课时提分集训(61) (Word练习)-【金榜题名】2026年高考生物一轮总复习

课时提分集训 一、选择题：每小题给出的四个选项中只有一个符合题目要求。 1．(2024·山东高考)关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是(　　 ) A．整个提取过程中可以不使用离心机 B．研磨液在4 ℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中 C．鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变 D．仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰 【答案】　A 【解析】　A、在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，可将获得的研磨液用纱布过滤后，在4 ℃的冰箱中放置几分钟，再取上清液，也可以直接将研磨液用离心机进行离心后取上清液，A正确； B、研磨液在4 ℃冰箱中放置几分钟后，DNA在上清液中，应取上清液倒入烧杯中，B错误； C、鉴定过程中用沸水浴加热，DNA双螺旋结构会发生改变，C错误； D、加入二苯胺试剂后沸水浴处理的时间要在5分钟以上，且要等到冷却后再观察结果，这样才可以观察到较为明显的显色反应，仅设置一个对照组可以排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰，D错误。 故选A。 2．(2025·浙江模拟)通过PCR扩增可得到含有部分未知序列的DNA片段的扩增产物，具体操作步骤如下图所示，图中白色为未知片段，黑色为已知片段，M、N为限制酶的识别序列，下列相关叙述错误的是(　　 ) A．已知片段中没有限制酶N的识别序列 B．将最终的PCR产物进行测序即可知道未知片段的DNA序列 C．该PCR过程中所使用的引物应依据a、b的序列进行设计 D．第一步酶切时可更换限制酶，只要所用限制酶的识别序列在已知片段中不存在即可 【答案】　D 【解析】　A、在酶切阶段，已知片段中不能含有酶切时所选限制酶的识别序列，不然会将已知片段中切断，造成序列识别混乱，A正确； B、PCR产物是包含所有已知序列和未知序列的链状DNA分子，因此将最终的PCR产物进行测序即可知道未知片段的DNA序列，B正确； C、PCR过程需要两种引物，为保证延伸的是序列N两侧的未知序列，应依据a、b的序列进行设计，C正确； D、第一步酶切时可更换限制酶，所用限制酶的识别序列在已知片段中不存在，还要能够产生相同的黏性末端，D错误。 故选D。 3．(2025·湖南衡阳模拟)W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟制备乳腺生物反应器来获得大量W，基本过程如图所示。下列相关叙述错误的是(　　 ) A．①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子 B．②过程通常在显微镜下进行去核、注入等操作 C．该过程培养的山羊所有组织细胞均能分泌W D．该过程利用了转基因、胚胎移植等工程技术 【答案】　C 【解析】　A、①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子，即仅在乳腺细胞中特异性表达的启动子，A正确； B、②为核移植，通常在显微镜下进行去核、注入等操作，B正确； C、该过程培养的山羊只有乳腺细胞能分泌W，C错误； D、通过生物工程技术制备山羊乳腺生物反应器过程中应用到了转基因(W基因导入山羊胚胎成纤维细胞)、核移植(胚胎成纤维细胞和卵母细胞形成重构胚)和胚胎移植(重构胚移入山羊体内)等工程技术，D正确。 故选C。 4．为解决跨物种器官移植出现的免疫排斥反应，研究者借助CRISPR/Cas9技术对移植的猪心脏进行了基因编辑，剔除猪的相关基因。CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA(sgRNA)，sgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，其机制如图所示。下列叙述错误的是(　　 ) A．上述需要剔除的基因可能是标明猪细胞身份的标签蛋白基因 B．常选择受精卵作为受体细胞的主要原因是受精卵体积大容易操作 C．复合体中，sgRNA特异性识别目标DNA，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键 D．sgRNA会因错误结合出现脱靶现象，一般sgRNA序列越短，脱靶率越高 【答案】　B 【解析】　A、免疫排斥主要与标明身份的标签的蛋白质相关，上述需要剔除的基因可能是标明猪细胞身份的标签蛋白基因，A正确； B、常选择受精卵作为受体细胞的主要原因是受精卵的全能性高，B错误； C、由题图可知，而Cas9蛋白可以对基因特定位点进行切割，C正确； D、sgRNA序列越短，sgRNA错误结合的概率越高，脱靶率越高，D正确。 故选B。 5．科研人员将寒带地区海鱼中的抗冻基因转入千禧果细胞中，成功培育出抗冻千禧果。下图为培育过程中使用的Ti质粒示意图，其中Vir区的基因活化能促进T­DNA的加工和转移，下列叙述正确的是(　　 ) A．构建基因表达载体时，最好选择限制酶Ⅱ和Ⅲ来切割质粒 B．利用PCR扩增抗冻基因，需提前检测抗冻基因的全部碱基序列 C．Vir区的基因活化促进抗冻基因整合到千禧果细胞的染色体DNA上 D．利用含卡那霉素的培养基可筛选出成功导入抗冻基因的千禧果细胞 【答案】　C 【解析】　A、使用限制酶Ⅱ会破坏Vir区的基因，Vir区的基因活化能促进T­DNA的加工和转移，是T­DNA转移整合到受体细胞DNA上必不可少的，不能选限制酶Ⅱ，A错误； B、使用PCR技术扩增抗冻基因，只需要知道抗冻基因两端碱基序列设计引物即可，B错误； C、农杆菌侵染植物细胞后，Ti质粒上的T­DNA能转移到被侵染的细胞并整合到该细胞的染色体DNA上，所以Vir区基因活化可促进抗冻基因整合到千禧果细胞的染色体DNA上，C正确； D、为筛选成功导入抗冻基因的千禧果细胞，最好在培养基中添加四环素，可以筛选成功导入抗冻基因的千禧果细胞，D错误。 故选C。 6．(2025·甘肃白银模拟)普通棉花中β­甘露糖苷酶(GhMnaA2)基因表达出的GhMnaA2能催化半纤维素降解，使棉纤维长度变短。为了培育长绒棉，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体(将正义GhMnaA2基因与载体反向连接)，获得了转基因长绒棉新品种，具体过程如图所示，SmaⅠ，NotⅠ，HindⅢ和BamHⅠ为酶切位点。用SmaⅠ和NotⅠ切割某正义表达载体可获得3 kb、18 kb、28 kb、59 kb 4种长度的DNA片段。下列叙述正确的是(　　 ) A．正义GhMnaA2基因的转录方向是B→A B．①过程所得到的表达载体均为反义表达载体 C．反义GhMnaA2基因可能通过抑制GhMnaA2基因的翻译来保证棉纤维长度 D．用NotⅠ切割反义表达载体获得的DNA片段的长度为21 kb和87 kb 【答案】　C 【解析】　A、由图可知，NotⅠ的酶切位点靠近GhMnaA2基因转录的起始端，其转录方向是A→B，A错误； B、①过程得到的表达载体可能为反义表达载体，也可能为正义表达载体，B错误； C、反义GhMnaA2基因转录出来的RNA与正常转录的mRNA互补，从而阻止其与核糖体结合，即反义GhMnaA2基因可能通过抑制GhMnaA2基因的翻译来保证棉纤维长度，C正确； D、用SmaⅠ和NotⅠ切割正义表达载体可获得3 kb、18 kb、28 kb、59 kb 4种长度的DNA片段，据此判断左侧SmaⅠ和NotⅠ之间的长度是59 kb，A位置的SmaⅠ和NotⅠ之间的长度是3 kb，B位置处的SmaⅠ和NotⅠ之间的长度是18 kb，右上角E6位置好处SmaⅠ和NotⅠ之间的长度是28 kb。故用NotⅠ切割反义表达载体获得的DNA片段的长度应分别为18 kb＋28 kb＝46 kb和3 kb＋59 kb＝62 kb，D错误。 故选C。 7．翻译控制肿瘤蛋白(TCTP) 是在翻译水平受到抑制的肿瘤相关蛋白，是一个高度保守且和细胞生长、死亡等功能有关的蛋白。现从果蝇基因组DNA中扩增果蝇dTCTP基因，经限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后，插入表达质粒pGEX－4T－2 上构建基因表达载体，最终表达有活性的dTCTP融合蛋白。关于该基因表达载体的构建，下列叙述错误的是(　　 ) A．表达质粒pGEX－4T－2需要用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ进行双酶切 B．dTCTP基因是该项研究中的目的基因 C．除了目的基因和标记基因外，该基因表达载体还必须有启动子和终止子 D．将dTCTP基因插入表达质粒pGEX－4T－2上时，需要用到DNA聚合酶 【答案】　D 【解析】　A、dTCTP基因经限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切，因此需要相同的限制酶切割载体，产生相同的黏性末端，A正确； B、由题意知，从果蝇基因组DNA中扩增果蝇dTCTP基因，最终获得dTCTP融合蛋白，故dTCTP基因是该项研究中的目的基因，B正确； C、基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，C正确； D、利用DNA 连接酶将目的基因片段拼接到载体切口处，构建基因表达载体，D错误。 故选D。 8．(2025·贵阳二模)红豆草是一种品质优良的豆科多年生高蛋白牧草作物，被誉为“牧草皇后”。为提高红豆草的耐盐性、增大种植范围，科研人员将盐生植物碱蓬中的耐盐基因SsPSL转入红豆草中，对转基因耐盐红豆草DNA进行PCR，再对PCR的产物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。下列有关叙述错误的是(　　 ) A．利用PCR获取和扩增耐盐基因SsPSL，需添加一种引物，四种核糖核苷酸等组分 B．构建基因表达载体是培育转基因耐盐红豆草的核心工作 C．将植物材料和农杆菌共同培养之前，植物材料需要消毒处理 D．凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来 【答案】　A 【解析】　A、利用PCR获取和扩增耐盐基因SsPSL，需添加两种引物，四种脱氧核苷酸等组分，A错误； B、构建基因表达载体是基因工程的核心，B正确； C、为防止杂菌污染，将植物材料和农杆菌共同培养之前，植物材料需要消毒处理，C正确； D、DNA分子的大小和构象等有关，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来，D正确。 故选A。 9．研究人员将目的基因插入质粒，构建重组质粒的过程如图所示，再将该重组质粒导入大肠杆菌中。由β­半乳糖苷酶基因编码产生的β­半乳糖苷酶可分解X­gal产生蓝色物质，使菌落呈蓝色，否则菌落为白色。下列叙述错误的是(　　 ) A．将目的基因插入质粒中时，需要用到的酶有XhoⅠ、NheⅠ和DNA连接酶 B．需要用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的状态 C．按图示构建的重组质粒导入大肠杆菌后，大肠杆菌可正常表达该目的基因 D．在含X­gal的培养基上培养导入了重组质粒的大肠杆菌，可出现蓝色菌落 【答案】　C 【解析】　A、目的基因两侧含有限制酶XhoⅠ、NheⅠ的识别序列，将目的基因插入质粒中时，需要用到的限制酶XhoⅠ、NheⅠ切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接在一起，A正确； B、将目的基因导入受体细胞时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的状态，B正确； C、按图示构建的重组质粒导入大肠杆菌后，由于目的基因的转录方向和启动子的方向相反，大肠杆菌不能正常表达该目的基因，C错误； D、在含X­gal的培养基上培养导入了重组质粒的大肠杆菌，β­半乳糖苷酶基因编码产生的β­半乳糖苷酶可分解X­gal产生蓝色物质，使菌落呈蓝色，D正确。 故选C。 10．(2025·浙江金华模拟)大肠杆菌的质粒上含有青霉素抗性基因和lacZ基因，lacZ基因编码的产物β半乳糖苷酶能催化无色的Xgal生成蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，目的基因插入lacZ基因中则菌落呈现白色，该过程称为蓝白斑筛选。下列叙述正确的是(　　 ) A.蓝白斑筛选属于个体水平上的操作 B．CaCl2溶液处理的大肠杆菌能吸收周围DNA从而完成转化 C．平板中加入青霉素可以筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌 D．将完成转化的大肠杆菌涂布到平板上将产生蓝色斑菌落 【答案】　B 【解析】　A、根据题意可知，蓝白斑筛选是通过菌落呈现的颜色进行筛选，因此不属于个体水平的筛选，而属于种群水平的筛选，A错误； B、转化过程中，大肠杆菌通常用CaCl2溶液处理，使其处于能吸收周围DNA的状态，从而完成转化，B正确； C、依题意，大肠杆菌的质粒上含有青霉素抗性基因，平板中加入青霉素筛选出来的菌可能是含有带目的基因的重组质粒的菌，也可能是只含大肠杆菌质粒的菌，C错误； D、完成转化的菌是带有目的基因的菌，目的基因的插入破坏了lacZ基因，因此，完成转化的大肠杆菌涂布到平板上将产生白色斑菌落，D错误。 故选B。 二、选择题：每小题给出的四个选项中有一个或多个符合题目要求。 11．如图所示，研究人员将雪花莲凝集素基因(GNA)和尾穗苋凝集素基因(ACA)与载体(pB1121)结合，然后导入棉花细胞。下列操作不符合实验目的是(　　 ) A．用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中 B．将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞 C．用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA—ACA融合基因 D．与只用KpnⅠ相比，KpnⅠ和XhoⅠ处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确 【答案】　B 【解析】　A、根据GNA－ACA融合基因的两端序列设计合适的引物，可以利用PCR技术检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中，A正确； B、由于重组质粒含有卡那霉素的抗性基因，故将棉花细胞接种在含卡那霉素的培养基上可筛选出转基因细胞，B错误； C、雪花莲凝集素基因(GNA)和尾穗苋凝集素基因(ACA)均有 BsaBⅠ酶切位点，所以用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA－ACA融合基因，C正确； D、图中质粒与ACA－GNA上都含有KpnⅠ和XhoⅠ的酶切位点，与只用KpnⅠ相比，KpnⅠ和XhoⅠ处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确，D正确。 故选B。 12．科学家将某病毒抗原蛋白的部分编码序列(RBD)拼接成融合基因2RBD和3RBD，探究RBD的二聚体蛋白和三聚体蛋白能否模拟RBD的天然构象并获得高效免疫原性。为鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒用NcoⅠ和SacⅠ双酶切处理后电泳，结果如图，其中泳道1为双酶切pNZ8149－2RBD，两个条带大小分别为2507 bp和2020 bp。将构建好的重组质粒分别导入工程菌中进行表达产物的检测。下列说法正确的是(　　 ) A．PCR扩增融合基因时，在引物的3′端添加相应限制酶的识别序列 B．据图可知，融合基因3RBD的长度为2686bp C．泳道2呈现一个条带的原因是酶切pNZ8149－3RBD后产生的两个片段大小相近 D．从工程菌细胞表面提取蛋白质进行检测，从而进一步比较两者的免疫原性 【答案】　BCD 【解析】　A、引物使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，PCR扩增融合基因时，在引物的5′端添加相应限制酶的识别序列，A错误； B、由图可知pNZ8149－2RBD和pNZ8149－3RBD的碱基对分别为4527 bp和5193 bp，所以RBD长度为5 193－4 527＝666 bp，泳道1为双酶切pNZ8149－2RBD，两个条带大小分别为2 507 bp和2 020 bp，所以融合基因3RBD的长度为666＋2 020＝2686 bp，B正确； C、由图可知，泳道2呈现一个条带，其原因是双酶切pNZ8149－3RBD后产生的两个片段大小相近，C正确； D、该实验的目的是“探究RBD的二聚体蛋白和三聚体蛋白能否模拟RBD的天然构象并获得高效免疫原性”，可以从工程菌细胞表面提取蛋白质进行检测，从而进一步比较两者的免疫原性，D正确。 故选BCD。 13．青蒿素是有效的抗疟疾药物，但野生黄花蒿中青蒿素的产量较低。为缓解青蒿素供应不足的状况，科学家将基因tms和tmr导入黄花蒿的愈伤组织，获得了黄花蒿的冠瘿组织，改造过程用到的部分结构如图所示。下列叙述错误的是(　　 ) A．将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞常用的方法是农杆菌转化法 B．图中P位于基因的首端，作用是DNA聚合酶识别和结合的部位，驱动转录 C．图中还缺少的结构是标记基因，标记基因的作用是表达出目的基因产物 D．欲检测目的基因是否导入冠瘿组织细胞的染色体DNA上可采用PCR技术 【答案】　BC 【解析】　A、将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞常用的方法是农杆菌转化法，A正确； B、图中P为启动子，位于基因的首端，作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动转录，B错误； C、图中还缺少的结构是标记基因，标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含目的基因的细胞筛选出来，C错误； D、要检测目的基因是否导入冠瘿组织细胞的染色体DNA上，可采用PCR技术，D正确。 故选BC。 三、非选择题 14．(2025·日照期末)科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入甘蓝植株，获得抗草甘膦转基因甘蓝植株。培育过程如图1所示。 (1)为便于PCR扩增后的草甘膦抗性基因与质粒连接，需在两个引物的______(填“3′”或“5′”)端添加限制的识别序列。扩增产物经酶切后形成的黏性末端(单链突出末端)序列为5′－______________－3′和5′－______________－3′。 (2)若目的基因用BamHⅠ和BglⅡ剪切，质粒用BamHⅠ剪切，酶切后的目的基因存在正向与反向两种连接方式，可用__________________________酶对两种重组质粒进行剪切。通过琼脂糖凝胶电泳技术对产物分别进行分析，结果如图2所示，样品1和样品2中小片段的长度分别为____________kb，图中______(填“样品1”或“样品2”)为所需的基因表达载体。 (3)在过程④的培养基中添加的抗生素为_________，以便筛选出含目的基因的甘蓝植株。鉴定时发现，该过程获得的转基因甘蓝植株有一部分具有草甘膦抗性基因，但没有表现出抗草甘膦性状，原因可能是_______________________________(答出一点即可)。 【答案】　(1)5′　GATC　GATC (2)BamHⅠ和EcoRⅠ　20 kb、45 kb　样品2 (3)潮霉素　草甘膦抗性基因没有表达 【解析】　(1)PCR扩增后的草甘膦抗性基因包含引物，切割的时候也要包含引物，需要把限制酶识别序列加在5′ 端，扩增产物用BamHⅠ酶到BglⅡ酶进行切割，产生的黏性末端分别是5′－GATC－3′和5′－GATC－3′。 (2)用BamHⅠ酶到BglⅡ酶切割产生相同的黏性末端，保证正向连接用的是EcoRI酶和BamHⅠ酶。正向连接的重组质粒会被切去20＋25＝45 kb长度的片段，反向连接的重组质粒会被切去20 kb长度的片段，电泳凝胶中，DNA分子量越大，在凝胶中收到的阻力越大，迁移距离越短，正向连接的重组质粒被切割后两个片段的大小介于反向连接的重组质粒被切割后两个片段的大小之间，说明样品2是所需的基因表达载体。 (3)由图可知，卡那霉素抗性基因不在T­DNA片段中，潮霉素抗性基因在T­DNA片段中，可随T­DNA转移并整合到被侵染的细胞的染色体DNA上，从而使含目的基因的甘蓝植株有抗潮霉素的抗性，所以能在含潮霉素的培养基上筛选含目的基因的甘蓝植株，故步骤④的培养基中添加潮霉素，以便筛选出含目的基因的甘蓝植株。转基因甘蓝植株有一部分具有草甘膦抗性基因，但没有表现出抗草甘膦性状，原因可能是草甘膦抗性基因没有表达，从而使得相应性状没有表现出来。 15．(2025·山东模拟)我国科研人员成功从某种癌细胞中筛选出标志性蛋白质T。研究中同时发现TP、P2、P4和AD四种蛋白质细胞癌变过程中也存在一定作用，为研究上述四种蛋白与T蛋白之间的相互作用，科研人员进行了一系列实验。 (1)研究人员提取该种癌细胞的总mRNA，以__________为原料进行在___________酶的催化下获得总cDNA。 (2)通过PCR技术从总cDNA中扩增出T蛋白基因。经4轮扩增，产物中等长的T蛋白基因片段的数量是______个，需要消耗引物______个。为了将T蛋白基因准确连接到下图的PcDNA3.1质粒载体上，在扩增T蛋白基因时需要在引物的__________(填“5′”或“3′”)端添加______________限制酶的识别序列，质粒中抗生素抗性基因的作用是____________________________。 (3)免疫共沉淀技术是在体外研究蛋白质之间相互作用的一种技术。其原理是：抗体A可与蛋白质A特异性结合，将抗体A与磁珠偶联，磁珠可以使抗体A与蛋白A沉淀下来，若蛋白质B与蛋白质A相互作用，那么蛋白B也会被一起沉淀下来，可以通过对沉淀物中的蛋白质进行检测最终确定蛋白质之间的相互作用关系。研究人员将T蛋白高表达的癌细胞裂解后，利用抗T蛋白的抗体偶联磁珠，对裂解液中的TP、P2、P4和AD四种蛋白质进行免疫共沉淀，结果如图2。该结果表明与T蛋白相互作用的蛋白质是____________。 【答案】　(1)脱氧核苷酸　逆(反)转录 (2)8　30　5′　XhoⅠ和HindⅢ　便于重组DNA分子的筛选 (3)TP和P4 【解析】　(1)研究人员提取mRNA，然后以mRNA为模板，在逆(反)转录酶的作用下合成cDNA。 (2)PCR过程中第一、二轮循环合成的子链长度均不同，根据半保留复制特点可知，前两轮循环产生的四个DNA分子的两条链均不等长，第三轮循环产生的DNA分子存在等长的两条核苷酸链，如分析中的图示。由于第三轮出现两个等长的DNA，经过第四次复制产生4个等长的DNA，另外有四个DNA通过第四次复制也会分别一个等长的DNA，即总共8个。 PCR技术的原理是DNA双链复制，使DNA以指数形式增加，复制n次后，产生的DAN总数为2n，扩增过程中，需要引物与DNA单链结合，再进行链的延伸，所以产生的子代DNA链中都有引物，因此PCR过程中需要消耗引物为2n+1－2个，复制4次，需要引物为30个。 引物的设计在5′，选择限制酶时应当保证目的基因插入位点在启动子和终止子之间并保证目的基因的正确连接，应当在XhoⅠ、HindⅢ、NdeⅠ中选择两种，由于NdeⅠ在质粒上还有一个酶切位点，因此不能选择NdeⅠ，应当选择XhoⅠ和HindⅢ两种限制酶。 抗性基因为质粒上的标记基因作用为便于重组DNA分子的筛选。 (3)结合免疫共沉淀技术的原理及表中结果可知，TP和P4是与T蛋白相互作用的蛋白质。 学科网（北京）股份有限公司 $$