内容正文:
假期必刷3 动物细胞工程
1.动物细胞培养的条件为:营养、无菌、无毒的
环境,温度、pH和渗透压,气体环境.
2.动物细胞融合突破了有性杂交的局限,使远
缘杂交成为可能.
3.传统抗体的特点是产量低、纯度低、特异性
差,单克隆抗体的特点是特异性强,灵敏度
高,可大量制备.
4.胚胎干细胞能够分化成为成年动物体内的
任何一种类型的细胞,成体干细胞具有组织
特异性,只能分化成特定的细胞或组织.
5.哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植
和体细胞核移植.后者难度高于前者.
6.试管动物:试管动物技术是指通过人工操作使
卵子在体外受精,经培养发育为早期胚胎后,
再经移植产生个体.
7.胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切
割成2等份,4等份,8等份,经移植获得同
卵双胎或多胎的技术.
1.通过细胞培养构建的人造皮肤在治疗大面
积烧伤时具有较好的应用前景,下列叙述正
确的是 ( )
A.由于对细胞所需的营养物质未全部研究
清楚,培养时通常加入血清
B.细胞培养获得人造皮肤的过程中,可加
入纤维素酶处理贴壁的细胞
C.培养过程中其培养液所需的适宜pH 为
68-70
D.选择非患者细胞进行培养获得人造皮
肤,可以降低免疫排斥的发生
2.下列有关动物细胞核移植和克隆动物的叙
述,错误的是 ( )
A.胚胎细胞核移植的难度明显低于体细胞
核移植
B.用于核移植的卵母细胞需要在体外培养
到 MⅡ期
C.核移植后形成的重构胚可以直接移入受
体动物体内
D.克隆动物和体细胞供体动物的性状基本
相同
3.单克隆抗体在生物工程和临床医学上有着极
为重要的地位和巨大的应用.下列有关单克
隆抗体技术及其应用的叙述,正确的是 ( )
A.新冠病毒检测单克隆抗体诊断试剂盒需
要根据新冠病毒内部的核酸研制
B.将选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞直
接用于生产单克隆抗体
C.利用抗原-抗体杂交技术可筛选出能产
生单一抗体的杂交瘤细胞
D.“生物导弹”中的单克隆抗体能特异性的
结合抗原并杀死癌细胞
4.下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的
叙述,正确的是 ( )
A.绝大多数精卵细胞的识别具有物种特
异性
B.精子头部进入卵细胞后能阻止后续精子
入卵
C.内细胞团经酶处理形成的单个细胞可发
育成个体
D.原肠胚可发育分化形成内外两个胚层
5.2023年,我国科学家培育出世界上首只高
比例胚胎干细胞“嵌合食蟹猴”.研究人员
将遗传信息改造后的胚胎干细胞(ES细胞)
注射到发育中的另一受体桑葚胚中 ,可发
育形成拥有不同基因型细胞的嵌合体.其
技术路线如下图所示.下列叙述错误的是
( )
A.诱导多能干细胞可作为供体ES的“替代
品”培育嵌合体
B.嵌合猴中来自ES细胞的遗传信息不一
定能传给后代
C.培育嵌合猴涉及到胚胎培养和胚胎移植
等技术
D.桑葚胚经过进一步孵化的过程后形成嵌
合胚泡
5
6.动物体细胞融合后染色体核型不稳定,来自
某一方的染色体往往随机丢失一至多条.
这种现象常应用于基因的定位.在甲型流
感单克隆抗体的制备过程中,杂交瘤细胞在
克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色
体往往出现随机丢失现象.下列叙述正确
的是 ( )
A.注射甲型流感疫苗后,应立即从相关动
物的脾脏中获得B淋巴细胞
B.杂交瘤细胞在培养过程中出现接触抑制
现象时可使用胰蛋白酶处理
C.若杂交瘤细胞丢失某染色体后不能分泌
单克隆抗体,则该基因位于该染色体上
D.利用抗体检测筛选的杂交瘤细胞克隆化
培养将具有持续产生甲型流感抗体的
能力
7.(2024黑吉辽
卷,14)从 小 鼠
胚 胎 中 分 离 获
取 胚 胎 成 纤 维
细 胞 进 行 贴 壁
培养,在传代后
的 不 同 时 间 点
检测细胞数目,
结果如图.下列叙述正确的是 ( )
A.传代培养时,培养皿需密封防止污染
B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理
C.直接用离心法收集细胞进行传代培养
D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过
大有关
8.(不定项)如图表示抗人体胃癌单克隆抗体
的制备过程,下列有关叙述错误的是( )
甲
注射
→小鼠
B淋
巴细胞
骨髄
瘤细胞
融合
→乙
选择培养
→丙 丁→
分泌
→
抗胃癌
单克隆
抗体
A.将单个B淋巴细胞大量增殖即可产生大
量单一抗体
B.丙细胞既能无限增殖又能产生所需的专
一抗体
C.要获得产生所需抗体的淋巴细胞,必须
给小鼠先注射特定的抗原
D.图中的乙包括未融合的亲本细胞,具有
同种核的融合细胞和杂种细胞
9.科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导
性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出
与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:
(1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的
初次培养称为 ,培养的细胞在贴
壁生长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现
象称为 .
(2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠
输卵管内获得,该过程称为冲卵;也可从灰
鼠体内取出卵子,通过 (技术
名称)后进行早期胚胎培养获得.
(3)图中重组囊胚通过 技术移入
白鼠子宫内继续发育,若想进一步提高胚胎
的利用率,可采用 技术.小鼠
胚胎干细胞(ES)可由囊胚的 分
离培养获得.
(4)若一次给受体母牛移入体外受精的多个
胚胎,产生的多个后代基因型相同吗?
.若想对胚胎做性别鉴定,可以
取 进 行 DNA
分析.
(5)哺乳动物受精过程能阻止多个精子入卵
受精的有 .
A.顶体反应
B.精子穿越卵子透明带触及卵黄膜,导致
透明带反应
C.精子触发卵细胞膜表面微绒毛的抱合反应
D.精子入卵后,触发卵细胞膜反应
动植物检疫专业
动植物检疫专业培养及具备动植物检验
检疫方面的基本理论知识和技能,能在国家各
级检验检疫部门、动植物产品卫生安全与监督
机构、农畜产品生产销售等企业从事动植物病
虫害检验检疫及防治、农畜产品卫生安全检
测、动植物保护等方面的技术、管理与推广的
高级技术人才.
6
7.BD [植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,故用果胶酶
和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体,A 错误;
用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞,得到原生质
体,运用物理方法或化学方法诱导融合,形成杂种细胞,再利
用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株,故融合的
原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织,B正确;体
细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的遗传物质,
只有1个细胞核,C错误;通过愈伤组织再生出多个完整植
株的过程属于植物的组织培养,从繁殖看属于无性繁殖,D
正确.]
8.BCD [植物的次生代谢产物一般不是植物基本生命活动所
必需的,其在植物细胞中含量很少,A正确;愈伤组织是由高
度分化的细胞转化而来的一团薄壁细胞组成,其分化程度很
低,B错误;诱导外植体脱分化获得愈伤组织不需要PEG(聚
乙二醇),需要植物激素,C错误;愈伤组织的诱导受植物激
素配比 的 影 响,也 受 营 养 物 质 和 光 照 等 因 素 的 影 响,D
错误.]
9.解析:(1)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,根据酶的
专一性原理,采用酶解法去除植物细胞壁,常用的酶是纤维
素酶和果胶酶.
(2)人工诱导原生质体融合的物理方法有离心、振动、电激
等;化学方法是用聚乙二醇(PEG)等试剂作为诱导剂诱导
融合.
(3)植物细胞壁的形成与高尔基体有关.
(4)④是由杂种细胞形成愈伤组织的过程,表示脱分化,⑤过
程是由愈伤组织形成杂种植株的过程,是再分化的过程;在
该过程中,细胞分裂的主要方式是有丝分裂,保证了遗传信
息在亲代和子代细胞中的一致性.
(5)植物体细胞杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍,使远缘
杂交成为可能.
答案:(1)纤维素酶和果胶酶
(2)离心、振动、电刺激 聚乙二醇(PEG)
(3)高尔基体
(4)脱分化 再分化 有丝分裂
(5)克服远缘杂交不亲和的障碍
假期必刷3
1.A [在进行动物细胞培养时,培养液中通常需加入血清、血
浆等一些天然成分,主要目的是为细胞提供促生长因子,以
补充细胞生长和增殖过程中所需的营养物质,A 正确;细胞
培养获得人造皮肤的过程中,可加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶
处理贴壁的细胞,B错误;培养过程中其培养液所需的适宜
pH 通常为72-74,C错误;选择患者自身的细胞进行培
养获得人造皮肤,可以避免免疫排斥的发生,选择非患者细
胞 进 行 培 养 获 得 人 造 皮 肤,一 般 会 发 生 免 疫 排 斥 反 应,
D错误.]
2.C [体细胞分化程度高,表现全能性困难,而胚胎细胞分化
程度低,表现全能性容易,因此胚胎细胞核移植的难度明显
低于体细胞核移植,A正确;获得的卵母细胞去核后,需要培
养到减数分裂Ⅱ中期才能进行核移植,B正确;重构胚,使其
完成细胞分裂和发育进程才能移入受体动物体内,C错误;
个体性状表现主要由细胞核控制,因此克隆动物的性状表现
与供体动物(供核动物)基本相同,D正确.]
3.C [单克隆抗体诊断试剂盒检测病毒的原理是:抗原和抗
体的结合具有特异性,所以新冠病毒检测单克隆抗体诊断试
剂盒需要根据新冠病毒表面的抗原研制,A 错误;将选择培
养基筛选得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测,不
能直接用于生成单克隆抗体,B错误;利用抗原—抗体杂交
技术可筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞,C正确;“生物
导弹”的原理是借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向
带到癌细胞,在原位杀死癌细胞,单克隆抗体只起定位作用
不能杀死癌细胞,D错误.]
4.A [细胞膜表面均有糖蛋白,糖蛋白具有细胞识别功能,绝
大多数精卵细胞的识别具有物种特异性,精子、卵细胞的相
互识别保证了同种精卵结合,A正确;精子接触卵细胞膜时,
会发生透明带反应,精子入卵后,会发生卵细胞膜反应,卵细
胞能阻止其它精子进入,以防多个精子与卵细胞受精,B错
误;内细胞团将来发育成胎儿的各种组织,将内细胞团经酶
处理形成的单个细胞不可以发育成个体,C错误;原肠胚发
育分化形成内外中三个胚层,D错误.]
5.D [诱导多能干细胞(iPS)与 ES一样,具有发育的全能性,
故理论上可替代 ES培育嵌合体,A 正确;嵌合幼猴中来源
于 ES细胞的遗传信息是否遗传给后代,取决于基因的表达
状况和存在位置,基因在不同的细胞中表达状况不同,若改
造后的 ES细胞将来发育成体细胞,则不会遗传给后代,若
改造后的 ES细胞将来发育成生殖细胞,则可遗传给后代,B
正确;此过程涉及早期胚胎培养和胚胎移植等技术,C正确;
桑葚胚进一步发育形成囊胚,囊胚扩大导致滋养层破裂,胚
胎从其中伸展出来的过程叫孵化,图中嵌合胚泡形成前,桑
葚胚不会孵化,D错误.]
6.C [注射甲型流感疫苗后,一段时间后从相关动物的脾脏
中获得B淋巴细胞(实际上是浆细胞),因为 B淋巴细胞增
殖和分化为浆细胞需要一定的时间,A 错误;杂交瘤细胞具
有骨髓瘤细胞的特征,能无限增殖,培养过程中一般无接触
抑制现象,不需要用胰蛋白酶处理,B错误;分泌单克隆抗体
的基因位于染色体上,因此与亲代杂交瘤细胞相比较,若减
少某条染色体后分泌单克隆抗体的功能缺失,说明该抗体的
基因位于这条染色体上,C正确;杂交瘤细胞在克隆化培养
过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象,
若丢失的染色体含有产生甲型流感抗体的基因,则利用抗体
检测筛选的杂交瘤细胞不一定具有持续产生甲型流感抗体
的能力,D错误.]
7.D 传代培养小鼠的胚胎成纤维细胞,应该将细胞置于含有
95%空气和5%CO2 的混合气体的CO2 培养箱中进行培养,
A 错误;细胞通常在进入平台期之前的指数增长期进行传
代,这样可以提高细胞增长速率(该阶段细胞代谢活性及酶
活性高而稳定,生活力强)并避免延迟期,①太接近延迟期
(细胞数目少,还处于适应环境阶段,未充分活化,不宜选),
故选取②的细胞更合理,B错误;贴壁生长的细胞需经胰蛋
白酶等处理制成细胞悬液后才能进行传代培养,C错误;图
中细胞增长进入平台期后,细胞数目比较稳定,可能受到细
胞密度过大、营养物质有限等因素的制约,D正确.
8.AB [单个B淋巴细胞不能增殖,所以不能产生大量的单一
抗体,A错误;丙细胞是产生不同抗体的多种 B细胞和骨髓
瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞,能够无限增殖,但不一定产
生所需抗体,B错误;给小鼠先注射特定的抗原后,刺激小鼠
产生免疫反应,从而获得产生所需抗体的淋巴细胞,C正确;
B细胞和骨髓瘤细胞融合后,形成的细胞包括B细胞和B细
胞的融合、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合,B细胞和骨髓
瘤细胞的融合,故图中的乙包括未融合的亲本细胞,具有同
种核的融合细胞和杂种细胞,D正确.]
9.解析:(1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称
为原代培养;培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止
分裂,这种现象称为接触抑制.
(2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,
该过程称为冲卵,也可从灰鼠体内取出卵子,培养到一定时
期再通过体外受精(或核移植)后进行早期胚胎培养获得.
(3)图中体外获得的重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子
宫内继续发育;胚胎分割技术可以得到多个相同的胚胎,提
高胚胎的利用率;囊胚的内细胞团保留分裂和分化能力,小
鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的内细胞团分离培养获得.
(4)一次给受体母牛移入多个胚胎,由于这些胚胎来源不同,
它们的基因型可能相同,也可能不同,因此产生的多个后代
基因型不一定相同;在胚胎发育成桑葚胚后,桑葚胚进一步
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发育,开始出现分化,沿透明带内壁扩展和排列的一种个体
较小的细胞为滋养层细胞,通常取少量滋养层细胞诊断是否
患有遗传病或做性别鉴定,这样不会影响胚胎发育.
(5)受精时,首先发生顶体反应,即精子头部顶体释放顶体
酶,有利于精子穿过放射冠、透明带,故顶体反应不会阻止精
子入卵受精,A 错误;哺乳动物受精过程阻止多精子入卵受
精机制:精子通过顶体酶溶解出的两条通道与卵黄膜接触,
立即发生透明带反应以阻止其他精子通过透明带,这是防止
多个精子进入卵细胞的第一道屏障,B正确;精子进入卵黄
膜的时候,卵黄膜表面有大量的微绒毛,抱合精子,精子外膜
与卵黄膜融合,精子入卵,故精子触发卵黄膜表面微绒毛的
抱合反应不会阻止精子入卵受精,C错误;精子入卵后,卵细
胞随即发生卵黄膜封闭作用,是阻止多精入卵受精的第二道
屏障,D正确.
答案:(1)原代培养 接触抑制
(2)体外受精(或核移植)
(3)胚胎移植 胚胎分割 内细胞团
(4)不一定相同 囊胚的滋养层细胞
(5)BD
假期必刷4
1.C [作为运载体必须具备的条件之一是能够在宿主细胞中
稳定地保存 下 来 并 大 量 复 制,以 便 提 供 大 量 的 目 的 基 因,
A正确;作为运载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶
切点,以便于目的基因的插入,B正确;作为运载体必须具备
的条件之一是具有某些标记基因,以便于重组后进行重组
DNA分子的筛选,C错误;携带外源 DNA 片段的质粒进入
受体细胞后,停留在细胞中进行自我复制,或整合到染色体
DNA上,随着染色体 DNA进行同步复制,同时运载体对宿
主细胞无伤害,以使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保
存,D正确.]
2.A [在 DNA的粗提取与鉴定实验中,可将获得的研磨液用
纱布过滤后,在4℃的冰箱中放置几分钟,再取上清液,也可
以直接将研磨液用离心机进行离心后取上清液,A 正确;研
磨液在4℃冰箱中放置几分钟后,DNA在上清液中,应取上
清液倒入烧杯中,B错误;鉴定过程中用沸水浴加热,DNA
双螺旋结构会发生改变,C错误;加入二苯胺试剂后沸水浴
处理的时间要在5分钟以上,且要等到冷却后再观察结果,
这样才可以观察到较为明显的显色反应,仅设置一个对照组
可以排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰,D错误.]
3.A [导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细
胞,而是受精卵或早期胚胎细胞,A 错误;农杆菌中的 Ti质
粒上的 T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞
染色体的 DNA上,根据农杆菌的这一特点,将目的基因插
入 Ti质粒的 T-DNA 上,通过农杆菌的转化作用,就可以
把目的基因的 T-DNA 整合到植物细胞中染色体的 DNA
上,B正确;引物的延伸方向为3′端,扩增目的基因时,利用
耐高温的 DNA聚合酶从引物a、b的3′端进行子链合成,C
正确;启 动 子 是 位 于 DNA 上 RNA 聚 合 酶 的 结 合 部 位,
mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的,若某基因是
从人的细胞内提取 mRNA 经逆转录形成的,则该基因中不
含启动子序列,D正确.]
4.D [PCR技术所用TaqDNA聚合酶能耐高温,但其最适温
度不是95℃,A错误;每合成一条子链需要一个引物,PCR
扩增n次后有2n+1条 DNA 单链,其中有两条是母链,所以
经PCR扩增n次后需2n+1-2个引物,B错误;第1次扩增
的产物 DNA为长-中链,第二次扩增出现中-短链,在第3
轮循环产物中开始出现目标DNA片段(短-短链),C错误;
一个DNA片段n次扩增有2个长-中链和2n-2个中-短
链,一个 DNA 片段经 PCR 扩增 n次后含 目 标 DNA 片 段
2n-2-(2n-2)=2n-2n,D正确.]
5.A [SCID有多种突变类型体现了基因突变的随机性,A 错
误;编码腺苷脱氨酶(ADA)的基因的碱基替换,可能导致终
止密码子提前出现,则ADA 基因突变可能改变腺苷脱氨酶
的氨基酸数目,B 正 确;ADA 基 因 突 变 导 致 dATP 含 量 升
高,导致体液免疫和细胞免疫缺陷,可能是抑制了淋巴细胞
增殖,C正确;基因治疗的目的是使编码脱氨基腺苷酶的基
因表达,能合成 ADA,通过 基 因 治 疗 的 方 法 可 根 治 SCID,
D正确.]
6.C [酶 E会破坏两种标记基因,为避免切割后 DNA 片段的
自身环化,又保留质粒上的标记基因,切割时应选择的限制
酶组合是酶 F 和酶 G,A 正确;所选用的受体菌 不 能 含 有
AmpR 和TetR 基因,以便于对含有目的基因的受体菌的选
择,B正确;用含氨苄青霉素的培养基筛选出的有导入重组
质粒的受体菌和导入原质粒的受体菌,C错误;据图可知,同
时用三种限制酶处理图中质粒,因酶 E有两个作用位点,故
将质粒切割成了4个 DNA片段,电泳后可得到4个条带,D
正确.]
7.ABC [蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物
功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋
白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产
和生活的需求,故蛋白质工程可以定向改造蛋白质分子的结
构,A正确;蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成进行的,
故改造蛋白质是通过改造基因结构而实现的,B正确;改造
后的中华鲟具有新的性状,但不存在生殖隔离,其和现有中
华鲟仍是同一物种,C正确;蛋白质工程改造的是基因,可以
遗传给子代,因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白
质,D错误.]
8.B [预变性是 使 DNA 的 两 条 链 完 全 变 性 解 开,A 错 误;
后延伸过程中后延伸是为了让引 物 延 伸 完 全 并 让 单 链 产
物完全退火形 成 双 链 结 构,可 使 目 的 基 因 的 扩 增 更 加 充
分,B正确;延伸过程 需 引 物 参 与,C错 误;转 基 因 品 种 不
只需要检测是否含有目的基因,还要 检 测 是 否 表 达,还 有
安全性问题,D错误.]
9.解析:(1)E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接黏
性末端,另外 T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平
末端时 的 效 率 比 较 低.据 图 可 知,EcoRⅠ 和 PstⅠ 切 割
DNA后产生的是黏性末端,SmaⅠ和EcoRⅤ切割 DNA 后
产生的 是 平 末 端.因 此 图 中 EcoRⅠ、PstⅠ 酶 切 割 后 的
DNA片段可以用 E.coliDNA 连接酶连接,图中 EcoRⅠ、
PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ 酶 切 割 后 的 DNA 片 段 可 以 用
T4DNA连接酶连接.
(2)目的基因片段与质粒载体片段均是 DNA 片段,因此两
片段之间通过核苷酸形成磷酸二酯键连接.因此 DNA 连
接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键
是磷酸二酯键.
(3)质粒 DNA分子上有复制原点,可以保证质粒在受体细
胞中能自我复制、稳定存在;质粒 DNA 分子上有限制酶切
割位点,通过不同的限制酶对质粒进行切割,以便插入外源
DNA.标记基 因 的 作 用 是 为 了 用 于 重 组 DNA 的 筛 选 和
鉴定.
(4)表 达 载 体 含 有 启 动 子,启 动 子 位 于 目 的 基 因 首 端,是
RNA聚合酶识别、结合并启动转录的 DNA片段.
(5)将 目 的 基 因 导 入 植 物 细 胞 最 常 用 的 方 法 是 农 杆 菌 转
化法.
答案:(1)EcoRⅠ、PstⅠ EcoRⅠ、SmaⅠ、PstⅠ、EcoRⅤ
(2)磷酸二酯键
(3)自我复制 限制酶切割位点 用于重组 DNA 的筛选和
鉴定
(4)RNA聚合酶识别、结合并启动转录的 DNA片段
(5)农杆菌转化法
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