内蒙古自治区乌兰察布市察哈尔右翼前旗乌兰察布市衡水卓远中学2024-2025学年高二下学期6月期中生物试题

答案 一、单选题 1.【答案】C 【解析】乳酸菌发酵不产生气体，A错误；平板划线法不能计数，B错误；从题干中“作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质”可知，硫化氢气体是蛋白质分解后氨基酸的代谢产物之一，C正确；乳酸逐渐积累导致发酵液pH值逐渐降低后保持稳定，D错误。 2.【答案】C 【解析】由分析可知，a组为实验组，b组为对照组，A正确；为遵循对照实验的等量原则和单一变量原则，应向a、b中喷入等量该农药，再置于同一恒温培养箱中培养相同时间，B正确；检测该农药消失的情况，a组高压灭菌，b组不灭菌，预计a组该农药含量不变，b组的可能全部消失，也可能不变，要看土壤微生物是否能分解该农药，C错误；只用砂土，实验效果不如几种典型土壤混合后的好，应尽可能模拟自然环境，D正确。 3.【答案】D 【解析】农杆菌侵染双子叶植物是因为双子叶植物可以产生一种酚类化合物，但单子叶植物通常不能，所以农杆菌不会感染单子叶植物；因此，农杆菌转化不能用于将目标基因导入单子叶植物，A错误；利用农杆菌介导的矮牵牛转基因技术有两次转化，第一次是将含目的基因的重组Ti质粒导入Ca2+处理的农杆菌中，B错误；农杆菌中进入矮牵牛细胞的只有带着目的基因的T-DNA，农杆菌拟核DNA没有进入矮牵牛细胞，也不能和矮牵牛的核DNA发生基因重组，与矮牵牛的核DNA发生基因重组的是农杆菌质粒上的基因，C错误；检测转基因矮牵牛是否培育成功的第一步可以先先检测目的基因是否成功导入，可以采用PCR等技术，D正确。 4.【答案】A 【解析】根据题意可知，人脐带间充质干细胞可以分化成脂肪、肝、神经等多种组织细胞，故属于多能干细胞，A错误；胰蛋白酶可以降解细胞之间的胶原蛋白及其它成分，因此①过程需要加入胰蛋白酶，将人脐带组织碎块分散成单个细胞，B正确；②过程利用离心法将细胞和细胞培养液等其它成分分离，从而收集存在于试管底部的单个细胞，C正确；动物细胞培养过程中通常含有血清等天然成分，为动物细胞的增殖提供营养物质等，D正确。 5.【答案】B 【解析】甲试管中的液体是无菌水，不是液体培养基，目的是对样品进行稀释，A错误；可挑取图2中周围出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化，D错误。 6.【答案】D 【解析】由图可知，DHA油脂的产量随着发酵进程逐渐增加，生物量也随着发酵进程逐渐增加，它们的变化呈正相关，A正确；由图可知，生物量与DHA油脂的产量呈正相关，温度和溶解氧影响微生物的生长繁殖，进而影响DHA油脂的产量，B正确；发酵液中葡萄糖被微生物吸收用于呼吸作用产生能量，供其合成DHA油脂，C正确；DHA油脂是一种不饱和脂肪酸，含C、H、O不含N，所以在12～60h，DHA油脂的合成对碳源的需求高，不需要氮源，D错误。 7.【答案】B 【解析】用稀释涂布平板法时，当两个或多个细胞连在一起时也在培养基表面形成一个菌落，B错误。 8.【答案】C 【解析】该流程是利用植物组织培养技术得到的山药脱毒苗，植物组织培养技术体现了植物细胞具有全能性，A正确；芽尖等分生组织分裂旺盛，且含病毒少，取材时常选用其作为外植体，可减少病毒感染，B正确；外植体需要进行消毒处理，不能灭菌处理，灭菌处理会破坏外植体的活性，C错误；将外植体接种至固体培养基时，需注意方向不要倒插，倒插可能会导致外植体与培养基的接触不良，影响其对营养物质的吸收和利用。同时，倒插还可能使外植体的伤口部分暴露在空气中，增加感染的风险，D正确。 9.【答案】A 【解析】囊胚细胞的分化程度低于体细胞，囊胚细胞的全能性高于体细胞，在克隆模型猴时，利用囊胚细胞核移植比体细胞核移植更有优势，A正确；培养早期胚胎的培养基中需要有糖类、氨基酸等营养条件，同时也需提供气体环境：95％空气和5％CO2，B错误；胎移植的过程中，需要选择有健康的体质和正常繁殖能力的个体作为受体，C错误；为获得更多克隆猴，可以采用分割针或分割刀对早期胚胎进行分割，经移植获得同卵双胎或多胎，D错误。 10.【答案】B 【解析】由于引物只能引导子链从5＇到3＇，根据碱基互补配对原则，其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇，A正确；根据三种酶的酶切位点，左侧的黏性末端是使用NheI切割形成的，右边的黏性末端是用CfoI切割形成的，B错误；用步骤①的酶对载体进行酶切，使用了NheI和CfoI进行切割，根据他们的识别位点以及原本DNA的序列，切割之后至少获得了2个片段，C正确；图中形成的是黏性末端，而E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端，D正确。 11.【答案】B 【解析】工业化啤酒生产中，焙烤杀死种子胚但不使淀粉酶失活，A错误；啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵，B正确，D错误； 啤酒酿造的原理是酵母菌无氧呼吸生成酒精，需要提供无氧环境，因此不能打开发酵装置，C错误。 12.【答案】C 【解析】①过程为逆转录，催化①过程的酶是逆转录酶，A错误；催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，②过程由DNA单链合成双链的过程不需要耐高温，B错误；③过程不需要解旋酶的作用，是通过加热解旋的，C正确；对同一目的基因而言，通过 cDNA 过程获得和 PCR 过程获得的目的基因结构不完全相同，D错误。 13.【答案】B 【解析】酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，故米酒发酵液中冒出的“气泡”来源于酵母菌无氧呼吸和有氧呼吸，A错误；制作米酒利用的是酵母菌，添加“酵头”的目的是接种酿酒酵母，B正确；乳酸菌是厌氧菌，制作酸奶和泡菜利用的是乳酸菌，故酸奶和泡菜制作中均需要确保无氧呼吸，以保证乳酸菌的无氧呼吸，C错误；为避免杂菌污染，发酵前需要对器具等进行灭菌，但原料不需灭菌，D错误。 14.【答案】C 【解析】图1中溶液a是2 mol·L-1的NaCl溶液，A正确；图1所示操作的原理是DNA不能溶于酒精，而蛋白质等杂质能溶，B正确；图2试管1的作用是证明2 mol·L-1 NaCl溶液遇二苯胺不会出现蓝色，C错误；图2所示实验操作中有一处明显错误(试管2中未将DNA溶于2 mol·L-1的NaCl溶液中)，可能导致试管2中蓝色变化不明显，D正确。 15.【答案】C 【解析】—磷酸端为DNA链的5'端，—OH端为DNA链的3'端。进行PCR时，引物与模板链的3'端结合，因此在扩增OsMYB56时需要添加的引物是5'—CTTGGATGAT—3'和5'—TCTGTTGAAT—3'，C正确。 二、不定项选择题 16.【答案】ABD 【解析】图中基因的编码区存在外显子和内含子，因此该目的基因来源于真核生物，A错误；将重组DNA导入动物细胞(受精卵)常用显微注射法，B错误；用PCR技术扩增该基因时，dNTP可在形成磷酸二酯键时提供能量，C正确；限制酶Sma I的酶切位点在编码区，会破坏目的基因，所以不能用限制酶Sma I切割目的基因，D错误。 17.【答案】CD 【解析】由题意不能判断出该嗜热菌细胞壁的合成是否受青霉素的抑制。高温淀粉酶能在一定范围内耐高温，故在酶的分离提纯过程中，需要控制温度，保持酶的活性。 18.【答案】AD 【解析】过程①表示通过逆转录法合成目的基因，该过程是在体外进行的，不是在小菜蛾细胞的细胞核中进行的，A错误；目的基因是通过逆转录法获得的，该方法获得的目的基因不含启动子，因此过程②获取的CarE基因中不含启动子，B正确；将目的基因导入微生物细胞时采用感受态细胞法，感受态细胞可用CaCl2溶液制备，C正确；过程④需要进行鉴定，该过程获得的工程菌中都含有CarE基因，D错误。 19.【答案】CD 【解析】可以通过生物合成法、全化学合成法、半化学合成法来产生抗生素，其中生物合成法中可以通过工程菌制造法来产生，A不符合题意；克隆技术是可以克隆器官的，但是不可以进行人体克隆，禁止生殖性克隆人，B不符合题意；中国声明：在任何情况下，不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C符合题意。 20.【答案】BC 【解析】图中两种酶识别的序列不同，但酶切产物具有相同的末端，可用于构建重组DNA,A正确。泳道②是Xho I的酶切结果，共有2个酶切位点,断开了4个磷酸二酯键，B错误。若用两种限制酶同时切割该DNA，可将该DNA切成6个片段，如果6个片段分子大小均不同，则在泳道中将出现6个条带，如果其中有片段分子大小相同，则条带数目小于6,C错误。泳道①是SalⅠ的酶切结果,D正确。 三、非选择题 21.【答案】（1）遗传特性（或性状）DNA　　构建基因表达载体 （2）种子　　叶绿体属细胞质遗传（或母系遗传或位于细胞质中），可随卵细胞进入受精卵及种子中 （3）转基因技术的专利保护（或外源基因通过种子扩散，带来生态安全隐患） （4）启动子、目的基因、标记基因、终止子　　特定器官特异启动子　　　　能　　不具有　　通过喷施诱导剂激活RNAi—FLP基因，RNAi—FLP基因会抑制FLP基因表达，不能合成重组酶FLP，不能完成切割，种子基因组中的外源基因不被清除，从而获得转基因种子 【解析】（1）转基因技术能按照人们的愿望，赋予生物新的性状，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，转基因技术是在DNA分子水平上进行的设计和施工，其核心步骤是基因表达载体的构建。 （2）叶绿体属细胞质遗传（或母系遗传或位于细胞质中），可随卵细胞进入受精卵及种子中，叶绿体转基因技术不能阻止外源基因通过种子传播。 （3）“终结者”种子技术是通过植入“终结者基因”，阻滞种子胚胎后期发育，最后得到成熟但不育的种子，故就不能通过该种子扩散，避免了生态安全隐患问题。 （4）基因表达载体的必备组件包括启动子、目的基因、标记基因、终止子，由题图可知特异启动子驱动FLP基因表达产生重组酶。重组酶可以将“外源基因清除”调控组件将全部外源基因从花粉、种子和果实等特定器官中彻底清除，故剩余的序列为。农民播种经“外源基因清除”技术处理的转基因作物种子可以获得作物，但由于该种子已经将转基因清除，所以后代作物不具有转基因形状。科学家将RNAi—FLP基因（FLP基因的RNA干扰系统）插入到外源基因清除系统中，通过喷施诱导剂激活RNAi—FLP基因，RNAi—FLP基因会抑制FLP基因表达，不能合成重组酶FLP，不能完成切割，种子基因组中的外源基因不被清除，从而获得转基因种子。 22.【答案】（1）基本不会破坏牛奶的营养成分 （2）乙 （3）6.4×107　　小　　（形状、大小、颜色）不同 （4）B　　5或五 【解析】（1）牛奶用巴氏消毒法消毒的好处是该方法可以杀死牛奶中绝大多数的微生物，并且不会破坏牛奶的营养成分。 （2）对牛奶进行稀释涂布，应选的工具是涂布器，对应与图乙。 （3）依据图示可知，酸奶稀释了105倍，在恒温培养箱中培养一段时间后，3个平板上菌落数分别为65、63、64，则可以推测酸奶中每毫升含菌数为=(65+63+64) ÷3÷0.1×105=6.4×107个。由于有的菌落可能是由两个或多个菌体形成的，因此运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。如果在培养基上出现了形状、大小、颜色不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。 （4）平板划线法时，每次从上次划线的末端开始划线，划线时最后一区域不要与第一区域相连，故要进一步分离纯化菌种，应采用图3中B所示的划线分离操作。第一次划线之前需要灼烧，每次划线之后需要灼烧，故划线4次工具至少要灼烧5次。 23.【答案】（1）多种　　PEG融合法、电融合法和灭活的病毒诱导法 （2）未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞　　使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的　　癌胚抗原和长春碱　　（3）小 【解析】（1）经过程①注射癌胚抗原处理后小鼠在此前可能还接受过其他抗原，故产生的B淋巴细胞群能合成并分泌多种抗体；过程②诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法和灭活的病毒诱导法。 （2）过程③在HAT培养基上进行，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞（如B淋巴细胞-B淋巴细胞、骨髓瘤-骨髓瘤）都会死亡；先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，这是为了使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的；结合图示可知，该制备过程中分别注射了癌胚抗原和长春碱，故过程⑤⑥的操作目的是获取能分泌可同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的单克隆杂交一杂交瘤细胞。 （3）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，由于单克隆抗体的导向作用，不会杀伤正常细胞，故对人体的副作用小。 24.【答案】（1）细胞核、线粒体、叶绿体 （2）PmaCI和XbaI　　DNA连接酶 （3）氨苄青霉素　　引物　　1-4和6 （4）随着时间的变化，Z的类胡萝卜素的含量一直高于WT （5）抗原-抗体杂交 【解析】（1）莱茵衣藻是一种单细胞真核绿藻，含有DNA的细胞结构有细胞核、线粒体、叶绿体。 （2）由图1可知，应将pUCBKT-P的bkt基因切割下来拼接到pH105的启动子和终止子之间，所以应选择PmaC I和Xba I对质粒pUCBKT-P和pH105分别进行双酶切，并用DNA连接酶将bkt基因连入启动子与终止子之间。 （3）由图可知，构建的重组质粒含有氨苄青霉素抗性基因，所以将以上构建完成的基因表达载体导入Ca2+处理的大肠杆菌，在含氨苄青霉素的培基中培养一段时间后，挑选单菌落并进行菌落PCR，扩增时需提供与两条DNA模板链结合的2种引物，最终得到大小约为990bp的片段，如图2所示。结果显示，1-4和6号具有阳性条带，且条带长度符合预期，即为成功导入外源bkt基因的目的菌。 （4）依据同样的技术，科研人员获得同时转入bkt等多个外源基因的表达载体，导入衣藻细胞，经过筛选，获得了能够同时稳定表达以上外源目的基因的衣藻Z。测量野生型衣藻（WT）和转基因衣藻（Z）的类胡萝卜素含量，结果如图3，由此推测Z中的bkt基因的表达量比野生型高，其依据是随着时间的变化，Z的类胡萝卜素的含量一直高于WT。 （5）bkt酶的本质是蛋白质，目的是检测bkt基因是否表达，所以可以利用抗原-抗体杂交技术来分别检测野生型衣藻（WT）和转基因衣藻（Z）的bkt酶的含量，并做比较。 25.【答案】（1）生长素和细胞分裂素　　比例和使用顺序　　基因表达调控　　环境因素 （2）植物组织培养过程中离体培养植物器官、组织或细胞 　　可以保持母体优良品种的遗传特性　　高效快速地实现种苗的大量繁殖，受季节影响小 （3）去壁　　聚乙二醇或PEG　　高Ca2＋-高pH （4）m+n 【解析】（1）②是脱分化过程，③是再分化过程，图1中，启动②和③过程的关键植物激素是生长素和细胞分裂素；植物激素使用的比例和使用顺序会影响植物细胞的发育方向，如生长素和细胞分裂素比例高时利于生根；植物生长发育的调控，是由基因表达调控、激素调节和环境因素调节共同完成的。 （2）植物组织培养过程中离体培养植物器官、组织或细胞被称作外植体；利用图1组织培养技术，不仅可以保持母体优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖，受季节影响小，而且诱导变异也相对容易，为科研和生产带来了很大方便。 （3）据图可知，图2中①是指植物细胞去除细胞壁的过程，即去壁；②过程是诱导植物原生质体融合的过程，常利用的化学手段有聚乙二醇（PEG）和高Ca2＋-高pH处理。 （4）若人参细胞内有m条染色体，胡萝卜细胞内有n条染色体，则“人参—胡萝卜”融合细胞有m+n条染色体。 第1页 共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024-2025学年高二下学期期中考试 生物卷 一、单选题（共15小题，每题2分） 1.在中国南方，酸笋是一种非常受欢迎的食物，它具有独特的酸味和口感。在自然发酵过程中，酸笋中的乳酸菌作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质，形成了螺蛳粉的特殊风味。下列叙述正确的是（　　） A. 酸笋发酵过程中需要定期排气以确保发酵罐内压强稳定 B. 可采用平板划线法从发酵液中分离纯化乳酸菌并计数 C. 酸笋发酵中产生的硫化氢气体是蛋白质分解后含硫氨基酸的代谢产物之一 D. 随着发酵的进行，乳酸逐渐积累导致发酵液pH值逐渐升高后保持稳定 2.为了解土壤微生物是否能分解农药，并尽快得出实验结论，有人用某种农药进行了实验。取等量砂土分装于相同的两容器中，a组高压灭菌，b组不灭菌。下列有关叙述，不正确的是（　　） A. a组为实验组，b组为对照组 B. 向a、b中喷入等量该农药，再置于同一恒温培养箱中培养相同时间 C. 检测该农药消失的情况，预计a组该农药含量不变，b组的全部消失 D. 只用砂土，实验效果不如几种典型土壤混合后的好 3.科研团队利用农杆菌转化法将与植物花青素代谢相关的基因导入矮牵牛中，使它呈现出自然界没有的颜色变异。以下说法正确的是（　　） A. 在自然条件下，农杆菌能侵染单子叶植物和裸子植物，而对大多数双子叶植物没有侵染能力 B. 利用农杆菌介导的矮牵牛转基因技术有两次转化，第一次是将含目的基因的重组Ti质粒导入Mg2+处理的农杆菌中 C. 农杆菌的拟核DNA与矮牵牛的核DNA发生了基因重组 D. 检测转基因矮牵牛是否培育成功的第一步可以采用PCR等技术 4.人脐带间充质干细胞在特定诱导条件下，可分化为脂肪、肝、神经等多种组织细胞。下图表示培养人脐带间充质干细胞的大致过程。下列叙述错误的是（　　） A. 人脐带间充质干细胞属于一种iPS细胞 B. ①过程需要加入胰蛋白酶，将人脐带组织碎块分散成单个细胞 C. ②过程利用离心法收集存在于试管底部的单个细胞 D. ③过程加入的培养液中通常含有血清等天然成分 5.地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维素酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有纤维素作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用刚果红处理，看到如图2所示情况。下列有关叙述正确的是(　　) A. 甲试管中的液体是液体培养基，作用是富集培养，②过程是为了筛选单菌落 B. Ⅰ号培养基属于选择培养基，除需加入纤维素外，还需加入硝酸铵为其提供氮源 C. Ⅱ号培养基属于固体培养基，制备时应先灭菌再调节pH D. 可挑取图2中周围不出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化 6.利用某种微生物发酵生产DHA油脂，可获取DHA（一种不饱和脂肪酸）。下图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是（　　） A. DHA油脂的产量与生物量呈正相关 B. 温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量 C. 葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量 D. 12～60h，DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高 7.分离纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的叙述，错误的是(　　) A. 均将大肠杆菌接种在固体培养基的表面 B. 获得的每一个菌落均是由一个细菌繁殖而来的子细胞群 C. 都应在酒精灯火焰附近操作，以防止杂菌污染 D. 稀释分散菌种的原理不同，但均能达到纯化大肠杆菌的目的 8.采用植物组织培养技术得到的山药脱毒苗，可恢复其原有的优质高产特性，流程如下图，下列叙述错误的是（　　） A. 该技术体现了植物细胞具有全能性 B. 选择茎尖作为外植体可减少病毒感染 C. 外植体需要进行灭菌处理，否则会导致培养过程中外植体边缘污染 D. 将外植体接种至固体培养基时，需注意方向不要倒插 9.孤独症谱系障碍与基因S的变异有关，科研人员对猕猴的基因S进行编辑，首次获得孤独症模型猴，然后再通过动物细胞工程和胚胎工程技术获得更多克隆猴，下列叙述正确的是（　　） A. 在克隆模型猴时，利用囊胚细胞核移植比体细胞核移植更有优势 B. 培养早期胚胎的培养基中需要有糖类、氨基酸等营养条件，但无需提供气体环境 C. 胚胎移植的过程中，需要选择具有优良遗传性状的雌性个体作为受体 D. 为获得更多克隆猴，可以采用胰蛋白酶或胶原蛋白酶对早期胚胎进行分割，经移植获得同卵双胎或多胎 10.某小组通过PCR（假设引物长度为8个碱基短于实际长度）获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是（　　） A. 其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇ B. 步骤①所用的酶是SpeI和CfoI C. 用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段 D. 酶切片段和载体连接时，可使用 E. coli连接酶或T4连接酶 11.下列有关啤酒工业化生产的叙述，正确的是（　　） A. 工业化啤酒生产中，焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌 B. 糖的分解及代谢物的生成在主发酵阶段完成 C. 在啤酒的酿造过程中，适时打开发酵装置有利于提高啤酒产量 D. 主发酵结束后，需在高温密闭环境下进行后发酵 12.以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（　　） A. 催化①过程的酶是RNA聚合酶 B. 催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温 C. ③过程不需要解旋酶的作用 D. 通过cDNA过程和PCR过程获得的同一目的基因的结构完全相同 13.下列有关米酒、酸奶、泡菜等传统发酵制品的叙述，正确的是（　　） A. 米酒发酵液中冒出的“气泡”都来源于酵母菌的有氧呼吸 B. 制作米酒时添加“酵头”的目的是接种酿酒酵母 C. 酸奶和泡菜制作中均需要及时通氧，保证乳酸菌的有氧呼吸 D. 为避免杂菌污染，发酵前需要对器具、原料等进行灭菌 14.如图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，下列叙述错误的是(　　) A. 图1中溶液a可以选用2 mol·L-1的NaCl溶液 B. 图1所示操作的原理是DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精 C. 图2试管1的作用是证明2 mol·L-1 NaCl溶液遇二苯胺出现蓝色 D. 图2所示实验操作中有一处错误，可能导致试管2中蓝色变化不明显 15.将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱海水稻新品种。下图PCR扩增OsMYB56时需要添加引物，应选用的引物组合为（　　） A. 5'－CTTGGATGAT－3'和5'－TAAGTTGTCT－3' B. 5'－ATTCAACAGA－3'和5'－ATCATCCAAG－3' C. 5'－CTTGGATGAT－3'和5'－TCTGTTGAAT－3' D. 5'－ATTCAACAGA－3'和5'－GAACCTACTA－3 二、不定项选择题（共5小题，每题3分） 16.如图为目的基因结构示意图及几种限制酶的酶切位点，下列相关叙述错误的是(　　) A. 图中所示目的基因可能来源于真核生物，也可能来源于原核生物 B. 噬菌体可以作为载体将重组DNA导入动物细胞获得转基因动物 C. 用PCR技术扩增该基因时，形成磷酸二酯键所需要的能量可由dNTP直接提供 D. 用图中目的基因和质粒构建重组质粒时，只能用限制酶Sma I切割 17.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。下列说法错误的是(　　) A. ①过程称为稀释，②过程是为了单个菌落的筛选 B. Ⅰ号培养基称为选择培养基，该培养基中除了加入淀粉外，还需加入氮源等营养物质 C. 该嗜热菌细胞壁的合成易受到青霉素的抑制 D. 高温淀粉酶比较耐高温，在酶的分离提纯过程中，不需要考虑温度问题 18.利用基因工程生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述错误的是(　　) A. 过程①是在小菜蛾细胞的细胞核中进行的 B. 过程②获取的CarE基因中不含启动子 C. 过程③进行前需要用Ca2+处理大肠杆菌 D. 过程④后只有部分工程菌含有CarE基因 19.为有效防范由各类生物因子、生物技术误用滥用等引起的生物性危害，生物安全已纳入国家安全体系。下列不符合生物技术的安全性和伦理问题的是(　　) A. 利用生物技术改造工程菌获得大量的抗生素 B. 克隆技术可应用到器官移植但不能进行人体克隆 C. 中国反对生物武器，但在特殊情况下可以生产生物武器 D. 基因编辑技术的不断成熟并不意味着大家可以随意选择和定制孩子 20.用Xho I和Sal I两种限制性内切核酸酶分别处理图1 DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图1、图2所示。下列叙述错误的是(　　) A. 图中两种酶识别的序列不同，但酶切产物可用于构建重组DNA B. 图2中泳道②的酶切产物说明该限制酶断开了6个磷酸二酯键 C. 若用两种限制酶同时切割该DNA,在泳道中将出现7个条带 D. 泳道①是Sal I的酶切结果 三、非选择题（共5小题，共55分） 21.转基因技术可以改善作物品质、提高作物产量，减少农药使用量，在解决粮食需求和保障农业可持续发展等方面发挥重要作用。但是转基因技术存在种子公司转基因技术的专利保护问题，还存在外源基因通过花粉和种子等途径在种群之间漂移扩散、带来生态安全隐患以及人们对转基因食品安全性担忧的问题。科学家采用叶绿体转基因、“终结者”种子、“外源基因清除”技术试图解决上述问题。 （1）转基因技术能按照人们的愿望，赋予生物新的　　　　　，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，转基因技术是在　　　　　分子水平上进行的设计和施工，其核心步骤是　　　　　。 （2）叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中，以实现改良叶绿体功能、创造新品种的目的。叶绿体转基因技术不能阻止外源基因通过　　　　　（填“花粉”或“种子”）传播，原因是　　　　　。 （3）“终结者”种子技术是通过植入“终结者基因”，阻滞种子胚胎后期发育，最后得到成熟但不育的种子。“终结者”种子技术在一定程度上解决了转基因技术存在的　　　　　问题，但危害到了农民自行留种的权利，也不能消除人们对转基因食品安全性的担忧。 （4）“外源基因清除”技术将“外源基因清除”调控组件与基因表达载体的必备组件重组后构建出新的基因表达载体转入受体细胞中表达，待外源基因完成相应的功能后，“外源基因清除”调控组件将全部外源基因从花粉、种子和果实等特定器官中彻底清除。“外源基因清除”调控组件由“特定器官特异启动子、重组酶（FLP）基因和融合识别位点（LF）”构成，LF是利用噬菌体的Cre/LoxP系统和酵母的FLP/FRT系统创造出的融合识别位点。FLP基因在适当的时间和空间表达后，重组酶FLP可识别融合识别位点LF并在L与F之间完成切割，从而将两个融合识别位点之间的序列在特定时期从特定植物器官的细胞基因组中全部清除。其技术原理如下图所示： ①图中基因表达载体的必备组件包括　　　　　。通过插入不同的　　　　　，以决定在不同器官中表达重组酶，从而将相应器官中的某些基因序列从基因组中彻底清除，按需获得不含外基因的种子、果实等。请在答题卡方框中填写重组酶发挥清除作用后剩余的序列组合　　　　。 ②农民播种经“外源基因清除”技术处理的转基因作物种子　　　（填“能”或“不能”）获得收成，该种子播种后获得的作物　　　　　（填“具有”或“不具有”）转基因性状。 ③科学家将RNAi—FLP基因（FLP基因的RNA干扰系统）插入到外源基因清除系统中，通过喷施诱导剂激活RNAi—FLP基因从而留存转基因种子，试分析该方式留存转基因种子的原理是　　　　　。 22.牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图所示操作。请回答下列问题。 　 （1）牛奶用巴氏消毒法消毒的好处是_______________________________。 （2）取最终的牛奶稀释液0.1 mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是下图中的____。 　 （3）（1）问图示方法为稀释涂布平板法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为_______个，运用这种方法统计的结果往往较实际值________（填“大”或“小”），如果培养基上出现________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。 （4）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要进一步分离纯化乳酸菌，应采用下图中________（填字母）所示的划线分离操作，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧________次。 　　 23.双特异性抗体是含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体，能在靶细胞和功能分子（细胞）之间架起桥梁，激发具有导向性的免疫反应，可以通过重组DNA技术或细胞融合技术人工制备实现，现已成为抗体工程领域的热点，在肿瘤的免疫治疗中具有广阔的应用前景。图1表示科研人员通过免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术生产双特异性抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用示意图。已知长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。回答下列问题： （1）经过程①处理过的小鼠产生的B淋巴细胞群能合成并分泌______（填“一种”或“多种”）抗体。过程②诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的方法有______（答出2点）。 （2）过程③在HAT培养基上进行，______都会死亡。过程④一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，这是为了______。过程⑤⑥的操作目的是获取能分泌可同时识别______的双特异性单克隆抗体的单克隆杂交一杂交瘤细胞。 （3）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用______（填“小”“大”或“基本不变”）。 24.莱茵衣藻是一种单细胞真核绿藻，可产生类胡萝卜素但产量较低。科研人员欲在莱茵衣藻中导入合成类胡萝卜素的外源关键酶基因bkt，以期提高其产生类胡萝卜素的产量。 （1）莱茵衣藻中含有DNA的细胞结构有_______。 （2）图1为构建外源bkt基因表达载体的过程，则图中？处应用_______对质粒pUCBKT-P和pH105分别进行双酶切，并用________酶将bkt基因连入启动子与终止子之间。 （3）将以上构建完成的基因表达载体导入Ca2+处理的大肠杆菌，在含_______的培养基中培养一段时间后，挑选单菌落并进行菌落PCR，扩增时需提供与两条DNA模板链结合的2种________，最终得到大小约为990bp的片段，如图2所示。结果显示，____号具有阳性条带，且条带长度符合预期，即为成功导入外源bkt基因的目的菌。 （4）依据同样的技术，科研人员获得同时转入bkt等多个外源基因的表达载体，导入衣藻细胞，经过筛选，获得了能够同时稳定表达以上外源目的基因的衣藻Z。测量野生型衣藻（WT）和转基因衣藻（Z）的类胡萝卜素含量，结果如图3.由此推测Z中的bkt基因的表达量比野生型高，其依据是_______。 （5）若要验证以上推测，可以利用______技术来分别检测野生型衣藻（WT）和转基因衣藻（Z）的bkt酶的含量，并做比较。 25.人参是名贵的中药材。研究人员利用植物组织培养技术，实现了人参的快速繁殖，流程如图1所示。人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员诱导人参根与胡萝卜根细胞进行细胞融合并产生愈伤组织，通过植物细胞培养以提高人参皂苷的产率，流程如图2所示。回答下列问题： （1）图1中，启动②和③过程的关键植物激素是______。它们的______会影响植物细胞的发育方向。植物生长发育的调控，除了激素调节外，还与______和______有关。 （2）外植体是指______，利用图1技术进行人参的繁殖优点是______、______。 （3）图2中①是指______过程，②过程常利用的化学手段有_______、_______。 （4）若人参细胞内有m条染色体，胡萝卜细胞内有n条染色体，则融合后细胞中含有______条染色体。 第1页 共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$