精品解析：江苏省连云港市灌云县第一中学2024-2025学年高二下学期5月期中生物试题

灌云县第一中学高二年级下学期期中考试生物学试卷 一、单项选择题：共20题，每题2分，共40分，每题只有一个选项最符合题意。 1. 葡萄酒的酿造技术历史悠久，唐代苏敬的《新修本草》云：凡作酒醴须曲，而蒲桃（即葡萄）、蜜等酒独不用曲。下列叙述错误的是（　　） A. 在榨汁前对葡萄的处理是先清洗葡萄再去除枝梗 B. 装置密闭发酵过程中，酒精度的变化是先增加后趋于稳定 C. 若葡萄酒变酸且产生菌膜，一般可从菌膜中分离得到醋酸菌 D. "蒲桃、蜜等酒独不用曲"说明葡萄酒的酿制不需要微生物 【答案】D 【解析】 【分析】在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。在发酵过程中，随着酒精度数的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色。在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。 【详解】A、在榨汁前对葡萄的处理是先清洗葡萄再去除枝梗，这样能够防止去除枝梗时露出的果肉被杂菌污染，A正确； B、装置密闭发酵过程中，随着发酵的进行酵母活细胞数量和酒精度逐渐增大，而在发酵后期酒精度趋于稳定，B正确； C、若发现葡萄酒变酸且产生表面菌膜，是由于醋酸菌大量的繁殖产生的菌膜，故一般可从菌膜中分离得到醋酸菌，C正确； D、在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌，因此可以“蒲桃、蜜等酒独不用曲”，并不是葡萄酒的酿制不需要微生物，D错误。 故选D。 2. 下列对灭菌和消毒的理解不正确的是（ ） A. 灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B. 消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物 C. 消毒和灭菌都是采用物理方法杀灭微生物 D. 常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌等 【答案】C 【解析】 【分析】消毒和灭菌 消毒 灭菌 概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子） 常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等 【详解】A、灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，A正确；B、消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），B正确； C、消毒和灭菌都是采用物理或化学的方法杀灭微生物，不仅有物理方法，C错误； D、灭菌的方法比较强烈，一般是高温或高压，常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、湿热灭菌灭菌法等，D正确。 故选C。 3. 如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法叙述正确的是（　　） A. 在1、2、3、4、5区域中划线前都要对接种环灼烧灭菌，灼烧灭菌后立即进行划线 B. 1和5划线可以如图所示，也可以相连在一起 C. 在划线操作结束时，要对接种环灼烧灭菌 D. 在5区域中才可以得到菌落 【答案】C 【解析】 【分析】本题以图文结合为情境，考查学生对平板划线法的具体操作过程、注意事项等相关知识的识记和理解能力，以及识图分析能力。 【详解】在1、2、3、4、5区域中划线前都要对接种环灼烧灭菌，待接种环冷却后，从上一次的划线的末端开始再进行下一次的划线，A错误；1和5分别是第一划线区与最后划线区，二者不能相连在一起，B错误；在划线操作结束时，要对接种环灼烧灭菌，以杀死接种环上残留的菌种、避免微生物污染或感染操作者，C正确；在5个区域中，只要有单个的微生物，通过培养均可得到菌落，D错误。 4. 丙草胺是一种应用广泛的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某生物兴趣小组从达活泉公园土壤中分离出能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其进行计数（如下图所示），以期为修复被丙草胺污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（ ） A. 将培养基PH调至酸性，有利于丙草胺降解菌的生长繁殖 B. 图中所用计数方法为稀释涂布平板法，用该方法计数结果往往比实际值偏小 C. 用以丙草胺为唯一氮源的液体培养基进行培养可提高丙草胺降解菌浓度 D. 通过计算得知每克土壤中的菌株数约为1．7×109个 【答案】A 【解析】 【分析】统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法： ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）：①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。 【详解】A、培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，A错误； B、图中利用的是稀释涂布平板法进行计数，利用该方法计数结果往往比实际值偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时观察到的只有一个菌落，B正确； C、由题干信息可知，该实验的目的是从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，故培养基应以丙草胺为唯一氮源，该培养基中只有降解丙草胺的细菌菌株才能生长，其他微生物的生长会受到抑制，故用该培养基进行培养可提高降解菌的浓度，C正确； D、5号试管的稀释倍数是105，则每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3÷0.1×10×105=1.7×109个，D正确。 故选A。 5. 图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述正确的是（　　） A. 步骤①添加盐酸以去除细胞壁 B. 步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗 C. 台盼蓝检测后应选择蓝色的原生质体继续培养 D. 原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间 【答案】D 【解析】 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】A、步骤①添加纤维素酶或果胶酶去除细胞，其原理是酶的专一性，A错误； B、步骤②吸取原生质体放入等渗液中清洗，否则会导致原生质体吸水涨破，B错误； C、台盼蓝检测后应选择无色的原生质体继续培养，染成蓝色的原生质体活性差或死亡，C错误； D、结合图示可知，原生质体处于甘露醇和蔗糖溶液之间，因而可推测原生质体的密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间，D正确。 故选D。 6. 红豆杉是濒危植物，其树皮产生的紫杉醇对抗癌有一定的效果。红豆杉植株组织培养和细胞培养的流程如图所示，②为愈伤组织，通过b过程可最终产生新的植株，通过c过程可产生大量细胞。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培养过程中所用的培养基，需添加抗生素、血清等成分 B. a、b过程的实质是基因的选择性表达，该过程会导致细胞中部分基因丢失 C. b过程的实质是基因的选择性表达，该过程和a过程的光照条件相同 D. 紫杉醇可从c过程中获得，其细胞增殖的方式是有丝分裂 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。 【详解】A、图示过程设计植物细胞培养，所以所用的培养基不需要添加动物细胞培养所特有的血清，A错误； B、a表示脱分化，b表示再分化，脱分化的实质是恢复细胞的全能性，再分化的实质是基因的选择性表达，该过程不会导致细胞中部分基因丢失，B错误； C、b过程可最终产生新的植株，该过程会发生分裂分化，实质是基因的选择性表达，但该过程需要光照条件，a过程可形成愈伤组织，所以a过程表示脱分化，该过程不需要光照，C错误； D、c过程表示对愈伤组织进行植物细胞培养，紫杉醇可从c过程中获得，其细胞增殖的方式是有丝分裂，D正确。 故选D。 7. 下图表示用草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗盐新品种的过程。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①需要使用的酶是胃蛋白酶 B. 灭活病毒不能诱导过程②中A和B的融合 C. 过程②处理后得到的两两融合原生质体类型可能有3种 D. 经过过程④所得到的愈伤组织细胞中含有四个染色体组 【答案】A 【解析】 【分析】分析图解：图中①过程是用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁，②过程是原生质体的融合过程，③过程是融合细胞再生出细胞壁，④过程是植物组织培养的脱分化形成愈伤组织。 【详解】A、过程①需要使用的酶是纤维素酶和果胶酶，目的是去除细胞壁，A错误； B、过程②为植物原生质体的融合过程，其诱导方法有PEG处理、离心、电激等，用灭活病毒是诱导动物细胞融合的手段，不能用于植物原生质体的融合，B正确； C、若只考虑两两融合的情况，则过程②处理后得到的融合原生质体类型可能有3种，C正确； D、该题中的两个植物细胞各有两个染色体组，故两细胞融合形成的细胞内含有四个染色体组，D正确。 故选A。 8. 应用动物细胞培养技术进行人造肉生产逐渐走向商业化，其基本流程如图所示。相关叙述正确的是（　　） A. 甲选择幼龄组织的原因是动物细胞的全能性更易表达 B. 人造肉生产可添加支架材料以便于动物细胞贴壁生长 C. 过程丙应暴露于空气中培养以减少培养基的pH波动 D. 过程乙添加的动物血清需先用高压蒸汽灭菌锅灭菌 【答案】B 【解析】 【分析】体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖；另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，大多数细胞属于这种类型，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁。 【详解】A 、动物细胞培养的原理是细胞增殖，没有体现全能性，甲选择幼龄组织的原因是分裂旺盛，A错误； B、动物细胞培养时会有细胞出现贴壁生长的特点，故人造肉生产可添加支架材料以便于动物细胞吸附，B正确； C 、过程丙应暴露于95%空气+5%CO2中培养以减少培养基的pH波动，C错误； D、高压蒸汽灭菌会破坏动物血清中的营养成分，故动物血清不能高压蒸汽灭菌，D错误。 故选B。 9. 科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，基本流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 注射的特定抗原是肺癌细胞特有的大分子 B. ①利用选择培养基筛选的方式获得了杂交瘤细胞 C. 步骤③细胞培养时应提供95%O2和5%CO2的气体环境 D. 抗体—肺癌药物偶联物中的a能特异性结合并杀死肿瘤细胞 【答案】A 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、要制备针对肺癌细胞的单克隆抗体，注射的特定抗原应是肺癌细胞特有的大分子，这样才能刺激小鼠产生能特异性结合肺癌细胞的B淋巴细胞 ，A正确； B、①是细胞融合过程，之后还需用选择培养基筛选（获得杂交瘤细胞 ）以及进行抗体检测（获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞 ），并非仅通过①利用选择培养基筛选就获得杂交瘤细胞，B错误； C、动物细胞培养时应提供95%空气（其中O2满足细胞呼吸需求 ）和5%CO2（维持培养液的pH）的气体环境，C错误； D、抗体-肺癌药物偶联物中的a为抗体，能特异性结合肿瘤细胞，起到导向作用，杀死肿瘤细胞的是偶联的药物，不是抗体，D错误。 故选A。 10. 研究发现Oct4、Nanog和SMYD3基因能影响体细胞克隆猪早期胚胎发育。Oct4基因影响囊胚的形成，Nanog基因影响囊胚的发育，过表达SMYD3基因能促进Nanog和Oct4基因表达，并显著提高克隆猪的囊胚发育率。相关叙述正确的是（　　） A. 获得体细胞克隆猪主要涉及体外受精、动物细胞培养、胚胎移植等技术 B. 选用去核的卵母细胞作为核受体是因为其不含激活细胞核全能性的物质 C. Nanog和Oct4基因的表达受SMYD3基因调控，二者在囊胚期发挥作用都是相同的 D. 可采用Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程 【答案】D 【解析】 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、获得体细胞克隆猪是无性生殖，不涉及体外受精，A错误； B、选用去核的卵母细胞作为核受体是因为含有激活细胞核全能性的物质，B错误； C、分析题意可知Nanog和Oct4基因的表达受SMYD3基因调控，但是发挥的作用不同，Oct4基因影响囊胚的形成，Nanog基因影响囊胚的发育，C错误； D、可采用电刺激法、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程，D正确。 故选D。 11. 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得多能干细胞，继而利用多能干细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下图所示，下列叙述正确的是（　　） A. 对克隆鼠X进行性别鉴定时应从滋养层处取样 B. 将克隆鼠的肝脏移植给灰鼠不会发生免疫排斥反应 C. 重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子宫内继续发育 D. 胚胎早期发育时，桑葚（椹）胚内部开始出现含液体的腔 【答案】C 【解析】 【分析】据图可知，从黑鼠中提取体细胞诱导形成多能干细胞，然后注入到特殊处理使内细胞团不发育的囊胚中，形成的重组囊胚移入到白鼠（代孕母鼠），最终形成克隆鼠X。 【详解】A、克隆鼠X是由多能干细胞发育形成的，与滋养层细胞中遗传物质并不相同，因此对克隆鼠X进行性别鉴定时不能从滋养层处取样，A错误； B、克隆鼠是由黑鼠体细胞诱导形成的多能干细胞发育形成的，与黑鼠遗传特性相同，因此将克隆鼠的肝脏移植给黑鼠可避免免疫排斥反应，但是若发生基因突变，可能会发生免疫排斥反应，B错误； C、灰鼠提供胚胎，灰鼠和白鼠需要进行同期发情处理，重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子宫内继续发育，C正确； D、胚胎早期发育时，囊胚内部开始出现含液体的腔，D错误。 故选C。 12. 下列关于 DNA 的粗提取和鉴定实验的叙述，正确的是（　　） A. 用猪血作为材料，原因是猪血红细胞有细胞核 B. 用二苯胺试剂进行鉴定，原因是 DNA 溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色 C. 用酒精进行提纯，原因是DNA 溶于酒精,蛋白质不溶于酒精 D. 用不同浓度的 NaCl 溶液进行DNA 粗提取，原因是 DNA 在其中溶解度不同 【答案】D 【解析】 【分析】1、DNA粗提取选材的标准： DNA含量高，并且材料易得。由于哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器，因此不采用哺乳动物的血液。 2、DNA粗提取和鉴定的原理： （1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同(DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低) ；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。 （2）DNA对酶、 高温和洗涤剂的耐受性不同。 （3）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、猪是哺乳动物，做DNA粗提取和鉴定实验时，实验材料用鸡血而不用猪血，原因是哺乳动物的成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器，因此不含DNA，A错误； B、DNA溶液加入二苯胺试剂必须在沸水浴条件下才呈现蓝色，B错误； C、在对DNA提纯时，由于DNA不溶于酒精，而其它杂质可以溶于酒精，因此可以除去溶于酒精的杂质，C错误； D、由于DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，根据此原理可以对DNA粗提取，D正确。 故选D。 13. 下列有关PCR的叙述，错误的是（ ） A. PCR扩增过程中双链DNA的解开不需要解旋酶 B. 用于PCR扩增的DNA聚合酶是一种耐高温的酶 C. 延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和4种核糖核苷酸 D. 复性过程中引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则 【答案】C 【解析】 【分析】PCR技术：1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：已知目的基因两端的核苷酸序列，以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。5、过程：① 高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上； ③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。 【详解】A、PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开，A正确； B、PCR扩增DNA的过程中，需要高温解旋，催化复制的DNA聚合酶是一种耐高温的酶，B正确； C、PCR反应的产物是DNA，原料是四种游离的脱氧核苷三磷酸，不是核糖核苷酸，C错误； D、复性过程中引物（一段DNA）与模板链（DNA）的结合遵循碱基互补配对原则，D正确。 故选C。 14. 四种限制酶的切割位点如图所示，下列叙述错误的是（ ） A. 上图中EcoRⅠ、PstⅠ两种酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA连接酶连接 B. 图中SmaⅠ、EcoR V两种酶切割后的DNA片段，可以用T4DNA连接酶连接 C. DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段连接的化学键是磷酸二酯键 D. 限制酶能识别特定的核苷酸序列，具有专一性，不同的限制酶切割不能产生相同的黏性末端 【答案】D 【解析】 【分析】1、基因工程的基本操作步骤为：获取目的基因、形成重组DNA分子、将重组DNA分子导入受体细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达。 2、基因工程的工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。 【详解】A、EcoRⅠ、PstⅠ两种酶切割后，都会形成黏性末端，而E.coliDNA连接酶可以连接具有相同黏性末端的DNA片段，A正确； B、SmaⅠ、EcoRV两种酶切割后形成的是平末端，而T4DNA连接酶可以连接具有平末端的DNA片段，B正确； C、DNA连接酶是催化DNA片段的连接，形成的是磷酸二酯键，C正确； D、不同的限制酶也可能形成相同的黏性末端，D错误。 故选D。 15. 下列有关基因工程所需酶及载体的描述错误的是（　　） A. 限制酶切割1个位点，破坏两个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团 B. E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都可以高效连接平末端 C. DNA聚合酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 D. 使用质粒作为载体可以避免目的基因在受体细胞内被分解 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程最基本的工具：①基因的“剪刀”---限制性内切核酸酶（简称限制酶），②基因的 “针线”---DNA连接酶，③基因的运载体---质粒、噬菌体、动植物病毒等。 【详解】A、限制酶能够识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子，切割1个位点，会破坏两个磷酸二酯键，从而产生2个游离的磷酸基团，A正确； B、E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶连接平末端的效率都比较低，B错误； C、DNA聚合酶在DNA复制过程中，能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上，通过形成磷酸二酯键将其连接起来，C正确； D、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，使用质粒作为载体可以保护目的基因，避免目的基因在受体细胞内被分解，D正确。 故选B。 16. PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列，dNTP（四种脱氧核苷三磷酸）是DNA合成的原料。下列相关说法错误的是（　　） A. 图示环节所需的温度比上一个环节的低 B. dNTP作为扩增的原料会依次连接到5'端 C. TaqDNA聚合酶催化磷酸二酯键的形成 D. 经过1个循环后，获得的子代DNA的两条单链长短不同 【答案】B 【解析】 【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在体外复制特定的DNA的核酸合成技术。条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、引物、热稳定DNA聚合酶（Tag 酶）。 【详解】A、图示环节为引物与模板碱基互补配对，表示的是复性环节，复性的上一环节为变性，复性的温度比变性的温度低，A正确； B、在PCR扩增中，脱氧核苷酸只能连接在3'端，所以dNTP作为扩增的原料会依次连接到3'端，B正确； C、Tag 酶催化形成磷酸二酯键，磷酸二酯键是相邻的两个脱氧核苷酸之间形成的，C正确； D、由于两个引物均不在该片段的端点，因此1个循环后，获得的子代DNA的两条单链长短不同，D正确。 故选B。 17. 模型构建是生命科学教学、科研的一种重要方法。下图是生物概念模型，相关分析错误的是（ ） A. 若图示为基因工程，则C为重组质粒，D为受体细胞 B. 若图示为试管婴儿技术，C～D为早期胚胎培养和胚胎移植 C. 若图示为植物体细胞杂交部分流程，用灭活的病毒融合A、B得到C D. 若图示为核移植技术，则 B 可能为去核卵母细胞 【答案】C 【解析】 【分析】1、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 2、基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。 【详解】A、若图示为基因工程，则C为重组质粒，是目的基因和载体相连形成的，D为受体细胞，为重组质粒的表达提供条件，A正确； B、若图示为试管婴儿技术，A和B结合表示体外受精，C为早期胚胎培养，D为胚胎移植，B正确； C、若图示为植物体细胞杂交部分流程，则A、B表示两种不同的植物细胞除去细胞壁之后采用物理或化学方法进行融合形成杂种细胞C，该过程中没有用到灭活的病毒，灭活的病毒一般用于动物细胞融合而不是植物细胞融合，C错误； D、核移植技术需要将一个细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中，若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞，此时A可能是细胞核供体细胞，D正确。 故选C。 18. 古徽州有许多美食深受人们喜爱，如徽州毛豆腐、灵山酒酿、臭鳜鱼、徽州臭豆腐等。制作臭豆腐时需要将豆腐浸入含有乳酸菌和芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵，相关叙述正确的是（ ） A. 卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌相互独立，没有种间关系 B. 制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基 C. 徽州毛豆腐中的毛霉、曲霉产生的蛋白酶能促进大豆蛋白质、脂肪分解，丰富营养成分 D. 乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳，需定期排气 【答案】B 【解析】 【分析】腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15°C~18°C；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。 【详解】A、乳酸菌和芽孢杆菌生活在同一环境下会竞争营养物质和空间等，故卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌存在（种间）竞争关系，A错误； B、制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基，能够给微生物提供其生长所需的营养，B正确； C、酶具有专一性，毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸，C错误； D、乳酸菌发酵产物是乳酸，不会产生二氧化碳，D错误。 故选B。 19. 逆转录PCR(RT-PCR）是以mRNA为模板逆转录形成DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增的技术。如图为利用RT-PCR扩增人乳铁蛋白基因的部分过程，相关叙述错误的是（ ） A. 由于基因的选择性表达，人乳铁蛋白基因mRNA应从人乳腺细胞中提取获得 B. 过程①②所需的酶分别是逆转录酶、耐高温的DNA聚合酶，原料均为脱氧核苷酸 C. 过程③获得的人乳铁蛋白基因不具有起始密码子、终止密码子的对应序列 D. RT-PCR中，引物P1、P2的长度会影响复性温度以及扩增产物的数量和纯度 【答案】C 【解析】 【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 【详解】A、由于基因的选择性表达，人乳铁蛋白基因只在人乳腺细胞中表达，则人乳铁蛋白基因mRNA应从人乳腺细胞中提取获得，A正确； B、过程①为逆转录过程，需要逆转录酶的参与，过程②为DNA的复制（利用PCR技术合成），需要耐高温的DNA聚合酶，这两个过程都是合成DNA链，需要的原料均为脱氧核苷酸，B正确； C、mRNA上含有起始密码子和终止密码子，则由mRNA逆转录获得的人乳铁蛋白基因具有起始密码子、终止密码子的对应序列，C错误； D、PCR扩增中，引物的长度会影响复性温度以及扩增产物的数量和纯度，引物长度越长，复性的温度越高，扩增的产物特异性越强，D正确。 故选C。 20. 蛋白质工程是当前的新兴分子生物学技术，通过改造或合成基因，来改造现有的蛋白质或制造新的蛋白质，以满足人类生产、生活的需求。下列关于蛋白质工程的说法错误的是（ ） A. 蛋白质工程技术会改变组成蛋白质的氨基酸的种类、数目和排列顺序 B. 蛋白质工程获得的蛋白质都是自然界已存在的蛋白质（天然蛋白质） C. 蛋白质工程不直接改造蛋白质的原因是改造基因易于操作且改造后可遗传 D. 蛋白质工程生产出来的蛋白质的活性与天然蛋白质相似，而且稳定性更高 【答案】B 【解析】 【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。 【详解】A、蛋白质工程技术蛋是根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行设计改造，会改变组成蛋白质的氨基酸的种类、数目和排列顺序，A正确； B、基因工程获得的蛋白质都是自然界已存在的蛋白质（天然蛋白质），而蛋白质工程是根据人们的需求获得的蛋白质，所以都是非天然的蛋白质，B错误； C、由于基因决定蛋白质，因此要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成，故蛋白质工程不直接改造蛋白质的原因是改造基因易于操作且改造后可遗传，C正确； D、蛋白质工程生产出来的蛋白质在天然蛋白质的基础上经过改造，品质更加优良，活性与天然蛋白质相似，而且稳定性更高，D正确。 故选B。 二、多项选择题：共5题，每题3分，共15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 21. 图示普通韭菜（2n=16）的花药结构。为了快速获得普通韭菜的纯系，科研人员利用其花药进行单倍体育种。下列相关叙述正确的有（ ） A. 花粉细胞和花药壁细胞均具有全能性 B. 培养基中生长素与细胞分裂素的比例影响愈伤组织再分化 C. 镜检根尖分生区细胞的染色体，可鉴定出单倍体幼苗 D. 秋水仙素处理单倍体幼苗，所得植株的细胞中染色体数都是16 【答案】ABC 【解析】 【分析】生长素与细胞分裂素的用量比值高，有利于根的分化，抑制芽的形成；用量比值低，有利于芽的分化，抑制根的形成；用量比值适中，促进愈伤组织的形成。 【详解】A、花粉细胞含有一个完整的染色体组，花药壁细胞含有2个染色体组，都含有该生物生长发育繁殖的全部遗传信息，均具有全能性，A正确； B、愈伤组织再分化过程中，如果细胞分裂素和生长素同时使用，且生长素用量较高，有利于根的分化、抑制芽的形成，如果同时使用，且细胞分裂素用量较高，有利于芽的分化、抑制根的形成，所以培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向，B正确； C、单倍体幼苗细胞含有的染色体数目减半，因此可镜检根尖分生区细胞的染色体，鉴定出单倍体幼苗，C正确； D、秋水仙素处理单倍体幼苗，可能有些细胞染色体数目没有加倍，只含有8条，D错误。 故选ABC。 22. 从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，结果如图所示。下列相关叙述错误的有（ ） A. 选取发育状态一致的卵母细胞进行培养 B. 体外培养卵母细胞时通常加入湿热灭菌后的血清 C. 对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞 D. 体外培养时高温提高了卵母细胞发育的成熟率 【答案】BCD 【解析】 【分析】在探究高温对卵母细胞成熟的影响实验中，需要控制变量，选取发育状态一致的卵母细胞进行培养，以确保实验结果的准确性。血清可以为卵母细胞的培养提供营养物质。 【详解】A、选取发育状态一致的卵母细胞进行培养，这样可以排除其他因素的干扰，保证实验结果是由温度这一变量引起的，A正确； B、体外培养卵母细胞时通常加入血清，但是动物血清并不能进行湿热灭菌，否则会使其中部分有效成分失活，B错误； C、卵母细胞不能进行传代培养，因为卵母细胞是生殖细胞，不具有连续分裂的能力，C错误； D、由图可知，高温降低了卵母细胞发育的成熟率，而不是提高，D错误。 故选BCD。 23. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能 B. ②代表体外胚胎培养，该过程中细胞既进行有丝分裂也存在细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. ⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 【答案】AC 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，分析题图，①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢复，⑤是胚胎移植。 【详解】A、①代表体外受精，体外受精前和体内受精前精子均需要获能，A错误； B、②代表体外早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，当胚胎发育至囊胚阶段，会开始进行细胞分化，B正确； C、③代表胚胎分割，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分裂，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，而桑椹胚阶段的胚胎还未形成内细胞团，C错误； D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关，要对供、受体母牛进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，D正确。 故选AC。 24. OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（能引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法将其导入棉花细胞，在棉花叶绿体内构建了一条新的代谢途径，提高了棉花的产量。下列相关叙述错误的有（ ） A. 使用Ca2+处理农杆菌，有利于多基因表达载体的导入 B. 应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的棉花细胞 C. OsGLO1、EcCAT基因转录时以DNA的同一条单链为模板 D. 四个基因都在棉花叶绿体内进行转录、翻译 【答案】BCD 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、用Ca2+处理农杆菌使其处于感受态，有利于多基因表达载体的导入，A正确； B、卡那霉素抗性基因不在T-DNA上，没有转移到宿主细胞的染色体DNA上，因此应用潮霉素培养基筛选被农杆菌转化的棉花细胞，B错误； C、启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，图中OsGLO1、EcCAT基因启动子的位置和方向不同，且RNA链的延伸方向是由RNA的5’→3’，因而，OsGLO1、EcCAT基因转录时以DNA的不同单链为模板，C错误； D、四个基因在叶绿体外合成蛋白质，由叶绿体转运肽引导合成的蛋白质进入叶绿体，即这四个基因的转录和翻译过程都在叶绿体外完成，D错误。 故选BCD。 25. 如图表示花粉管通道法介导植物基因转移。下列说法正确的是（　　） A. 花粉管通道法可适用获得转基因抗虫棉花 B. 相比于农杆菌转化法，花粉管通道法避免了植物组织培养这一操作 C. 必须在雌蕊成熟时才能进行图中所示的处理方法 D. 最终获得的种子一定含有目的基因 【答案】ABC 【解析】 【分析】1、将目的基因导入植物细胞： （1）农杆菌转化法；（2）花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）。 2、将目的基因导入动物细胞方法：显微注射技术。（最有效一种方法）。 3、将目的基因导入微生物细胞：Ca2+处理法（感受态细胞法）。 【详解】A、花粉管通道法是一种常用的植物基因转移方法，适用于多种植物，包括棉花，A正确； B、花粉管通道法可以直接实现转基因植物的自然生成，而农杆菌转化法还需要对成功导入目的基因的受体细胞进行植物组织培养获得转基因植物，故花粉管通道法避免了植物组织培养这一操作，B正确； C、授粉过程需要在雌蕊成熟后，因此，花粉管通道法也应该必须在雌蕊成熟时才能进行图中所示的处理方法，C正确； D、外源DNA进入胚囊，不一定能整合到染色体上，故采用花粉管通道法将目的基因导入植物细胞，最终获得的种子不一定含有目的基因，D错误。 故选ABC。 三、非选择题（共45分，如无特殊说明每空2分） 26. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生代谢产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如图所示。请回答下列问题： 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）培养基中应添加一定浓度的蔗糖，目的是提供能源和__________。A处理为__________。 （2）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此分析应选择__________（填“发荧光”或“不发荧光”）的原生质体用于融合。 （3）获得的原生质体常使用化学试剂__________诱导融合过程④再分化阶段，芽的分化要求培养基中生长素与细胞分裂素比例__________（填“较高”、“较低”或“适中”）。 （4）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如表所示。后代植株中__________类型一定不是所需植株。 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA分子标记鉴定 甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 【答案】（1） ①. 碳源 ②. X射线处理 （2）发出荧光 （3） ①. 聚乙二醇 ②. 较低 （4）乙 【解析】 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【小问1详解】 培养基中应添加一定浓度的蔗糖，蔗糖能提供碳源和能源，不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，所以A处理为X射线处理，破坏供体细胞的染色质。 【小问2详解】 分析题意，FAD本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质会留在细胞内发出荧光发出荧光，故应选择发出荧光的原生质体用于融合。 【小问3详解】 获得的原生质体常使用化学试剂聚乙二醇诱导融合；过程④再分化阶段，芽的分化要求培养基中生长素与细胞分裂素比例较低。 【小问4详解】 根据表格信息可知，植株后代乙无红豆杉DNA片段，说明其不是杂种植株；甲、丙类型植株与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段，说明甲、丙植株属于杂种植株。 27. 牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原体，它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白，在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体，进行相关研究。请回答下列问题： （1）以VspX蛋白为抗原制备单克隆抗体，需用纯化的VspX蛋白对小鼠进行多次免疫，其目的是刺激机体产生更多的分泌__________的B淋巴细胞。 （2）杂交瘤细胞__________（填“能”或“不能”）产生专一抗体，所产生的抗体__________（填“一定”或“不一定”）能抗VspX蛋白。 （3）若将筛选出的杂交瘤细胞培养、稀释后接种到96孔培养板中，每一个孔中尽量只接种__________个杂交瘤细胞以实现克隆化培养。 （4）将抗VspX抗体与不同抗原进行杂交，免疫印迹分析如图所示，实验结果显示抗VspX单克隆抗体不能与__________结合，表明抗VspX抗体具有__________。 【答案】（1）抗VspX抗体 （2） ①. 能 ②. 不一定 （3）1 （4） ①. 3、4 ②. 特异性 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞；第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问1详解】 依据题干信息，制备以VspX蛋白为抗原制备单克隆抗体，首先需要用纯化的VspX蛋白对小鼠进行多次免疫，其目的是为了刺激机体产生更多的分泌抗VspX抗体的B淋巴细胞，然后利用细胞融合技术，获得杂交瘤细胞。 【小问2详解】 一个B淋巴细胞只能产生一种抗体，筛选出来的杂交瘤细胞有多个，每一个杂交瘤细胞能产生专一抗体，但产生的不一定是抗VspX蛋白的抗体，故杂交瘤细胞所产生的抗体不一定能抗VspX蛋白。 【小问3详解】 将筛选出的杂交瘤细胞培养、稀释后接种到96孔培养板中，每一个孔中尽量只接种1个杂交瘤细胞以实现克隆化培养。 【小问4详解】 据图可知，抗VspX抗体不能与3羊无乳支原体全菌蛋白、4丝状支原体丝状全菌蛋白结合，也说明了抗VspX抗体具有特异性。 28. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图回答下列问题： （1）应用1中，细胞B获取需对供体2注射__________以使获得更多的卵母细胞，使用核移植技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛，该技术的原理是__________。 （2）应用2中，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫胚胎移植，为使受体牛生理状况更适合完成该技术操作，要对受体牛进行__________处理，以提高成功率。 （3）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过胚胎分割技术获得二分胚①和②，操作时需将内细胞团均等分割。在此之前还可切取__________的细胞进行性别鉴定。这种使良种生物大量繁殖的技术属于__________（填“有性”或“无性”）生殖。 【答案】（1） ①. 促性腺激素 ②. 动物细胞核的全能性 （2）同期发情 （3） ①. 滋养层 ②. 无性 【解析】 【分析】题图分析：应用1中：供体1提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，称为克隆牛；应用2中：优良公牛和供体1配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖；应用3中：采用了胚胎分割技术；应用4中：从早期胚胎和原始性腺中获取胚胎干细胞，并进行体外干细胞培养。 【小问1详解】 应用1中供体2提供细胞质，为获取更多的细胞B（卵母细胞），需对供体2注射促性腺激素以促进排卵，使用核移植技术获得重组细胞，最终获得的小牛为克隆牛，该技术是体细胞核移植技术，所依据的原理是动物细胞核的全能性。 【小问2详解】 应用2属于有性生殖，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫胚胎移植，移植前对受体牛进行同期发情处理，可以使供体和受体处于相同的生理状态，提高成功率。 【小问3详解】 应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题： 通过胚胎分割技术获得二分胚①和②，操作时需将内细胞团均等分割，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，如果分割不均，会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。在此之前还可切取滋养层的细胞进行性别鉴定，因为滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，不会影响胚胎的发育。这种使良种生物大量繁殖的技术属于无性生殖，因为胚胎分割技术没有经过两性生殖细胞的结合。 29. 人的血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值，研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。下图为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，其中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。请回答下列问题： （1）人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外，还必须有__________、__________等。 （2）据左图分析，在构建基因表达载体时，选择限制酶__________切割质粒和目的基因，可提高目的基因和载体的正确连接率。 （3）为了排除普通受体细胞（未导入质粒）、空质粒受体细胞（导入pBR322质粒而非重组质粒）的干扰，目的基因导入后进行了进一步筛选：制备甲、乙两种培养基，甲培养基中有新霉素，乙培养基中有氨苄青霉素，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上_________（填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上__________（填“能”或“不能”）生存。 【答案】（1） ①. 启动子 ②. 终止子 （2）EcoRI和PstI （3） ①. 能 ②. 不能 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 基因工程的关键步骤是构建基因表达载体，基因表达载体主要由启动子、目的基因、标记基因和终止子组成，因此人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外，还必须有启动子、终止子等。 【小问2详解】 据图可知，BamH Ⅰ会切割目的基因，Tth Ⅲ 1切割位点在质粒中的复制原点之外，而EcoRⅠ和PstⅠ这两种酶能切割质粒和目的基因，不破坏所有抗性基因和复制原点等，且能能得到不同的黏性末端，避免质粒和目的基因自连及反接，因此在构建基因表达载体时，选择EcoRⅠ和PstⅠ作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率。 【小问3详解】 分析题图可知，PstI破坏了氨苄青霉素抗性基因（Ampr），构建的重组质粒无氨苄青霉素抗性，但具有新霉素抗性基因，而甲培养基中含有新霉素，因此，含重组质粒的受体细胞能在甲培养基上生存；乙培养基中含有氨苄青霉素，能杀死含有目的基因的受体细胞，不能在乙培养基中生存。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 灌云县第一中学高二年级下学期期中考试生物学试卷 一、单项选择题：共20题，每题2分，共40分，每题只有一个选项最符合题意。 1. 葡萄酒的酿造技术历史悠久，唐代苏敬的《新修本草》云：凡作酒醴须曲，而蒲桃（即葡萄）、蜜等酒独不用曲。下列叙述错误的是（　　） A. 在榨汁前对葡萄的处理是先清洗葡萄再去除枝梗 B. 装置密闭发酵过程中，酒精度的变化是先增加后趋于稳定 C. 若葡萄酒变酸且产生菌膜，一般可从菌膜中分离得到醋酸菌 D. "蒲桃、蜜等酒独不用曲"说明葡萄酒的酿制不需要微生物 2. 下列对灭菌和消毒的理解不正确的是（ ） A. 灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B. 消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物 C. 消毒和灭菌都是采用物理方法杀灭微生物 D. 常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌等 3. 如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法叙述正确的是（　　） A. 在1、2、3、4、5区域中划线前都要对接种环灼烧灭菌，灼烧灭菌后立即进行划线 B. 1和5划线可以如图所示，也可以相连在一起 C. 在划线操作结束时，要对接种环灼烧灭菌 D. 在5区域中才可以得到菌落 4. 丙草胺是一种应用广泛的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某生物兴趣小组从达活泉公园土壤中分离出能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其进行计数（如下图所示），以期为修复被丙草胺污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（ ） A. 将培养基PH调至酸性，有利于丙草胺降解菌的生长繁殖 B. 图中所用计数方法为稀释涂布平板法，用该方法计数结果往往比实际值偏小 C. 用以丙草胺为唯一氮源的液体培养基进行培养可提高丙草胺降解菌浓度 D. 通过计算得知每克土壤中的菌株数约为1．7×109个 5. 图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述正确的是（　　） A. 步骤①添加盐酸以去除细胞壁 B. 步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗 C. 台盼蓝检测后应选择蓝色的原生质体继续培养 D. 原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间 6. 红豆杉是濒危植物，其树皮产生的紫杉醇对抗癌有一定的效果。红豆杉植株组织培养和细胞培养的流程如图所示，②为愈伤组织，通过b过程可最终产生新的植株，通过c过程可产生大量细胞。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培养过程中所用的培养基，需添加抗生素、血清等成分 B. a、b过程的实质是基因的选择性表达，该过程会导致细胞中部分基因丢失 C. b过程的实质是基因的选择性表达，该过程和a过程的光照条件相同 D. 紫杉醇可从c过程中获得，其细胞增殖的方式是有丝分裂 7. 下图表示用草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗盐新品种的过程。下列叙述错误的是（　　） A. 过程①需要使用的酶是胃蛋白酶 B. 灭活病毒不能诱导过程②中A和B的融合 C. 过程②处理后得到的两两融合原生质体类型可能有3种 D. 经过过程④所得到的愈伤组织细胞中含有四个染色体组 8. 应用动物细胞培养技术进行人造肉生产逐渐走向商业化，其基本流程如图所示。相关叙述正确的是（　　） A. 甲选择幼龄组织的原因是动物细胞的全能性更易表达 B. 人造肉生产可添加支架材料以便于动物细胞贴壁生长 C. 过程丙应暴露于空气中培养以减少培养基的pH波动 D. 过程乙添加的动物血清需先用高压蒸汽灭菌锅灭菌 9. 科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，基本流程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 注射的特定抗原是肺癌细胞特有的大分子 B. ①利用选择培养基筛选的方式获得了杂交瘤细胞 C. 步骤③细胞培养时应提供95%O2和5%CO2的气体环境 D. 抗体—肺癌药物偶联物中的a能特异性结合并杀死肿瘤细胞 10. 研究发现Oct4、Nanog和SMYD3基因能影响体细胞克隆猪早期胚胎发育。Oct4基因影响囊胚的形成，Nanog基因影响囊胚的发育，过表达SMYD3基因能促进Nanog和Oct4基因表达，并显著提高克隆猪的囊胚发育率。相关叙述正确的是（　　） A. 获得体细胞克隆猪主要涉及体外受精、动物细胞培养、胚胎移植等技术 B. 选用去核的卵母细胞作为核受体是因为其不含激活细胞核全能性的物质 C. Nanog和Oct4基因的表达受SMYD3基因调控，二者在囊胚期发挥作用都是相同的 D. 可采用Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程 11. 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得多能干细胞，继而利用多能干细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下图所示，下列叙述正确的是（　　） A. 对克隆鼠X进行性别鉴定时应从滋养层处取样 B. 将克隆鼠的肝脏移植给灰鼠不会发生免疫排斥反应 C. 重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子宫内继续发育 D. 胚胎早期发育时，桑葚（椹）胚内部开始出现含液体的腔 12. 下列关于 DNA 的粗提取和鉴定实验的叙述，正确的是（　　） A. 用猪血作为材料，原因是猪血红细胞有细胞核 B. 用二苯胺试剂进行鉴定，原因是 DNA 溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色 C. 用酒精进行提纯，原因是DNA 溶于酒精,蛋白质不溶于酒精 D. 用不同浓度的 NaCl 溶液进行DNA 粗提取，原因是 DNA 在其中溶解度不同 13. 下列有关PCR的叙述，错误的是（ ） A. PCR扩增过程中双链DNA的解开不需要解旋酶 B. 用于PCR扩增的DNA聚合酶是一种耐高温的酶 C. 延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和4种核糖核苷酸 D. 复性过程中引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则 14. 四种限制酶的切割位点如图所示，下列叙述错误的是（ ） A. 上图中EcoRⅠ、PstⅠ两种酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA连接酶连接 B. 图中SmaⅠ、EcoR V两种酶切割后的DNA片段，可以用T4DNA连接酶连接 C. DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段连接的化学键是磷酸二酯键 D. 限制酶能识别特定的核苷酸序列，具有专一性，不同的限制酶切割不能产生相同的黏性末端 15. 下列有关基因工程所需酶及载体的描述错误的是（　　） A. 限制酶切割1个位点，破坏两个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团 B. E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都可以高效连接平末端 C. DNA聚合酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 D. 使用质粒作为载体可以避免目的基因在受体细胞内被分解 16. PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列，dNTP（四种脱氧核苷三磷酸）是DNA合成的原料。下列相关说法错误的是（　　） A. 图示环节所需的温度比上一个环节的低 B. dNTP作为扩增的原料会依次连接到5'端 C. TaqDNA聚合酶催化磷酸二酯键的形成 D. 经过1个循环后，获得的子代DNA的两条单链长短不同 17. 模型构建是生命科学教学、科研的一种重要方法。下图是生物概念模型，相关分析错误的是（ ） A. 若图示为基因工程，则C为重组质粒，D为受体细胞 B. 若图示为试管婴儿技术，C～D为早期胚胎培养和胚胎移植 C. 若图示为植物体细胞杂交部分流程，用灭活的病毒融合A、B得到C D. 若图示为核移植技术，则 B 可能为去核卵母细胞 18. 古徽州有许多美食深受人们喜爱，如徽州毛豆腐、灵山酒酿、臭鳜鱼、徽州臭豆腐等。制作臭豆腐时需要将豆腐浸入含有乳酸菌和芽孢杆菌等微生物的卤汁中发酵，相关叙述正确的是（ ） A. 卤汁中的乳酸菌和芽孢杆菌相互独立，没有种间关系 B. 制作臭豆腐时，豆腐相当于微生物生长的培养基 C. 徽州毛豆腐中的毛霉、曲霉产生的蛋白酶能促进大豆蛋白质、脂肪分解，丰富营养成分 D. 乳酸菌发酵产生了乳酸和二氧化碳，需定期排气 19. 逆转录PCR(RT-PCR）是以mRNA为模板逆转录形成DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增的技术。如图为利用RT-PCR扩增人乳铁蛋白基因的部分过程，相关叙述错误的是（ ） A. 由于基因的选择性表达，人乳铁蛋白基因mRNA应从人乳腺细胞中提取获得 B. 过程①②所需的酶分别是逆转录酶、耐高温的DNA聚合酶，原料均为脱氧核苷酸 C. 过程③获得的人乳铁蛋白基因不具有起始密码子、终止密码子的对应序列 D. RT-PCR中，引物P1、P2的长度会影响复性温度以及扩增产物的数量和纯度 20. 蛋白质工程是当前的新兴分子生物学技术，通过改造或合成基因，来改造现有的蛋白质或制造新的蛋白质，以满足人类生产、生活的需求。下列关于蛋白质工程的说法错误的是（ ） A. 蛋白质工程技术会改变组成蛋白质的氨基酸的种类、数目和排列顺序 B. 蛋白质工程获得的蛋白质都是自然界已存在的蛋白质（天然蛋白质） C. 蛋白质工程不直接改造蛋白质的原因是改造基因易于操作且改造后可遗传 D. 蛋白质工程生产出来的蛋白质的活性与天然蛋白质相似，而且稳定性更高 二、多项选择题：共5题，每题3分，共15分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 21. 图示普通韭菜（2n=16）的花药结构。为了快速获得普通韭菜的纯系，科研人员利用其花药进行单倍体育种。下列相关叙述正确的有（ ） A. 花粉细胞和花药壁细胞均具有全能性 B. 培养基中生长素与细胞分裂素的比例影响愈伤组织再分化 C. 镜检根尖分生区细胞的染色体，可鉴定出单倍体幼苗 D. 秋水仙素处理单倍体幼苗，所得植株的细胞中染色体数都是16 22. 从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，结果如图所示。下列相关叙述错误的有（ ） A. 选取发育状态一致的卵母细胞进行培养 B. 体外培养卵母细胞时通常加入湿热灭菌后的血清 C. 对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞 D. 体外培养时高温提高了卵母细胞发育的成熟率 23. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能 B. ②代表体外胚胎培养，该过程中细胞既进行有丝分裂也存在细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. ⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 24. OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（能引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法将其导入棉花细胞，在棉花叶绿体内构建了一条新的代谢途径，提高了棉花的产量。下列相关叙述错误的有（ ） A. 使用Ca2+处理农杆菌，有利于多基因表达载体的导入 B. 应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的棉花细胞 C. OsGLO1、EcCAT基因转录时以DNA的同一条单链为模板 D. 四个基因都在棉花叶绿体内进行转录、翻译 25. 如图表示花粉管通道法介导植物基因转移。下列说法正确的是（　　） A. 花粉管通道法可适用获得转基因抗虫棉花 B. 相比于农杆菌转化法，花粉管通道法避免了植物组织培养这一操作 C. 必须在雌蕊成熟时才能进行图中所示的处理方法 D. 最终获得的种子一定含有目的基因 三、非选择题（共45分，如无特殊说明每空2分） 26. 不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生代谢产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如图所示。请回答下列问题： 注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 （1）培养基中应添加一定浓度的蔗糖，目的是提供能源和__________。A处理为__________。 （2）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此分析应选择__________（填“发荧光”或“不发荧光”）的原生质体用于融合。 （3）获得的原生质体常使用化学试剂__________诱导融合过程④再分化阶段，芽的分化要求培养基中生长素与细胞分裂素比例__________（填“较高”、“较低”或“适中”）。 （4）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如表所示。后代植株中__________类型一定不是所需植株。 后代植株类型 染色体数目、形态 DNA分子标记鉴定 甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段 乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉DNA片段 丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段 27. 牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原体，它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白，在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体，进行相关研究。请回答下列问题： （1）以VspX蛋白为抗原制备单克隆抗体，需用纯化的VspX蛋白对小鼠进行多次免疫，其目的是刺激机体产生更多的分泌__________的B淋巴细胞。 （2）杂交瘤细胞__________（填“能”或“不能”）产生专一抗体，所产生的抗体__________（填“一定”或“不一定”）能抗VspX蛋白。 （3）若将筛选出的杂交瘤细胞培养、稀释后接种到96孔培养板中，每一个孔中尽量只接种__________个杂交瘤细胞以实现克隆化培养。 （4）将抗VspX抗体与不同抗原进行杂交，免疫印迹分析如图所示，实验结果显示抗VspX单克隆抗体不能与__________结合，表明抗VspX抗体具有__________。 28. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图回答下列问题： （1）应用1中，细胞B获取需对供体2注射__________以使获得更多的卵母细胞，使用核移植技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛，该技术的原理是__________。 （2）应用2中，将早期胚胎注入受体牛子宫内的技术叫胚胎移植，为使受体牛生理状况更适合完成该技术操作，要对受体牛进行__________处理，以提高成功率。 （3）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：通过胚胎分割技术获得二分胚①和②，操作时需将内细胞团均等分割。在此之前还可切取__________的细胞进行性别鉴定。这种使良种生物大量繁殖的技术属于__________（填“有性”或“无性”）生殖。 29. 人的血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值，研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。下图为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，其中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。请回答下列问题： （1）人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外，还必须有__________、__________等。 （2）据左图分析，在构建基因表达载体时，选择限制酶__________切割质粒和目的基因，可提高目的基因和载体的正确连接率。 （3）为了排除普通受体细胞（未导入质粒）、空质粒受体细胞（导入pBR322质粒而非重组质粒）的干扰，目的基因导入后进行了进一步筛选：制备甲、乙两种培养基，甲培养基中有新霉素，乙培养基中有氨苄青霉素，含重组质粒的受体细胞在甲培养基上_________（填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上__________（填“能”或“不能”）生存。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $