实验二十九 酵母菌的纯培养-《高中生物通关》图说生物实验

|第二部分新课标的重要实险 4.如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变 控制在18~30℃，每隔12h左右将瓶盖拧 化过程，下列叙述正确的是 () 松一次（注意：不是打开瓶盖），之后再将瓶 盖拧紧。当发酵产生酒精后，再将瓶盖打 HO+C0乙酸+H,0 ④ 开，盖上一层纱布，温度控制在30~35℃， 萄萄腿①内履2一酒精+c0 进行果醋发酵。同学乙用装置B,温度控制 与同学甲相同，不同的是制作果酒阶段关闭 A.过程①和②都发生在细胞质基质，过程③ 充气口，排气口用夹子夹住，每隔12h左右 和④都发生在线粒体中 松一松夹子放出多余的气体，制作果醋阶段 B.果醋发酵是否产生乙酸，可用pH试纸来 向充气口充气。经过20d左右，两名同学先 检验 后完成了果酒和果醋的制作。据此回答有 C.过程③和④不都需要氧气的参与 关问题： D.过程①~④所需的最适温度基本相同 充气口略 5.为酿制杨梅酒，小明将杨梅榨成汁后分别装 排气口 入甲、乙、丙三个发酵瓶中，如图所示。下列 有关说法不正确的是 () (1)同学甲在制作果酒阶段，每隔12h左右 甲 丙 将瓶盖拧松一次，目的是 注：各发酵瓶的左侧管为充气管，右侧管为排气管 ,但又不打开，原因是 A.应将发酵瓶放在30~35℃环境中进行发 酵 B.甲瓶未夹住发酵瓶的充气管，会导致发酵 (2)葡萄酒制作是否成功，发酵后可用 液从充气管流出 来鉴定，在酸性条件下该物质与 C.乙瓶每隔一段时间需打开排气管排气，最 酒精反应呈 色。 终可以得到杨梅酒 (3)制果酒时要将温度控制在18~30℃，而 D.丙瓶中发酵液过多，会导致发酵液从排气 制果醋时要将温度控制在30~35℃。两者 管流出 温度控制不同的原因是 6.如图是两名同学制作果酒和果醋时使用的 装置。同学甲用装置A(带盖的瓶子)制作 葡萄酒，在瓶中加入适量葡萄汁，发酵温度 实验二十九 酵母菌的纯培养 二名师知识释疑 到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的 1.实验原理 纯培养物。 微生物群分散或稀释成单个细胞，单个细 3.实验步骤 胞繁殖成单个菌落。 (1)制备培养基 菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基 配制培养基→灭菌→倒平板。 表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定 倒平板注意事项：①温度：50℃左右；②操 形态结构的子细胞群体，这就是菌落。 作：在酒精灯火焰附近：③冷凝后平板倒置。 2.实验方法 (2)接种和分离酵母菌 采用平板划线法和稀释涂布平板法将单 通过接种环在固体培养基表面连续划线 个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基 65 生物实验 表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单 D.为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来 菌落。 放置 (3)培养酵母菌 解析：C项应是用拇指和食指将培养皿打 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收， 开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全打开皿 将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放 盖，目的是防止杂菌污染。 入28℃左右的恒温培养箱中培养24~48h。 答案：C 4.配制培养基的注意事项 例2在分离、纯化细菌的实验中，划线接 (1)如果需要调节培养基的pH,应该在定 种（甲）、培养结果（乙）如下图，a、b、c、d是划线 容完成后，灭菌之前进行操作。 的四个区域。下列叙述错误的是 () (2)培养基灭菌后要冷却到50℃左右时 开始倒平板。其原因是琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板时高于 50℃会烫手，低于50℃时，若不及时操作，琼 脂会凝固。 A.每次划线前后都要对接种环灼烧灭菌 (3)倒平板时，要使锥形瓶的瓶口迅速通 B.连续划线的目的是获得单个细菌形成 过火焰。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污 的菌落 染培养基。 C.甲图中的a区域为划线的起始区域 (4)平板冷却凝固后，要将平板倒置。 D.蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁 (5)在倒平板的过程中，如果不小心将培 进行 养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平 解析：图中a对应的区域出现了单个菌 板不能用来培养微生物，因为空气中的微生物 落，d区域菌落最多，因此a区域应该为划线的 可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 最终区域，d区域为划线的起始区域，C错误。 5.实验结果的分析 答案：C (1)培养未接种的培养基的目的是检测培 三典题诊断 养基是否被杂菌污染（或检查培养基制备是否 1.如图是倒平板的操作，下列相关叙述错误的 合格)。未接种的培养基表面若有菌落生长， 是 则说明培养基被污染，应该重新制备：若无菌 落生长，则说明未被污染。 (2)在接种酵母菌的培养基上可观察到独 立的菌落，这些菌落在颜色、形状和大小上相 似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。 A.正确的操作顺序是丙→乙→甲→丁 (3)若在培养基中观察到不同形态的菌 B.甲应在酒精灯火焰附近进行 落，原因可能是菌液不纯，混入其他杂菌，或在 C.此培养基不可能为液体培养基 实验操作过程中被杂菌污染。 D.完成甲后应快速进行丁操作 二名师典例精析 2.下列有关平板划线操作的叙述，错误的是 例1下列关于倒平板的叙述，错误的是 A.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环 A.待培养基冷却至50℃左右时倒平板 烧红 B.倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁 B.接种环在平板上随机划线时不要划破培 进行 养基 C.完全打开培养皿皿盖，右手将锥形瓶中 C.在蘸取菌液前后均要将盛有菌液的试管 的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的 口通过火焰 皿盖 D.平板冷却后倒置，放人恒温培养箱中培养 66 |第二部分新课标的重要实险 3.如图是平板划线示意图，划线 C.该种微生物有可能是H5N1病毒 的顺序为1→2→3→4→5。下 D.该培养基上的菌落分布不均匀，代表纯化 列操作方法正确的是( 失败 A.操作前不用进行任何处理 6.苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对 B.划线操作必须在火焰上进行 环境有严重危害。小明同学准备依据图1 C.在5区域中才可以得到所需菌落 所示操作步骤，从处理废水的活性污泥中分 D.在1、2、3、4、5次划线的前后都要对接种 离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题： 环灭菌 4.下列有关微生物的分离与培养的叙述，错误 的是 () A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 活性污混高第培养 B.倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴 图1 落造成污染 (1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、 C.倒平板时将培养皿的盖拿开，以便于将锥 K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳 形瓶中的培养基倒入培养皿 源的有 D.检验培养基是否被杂菌污染的最有效方 (2)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应 法是将未接种的培养基放在恒温箱中 随转接次数增加而逐渐 ,以达到富 培养 集酚降解菌的目的。若图1平板中菌落过 5.如图所示为实验室使用某种接种方法在培 于密集，应进一步 ,以便 养基上培养某种微生物的结果。下列相关 于菌落计数与分离。制备平板培养基时除 说法正确的是 () 了需要水、营养物质外，还必须添加 (3)图2为平板划线法示意图，在图中 (填图中序号)区域更易获得单菌落。 开始处 A.该图最可能是用稀释涂布平板法进行接 种的 3 B.在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格 的消毒和灭菌 图2 实验三十 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二名师知识释疑 ②取样部位：距地表约3~8cm的土 1.实验原理：绝大多数微生物都能利用葡 壤层。 萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解 (2)样品的稀释 尿素。利用以尿素作为唯一氮源的选择培养 测定土壤中细菌的数量，一般选用1× 基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 104、1×105和1×105倍稀释的稀释液进行平 2.实验设计 板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的 (1)土壤取样 范围放宽一点。 ①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。 (3)微生物的培养与观察 67生物实验 实验二十六 探究土壤微生物 实验二十八 制作传统发酵食品 的分解作用 典题诊断 典题诊断 1.解析：在糖源不足时，醋酸酋将酒精分解产生乙醛，再将 1.解析：对土壤浸出液和蒸馏水进行高温消毒后，土壤浸出 乙醛变为乙酸，D错误。 液中的微生物被杀死，无法达到实验目的，B错误 答案：D 答案：B 2,解析：乳酸菌是异养厌氧型微生物，发酵过程需要为乳酸 2.解析：在探究土壤微生物分解作用的实验中，自变量是土 菌提供无氧环境，D错误。 壤微生物的有无，因变量是有机物的分解情况，实脸组是 答案：D 灭菌后的土壤，对照组就是接近于自然状态的一组，即不 3,解析：温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，客易造成 施加变量处理的一组，故迭A。 如菌大量繁殖，而施制时间过长，由于发酵产物乳酸不断 答案：A 积累，pH降低，不利于细菌大量繁殖，B错误。 3.解析：本实验的自变量是土壤中是否有微生物，且自然土 答案：B 壤中本身就有最生物，因此实验组土壤要进行灭菌处理， 4,解析：过程①是细胞呼吸的第一阶段，过程②是无氧呼吸 对照组土壤保持自然状态。 的第二阶段，细胞呼吸的第一阶段以及无氧呼吸均发生 答案：C 在细胞质基质中，过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，发 4,解析：本实验设置的因变量是落叶的腐烂程度，A错误。 生在线粒体中，而过程④为果醋制作过程，醋酸菌为好氧 答案：A 细菌，属于原核生物，没有载粒体，A错误，果醋制作过程 5,解析：欲证明树叶的分解是由“某种细菌”所引起的，应先 中，可以通过品尝或用pH试纸检验是否产生乙酸，B正 确：过程③表示有氧呼吸的第二和第三阶段，其中第三阶 将树叶灭菌，排徐其他微生物对实脸结果的干祝，同时应 段需要氧气的参与，过程④表示果醋发酵，由于醋酸菌是 将灭菌后的树叶分成两组，一组接种该细菌，另一如不提 种，两组均置于造宜条件下培养，以使对比分析得出 好氧菌，因此该过程也需耍气气的参与，C错误：过程① ②③是酵母菌的细胞呼吸，所需的疑适温度基本相同 结论。 (18一30℃)，过程④是醋酸茵的酿醋过程，所需的最适温 答案：C 度在30一35℃，故过程①一①所需的最造温度不相可，D 实验二十七 设计制作生态缸， 错误。 答案：B 观察其稳定性 5.解析：果酒发酵的最适温度是18~30℃，A错误， 典题诊断 答案：A 1.解析：腐生的微生物数量太少就不能将有机物分解成无 6.解析：(1)同学甲的实验装置比较简单，通过将瓶盖拧松 机物，首先出现营养危机的是能利用无机物的生物 排出瓶内CO2,但是放气时应注意避免O2和泰菌的进 生产者。 入。(2)酒精的检测原理是酒精在酸性条件下与重铬酸 答案：B 铆反应呈现灰绿色。(3)酵母菌和醋酸菌的最适生长温 2,解析：设计的生态虹要密闭。 度不同，发酵时对温度的控制主要是满足微生物生长的 答案：C 需要。 3,解析：乙瓶无光照，藻类因无法进行光合作用而死亡，种 答案：(1)推出CO2防止O2和有害杂菌进入(2)重铬 群密度下降。丙瓶与甲瓶相比，少泥沙，分解者很少，无 酸钾溶液灰绿(3)18~30℃适宜酵母菌生长和发酵， 法将该瓶中动植物遗体、动物的排泄物等中的有机物分 30一35℃适宜醋酸菌生长和发酵 解为无机物。丁瓶与甲瓶相比多小鱼，小鱼进行呼吸作 用要消耗水中大量的氧气，因此丁瓶与甲瓶相比，氧气含 实验二十九酵母菌的纯培养 量低。总结结论的方法：找出该组实验中的自变量与因 典题诊断 变量，归钠出自变量与因变量之间的关系。据表格分析 1.解析：等到所倒的平板凝固后，再进行丁的操作，D错误。 甲瓶为对服组，乙瓶、丙瓶、丁瓶都为实验组。乙瓶与甲 答案：D 瓶相比少光，不久稳定性被破坏，说明光照是雏持被生态 2.解析：接种环在平板上划线时采用分区划线，每个区要划 系统长期稳定的必要条件：丙瓶与甲瓶相比少分解者，不 3一5条平行线，而不是随机划的。 久稳定性被破坏，说明分解者是生态系统中不可缺少的 答案：B 重要组成成分：丁瓶与甲瓶相比多小鱼，消壹者过多，也 3.解析：划线之前应对接种环灼烧灭菌：划线操作在酒精灯 造成稳定性被破坏，说明生态瓶中动物不能过多，过多会 火焰旁进行：从第1次划线至第5次划线菌落密度越来越 使生产量<消耗量，造成生态系统崩渍。 小，周划线所用菌种密度的不同，在第3,4、5次划线中都 答案：C 可能得到所需菌落。 4,解析：甲瓶中主要是因为消费者植食性（小鱼）过多，所以 答案：D 应保持各组分的比例合造，方能使生态瓶雏持较长时间。 4.解析：倒平板时用食指和拇摇将培养皿打开一条稍大于 答案：A 瓶口的缝隙，使其恰好能让维形瓶瓶口仲入，随后倒入培 5,解析：观察图示可知，瓶内生活着大小不同的绿色枝物， 养基，C错误。 瓶内土環潮湿而富含腐殖质。要保证生物的生存，栽种 答案：C 的植物不能太大，不能生长太快，否则对其他植物生长不 5.解析：题图最可能是用平板划线法进行楼种的，A错误， 利。潮湿而富含腐殖质的环境还可导致真菌感乘 在操作时，为防止杂菌污菜，需进行严格的消毒和灭菌，B 答案：(1)图中植物应是长得慢的物种，若生长过快，其他 正确：病毒不能在培养基上生存擎殖，C错误：平板划线 植物会因遮光而死亡，降低了物种多样性：使图中所有物 法，随划线次数的增加，蓝落密度逐渐减小，因此分布不 种不受昆虫和真菌感染，因为在潮湿、温暖的环境中，病 均匀，D错误 虫害会迅速传播(2)适宜的光照和温度(3)O2CO2 答案：B (4)①提供分解者；②为植物提供初始无机营养：③为 6.解析：(1)培养基成分中的有机物均可以提供碳源，即蛋 分解者提供初始有机营养 白胨、苯酚均可以作为碳源。(2)分析实验可知，实脸目 110 答案全解全析 的是籍选酚降解菌，因此将采集到的样品接种培养，某酚 4.解析：用体积分数为70%的酒精擦拔超净工作台台面，通 用量应随转接次数增加而逐渐增加，以达到富集酚降解 免接种过程中感染杂菌：自来水冲洗是为了冲掉菊花茎 菌的目的。若图1平板中菌落过于密集，应进一步稀释 段上的灰尘、泥土等，而自来水中含有杂蓝：无菌水清洗 后再接种，以便于菌落计数与分离。平板培养基属于固 是为了洗去外植体上的洒精等，不用自来水是为了防止 体培养基，该培养基雪要加入凝固剂，如琼脂等。(3)图2 自来水中的杂菌污染外核体：在次氯酸钠溶液中处理 为平板划线法，髓着划线次数的增加，菌种进一步被稀 30min是为了给外植体消毒：使用无菌吸水纸的目的是 释，在困中③区战更客易获得单菌落。 在吸干外植体表面水分的同时防止杂荫污柒，培养基灭 答案：(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀释后再接种 凝固 菌是为了防止培养基上长出杂菌。 剂(3)③ 答案：B 实验三十 土壤中分解尿素的细菌 5.解析：愈伤织形成过程中，细胞还没有开始再分化，也 不可能进行光合作用，所以愈伤组织形成初期不需要充 的分离与计数 足的光照。 典题诊断 答案：D 1,解析：平板划线法能对细菌分离纯化，但是不能计数，D 6.解析：植物组织培养是用离体的植物组织、器官或细弛提 种到经灭菌的培养基中，培养基含有供如织细胞生长发 错误。 育所需要的无机物和小分子有机物，还有调节细胞胝分 答案：D 化和再分化的细胞分裂素和生长素。由外植体发育成试 2.解析：5号试管的结果表明每克土壤中活菌数为(168十 管苗，脱分化阶段细胞进行有丝分裂，再分化阶段伤组 175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109,C错误. 织如胞经有丝分裂和知胞分化形成试管苗，此阶段需要 答案：C 光照，原因是叶肉如胞中叶绿素的合成需要光照条件。 3.解析：涂布完成后，在培养皿的皿底做标记，B错误：若空 答案：(1)无机物生长素(2)植物细胞的全能性有 白对照组上有5个菌落，说明培养基灭菌不彻底，雪要重 丝分裂分化(3)培养基芽发育成叶，叶肉细胞中叶 新进行实验，D错误，计算平板上的蔺落数，应选择菌落 绿素的合成需要光照条件(4)选择性表达 数在30一300的平板上进行计数，C错误。 答案：A 实验三十二DNA的粗提取与鉴定 4,解析：蔺落的大小、颜色、隆起程度等特征都可作为菌种 典题诊断 鉴定的依据，但是有无莫膜通过肉眼无法观察，B错误：用 1.解析：甲紫溶液客易将染色体（质）染成紫色，而不会将 血如胞计数板计数微生物时，因死菌、活菌都计算在内 DNA柒成紫色：在DNA粗提取实脸中应用体积分数为 因此，实验结果往往偏大，C错误；将好氧型菌株接种到 95%的冷酒精提纯，故②⑤不将合题意。 培养液中雾振荡培养，D错误。 答案：B 答案：A 2.解析：兔属于南乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中没有细 5,解析：要探究微生物种类和数量的变化，应采用固体培养 胞核，不能用于DNA的粗提取，A错误：DNA含量高， 基，用稀释涂布平板法进行接种，液体培养基无法观察到 且材料易得的生物都可以作为提歌DNA的材料，所以菠 首落，不使区分微生物种类，平板划线法不能对徽生物进 莱也可以作为提取DNA的材料，C错误：鉴定DNA时， 行计数，A、B错误：每组至少设置三个平板，避免偶然性， 将姓状物溶于2mol/L的NaCl溶液后加入二苯胺试剂， 确保实脸结果的准确性，C正确：对照组还需要设置接种 进行沸水浴，冷却后呈蓝色，D错误」 没有覆盖保鲜膜的西瓜的瓜瓢浸出液，D错误。 答案：B 答案：C 3.解析：DNA不溶于酒精溶液，但是钿胞中的某些蛋白质 6.解析：(1)分解尿素的细菌含有脲酶，要筛逃出能分解尿 测溶于酒精。利用这一原理，在提取液中加入95%的冷 素的细菌，应该用以尿素为唯一氨源的选择培养基。 酒精后，蛋白质会与DNA分离并析出，C错误 (2)接种撒生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中 答案：C 稀释涂布平板法可用于活菌计数。(3)该小组在接种前， 4.解析：鸡血、莱花中都含有DNA,而猪是哺乳动物，其成 随机取若千灭菌后的空白平板先培养一段时间，用于检 熟的红朝胞中没有细胞核和各种细胞器，不含DNA,因 测平板灭菌是否彻底。经适当培养后，统计活菌数日，每 此实险材料选择错误的组别是丙，A正确：甲、乙、丁组的 隔一个“时间间隔”统计一次首落数目，最后选取茵落数 实验材料中都含有DNA,但乙组为植物，将枝物细胞放 目稳定时的记录作为结果。3个平板的菌落数分别为 入蒸馏水中时，植物知胞不会吸水涨破，且DNA应该用 39,42和45，据此可得出每毫升样液中活菌数=(39+42 二苯胺试剂鉴定，而不能用双缩脲试剂鉴定，因此沸水浴 +45)÷3÷0.1×104=4.2×106 后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁，B正确，D错误： 答案：(1)脲酶尿素(2)稀释涂布平板法(3)检验平 DNA在冷的酒精中的溶解度较低，25℃的酒精对DNA 板灭菌是否彻底菌落数目稳定时的记录4.2×10 的蔽集数果差，C正确。 实验三十一菊花的组织培养 答案：D 5,解析：香蕉果肉组织细胞有细胞壁保护，因此加蒸馏水不 典题诊断 会破坏翻胞，不能将DNA释放出来，A错误，经研磨后， 1,解析：幼嫩组织细胞的分化程度较成粘组织细胞的低，因 将研磨液离心5min,取上清液进行下一步操作，B错误； 此幼嫩组织较成熟组织易培养成功，A正确；植物组织培 在沸水中，DNA遇二苯胺会出现蓝色反应，D错误。 养时需要用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左 答案：C 右的次氯酸钠溶液对离体幼茎进行消毒，B正确：生长素 6.解析：A、B两试管形成对照，B试管中含DNA丝状物，A 与细胞分裂素的含量比值较高时，有利于根的形成，D 试管中不含，起对照作用，其他条件均完全相同。本实验 错误。 强调反应条件是沸水中加热5min,这样可加快颜色反应 答案：D 的速率，观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。 2.解析：念伤组织是离体植物细胞经过脱分化形成的，A 答案：(1)溶液不变蓝色溶液逐渐变蓝色DNA在沸 错误。 水浴的情况下遇二苯胺试剂会被呈现蓝色(2)溶液颜 答案：A 色基本不变(3)加快颜色反应速率耐受性(4)对照 3.B (5)加入试管中的DNA(丝状物)的量