叙述错误的是（    ）    A．竹笋杀青、漂烫既能使酶失活保持竹笋天然色泽，又能有效杀灭竹笋表面的微生物 B．乳酸菌是酸笋发酵的主要菌群，其产酸既能抑制腐败菌生长，又能形成独特的酸香 C．酵母菌是酸笋发酵的次要菌群，其产酒精既能增加醇香，又能为醋酸菌发酵提供底物 D．发酵过程监控好条件使微生物同时发酵，既能缩短发酵时长，又能提高酸度 【答案】D 【分析】果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是兼性厌氧型真菌，前期需氧，后期不需氧。（1）在有氧条件下，反应产物是CO2和H2O；（2）在无氧条件下，反应产物是CO2和C2H5OH。 【详解】A、杀青和漂烫通过高温使酶失活，防止褐变并杀灭表面微生物，确保发酵过程由目标菌群主导，A正确； B、乳酸菌作为主要菌群，产酸抑制腐败菌，同时赋予酸味和香气，符合实际发酵机制，B正确； C、酵母菌在无氧条件下产酒精，酒精可为醋酸菌（需氧条件下）提供底物转化为醋酸，但酸笋发酵以厌氧为主，若存在短暂有氧阶段，此过程可行，C正确； D、乳酸菌（厌氧）与醋酸菌（需氧）对氧气需求矛盾，无法同时高效活动。实际发酵分阶段进行：初期酵母菌产酒精（微氧或无氧），后期乳酸菌主导产酸（厌氧）。若强制同时发酵，需交替条件，反而延长时长且降低效率。因此，“同时发酵缩短时长并提高酸度”的表述不符合科学实际，D错误。 故选D。 11．（2025·河南·三模）下图为不同条件下乳酸菌和醋酸菌混合发酵结束时山楂果醋风味成分的测定。根据图示实验结果分析，下列叙述正确的是（    ） A．摇床培养可增加发酵液中氧气的量，有利于两种菌的代谢活动 B．静置状态下，适当升高发酵温度有利于发酵液中多种物质含量的增加 C．两种菌代谢产生酸性物质的过程均体现其复杂生物膜系统的分工合作 D．使用两种菌混合发酵产生的果醋比醋酸菌单独发酵的风味成分含量更高 【答案】B 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、乳酸菌是厌氧菌，摇床培养可增加发酵液中氧气的量，不利于乳酸菌的代谢活动，A错误； B、根据实验数据推测，静置状态下，适当升高发酵温度有利于发酵液中多种物质含量的增加，B正确； C、两种菌都是原核生物，都不具有复杂生物膜系统，C错误； D、该实验并未分析醋酸菌单独发酵的风味成分，因此无法和混合发酵进行对比，D错误。 故选B。 12．（2025·辽宁·三模）传统的发酵技术在中国具有悠久的历史，在长期的生产生活实践中我们的祖先掌握了很多发酵技术，直接利用原材料中天然存在的微生物保存和制作食物，比如果酒、果醋、腐乳和泡菜等。下列相关叙述错误的是（　　） A．果酒制作的过程中酿酒酵母的最适生长温度约为35℃ B．果醋制作时加入一些上次发酵保留的基底醋更有利于快速发酵 C．制作腐乳主要是通过毛霉的作用将蛋白质水解成小分子肽和氨基酸 D．制作泡菜时盐水没过菜料可为乳酸菌创造无氧环境 【答案】A 【分析】果酒发酵过程中拧松瓶盖的目的是释放二氧化碳，在果酒发酵后期，瓶内的有机物减少，酒精发酵产生的二氧化碳减少，所以拧松瓶盖的间隔时间可延长；果酒发酵条件是18～30℃、前期需氧，后期不需氧。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当氧气和糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，条件是30～35℃、一直需氧。 【详解】A、酿酒酵母的最适生长温度约为 28℃ ，A错误； B、：上次发酵保留的基底醋中含有醋酸菌，制作果醋时加入基底醋，相当于增加了醋酸菌的菌种数量，有利于快速发酵，B正确； C、制作腐乳时，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质水解成小分子肽和氨基酸 ，C正确； D、乳酸菌是厌氧菌，制作泡菜时盐水没过菜料可排出空气，为乳酸菌创造无氧环境，利于其发酵，D正确。 故选A。 13．（2025·广西南宁·三模）甲、乙、丙、丁四个生物兴趣小组分别按如下流程进行科学探究活动，据此分析错误的是（　　） 甲：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒 乙：外植体→形成愈伤组织→长出丛芽→生根→试管苗 丙：土壤浸出液→尿素为唯一氮源的培养基培养→计数 丁：各种菜洗净并切成小块→加盐、糖及调味品→装入泡菜坛→发酵→成品 A．甲组在发酵后期打开排气口的间隔时间比发酵前期延长 B．乙组形成的试管苗可直接移栽到室外的土壤中 C．丙组常采用稀释涂布平板法对细菌进行分离和计数 D．丁组泡菜坛中可以加入陈泡菜水，其作用是提供经扩大培养的发酵菌种 【答案】B 【分析】果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧 条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核， 属于真核生物，适宜酵母菌生长的温度范围是18~30°C。 【详解】A、果酒发酵后期，由于营养物质减少等原因导致酵母菌数目下降，产生的二氧化碳减少，因此甲组在发酵时打开排气口的间隔时间可逐渐延长，A正确； B、乙组形成的试管苗要经过逐步改变适应（打开瓶盖或封口膜→移栽到消毒的蛭石或珍珠岩）环境才能移栽到土壤中，B错误； C、稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，常采用稀释涂布平板法对细菌进行分离和计数，C正确； D、加入“陈泡菜水”的作用是提供经扩大培养的发酵菌种，以加快发酵速度，D正确。 故选B。 14．（2025·广东惠州·三模）基于我国传统酿醋工艺，一种以果汁为原料进行液态发酵生产果醋的流程如图。下列叙述错误的是（    ） A．制取果汁时添加果胶酶可提高果汁产量，处理①加糖可增加碳源 B．醋酸发酵阶段通入充足的氧气有利于微生物将乙醇转化为乙酸 C．酒精发酵和醋酸发酵的微生物都是原核生物，最适生长温度不同 D．家庭制作果酒、果醋不必对原材料进行灭菌操作 【答案】C 【分析】1、酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵。 2、醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。 【详解】A、制取果汁时添加果胶酶可提高果汁产量，因为果胶酶能分解果胶，使不溶性的果胶变成可溶性的半乳糖醛酸，因而可以提高果汁产量，处理①中加糖可增加碳源，为酒精发酵提供充足的底物，A正确； B、醋酸菌是好氧菌，醋酸发酵阶段通入充足的氧气有利于微生物将乙醇转化为乙酸，B正确； C、酒精发酵和醋酸发酵的微生物分别是酵母菌和醋酸菌，酵母菌是真核生物，醋酸菌是原核生物，两者的最适生长温度不同，C错误； D、家庭制作果酒、果醋一般是利用原材料自带的微生物，因此不必对原材料进行灭菌操作，D正确。 故选C。 15．（2025·重庆·三模）鸭梨醋是以鸭梨为主要原料，利用发酵技术酿制而成的一种新型果醋，具有开胃、调节肠道有益菌群等功能。鸭梨醋的发酵流程如图所示，下列叙述正确的是（    ） 材料准备→酒精发酵→醋酸发酵→过滤与澄清→陈酿→成品 A．准备材料时，发酵瓶、榨汁机需要用70%的酒精灭菌，而鸭梨不需要 B．酒精发酵和醋酸发酵所需要的菌种的细胞结构的主要区别是有无以核膜包被的细胞核 C．酒精发酵结束后，打开瓶盖，将培养温度升高到28℃才能进行醋酸发酵 D．醋酸发酵阶段是通过检测醋酸菌产生二氧化碳的情况来推测发酵程度的 【答案】B 【分析】酒精发酵起主要作用的是酵母菌，通常前期通气使酵母菌进行有氧呼吸，以便大量繁殖，后期密封使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，醋酸发酵起主要作用的菌种是醋酸菌，在有氧的条件下发酵形成醋酸。 【详解】A、准备材料时，发酵瓶、榨汁机等需用 70% 的酒精消毒，鸭梨也需要进行清洗、消毒等处理，防止杂菌污染，A 错误； B、酒精发酵利用的是酵母菌，属于真核生物；醋酸发酵利用的是醋酸菌，属于原核生物。真核细胞和原核细胞结构的主要区别是有无以核膜包被的细胞核 ，B正确； C、酒精发酵结束后，进行醋酸发酵时，不仅要将温度升高到 30 - 35°C（醋酸菌的最适生长温度 ），还需要通入无菌空气，C 错误； D、醋酸发酵阶段主要是通过检测醋酸的含量来推测发酵程度，而不是检测二氧化碳，因为糖源不足时的醋酸发酵不产生二氧化碳 ，D 错误。 故选B。 16．（2025·福建三明·三模）传统发酵技术是祖先馈赠的神奇秘方，默默滋养着中华饮食文化。下列叙述正确的是（    ） A．传统发酵以单一菌种的固体发酵和半固体发酵为主 B．腐乳制作和果酒制作都利用微生物的胞外酶起作用 C．泡菜发酵后期乳酸菌数量下降主要是因为装置漏气 D．果酒发酵转为果醋发酵需适当升温并保持通气状态 【答案】D 【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 2、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。 3、果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或酒精转化成醋酸，醋酸菌是好氧菌，最适宜生长的温度范围是30～35℃。 【详解】A、传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，A错误； B、制作果酒利用的是微生物的胞内酶，腐乳利用的是微生物的是胞外酶（主要是毛霉分泌的蛋白酶），B错误； C、泡菜发酵后期乳酸菌数量下降主要因为乳酸的含量增加（pH降低），C错误； D、果酒发酵的温度为25～30℃，醋酸菌是好氧菌，最适宜生长的温度范围是30～35℃，因此果酒发酵转为果醋发酵需适当升温并保持通气状态，D正确。 故选D。 17．（2025·青海海东·三模）传统发酵技术在我国已有几千年的历史，可以用于腐乳、酸奶、酱油、醋、泡菜和豆豉等的制作。下列有关叙述错误的是（　　） A．缺少糖源时，醋酸菌可直接利用乙醇转化为乙醛并最终生成乙酸 B．传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物 C．酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面无法存活 D．在一段时间内，果醋和果酒的制作过程中发酵液的pH均会逐渐降低 【答案】C 【分析】传统发酵是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。 【详解】A、缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛，然后再将乙醇转化为乙酸，A正确； B、传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物，如葡萄酒的制作，利用葡萄表皮上自带的酵母菌，B正确； C、酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面可以存活，只是有氧条件下代谢会受到抑制，C错误； D、果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳，二氧化碳溶于水导致pH降低，果醋发酵，醋酸菌将乙醇氧化为醋酸，pH降低，D正确。 故选C。 18．（2025·湖北十堰·三模）传统发酵技术在我国已有几千年的历史，可以用于腐乳、酸奶、酱油、醋、泡菜和豆豉等的制作。下列有关叙述错误的是（　　） A．缺少糖源时，醋酸菌可直接利用乙醇转化为乙醛并最终生成乙酸 B．传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物 C．在一段时间内，果醋和果酒的制作过程中发酵液的pH均会逐渐降低 D．酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面无法存活 【答案】D 【分析】传统发酵是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。 【详解】A、缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛，然后再将乙醛转化为乙酸，A正确； B、传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物，如葡萄酒的制作，利用葡萄表皮上自带的酵母菌，B正确； C、果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳，二氧化碳溶于水导致pH降低，果醋发酵，醋酸菌将乙醇氧化为醋酸，pH降低，C正确； D、酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面可以存活，只是有氧条件下代谢会受到抑制，D错误。 故选D。 19．（2025·黑龙江齐齐哈尔·三模）研究人员探究了不同盐浓度对泡菜发酵过程中乳酸菌含量的影响。表格为两种盐浓度下泡菜的配方，图像为乳酸菌相对浓度随发酵时间变化曲线。下列说法错误的是（　　）    　 配方1盐浓度6% 配方2盐浓度8% 水（mL） 2500 2500 食盐（g） 150 200 白菜（g） 812 812 A．操作时将食盐溶于清水，配制好的盐水需煮沸冷却后再使用 B．为保证发酵顺利进行，两组实验需定期进行通气、排气且时长相等 C．与6%相比，8%的盐浓度不利于乳酸菌增殖可能与细胞渗透失水有关 D．本研究数据表明，配方1比配方2更适和用于泡菜的制作 【答案】B 【分析】由于在泡菜制作过程中，微生物会将原料中的硝酸盐还原形成亚硝酸盐，因此在发酵初期亚硝酸盐含量会逐渐升高，发酵后期亚硝酸盐又会被某些微生物氧化成硝酸盐，亚硝酸盐含量又会逐渐下降，因此在泡菜制作过程中要检测亚硝酸盐的含量，确定合适的取食时间。 【详解】A、在制作泡菜时，将食盐溶于清水，配制好的盐水需煮沸，目的是杀灭盐水中的杂菌等微生物，冷却后再使用是为了防止高温杀死乳酸菌等发酵菌种，A正确； B、乳酸菌是厌氧菌，发酵过程需要在无氧环境中进行，定期通气会引入氧气，破坏厌氧环境，抑制乳酸菌的生长，B错误； C、当盐浓度过高时，如8%的盐浓度，外界溶液浓度大于乳酸菌细胞内溶液浓度，乳酸菌细胞会发生渗透失水，进而影响其正常的生命活动，不利于乳酸菌增殖，因此与6%相比，8%的盐浓度不利于乳酸菌增殖可能与细胞的渗透失水有关，C正确； D、本研究数据表明，配方1比配方2中的乳酸菌相对浓度较高，达到峰值时间较早，持续时间长，更适和用于泡菜的制作，D正确。 故选B。 20．（2025·浙江·三模）黄豆酱是人们喜爱的传统食品，它以黄豆为主要原料，经米曲霉、酵母菌、乳酸菌等微生物发酵而成。劳动人民在制作过程中不断改进发酵技术，下列叙述不科学的是（　　） A．黄豆酱的风味是由微生物种类决定的 B．发酵初期需通风并定期搅拌有利米曲霉大量增殖 C．酵母菌在黄豆酱发酵过程中既有需氧呼吸又有厌氧呼吸 D．乳酸菌发酵产生的乳酸既形成特殊风味又可抑制杂菌的生长 【答案】A 【分析】米曲霉是真菌的一种，米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶（如蛋白酶和脂肪酶）中能将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分。 【详解】A、黄豆酱是传统发酵食品，其风味由大豆、微生物种类及它们的代谢产物等多种因素决定的，A错误； B、米曲霉是需氧微生物，在发酵初期通风并定期搅拌，可以为米曲霉提供充足的氧气，有利于米曲霉进行有氧呼吸，从而大量增殖，B正确； C、酵母菌是兼性厌氧微生物，在黄豆酱发酵初期，氧气含量相对充足时，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；随着发酵的进行，氧气含量逐渐减少，酵母菌可进行无氧呼吸产生酒精等物质，所以酵母菌在黄豆酱发酵过程中既有有氧呼吸又有无氧呼吸，C正确； D、乳酸菌发酵产生乳酸，乳酸一方面可以形成黄豆酱特殊的风味，另一方面酸性环境可以抑制一些不耐酸杂菌的生长，D正确。 故选A。 21．（2025·黑龙江大庆·三模）完达山酒、双城烤醋、克东腐乳、翠花酸菜均为黑龙江省名牌传统发酵食品，其制作工艺被列入省非物质文化遗产名录。下列关于传统发酵技术及发酵工程的叙述正确的是（    ） A．完达山酒和双城烤醋均需在无氧条件下发酵制作 B．克东腐乳和翠花酸菜均由细菌发酵制作而成 C．传统发酵食品可由天然混合菌种通过发酵工程规模化生产 D．发酵工程培养酵母菌获得的单细胞蛋白可作为食品添加剂 【答案】D 【分析】传统发酵食品的制作离不开各种各样的微生物。乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸，可用于乳制品的发酵、泡菜的腌制等。乳酸菌种类很多，在自然界中分布广泛，空气、土壤、植物 体表、人或动物的肠道内都有乳酸菌分布。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌传统发酵食品的制作离不开各种各样的微生物。乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸，可用于乳制品的发酵、泡菜的腌制等。乳酸菌种类很多，在自然界中分布广泛，空气、土壤、植物 体表、人或动物的肠道内都有乳酸菌分布。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌 【详解】A、完达山酒需要酵母菌无氧发酵，双城烤醋所需微生物位醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，需有氧发酵，A错误； B、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，属于真菌；参与酸菜制作的微生物是乳酸菌，原核生物，属于细菌，B错误； C、传统发酵依赖天然混合菌种自然发酵，C错误； D、发酵工程培养的酵母菌菌体含丰富蛋白质，因此单细胞蛋白用作食品添加剂，D正确。 故选D。 22．（2025·陕西·三模）利用苹果制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸菌，发酵5天。下列有关叙述正确的是（　　） A．不同微生物所需的最适温度不同，接入醋酸菌后，应适当升高发酵温度 B．苹果中的葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的线粒体中被分解 C．酵母菌和醋酸菌发酵过程中均需在密闭的条件下完成 D．醋酸菌和酵母菌均以有丝分裂的方式进行增殖 【答案】A 【分析】果酒制作的原理是酵母菌在无氧的条件下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、酵母菌适宜温度是18~30℃，醋酸菌最适温度为30~35℃，接入醋酸菌后，应适当升高发酵温度，A正确； B、葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的细胞质基质中被分解成丙酮酸，进入线粒体中被进一步分解，B错误； C、酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖，再密闭进行酒精发酵；醋酸菌为好氧菌，需持续通气，C错误； D、酵母菌一般以出芽的方式繁殖，醋酸菌以二分裂的方式进行增殖，D错误。 故选 A。 23．（2025·四川达州·三模）酸笋是螺蛳粉的“灵魂”。在自然发酵过程中，酸笋中的乳酸菌作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质，形成了螺蛳粉的特殊风味。酸笋的传统发酵工艺包括原材料处理、装坛、发酵等过程。下列相关叙述正确的是（    ） A．乳酸菌代谢类型为异养厌氧型，所以不会分布在空气中 B．原材料处理主要是对采摘后的竹笋进行剥壳、清洗和灭菌 C．装坛时应保证竹笋被盐水全部浸没，才能保证发酵的正常进行 D．随着发酵的进行，发酵液pH值逐渐升高后保持稳定 【答案】C 【分析】制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的。发酵期间，乳酸会不断积累。泡菜在腌制过程中会有亚硝酸盐产生，亚硝酸盐含量呈现先上升后下降的趋势。 【详解】A、在自然界中，乳酸菌分布广泛，空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内都分布有乳酸菌，A错误； B、竹笋中含有发酵的天然菌种，故不能对采摘后的竹笋进行灭菌，否则会杀死发酵的天然菌种，B错误； C、盐水浸没可以创造无氧环境，利于乳酸菌生存繁殖，同时减少杂菌污染，C正确； D、乳酸逐渐积累导致发酵液pH值逐渐降低后保持稳定，D错误。 故选C。 24．（2025·内蒙古通辽·三模）传统发酵食品是我国饮食文化的重要组成部分。下表中发酵食品制作所使用的主要菌种和制作条件均正确的是（    ） 选项 食品名称 主要菌种 制作条件 A 腐乳 毛霉 有氧 B 果醋 醋酸菌 无氧 C 酸奶 乳酸菌 有氧 D 泡菜 酵母菌 无氧 A．A B．B C．C D．D 【答案】A 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。 4、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、腐乳制作的主要菌种是毛霉，毛霉是需氧型微生物，在有氧条件下生长繁殖，将豆腐中的成分进行分解等一系列反应，A正确； B、果醋制作的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，需要在有氧条件下将酒精转化为醋酸，B错误； C、酸奶制作的主要菌种是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，在无氧条件下将葡萄糖分解产生乳酸，C错误； D、泡菜制作的主要菌种是乳酸菌，而不是酵母菌，乳酸菌在无氧条件下发酵产生乳酸，D错误。 故选A。 25．（2025·湖南郴州·三模）《礼记·月令篇》里记载有古遗六法：秫稻必齐，曲蘖必时，湛炽必洁，水泉必香，陶器必良，火剂必得。它是中国最古老的酿酒工艺的记载。下列相关叙述错误的是（　　） A．酒精是酵母菌利用“秫稻”在无氧条件下的初生代谢物 B．“曲蘖必时”，酒曲中酵母菌的大量繁殖需要适宜的温度（时节） C．“湛炽必洁”，严格杀菌消毒，一定程度上可避免杂菌对发酵的影响 D．“陶器必良”，选用质地优良、无渗漏的陶器，为酵母菌的发酵隔绝空气形成厌氧的环境 【答案】A 【分析】酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，产生二氧化碳和水；在无氧条件下酵母菌也能进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～30℃，pH最好是弱酸性。 【详解】A、初生代谢物是生物生长和生存所必需的代谢产物，包括糖类、脂质、蛋白质和核酸等。次生代谢物不是生物生长所必需的，在无氧条件下酵母菌能进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酒精是次生代谢物，A错误； B、“曲蘖必时”意思是酒曲的使用要选择合适的时间。酵母菌的生长和繁殖需要适宜的温度，不同的时节温度不同，在适宜的温度条件下，酒曲中的酵母菌才能大量繁殖，为后续的酿酒过程提供足够的菌种，B正确； C、“湛炽必洁”强调酿酒过程中要保证清洁，严格杀菌消毒。在酿酒过程中，如果混入了杂菌，杂菌可能会与酵母菌竞争营养物质和生存空间，还可能会产生一些有害物质，从而影响发酵过程和酒的品质。因此，严格杀菌消毒一定程度上可避免杂菌对发酵的影响，C正确； D、“陶器必良”要求选用质地优良、无渗漏的陶器。在酿酒过程中，需要为酵母菌创造一个无氧的环境，让其进行无氧呼吸产生酒精。质地优良、无渗漏的陶器可以有效地隔绝空气，形成厌氧环境，有利于酵母菌发酵产生酒精，D正确。 故选A。 26．（2025·陕西商洛·三模）某小组同学选用新鲜成熟的葡萄制作果酒和果醋，流程如图所示。下列叙述正确的是（    ）    A．过程①加入少量的胶原蛋白酶可提高果肉的出汁率 B．过程②需定时将瓶盖打开，以免过多的CO2抑制发酵 C．进行过程③的微生物存在将乙醇转化为乙酸的酶 D．从过程②到过程③，需要将发酵温度适当降低 【答案】C 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、过程①加入少量的纤维素酶、果胶酶可提高果肉的出汁率，A错误； B、过程②需定时将瓶盖拧松，以释放酒精发酵时产生的CO2，B错误； C、过程③指的是果醋的制作过程，其中涉及的主要微生物是醋酸菌。醋酸菌能够将乙醇转化为乙酸，这是制作果醋的关键步骤。醋酸菌细胞内存在特定的酶系，能够催化乙醇氧化为乙醛，再将乙醛氧化为乙酸，C正确； D、酒精发酵的适宜温度是 18~30 ℃，醋酸发酵的适宜温度为30~35 ℃，从过程②到过程③，需要将发酵温度适当升高，D 错误。 故选C。 二、多选题 27．（2025·河北沧州·三模）我国劳动人民很早就发明了家庭制酱技术，即将长白毛的馒头、蒸煮软烂的黄豆置于干净的器皿中，加入适量食盐、凉开水，搅拌成泥状，盖上纱布置于通风阴凉处，每日搅拌一次，发酵成熟后再暴晒、过滤。下列有关叙述正确的是（　　） A．传统制酱是在以毛霉为主的多种微生物的共同参与下完成的 B．制酱过程中蛋白酶、脂肪酶可将大分子有机物分解为小分子 C．发酵过程中能从发酵液中分离出产淀粉酶的微生物 D．传统制酱属于半固体发酵，发挥作用的微生物大多进行有氧呼吸 【答案】ACD 【分析】腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸。 【详解】A、长白毛的馒头上主要生长着毛霉，因此传统制酱是在以毛霉为主的多种微生物的共同参与下完成的，A正确； B、脂肪酶分解脂肪，脂肪不是大分子有机物，B错误； C、发酵过程中存在能产生淀粉酶的微生物，可将馒头中的淀粉水解为二糖或单糖，再被微生物利用，C正确； D、传统制酱属于半固体发酵，发酵过程中不进行密封，故发挥作用的微生物大多进行有氧呼吸，D正确。 故选ACD。 三、实验题 28．（2025·贵州遵义·三模）食醋工业发酵过程中，乙醇体积分数及乙酸浓度会影响醋酸菌的生长代谢，进而影响食醋的品质和口感。如图所示为研究者通过原生质体融合技术筛选出具有高乙醇、高乙酸耐受性醋酸菌的部分过程。    回答下列问题： (1)摇床培养时温度设置为30℃的原因是 ；图中溶解醋酸菌细胞壁的物质是 。 (2)在制备醋酸菌原生质体时， （填“能”或“不能”）用低渗溶液代替一定浓度的高渗溶液，加入高渗溶液的目的是 。 (3)研究者将醋酸菌原生质体用紫外线处理后分成两组，分别接种到富含 的选择培养基上，再使用 方法将筛选出的原生质体融合，获得再生能力的融合菌株。该菌株能耐乙醇、耐乙酸的根本原因是 。 【答案】(1) 30℃是醋酸菌最适生长温度 溶菌酶 (2) 不能 防止醋酸菌原生质体在低渗溶液中吸水涨破，保护原生质体的活性 (3) 高乙醇、高乙酸 化学或物理/PEG融合法/电融合法 紫外线处理后使醋酸菌原生质体发生基因突变，产生耐乙醇和耐乙酸的突变体 【分析】酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧环境下都能生存，属于兼性厌氧菌。 【详解】（1）醋酸菌生长的最适温度为30−35∘C，将摇床培养时温度设置为30∘C，是因为此温度接近醋酸菌生长的最适温度，在该温度下醋酸菌的生长和代谢较为旺盛，有利于醋酸菌的培养，细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖，溶菌酶能够特异性地破坏肽聚糖的结构，从而溶解细菌细胞壁，所以图中溶解醋酸菌细胞壁的物质是溶菌酶。 （2）醋酸菌细胞壁被溶菌酶溶解后，原生质体失去了细胞壁的保护，在低渗溶液中会因吸水过多而涨破，因此在制备醋酸菌原生质体时，不能用低渗溶液代替一定浓度的高渗溶液，加入高渗溶液的目的​​：防止醋酸菌原生质体在低渗溶液中吸水涨破，保护原生质体的活性。 （3）由于要筛选出具有高乙醇、高乙酸耐受性醋酸菌，所以研究者将醋酸菌原生质体用紫外线处理后分成两组，分别接种到富含乙醇、乙酸的选择培养基上，原生质体融合常用的方法是化学或物理（PEG融合法或电融合法），所以再使用聚乙二醇（PEG）融合法将筛选出的原生质体融合，获得再生能力的融合菌株，该菌株能耐乙醇、耐乙酸的根本原因是其遗传物质（DNA）发生了改变，具有了耐受乙醇和乙酸的相关基因，所以可能是紫外线处理后使醋酸菌原生质体发生基因突变，产生耐乙醇和耐乙酸的突变体。 微生物培养及计数考点02 一、单选题 1．（2025·山西·三模）杏果中富含香味前体物质，传统的香料提取方法会浪费大量的杏果渣，研究小组从杏果园的土壤中筛选出具有显著产香能力的菌株（如图），通过发酵对杏果渣进行二次加工利用，有效增加了产品风味并提高了产品感官品质。下列说法错误的是（　　） A．虽然利用土壤样品进行培养，但此过程的关键仍是防止杂菌污染 B．微生物的纯培养是指采用平板划线法等接种后培养得到单菌落 C．该技术的原理是通过选择培养基直接选出产香效果最佳的菌株 D．微生物发酵产香具有成本低、产量高、所产废弃物较少等优点 【答案】C 【分析】微生物常见的接种的方法： (1)平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生 长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 (2)稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、利用土壤取样是为了获得所需菌种，为了不受其他微生物的影响，以后的操作过程的关键仍是防止杂菌污染，A正确； B、微生物的纯培养，指的是采用平板划线法或稀释涂布平板法将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到单菌落，B正确； C、该技术是通过选择培养和纯培养再根据嗅香评价的方式选出产香效果最佳的菌株，C错误； D、通过发酵对杏果渣进行二次加工利用，并且微生物繁殖代谢快，体现了微生物发酵产香具有成本低、产量高、所产废弃物较少等优点，D正确。 故选C。 2．（2025·江西·三模）自生固氮菌存在于土壤中，可将空气中的N2固定为NH4+。为获得自生固氮菌，某兴趣小组用取土铲取土壤样品，并将5g土样溶于95mL无菌水中制成母液。将母液稀释103倍后，取0.1mL稀释液接种在Ashby培养基上（配方如图所示），在28℃条件下培养5天，培养基上的平均菌落数为45个。下列说法错误的是（    ） Ashby培养基 甘露醇···············10g NaCl················0.2g CaCO3··················5g KH2PO4···············0.2g MgSO4···············0.2g CaSO4···············0.1g 琼脂···············适量 A．取土铲等用具在使用前应进行灭菌处理 B．Ashby培养基的组分中缺少氮源，应增加氮源 C．将稀释菌液接种到培养基上应采用稀释涂布平板法 D．该实验所用的土样中，自生固氮菌约为9×106个/g 【答案】B 【分析】选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 稀释涂布平板法：可用于分离微生物外，还可以统计样品中活菌的数量。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。 【详解】A、为了防止杂菌污染，取土铲等用具在使用前应进行灭菌处理，A正确； B、因为自生固氮菌能固定空气中的氮气，所以 Ashby 培养基的组成成分中缺少氮源，这样可以筛选出自生固氮菌，B错误； C、 将稀释菌液接种到培养基上应采用稀释涂布平板法，该方法可以进行计数，C正确； D、该实验所用的土样中自生固氮菌约为（45÷0.1）×103×20=9×106个/g，D正确。 故选B。 3．（2025·湖南常德·三模）如图所示，自来水经滤膜过滤后，转移到牛肉膏蛋白胨培养基上，适宜条件下培养48 h染色后统计变色菌落数目为165个。下列说法正确的是（　　） A．若培养基含伊红—亚甲蓝，大肠杆菌菌落呈蓝绿色 B．自来水中大肠杆菌浓度是33个·L-1，比真实值偏大 C．为了提高准确度，需设重复实验，但不用空白对照 D．若培养基菌落数目大于300，可适当减少自来水量 【答案】D 【分析】分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在周体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 【详解】A、若培养基含伊红-美蓝，大肠杆菌菌落呈黑色或紫黑色有金属光泽，A错误； B、自来水中大肠杆菌浓度是165÷5=33个/L，由于两个或多个大肠杆菌可能长成一个菌落，因此比真实值偏小，B错误； C、为了提高准确度，需设重复实验，同时需要设置空白对照，C错误； D、若培养基菌落数目大于300，说明细菌数目较多，可适当减少自来水量，D正确。 故选D。 4．（2025·重庆·三模）硝化细菌是一种好氧菌，可有效净化水体中铵盐，降低高浓度铵盐引发的池塘养殖对虾的死亡率。科研人员拟从当地对虾养殖池塘中筛选出对铵盐降解率高的硝化细菌菌株，操作流程如下图所示。下列叙述错误的是（　　） A．在配制选择培养基筛选硝化细菌时，不需要添加氮源 B．从对虾死亡率低的养殖池塘中取样，能提高筛选的成功率 C．用图示方法纯化菌种时，不能将最后一次的划线与第一次的划线相连 D．应选择铵盐浓度减少最多的一组候选菌进行后续培养 【答案】A 【分析】1、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生 长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、振荡培养：提供充足氧气、并使细菌与营养物质充分接触，扩大培养。 【详解】A、在配制选择培养基筛选硝化细菌时，要以铵盐为唯一氮源，A错误； B、本题想要筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，那么从对虾死亡率低的养殖池塘中取样，能提高筛选的成功率，B正确； C、图示是平板画线法，在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，不能将最后一次的划线与第一次的划线相连，C正确； D、对铵盐降解率越高，培养基中铵盐浓度减小得越多，所以可选择铵盐浓度减小得最多的一组候选菌进行后续培养，D正确。 故选A。 5．（2025·湖南湘西·三模）乳酸菌在食品工业和农业生产中应用广泛。下列叙述正确的是（    ） A．乳酸菌通过二分裂增殖，在无氧条件下可将葡萄糖分解为乳酸 B．制作酸奶时应对原料进行高压蒸汽灭菌，以彻底杀灭所有微生物 C．青贮饲料中添加乳酸菌，主要通过产生抗生素来抑制杂菌生长 D．培养乳酸菌时需添加生长因子，但不需要添加氮源 【答案】A 【分析】泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。 【详解】A、乳酸菌是细菌属于原核生物，通过二分裂增殖，在无氧条件下可将葡萄糖分解为乳酸，A正确； B、制作酸奶时原料为牛奶；牛奶可使用巴氏消毒法，此方法可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且基本不会破坏牛奶的营养成分；而高压蒸汽灭菌会破坏牛奶中的营养成分，且会把菌种乳酸菌杀死，B错误； C、青贮饲料中添加乳酸菌，主要通过产生乳酸来抑制杂菌生长，C错误； D、培养乳酸菌时需添加生长因子，也需要添加氮源，D错误。 故选A。 6．（2025·湖北·三模）幽门螺杆菌（含有脲酶）感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。下列有关叙述正确的是（　　） A．可用牛肉膏蛋白胨培养基作对照证明选择培养基的选择作用 B．鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂和缓冲物质 C．分离纯化幽门螺杆菌时应使用以葡萄糖为唯一氮源的培养基 D．对幽门螺杆菌进行分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法 【答案】A 【分析】1、脲酶可以将尿素分解成二氧化碳和氨气。 2、分离纯化细菌的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。 【详解】A、为了证明选择培养基的选择作用，可用牛肉膏蛋白胨培养基作对照，A正确； B、鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂，但不能加缓冲物质，B错误； C、幽门螺杆菌合成脲酶，可以利用尿素，所以分离纯化幽门螺杆菌时应使用以尿素为唯一氮源的培养基，C错误； D、对幽门螺杆菌进行分离和计数要用稀释涂布平板法，D错误。 故选A。 7．（2025·安徽合肥·三模）番茄灰霉病由灰葡萄孢菌引起，严重影响番茄的产量和品质。某些番茄植株组织中存在的内生菌可防治灰葡萄孢菌，科研人员在大量感染番茄灰霉病的田中，取样、分离并纯化出一种芽孢杆菌，为探究其对番茄灰霉病的防治作用，开展了有关实验，结果如图。下列有关分析错误的是（    ） A．应选择田中患病番茄植株进行采样，并对样品进行充分消毒 B．操作过程中的无菌技术可以保护操作者，避免被微生物感染 C．A组作为对照可排除培养基成分及小圆片对实验结果的影响 D．据实验结果推测，该种芽孢杆菌可以用于番茄灰霉病的防治 【答案】A 【分析】从图中看出，A组灰葡萄孢菌长满了培养基，B组小圆片周围没有灰葡萄孢菌生长，说明芽孢杆菌可以抑制灰葡萄孢菌的生长。 【详解】A、实验目的是探究芽孢杆菌对番茄灰霉病的防治作用，所以应该选择田中患病番茄植株进行采样，培养灰葡萄孢菌，不能对样品消毒，A错误； B、操作过程中的无菌技术可以防止杂菌污染，同时保护操作者，避免被微生物感染，B正确； C、A组中央接种灰葡萄孢菌，周边三个小圆片接种无菌水，作为对照，可以排除培养基成分及小圆片对实验结果的影响，C正确； D、从图中可以看出，B组周边三个小圆片接种了芽孢杆菌，在其周围没有灰葡萄孢菌的生长，说明该种芽孢杆菌可以抑制灰葡萄孢菌的生长，可以用于番茄灰霉病的防治，D正确。 故选A。 8．（2025·湖南长沙·三模）传统酱油以大豆等为原料，在米曲霉等多种微生物参与下，经过制曲和发酵两个主要阶段酿造获得。下列说法中错误的是（    ） A．大豆等原料为微生物提供碳源、氮源、无机盐等营养 B．优良米曲霉菌可通过诱变育种、基因工程育种等方法获得 C．制曲阶段主要是让米曲霉等菌种大量生长，产生多种酶类 D．统计酱渣中含有的微生物种类必须使用固体培养基接种观察 【答案】D 【分析】米曲霉在发酵过程中产生的蛋白酶能将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，产生的脂肪酶能将脂肪分解为甘油和脂肪酸，使发酵的产物具有独特的风味。 【详解】A、大豆中含有蛋白质、脂肪、糖类等有机物，能为微生物提供碳源、氮源，同时还含有一些无机盐等营养成分，A正确； B、诱变育种可以通过物理或化学因素诱导米曲霉菌发生基因突变，筛选出优良性状的菌种；基因工程育种能够定向地改造米曲霉菌的基因，从而获得优良菌种，B正确； C、制曲阶段创造适宜的条件让米曲霉等菌种大量生长，这些菌种会产生淀粉酶、蛋白酶等多种酶类，为后续发酵阶段分解原料中的成分做准备，C正确； D、初步统计酱渣中含有的微生物种类既可以使用固体培养基接种，通过菌落鉴定；也可以使用液体培养基培养后通过显微镜直接观察，D错误。 故选D。 9．（2025·河南周口·三模）下列实验操作正确的是（    ） A．将涂布器放在酒精灯火焰上灼烧，灼烧后可立即均匀涂布菌液 B．测土壤中细菌数目，每24h统计一次菌落数目，直至出现30～300的菌落数 C．将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液混合并加入核酸染料后进行电泳 D．DNA粗提取时，将洋葱研磨液倒入离心管中离心后，取上清液加入预冷的酒精溶液中再搅拌或离心 【答案】D 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、灼烧后还需冷却才能涂布菌液，否则高温会杀死菌种，A错误； B、每24h统计一次菌落数目，直至菌落数稳定，并且要有3个或3个以上菌落数在30～300范围内的平板作为结果，B错误； C、核酸染料应加入琼脂糖溶液中，C错误； D、将洋葱研磨液倒入离心管中离心，取上清液加入预冷的酒精溶液中再搅拌或离心，D正确。 故选D。 10．（2025·安徽·三模）荧蒽（C16H10）是一种有毒性的多环芳烃，利用同位素示踪法对红球菌BAP-1跨膜运输14C—荧蒽（14C—FLU）的过程进行研究：控制14C—FLU的初始浓度为0.25μmol/L，检测红球菌BAP—1在添加或不添加NaN3（ATP抑制剂）时，细胞内外14C—FLU含量变化，结果如图。其中空白组不添加红球菌BAP—1，仅添加14C—FLU。下列叙述错误的是（　　）    A．FLU可以为红球菌BAP-1提供碳源 B．红球菌BAP—1可降解所摄取的14C—FLU C．红球菌BAP—1可能是通过载体蛋白摄取14C—FLU D．接种红球菌BAP-1去除土壤中残留的FLU既高效又安全 【答案】D 【分析】培养基的组成成分包括碳源、氮源，水、无机盐，有的还有生长因子，以CO2为唯一碳源的培养基培养自养微生物，培养基中还必须提供氮源、水、无机盐。 【详解】AB、据图1，细胞内膜结合14C-FLU含量在1～48min之间不断下降，说明红球菌BAP-1可降解所摄取的14C-FLU，FLU可以为红球菌BAP-1提供碳源，AB正确； C、在有NaN3（ATP抑制剂）时，细胞内FLU含量显著降低（图1），说明红球菌的摄取依赖ATP，属于主动运输，而主动运输需载体蛋白协助，C正确； D、红球菌可高效降解FLU，但题目未说明其对土壤生态的安全性（如是否产生有害代谢产物、是否破坏微生物平衡等），D错误。 故选D。 11．（2025·浙江·三模）为检测自来水中细菌数量，研究人员向3个试管中各加入9mL无菌水，取自来水水样1mL，加入到A试管中，摇匀后从A试管取1mL加入B试管中，重复此步骤，直到完成所有预定稀释。从每个试管中分别取0.1mL接种至两个平行平板中，培养后进行菌落计数。4个不同水样的检测结果如下表。下列叙述错误的是（    ） 水样编号 A平行1 A平行2 B平行1 B平行2 C平行1 C平行2 1 0 0 0 0 0 0 2 数不清 数不清 150 160 15 20 3 数不清 数不清 236 248 35 33 4 数不清 数不清 数不清 数不清 320 330 A．本实验所用的培养基为LB固体培养基 B．从每个试管分别取0.1mL涂布接种两个平行平板是为了减少误差，使实验结果更准确 C．水样2的细菌数约为1.75×104个/mL，水样4的细菌数明显比其他水样多 D．水样3中B组平板上菌落数明显低于C组的10倍，原因可能是B组平板上出现多个细菌形成同一个菌落的现象 【答案】C 【分析】1、配制乳酸菌分离培养基：制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。该培养基的化学成分包括碳源、氮源、水、无机盐四类营养成分，在培养该细菌的培养基中还需要添加维生素。培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。 2、分离微生物常用的方法：①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。其中，稀释涂布平板法还可以用于对微生物进行计数。 【详解】A、本实验是检测自来水中细菌数量，所用的培养基为细菌通用的LB培养基，由于要数菌落数，因此是固体培养基，A正确； B、涂布接种两个平行平板是为了减少误差，使实验结果更准确，B正确； C、A、B、C试管的稀释倍数分别是101、102、103，水样2的细菌数约为103×（15+20）/2/0.1=1.75×105个/mL，C错误； D、B组平板上菌落数较多，B组稀释度不够，B组平板上很可能出现多个细菌形成同一个菌落的现象，D正确。 故选C。 12．（2025·重庆·三模）根据微生物对氧气需求的不同，可以将它们分为好氧菌，兼性厌氧菌，微好氧菌，耐氧菌和厌氧菌。微好氧菌只能在较低的氧分压下正常生长，耐氧菌不需要任何氧但氧气对其无害。图1展示了氧气对其中三种菌的生长影响，图2展示了这五种菌在半固体琼脂培养基中的生长状态。下列说法错误的是（    ）    A．醋酸杆菌为好氧菌，酵母菌为兼性厌氧菌，乳酸杆菌为耐氧菌 B．兼性厌氧菌在有氧环境下较无氧环境下生长情况更好，因为有氧呼吸比无氧呼吸产能效率更高 C．氧气对厌氧菌有毒，可能是由于这些细菌缺乏处理氧自由基的酶，自由基会破坏生物膜系统 D．将微生物接种在图2半固体琼脂培养基的接种方法应为稀释涂布平板法 【答案】D 【分析】微生物的接种方法有稀释涂布平板法、平板划线法。 【详解】A、从右图看出，醋酸杆菌分布在试管的最顶部，是好氧菌，酵母菌在顶部分布较多，但底部也有分布，是兼性厌氧菌，乳酸菌在顶部和底部都分布均匀，其生长不需要任何氧但氧气对其无害，是耐氧菌，A正确； B、有氧呼吸可以将物质彻底氧化分解并释放能量，其能量的利用效率更高，所以兼性厌氧菌在有氧环境下较无氧环境下生长情况更好，B正确； C、氧气对厌氧菌有毒，因为氧化过程中可能会产生自由基，是由于这些细菌缺乏处理氧自由基的酶，自由基会破坏生物膜系统，C正确； D、将微生物接种在图2半固体琼脂培养基的接种方法应为穿刺接种法，D错误。 故选D。 13．（2025·安徽·三模）采用平板划线法和稀释涂布平板法都能将单个微生物分散在固体培养基上，经培养得到单菌落。有关以上两种方法的比较分析，下列说法正确的是（　　） A．对接种工具均采用灼烧灭菌法灭菌，但灭菌的具体操作存在差异 B．都先用微量移液器取菌液，再分别用接种环、涂布器完成接种操作 C．接种后，都需要立即将平板倒置并放入恒温培养箱中培养 D．发酵工程中，以上两种方法均可将菌种接种到发酵罐内 【答案】A 【分析】1、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。 【详解】A、平板划线法和稀释涂布平板法均通过灼烧灭菌，但是操作方法有不同，如平板划线法使用接种环直接灼烧灭菌，稀释涂布平板法先将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中；再涂布器灼烧灭菌，A正确； B、平板划线法中用接种环蘸取菌液，不需要用微量移液器取菌液，B错误； C、接种后，都需要待菌液被培养基吸收后，再将平板倒置并放入恒温培养箱中培养，C错误； D、这两种方法主要用于实验室微生物的分离、纯化，不适用于直接接种到发酵罐内，D错误。 故选A。 14．（2025·江苏徐州·三模）乙醇是酵母菌发酵的重要产物，积累到一定程度会对酵母菌产生毒害作用。乙醇在发酵过程中易被一些不耐酸的微生物污染，造成重大经济损失，因此生产中需要加强耐酸酵母菌进行筛选，现对某酒厂耐酸性酿酒酵母菌进行分离与筛选，下列有关叙述错误的是（    ） A．从窖池底泥黄浆水中寻找耐酸酵母菌的原因是有机酸含量高，有利于耐酸酵母菌的筛选 B．过程②需充分振荡以增大培养液的溶氧量，使碳源、氮源等营养物质与菌体充分接触 C．过程③能直接统计出窖池底泥中耐酸酵母菌的数量 D．将④菌株接种到以赖氨酸为唯一氨源的培养基上，无菌落说明赖氨酸不是耐酸酵母菌的氮源 【答案】C 【分析】酿酒的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物。 【详解】A、寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，从窖池底泥黄浆水寻找耐酸酵母菌的原因是有机酸含量高，有利于耐酸酵母菌的筛选，A正确； B、过程②需要充分振荡以增大培养液的溶氧量，有利于酵母菌的繁殖，同时还使碳源、氮源等营养物质与菌体充分接触，B正确； C、过程③的接种方法为平板划线法，该方法不能统计窖池底泥中耐酸酵母菌的数量，C错误； D、将④中的菌株接种到以赖氨酸为唯一氮源的培养基上，无菌落生长说明耐酸酵母菌不能利用赖氨酸，即赖氨酸不是耐酸酵母菌的氮源，D正确。 故选C。 15．（2025·浙江温州·三模）科研小组欲验证某细菌分泌的X酶为青霉素酶（能分解青霉素），进行如下实验：在培养基上接种大肠杆菌，分别放置经不同溶液浸润的滤纸圆片甲~丁，并在适宜条件下培养。一段时间后观察滤纸圆片周围的抑菌圈（细菌生长被抑制而形成的透明环形区域），实验处理和结果如表所示。 组别 滤纸圆片浸润的溶液种类 实验结果 甲 ① 未出现抑菌圈 乙 ② 出现抑菌圈 丙 经青霉素酶处理的青霉素溶液 未出现抑菌圈 丁 经X酶处理的青霉素溶液 ③ 下列叙述错误的是（    ） A．培养基上接种的是青霉素敏感型大肠杆菌 B．①和②分别为无菌水和青霉素溶液 C．甲、乙为对照组，丙、丁为实验组 D．③为“未出现抑菌圈”，则X酶为青霉素酶 【答案】C 【分析】青霉素抑制大肠杆菌的生长，青霉素酶可以将青霉素分解，因此大肠杆菌可以生长。 【详解】A、实验目的是验证某细菌分泌的X酶为青霉素酶，在培养基上接种大肠杆菌，培养基中加入青霉素，如果X酶为青霉素酶，则可以将青霉素分解，大肠杆菌可以存活，如果不是青霉素酶，则青霉素抑制大肠杆菌的生长，所以培养基上接种的是青霉素敏感型大肠杆菌，A正确； B、①中没有出现抑菌圈，对比四组，应该是加入了无菌水，作为空白对照，②出现抑菌圈，说明加入了青霉素，B正确； C、丙加入了经青霉素酶处理的青霉素溶液，也是对照组，只有丁是实验组，C错误； D、如果③为“未出现抑菌圈”，说明X是青霉素酶，将青霉素分解，不能抑制大肠杆菌的生长，D正确。 故选C。 16．（2025·河南·三模）牙刷在使用后会残留大量的细菌，科研人员比较了2.5%的碳酸氢钠溶液和沸水对牙刷的消毒效果，实验结果如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．培养微生物的培养基和接种工具都要先进行高压蒸汽灭菌 B．图中实际菌落数的计数方法是平板划线法 C．建议定期使用2.5%的碳酸氢钠溶液对牙刷进行消毒 D．将接种的培养基倒置培养24小时即可比较不同方法消毒效果的差异 【答案】C 【分析】1、培养基的成分：水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等。 2、常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法等。 【详解】A、培养微生物的培养基一般采用高压蒸汽灭菌，而接种工具如接种环等采用灼烧灭菌，接种针等也可采用干热灭菌，并非都进行高压蒸汽灭菌，A错误； B、图中实际菌落数的计数方法是稀释涂布平板法，平板划线法不能用于计数，B错误； C 、从图中可以看出，2.5%的碳酸氢钠溶液组的实际菌落数明显低于空白对照组，且与沸水组相比，在一定时间内也能较好地抑制细菌生长，所以建议定期使用 2.5%的碳酸氢钠溶液对牙刷进行消毒，C正确； D、将接种的培养基倒置培养 24 小时，时间可能过短，不同方法消毒效果的差异可能不明显，应培养适当时间，观察菌落生长情况来比较差异，D错误。 故选C。 17．（2025·四川内江·三模）某研究小组从某草本豆科植物中分离得到甲和乙两种根瘤菌菌株，欲比较并筛选出固氮能力强的菌株，用于发酵工程生产根瘤菌肥。下列相关叙述错误的是（　　） A．可选择无氮源、含有机碳源的培养基培养根瘤菌 B．培养相同时间后，根据菌落生长情况可初步比较二者固氮能力 C．细菌计数板适用于监控根瘤菌发酵过程中活细胞数量的变化 D．根瘤菌肥作为微生物肥料可增进土壤肥力、改良土壤结构，促进植株生长 【答案】C 【分析】在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。获得纯培养物的过程称纯培养，包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。 【详解】A、根瘤菌可以通过自身的固氮作用将大气中的氮气转化成可利用的氮，所以培养根瘤菌时，可选择无氮源、含有机碳源的培养基，A正确； B、培养相同时间后，根据菌落生长情况可初步比较二者固氮能力，B正确； C、细菌计数板计数无法区分死菌和活菌，C错误； D、微生物肥料利用微生物在代谢过程中产生的有机酸、生物活性物质等来增进土壤肥力，改良土壤结构，促进植株生长，常见的有根瘤菌肥、固氮菌肥等，D正确。 故选C。 18．（2025·江西景德镇·三模）利用杨木生产二代燃料乙醇，需要预处理、酶解和发酵等阶段（预处理过程所需的果胶酶常来自于黑曲霉等微生物）。下图为发酵阶段菌种接种量对发酵结果的影响。下列说法正确的是（    ） A．培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，果胶酶是黑曲霉分泌的一种单细胞蛋白 B．在伊红—亚甲蓝培养基上可筛选出高产纤维素酶的菌株用于酶解糖化过程 C．接种量超过15%时酒精产量反而有所降低的原因可能是菌种生长消耗大量的糖分 D．接种的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量相等 【答案】C 【分析】1、培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A、培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，但单细胞蛋白指微生物菌体，果胶酶不属于单细胞蛋白，A错误； B、伊红—亚甲蓝培养基是鉴定大肠杆菌的培养基，本实验应该用刚果红培养基筛选高产纤维素酶菌株，B错误； C、由图可知，菌种接种量为15%时对应的酒精含量达到最大值，接种量超过15%，菌种数量大，自身的生长会大量消耗反应物，导致酒精产量降低，C正确； D、酒精发酵的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量曲线有交点，但两者的纵坐标数值及单位均不同，故发酵后二者含量不同，D错误。 故选C。 19．（2025·陕西安康·三模）链霉素是一种从灰色链霉菌的培养液中提取的氨基糖苷类抗生素，对由野油菜黄单胞杆菌侵染所引起的油菜黑腐病有较好的防治作用。下列相关叙述正确的是（    ） A．链霉素是灰色链霉菌生长所必需的初生代谢物 B．链霉素是在灰色链霉菌的核糖体上直接合成的 C．对灰色链霉菌进行扩大培养的培养基一般为液体培养基 D．对灰色链霉菌进行计数时采用平板划线法 【答案】C 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落； ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、链霉素是从灰色链霉菌培养液中提取的，对其他病菌有防治作用，属于次生代谢物，不是灰色链霉菌生长所必需的初生代谢物，A错误； B、链霉素是氨基糖苷类抗生素，属于小分子化合物，不是蛋白质，不是在核糖体上直接合成的 ，B错误； C、液体培养基有利于微生物与营养物质充分接触，能为微生物提供更充足的营养和空间，对灰色链霉菌进行扩大培养的培养基一般为液体培养基 ，C正确； D、平板划线法主要用于分离纯化微生物，不能用于计数；对灰色链霉菌进行计数常用稀释涂布平板法或显微镜直接计数法等，D错误。 故选C。 20．（2025·江西·三模）土壤污染威胁农产品质量及生态安全，重金属污染是土壤污染的主要方面。科学家从不锈钢污染土壤中分离到某种耐高浓度铁的微生物，其操作流程如下图所示，下列有关叙述正确的是（    ） A．不锈钢污染土壤中耐重金属细菌种群密度比较大，利于对该种耐高浓度铁细菌的筛选 B．甲乙都属于选择培养基，都要添加琼脂和高浓度的铁，但在操作流程中的作用不相同 C．为了测定土壤中耐高浓度铁的细菌的种群数量，可采用平板划线法进行分离 D．过程①要对装土壤的袋子和铁铲进行灭菌，过程③要对接种环进行灼烧灭菌，防止杂菌干扰 【答案】A 【分析】微生物接种常用的两种方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落； ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。 【详解】A、不锈钢污染土壤中重金属含量较高，适合耐重金属细菌生长，种群密度比较大，利于对耐高浓度铁细菌的筛选，A正确； B、甲乙都属于选择培养基，都要添加高浓度的铁，但甲是液体培养基没有加琼脂，起筛选作用，而乙是固体培养基加了琼脂，起分离纯化作用，B错误； C、测定土壤中耐高浓度铁的细菌的种群数量，不能采用平板划线法进行分离，无法计数，C错误； D、过程①要对装土壤的袋子和铁铲进行灭菌，过程③要对涂布器进行灼烧灭菌，防止杂菌干扰，D错误。 故选A。 21．（2025·广东惠州·三模）国家规定饮用水标准为1mL自来水中检出菌落总数不超过100个（37℃培养48h），不得检出总大肠菌群。为检测某品牌冰淇淋中大肠杆菌的数量是否超标，在伊红—亚甲蓝琼脂培养基上涂布适量的冰淇淋原液设为甲组，不涂布冰淇淋原液的培养基设为乙组，经过37℃、48h培养，观察两组培养基上菌落生长情况。下列叙述正确的是（    ） A．伊红—亚甲蓝琼脂培养基属于鉴别培养基 B．以菌落数计数样品中的大肠杆菌数量，结果往往比实际值偏大 C．该实验涂布前未对冰淇淋原液进行稀释会导致实验结果出现较大误差 D．观察计数时发现乙组培养基上长有少量菌落，应将甲组的菌落数减去乙组的菌落数以减小误差 【答案】A 【分析】1、微生物常见的接种的方法：平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法可用于微生物的计数； 2、稀释涂布平板法统计菌落数目的原理：①当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。 【详解】A、伊红-亚甲蓝琼脂培养基上，大肠杆菌的菌落会呈现黑色，可用于鉴别大肠杆菌，属于鉴别培养基，A正确； B、实验结果中以菌落数代表样品中的大肠杆菌数量，可能会出现一个菌落由多个细菌产生的情况，因此统计结果往往比实际值偏小，B错误； C、如果冰淇淋中大肠杆菌数量不是特别多，涂布前未对其稀释，不一定会导致实验结果出现较大误差，C错误； D、乙组培养基上未接种冰淇淋原液，若观察计数时发现乙组培养基上长有少量菌落，说明培养基被污染或培养基灭菌不合格，需要重新进行实验，D错误。 故选A。 22．（2025·湖南·三模）黑曲霉是一种丝状真菌，其代谢产物广泛应用于食品加工等领域。黑曲霉的液体产酶培养基成分为麸皮、豆饼粉、（NH4）2SO4、MgSO4·7H2O和KH2PO4等。下列相关叙述正确的是（　　） A．麸皮、豆饼粉仅为黑曲霉的发酵提供碳源 B．该培养基可用高压蒸汽等干热灭菌法灭菌 C．向上述培养基中加入琼脂可实现菌种计数 D．黑曲霉发酵制得的柠檬酸可加工制成味精 【答案】C 【分析】各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A、麸皮、豆饼粉可为黑曲霉的发酵提供碳源和氮源，A错误； B、培养基可用高压蒸汽灭菌法灭菌，该方法属于湿热灭菌法，B错误； C、向液体培养基中加入琼脂，可使培养基凝固成固体培养基。 固体培养基可用于微生物的分离、鉴定和计数等。在菌种计数时，可将适当稀释的菌液涂布到固体培养基表面，通过统计平板上的菌落数来估算样品中微生物的数量，C正确； D、黑曲霉发酵制得的柠檬酸是一种应用广泛的食品酸度调节剂，味精的制作需用到谷氨酸，D错误。 故选C。 23．（2025·甘肃甘南·三模）固体培养基中含有碳酸钙时显色不透明，碳酸钙可被乳酸溶解。某同学从样品中分离到5株产乳酸菌株，检测5株目的菌株培养后的溶钙圈直径和培养液的乳酸浓度，结果如图。下列叙述正确的是（　　） A．牛肉膏蛋白胨固体培养基可用于筛选不同乳酸菌菌株 B．用稀释涂布平板法接种菌种，测量菌落周围的透明圈直径 C．溶钙圈的直径越大说明乳酸菌的生长速率和发酵速率越快 D．菌株3应用于泡菜发酵可在最短时间内获得最佳发酵效果 【答案】B 【分析】泡菜发酵的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加．一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。 【详解】A、牛肉膏蛋白胨固体培养基不含特殊的碳源或氮源，不能用于筛选不同乳酸菌菌株，A错误； B、固体培养基中含有碳酸钙显色不透明，乳酸菌分泌的乳酸可使碳酸钙溶解而透明，菌落周围出现透明圈，用稀释涂布平板法接种菌种，测量菌落周围的透明圈直径，B正确； C、溶钙圈的直径越大说明乳酸菌产乳酸能力强，不能说明生长速率快，C错误； D、实验结果说明菌株3产乳酸能力强，但应用于泡菜发酵还需要考虑乳酸菌是否耐盐耐酸，D错误。 故选B。 24．（2025·广西·三模）为了利用基因工程技术改造牙鲆（一种鱼类），科学家计划将构建好的载体转化至大肠杆菌内扩增，再将大肠杆菌中扩增的载体纯化后导入牙鲆细胞。此实验构建的重组质粒上包含目的基因和氨苄青霉素抗性基因。下列关于此实验的相关说法，错误的是（    ） A．为了避免外部杂菌污染培养基，接种过大肠杆菌的培养基应灭菌后进行培养 B．为了使牙鲆细胞在培养瓶中增殖，培养牙鲆细胞的培养基中通常需要加入血清 C．为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应含有凝固剂 D．为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应加入氨苄青霉素 【答案】A 【分析】基因工程基本操作顺序：目的基因获取、表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。过程①是基因表达载体构建，过程②是目的基因导入受体细胞。 【详解】A、接种过大肠杆菌的培养基不能灭菌，否则接种的大肠杆菌也会被杀死，A错误； B、牙鲆属于动物，培养动物细胞的培养基中通常需要加入血清，B正确； C、为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应含琼脂等凝固剂，只有在固体培养基上才有可能形成菌落，C正确； D、此实验构建的重组质粒上包含氨苄青霉素抗性基因，因此为了筛选成功导入重组质粒的大肠杆菌，培养基中应加入氨苄青霉素，D正确。 故选A。 25．（2025·黑龙江齐齐哈尔·三模）如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（　　） A．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个 B．5号试管的菌液进行平板培养得到的菌落平均数恰为4号试管的10倍 C．在同一稀释度下涂布三个平板可形成相互对照，增加实验结果的可靠性 D．5号试管的菌液需要涂布在以尿素为唯一氮源的选择培养基上 【答案】D 【分析】从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。图中5支试管为梯度稀释，最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。 【详解】A、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109个，A错误； B、4号中稀释液的稀释倍数比5号的低10倍，所以4号的稀释液涂布后菌落数量应高于5号的稀释液，但不一定是10倍，B错误； C、在同一稀释度下涂三个平板进行重复计数，属于实验原则中的平行可重复实验，不是对照试验，然后求平均值，可避免偶然性，减小实验误差，C错误； D、利用以尿素为唯一氮源的选择培养基可以从土壤中分离出分解尿素的细菌，D正确。 故选D。 26．（2025·陕西宝鸡·三模）食品发酵生产、医学手术治疗、生物技术实验等领域都要求进行消毒、灭菌的操作。下列叙述正确的是（　　） A．生产奶制品时煮沸消毒不会破坏其营养成分，形成的废弃液可以直接排放 B．对手术人员的双手、衣着以及操作空间等，采用紫外线进行消毒 C．微生物、动物细胞培养基中，都需添加一定量的抗生素以防止污染 D．外植体只需要进行消毒，但实验中使用的培养基和所有器械都要灭菌 【答案】D 【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和湿热灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。 【详解】A、煮沸可能破坏营养成分，如维生素等，废弃液需灭菌后排放处理，A错误； B、对操作者的双手采用酒精进行消毒， 紫外线会对人体造成伤害， 衣着和操作空间可采用紫外线进行消毒，B错误； C、抗生素可能会抑制目标微生物的生长，所以动物细胞培养基中一般添加抗生素，C错误； D、外植体通常用化学消毒剂消毒， 培养基和器械必须灭菌（如高压蒸汽灭菌），以确保无菌环境，D正确。 故选D。 27．（2025·辽宁·三模）下列关于从土壤中分离分解尿素的细菌并对其进行活菌计数的实验的说法，错误的是（    ） ①用于筛选的培养基为固体培养基，高压蒸汽灭菌后再调整pH  ②培养基中的尿素可以为细菌提供氮源  ③为了提高分离筛选的成功率，取样时最好不要铲去表层土  ④利用细菌计数板计数的结果可能偏高，而利用稀释涂布平板法计数的结果可能偏低  ⑤在以尿素为唯一氮源的选择培养基上出现的菌落一定是能分解尿素的细菌繁殖产生的 A．①②③ B．①③⑤ C．④⑤ D．③④⑤ 【答案】B 【分析】培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基中的唯一氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物；土壤中分解尿素的计数实验中，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30—300之间的实验组平板进行计数。 【详解】①、用于筛选的培养基为固体培养基，应该先调整pH，再进行高压蒸汽灭菌，若高压蒸汽灭菌后再调整pH，可能会导致培养基被污染，①错误； ②、尿素含有氮元素，培养基中的尿素可以为能分解尿素的细菌提供氮源，②正确； ③、细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3~8cm的土壤层，故《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》实验中取样时应铲去表层土以提高筛选成功率，③错误； ④、利用细菌计数板计数时，由于可能将死菌也计数在内，所以结果可能偏高；而利用稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以结果可能偏低，④正确； ⑤、在以尿素为唯一氮源的选择培养基上出现的菌落不一定是能分解尿素的细菌繁殖产生的，可能是一些固氮菌等其他细菌，因为固氮菌能利用空气中的氮气作为氮源在该培养基上生长，⑤错误。 综上，①③⑤错误，即B正确，ACD错误。 故选B。 28．（2025·浙江·三模）菊花组织培养的三种培养基配方如下： 配方甲：在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度均为0.5mg/L； 配方乙：在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度分别为2~3mg/L和0.02~0.3mg/L； 配方丙：MS培养基各成分用量减半，并添加NAA，质量浓度为0.1mg/L。 下列叙述不合理的是（　　） A．实验时可使用保存的母液来制备MS培养基 B．为防止杂菌污染需对MS培养基、外植体及仪器等进行灭菌 C．若要诱导形成丛芽，应选择配方乙的培养基 D．若要诱导丛壮苗的生根，可用配方丙的培养基 【答案】B 【分析】MS培养基是用于植物组织培养的培养基，其成分包括大量元素、微量元素和有机物等，实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备。MS培养基含有丰富的营养，容易引起杂菌污染，所以要严格灭菌，常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。 【详解】A、MS培养基是用于植物组织培养的培养基，实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备，A正确； B、外植体不能进行灭菌，而是进行消毒，B错误； C、乙配方中BA与NAA比例较高，有利于再分化过程中诱导胚芽的形成，所以诱导形成丛芽，应选择配方乙的培养基，C正确； D、NAA具有促进生根的作用，配方丙是MS培养基各成分用量减半，并添加NAA，质量浓度为0.1mg/L，若要诱导丛壮苗的生根，可用配方丙的培养基，D正确。 故选B。 29．（2025·甘肃白银·三模）为增强熊果酸（UA）抗菌效果，研究者探究了药物（P）和熊果酸（UA）的比值与抑菌圈直径大小的关系，结果如图所示。下列分析正确的是（    ） A．实验须用平板划线法将菌种接种到培养基上 B．该实验自变量是P/UA的值，因变量为是否出现抑菌圈 C．据实验结果可判断P/UA的值最适宜介于3～5 D．据实验结果可推测不同P/UA的值的抑菌效果均不同 【答案】C 【分析】稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、由实验结果出现抑菌圈可以推导出实验用稀释涂布平板法将菌种接种到培养基上，A错误； B、该实验自变量是P/UA的值，因变量是抑菌圈的直径大小，B错误； C、据实验结果可判断P/UA的值最适宜介于3～5，此时抑菌圈直径最大，C正确； D、据实验结果可推测，随着P/UA的值增大抑菌效果可能与P/UA的值较小时的抑菌效果相同，D错误。 故选C。 30．（2025·陕西·三模）竹子富含纤维素，大熊猫每天要吃大量竹子，只能利用其中小部分纤维素。研究表明，大熊猫的基因组缺少编码纤维素酶的基因，但肠道中有多种纤维素分解菌。下列说法正确的是（　　） A．大熊猫和肠道中的纤维素分解菌是寄生的种间关系 B．大熊猫是这条捕食食物链的初级消费者，也是最低营养级 C．流向纤维素分解菌的能量属于该生态系统中未利用的能量 D．可用纤维素为唯一碳源的培养基筛选大熊猫肠道中的纤维素分解菌 【答案】D 【分析】由题意可知，大熊猫依赖肠道中纤维素分解菌消化纤维素，纤维素分解菌则吸收营养物质，因此两者的种间关系为互利共生。 【详解】A、纤维素分解菌通过大熊猫获得纤维素，同时给大熊猫提供分解产生的葡萄糖，二者是互利共生的种间关系，A错误； B、竹子→大熊猫构成一条食物链，大熊猫是这条捕食食物链的初级消费者，也是最高营养级，B错误； C、未利用的能量指的是没有被呼吸消耗，也没有流向下一营养级和分解者的能量，C错误； D、要培养筛选大熊猫肠道中的纤维素分解菌，培养基中需要添加纤维素作为唯一碳源，D正确。 故选D。 31．（2025·安徽·三模）自生固氮菌能够在常温常压条件下，将空气中的氮气固定，对农作物增产有重要作用。为了测定土壤中自生固氮菌的含量，科研人员取样某田地中的10克土壤，并加入90mL无菌水制成土壤悬浮液，再将该土壤悬浮液稀释1000倍后取0.1mL在平板上涂布培养并计数，以下说法正确的是（    ） A．培养该固氮菌的培养基为选择培养基，通常不需加入氮源，并将培养基调至酸性 B．涂布时，用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，可转动培养皿，使涂布均匀 C．根瘤菌与豆科植物是互利共生关系，能将氮气固定成含氮有机物供豆科植物利用 D．若培养稳定后平板上菌落平均数为65个，则每克土壤含该固氮菌约为6.5×105个 【答案】B 【分析】用稀释涂布平板法测定菌落数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，求平均值，再通过计算得出总数。 【详解】A、自生固氮菌属于细菌类，通常培养基的pH调整为中性或者弱碱性，A错误； B、涂布时，涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，转动培养皿可使涂布均匀，B正确； C、根瘤菌是异养菌，不能将氮气固定成含氮有机物，C错误； D、若培养稳定后平板上菌落平均数为65个，根据计算公式（c÷v×M），这里要注意稀释倍数为10000，则每克土壤中含氮菌约为6.5×106个，D错误。 故选B。 32．（2025·黑龙江大庆·三模）研究人员对布氏田鼠盲肠中的纤维素分解菌进行分离、鉴定，过程如图。下列说法正确的是（    ） A．①②③应在95%空气和5%氧气的气体环境中倒置培养 B．①②③中的培养基是以纤维素为唯一碳源的选择培养基 C．通过比较透明圈大小可知，甲、乙分解纤维素的能力相同 D．若①②③菌落数分别为20、37、39，则内容物中纤维素分解菌密度为1.6×107个/mL 【答案】B 【分析】刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，因此可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 【详解】A、分析题意，菌株是从盲肠中分离的厌氧细菌，故在平板培养时需置于厌氧环境中，A错误； B、筛选纤维素分解菌需要以纤维素为唯一碳源，B正确； C、需要根据菌落和透明圈之间的直径作比较来判断分解能力的大小，乙的分解能力大于甲的。C错误； D、若①②③菌落数分别为20（舍弃）、37、39，则平均菌落数是38，内容物中纤维素分解菌密度为C/V×M=38/0.2×105=1.9×107个/mL，D错误。 故选B。 33．（2025·河南·三模）科研人员从木材场的土壤中筛选出高效降解纤维素的细菌，鉴别纤维素分解菌时，在培养基中加入刚果红（可与纤维素形成红色复合物，但并不与水解后的纤维素二糖、葡萄糖等发生这种反应），再通过发酵工程生产纤维素酶。下列相关叙述错误的是（    ） A．土壤样品稀释液应加到以纤维素为唯一碳源的培养基中进行培养 B．采用平板划线法进行纯化培养时，培养基上并不是都能形成单菌落 C．可依据单菌落周围红色透明圈直径与菌落直径的比值来筛选目的菌株 D．发酵结束后，可采取适当的提取、分离和纯化等措施获得纤维素酶 【答案】C 【分析】1、稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。 2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。 【详解】A、筛选纤维素分解菌，需用纤维素作为唯一碳源，A正确； B、采用平板划线法对细菌进行纯化培养时，开始划线的区域菌液浓度高，不能形成单菌落，随着划线次数增多，菌液被稀释，逐渐形成单菌落，B正确； C、纤维素能与刚果红反应形成红色复合物，而纤维素分解菌产生的纤维素酶将纤维素分解，因此菌落周围是无色的透明圈，而不是红色的透明圈，C错误； D、纤维素酶为纤维素分解菌的产物，可采用适当的提取､分离和纯化等措施从发酵液中获得，D正确。 故选C。 34．（2025·广西柳州·三模）“高温堆肥”是指在我国南方农村，农民将禽畜粪便（常含有抗生素）和秸秆等堆积起来，通过细菌和真菌发酵释放出高温的堆肥方式，如图为堆肥温度变化曲线。科研人员拟从高温堆肥的细菌群体中，筛选出能高效分解抗生素和纤维素的嗜热菌。下列做法正确的是（    ） A．要高效获得目的菌，可从图中的任意一点取样 B．在a点取样后，接种到只含有抗生素与纤维素的培养基 C．培养过程必须加入某些色素，使菌落呈现特定的颜色 D．配制的选择培养基中，必须含有抗生素、纤维素 【答案】D 【分析】稀释涂布平板法：先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 1:10、1:100 、1:1000、1:10000 …),然后分别取不同稀释液,与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倒入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保培养一定时间即可出出菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散。 【详解】A、要高效获得目的菌，应从堆肥温度较高且微生物适应高温环境的时段取样。因为目的菌是嗜热菌，在高温环境下数量相对较多且活性较高。图中a点温度较低，此时嗜热菌数量可能较少，所以不能从图中的任意一点取样，A错误； B、在a点取样后，接种到只含有抗生素与纤维素的培养基中，由于a点温度低，嗜热菌数量少，可能无法获得足够的目的菌。而且这样的培养基没有考虑到嗜热菌对温度的要求等其他条件，不一定能筛选出目的菌，B错误； C、培养过程中加入某些色素使菌落呈现特定颜色，一般是用于鉴别微生物，而不是筛选能高效分解抗生素和纤维素的嗜热菌的必要条件。筛选嗜热菌主要依据其对温度的适应性以及对特定物质（抗生素和纤维素）的分解能力，C错误； D、配制的选择培养基中必须含有抗生素、纤维素。因为要筛选的是能高效分解抗生素和纤维素的嗜热菌，选择培养基中加入这两种物质，只有能够分解它们的微生物才能在该培养基上生长，从而起到筛选的作用，D正确。 故选D。 35．（2025·四川成都·三模）某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖而其突变株则不能。将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-（仅图1中的某一步受阻）分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续培养后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述正确的是（　　） A．配制图2培养基时加入了琼脂和少量色氨酸，pH通常呈酸性 B．使用涂布器接种3种突变菌株，涂布前需对涂布器进行灼烧灭菌 C．TrpC-菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅰ区域的一端 D．TrpB-、TrpC-、TrpE-三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻 【答案】D 【分析】依据题图及题干信息“突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，“继续培养一段时间后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的细菌继续生长增殖”；分析得知：突变株TrpB-，将分支酸转化为邻氨基苯甲酸受阻，但可将邻氨基苯甲酸转化为吲哚，并进一步转化为色氨酸；突变株TrpC-对应Ⅱ区域，将邻氨基苯甲酸转化为吲哚受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，也可以将吲哚转化为色氨酸；突变株TrpE-对应Ⅲ区域，将吲哚转化为色氨酸受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，并进一步转化为吲哚。 【详解】A、依据题干信息“培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，推断培养基中存在少量色氨酸，培养细菌一般将pH调至中性或弱碱性，A错误； B、得到图2所示菌落，应使用接种针接种，B错误； C、依据题图及题干信息“突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，“继续培养一段时间后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的细菌继续生长增殖”；分析得知：突变株TrpB-，将分支酸转化为邻氨基苯甲酸受阻，但可将邻氨基苯甲酸转化为吲哚，并进一步转化为色氨酸；突变株TrpC-对应Ⅱ区域，将邻氨基苯甲酸转化为吲哚受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，也可以将吲哚转化为色氨酸；突变株TrpE-对应Ⅲ区域，将吲哚转化为色氨酸受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，并进一步转化为吲哚。Ⅰ区域的TrpB-划线上端与Ⅱ区域临近，可利用Ⅱ区域TrpC-合成的邻氨基苯甲酸进一步合成吲哚及色氨酸生长增殖；Ⅰ区域的TrpB-划线下端与Ⅲ区域临近，可利用Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖；Ⅱ区域的TrpC-划线上端自身不能合成吲哚，临近的Ⅰ区域TrpB-可利用Ⅱ区域合成的邻氨基苯甲酸合成吲哚并进一步合成色氨酸，无多余的吲哚反馈给Ⅱ区域上端，所以Ⅱ区域的TrpC-划线上端不生长；Ⅱ区域的TrpC-划线下端，可利用临近Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖；Ⅲ区域TrpE-由于不能将吲哚转化为色氨酸，所以Ⅲ区域两端不生长增殖，所以Ⅱ区域的TrpC-划线下端靠近Ⅲ区域，可利用临近Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖，而不是靠近Ⅰ区域的一端，C错误； D、将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的I、Ⅱ、Ⅲ区域，突变菌株能将积累的中间产物分泌到细胞外，使其他突变体得以生存，Ⅲ区域菌株不再生长，说明TrpE-阻断吲哚转化为色氨酸，即阻断③过程；TrpB-能够利用TrpC-和TrpE-合成的代谢产物，完成色氨酸的合成，说明TrpB-阻断①过程；TrpC-只能利用TrpE-合成的代谢产物，完成色氨酸的合成，说明阻断的是②过程，因此TrpB-、TrpC-、TrpE-三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻，D正确。 故选D。 二、解答题 36．（2025·山西晋城·三模）三环芳烃——菲（PHE）是一种典型的疏水性有机污染物，广泛存在于沉积物、水体、土壤和大气中，因其具有潜在致癌性、致畸性及致突变性，受到人类广泛关注。实验人员从长期受污染的内河河流采集表层沉积物，经富集筛选后得到一组PHE高效降解菌群，并测试其在不同环境条件下降解PHE的能力。回答下列问题： (1)实验人员先制备富集培养基，然后采用 法灭菌，冷却后再接入沉积物样品。富集培养基中除含微生物生长所必需的各种无机盐外，还需要加入氮源，并以 作为唯一碳源。 (2)经富集培养得到的菌液用 法进行分离后，实验人员通过比较 的大小来判断不同菌种的降解能力。 (3)实验人员统计了3种不同种类菌群对PHE的降解效果，在实验条件下降解效果最好的菌群是 ，依据是 。 菌群种类 PHE浓度/（mg·L-1） 降解率/% 降解时间/d B1 100 85.48 7.0 B2 100 95.78 2.5 B3 100 87.40 9.0 (4)实验人员进一步测定了不同培养温度下三种菌群的吸光值OD600（吸光值越大，菌体生物量越多），结果如图所示。在图中培养条件下，三种菌群中对温度耐受性最好的菌群是 。进一步研究发现，B2在pH为5～11时都能够生长，若要测定B2的最适生长pH的范围，则实验的设计思路是 。    【答案】(1) 高压蒸汽灭菌 PHE (2) 稀释涂布平板 降解圈 (3) B2 B2对PHE的降解率最高，且降解时间最短 (4) B2 配制七组培养基，将培养基的pH分别调整为5、6、7、8、9、10、11（或配制pH为5～11内的一系列pH梯度的培养基），在各组培养基上分别接种等量的B2，在相同且适宜的条件下培养一段时间，测定各组培养基中B2的吸光值OD600，吸光值OD600最大的一组的相邻两组对应的pH范围即为B2生长的最佳pH范围 【分析】纯化微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法的过程是：由接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。 【详解】（1）培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，微生物生长所需要的营养物质包括各种无机盐、碳源、氮源，为获得高效降解PHE的降解菌，配制的培养基必须以PHE为唯一碳源。 （2）经富集培养得到的菌液用稀释涂布平板法进行分离后，通过比较降解圈大小判断不同微生物的降解能力，降解圈大的，降解能力强。 （3）根据表中数据可知，B2对PHE的降解率最高，且降解时间最短，因此，在实验条件下降解效果最好的菌群是B2。 （4）与B1和B3相比，B2在20～40℃内，各组生物量相差不大，且都有较高的生物量，说明B2对温度耐受性最好。要测定B2的最适生长pH的范围，可以配制七组培养基，将培养基的pH分别调整为5、6、7、8、9、10、11（或配制pH为5～11内的一系列pH梯度的培养基），在各组培养基上分别接种等量的B2，在相同且适宜的条件下培养一段时间，测定各组培养基中B2的吸光值OD600，吸光值OD600最大的一组的相邻两组对应的pH范围即为B2生长的最佳pH范围。 37．（2025·浙江嘉兴·三模）放牧是人类利用天然草地的主要方式，也是对草地的强烈干扰。放牧强度对草地的影响的研究结果如图，G0表示不放牧，G1-G3的放牧强度逐渐增大。 (1)5-6月份应采用的放牧强度是 （填“G1”“G2”“G3”）。与7月份相比，8月份不放牧草地生物量较 。为应对10月以后草地净初级生产量的不足，牧民可采用 （写出1点即可）措施。 (2)中等干扰学说认为：在中等程度的干扰条件下，群落的物种多样性最高。据此推测，适度放牧会导致优势种的生态位 ，增加了群落的物种丰富度。过度放牧会导致群落优势种 而发生次生演替，甚至荒漠化。 (3)研究人员进行了放牧强度对草原土壤酶含量影响的实验。 ①放牧试验。实验区120公顷，分为3个大区，每个大区设置3个实验组和1个对照组。设置3个大区目的是 ，以减少实验误差。 ②土样采集。用取样器采集深度为 （填“0-25cm”“5-25cm”“10-25cm”）的柱形土壤样品，过筛去除植物根系等杂质，贴上标签，置于 （填“常温”“低温”“酶活性最适温度”）条件下保存，以备用于测定土壤酶含量。 ③结果表明，过度放牧会导致土壤酶含量降低。过度放牧会使土壤有机物含量 ，从而抑制微生物繁殖。已有研究表明土壤酶含量与土壤有机碳、氮、磷含量呈 （填“正相关”“负相关”），这也支持上述结论。 【答案】(1) G2 大 补饲/减少牲畜头数 (2) 变窄 被取代 (3) 设置重复实验 0-25cm 低温 降低 正相关 【分析】要研究某草地在不同程度下的放牧和割草两种利用方式的地上生物量和生物多样性之间的关系，就要选取一定大小的样方，识别并统计样方内物种的种类和生物的数量。 【详解】（1）5 - 6月份：从图中观察，5 - 6月份时，G2放牧强度下草地净初级生产量最高，所以应采用的放牧强度是G2。 8月份与7月份比较：8月份不放牧草地（G0）生物量较7月份大，从图中曲线可直接看出。 应对10月以后草地净初级生产量不足的措施：补饲可直接为牲畜提供额外食物；减少牲畜头数可降低对草地的压力，这两种措施都能应对草地净初级生产量不足的问题。 （2）适度放牧：根据中等干扰学说，适度放牧会导致优势种的生态位变窄，这样可以为更多其他物种提供生存空间，从而增加群落的物种丰富度。 过度放牧：过度放牧压力过大，优势种会被取代，群落发生次生演替，甚至可能导致荒漠化。 （3）放牧试验设置3个大区：设置3个大区并在每个大区设置3个实验组和1个对照组，目的是设置重复实验，通过多次实验减少偶然因素造成的实验误差，使实验结果更可靠。 土样采集深度：一般采集深度为0 - 25cm的土样用于研究土壤相关指标。 土样保存条件：低温条件下保存土样，因为低温可以抑制微生物的活性，减少微生物对土壤成分的影响，便于后续测定土壤酶含量等指标。 过度放牧与土壤有机物含量关系：过度放牧导致土壤酶含量降低，而已有研究表明土壤酶含量与土壤有机碳、氮、磷含量呈正相关，所以过度放牧会使土壤有机物含量降低，进而抑制微生物繁殖。 试卷第1页，共3页 2 / 2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题13 发酵工程 考点概览 考点01 传统发酵技术 考点02 微生物培养及计数 传统发酵技术考点01 一、单选题 1．（2025·河南许昌·三模）研究者用酸笋开发具有降低胆固醇功能的益生菌。先将酸笋发酵液接种到含有CaCO3的固体培养基上，筛选出乳酸菌，然后将乳酸菌接种到含有胆固醇的培养液中，筛选出能够降解胆固醇的乳酸菌。下列叙述正确的是（    ） A．乳酸菌和酵母菌的细胞壁、细胞膜的成分都是相同的 B．与酸笋风味形成相关的乳酸菌为厌氧型，所以不会分布在空气中 C．培养基上生长的菌落直径与溶钙圈直径比值小的菌落即为目标菌落 D．胆固醇既可为乳酸菌的生长提供氮源，也可参与动物细胞膜的组成 2．（2025·陕西咸阳·三模）百香果一火龙果复合果酒制作流程：火龙果汁与百香果汁混合→酶解→糖度调整→接种活性酵母菌→主发酵→过滤→后发酵→澄清→过滤→口感优化→巴氏灭菌→百香果—火龙果复合果酒。下列叙述错误的是（    ） A．在酶解环节，可以向混合果汁中添加适量纤维素酶和果胶酶 B．在糖度调整环节加入适量蔗糖，可以提高复合果酒的酒精含量 C．接种的活性酵母菌的代谢类型是异养需氧型，接种量会影响发酵时长 D．酿制好的果酒经过巴氏灭菌后密封保存，可以延长果酒的保质期 3．（2025·甘肃天水·三模）传统发酵技术促进了中华民族特有的饮食文化的形成，下列关于传统发酵技术的叙述正确的是（    ） A．传统发酵技术需要进行严格的灭菌操作才能成功 B．传统发酵要求人们在严格控制的环境条件下大规模生产发酵产品 C．发酵产物要通过化学纯化才能食用 D．传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主 4．（2025·甘肃白银·三模）豆酱是我国传统豆制品，历史悠久，其制作流程如图所示，米曲霉是传统酿造食品酱常用的主要真菌菌种。下列叙述正确的是（    ） 浸豆→蒸豆→（米曲霉等）发酵→天然照晒→高温煮酱→装酱 A．浸豆时，要对黄豆去皮，并用适量酒精浸泡 B．蒸豆时，要加过量盐，以杀死可能存在的微生物 C．发酵过程主要利用米曲霉等产生的蛋白酶 D．高温煮酱后立即装酱即可出售或长期保存 5．（2025·山西晋中·三模）制醋工艺通常包括“酒精发酵”和“乙酸发酵”两阶段，现代工业制醋采用连续发酵工艺：先密封培养一段时间，随后通入无菌空气并搅拌。下列相关叙述正确的是（　　） A．传统制醋“酒精发酵”阶段所用菌种来源于原材料表面附着的多种酵母菌 B．与现代工业制醋相比较，传统制醋工艺不需要考虑消毒、灭菌等繁琐的操作 C．密封阶段中，微生物无氧呼吸产生的酒精可作为底物促进醋酸菌快速繁殖 D．通入无菌空气进行“乙酸发酵”时，需要适当降低发酵罐中的温度 6．（2025·山西晋城·三模）鸭梨醋是以鸭梨为主要原料，利用发酵技术酿制而成的一种新型果醋，具有开胃、调节肠道有益菌群等功能。鸭梨醋的发酵流程如图所示，下列叙述正确的是（　　） 材料准备→酒精发酵→醋酸发酵→过滤与澄清→陈酿→成品 A．准备材料时，发酵瓶、榨汁机需要用70%的酒精灭菌，而鸭梨不需要 B．酒精发酵结束后，打开瓶盖，将培养温度升高到28℃才能进行醋酸发酵 C．酒精发酵和醋酸发酵所需要的菌种的细胞结构的主要区别是有无以核膜包被的细胞核 D．醋酸发酵阶段是通过检测醋酸菌产生二氧化碳的情况来推测发酵程度的 7．（2025·甘肃白银·三模）独流老醋为中国三大名醋之一，其由高粱等原料经蒸煮、糖化、酒精发酵、醋酸发酵、过滤等工序酿造而成。下列说法错误的是（    ） A．在酒精发酵、醋酸发酵阶段，发酵液pH均会下降 B．在酒精发酵的基础上进行醋酸发酵需升高温度，增加通气量 C．若醋酸菌以酒精发酵的产物作为碳源，其发酵过程会产生大量气泡 D．在醋酸发酵阶段的发酵液中，液面处醋酸菌密度大于瓶底处的醋酸菌密度 8．（2025·浙江·三模）腐乳是一类受到人们喜爱的发酵食品，参与发酵的微生物有酵母、曲霉和毛霉等，其中红曲霉可用于生产红腐乳。下列叙述错误的是（    ） A．优良的红曲霉菌种可从自然中筛选或通过诱变育种获得 B．腐乳的制作过程是混合菌种的固体发酵过程 C．菌种类型、豆腐的含水量、环境条件等可影响腐乳的风味 D．发酵结束后可用萃取、离心等手段获得发酵产品 9．（2025·河南·三模）关于传统发酵技术的应用，下列叙述正确的是（    ） A．多种微生物参与了泡菜的发酵，起主要作用的是毛霉 B．传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主 C．当氧气和糖源不足时，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸 D．制作葡萄酒时，每隔12h左右需将瓶盖打开一次，以排出CO2 10．（2025·江苏·三模）酸笋具有独特的酸味和香气，是乳酸菌、酵母菌、醋酸菌等多种微生物发酵而成的传统食品，主要流程如下图。相关叙述错误的是（    ）    A．竹笋杀青、漂烫既能使酶失活保持竹笋天然色泽，又能有效杀灭竹笋表面的微生物 B．乳酸菌是酸笋发酵的主要菌群，其产酸既能抑制腐败菌生长，又能形成独特的酸香 C．酵母菌是酸笋发酵的次要菌群，其产酒精既能增加醇香，又能为醋酸菌发酵提供底物 D．发酵过程监控好条件使微生物同时发酵，既能缩短发酵时长，又能提高酸度 11．（2025·河南·三模）下图为不同条件下乳酸菌和醋酸菌混合发酵结束时山楂果醋风味成分的测定。根据图示实验结果分析，下列叙述正确的是（    ） A．摇床培养可增加发酵液中氧气的量，有利于两种菌的代谢活动 B．静置状态下，适当升高发酵温度有利于发酵液中多种物质含量的增加 C．两种菌代谢产生酸性物质的过程均体现其复杂生物膜系统的分工合作 D．使用两种菌混合发酵产生的果醋比醋酸菌单独发酵的风味成分含量更高 12．（2025·辽宁·三模）传统的发酵技术在中国具有悠久的历史，在长期的生产生活实践中我们的祖先掌握了很多发酵技术，直接利用原材料中天然存在的微生物保存和制作食物，比如果酒、果醋、腐乳和泡菜等。下列相关叙述错误的是（　　） A．果酒制作的过程中酿酒酵母的最适生长温度约为35℃ B．果醋制作时加入一些上次发酵保留的基底醋更有利于快速发酵 C．制作腐乳主要是通过毛霉的作用将蛋白质水解成小分子肽和氨基酸 D．制作泡菜时盐水没过菜料可为乳酸菌创造无氧环境 13．（2025·广西南宁·三模）甲、乙、丙、丁四个生物兴趣小组分别按如下流程进行科学探究活动，据此分析错误的是（　　） 甲：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒 乙：外植体→形成愈伤组织→长出丛芽→生根→试管苗 丙：土壤浸出液→尿素为唯一氮源的培养基培养→计数 丁：各种菜洗净并切成小块→加盐、糖及调味品→装入泡菜坛→发酵→成品 A．甲组在发酵后期打开排气口的间隔时间比发酵前期延长 B．乙组形成的试管苗可直接移栽到室外的土壤中 C．丙组常采用稀释涂布平板法对细菌进行分离和计数 D．丁组泡菜坛中可以加入陈泡菜水，其作用是提供经扩大培养的发酵菌种 14．（2025·广东惠州·三模）基于我国传统酿醋工艺，一种以果汁为原料进行液态发酵生产果醋的流程如图。下列叙述错误的是（    ） A．制取果汁时添加果胶酶可提高果汁产量，处理①加糖可增加碳源 B．醋酸发酵阶段通入充足的氧气有利于微生物将乙醇转化为乙酸 C．酒精发酵和醋酸发酵的微生物都是原核生物，最适生长温度不同 D．家庭制作果酒、果醋不必对原材料进行灭菌操作 15．（2025·重庆·三模）鸭梨醋是以鸭梨为主要原料，利用发酵技术酿制而成的一种新型果醋，具有开胃、调节肠道有益菌群等功能。鸭梨醋的发酵流程如图所示，下列叙述正确的是（    ） 材料准备→酒精发酵→醋酸发酵→过滤与澄清→陈酿→成品 A．准备材料时，发酵瓶、榨汁机需要用70%的酒精灭菌，而鸭梨不需要 B．酒精发酵和醋酸发酵所需要的菌种的细胞结构的主要区别是有无以核膜包被的细胞核 C．酒精发酵结束后，打开瓶盖，将培养温度升高到28℃才能进行醋酸发酵 D．醋酸发酵阶段是通过检测醋酸菌产生二氧化碳的情况来推测发酵程度的 16．（2025·福建三明·三模）传统发酵技术是祖先馈赠的神奇秘方，默默滋养着中华饮食文化。下列叙述正确的是（    ） A．传统发酵以单一菌种的固体发酵和半固体发酵为主 B．腐乳制作和果酒制作都利用微生物的胞外酶起作用 C．泡菜发酵后期乳酸菌数量下降主要是因为装置漏气 D．果酒发酵转为果醋发酵需适当升温并保持通气状态 17．（2025·青海海东·三模）传统发酵技术在我国已有几千年的历史，可以用于腐乳、酸奶、酱油、醋、泡菜和豆豉等的制作。下列有关叙述错误的是（　　） A．缺少糖源时，醋酸菌可直接利用乙醇转化为乙醛并最终生成乙酸 B．传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物 C．酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面无法存活 D．在一段时间内，果醋和果酒的制作过程中发酵液的pH均会逐渐降低 18．（2025·湖北十堰·三模）传统发酵技术在我国已有几千年的历史，可以用于腐乳、酸奶、酱油、醋、泡菜和豆豉等的制作。下列有关叙述错误的是（　　） A．缺少糖源时，醋酸菌可直接利用乙醇转化为乙醛并最终生成乙酸 B．传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物 C．在一段时间内，果醋和果酒的制作过程中发酵液的pH均会逐渐降低 D．酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面无法存活 19．（2025·黑龙江齐齐哈尔·三模）研究人员探究了不同盐浓度对泡菜发酵过程中乳酸菌含量的影响。表格为两种盐浓度下泡菜的配方，图像为乳酸菌相对浓度随发酵时间变化曲线。下列说法错误的是（　　）    　 配方1盐浓度6% 配方2盐浓度8% 水（mL） 2500 2500 食盐（g） 150 200 白菜（g） 812 812 A．操作时将食盐溶于清水，配制好的盐水需煮沸冷却后再使用 B．为保证发酵顺利进行，两组实验需定期进行通气、排气且时长相等 C．与6%相比，8%的盐浓度不利于乳酸菌增殖可能与细胞渗透失水有关 D．本研究数据表明，配方1比配方2更适和用于泡菜的制作 20．（2025·浙江·三模）黄豆酱是人们喜爱的传统食品，它以黄豆为主要原料，经米曲霉、酵母菌、乳酸菌等微生物发酵而成。劳动人民在制作过程中不断改进发酵技术，下列叙述不科学的是（　　） A．黄豆酱的风味是由微生物种类决定的 B．发酵初期需通风并定期搅拌有利米曲霉大量增殖 C．酵母菌在黄豆酱发酵过程中既有需氧呼吸又有厌氧呼吸 D．乳酸菌发酵产生的乳酸既形成特殊风味又可抑制杂菌的生长 21．（2025·黑龙江大庆·三模）完达山酒、双城烤醋、克东腐乳、翠花酸菜均为黑龙江省名牌传统发酵食品，其制作工艺被列入省非物质文化遗产名录。下列关于传统发酵技术及发酵工程的叙述正确的是（    ） A．完达山酒和双城烤醋均需在无氧条件下发酵制作 B．克东腐乳和翠花酸菜均由细菌发酵制作而成 C．传统发酵食品可由天然混合菌种通过发酵工程规模化生产 D．发酵工程培养酵母菌获得的单细胞蛋白可作为食品添加剂 22．（2025·陕西·三模）利用苹果制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸菌，发酵5天。下列有关叙述正确的是（　　） A．不同微生物所需的最适温度不同，接入醋酸菌后，应适当升高发酵温度 B．苹果中的葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的线粒体中被分解 C．酵母菌和醋酸菌发酵过程中均需在密闭的条件下完成 D．醋酸菌和酵母菌均以有丝分裂的方式进行增殖 23．（2025·四川达州·三模）酸笋是螺蛳粉的“灵魂”。在自然发酵过程中，酸笋中的乳酸菌作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质，形成了螺蛳粉的特殊风味。酸笋的传统发酵工艺包括原材料处理、装坛、发酵等过程。下列相关叙述正确的是（    ） A．乳酸菌代谢类型为异养厌氧型，所以不会分布在空气中 B．原材料处理主要是对采摘后的竹笋进行剥壳、清洗和灭菌 C．装坛时应保证竹笋被盐水全部浸没，才能保证发酵的正常进行 D．随着发酵的进行，发酵液pH值逐渐升高后保持稳定 24．（2025·内蒙古通辽·三模）传统发酵食品是我国饮食文化的重要组成部分。下表中发酵食品制作所使用的主要菌种和制作条件均正确的是（    ） 选项 食品名称 主要菌种 制作条件 A 腐乳 毛霉 有氧 B 果醋 醋酸菌 无氧 C 酸奶 乳酸菌 有氧 D 泡菜 酵母菌 无氧 A．A B．B C．C D．D 25．（2025·湖南郴州·三模）《礼记·月令篇》里记载有古遗六法：秫稻必齐，曲蘖必时，湛炽必洁，水泉必香，陶器必良，火剂必得。它是中国最古老的酿酒工艺的记载。下列相关叙述错误的是（　　） A．酒精是酵母菌利用“秫稻”在无氧条件下的初生代谢物 B．“曲蘖必时”，酒曲中酵母菌的大量繁殖需要适宜的温度（时节） C．“湛炽必洁”，严格杀菌消毒，一定程度上可避免杂菌对发酵的影响 D．“陶器必良”，选用质地优良、无渗漏的陶器，为酵母菌的发酵隔绝空气形成厌氧的环境 26．（2025·陕西商洛·三模）某小组同学选用新鲜成熟的葡萄制作果酒和果醋，流程如图所示。下列叙述正确的是（    ）    A．过程①加入少量的胶原蛋白酶可提高果肉的出汁率 B．过程②需定时将瓶盖打开，以免过多的CO2抑制发酵 C．进行过程③的微生物存在将乙醇转化为乙酸的酶 D．从过程②到过程③，需要将发酵温度适当降低 二、多选题 27．（2025·河北沧州·三模）我国劳动人民很早就发明了家庭制酱技术，即将长白毛的馒头、蒸煮软烂的黄豆置于干净的器皿中，加入适量食盐、凉开水，搅拌成泥状，盖上纱布置于通风阴凉处，每日搅拌一次，发酵成熟后再暴晒、过滤。下列有关叙述正确的是（　　） A．传统制酱是在以毛霉为主的多种微生物的共同参与下完成的 B．制酱过程中蛋白酶、脂肪酶可将大分子有机物分解为小分子 C．发酵过程中能从发酵液中分离出产淀粉酶的微生物 D．传统制酱属于半固体发酵，发挥作用的微生物大多进行有氧呼吸 三、实验题 28．（2025·贵州遵义·三模）食醋工业发酵过程中，乙醇体积分数及乙酸浓度会影响醋酸菌的生长代谢，进而影响食醋的品质和口感。如图所示为研究者通过原生质体融合技术筛选出具有高乙醇、高乙酸耐受性醋酸菌的部分过程。    回答下列问题： (1)摇床培养时温度设置为30℃的原因是 ；图中溶解醋酸菌细胞壁的物质是 。 (2)在制备醋酸菌原生质体时， （填“能”或“不能”）用低渗溶液代替一定浓度的高渗溶液，加入高渗溶液的目的是 。 (3)研究者将醋酸菌原生质体用紫外线处理后分成两组，分别接种到富含 的选择培养基上，再使用 方法将筛选出的原生质体融合，获得再生能力的融合菌株。该菌株能耐乙醇、耐乙酸的根本原因是 。 微生物培养及计数考点02 一、单选题 1．（2025·山西·三模）杏果中富含香味前体物质，传统的香料提取方法会浪费大量的杏果渣，研究小组从杏果园的土壤中筛选出具有显著产香能力的菌株（如图），通过发酵对杏果渣进行二次加工利用，有效增加了产品风味并提高了产品感官品质。下列说法错误的是（　　） A．虽然利用土壤样品进行培养，但此过程的关键仍是防止杂菌污染 B．微生物的纯培养是指采用平板划线法等接种后培养得到单菌落 C．该技术的原理是通过选择培养基直接选出产香效果最佳的菌株 D．微生物发酵产香具有成本低、产量高、所产废弃物较少等优点 2．（2025·江西·三模）自生固氮菌存在于土壤中，可将空气中的N2固定为NH4+。为获得自生固氮菌，某兴趣小组用取土铲取土壤样品，并将5g土样溶于95mL无菌水中制成母液。将母液稀释103倍后，取0.1mL稀释液接种在Ashby培养基上（配方如图所示），在28℃条件下培养5天，培养基上的平均菌落数为45个。下列说法错误的是（    ） Ashby培养基 甘露醇···············10g NaCl················0.2g CaCO3··················5g KH2PO4···············0.2g MgSO4···············0.2g CaSO4···············0.1g 琼脂···············适量 A．取土铲等用具在使用前应进行灭菌处理 B．Ashby培养基的组分中缺少氮源，应增加氮源 C．将稀释菌液接种到培养基上应采用稀释涂布平板法 D．该实验所用的土样中，自生固氮菌约为9×106个/g 3．（2025·湖南常德·三模）如图所示，自来水经滤膜过滤后，转移到牛肉膏蛋白胨培养基上，适宜条件下培养48 h染色后统计变色菌落数目为165个。下列说法正确的是（　　） A．若培养基含伊红—亚甲蓝，大肠杆菌菌落呈蓝绿色 B．自来水中大肠杆菌浓度是33个·L-1，比真实值偏大 C．为了提高准确度，需设重复实验，但不用空白对照 D．若培养基菌落数目大于300，可适当减少自来水量 4．（2025·重庆·三模）硝化细菌是一种好氧菌，可有效净化水体中铵盐，降低高浓度铵盐引发的池塘养殖对虾的死亡率。科研人员拟从当地对虾养殖池塘中筛选出对铵盐降解率高的硝化细菌菌株，操作流程如下图所示。下列叙述错误的是（　　） A．在配制选择培养基筛选硝化细菌时，不需要添加氮源 B．从对虾死亡率低的养殖池塘中取样，能提高筛选的成功率 C．用图示方法纯化菌种时，不能将最后一次的划线与第一次的划线相连 D．应选择铵盐浓度减少最多的一组候选菌进行后续培养 5．（2025·湖南湘西·三模）乳酸菌在食品工业和农业生产中应用广泛。下列叙述正确的是（    ） A．乳酸菌通过二分裂增殖，在无氧条件下可将葡萄糖分解为乳酸 B．制作酸奶时应对原料进行高压蒸汽灭菌，以彻底杀灭所有微生物 C．青贮饲料中添加乳酸菌，主要通过产生抗生素来抑制杂菌生长 D．培养乳酸菌时需添加生长因子，但不需要添加氮源 6．（2025·湖北·三模）幽门螺杆菌（含有脲酶）感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。下列有关叙述正确的是（　　） A．可用牛肉膏蛋白胨培养基作对照证明选择培养基的选择作用 B．鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂和缓冲物质 C．分离纯化幽门螺杆菌时应使用以葡萄糖为唯一氮源的培养基 D．对幽门螺杆菌进行分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法 7．（2025·安徽合肥·三模）番茄灰霉病由灰葡萄孢菌引起，严重影响番茄的产量和品质。某些番茄植株组织中存在的内生菌可防治灰葡萄孢菌，科研人员在大量感染番茄灰霉病的田中，取样、分离并纯化出一种芽孢杆菌，为探究其对番茄灰霉病的防治作用，开展了有关实验，结果如图。下列有关分析错误的是（    ） A．应选择田中患病番茄植株进行采样，并对样品进行充分消毒 B．操作过程中的无菌技术可以保护操作者，避免被微生物感染 C．A组作为对照可排除培养基成分及小圆片对实验结果的影响 D．据实验结果推测，该种芽孢杆菌可以用于番茄灰霉病的防治 8．（2025·湖南长沙·三模）传统酱油以大豆等为原料，在米曲霉等多种微生物参与下，经过制曲和发酵两个主要阶段酿造获得。下列说法中错误的是（    ） A．大豆等原料为微生物提供碳源、氮源、无机盐等营养 B．优良米曲霉菌可通过诱变育种、基因工程育种等方法获得 C．制曲阶段主要是让米曲霉等菌种大量生长，产生多种酶类 D．统计酱渣中含有的微生物种类必须使用固体培养基接种观察 9．（2025·河南周口·三模）下列实验操作正确的是（    ） A．将涂布器放在酒精灯火焰上灼烧，灼烧后可立即均匀涂布菌液 B．测土壤中细菌数目，每24h统计一次菌落数目，直至出现30～300的菌落数 C．将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液混合并加入核酸染料后进行电泳 D．DNA粗提取时，将洋葱研磨液倒入离心管中离心后，取上清液加入预冷的酒精溶液中再搅拌或离心 10．（2025·安徽·三模）荧蒽（C16H10）是一种有毒性的多环芳烃，利用同位素示踪法对红球菌BAP-1跨膜运输14C—荧蒽（14C—FLU）的过程进行研究：控制14C—FLU的初始浓度为0.25μmol/L，检测红球菌BAP—1在添加或不添加NaN3（ATP抑制剂）时，细胞内外14C—FLU含量变化，结果如图。其中空白组不添加红球菌BAP—1，仅添加14C—FLU。下列叙述错误的是（　　）    A．FLU可以为红球菌BAP-1提供碳源 B．红球菌BAP—1可降解所摄取的14C—FLU C．红球菌BAP—1可能是通过载体蛋白摄取14C—FLU D．接种红球菌BAP-1去除土壤中残留的FLU既高效又安全 11．（2025·浙江·三模）为检测自来水中细菌数量，研究人员向3个试管中各加入9mL无菌水，取自来水水样1mL，加入到A试管中，摇匀后从A试管取1mL加入B试管中，重复此步骤，直到完成所有预定稀释。从每个试管中分别取0.1mL接种至两个平行平板中，培养后进行菌落计数。4个不同水样的检测结果如下表。下列叙述错误的是（    ） 水样编号 A平行1 A平行2 B平行1 B平行2 C平行1 C平行2 1 0 0 0 0 0 0 2 数不清 数不清 150 160 15 20 3 数不清 数不清 236 248 35 33 4 数不清 数不清 数不清 数不清 320 330 A．本实验所用的培养基为LB固体培养基 B．从每个试管分别取0.1mL涂布接种两个平行平板是为了减少误差，使实验结果更准确 C．水样2的细菌数约为1.75×104个/mL，水样4的细菌数明显比其他水样多 D．水样3中B组平板上菌落数明显低于C组的10倍，原因可能是B组平板上出现多个细菌形成同一个菌落的现象 12．（2025·重庆·三模）根据微生物对氧气需求的不同，可以将它们分为好氧菌，兼性厌氧菌，微好氧菌，耐氧菌和厌氧菌。微好氧菌只能在较低的氧分压下正常生长，耐氧菌不需要任何氧但氧气对其无害。图1展示了氧气对其中三种菌的生长影响，图2展示了这五种菌在半固体琼脂培养基中的生长状态。下列说法错误的是（    ）    A．醋酸杆菌为好氧菌，酵母菌为兼性厌氧菌，乳酸杆菌为耐氧菌 B．兼性厌氧菌在有氧环境下较无氧环境下生长情况更好，因为有氧呼吸比无氧呼吸产能效率更高 C．氧气对厌氧菌有毒，可能是由于这些细菌缺乏处理氧自由基的酶，自由基会破坏生物膜系统 D．将微生物接种在图2半固体琼脂培养基的接种方法应为稀释涂布平板法 13．（2025·安徽·三模）采用平板划线法和稀释涂布平板法都能将单个微生物分散在固体培养基上，经培养得到单菌落。有关以上两种方法的比较分析，下列说法正确的是（　　） A．对接种工具均采用灼烧灭菌法灭菌，但灭菌的具体操作存在差异 B．都先用微量移液器取菌液，再分别用接种环、涂布器完成接种操作 C．接种后，都需要立即将平板倒置并放入恒温培养箱中培养 D．发酵工程中，以上两种方法均可将菌种接种到发酵罐内 14．（2025·江苏徐州·三模）乙醇是酵母菌发酵的重要产物，积累到一定程度会对酵母菌产生毒害作用。乙醇在发酵过程中易被一些不耐酸的微生物污染，造成重大经济损失，因此生产中需要加强耐酸酵母菌进行筛选，现对某酒厂耐酸性酿酒酵母菌进行分离与筛选，下列有关叙述错误的是（    ） A．从窖池底泥黄浆水中寻找耐酸酵母菌的原因是有机酸含量高，有利于耐酸酵母菌的筛选 B．过程②需充分振荡以增大培养液的溶氧量，使碳源、氮源等营养物质与菌体充分接触 C．过程③能直接统计出窖池底泥中耐酸酵母菌的数量 D．将④菌株接种到以赖氨酸为唯一氨源的培养基上，无菌落说明赖氨酸不是耐酸酵母菌的氮源 15．（2025·浙江温州·三模）科研小组欲验证某细菌分泌的X酶为青霉素酶（能分解青霉素），进行如下实验：在培养基上接种大肠杆菌，分别放置经不同溶液浸润的滤纸圆片甲~丁，并在适宜条件下培养。一段时间后观察滤纸圆片周围的抑菌圈（细菌生长被抑制而形成的透明环形区域），实验处理和结果如表所示。 组别 滤纸圆片浸润的溶液种类 实验结果 甲 ① 未出现抑菌圈 乙 ② 出现抑菌圈 丙 经青霉素酶处理的青霉素溶液 未出现抑菌圈 丁 经X酶处理的青霉素溶液 ③ 下列叙述错误的是（    ） A．培养基上接种的是青霉素敏感型大肠杆菌 B．①和②分别为无菌水和青霉素溶液 C．甲、乙为对照组，丙、丁为实验组 D．③为“未出现抑菌圈”，则X酶为青霉素酶 16．（2025·河南·三模）牙刷在使用后会残留大量的细菌，科研人员比较了2.5%的碳酸氢钠溶液和沸水对牙刷的消毒效果，实验结果如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．培养微生物的培养基和接种工具都要先进行高压蒸汽灭菌 B．图中实际菌落数的计数方法是平板划线法 C．建议定期使用2.5%的碳酸氢钠溶液对牙刷进行消毒 D．将接种的培养基倒置培养24小时即可比较不同方法消毒效果的差异 17．（2025·四川内江·三模）某研究小组从某草本豆科植物中分离得到甲和乙两种根瘤菌菌株，欲比较并筛选出固氮能力强的菌株，用于发酵工程生产根瘤菌肥。下列相关叙述错误的是（　　） A．可选择无氮源、含有机碳源的培养基培养根瘤菌 B．培养相同时间后，根据菌落生长情况可初步比较二者固氮能力 C．细菌计数板适用于监控根瘤菌发酵过程中活细胞数量的变化 D．根瘤菌肥作为微生物肥料可增进土壤肥力、改良土壤结构，促进植株生长 18．（2025·江西景德镇·三模）利用杨木生产二代燃料乙醇，需要预处理、酶解和发酵等阶段（预处理过程所需的果胶酶常来自于黑曲霉等微生物）。下图为发酵阶段菌种接种量对发酵结果的影响。下列说法正确的是（    ） A．培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，果胶酶是黑曲霉分泌的一种单细胞蛋白 B．在伊红—亚甲蓝培养基上可筛选出高产纤维素酶的菌株用于酶解糖化过程 C．接种量超过15%时酒精产量反而有所降低的原因可能是菌种生长消耗大量的糖分 D．接种的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量相等 19．（2025·陕西安康·三模）链霉素是一种从灰色链霉菌的培养液中提取的氨基糖苷类抗生素，对由野油菜黄单胞杆菌侵染所引起的油菜黑腐病有较好的防治作用。下列相关叙述正确的是（    ） A．链霉素是灰色链霉菌生长所必需的初生代谢物 B．链霉素是在灰色链霉菌的核糖体上直接合成的 C．对灰色链霉菌进行扩大培养的培养基一般为液体培养基 D．对灰色链霉菌进行计数时采用平板划线法 20．（2025·江西·三模）土壤污染威胁农产品质量及生态安全，重金属污染是土壤污染的主要方面。科学家从不锈钢污染土壤中分离到某种耐高浓度铁的微生物，其操作流程如下图所示，下列有关叙述正确的是（    ） A．不锈钢污染土壤中耐重金属细菌种群密度比较大，利于对该种耐高浓度铁细菌的筛选 B．甲乙都属于选择培养基，都要添加琼脂和高浓度的铁，但在操作流程中的作用不相同 C．为了测定土壤中耐高浓度铁的细菌的种群数量，可采用平板划线法进行分离 D．过程①要对装土壤的袋子和铁铲进行灭菌，过程③要对接种环进行灼烧灭菌，防止杂菌干扰 21．（2025·广东惠州·三模）国家规定饮用水标准为1mL自来水中检出菌落总数不超过100个（37℃培养48h），不得检出总大肠菌群。为检测某品牌冰淇淋中大肠杆菌的数量是否超标，在伊红—亚甲蓝琼脂培养基上涂布适量的冰淇淋原液设为甲组，不涂布冰淇淋原液的培养基设为乙组，经过37℃、48h培养，观察两组培养基上菌落生长情况。下列叙述正确的是（    ） A．伊红—亚甲蓝琼脂培养基属于鉴别培养基 B．以菌落数计数样品中的大肠杆菌数量，结果往往比实际值偏大 C．该实验涂布前未对冰淇淋原液进行稀释会导致实验结果出现较大误差 D．观察计数时发现乙组培养基上长有少量菌落，应将甲组的菌落数减去乙组的菌落数以减小误差 22．（2025·湖南·三模）黑曲霉是一种丝状真菌，其代谢产物广泛应用于食品加工等领域。黑曲霉的液体产酶培养基成分为麸皮、豆饼粉、（NH4）2SO4、MgSO4·7H2O和KH2PO4等。下列相关叙述正确的是（　　） A．麸皮、豆饼粉仅为黑曲霉的发酵提供碳源 B．该培养基可用高压蒸汽等干热灭菌法灭菌 C．向上述培养基中加入琼脂可实现菌种计数 D．黑曲霉发酵制得的柠檬酸可加工制成味精 23．（2025·甘肃甘南·三模）固体培养基中含有碳酸钙时显色不透明，碳酸钙可被乳酸溶解。某同学从样品中分离到5株产乳酸菌株，检测5株目的菌株培养后的溶钙圈直径和培养液的乳酸浓度，结果如图。下列叙述正确的是（　　） A．牛肉膏蛋白胨固体培养基可用于筛选不同乳酸菌菌株 B．用稀释涂布平板法接种菌种，测量菌落周围的透明圈直径 C．溶钙圈的直径越大说明乳酸菌的生长速率和发酵速率越快 D．菌株3应用于泡菜发酵可在最短时间内获得最佳发酵效果 24．（2025·广西·三模）为了利用基因工程技术改造牙鲆（一种鱼类），科学家计划将构建好的载体转化至大肠杆菌内扩增，再将大肠杆菌中扩增的载体纯化后导入牙鲆细胞。此实验构建的重组质粒上包含目的基因和氨苄青霉素抗性基因。下列关于此实验的相关说法，错误的是（    ） A．为了避免外部杂菌污染培养基，接种过大肠杆菌的培养基应灭菌后进行培养 B．为了使牙鲆细胞在培养瓶中增殖，培养牙鲆细胞的培养基中通常需要加入血清 C．为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应含有凝固剂 D．为了筛选含重组质粒的大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中应加入氨苄青霉素 25．（2025·黑龙江齐齐哈尔·三模）如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（　　） A．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108个 B．5号试管的菌液进行平板培养得到的菌落平均数恰为4号试管的10倍 C．在同一稀释度下涂布三个平板可形成相互对照，增加实验结果的可靠性 D．5号试管的菌液需要涂布在以尿素为唯一氮源的选择培养基上 26．（2025·陕西宝鸡·三模）食品发酵生产、医学手术治疗、生物技术实验等领域都要求进行消毒、灭菌的操作。下列叙述正确的是（　　） A．生产奶制品时煮沸消毒不会破坏其营养成分，形成的废弃液可以直接排放 B．对手术人员的双手、衣着以及操作空间等，采用紫外线进行消毒 C．微生物、动物细胞培养基中，都需添加一定量的抗生素以防止污染 D．外植体只需要进行消毒，但实验中使用的培养基和所有器械都要灭菌 27．（2025·辽宁·三模）下列关于从土壤中分离分解尿素的细菌并对其进行活菌计数的实验的说法，错误的是（    ） ①用于筛选的培养基为固体培养基，高压蒸汽灭菌后再调整pH  ②培养基中的尿素可以为细菌提供氮源  ③为了提高分离筛选的成功率，取样时最好不要铲去表层土  ④利用细菌计数板计数的结果可能偏高，而利用稀释涂布平板法计数的结果可能偏低  ⑤在以尿素为唯一氮源的选择培养基上出现的菌落一定是能分解尿素的细菌繁殖产生的 A．①②③ B．①③⑤ C．④⑤ D．③④⑤ 28．（2025·浙江·三模）菊花组织培养的三种培养基配方如下： 配方甲：在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度均为0.5mg/L； 配方乙：在MS培养基中加入BA和NAA，质量浓度分别为2~3mg/L和0.02~0.3mg/L； 配方丙：MS培养基各成分用量减半，并添加NAA，质量浓度为0.1mg/L。 下列叙述不合理的是（　　） A．实验时可使用保存的母液来制备MS培养基 B．为防止杂菌污染需对MS培养基、外植体及仪器等进行灭菌 C．若要诱导形成丛芽，应选择配方乙的培养基 D．若要诱导丛壮苗的生根，可用配方丙的培养基 29．（2025·甘肃白银·三模）为增强熊果酸（UA）抗菌效果，研究者探究了药物（P）和熊果酸（UA）的比值与抑菌圈直径大小的关系，结果如图所示。下列分析正确的是（    ） A．实验须用平板划线法将菌种接种到培养基上 B．该实验自变量是P/UA的值，因变量为是否出现抑菌圈 C．据实验结果可判断P/UA的值最适宜介于3～5 D．据实验结果可推测不同P/UA的值的抑菌效果均不同 30．（2025·陕西·三模）竹子富含纤维素，大熊猫每天要吃大量竹子，只能利用其中小部分纤维素。研究表明，大熊猫的基因组缺少编码纤维素酶的基因，但肠道中有多种纤维素分解菌。下列说法正确的是（　　） A．大熊猫和肠道中的纤维素分解菌是寄生的种间关系 B．大熊猫是这条捕食食物链的初级消费者，也是最低营养级 C．流向纤维素分解菌的能量属于该生态系统中未利用的能量 D．可用纤维素为唯一碳源的培养基筛选大熊猫肠道中的纤维素分解菌 31．（2025·安徽·三模）自生固氮菌能够在常温常压条件下，将空气中的氮气固定，对农作物增产有重要作用。为了测定土壤中自生固氮菌的含量，科研人员取样某田地中的10克土壤，并加入90mL无菌水制成土壤悬浮液，再将该土壤悬浮液稀释1000倍后取0.1mL在平板上涂布培养并计数，以下说法正确的是（    ） A．培养该固氮菌的培养基为选择培养基，通常不需加入氮源，并将培养基调至酸性 B．涂布时，用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，可转动培养皿，使涂布均匀 C．根瘤菌与豆科植物是互利共生关系，能将氮气固定成含氮有机物供豆科植物利用 D．若培养稳定后平板上菌落平均数为65个，则每克土壤含该固氮菌约为6.5×105个 32．（2025·黑龙江大庆·三模）研究人员对布氏田鼠盲肠中的纤维素分解菌进行分离、鉴定，过程如图。下列说法正确的是（    ） A．①②③应在95%空气和5%氧气的气体环境中倒置培养 B．①②③中的培养基是以纤维素为唯一碳源的选择培养基 C．通过比较透明圈大小可知，甲、乙分解纤维素的能力相同 D．若①②③菌落数分别为20、37、39，则内容物中纤维素分解菌密度为1.6×107个/mL 33．（2025·河南·三模）科研人员从木材场的土壤中筛选出高效降解纤维素的细菌，鉴别纤维素分解菌时，在培养基中加入刚果红（可与纤维素形成红色复合物，但并不与水解后的纤维素二糖、葡萄糖等发生这种反应），再通过发酵工程生产纤维素酶。下列相关叙述错误的是（    ） A．土壤样品稀释液应加到以纤维素为唯一碳源的培养基中进行培养 B．采用平板划线法进行纯化培养时，培养基上并不是都能形成单菌落 C．可依据单菌落周围红色透明圈直径与菌落直径的比值来筛选目的菌株 D．发酵结束后，可采取适当的提取、分离和纯化等措施获得纤维素酶 34．（2025·广西柳州·三模）“高温堆肥”是指在我国南方农村，农民将禽畜粪便（常含有抗生素）和秸秆等堆积起来，通过细菌和真菌发酵释放出高温的堆肥方式，如图为堆肥温度变化曲线。科研人员拟从高温堆肥的细菌群体中，筛选出能高效分解抗生素和纤维素的嗜热菌。下列做法正确的是（    ） A．要高效获得目的菌，可从图中的任意一点取样 B．在a点取样后，接种到只含有抗生素与纤维素的培养基 C．培养过程必须加入某些色素，使菌落呈现特定的颜色 D．配制的选择培养基中，必须含有抗生素、纤维素 35．（2025·四川成都·三模）某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖而其突变株则不能。将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-（仅图1中的某一步受阻）分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续培养后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述正确的是（　　） A．配制图2培养基时加入了琼脂和少量色氨酸，pH通常呈酸性 B．使用涂布器接种3种突变菌株，涂布前需对涂布器进行灼烧灭菌 C．TrpC-菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅰ区域的一端 D．TrpB-、TrpC-、TrpE-三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻 二、解答题 36．（2025·山西晋城·三模）三环芳烃——菲（PHE）是一种典型的疏水性有机污染物，广泛存在于沉积物、水体、土壤和大气中，因其具有潜在致癌性、致畸性及致突变性，受到人类广泛关注。实验人员从长期受污染的内河河流采集表层沉积物，经富集筛选后得到一组PHE高效降解菌群，并测试其在不同环境条件下降解PHE的能力。回答下列问题： (1)实验人员先制备富集培养基，然后采用 法灭菌，冷却后再接入沉积物样品。富集培养基中除含微生物生长所必需的各种无机盐外，还需要加入氮源，并以 作为唯一碳源。 (2)经富集培养得到的菌液用 法进行分离后，实验人员通过比较 的大小来判断不同菌种的降解能力。 (3)实验人员统计了3种不同种类菌群对PHE的降解效果，在实验条件下降解效果最好的菌群是 ，依据是 。 菌群种类 PHE浓度/（mg·L-1） 降解率/% 降解时间/d B1 100 85.48 7.0 B2 100 95.78 2.5 B3 100 87.40 9.0 (4)实验人员进一步测定了不同培养温度下三种菌群的吸光值OD600（吸光值越大，菌体生物量越多），结果如图所示。在图中培养条件下，三种菌群中对温度耐受性最好的菌群是 。进一步研究发现，B2在pH为5～11时都能够生长，若要测定B2的最适生长pH的范围，则实验的设计思路是 。    37．（2025·浙江嘉兴·三模）放牧是人类利用天然草地的主要方式，也是对草地的强烈干扰。放牧强度对草地的影响的研究结果如图，G0表示不放牧，G1-G3的放牧强度逐渐增大。 (1)5-6月份应采用的放牧强度是 （填“G1”“G2”“G3”）。与7月份相比，8月份不放牧草地生物量较 。为应对10月以后草地净初级生产量的不足，牧民可采用 （写出1点即可）措施。 (2)中等干扰学说认为：在中等程度的干扰条件下，群落的物种多样性最高。据此推测，适度放牧会导致优势种的生态位 ，增加了群落的物种丰富度。过度放牧会导致群落优势种 而发生次生演替，甚至荒漠化。 (3)研究人员进行了放牧强度对草原土壤酶含量影响的实验。 ①放牧试验。实验区120公顷，分为3个大区，每个大区设置3个实验组和1个对照组。设置3个大区目的是 ，以减少实验误差。 ②土样采集。用取样器采集深度为 （填“0-25cm”“5-25cm”“10-25cm”）的柱形土壤样品，过筛去除植物根系等杂质，贴上标签，置于 （填“常温”“低温”“酶活性最适温度”）条件下保存，以备用于测定土壤酶含量。 ③结果表明，过度放牧会导致土壤酶含量降低。过度放牧会使土壤有机物含量 ，从而抑制微生物繁殖。已有研究表明土壤酶含量与土壤有机碳、氮、磷含量呈 （填“正相关”“负相关”），这也支持上述结论。 试卷第1页，共3页 2 / 2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$