精品解析：吉林省长春市东北师范大学附属中学2024-2025学年高二下学期期中考试生物试题

2024～2025学年度下学期高二年级期中考试 生物学试题 注意事项： 1．答题前：考生需将自己的姓名、班级、考场/座位号填写在答题卡指定位置上，并粘贴条形码。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。 3．回答非选择题时，请使用0.5毫米黑色字迹签字笔将答案写在答题卡各题目的答题区域内，超出答题区域或在草稿纸、本试题卷上书写的答案无效。 4．保持卡面清洁，不要折叠、不要弄皱、弄破，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。 一、选择题：本题共40小题，每小题1分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是（ ） A. 无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖 B. 自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌 C. 葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的 D. 制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加 【答案】D 【解析】 【分析】果酒制备的菌种是酵母菌，条件：温度18-25℃，先通气后密闭。通气阶段，酵母菌有氧呼吸获得能量大量繁殖，密闭阶段发酵产生酒精。pH最好是弱酸性。 【详解】A、酵母菌进行有氧呼吸获得能量大量繁殖，无氧条件下，发酵产生酒精，故无氧条件下酵母菌能进行无氧呼吸存活但不能大量繁殖，A正确； B、自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是葡萄皮上的野生型酵母菌，B正确； C、葡萄皮中的色素进入发酵液使葡萄酒呈现颜色，C正确； D、制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量减少，D错误。 故选D。 2. 山东酱豆的制作要经过两次发酵。第一阶段以大豆为主要原料，利用毛霉、曲霉或细菌的作用，分解大豆蛋白质。第二阶段以蔬菜与发酵过的大豆为主，进行乳酸发酵。下列叙述正确的是（ ） A. 第一阶段在空气中发酵时保湿，有利于霉菌的菌丝生长 B. 第二阶段定期通入空气有利于乳酸菌活动 C. 毛霉、曲霉产生的蛋白酶能促进大豆蛋白质、脂肪分解，可以丰富营养成分 D. 乳酸发酵能促进蔬菜中纤维素水解，损失了营养 【答案】A 【解析】 【分析】毛霉，是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型，毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将大豆中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、第一阶段在空气中利用毛霉、曲霉或细菌的作用，发酵时保湿，有利于霉菌的菌丝生长，A正确； B、第二阶段定期密封有利于乳酸菌活动，B错误； C、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸，C错误； D、乳酸发酵能促进蔬菜中纤维素水解，有利于人们食用后消化吸收，没有损失营养，D错误。 故选A。 3. 谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，某研究小组通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是（ ） A. 提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量 B. 发酵初期控制pH为5.6，后调为7.0，有利于提高L-谷氨酰胺产量 C. 通过电子显微镜观察，可以判断发酵过程中是否发生球状细菌污染 D. 发酵结束后，采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥即可获得产品 【答案】C 【解析】 【分析】1、发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。发酵过程：菌种选育→菌种的扩大培养→培养基的配制→灭菌和接种→发酵条件的控制→分离和提纯。 2、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。 3、产品不同，分离提纯的方法一般不同。（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来。（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。 4、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。 5、发酵过程般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。 【详解】A、由图可知，提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酰胺合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量，但谷氨酸合成酶会使L-谷氨酰胺再转化为L-谷氨酸，反而降低L-谷氨酰胺产量，A错误； B、谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，谷氨酰胺合成酶最适pH为5.6，因此发酵初期控制pH为7.0，有利于增加谷氨酸棒状杆菌的数量，后调为5.6，有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性，进而提高L-谷氨酰胺产量，B错误； C、谷氨酸棒状杆菌呈杆状、而球状细菌为球状，可通过电子显微镜观察判断发酵过程中是否发生球状细菌污染，C正确； D、L-谷氨酰胺是细胞代谢产物，对细胞代谢产物可通过提取、分离和纯化措施来获得产品，D错误。 故选C。 4. 人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是（　　） A. 对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌 B. 使用无菌棉拭子从皮肤表面取样 C. 用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布 D. 观察菌落的形态和颜色等进行初步判断 【答案】C 【解析】 【分析】实验室常用的消毒和灭菌方法的比较： 1、消毒：煮沸消毒法（一般物品）、巴氏消毒法（一些不耐高温的液体，如牛奶）、化学药剂消毒法（如用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等）、紫外线消毒法（接种室、操作台）； 2、灭菌：灼烧灭菌（接种工具）、干热灭菌（玻璃器皿、金属用具）、高压蒸汽灭菌（培养基及容器）。 【详解】A、为避免杂菌污染干扰，需对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌，A正确； B、葡萄球菌需从人体皮肤的微生物中分离，为避免杂菌污染，故需要使用无菌棉拭子从皮肤表面取样，B正确； C、用取样后的棉拭子浸出液在固体培养基上涂布，C错误； D、根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别，D正确。 故选C。 5. 微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（　　） A. ①②⑤⑥ B. ③④⑥⑦ C. ①②⑦⑧ D. ①③④⑤ 【答案】D 【解析】 【分析】微生物平板划线和培养的过程中要保证始终没有杂菌的污染，接种环、培养基、试管等都需要进行灭菌，实验操作过程应该在酒精灯火焰旁进行。 【详解】由图可知，②中拔出棉塞后应握住棉塞上部；⑥中划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开，应只打开一条缝隙；⑦中划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连；⑧中平板应倒置培养。 ①③④⑤正确，故选D。 6. 丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如下图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（ ） A. 提供适宜的温度，将培养基的pH调至酸性，有利于降解菌的生长繁殖 B. 利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小 C. 配制以丙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可以提高降解菌的浓度 D. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个 【答案】A 【解析】 【分析】1、微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。 【详解】A、能有效降解丙草胺的菌株包括细菌、放线菌和真菌，不同微生物对培养基中的pH的要求不同，培养霉菌时需要将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需要将培养基的pH调至中性或微碱性，A错误； B、图示采用的计数方法是稀释涂布平板法，由于两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到一个菌落，因此用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小，B正确； C、乙草胺可提供碳源、氮源，配制以丙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可提高降解菌的浓度，C正确； D、由图可知共稀释了106倍，则5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109个，D正确。 故选A。 7. 青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法错误的是（ ） A. 发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖 B. 可用深层通气液体发酵技术提高产量 C. 选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中 D. 青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌 【答案】D 【解析】 【分析】培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等四类营养物质。配制培养基时除了满足基本的营养条件外，还需满足微生物生长对特殊营养物质、pH、O2的要求。 【详解】A、青霉菌处于葡萄糖浓度不足的环境中会通过分泌青霉素杀死细菌，乳糖是二糖，可被水解为半乳糖和葡萄糖，是青霉菌生长的最佳碳源，可以被青霉菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条件，A正确； B、青霉菌的代谢类型为异养需氧型，可用深层通气液体发酵技术提高产量，B正确； C、选育出的高产青霉素菌株经扩大培养纯化后，才可接种到发酵罐中进行工业化生产，C正确； D、青霉素只能抑制细菌的生长，不能抑制其他真菌的生长，发酵罐仍需严格灭菌，D错误。 故选D。 8. 含硫蛋白在微生物的作用下可产生H2S导致生活污水发臭。H2S可与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌能否产生H2S及两种菌的运动能力，用穿刺接种法，分别将两种菌接种在培养基上培养（如图）。下列叙述错误的是（ ） 注：两种菌繁殖速度相同。 A. 实验所用培养基应该添加含硫蛋白质和硫酸亚铁铵 B. 穿刺接种前后接种针都需要通过酒精灯火焰进行灼烧灭菌 C. 培养基可以水蒸气为介质，在压力为100kPa、温度为121℃，维持20min灭菌 D. 乙的分布面积大，说明其产H2S的能力远高于甲 【答案】D 【解析】 【分析】题意分析，本实验的目的是探究发臭水体中甲、乙菌能否产生H2S及两种菌的运动能力，因而可以根据是否有黑色区域出现判断能否产生H2S，根据黑色区域大小反应甲乙两种菌的运动能力。 【详解】A、题意显示，含硫蛋白在微生物的作用下可产生H2S导致生活污水发臭。H2S可与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀，据此推测，实验所用培养基应该添加含硫蛋白质和硫酸亚铁铵，A正确； B、穿刺接种前后接种针都需要通过酒精灯火焰进行灼烧灭菌，接种前灭菌是为了防止杂菌污染，接种后灭菌是为了避免污染环境和操作者，B正确； C、培养基可以水蒸气为介质，在压力为100kPa、温度为121℃，维持15~30min灭菌，C正确； D、图中黑色区域的面积大小反映两种菌运动能力的大小，而不能表示二者产生硫化氢的能力大小，根据结果可知，二者均能产生H2S，且乙的运动能力强，D错误。 故选D。 9. 兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（ ） A. ①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B. ②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C. 3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D. 百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、在脱分化过程中，1号培养基中的愈伤组织是排列不规则的薄壁组织团块，A错误； B、愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变，但基因重组发生在减数分裂过程中，而愈伤组织细胞的分化过程是有丝分裂，所以不会发生基因重组，B错误。 C、3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值应该小于1，C错误； D、百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以作为该研究中的外植体，D正确； 故选D。 10. 迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时，先诱导外植体形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量。下列叙述正确的是（ ） A. 迷迭香顶端茎段的机械组织最适合用作外植体 B. 诱导愈伤组织时需加入NAA和脱落酸 C. 悬浮培养时需将输导组织打散成单个细胞或较小的细胞团 D. 茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合成速率 【答案】D 【解析】 【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体，该部位生长旺盛，分裂能力较强，脱分化容易，A错误； B、诱导愈伤组织时需加入NAA和细胞分裂素，B错误； C、悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团，获得更多的营养物质和氧气，使得其可以进一步分裂，C错误； D、加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量，推测茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物（不是植物生长所必须的）的合成速率，D正确。 故选D。 11. 研究者拟通过有性杂交的方法将簇毛麦（2n=14）的优良性状导入普通小麦（2n=42）中。用簇毛麦花粉给数以千计的小麦小花授粉，10天后只发现两个杂种幼胚，将其离体培养，产生愈伤组织，进而获得含28条染色体的大量杂种植株。下列叙述错误的是（ ） A. 簇毛麦与小麦之间存在生殖隔离 B. 培养过程中需用不同类型的MS培养基 C. 杂种植株减数分裂时染色体能正常联会 D. 杂种植株的染色体加倍后能产生可育植株 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养： ①原理：植物细胞具有全能性。 ②过程：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）经过脱分化形成愈伤组织，又经过再分化形成胚状体，最终形成植株（新植体）。 【详解】A、用簇毛麦花粉给数以千计的小麦小花授粉，10天后只发现两个杂种幼胚，说明二者之间存在生殖隔离，A正确； B、植物组织培养中，不同阶段（如诱导愈伤组织、分化、生根等）需要调整培养基的激素比例（如生长素和细胞分裂素），因此可能需要不同类型的MS培养基，B正确； C、杂种植株细胞内由于没有同源染色体，故减数分裂时染色体无法正常联会，C错误； D、染色体加倍（如用秋水仙素处理）可使杂种成为异源四倍体（2n=56），每条染色体都有同源配对的对象，从而恢复育性，D正确。 故选C。 12. 东云系多肉植物的繁殖率和叶插率都较低。研究人员以东云系多肉植物品种HBG和阿姆斯特壮为实验材料进行植物组织培养，探究外植体选取部位对东云系多肉植物污染率和成活率的影响，实验结果如表。下列叙述正确的是（ ） 外植体 污染率/% 成活率/% HBG 阿姆斯特壮 HBG 阿姆斯特壮 叶片 56.67 70.00 26.67 16.67 嫩芽 23.33 20.00 46.46 53.33 花芽 16.67 13.33 56.67 60.00 A. 实验所用叶片、嫩芽和花芽经过灭菌后才能进行培养 B. HBG叶片经诱导后形成愈伤组织时需要用液体培养基 C. 东云系多肉植物可能因为叶片污染率高导致叶插成活率低 D. 由表可知东云系多肉植物进行植物组织培养时优选部位为叶片 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、实验所用叶片、嫩芽和花芽等外植体需要经过消毒后才能进行培养，A错误； B、诱导愈伤组织通常使用固体培养基（含琼脂），而非液体培养基，B错误； C、从表中数据显示，叶片的污染率最高（HBG 56.67%，阿姆斯特壮 70.00%），同时其成活率最低（HBG 26.67%，阿姆斯特壮 16.67%）。说明高污染率可能是导致叶插成活率低的原因之一，这可能与叶片多肉有关，C正确； D、表中数据显示，花芽的污染率更低且成活率更高，而叶片的污染率高、成活率低。因此“优选部位为花芽，D错误。 故选C。 13. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B. 过程②中常采用PEG诱导原生质体融合 C. 过程④和⑤的培养基中均只要添加IBA和NAA D. 可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 【答案】C 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。 题图分析：图示为甲、乙两种植物细胞融合并培育新植株的过程，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②③表示人工诱导原生质体融合以及再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化形成愈伤组织；⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。 【详解】A、酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，A正确； B、过程②为原生质体的融合，常用PEG诱导原生质体融合，还可用高Ca2+-高pH诱导促融，B正确； C、过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，而IBA和NAA均属于生长素，C错误； D、植物丙是植物甲和植物乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。 故选C。 14. 下图为利用体细胞诱变技术获得抗除草剂白三叶草的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 该育种过程所依据的原理有基因突变和植物细胞的全能性 B. 为了获取愈伤组织细胞，培养白三叶草组织细胞的培养基为固体培养基 C. 白三叶草愈伤组织和胚状体的细胞中DNA和RNA种类相同 D. 过程③通常采用的筛选方法是向白三叶草幼苗喷洒适宜浓度的除草剂 【答案】C 【解析】 【分析】图示为利用体细胞诱变获得抗除草剂白三叶草新品种的过程，其中①表示脱分化过程，②表示再分化过程，③表示筛选过程。 【详解】A、γ射线照射愈伤组织，能诱发基因突变；白三叶草组织细胞的培养通过①脱分化和②再分化形成胚胚状体，进而形成白三叶草幼苗的过程运用了植物细胞的全能性，A正确； B、通过脱分化形成愈伤组织细胞的培养基为固体培养基，B正确； C、白三叶草愈伤组织和胚状体的细胞中DNA种类相同，但由于细胞分化，基因选择性表达，RNA种类不同，C错误； D、由于基因突变具有多害少利性和不定向性，需要通过检测与筛选培育作物新品种，所以过程③通常采用的筛选方法是向白三叶草幼苗喷洒除草剂，观察其能否生长，D正确。 故选C。 15. 某小组以拟南芥原生质体为材料，研究了生长素（IAA）、组蛋白乙酰化及R基因对原生质体形成愈伤组织的影响。野生型（WT）和R基因突变型（rr）的原生质体分别经下表不同条件培养相同时间后，检测培养材料中R基因表达量，并统计愈伤组织形成率，结果如图所示。据此推断，下列叙述正确的是（ ） 编号 原生质体 培养条件 ① WT 培养基 ② WT 培养基+合适浓度的IAA ③ rr 培养基 ④ rr 培养基+合适浓度的IAA ⑤ WT 培养基+组蛋白乙酰化抑制剂 A. 组蛋白乙酰化有利于WT原生质体形成愈伤组织 B. R基因通过促进IAA的合成提高愈伤组织形成率 C. 组蛋白乙酰化通过改变DNA碱基序列影响R基因表达量 D. 若用IAA合成抑制剂处理WT原生质体，愈伤组织形成率将升高 【答案】A 【解析】 【分析】离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株。 【详解】A、①和③进行对比可以看出R基因表达量高，愈伤组织形成率高，①和⑤对比，使用组蛋白乙酰化抑制剂之后，R基因的表达量下降，愈伤组织的形成率也会降低，因此推测组蛋白乙酰化有利于WT原生质体形成愈伤组织，A正确； B、图中数据无法得出R基因是通过促进IAA的合成提高愈伤组织形成率，B错误； C、图中的数据没有关于DNA碱基序列的测定，因此无法推测组蛋白乙酰化通过改变DNA碱基序列影响R基因表达量，C错误； D、①和②对比可以看出IAA能够促进愈伤组织的形成，因此若用IAA合成抑制剂处理WT原生质体，愈伤组织形成率将降低，D错误。 故选A。 16. 下列有关体细胞克隆猕猴的叙述，错误的是（ ） A. 该技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性 B. 研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体 C. 培育出的两只猕猴的基因组成几乎完全相同 D. 克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能 【答案】A 【解析】 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。 【详解】A、体细胞克隆猕猴技术证明高度分化的动物体细胞核具有全能性，A错误； B、克隆需将体细胞核移植到去核的成熟卵母细胞中，利用卵母细胞质中的激活核发育潜能，B正确； C、克隆个体的核DNA来自同一供体细胞，故基因组成几乎相同（线粒体DNA可能有差异），C正确； D、克隆技术可复制特定遗传背景的灵长类动物，为人类疾病（如遗传病）研究提供理想模型动物，D正确。 故选A。 17. 动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是（ ） A. 配制细胞培养基时，加氯霉素后，湿热灭菌处理 B. 在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素 C. 考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，直接涂布在平板上培养后计数 D. 采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染 【答案】B 【解析】 【分析】 动物细胞培养就是从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 【详解】A.、配制细胞培养基时，湿热灭菌处理后通过过滤灭菌加氯霉素和血清，A错误； B、在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素，保证动物细胞正常生长并抑制细菌生长，B正确； C、考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，稀释后涂布在平板上培养后计数，C错误； D、 采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作不能清除“黑胶虫”污染，D错误。 故选B。 18. 对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列叙述错误的是（ ） A. 在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B. 动物细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用维持培养液的pH C. 为了防止动物细胞培养过程中受污染，可向培养液中加入适量的干扰素 D. 在合成培养基中，通常需加入血清等一些天然成分 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养的条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物； （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质； （3）温度和pH； （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是维持培养液的pH）。 【详解】A、在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，以分解组织细胞间的蛋白质，得到单个细胞，A正确； B、细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH，B正确； C、为防止动物细胞培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，C错误； D、使用合成培养基培养动物细胞时，通常要加入血清或血浆等一些天然的成分，以利于动物细胞生长，D正确。 故选C。 19. 研究人员将猪胚胎细胞（a）中的细胞核取出，移植入一雌猪的去核卵母细胞（b）中，得到重构胚（c），经培养获得胚胎并移植到另一雌猪（d）体内进一步发育，获得克隆猪兰兰（e）。下列叙述正确的是（ ） A. 兰兰的细胞核内的全部基因都来自a，细胞质的全部基因来自a和b B. c经一系列增殖和分化形成e的过程中，细胞核起控制作用 C. d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件 D. e的形成过程中没经过受精作用，其体细胞中无同源染色体 【答案】B 【解析】 【分析】根据题意，克隆猴的获得过程不经过两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，其中猪的胚胎细胞（a）提供细胞核，去核的猪的卵母细胞（b）提供细胞质；雌猪（d）作为受体细胞提供子宫孕育克隆猪兰兰（e）。 【详解】A、重构胚（c）的细胞核来自猪胚胎细胞（a），细胞核中含有大量基因；而去核的猪的卵母细胞（b）虽然去除了细胞核，但细胞质中也含有少量的基因（如线粒体DNA上的基因），这些基因也会进入重构胚（c）中。所以重构胚（c）的细胞核内的基因全部来自a，细胞质的全部基因来自b，A错误； B、细胞核是细胞代谢和遗传的控制中心。在重构胚（c）经一系列增殖和分化形成克隆猴（e）的过程中，细胞核中的遗传物质决定了细胞的分裂、分化等生命活动的进程，对整个发育过程起控制作用，B正确； C、d为胚胎发育提供了适宜的环境等条件，但遗传物质主要来自重构胚（c）中的细胞核（即a提供的细胞核），d并不提供遗传物质，C错误； D、e的形成过程没有经过受精作用，属于无性生殖。但猴是二倍体生物，其体细胞中原本就存在同源染色体，克隆过程并没有改变细胞中染色体的组成，所以e的体细胞中有同源染色体，D错误。 故选B。 20. 某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能的是（　　） A. 实验材料取自小鼠胚胎的脑组织 B. 为了防止污染将培养瓶瓶口密封 C. 血清经过高温处理后加入培养基 D. 所使用的培养基呈弱酸性 【答案】A 【解析】 【分析】小鼠原代神经元培养属于动物细胞培养，需要在无菌无毒和培养液提供类似内环境的条件下进行。 【详解】A、小鼠胚胎脑组织中含有丰富的原代神经元，细胞增殖能力强，不会造成生长缓慢，A符合题意； B、培养瓶瓶口密封会使培养液中缺氧，影响细胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使细胞生长缓慢，B不符合题意； C、血清经过高温处理后，其中活性成分变性，失去原有功能，细胞生存环境严重恶化，可能使细胞生长缓慢，C不符合题意； D、小鼠内环境为弱碱性，所使用的培养基呈弱酸性，使细胞生存环境恶劣，可能造成细胞生长缓慢，D不符合题意。 故选A。 21. 干细胞治疗为骨缺损的临床治疗提供了新思路。为探究不同细胞共培养对脂肪干细胞分化为成骨细胞的影响，科研人员利用图1装置对细胞进行共培养，装置的上下层通过小孔连通，一段时间后检测脂肪干细胞成骨分化相对水平，结果如图2所示。 下列相关叙述错误的是（ ） A. 除a组外，b、c、d组中的培养液均含有促进成骨分化的相关因子 B. 与a组相比，b、c、d组脂肪干细胞的成骨分化相关基因的表达存在差异 C. 相对于血管内皮细胞，与成纤维细胞的共培养更有利于脂肪干细胞的成骨分化 D. 成纤维细胞和血管内皮细胞通过分泌相关细胞因子促进了脂肪干细胞的成骨分化 【答案】A 【解析】 【分析】细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的结果：细胞的种类增多，细胞中细胞器的种类和数量发生改变，细胞功能趋于专门化。 【详解】A、由题图2可知，a、b、c、d组中的脂肪干细胞均可分化为成骨细胞，说明四组培养液中均含有促进成骨分化的相关因子，A错误； B、细胞分化的实质为基因的选择性表达，由于不同细胞共培养促进脂肪干细胞分化为成骨细胞的水平不同，说明四组脂肪干细胞的成骨分化相关基因的表达存在差异，B正确； C、与c组脂肪干细胞和血管内皮细胞共培养相比较，b组脂肪干细胞和成纤维细胞共培养的脂肪干细胞成骨分化水平更高，C正确； D、由题图1装置可知，共培养细胞没有与脂肪干细胞直接接触，而是通过隔板上的小孔连通，且共培养b、c、d组细胞成骨分化水平均高于a组，说明成纤维细胞和血管内皮细胞通过分泌相关细胞因子促进了脂肪干细胞的成骨分化，D正确。 故选A。 22. 下列有关动物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础 B. 单克隆抗体制备过程，第一次筛选的目的是获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞 C. 造血干细胞、精原干细胞、胚胎干细胞和神经干细胞均属于成体干细胞 D. ES细胞在体外可发育成心肌细胞、血细胞等，但不能分化成神经元 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞工程有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体的制备等。 【详解】A、动物细胞工程有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合等技术，其中，动物细胞培养是动物细胞工程的基础，A正确； B、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选是为了获得杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、成体干细胞是指存在于已分化组织中的未分化细胞，造血干细胞、精原干细胞、胚胎干细胞和神经干细胞均属于成体干细胞 ， 胚胎干细胞(ES细胞)不属于成体干细胞，它来源于早期胚胎，C错误； D、胚胎干细胞(ES细胞)来源于早期胚胎，具有发育的全能性，在体外可发育成心肌细胞、血细胞和神经元细胞，D错误。 故选A。 23. 下列植物组织培养技术和单克隆抗体技术的叙述，正确的是（ ） A. 利用的原理均是细胞的全能性 B. 使用的培养基均需添加葡萄糖和血清 C. 培养时的温度和pH均相同 D. 产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养技术包括外植体脱分化形成愈伤组织和愈伤组织再分化形成试管苗的过程。植物体细胞杂交技术包括去壁、促融和植物组织培养三个过程。杂交瘤细胞是骨髓瘤细胞与效应B细胞融合形成的。 【详解】A、植物组织培养利用细胞全能性，单克隆抗体制备利用细胞膜流动性和细胞增殖，A错误； B、植物组织培养基不用血清，单克隆抗体培养基用血清，B错误； C、植物细胞和动物细胞生长所需的适宜温度和pH存在差异，比如植物组织培养的温度一般在25℃左右，动物细胞培养温度一般在37℃左右，植物细胞培养的pH一般在5.5-5.8左右，动物细胞培养的pH一般在7.2-7.4，所以培养时的温度和pH不相同，C错误； D、愈伤组织是外植体（离体的植物器官、组织或细胞）经脱分化形成的，脱分化后的细胞恢复了分裂能力，所以愈伤组织细胞具有增殖能力，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合后形成的，骨髓瘤细胞本身就具有无限增殖的特性，融合后的杂交瘤细胞也保留了这种增殖能力，所以产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力，D正确。 故选D。 24. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体 才能获得后代。下图列举了几项技术成果。 下列叙述正确的是 （ ） A. 经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致 B. ①需获得MII期的去核卵母细胞 C. ②能大幅改良动物性状 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 【答案】D 【解析】 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。 【详解】A、子代动物的遗传性状与供体基本一致，但与受体无关，A错误； B、核移植过程中需要处于MII中期的去核卵母细胞，而过程1是培育试管动物，需要培育到适宜时期（桑葚胚或囊胚等时期）进行胚胎移植，B错误； C、过程2得到的是克隆动物，是无性生殖的一种，不能大幅改良动物性状，C错误； D、过程2克隆技术可得到大量同种个体，为过程3提供了量产方式；过程3是转基因技术，转基因可导入外源优良基因，为过程1、2提供了改良性状的方式，D正确。 故选D。 25. 下列有关牛体外受精的叙述，正确的是（ ） A. 新鲜的精液经离心后，取上清液参与体外受精 B. 从卵巢中取出的卵母细胞，可与精子结合完成受精 C. 体外受精可采用高速离心诱导精卵结合 D. 精子入卵后，卵细胞膜也会发生生理反应，阻止其他精子进入 【答案】D 【解析】 【分析】哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能和受精等几个主要步骤。 【详解】A、体外受精时，采集到的成熟精子经获能处理后才具有受精能力，且离心后使用的是沉淀物，而不是上清液，A错误； B、从卵巢中取出的卵母细胞，要在体外成熟培养至MⅡ，才具备与精子受精的能力，B错误； C、体外受精通过将获能的精子与成熟的卵子置于培养液中共同孵育，促进自然结合，C错误； D、卵细胞膜反应是指精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后卵细胞膜也会发生生理反应，这是防止多精入卵的第二道屏障，D正确。 故选D。 26. 雌性小鼠在精子入卵后，被激活的卵子会完成MII排出第二极体（如图），第二极体仅与受精卵分裂形成的2个子细胞之一接触。在甲时期去除第二极体会导致胚胎明显缩小，不能正常存活，这一异常可通过向细胞1中注射第二极体的细胞提取液加以改善。在乙时期后去除第二极体对胚胎发育无显著影响。下列叙述错误的是（　　） A. 极体的形成与减数分裂时细胞质不均等分裂有关 B. MII的过程中不会发生染色体DNA的复制 C. 胚胎细胞与第二极体间可能进行物质交换与信息交流 D. 第二极体会被保留成为胚胎的组成部分以发挥重要作用 【答案】D 【解析】 【分析】1、减数分裂的过程：（1）减数分裂Ⅰ前的间期：染色体的复制和相关蛋白质的合成；（2）减数分裂Ⅰ：①前期：联会，同源染色体上的非姐妹染色单体互换；②中期：同源染色体成对的排列在赤道板上；③后期：同源染色体分离，非同源染色体自由组合；④ 末期：细胞质分裂；（3）减数分裂Ⅱ：①前期：染色体散乱的 排布与细胞内；②中期：染色体形态固定、数 目清晰；③后期：着丝粒分裂，姐妹染色单体 分开成为染色体，并均匀地移向两极；④末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。 2、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数分裂Ⅱ并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。 【详解】A、减数分裂Ⅰ的后期由于细胞质不均等分裂导致形成大小不同的两个细胞，大的细胞被称为次级卵母细胞，小的细胞叫极体，可见极体的形成与减数分裂时细胞质不均等分裂有关，A正确； B、减数分裂的特点是DNA只复制一次，而细胞分裂两次，所以在减数分裂Ⅱ的过程中不会发生染色体DNA的复制，B正确； C、由题干信息可知，第二极体仅与受精卵分裂形成的2个子细胞之一接触，所以胚胎细胞与第二极体间可能进行物质交换与信息交流，C正确； D、由题干信息可知，雌性小鼠在精子入卵后，被激活的卵子会完成减数分裂Ⅱ排出第二极体，D错误。 故选D。 27. 研究者探究不同浓度的雌激素甲对牛的卵母细胞和受精卵在体外发育的影响，实验结果如下表所示。根据实验数据，下列叙述错误的是（ ） 甲的浓度（μg/mL） 卵母细胞（个） 第一极体排出（个） 成熟率（%） 卵裂数（个） 卵裂率（％） 0 106 70 66.0 28 40.0 1 120 79 65.8 46 58.2 10 113 53 46.9 15 28.3 100 112 48 42.8 5 10.4 A. 实验结果说明甲抑制卵裂过程 B. 甲浓度过高抑制第一极体的排出 C. 添加1μg/mL的甲可提高受精后胚胎发育能力 D. 本实验中，以第一极体的排出作为卵母细胞成熟的判断标准 【答案】A 【解析】 【分析】据表可知，较对照组（甲浓度为0μg/mL）而言，甲浓度增大均使卵母细胞数量增多，对于第一极体排出个数、成熟率、卵裂数、卵裂率都呈先增加，后下降的趋势。 【详解】A、由表可知，甲低浓度时促进卵裂，高浓度时抑制卵裂，A错误； B、对照组第一极体排出个数为70个，甲浓度过高（＞10μg/mL，第一极体排出个数＜70）抑制第一极体的排出，B正确； C、添加1μg/mL的甲，卵裂数增大，即该条件可提高受精后胚胎发育能力，C正确； D、卵母细胞成熟的判断标准是第一极体的排出，D正确。 故选A。 28. 波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（ ） A. 选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B. 胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C. 普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体 D. 生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。 【详解】A、选择遗传性状优良的健康波尔母山羊作为供体，进行超数排卵处理，A正确； B、胚胎移植前，采集部分滋养层细胞进行遗传学检测，B正确； C、作为受体的杜泊母山羊只需具备健康的体质和正常繁殖能力即可，但山羊和绵羊是不同的物种，具有生殖隔离，不能将山羊的胚胎移植到绵羊子宫发育，即普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体，C正确； D、生产中需选择品质良好的波尔公山羊提供精子，D错误。 故选D。 29. 甘加藏羊是甘肃高寒牧区的优良品种，是季节性发情动物，每年产羔一次，每胎一羔，繁殖率较低。为促进畜牧业发展，研究人员通过体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 B. 藏羊乙的获能精子能与刚采集到的藏羊甲的卵母细胞受精 C. 受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理 D. 后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎移植基本程序主要包括：1、对供、受体的选择和处理。2、配种或人工授精。3、对胚胎的收集、检查、培养或保存。4、对胚胎进行移植。5、移植后的检查。 【详解】A、促性腺激素能作用于卵巢，藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵，A正确； B、从卵巢中刚采集的卵母细胞需培养成熟（减数第二次分裂中期）后才可与获能的精子进行体外受精，B错误； C、在胚胎移植前要对接受胚胎的受体和供体进行同期发情处理，使受体的生理状况相同，因此受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理，C正确； D、后代丁是由藏羊甲的卵细胞和藏羊乙的精子结合形成的受精卵发育而来，因此后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙，D正确。 故选B。 30. 治疗性克隆的一般流程是把患者（供体）体细胞移植到去核卵母细胞中形成重构胚，再把重构胚体外培养到囊胚，然后从中分离出ES细胞，并诱导ES细胞定向分化为所需的特定细胞类型用于移植。下列说法错误的是（ ） A. 供体细胞注入去核卵母细胞后还需诱导融合 B. ES细胞在核遗传上和供体细胞相同 C. 治疗性克隆是治疗遗传病的根本措施 D. 治疗性克隆可解决器官移植时的免疫排斥问题 【答案】C 【解析】 【分析】治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。此技术解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。 【详解】A、供体细胞注入去核卵母细胞后，还需通过电融合法等诱导融合，使供体核进入卵母细胞，形成重构胚，A正确； B、治疗性克隆的ES细胞来源于供体细胞，在核遗传上和供体细胞相同，B正确； C、治疗遗传病的根本措施是基因治疗，C错误； D、治疗性克隆的目的是培养出能够用于医学治疗的供体器官，以解决目前临床上存在的供体器官不足和移植后免疫排斥的问题，D正确。 故选C。 31. 基于AI（人工智能）的蛋白质设计方法可以利用现有蛋白质数据库以及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构及功能。下列说法错误的是（ ） A. AI可帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系 B. AI预测新型蛋白质的结构和功能依据的原理是中心法则 C. 可通过改造或合成基因来获得AI设计的蛋白质 D. AI可帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质 【答案】B 【解析】 【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求，蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界已有的蛋白质。 2、蛋白质工程的基本思路：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。 【详解】A、AI可以利用现有蛋白质数据库帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系，A正确； B、AI对新型蛋白质的预测应从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，B错误； C、对蛋白质的改造是通过改造或合成基因来完成的，C正确； D、AI可用于蛋白质工程，帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质，D正确。 故选B。 32. 蛛丝蛋白是一种特殊纤维蛋白，具有强度高、韧性大等特点，在人工肌腱等医学领域有着诱人的前景。某研究小组提取一种丝绒蜘蛛中的蛛丝蛋白基因，将其导入大肠杆菌生产蛛丝蛋白。下列叙述正确的是（ ） A. 构建蛛丝蛋白基因表达载体需要DNA聚合酶 B. 可通过显微注射的方法将蛛丝蛋白基因导入大肠杆菌 C. 基因表达载体上的复制原点可调控蛛丝蛋白基因的表达 D. 可通过蛋白质工程设计与改造蛛丝蛋白的结构以增强其韧性 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： 1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。 3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 4、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因一DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、构建蛛丝蛋白基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶，A错误； B、可通过感受态细胞的方法将蛛丝蛋白基因导入大肠杆菌，B错误； C、基因表达载体上的启动子可调控蛛丝蛋白基因的表达，C错误； D、若需对蛛丝蛋白进行设计和改造以增强其韧性，可通过蛋白质工程来实现，D正确。 故选D。 33. 用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TerR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述正确的是（ ） A. 若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物一定相同 B. 若用PvuI酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，一定含有目的基因 C. 若用SphI酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D. 若用SphI酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落 【答案】C 【解析】 【分析】图中质粒内，氨苄青霉素抗性基因（AmpR）内含有ScaI和PvuI的酶切位点，四环素抗性基因（TetR）内含有HindIII、SphI和SalI的酶切位点。 【详解】A、若用HindⅢ酶切，目的基因可能正向插入，也可能反向插入，转录的产物可能不同，A错误。 B、若用PvuⅠ酶切，重组质粒和质粒中都有四环素抗性基因（TetR），因此在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因，B错误； C、若用SphI酶切，由于重组质粒和普通质粒的碱基对数不同，因此可通过 DNA 凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否，C正确； D、SphⅠ的酶切位点位于四环素抗性基因中，若用SphⅠ酶切，重组质粒中含氨苄青霉素抗性基因（AmpR），因此携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）的培养基中能形成菌落，在含Tet的培养基中不能形成菌落，D错误。 故选C。 34. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”(实验I)和“DNA的粗提取与鉴定”(实验Ⅱ)的实验操作，下列相关叙述正确的是（ ） A. 实验I中，PCR实验所需的移液器、枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理 B. 实验I中，将扩增得到的PCR产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 C. 实验Ⅱ中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA D. 实验Ⅱ中，将白色丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA 【答案】C 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、实验Ⅰ中，PCR实验所需的枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理，移液器不需要进行高压蒸汽灭菌处理，A错误； B、实验Ⅰ中，将扩增得到的PCR产物进行凝胶电泳，应先加样后接通电源，B错误； C、实验Ⅱ中，取洋葱研磨液的上清液，由于DNA不溶于酒精溶液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA，C正确； D、实验Ⅱ中，将丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液后加入二苯胺试剂，在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，用于鉴定DNA，D错误。 故选C。 35. “DNA粗提取与鉴定”的操作步骤为研磨→除杂→析出→鉴定。某研究组欲探究不同除杂方法对实验结果的影响（如下表）。下列叙述正确的是（ ） 除杂方法 沉淀质量（g） DNA浓度（ng·μL-1） OD260/OD280 二苯胺鉴定 离心 0.0680 81.50 1.56 蓝色 4℃冰箱静置 0.1028 336.4 1.41 蓝色 注：OD260与OD280的比值可检查DNA纯度；纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质污染时，这一比值会明显降低。 A. 猪血、菜花、草莓均可作为提取DNA的材料 B. 对研磨液进行离心的目的是加速DNA的沉淀 C. 离心法可以获得的DNA纯度较低 D. 析出时的离心转速明显高于除杂时 【答案】D 【解析】 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是： （1）DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的； （2）DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离； （3）在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。 【详解】A、DNA粗提取与鉴定的实验中，应选择富含DNA的材料，菜花、草莓均可作为提取DNA的材料，但猪血不含细胞核不合适，A错误； BC、离心研磨液的目的是加速沉淀，离心能够加速细胞膜、细胞器、一些较大杂质的沉淀，离心法可以获得更高纯度的DNA，BC错误； D、据表可知，离心时DNA浓度是81.5ng⋅μL-1，4℃冰箱静置时DNA浓度是336.4ng⋅μL-1，说明静置时蛋白质含量较多，离心时沉淀质量是0.068g，4℃冰箱静置时沉淀质量是0.1028g，比较可知DNA的沉淀质量小，故析出时的离心转速明显高于去杂质时，D正确。 故选D。 36. 某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是（ ） A. 增加模板DNA的量 B. 延长热变性的时间 C. 延长延伸的时间 D. 提高复性的温度 【答案】D 【解析】 【分析】多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，PCR过程一般经历下述三循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。 【详解】A、增加模板DNA的量可以提高反应速度，但不能有效减少非特异性条带，A错误； BC、延长热变性的时间和延长延伸的时间会影响变性延伸过程，但对于延伸中的配对影响不大，故不能有效减少反应非特异性条带，BC错误； D、非特异性产物增加的原因可能是复性温度过低会造成引物与模板的结合位点增加，故可通过提高复性的温度来减少反应非特异性条带的产生，D正确。 故选D。 37. 最早的双脱氧测序法是PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸（ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧腺苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 上述PCR反应体系中加入两种引物 B. 电泳时产物的片段越小，迁移速率越慢 C. 5'-CTACCCGTGAT-3'为对照个体的一段序列 D. 患者该段序列中某位点的碱基C突变为G 【答案】C 【解析】 【分析】1、PCR技术： （1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 （2）原理：DNA复制。 （3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。 （4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。 （5）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 2、双脱氧测序法的原理：在DNA聚合酶、引物、四种单脱氧核苷酸（dNTP）存在的情况下，如果在四管反应系统中再分别加入四种双脱氧核苷三磷酸（ ddNTP），DNA链合成反应过程中 ddNTP与dNTP处于一种竞争状态，即新合成DNA链既可能掺入正常dNTP，也可能掺入ddNTP并使新合成链终止延伸。这样在每个反应系统中形成的产物是一系列长度不等的多核苷酸片段，这些片段具有相同的起点，即引物的5'端，但有不同的ddNTP终端。 在结束反应后，用四个泳道进行电泳，分别分离各组反应体系中不同长度的DNA 片段，检测DNA片段终止末端位置的碱基种类，从自显影图谱中直接读取到与模板相匹配的新的链序。 【详解】A、利用双脱氧测序法时，PCR反应体系中加入的模板是待测的单链DNA，故只需加入一种引物，A错误； B、电泳时，产物的片段越大，迁移速率越慢，B错误； C、依据分析中双脱氧测序法的原理，可以确定每个泳道中的条带（DNA片段）的3'终端的碱基，如+ddATP的泳道中出现的条带（DNA片段）的3'终端碱基就是A。另外由于每个片段的起始点相同，但终止点不同，因此可以通过比较片段的长度来确定DNA序列中每个位置上的碱基；图示电泳方向为从上→下，即对应的DNA片段为长→短，则对应的DNA测序结果为3'→5'，如对照个体的电泳结果最短的条带为+ddCTP泳道组的条带，则说明该DNA片段5'端第一个碱基为C；因此对照个体的测序结果为5'-CTACCCGTGAT-3'，患者的测序结果为5'-CTACCTGTGAT-3'，C正确； D、对比患者和对照个体的测序结果可知，患者该段序列中某位点的碱基C突变为T，D错误。 故选C。 38. 下列有关生物技术的安全性和伦理问题的观点，正确的是（ ） A. 可广泛利用体外受精技术设计试管婴儿的性别 B. 应基于科学和理性来讨论转基因作物的安全性问题 C. 食品中若含有食品添加剂，则该食品的安全性难以保障 D. 通过基因筛查来禁止重大疾病基因携带者就业 【答案】B 【解析】 【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。 【详解】A、我国不允许利用体外受精技术筛选早期胚胎性别，A错误； B、应基于科学和理性讨论转基因作物的安全性问题，合理使用转基因作物，B正确； C、有些食品添加剂对人体是无害的，C错误； D、通过基因筛查来禁止重大疾病基因携带者就业，这属于基因歧视，违背伦理原则，且基因携带者未必会发病，D错误。 故选B。 39. 社会上流传着一些与生物有关的说法，有些有一定的科学依据，有些违反生物学原理。以下说法中有科学依据的是（　　） A. 长时间炖煮会破坏食物中的一些维生素 B. 转基因抗虫棉能杀死害虫就一定对人有毒 C. 消毒液能杀菌，可用来清除人体内新冠病毒 D. 如果孩子的血型和父母都不一样，肯定不是亲生的 【答案】A 【解析】 【分析】血型分为四种，即A，B，AB，O。血型是指红细胞上所含的抗原不同而言，红细胞上只含A抗原的称A型，含有B抗原的称B型，既有A抗原又有B抗原的称为AB型，既没有A抗原也没有B抗原的称为O型。ABO血型受ABO三种基因控制，A基因控制A抗原产生，B基因控制B抗原产生，O基因控制不产生A和B两种抗原，而基因都是成对存在，控制ABO血型的基因可有六种不同组合，即AA，AO，BB，BO，AB，OO，而每个人只有其中一对。 【详解】A、维生素会受到高温破坏，加热、光照、长时间储存等都会造成维生素的流失和分解，A正确； B、转基因抗虫棉对非靶标生物无毒性，B错误； C、消毒液只能杀死表面的病毒细菌，但无法清除体内的病毒，C错误； D、如果孩子的血型和父母都不一样，也可能是亲生的，如A型血和B型血的父母也可以生出O型血的孩子，D错误。 故选A。 40. 依据《中华人民共和国生物安全法》，生物安全是指国家有效防范和应对危险生物因子及相关因素威胁，生物技术能够稳定健康发展，人民生命健康和生态系统相对处于没有危险和不受威胁的状态，生物领域具备维护国家安全和持续发展的能力。下列叙述错误的是（ ） A. 高致病性微生物须在高等级生物安全实验室中开展实验活动 B. 生物技术可广泛应用在人类自身基因组改造和新物种创造中 C. 外来入侵物种可能增加本土食物来源却给自然生态造成破坏 D. 动物饲料中的抗生素会通过食物链使人体微生物耐药性增强 【答案】B 【解析】 【分析】《中华人民共和国生物安全法》是为维护国家安全，防范和应对生物 安全风险，保障人民生命健康，保护生物资源和生态环境，促进生物技术健康发展，推动构建人类命运共同体，实现人与自然和谐共生，制定的法律。 【详解】A、高致病性微生物须在高等级生物安全实验室中开展实验活动，防止造成致病性微生物外泄，造成污染，危害生物健康，A正确； B、生物技术可应用在新物种创造中，但对人类自身基因组改造到目前还存在相应的问题，难以实现，B错误； C、外来入侵物种可能增加本土食物来源，但如果缺乏天敌会造成自然生态破坏，C正确； D、长期使用抗生素，必然产生残留，而其残留在动物饲料中的抗生素，会随着食物链进入人体引发微生物的耐药性，D正确。 故选B。 二、选择题：本题共5小题，每小题2分，共10分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全选对者得2分，选对但不全的得1分，有错选得0分。 41. 某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌，醋醅含有醋酸菌；糖化即淀粉水解过程。下列叙述正确的是（ ） A. 糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化和灭菌 B. 发酵原理是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸 C. 醋酸发酵过程中经常翻动发酵物，可控制发酵温度和改善通气状况 D. 啤酒酿造流程中适当增加溶解氧会延长发酵时间 【答案】AC 【解析】 【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~30℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。 2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。 【详解】A、分析题图可知，糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的均有利于灭菌和糖化过程，A正确； B、图中制酒用到了酒曲，酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌，霉菌属于真菌，其为需氧型，该过程霉菌产生的淀粉酶有利于将糯米中的淀粉分解，其中的乳酸菌（属于细菌）进行的是无氧呼吸，酵母菌（属于真菌，兼氧型）主要进行无氧呼吸过程完成酿酒的过程，醋酸发酵过程中主要利用了醋酸杆菌（属于细菌）的有氧呼吸进行醋酸发酵，B错误； C、醋酸发酵过程中利用了醋酸菌的有氧呼吸，在发酵过程中经常翻动发酵物，有利于散热，可控制发酵温度和改善通气状况，C正确； D、啤酒酿造流程中利用的原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精的过程，若适当增加溶解氧有利于酵母菌有氧呼吸产生更多的能量满足酵母菌自身增殖的需要，因而可缩短发酵时间，D错误。 故选AC。 42. 植物细胞悬浮培养技术在生产中已得到应用。某兴趣小组尝试利用该技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素，设计了如下图实验流程和培养装置，请同学们进行评议。下列评议合理的是（ ） A. 实验流程中应该用蛋白酶处理愈伤组织，制备悬浮细胞 B. 装置中的充气管应置于液面上方，该管可同时作为排气管 C. 装置充气口需要增设无菌滤器，用于防止杂菌污染培养液 D. 细胞培养需要适宜的温度，装置需增设温度监测和控制设备 【答案】CD 【解析】 【分析】植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。 【详解】A、植物细胞间存在果胶质层，可使用果胶酶处理愈伤组织，获得悬浮细胞，A错误； B、装置中的充气管应置于液面下方，以利于培养液中的溶氧量的增加，该管不能同时作为排气管，B错误； C、为了防止杂菌污染培养液，装置充气口需要增设无菌滤器，C正确； D、细胞培养时需要保证适宜的温度，因此装置需增设温度监测和控制设备，D正确。 故选CD。 43. 某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S，结构蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用如图杂交瘤技术制备了抗S单克隆抗体。下列叙述正确的是（ ） A. 常利用高Ca2+-高pH法将B淋巴细胞与分散骨髓瘤细胞融合 B. 制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体 C. 用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，但不能冻存 D. 单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、动物细胞融合常用方法为物理法（电刺激法）、化学法（聚乙二醇PEG诱导法）或生物法（灭活病毒诱导法），A错误； B、由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体，单克隆抗体A和单克隆抗体B来自不同的杂交瘤细胞，因此制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B不是相同的单克隆抗体，B错误； C、用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，也可以冷冻保存，C错误； D、单克隆抗体A和单克隆抗体B都来自筛选出的杂交瘤细胞，因此都能够特异性识别S蛋白上的抗原决定簇，D正确。 故选D。 44. 科学家将与细胞的脱分化有关的基因借助逆转录病毒导入小鼠成纤维细胞，获得了iPS细胞。对iPS细胞进行定向诱导获得的细胞可用于治疗某些疾病。下列叙述正确的是（ ） A. 与造血干细胞相比，iPS细胞的分化程度更高 B. iPS细胞需要培养在含95%空气和5%CO2的混合气体环境中 C. 上述过程的外源基因经显微注射法导入小鼠成纤维细胞 D. 用iPS细胞治疗疾病存在导致肿瘤发生的风险 【答案】BD 【解析】 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【详解】A、iPS细胞是诱导多能干细胞，与造血干细胞相比，iPS细胞的分化程度更低，可以分化形成的细胞种类也更多，A错误； B、iPS细胞需培养在含95%空气和5%CO2的混合气体环境中，其中5%CO2有利于维持溶液的pH，B正确； C、外源基因借助逆转录病毒导入小鼠成纤维细胞中，C错误； D、由于iPS细胞具有活跃的分裂能力，若不受控制可能转化为癌细胞，所以用它进行治疗时可能存在安全风险，D正确。 故选BD。 45. 某小组通过PCR获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（如图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述正确的是（ ） 注：假设引物长度为8个碱基，短于实际长度。 A. 其中一个引物序列为5'-TGCGCAGT-3' B. 步骤①所用的酶是NheI和CfoI C. 用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了两个片段 D. 酶切片段和载体连接时，只能用T4DNA连接酶，不能用E．coliDNA连接酶 【答案】ABC 【解析】 【分析】E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。 【详解】A、由于引物只能引导子链从5＇到3＇，根据碱基互补配对原则，其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇，A正确； B、根据三种酶的酶切位点，左侧的黏性末端是使用Nhe I切割形成的，右边的黏性末端是用Cfo I切割形成的，B正确； C、用步骤①的酶对载体进行酶切，使用了Nhe I和Cfo I进行切割，根据他们的识别位点以及原本DNA的序列，切割之后至少获得了两个片段，C正确； D、图中形成的是黏性末端，而E.coliDNA连接酶能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端，D错误。 故选ABC。 三、非选择题：本题共5小题，共50分。 46. 苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。某研究小组准备依据图1操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株。回答下列问题。 （1）分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成_________的子细胞群体，称为菌落。 （2）苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有________。实验所用的培养皿应5～8套包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入_______内，在160~170℃灭菌2h。 （3）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________（填“增加”或“降低”），以达到富集苯酚降解菌的目的。若图1平板中菌落过于密集，应进一步______，以便于菌落计数与分离。 （4）下图2为平板划线法示意图，该方法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种______分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。在图2中______（填序号）区域更易获得单菌落。 （5）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为_______。如果废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释_______（填序号：①5；②10；③20）倍后，再进行比色。 管号 1 2 3 4 5 6 苯酚浓度 1.0mg·L-1 【答案】（1）肉眼可见的、有一定形态结构 （2） ①. 蛋白胨、苯酚 ②. 干热灭菌箱 （3） ①. 增加 ②. 稀释涂布 （4） ①. 逐步稀释 ②. ③ （5） ①. 0、0.2、0.4、0.6、0.8mg·L-1 ②. ③ 【解析】 【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用； 2、微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落； ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 菌落是分散的微生物在适宜固体培养基表面或内部，通过繁殖形成的 肉眼可见、有一定形态结构的子细胞群体。 【小问2详解】 碳源是为微生物提供碳元素的物质。培养基中蛋白胨（含碳的有机物）、苯酚（含碳）可作为碳源；对培养皿等玻璃器皿、金属用具等灭菌，常用干热灭菌法，需放入干热灭菌箱，在160 - 170℃灭菌2h。 【小问3详解】 将采集到的样品接种培养的目的是富集酚降解菌，则苯酚用量应随转接次数增加而逐渐增加。平板中菌落过于密集，说明菌种密度过大，应进一步稀释涂布，以便于菌落计数与分离。 【小问4详解】 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，经数次划线后培养，可以分离得到单菌落；下一次划线的起始端是上次划线的末端，随着划线的进行，菌种的密度越来越小，更易形成单菌落，故③区域更易获得菌落。 【小问5详解】 1号管为空白对照管，不加苯酚，6号管中苯酚浓度为1 mg/L，2~6号管苯酚浓为0~1 mg/L，可判断浓度梯度为0.2 mg/L，则2~5号管中苯酚浓度分别是0.2、0.4、0.6、0.8mg/L；废水中苯酚溶液浓度为50 mg/ L，降解后约有21%的苯酚残留，则苯酚溶液浓度为10.5 mg/L，由于制作的比色管中苯酚浓度介于0~1 mg/L间，则残留液需稀释20倍（即③）后，再进行比色。 47. 在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗是被动地将具有抗肿瘤活性的免疫制剂或细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，该治疗方案适用于肿瘤晚期患者，主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类，其中过继性细胞治疗相关过程如图。回答下列问题。 （1）在单克隆抗体治疗中，为了获取能产生抗肿瘤细胞的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。筛选所用的培养基按功能分类属于_________。筛选出来的杂交瘤细胞进行_________才可以获得能分泌所需抗体的细胞。 （2）科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合，制成了ADC．ADC由单克隆抗体、细胞毒素和_________组成。 （3）过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞能够特异性地识别并处理肿瘤细胞，该种细胞是_________。将分离出来的免疫细胞进行诱导培养，但培养过程中会出现分裂受阻，其原因主要有_________（答出两点即可）；培养过程中出现_________现象时，可用酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞后，再进行分瓶培养，称为_________。 （4）过继性细胞治疗能有效避免免疫排斥，其原因是以患者自体免疫细胞进行诱导培养得到的免疫细胞与患者细胞的_________抗原相同。 【答案】（1） ①. 选择培养基 ②. 克隆化培养和抗体检测 （2）接头 （3） ①. 细胞毒性T细胞 ②. 细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏 ③. 接触抑制 ④. 传代培养 （4）组织相容性（或人类白细胞，或HLA） 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备利用的技术有动物细胞培养和动物细胞融合，所利用的原理是细胞增殖和细胞膜的流动性。在该过程中需要进行两次筛选，最终才能获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。ADC上的单克隆抗体可以特异性识别肿瘤细胞表面的抗原，从而实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。 【小问1详解】 单克隆抗体制备过程中两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，用特定的选择培养基，未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞都死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长；第二次筛选出能合成特定抗体的杂交瘤细胞，以克隆化培养和抗体检测的方法，才可以获得能分泌所需抗体的细胞。 【小问2详解】 ADC为抗体—药物偶联物，由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，抗体具有特异性，可以实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，减少了用药量，也降低了副作用。 【小问3详解】 细胞毒性T细胞可以特异性识别并处理、裂解肿瘤细胞；在细胞培养的过程中，由于细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏和接触抑制，细胞分裂受阻；培养过程中出现接触抑制现象时，可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞，再进行分瓶培养，称为传代培养。 【小问4详解】 过继性细胞治疗有效避免免疫排斥，原因是自体免疫细胞进行诱导培养得到的免疫细胞与人体细胞的组织相容性抗原相同。 48. 我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图。回答下列问题。 （1）卵细胞转化成phESC相当于植物组织培养中的________过程。 （2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，此卵母细胞应体外培养到________期。在对卵母细胞进行去核时，________（填“能”或“不能”）采用紫外线短期照射的方法，得到的重构胚通常需要发育到________阶段才能进行胚胎移植。胚胎移植的实质是早期胚胎在________条件下空间位置的转移。 （3）图中“甲”为_________胚，聚集在该胚胎一端的细胞，将来发育成________，其余细胞发育成_________。 （4）不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为_______。 【答案】（1）脱分化 （2） ①. 减数分裂Ⅱ中（或MⅡ） ②. 不能 ③. 桑葚胚或囊胚 ④. 相同生理 （3） ①. 囊 ②. 胎儿的各种组织 ③. 胎盘和胎膜 （4）XX、XY或YY 【解析】 【分析】1、卵细胞激活转化成phFSC，通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC，获得甲，从而得到孤雌小鼠。2、精子激活转化成ahFSC，通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC，获得乙，从而得到孤雄小鼠。 【小问1详解】 卵细胞是高度分化的细胞，转化为孤雌胚胎干细胞phFSC相当于植物组织培养中的脱分化阶段。 【小问2详解】 要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，需将去核卵母细胞培养至减数第二次分裂中期。去核的目的是精确地移除卵母细胞自身的遗传物质，同时要最大限度地保持细胞质的完整和活性，因为细胞质对于后续发育至关重要。紫外线照射虽然能破坏细胞核，但它会无差别地损伤细胞质中的各种成分，导致重构胚无法正常发育。所以不能用紫外线短期照射，而应该通过显微操作去核。得到的重构胚通常需要发育到桑葚胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植，因为此时的胚胎易操作，且处于游离状态。胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理条件下空间位置的转移。 【小问3详解】 图中“甲”的结构非常典型，它是一个中空的球体，内部有一个细胞团聚集在一侧。这是囊胚的标志性结构。聚集在一端的细胞团叫做内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。而其余细胞称为滋养层细胞，它 们将来发育成胎膜和胎盘。 【小问4详解】 不考虑致死，孤雌小鼠具有双母亲来源，因此其染色体组成为XX，而孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以其性染色体可能是XX、XY或YY。 49. 新城疫病毒可以引起家禽急性败血性传染病，我国科学家将该病毒相关基因改造为r2HN基因，使其在水稻胚乳特异表达，制备获得r2HN疫苗，并对其免疫效果进行了检测。回答下列问题。 （1）实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如图，其中GtP为启动子，若使r2HN基因仅在水稻胚乳表达，GtP应为_______。Nos为终止子，其作用为________。r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点，因此，可选择限制酶________对r2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。 注：KpnI、HindⅢ、SacI和EcoRI标注的位点为各限制酶的识别位点。 （2）利用_________方法将r2HIN基因导入水稻愈伤组织细胞，在实验操作中，需将r2HN基因插入_________中。 （3）为检测r2HN表达情况，可通过PCR技术检测_________，通过_________技术检测是否翻译出r2HN蛋白。 （4）获得转基因植株后，通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。此类植株自交一代后，r2HN纯合体植株的占比为________。 （5）利用水稻作为生物反应器生产r2HN疫苗的优点是________。 A. 生产成本低 B. 种子蛋白易纯化 C. 水稻自花传粉不易发生基因污染 【答案】（1） ①. 胚乳特异表达基因的启动子 ②. 终止转录 ③. HindⅢ和EcoRI （2） ①. 农杆菌转化 ②. Ti质粒的T-DNA （3） ①. r2HN是否转录出mRNA ②. 抗原-抗体杂交 （4）1/4 （5）ABC 【解析】 【分析】基因工程是一项体外DNA重组技术，需要借助限制酶、 DNA 连接酶和载体等工具才能进行。它的基本操作程序包括：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 利用水稻细胞培育能表达r2HN的水稻胚乳细胞生物反应器，在胚乳中特异性表达的启动子在水稻胚乳细胞中更容易被RNA聚合酶识别和结合而驱动转录，因此图中的GtP应为在胚乳特异表达基因的启动子，Nos为终止子，终止子可以终止转录。r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点。Kpn I破坏了启动子序列不能选用，Sac I位于终止子序列之外不能选用，则为了将目的基因插入载体的启动子和终止子之间，则需要用限制酶Hind III和EcoR I对r2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。 【小问2详解】 获得水稻愈伤组织后，利用农杆菌转化法，使目的基因r2HIN进入水稻细胞并完成转化。在实验操作中，需将r2HN基因插入Ti质粒的T-DNA，进而可以将目的基因与水稻细胞的基因组进行整合。 【小问3详解】 为检测r2HN表达情况，可通过PCR技术检测转录的r2HN mRNA，可从转基因水稻中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交检测是否翻译出r2HN蛋白。 【小问4详解】 获得转基因植株后，通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。单一位点插入目的基因的植株，则相当于杂合子，杂合子自交，后代含有r2HN基因的纯合子为1/4。 【小问5详解】 通过水稻作为生物反应器生产r2HN疫苗具有不受性别的限制、可大量种植、成本低、安全性高等优点，此外还具有种子蛋白易纯化、水稻自花传粉不易发生基因污染的优点，即ABC符合题意。 故选ABC。 50. PCR技术对于目的基因的定点诱变是非常重要的，目的基因的不同位置突变需求往往可以采用不同的策略。回答下列问题。 （1）用PCR对平板上长出菌落进行鉴定时，某种引物共用31个，则目的基因最多扩增了________次。 （2）若突变的碱基位于目的基因的末端，可以直接在设计特异性引物时直接予以考虑，但是最好不要太靠近_______端，否则Taq酶的延伸效率偏低，甚至无法延伸。 （3）若突变碱基位于目的基因某一侧，可以采用如图1所示“大引物PCR技术”，在图1获取突变基因过程中，需要以下三种引物： 引物A：5'-CCCCAACCGGAAAGTGTCA-3'（下划线字母为突变碱基） 引物B：5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3'（下划线部分为HindⅢ识别序列） 引物C：5-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3'（下划线部分为SacI识别序列） PCR1中使用的引物有_________（填字母）和_________（填字母） PCR2中使用的引物有________（填字母）和图中大引物的________（填“①”或“②”）链。 （4）若突变碱基位于目的基因中央时，可以采用如图2所示的PCR技术，图2中4次PCR对引物的使用不完全相同。请完成PCR中引物的选择。 ①PCR1：引物A和B； ②PCR2：引物C和D； ③PCR3：_________； ④PCR4：_________。 PCR1和PCR2_______（填“能”或“不能”）在同一个反应体系里面进行。 注:图中“”为碱基序列变化点。 【答案】（1）5 （2）3' （3） ①. 引物A ②. 引物C ③. 引物B ④. ② （4） ①. 不使用引物 ②. 引物A和D ③. 不能 【解析】 【分析】PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。 【小问1详解】 PCR是一种DNA的体外复制技术，其原理是DNA的半保留复制，因此复制n次，需要某种引物数量需要2n-1，因此某种引物共用31个，2n-1=31，得出n=5，则目的基因最多扩增了5次。 【小问2详解】 若突变的碱基位于目的基因的末端，可以根据剪辑互补配对原则，直接在设计特异性引物时直接予以考虑，若该位点太靠近3'端，由于无后续的碱基配对，导致其热稳定DNA聚合酶的延伸效率偏低。 【小问3详解】 分析图1可知，在PCR1中，获取的是大引物，大引物中含有突变基因，所以应含有引物A，在基因的右端有限制酶SacⅠ识别序列，所以要用到引物C。在PCR2中，有一个引物结合到了基因的左端，在它从5'到3'的序列的开始部位应含有限制酶HindⅢ识别序列，所以要用到引物B。而另外的一个引物就是大引物中的一条链，它应该结合到基因的右端，且从5'到3'端的序列中开始部位应含有SacⅠ识别的序列，从图中看，它是大引物的②链。 【小问4详解】 PCR3的两条链都是从头开始的，不需要引物即可顺着3'端延伸，PCR4最后要得的新的蛋白A基因，所以需要引物A和引物D，即从该基因的两条链的两端开始延伸。由于引物B和引物C会互补配对而失效，所以PCR1和PCR2不能在同一个反应体系里面进行。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2024～2025学年度下学期高二年级期中考试 生物学试题 注意事项： 1．答题前：考生需将自己的姓名、班级、考场/座位号填写在答题卡指定位置上，并粘贴条形码。 2．回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。 3．回答非选择题时，请使用0.5毫米黑色字迹签字笔将答案写在答题卡各题目的答题区域内，超出答题区域或在草稿纸、本试题卷上书写的答案无效。 4．保持卡面清洁，不要折叠、不要弄皱、弄破，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。 一、选择题：本题共40小题，每小题1分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1. 葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是（ ） A. 无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖 B. 自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌 C. 葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的 D. 制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加 2. 山东酱豆的制作要经过两次发酵。第一阶段以大豆为主要原料，利用毛霉、曲霉或细菌的作用，分解大豆蛋白质。第二阶段以蔬菜与发酵过的大豆为主，进行乳酸发酵。下列叙述正确的是（ ） A. 第一阶段在空气中发酵时保湿，有利于霉菌的菌丝生长 B. 第二阶段定期通入空气有利于乳酸菌活动 C. 毛霉、曲霉产生的蛋白酶能促进大豆蛋白质、脂肪分解，可以丰富营养成分 D. 乳酸发酵能促进蔬菜中纤维素水解，损失了营养 3. 谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，某研究小组通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是（ ） A. 提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺产量 B. 发酵初期控制pH为5.6，后调为7.0，有利于提高L-谷氨酰胺产量 C. 通过电子显微镜观察，可以判断发酵过程中是否发生球状细菌污染 D. 发酵结束后，采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥即可获得产品 4. 人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是（　　） A. 对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌 B. 使用无菌棉拭子从皮肤表面取样 C. 用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布 D. 观察菌落的形态和颜色等进行初步判断 5. 微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（　　） A. ①②⑤⑥ B. ③④⑥⑦ C. ①②⑦⑧ D. ①③④⑤ 6. 丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如下图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（ ） A. 提供适宜的温度，将培养基的pH调至酸性，有利于降解菌的生长繁殖 B. 利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小 C. 配制以丙草胺为唯一氮源的选择培养基进行培养，可以提高降解菌的浓度 D. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个 7. 青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法错误的是（ ） A. 发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖 B. 可用深层通气液体发酵技术提高产量 C. 选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中 D. 青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌 8. 含硫蛋白在微生物的作用下可产生H2S导致生活污水发臭。H2S可与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌能否产生H2S及两种菌的运动能力，用穿刺接种法，分别将两种菌接种在培养基上培养（如图）。下列叙述错误的是（ ） 注：两种菌繁殖速度相同。 A. 实验所用培养基应该添加含硫蛋白质和硫酸亚铁铵 B. 穿刺接种前后接种针都需要通过酒精灯火焰进行灼烧灭菌 C. 培养基可以水蒸气为介质，在压力为100kPa、温度为121℃，维持20min灭菌 D. 乙的分布面积大，说明其产H2S的能力远高于甲 9. 兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（ ） A. ①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块 B. ②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组 C. 3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1 D. 百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体 10. 迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时，先诱导外植体形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量。下列叙述正确的是（ ） A. 迷迭香顶端茎段的机械组织最适合用作外植体 B. 诱导愈伤组织时需加入NAA和脱落酸 C. 悬浮培养时需将输导组织打散成单个细胞或较小的细胞团 D. 茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合成速率 11. 研究者拟通过有性杂交的方法将簇毛麦（2n=14）的优良性状导入普通小麦（2n=42）中。用簇毛麦花粉给数以千计的小麦小花授粉，10天后只发现两个杂种幼胚，将其离体培养，产生愈伤组织，进而获得含28条染色体的大量杂种植株。下列叙述错误的是（ ） A. 簇毛麦与小麦之间存在生殖隔离 B. 培养过程中需用不同类型的MS培养基 C. 杂种植株减数分裂时染色体能正常联会 D. 杂种植株的染色体加倍后能产生可育植株 12. 东云系多肉植物的繁殖率和叶插率都较低。研究人员以东云系多肉植物品种HBG和阿姆斯特壮为实验材料进行植物组织培养，探究外植体选取部位对东云系多肉植物污染率和成活率的影响，实验结果如表。下列叙述正确的是（ ） 外植体 污染率/% 成活率/% HBG 阿姆斯特壮 HBG 阿姆斯特壮 叶片 56.67 70.00 26.67 16.67 嫩芽 23.33 20.00 46.46 53.33 花芽 16.67 13.33 56.67 60.00 A. 实验所用叶片、嫩芽和花芽经过灭菌后才能进行培养 B. HBG叶片经诱导后形成愈伤组织时需要用液体培养基 C. 东云系多肉植物可能因为叶片污染率高导致叶插成活率低 D. 由表可知东云系多肉植物进行植物组织培养时优选部位为叶片 13. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B. 过程②中常采用PEG诱导原生质体融合 C. 过程④和⑤的培养基中均只要添加IBA和NAA D. 可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 14. 下图为利用体细胞诱变技术获得抗除草剂白三叶草的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 该育种过程所依据的原理有基因突变和植物细胞的全能性 B. 为了获取愈伤组织细胞，培养白三叶草组织细胞的培养基为固体培养基 C. 白三叶草愈伤组织和胚状体的细胞中DNA和RNA种类相同 D. 过程③通常采用的筛选方法是向白三叶草幼苗喷洒适宜浓度的除草剂 15. 某小组以拟南芥原生质体为材料，研究了生长素（IAA）、组蛋白乙酰化及R基因对原生质体形成愈伤组织的影响。野生型（WT）和R基因突变型（rr）的原生质体分别经下表不同条件培养相同时间后，检测培养材料中R基因表达量，并统计愈伤组织形成率，结果如图所示。据此推断，下列叙述正确的是（ ） 编号 原生质体 培养条件 ① WT 培养基 ② WT 培养基+合适浓度的IAA ③ rr 培养基 ④ rr 培养基+合适浓度的IAA ⑤ WT 培养基+组蛋白乙酰化抑制剂 A. 组蛋白乙酰化有利于WT原生质体形成愈伤组织 B. R基因通过促进IAA的合成提高愈伤组织形成率 C. 组蛋白乙酰化通过改变DNA碱基序列影响R基因表达量 D. 若用IAA合成抑制剂处理WT原生质体，愈伤组织形成率将升高 16. 下列有关体细胞克隆猕猴的叙述，错误的是（ ） A. 该技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性 B. 研究中需要使用成熟卵母细胞作为核移植的受体 C. 培育出的两只猕猴的基因组成几乎完全相同 D. 克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供了可能 17. 动物细胞培养时操作不当会造成“黑胶虫”细菌的污染，该菌对氯霉素敏感。下列叙述正确的是（ ） A. 配制细胞培养基时，加氯霉素后，湿热灭菌处理 B. 在加入氯霉素防治“黑胶虫”污染过程中，需要考虑细胞和细菌生长双重因素 C. 考察“黑胶虫”污染程度时，应取细胞培养液，直接涂布在平板上培养后计数 D. 采用更换培养基、胰蛋白酶处理和分瓶培养等操作可清除“黑胶虫”污染 18. 对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列叙述错误的是（ ） A. 在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B. 动物细胞培养应在CO2培养箱中进行，CO2的作用维持培养液的pH C. 为了防止动物细胞培养过程中受污染，可向培养液中加入适量的干扰素 D. 在合成培养基中，通常需加入血清等一些天然成分 19. 研究人员将猪胚胎细胞（a）中的细胞核取出，移植入一雌猪的去核卵母细胞（b）中，得到重构胚（c），经培养获得胚胎并移植到另一雌猪（d）体内进一步发育，获得克隆猪兰兰（e）。下列叙述正确的是（ ） A. 兰兰的细胞核内的全部基因都来自a，细胞质的全部基因来自a和b B. c经一系列增殖和分化形成e的过程中，细胞核起控制作用 C. d为胚胎发育提供遗传物质和其他适宜条件 D. e的形成过程中没经过受精作用，其体细胞中无同源染色体 20. 某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能的是（　　） A. 实验材料取自小鼠胚胎的脑组织 B. 为了防止污染将培养瓶瓶口密封 C. 血清经过高温处理后加入培养基 D. 所使用的培养基呈弱酸性 21. 干细胞治疗为骨缺损的临床治疗提供了新思路。为探究不同细胞共培养对脂肪干细胞分化为成骨细胞的影响，科研人员利用图1装置对细胞进行共培养，装置的上下层通过小孔连通，一段时间后检测脂肪干细胞成骨分化相对水平，结果如图2所示。 下列相关叙述错误的是（ ） A. 除a组外，b、c、d组中的培养液均含有促进成骨分化的相关因子 B. 与a组相比，b、c、d组脂肪干细胞的成骨分化相关基因的表达存在差异 C. 相对于血管内皮细胞，与成纤维细胞的共培养更有利于脂肪干细胞的成骨分化 D. 成纤维细胞和血管内皮细胞通过分泌相关细胞因子促进了脂肪干细胞的成骨分化 22. 下列有关动物细胞工程的叙述，正确的是（ ） A. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础 B. 单克隆抗体制备过程，第一次筛选的目的是获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞 C. 造血干细胞、精原干细胞、胚胎干细胞和神经干细胞均属于成体干细胞 D. ES细胞在体外可发育成心肌细胞、血细胞等，但不能分化成神经元 23. 下列植物组织培养技术和单克隆抗体技术的叙述，正确的是（ ） A. 利用的原理均是细胞的全能性 B. 使用的培养基均需添加葡萄糖和血清 C. 培养时的温度和pH均相同 D. 产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力 24. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体 才能获得后代。下图列举了几项技术成果。 下列叙述正确的是 （ ） A. 经胚胎移植产生的后代与受体均保持一致 B. ①需获得MII期的去核卵母细胞 C. ②能大幅改良动物性状 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 25. 下列有关牛体外受精的叙述，正确的是（ ） A. 新鲜的精液经离心后，取上清液参与体外受精 B. 从卵巢中取出的卵母细胞，可与精子结合完成受精 C. 体外受精可采用高速离心诱导精卵结合 D. 精子入卵后，卵细胞膜也会发生生理反应，阻止其他精子进入 26. 雌性小鼠在精子入卵后，被激活的卵子会完成MII排出第二极体（如图），第二极体仅与受精卵分裂形成的2个子细胞之一接触。在甲时期去除第二极体会导致胚胎明显缩小，不能正常存活，这一异常可通过向细胞1中注射第二极体的细胞提取液加以改善。在乙时期后去除第二极体对胚胎发育无显著影响。下列叙述错误的是（　　） A. 极体的形成与减数分裂时细胞质不均等分裂有关 B. MII的过程中不会发生染色体DNA的复制 C. 胚胎细胞与第二极体间可能进行物质交换与信息交流 D. 第二极体会被保留成为胚胎的组成部分以发挥重要作用 27. 研究者探究不同浓度的雌激素甲对牛的卵母细胞和受精卵在体外发育的影响，实验结果如下表所示。根据实验数据，下列叙述错误的是（ ） 甲的浓度（μg/mL） 卵母细胞（个） 第一极体排出（个） 成熟率（%） 卵裂数（个） 卵裂率（％） 0 106 70 66.0 28 40.0 1 120 79 65.8 46 58.2 10 113 53 46.9 15 28.3 100 112 48 42.8 5 10.4 A. 实验结果说明甲抑制卵裂过程 B. 甲浓度过高抑制第一极体的排出 C. 添加1μg/mL的甲可提高受精后胚胎发育能力 D. 本实验中，以第一极体的排出作为卵母细胞成熟的判断标准 28. 波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（ ） A. 选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理 B. 胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测 C. 普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体 D. 生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选 29. 甘加藏羊是甘肃高寒牧区的优良品种，是季节性发情动物，每年产羔一次，每胎一羔，繁殖率较低。为促进畜牧业发展，研究人员通过体外受精、胚胎移植等胚胎工程技术提高藏羊的繁殖率，流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 藏羊甲需用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 B. 藏羊乙的获能精子能与刚采集到的藏羊甲的卵母细胞受精 C. 受体藏羊丙需和藏羊甲进行同期发情处理 D. 后代丁的遗传物质来源于藏羊甲和藏羊乙 30. 治疗性克隆的一般流程是把患者（供体）体细胞移植到去核卵母细胞中形成重构胚，再把重构胚体外培养到囊胚，然后从中分离出ES细胞，并诱导ES细胞定向分化为所需的特定细胞类型用于移植。下列说法错误的是（ ） A. 供体细胞注入去核卵母细胞后还需诱导融合 B. ES细胞在核遗传上和供体细胞相同 C. 治疗性克隆是治疗遗传病的根本措施 D. 治疗性克隆可解决器官移植时的免疫排斥问题 31. 基于AI（人工智能）的蛋白质设计方法可以利用现有蛋白质数据库以及机器深度“学习算法”来预测新型蛋白质的结构及功能。下列说法错误的是（ ） A. AI可帮助人们更深入了解蛋白质的结构与功能关系 B. AI预测新型蛋白质的结构和功能依据的原理是中心法则 C. 可通过改造或合成基因来获得AI设计的蛋白质 D. AI可帮助人们高效地设计出自然界没有的蛋白质 32. 蛛丝蛋白是一种特殊纤维蛋白，具有强度高、韧性大等特点，在人工肌腱等医学领域有着诱人的前景。某研究小组提取一种丝绒蜘蛛中的蛛丝蛋白基因，将其导入大肠杆菌生产蛛丝蛋白。下列叙述正确的是（ ） A. 构建蛛丝蛋白基因表达载体需要DNA聚合酶 B. 可通过显微注射的方法将蛛丝蛋白基因导入大肠杆菌 C. 基因表达载体上的复制原点可调控蛛丝蛋白基因的表达 D. 可通过蛋白质工程设计与改造蛛丝蛋白的结构以增强其韧性 33. 用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TerR）作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述正确的是（ ） A. 若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物一定相同 B. 若用PvuI酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，一定含有目的基因 C. 若用SphI酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D. 若用SphI酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落 34. 关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”(实验I)和“DNA的粗提取与鉴定”(实验Ⅱ)的实验操作，下列相关叙述正确的是（ ） A. 实验I中，PCR实验所需的移液器、枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理 B. 实验I中，将扩增得到的PCR产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源 C. 实验Ⅱ中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的DNA D. 实验Ⅱ中，将白色丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定DNA 35. “DNA粗提取与鉴定”的操作步骤为研磨→除杂→析出→鉴定。某研究组欲探究不同除杂方法对实验结果的影响（如下表）。下列叙述正确的是（ ） 除杂方法 沉淀质量（g） DNA浓度（ng·μL-1） OD260/OD280 二苯胺鉴定 离心 0.0680 81.50 1.56 蓝色 4℃冰箱静置 0.1028 336.4 1.41 蓝色 注：OD260与OD280的比值可检查DNA纯度；纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质污染时，这一比值会明显降低。 A. 猪血、菜花、草莓均可作为提取DNA的材料 B. 对研磨液进行离心的目的是加速DNA的沉淀 C. 离心法可以获得的DNA纯度较低 D. 析出时的离心转速明显高于除杂时 36. 某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是（ ） A. 增加模板DNA的量 B. 延长热变性的时间 C. 延长延伸的时间 D. 提高复性的温度 37. 最早的双脱氧测序法是PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸（ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP），子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧腺苷三磷酸（dATP），继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 上述PCR反应体系中加入两种引物 B. 电泳时产物的片段越小，迁移速率越慢 C. 5'-CTACCCGTGAT-3'为对照个体的一段序列 D. 患者该段序列中某位点的碱基C突变为G 38. 下列有关生物技术的安全性和伦理问题的观点，正确的是（ ） A. 可广泛利用体外受精技术设计试管婴儿的性别 B. 应基于科学和理性来讨论转基因作物的安全性问题 C. 食品中若含有食品添加剂，则该食品的安全性难以保障 D. 通过基因筛查来禁止重大疾病基因携带者就业 39. 社会上流传着一些与生物有关的说法，有些有一定的科学依据，有些违反生物学原理。以下说法中有科学依据的是（　　） A. 长时间炖煮会破坏食物中的一些维生素 B. 转基因抗虫棉能杀死害虫就一定对人有毒 C. 消毒液能杀菌，可用来清除人体内新冠病毒 D. 如果孩子的血型和父母都不一样，肯定不是亲生的 40. 依据《中华人民共和国生物安全法》，生物安全是指国家有效防范和应对危险生物因子及相关因素威胁，生物技术能够稳定健康发展，人民生命健康和生态系统相对处于没有危险和不受威胁的状态，生物领域具备维护国家安全和持续发展的能力。下列叙述错误的是（ ） A. 高致病性微生物须在高等级生物安全实验室中开展实验活动 B. 生物技术可广泛应用在人类自身基因组改造和新物种创造中 C. 外来入侵物种可能增加本土食物来源却给自然生态造成破坏 D. 动物饲料中的抗生素会通过食物链使人体微生物耐药性增强 二、选择题：本题共5小题，每小题2分，共10分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项符合题目要求。全选对者得2分，选对但不全的得1分，有错选得0分。 41. 某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌，醋醅含有醋酸菌；糖化即淀粉水解过程。下列叙述正确的是（ ） A. 糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化和灭菌 B. 发酵原理是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸 C. 醋酸发酵过程中经常翻动发酵物，可控制发酵温度和改善通气状况 D. 啤酒酿造流程中适当增加溶解氧会延长发酵时间 42. 植物细胞悬浮培养技术在生产中已得到应用。某兴趣小组尝试利用该技术培养胡萝卜细胞并获取番茄红素，设计了如下图实验流程和培养装置，请同学们进行评议。下列评议合理的是（ ） A. 实验流程中应该用蛋白酶处理愈伤组织，制备悬浮细胞 B. 装置中的充气管应置于液面上方，该管可同时作为排气管 C. 装置充气口需要增设无菌滤器，用于防止杂菌污染培养液 D. 细胞培养需要适宜的温度，装置需增设温度监测和控制设备 43. 某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S，结构蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用如图杂交瘤技术制备了抗S单克隆抗体。下列叙述正确的是（ ） A. 常利用高Ca2+-高pH法将B淋巴细胞与分散骨髓瘤细胞融合 B. 制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体 C. 用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，但不能冻存 D. 单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白 44. 科学家将与细胞的脱分化有关的基因借助逆转录病毒导入小鼠成纤维细胞，获得了iPS细胞。对iPS细胞进行定向诱导获得的细胞可用于治疗某些疾病。下列叙述正确的是（ ） A. 与造血干细胞相比，iPS细胞的分化程度更高 B. iPS细胞需要培养在含95%空气和5%CO2的混合气体环境中 C. 上述过程的外源基因经显微注射法导入小鼠成纤维细胞 D. 用iPS细胞治疗疾病存在导致肿瘤发生的风险 45. 某小组通过PCR获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（如图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述正确的是（ ） 注：假设引物长度为8个碱基，短于实际长度。 A. 其中一个引物序列为5'-TGCGCAGT-3' B. 步骤①所用的酶是NheI和CfoI C. 用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了两个片段 D. 酶切片段和载体连接时，只能用T4DNA连接酶，不能用E．coliDNA连接酶 三、非选择题：本题共5小题，共50分。 46. 苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。某研究小组准备依据图1操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株。回答下列问题。 （1）分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成_________的子细胞群体，称为菌落。 （2）苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有________。实验所用的培养皿应5～8套包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入_______内，在160~170℃灭菌2h。 （3）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________（填“增加”或“降低”），以达到富集苯酚降解菌的目的。若图1平板中菌落过于密集，应进一步______，以便于菌落计数与分离。 （4）下图2为平板划线法示意图，该方法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种______分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。在图2中______（填序号）区域更易获得单菌落。 （5）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为_______。如果废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释_______（填序号：①5；②10；③20）倍后，再进行比色。 管号 1 2 3 4 5 6 苯酚浓度 1.0mg·L-1 47. 在肿瘤患者的治疗中，被动免疫治疗是被动地将具有抗肿瘤活性的免疫制剂或细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，该治疗方案适用于肿瘤晚期患者，主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类，其中过继性细胞治疗相关过程如图。回答下列问题。 （1）在单克隆抗体治疗中，为了获取能产生抗肿瘤细胞的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。筛选所用的培养基按功能分类属于_________。筛选出来的杂交瘤细胞进行_________才可以获得能分泌所需抗体的细胞。 （2）科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合，制成了ADC．ADC由单克隆抗体、细胞毒素和_________组成。 （3）过继性细胞治疗中，从肿瘤患者体内获取的免疫细胞能够特异性地识别并处理肿瘤细胞，该种细胞是_________。将分离出来的免疫细胞进行诱导培养，但培养过程中会出现分裂受阻，其原因主要有_________（答出两点即可）；培养过程中出现_________现象时，可用酶处理贴壁细胞使之分散成单个细胞后，再进行分瓶培养，称为_________。 （4）过继性细胞治疗能有效避免免疫排斥，其原因是以患者自体免疫细胞进行诱导培养得到的免疫细胞与患者细胞的_________抗原相同。 48. 我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图。回答下列问题。 （1）卵细胞转化成phESC相当于植物组织培养中的________过程。 （2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，此卵母细胞应体外培养到________期。在对卵母细胞进行去核时，________（填“能”或“不能”）采用紫外线短期照射的方法，得到的重构胚通常需要发育到________阶段才能进行胚胎移植。胚胎移植的实质是早期胚胎在________条件下空间位置的转移。 （3）图中“甲”为_________胚，聚集在该胚胎一端的细胞，将来发育成________，其余细胞发育成_________。 （4）不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为_______。 49. 新城疫病毒可以引起家禽急性败血性传染病，我国科学家将该病毒相关基因改造为r2HN基因，使其在水稻胚乳特异表达，制备获得r2HN疫苗，并对其免疫效果进行了检测。回答下列问题。 （1）实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如图，其中GtP为启动子，若使r2HN基因仅在水稻胚乳表达，GtP应为_______。Nos为终止子，其作用为________。r2HN基因内部不含载体的限制酶识别位点，因此，可选择限制酶________对r2HN基因与载体进行酶切，用于表达载体的构建。 注：KpnI、HindⅢ、SacI和EcoRI标注的位点为各限制酶的识别位点。 （2）利用_________方法将r2HIN基因导入水稻愈伤组织细胞，在实验操作中，需将r2HN基因插入_________中。 （3）为检测r2HN表达情况，可通过PCR技术检测_________，通过_________技术检测是否翻译出r2HN蛋白。 （4）获得转基因植株后，通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。此类植株自交一代后，r2HN纯合体植株的占比为________。 （5）利用水稻作为生物反应器生产r2HN疫苗的优点是________。 A. 生产成本低 B. 种子蛋白易纯化 C. 水稻自花传粉不易发生基因污染 50. PCR技术对于目的基因的定点诱变是非常重要的，目的基因的不同位置突变需求往往可以采用不同的策略。回答下列问题。 （1）用PCR对平板上长出菌落进行鉴定时，某种引物共用31个，则目的基因最多扩增了________次。 （2）若突变的碱基位于目的基因的末端，可以直接在设计特异性引物时直接予以考虑，但是最好不要太靠近_______端，否则Taq酶的延伸效率偏低，甚至无法延伸。 （3）若突变碱基位于目的基因某一侧，可以采用如图1所示“大引物PCR技术”，在图1获取突变基因过程中，需要以下三种引物： 引物A：5'-CCCCAACCGGAAAGTGTCA-3'（下划线字母为突变碱基） 引物B：5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3'（下划线部分为HindⅢ识别序列） 引物C：5-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3'（下划线部分为SacI识别序列） PCR1中使用的引物有_________（填字母）和_________（填字母） PCR2中使用的引物有________（填字母）和图中大引物的________（填“①”或“②”）链。 （4）若突变碱基位于目的基因中央时，可以采用如图2所示的PCR技术，图2中4次PCR对引物的使用不完全相同。请完成PCR中引物的选择。 ①PCR1：引物A和B； ②PCR2：引物C和D； ③PCR3：_________； ④PCR4：_________。 PCR1和PCR2_______（填“能”或“不能”）在同一个反应体系里面进行。 注:图中“”为碱基序列变化点。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $