精品解析：天津市河东区第八十二中学2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题

启用前保密 2024-2025学年第二学期河东区联考高二年级生物学科期中检测 时间：60分钟；满分100分 一、选择题（共12题，每题4分，满分48分） 1. 如下是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是（ ） A. 挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗 B. 果酒制作时，将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约2/3的空间，有利于增加酵母菌数量 C. 为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种 D. 制作果醋时，利用了醋酸菌在无氧条件下产生了乙酸 【答案】C 【解析】 【分析】主要考查果酒和果醋的制作，A过程是酒精发酵，A过程完后，要进行果醋发酵，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是需氧菌，最适温度是30~35℃，故转入醋酸发酵后，要持续通气，提高温度。 【详解】 A、为防止杂菌污染，应该在冲洗之后去 除腐烂的籽粒和枝梗，A错误； B、果酒制作时，将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，可以防止发酵液的溢出，B错误； C、为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种，C正确。 D、制作果醋时，利用了醋酸菌在有氧条件下产生了乙酸，D错误。 故选C。 2. 随着工业的发展，土壤重金属污染日益严重，对动植物的生长有严重的危害作用。科研人员欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，部分实验流程如图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 选取工厂附近的菜田土更容易获得目的菌 B. 若接种I是平板划线法，则下一次划线需要从上一次划线的末端开始 C. 固体培养基中需要添加适量重金属铬，以达到筛选的目的 D. 图中筛选得到的菌株对含重金属铬的土壤具有耐受性和修复能力 【答案】D 【解析】 【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质，pH和O2的需求。筛选目的微生物最好应该到目的微生物含量丰富的地方取样，如果没有这样的环境，应该人为创造适宜其生长的环境。 【详解】A、获取目的菌应从富含该菌的环境中进行，本操作欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，工厂的重金属较多，故选取工厂附近的菜田土更容易获得目的菌，A正确； B、若接种I是平板划线法，则下一次划线需要从上一次划线的末端开始，保证下一次划线的菌落来自上一次的末端，这样随着划线次数增加，最终能得到单菌落，B正确； C、本操作欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，固体培养基中需要添加适量重金属铬，以达到筛选的目的，C正确； D、图中筛选得到的菌株对含重金属铬的土壤具有耐受性，但不一定具有修复能力，还需通过实验进一步验证，D错误。 故选D。 3. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤 B. 图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行 C. 若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株体细胞染色体数目最多可达到64条 D. 病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，病斑面积占叶片总面积比例最小的植株抗病性最强 【答案】B 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质；植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍； 图谱分析，4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，说明是杂种细胞，而1、2、3号个体只有紫罗兰中的蛋白质，说明不是杂种细胞。 【详解】A、图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤，其中原生质体融合过程依赖膜的流动性实现，A正确； B、为保证组织细胞的活性，图1过程①应在等渗或略微高渗的溶液中进行，过程②应在液体培养基中进行，B错误； C、若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株是杂种植株，其细胞在有丝分裂后期染色体数目为64条，C正确； D、病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，若病斑面积占叶片总面积比例越小，则说明该植株抗病性越强，即病斑面积占叶片总面积比例最小的植株是抗病性最强的个体，D正确。 故选B。 4. 马铃薯在进行无性繁殖过程中，感染的病毒会在体内逐年积累，导致产量降低、品质变差。培育高品质马铃薯的流程如下：接种马铃薯幼嫩的茎段→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。下列叙述正确的是（　　） A. 马铃薯在无性生殖过程中不会产生可遗传变异 B. 该过程的原理是植物细胞核的全能性 C. 诱导生芽和生根所需生长素和细胞分裂素的含量比相同 D. 幼嫩茎段接种前用70%的酒精和次氯酸钠进行消毒处理 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养技术： （1）过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→脱分化形成愈伤组织→再分化形成胚状体→植株 (新植体)。 (2)原理：植物细胞的全能性。 （3）条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如温度、光照、pH和无菌环境等）； ②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素)。 【详解】A、利用植物组织培养技术培养马铃薯属于无性繁殖，无性繁殖过程中可能会产生基因突变，基因突变属于可遗传变异，A错误； B、植物组织培养的原理是利用植物细胞的全能性，B错误； C、诱导生芽和生根所需生长素和细胞分裂素的含量比不相同，C错误； D、幼嫩茎段接种前用70%的酒精和次氯酸钠进行消毒处理，D正确。 故选D。 5. 下列有关植物细胞工程应用的叙述，不正确的是（ ） A. 利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种 B. 组织培养技术获得的子代可保持亲本的优良性状 C. 利用植物组织培养技术获得紫草素，实现了细胞产物的工厂化生产 D. 植物体细胞杂交技术，能克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍 【答案】A 【解析】 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、因为分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，所以将分生组织（如根尖、茎尖）进行离体培养能获得脱毒植株，但不能获得抗病毒的新品种，A错误； B、利用植物组织培养技术获得子代的过程属于无性生殖，因此能保持亲本的优良性状，该过程的原理是植物细胞的全能性，B正确； C、组织培养技术除了在农业生产上的应用外，还可广泛应用于另一个重要的领域，即细胞产物的工厂化生产，如利用细胞培养技术可大量获得紫草素，C正确； D、白菜和甘蓝不属于同一物种，它们之间存在生殖隔离，因此利用植物体细胞杂交技术可培育出“白菜一甘蓝”，该技术能够克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，D正确。 故选A。 6. 体外动物细胞培养制造出的细胞培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细胞生长基质，其表面能使细胞贴附。下列叙述正确的是（　　） A. ①过程可用机械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等处理的方法获得细胞悬液 B. ③过程中加入微载体为细胞提供更大附着面积，使细胞间不出现接触抑制，产量增加 C. ③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细胞时既要提供O2也要提供CO2 D. 肌肉干细胞属于成体干细胞，能够分化成特定的细胞和组织，具有全能性 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、①过程为制备细胞悬液的过程，可用机械的方法或用胰蛋白酶处理的方法获得细胞悬液，胃蛋白酶催化的酸性环境对细胞有害，A错误； B、③过程中加入微载体为细胞提供了更大的附着面积，但细胞间会出现接触抑制，B错误； C、③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细胞时提供95%空气+5%CO2，C正确； D、肌肉干细胞属于成体干细胞，能够分化成特定的细胞和组织，但不具有发育成完整个体的能力，不具有全能性，D错误。 故选C。 7. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ ） A. 组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程 B. ①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞突变为iPS细胞 C. ③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合 D. 图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术 【答案】A 【解析】 【分析】生物体基因的碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化的现象，叫作表观遗传；除了DNA甲基化，构成染色体的组蛋白发生甲基化、乙酰化等修饰也会影响基因的表达。 【详解】A、结合题图，重构胚中在加入Kdm4d的mRNA和TSA后，发育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程，A正确； B、①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞脱分化为iPS细胞，并未发生突变，B错误； C、③为动物细胞融合的过程，诱导动物细胞发生融合所用的是灭活的病毒，C错误； D、图示流程运用了体细胞核移植、胚胎移植等技术，并未运用重组 DNA技术（基因工程中核心技术），D错误。 故选A。 8. “嵌合体”是指由两个或两个以上具有不同遗传物质的细胞系形成的综合体。某大学利用二倍体小鼠和相应生物技术成功培育出作为科研动物的“嵌合体小鼠”。下列相关叙述正确的是（ ） A. 该实验成功的技术基础是动物细胞培养和动物细胞融合 B. “嵌合体小鼠”依然是二倍体 C. 图中囊胚的细胞基因型都相同 D. 代孕母鼠不需同期发情处理操作 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 【详解】A、由题图可知，白鼠的8细胞胚和黑鼠的8细胞胚合并形成16细胞胚，后经过胚胎发育过程形成囊胚，然后植入代孕母鼠，分娩得到嵌合体小鼠。该实验过程中没有进行动物细胞融合，A错误； B、嵌合体小鼠是由白鼠的8细胞胚和黑鼠的8细胞胚合并形成的，没有发生动物细胞融合，因此嵌合体小鼠仍为二倍体，B正确； C、图中囊胚是由白鼠的8细胞胚和黑鼠的8细胞胚合并形成的，其基因型不一定相同，C错误； D、胚胎移植时，代孕母鼠和供体母鼠需进行同期发情处理，使同种动物的供、受体生殖器官的生理变化相同，以便为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境，D错误。 故选B。 9. “工欲善其事，必先利其器”。下列有关重组DNA技术的基本工具的相关表述正确的是（　　） A. 限制酶均能特异性地识别6个核苷酸序列 B. DNA连接酶可以将配对的碱基通过氢键连接起来 C. 作为载体的质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因 D. —CATG↓—和—G↓GTACC—序列被限制酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接 【答案】C 【解析】 【分析】1、限制酶：（1）特点：能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。（2）识别序列：大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成。 2、DNA连接酶（将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键）：（1）种类： E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。（2）作用：E.coli DNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来，不能连接具有平末端的DNA片段；而T4 DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率相对较低。 3、载体（通常是利用质粒作为载体，将基因送入细胞）：（1）质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。（2）质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点供外源DNA片段(基因)插入其中。携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，能在细胞中进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制。这些质粒上常有特殊的标记基因，如四环素抗性基因、氨某青霉素抗性基因等，便于重组DNA分子的筛选。 【详解】A、切割质粒的限制酶具有特异性，不是都能特异性地识别6个核苷酸序列，A错误； B、DNA连接酶可以将配对的两个DNA片段之前通过磷酸二酯键连接起来，B错误； C、载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，C正确； D、—CATG↓—和—G↓GTACC—序列被限制酶切出的黏性末端不同，不能用DNA连接酶连接，D错误。 故选C。 10. 乳酸菌是乳酸的传统生产菌，但耐酸能力较差，影响产量。酿酒酵母耐酸能力较强，但不产生乳酸。研究者将乳酸菌内催化乳酸生成的乳酸脱氢酶基因（LDH）导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的酵母工程菌株。如图为通过双酶切构建重组质粒的过程。相关叙述正确的是（ ） A. 用PCR技术获取该目的基因时，经PCR技术扩增n次需引物1数量为（2n+1-2）/2个 B. 重组质粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体 C. 基因表达载体中应带有乳酸菌LDH基因自身的启动子 D. 酵母工程菌培育成功的标志是产生乳酸脱氢酶 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建（核心）；（3）将目的基因导入受体细胞；（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、PCR技术扩增n次，根据DNA分子半保留复制特点可知，共有2n-1对引物参与子代DNA分子的合成，故引物1的数量为2n-1=（2n+1-2）/2个，A正确； B、重组质粒含有尿嘧啶合成酶基因，故应以不能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体，便于后续筛选，B错误； C、构建基因表达载体时，目的基因应该插在启动子和终止子之间，据图可知，质粒上已经含有启动子，因此基因表达载体中不需要带有乳酸菌LDH基因自身的启动子，且酵母菌是真核生物，乳酸菌是原核生物，将原核基因导入真核细胞应该使用真核基因的启动子，C错误； D、由题意可知，酵母工程菌培育成功的标志是产生乳酸，D错误。 故选A。 11. 基因编辑是一种基因工程技术，CRISPR/Cas9基因编辑技术，可以实现对DNA的定点切割。系统主要由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白两部分组成，sgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，其机制如图所示。研究发现CRISPR-Cas9系统广泛存在于细菌细胞内，下列说法错误的是（ ） A. 细菌体内的Cas9能切割外源DNA保护自身，类似于限制酶 B. 有时sgRNA会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般sgRNA序列越短，脱靶率越低 C. Cas9对不同目标DNA进行编辑时，应使用不同的向导RNA D. sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键 【答案】B 【解析】 【分析】限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 【详解】A、Cas9蛋白切割特定基因位点，相当于限制酶，作用于脱氧核糖和磷酸之间的磷酸二酯键，A正确； B、CRISPR/Cas9技术编辑基因有时会因SgRNA错误结合而出现“脱靶”现象，SgRNA的序列越短，可识别的DNA上的特定碱基序列越短，越容易发生脱靶现象，即脱靶率越高，B错误； C、在对不同目标DNA进行编辑时，应使用Cas9蛋白和“不同”的sgRNA结合进而实现对不同基因的编辑，C正确； D、sgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，所以sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键，D正确。 故选B。 12. 干扰素是动物细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，可用于对抗病毒的感染和癌症，但体外保存相当困难。下图是利用蛋白质工程设计生产干扰素的流程图，错误的是（ ） A. 图中新的干扰素基因必须插入质粒上的起始密码子和终止密码子之间才能表达 B. 图中构建新的干扰素模型的主要依据是蛋白质的预期功能 C. 图中改造干扰素结构的实质是改造干扰素基因的结构 D. 图中各项技术环节中，有些需要通过基因工程实现 【答案】A 【解析】 【分析】蛋白质工程是将控制蛋白质的基因进行修饰改造或合成新的基因，然后运用基因工程合成新的蛋白质。蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。蛋白质工程得到的蛋白质一般不是天然存在的蛋白质。 【详解】A、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，从而驱动转录，而终止子提供转录终止的信号，因此图中新的干扰素基因必须插入质粒上的启动子和终止子之间才能表达，A错误； B、由题干可知，题图是利用蛋白质工程设计生产干扰素的流程图，而蛋白质工程的主要依据是蛋白质的预期功能，因此图中构建新的干扰素模型的主要依据是蛋白质的预期功能，B正确； C、蛋白质工程的实质是对基因进行操作，操作简单，且能遗传给后代，即图中改造干扰素结构的实质是改造干扰素基因的结构，C正确； D、合成新的干扰素基因后，要构建基因表达载体在受体细胞中表达，这属于基因工程技术，D正确。 故选A。 二、非选择题（共5题，满分52分） 13. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题： （1）已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是______。依照物理性质划分，驯化培养基属于______培养基，其中蛋白胨可提供______（至少答两点）。 （2）用于筛选的样品应来自______的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为_______。 （3）将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的多个相同培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中______，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了3个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、253，测得培养基C中菌落数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为______mL。该统计数据往往比活菌的实际数目______（填“多”或“少”）理由是______。 【答案】（1） ①. 敌敌畏 ②. 液体 ③. 氮源、碳源、维生素 （2） ①. 常年施用敌敌畏 ②. 平板划线法 （3） ①. 敌敌畏的剩余量 ②. 0.2 ③. 少 ④. 两个或多个细菌形成一个菌落 【解析】 【分析】培养基从功能上可划分为选择培养基和鉴别培养基，从物理性质上可划分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基，从成分上可划分为天然培养基和合成培养基。 【小问1详解】 本实验目的是筛选抗敌敌畏的微生物，故驯化时，培养液逐步加入的物质X是敌敌畏，这样操作的目的是筛选出高效分解敌敌畏的微生物；由图可知，该驯化培养基中并未加入凝固剂如琼脂等，故依照物理性质划分，驯化培养基属于液体培养基；蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，可以为微生物生长提供碳源、氮源和维生素。 【小问2详解】 该实验的目的是从土壤中筛选能能高效降解有机磷农药—敌敌畏的微生物，故用于筛选的样品应来自常年施用敌敌畏的土壤，这样能够增加获得目的菌的概率。结合题图可知，将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为平板划线法。 【小问3详解】 单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C，单位时间内剩余的敌敌畏越少，说明筛选出的微生物分解敌敌畏的能力越强，故通过测定培养瓶中敌敌畏的剩余量，可筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物。 微生物计数时应选择菌落数目在30～300之间的进行计数，统计菌落数分别为250、247、312、253，则菌落的平均数（250+247+253）÷3=250个，图中稀释倍数是104，由公式可知250÷Y×104=1.25×107个/mL可知，涂布菌液Y=0.2mL。 用该方法计数时，由于可能存在两个或多个细菌形成一个菌落，所以计数的微生物数目比实际活菌数少。 14. 下图为利用某种低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。请回答下列问题： （1）过程①应将甲、乙两种植物细胞分别置于含有________酶的________（选填“低渗”“等渗”或“高渗”）溶液中，以制备原生质体甲′和乙′。 （2）植物丙′的体细胞中有________个染色体组，得到的杂种植株，理论上是否可育？________。简要阐述理由：______。 （3）该育种技术涉及的生物学原理有________（填标号）。 ①细胞膜的流动性 ②细胞膜的选择透过性 ③植物细胞的全能性 ④细胞增殖 （4）利用单倍体育种技术，也可以利用上述低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁。下表是相关实验中的一些步骤，请根据题意完成以下表格。 实验目的 方法步骤要点 收集花粉 ①将品种甲和品种乙________后获得F1，收集F1的花粉 获得可增殖分化的细胞 ②利用________技术中的脱分化过程，获得________ 诱导单倍体幼苗的形成 ③通过改变培养基中的________，实现诱导分化 获得染色体加倍的植株 ④用________处理单倍体幼苗 获得新品种丁 筛选符合要求的植株，收获其所结种子 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶 ②. 等渗 （2） ①. 6 ②. 可育 ③. 杂种植株细胞中含有成对的同源染色体 （3）①③④ （4） ①. 植物体细胞杂交 ②. 花药离体培养（植物组织培养） ③. 愈伤组织 ④. 生长素与细胞分裂素比例 ⑤. 秋水仙素 【解析】 【分析】利用细胞工程技术培养杂种植株时，首先利用纤维素酶和果胶酶（①）处理细胞去除其细胞壁；甲乙两细胞的原生质体经诱导产生“甲'+乙'”，即融合的原生质体，其再生新的细胞壁，形成杂种细胞，杂种细胞经过②脱分化过程形成愈伤组织，再经过再分化过程形成植株丙'，该植株经过图中③过程的选择作用培养出高产耐酸植物丙。 【小问1详解】 由植物细胞变成原生质体，需要去掉细胞壁，细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，酶具有专一性，所以应用纤维素酶和果胶酶处理细胞壁，为保证原生质体正常的形态，含有纤维素酶和果胶酶的溶液浓度应与细胞内的溶液等渗。 【小问2详解】 植物丙'是甲和乙通过体细胞杂交形成的杂种植株，为异源多倍体，根据题意可知，某种耐酸植物甲（4N）有4个染色体组，高产植物乙（2N）有2个染色体组，因此丙'植株的体细胞中有6个染色体组，由于杂种植株细胞中含有成对的同源染色体，理论上是可育的。 【小问3详解】 原生质体融合过程利用了细胞膜的流动性原理，将杂种细胞培养为杂种植株利用了细胞增殖和植物体细胞具有全能性的原理，①③④正确，②错误。 故选①③④。 【小问4详解】 利用上述低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁，需要先将两种植物的优良基因集中到一个个体上，由于两种植物存在生殖隔离，因此不能杂交，故需要将品种甲和品种乙植物体细胞杂交后获得F1，收集F1的花粉；利用花药离体培养（植物组织培养）技术培养花粉，经过脱分化过程形成愈伤组织；由于不同阶段需要的生长素和细胞分裂素的比例不同，因此通过改变培养基中的生长素和细胞分裂素的浓度比例（激素比例），实现诱导分化；用一定浓度的秋水仙素（低温、温度骤变）处理单倍体幼苗，获得可育的品种，并通过筛选获得符合要求的植株。 15. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： （1）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行_______和__________，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 （2）图2方框内至少需要经过__________次筛选，才能获取单克隆杂交-杂交瘤细胞。单克隆杂交-杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，无菌无毒的环境，适宜的___________，和适宜的气体环境等。 （3）临床试验发现，从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体治疗效果大大降低。因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低_____________________。 （4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是___________。 【答案】（1） ①. 克隆化培养 ②. （专一）抗体检测 （2） ①. 2/两 ②. 温度、pH和渗透压 （3）免疫排斥反应 （4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先将特定抗原注射到小鼠体内，使其发生相应特异性免疫反应，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，再经两次筛选：第一次筛选是利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选是利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问1详解】 为选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞，进行克隆化培养。因此对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和（专一）抗体检测，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 【小问2详解】 图2方框内需要经过2次筛选，先筛选得到对长春碱免疫的B淋巴细胞，后筛选出杂交—杂交瘤细胞；单克隆杂交一杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，无菌、无毒的环境，适宜的温度、pH和渗透压，适宜的气体环境等。 【小问3详解】 由于从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体后会被人体免疫系统识别和清除，因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低免疫排斥反应。 【小问4详解】 双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，避免了对正常细胞的损伤，因而对人体的副作用更小。 16. 北极狼是起源于30万年前的冰河时期幸存者，有着驰骋于极寒雪域的生存能力，野性十足，更是身披“银光战袍”的闪电捕猎者。2022年6月10日，世界首例体细胞克隆北极狼在北京呱呱坠地。克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园引进的一只野生北极狼的皮肤样本，其培育过程如图所示。回答下列问题： （1）欲获得多个卵母细胞，可对比格犬进行的处理是________。 （2）选用去核卵母细胞与细胞核融合的原因是______。野生北极狼皮肤细胞可用于克隆的关键在于______。 （3）过程②激活重构胚的目的是________；早期胚胎中，将来发育成胎盘和胎膜的是________（填图中字母和名称）。若要充分利用图示早期胚胎，一次性获得多个克隆北极狼，可采用胚胎分割技术，该技术操作的大致过程是______。 （4）过程③中是否需要对代孕动物使用抗免疫排斥反应的药物，并说明理由。_________。 【答案】（1）注射一定量的促性腺激素 （2） ①. 卵母细胞体积大、营养丰富、更容易激活细胞核的全能性 ②. 北极狼皮肤细胞的细胞核中含有该物种一整套遗传信息 （3） ①. 使其完成细胞分裂和发育进程 ②. a，滋养层 ③. 采用机械方法将早期胚胎均分为两份或四份等 （4）不需要，代孕动物对移植入子宫的外来胚胎基本不会发生免疫排斥反应 【解析】 【分析】通过动物核移植技术得到克隆动物，动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。 【小问1详解】 若要获得多个卵母细胞，可对比格犬注射一定量的促性腺激素，以促进其超数排卵来实现。 【小问2详解】 之所以选用去核卵母细胞与细胞核融合，是由于卵母细胞体积大、营养丰富、更容易激活细胞核的全能性；而之所以选用野生北极狼细胞用于克隆的关键是由于北极狼皮肤细胞的细胞核中含有该物种一整套遗传信息。 【小问3详解】 过程②表示采用物理或化学方法激活重构胚，其目的是使其完成细胞分裂和发育进程；在早期胚胎中，a滋养层细胞会发育成胎盘和胎膜。若要充分利用图示早期胚胎，一次性获得多个克隆北极狼，可采用胚胎分割技术，该技术操作的大致过程是采用采用机械方法将早期胚胎的内细胞团均分为两份或四份。 【小问4详解】 过程③表示胚胎移植，由于代孕动物对移植入子宫的外来胚胎基本不会发生免疫排斥反应，所以在该过程中不需要对代孕动物使用抗免疫排斥反应的药物。 17. 金黄色葡萄球菌（简称Sa）是人体重要致病细菌、不规范使用抗生素易出现多重抗药性Sa。 （1）Sa产生抗药性可遗传变异的来源有______（至少答出2点）。 （2）推测Sa产生头孢霉素抗性与其R基因有关。为验证该推测，以图1中R基因的上、下游片段和质粒1构建质粒2，然后通过同源重组（质粒2中的上、下游片段分别与Sa基因组中R基因上、下游片段配对，并发生交换）敲除Sa的R基因。 ①根据图1信息，简述质粒2的构建过程（需包含所选引物和限制酶）：______，然后回收上、下游片段，再与SacII酶切质粒1所得大片段连接，获得质粒2。 ②用质粒2转化临床分离的具有头孢霉素抗性、对氯霉素敏感的Sa，然后涂布在含______的平板上，经培养获得含质粒2的Sa单菌落。 ③将②获得的单菌落多次传代以增加同源重组敲除R基因的几率，随后稀释涂布在含______的平板上，筛选并获得不再含有质粒2的菌落。从这些菌落分别挑取少许菌体，依次接种到含____________的平板上，若无法增殖，则对应菌落中细菌的R基因疑似被敲除。 ④以③获得的菌株基因组为模板，采用不同引物组合进行PCR扩增，电泳检测结果如图2，表明R基因已被敲除的是______。 【答案】（1）基因突变、基因重组、表观遗传等 （2） ①. 采用引物1和4进行PCR扩增（或采用引物1和3以及引物2和4分别进行PCR扩增），用SacⅡ和EcoRⅠ对PCR产物进行酶切 ②. 氯霉素（或氯霉素+头孢霉素） ③. 脱水四环素 ④. 头孢霉素 ⑤. D 【解析】 【分析】【关键能力】 （1）信息获取与加工 题干关键信息 所学知识 信息加工 判断可遗传变异的来源 可遗传变异来源有：基因突变、基因重组、染色体变异及表观遗传 Sa是原核生物，没有染色体 简述基因表达载体构建过程 利用PCR扩增目的基因时，需要目的基因两端的一段已知序列构建引物 质粒1及Sa的基因组中都含有SacII酶识别位点，质粒2上含有R基因上下游片段 筛选含质粒2的Sa菌落 用标记基因筛选目的菌 质粒2上有氯霉素抗性基因 筛选并获得不再含有质粒2的菌落 用标记基因筛选目的菌 质粒2中的上、下游片段分别与Sa基因组中R基因上、下游片段配对，并发生交换，R基因被交换至质粒2上，则Sa的基因组中没有了R基因；Sa产生头孢霉素抗性与其R基因有关，失去R基因，Sa没有头孢霉素抗性；质粒2上含有的Y是可被脱水四环素诱导表达的Sa致死基因，则含质粒2的Sa在含脱水四环素的培养基中会死亡 筛选R基因被敲除的Sa PCR扩增目的基因时需要目的基因两端的一段已知序列构建引物 发生同源重组时，质粒2中的上、下游片段分别与Sa基因组中R基因上、下游片段配对，并发生交换，敲除Sa的R基因，但R基因两端的上、下游片段仍在Sa基因组中 （2）逻辑推理与论证 【小问1详解】 Sa为原核生物产生抗药性可遗传变异的来源有基因突变、基因重组、表观遗传等。 【小问2详解】 ①由图1可知，质粒2上依次接有SacⅡ、EcoRⅠ、SacⅡ三个酶切位点，而质粒1上只有SacⅡ酶切位点，R基因的上下游依次含有SacⅡ、EcoRⅠ、EcoRⅠ、SacⅡ酶切位点，若要构建质粒2，可以采用引物1和4进行PCR扩增可得到整个R基因，以及上下游片段（或采用引物1和3以及引物2和4分别进行PCR扩增），用SacⅡ和EcoRⅠ对PCR产物进行酶切，然后回收上、下游片段，再与SacII酶切质粒1所得大片段连接，获得质粒2。 ②用质粒2转化临床分离的具有头孢霉素抗性、对氯霉素敏感的Sa，因为重组的质粒2上含有氯霉素抗性基因，所以可以将重组后的含质粒2的菌落涂布在含氯霉素（或氯霉素+头孢霉素）的平板上，能生存下来的菌落就是，含质粒2的Sa单菌落。 ③推测Sa产生头孢霉素抗性与其R基因有关。为验证该推测需要敲除R基因，因为质粒2上含有Y可被脱水四环素又到表达的Sa致死基因，所以将②获得的单菌落多次传代以增加同源重组敲除R基因的几率，随后稀释涂布在含脱水四环素的平板上，可诱导R基因死亡，若无法增殖，则对应菌落中细菌的R基因疑似被敲除。 ④以③获得的菌株基因组为模板，采用不同引物组合进行PCR扩增，电泳检测结果如图2，表明R基因已被敲除的是D组，由图1可知，R基因两侧含有的引物为2和3，所以扩增后含有引物2或3，或者2和3的可能含有R基因，所以表明R基因已被敲除的是D组。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 启用前保密 2024-2025学年第二学期河东区联考高二年级生物学科期中检测 时间：60分钟；满分100分 一、选择题（共12题，每题4分，满分48分） 1. 如下是利用微生物制作果酒、果醋的流程示意图，下列相关叙述正确的是（ ） A. 挑选葡萄时，去除腐烂的籽粒和枝梗后再冲洗 B. 果酒制作时，将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约2/3的空间，有利于增加酵母菌数量 C. 为提高果酒的品质，可在果汁中加入人工培养的菌种 D. 制作果醋时，利用了醋酸菌在无氧条件下产生了乙酸 2. 随着工业的发展，土壤重金属污染日益严重，对动植物的生长有严重的危害作用。科研人员欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，部分实验流程如图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 选取工厂附近的菜田土更容易获得目的菌 B. 若接种I是平板划线法，则下一次划线需要从上一次划线的末端开始 C. 固体培养基中需要添加适量重金属铬，以达到筛选的目的 D. 图中筛选得到的菌株对含重金属铬的土壤具有耐受性和修复能力 3. 花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤 B. 图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行 C. 若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株体细胞染色体数目最多可达到64条 D. 病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，病斑面积占叶片总面积比例最小的植株抗病性最强 4. 马铃薯在进行无性繁殖过程中，感染的病毒会在体内逐年积累，导致产量降低、品质变差。培育高品质马铃薯的流程如下：接种马铃薯幼嫩的茎段→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。下列叙述正确的是（　　） A. 马铃薯在无性生殖过程中不会产生可遗传变异 B. 该过程的原理是植物细胞核的全能性 C. 诱导生芽和生根所需生长素和细胞分裂素的含量比相同 D. 幼嫩茎段接种前用70%的酒精和次氯酸钠进行消毒处理 5. 下列有关植物细胞工程应用的叙述，不正确的是（ ） A. 利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种 B. 组织培养技术获得的子代可保持亲本的优良性状 C. 利用植物组织培养技术获得紫草素，实现了细胞产物的工厂化生产 D. 植物体细胞杂交技术，能克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍 6. 体外动物细胞培养制造出的细胞培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细胞生长基质，其表面能使细胞贴附。下列叙述正确的是（　　） A. ①过程可用机械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等处理的方法获得细胞悬液 B. ③过程中加入微载体为细胞提供更大附着面积，使细胞间不出现接触抑制，产量增加 C. ③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细胞时既要提供O2也要提供CO2 D. 肌肉干细胞属于成体干细胞，能够分化成特定的细胞和组织，具有全能性 7. 我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ ） A. 组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程 B. ①过程的小分子化合物诱导小鼠成纤维细胞突变为iPS细胞 C. ③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合 D. 图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术 8. “嵌合体”是指由两个或两个以上具有不同遗传物质的细胞系形成的综合体。某大学利用二倍体小鼠和相应生物技术成功培育出作为科研动物的“嵌合体小鼠”。下列相关叙述正确的是（ ） A. 该实验成功的技术基础是动物细胞培养和动物细胞融合 B. “嵌合体小鼠”依然是二倍体 C. 图中囊胚的细胞基因型都相同 D. 代孕母鼠不需同期发情处理操作 9. “工欲善其事，必先利其器”。下列有关重组DNA技术的基本工具的相关表述正确的是（　　） A. 限制酶均能特异性地识别6个核苷酸序列 B. DNA连接酶可以将配对的碱基通过氢键连接起来 C. 作为载体的质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因 D. —CATG↓—和—G↓GTACC—序列被限制酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接 10. 乳酸菌是乳酸的传统生产菌，但耐酸能力较差，影响产量。酿酒酵母耐酸能力较强，但不产生乳酸。研究者将乳酸菌内催化乳酸生成的乳酸脱氢酶基因（LDH）导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的酵母工程菌株。如图为通过双酶切构建重组质粒的过程。相关叙述正确的是（ ） A. 用PCR技术获取该目的基因时，经PCR技术扩增n次需引物1数量为（2n+1-2）/2个 B. 重组质粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株为受体 C. 基因表达载体中应带有乳酸菌LDH基因自身的启动子 D. 酵母工程菌培育成功的标志是产生乳酸脱氢酶 11. 基因编辑是一种基因工程技术，CRISPR/Cas9基因编辑技术，可以实现对DNA的定点切割。系统主要由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白两部分组成，sgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，其机制如图所示。研究发现CRISPR-Cas9系统广泛存在于细菌细胞内，下列说法错误的是（ ） A. 细菌体内的Cas9能切割外源DNA保护自身，类似于限制酶 B. 有时sgRNA会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般sgRNA序列越短，脱靶率越低 C. Cas9对不同目标DNA进行编辑时，应使用不同的向导RNA D. sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键 12. 干扰素是动物细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，可用于对抗病毒的感染和癌症，但体外保存相当困难。下图是利用蛋白质工程设计生产干扰素的流程图，错误的是（ ） A. 图中新的干扰素基因必须插入质粒上的起始密码子和终止密码子之间才能表达 B. 图中构建新的干扰素模型的主要依据是蛋白质的预期功能 C. 图中改造干扰素结构的实质是改造干扰素基因的结构 D. 图中各项技术环节中，有些需要通过基因工程实现 二、非选择题（共5题，满分52分） 13. 微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让其逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题： （1）已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是______。依照物理性质划分，驯化培养基属于______培养基，其中蛋白胨可提供______（至少答两点）。 （2）用于筛选的样品应来自______的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为_______。 （3）将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的多个相同培养基C，培养24小时后，通过测定培养基中______，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了3个平板培养基D，统计菌落数分别为250、247、253，测得培养基C中菌落数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为______mL。该统计数据往往比活菌的实际数目______（填“多”或“少”）理由是______。 14. 下图为利用某种低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。请回答下列问题： （1）过程①应将甲、乙两种植物细胞分别置于含有________酶的________（选填“低渗”“等渗”或“高渗”）溶液中，以制备原生质体甲′和乙′。 （2）植物丙′的体细胞中有________个染色体组，得到的杂种植株，理论上是否可育？________。简要阐述理由：______。 （3）该育种技术涉及的生物学原理有________（填标号）。 ①细胞膜的流动性 ②细胞膜的选择透过性 ③植物细胞的全能性 ④细胞增殖 （4）利用单倍体育种技术，也可以利用上述低产耐酸植物甲（4N）和高产不耐酸植物乙（2N）培育出高产耐酸的新品种丁。下表是相关实验中的一些步骤，请根据题意完成以下表格。 实验目的 方法步骤要点 收集花粉 ①将品种甲和品种乙________后获得F1，收集F1的花粉 获得可增殖分化的细胞 ②利用________技术中的脱分化过程，获得________ 诱导单倍体幼苗的形成 ③通过改变培养基中的________，实现诱导分化 获得染色体加倍的植株 ④用________处理单倍体幼苗 获得新品种丁 筛选符合要求的植株，收获其所结种子 15. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题： （1）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行_______和__________，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 （2）图2方框内至少需要经过__________次筛选，才能获取单克隆杂交-杂交瘤细胞。单克隆杂交-杂交瘤细胞在体外培养时，需要满足的条件是充足的营养，无菌无毒的环境，适宜的___________，和适宜的气体环境等。 （3）临床试验发现，从小鼠腹水中提取抗体具有外源性，直接注入人体治疗效果大大降低。因此鼠源性的双特异性单克隆抗体在注射到人体前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低_____________________。 （4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是___________。 16. 北极狼是起源于30万年前的冰河时期幸存者，有着驰骋于极寒雪域的生存能力，野性十足，更是身披“银光战袍”的闪电捕猎者。2022年6月10日，世界首例体细胞克隆北极狼在北京呱呱坠地。克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园引进的一只野生北极狼的皮肤样本，其培育过程如图所示。回答下列问题： （1）欲获得多个卵母细胞，可对比格犬进行的处理是________。 （2）选用去核卵母细胞与细胞核融合的原因是______。野生北极狼皮肤细胞可用于克隆的关键在于______。 （3）过程②激活重构胚的目的是________；早期胚胎中，将来发育成胎盘和胎膜的是________（填图中字母和名称）。若要充分利用图示早期胚胎，一次性获得多个克隆北极狼，可采用胚胎分割技术，该技术操作的大致过程是______。 （4）过程③中是否需要对代孕动物使用抗免疫排斥反应的药物，并说明理由。_________。 17. 金黄色葡萄球菌（简称Sa）是人体重要致病细菌、不规范使用抗生素易出现多重抗药性Sa。 （1）Sa产生抗药性可遗传变异的来源有______（至少答出2点）。 （2）推测Sa产生头孢霉素抗性与其R基因有关。为验证该推测，以图1中R基因的上、下游片段和质粒1构建质粒2，然后通过同源重组（质粒2中的上、下游片段分别与Sa基因组中R基因上、下游片段配对，并发生交换）敲除Sa的R基因。 ①根据图1信息，简述质粒2的构建过程（需包含所选引物和限制酶）：______，然后回收上、下游片段，再与SacII酶切质粒1所得大片段连接，获得质粒2。 ②用质粒2转化临床分离的具有头孢霉素抗性、对氯霉素敏感的Sa，然后涂布在含______的平板上，经培养获得含质粒2的Sa单菌落。 ③将②获得的单菌落多次传代以增加同源重组敲除R基因的几率，随后稀释涂布在含______的平板上，筛选并获得不再含有质粒2的菌落。从这些菌落分别挑取少许菌体，依次接种到含____________的平板上，若无法增殖，则对应菌落中细菌的R基因疑似被敲除。 ④以③获得的菌株基因组为模板，采用不同引物组合进行PCR扩增，电泳检测结果如图2，表明R基因已被敲除的是______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $