安徽省农林牧渔大类专业技能测试 项目一 血涂片的制作

安徽省农林牧渔大类专业技能测试 项目一 血涂片的制作 考纲技术要求 实验介绍 仪器与材料 操作规程与要求 1 2 3 4 目录 CONTENTS 学生练习 课堂小结 5 6 考纲技术要求 PART01 技术要求 规范制作血涂片，显微镜下细胞结构清晰。 实验介绍 PART02 实验介绍 血涂片的制作是指将血液均匀地涂在载玻片上，形成一层薄薄的血膜，用于显微镜下的细胞形态学观察。瑞氏染色是一种常用的血液细胞染色方法，通过特定的染料使血细胞的不同成分呈现不同的颜色，便于在显微镜下观察细胞的形态和结构。 实验介绍 （1）血涂片制作 血涂片的制作原理是利用推片法将血液均匀地涂布在载玻片上，形成一层薄血膜。推片时，推片与载玻片之间的角度、推片速度、血滴大小和血液的黏稠度等因素会影响血膜的厚薄和均匀性。 （2）瑞氏染色 瑞氏染料由酸性染料伊红（E⁻）和碱性染料亚甲蓝（M⁺）组成。细胞的不同成分对染料的亲和力不同，细胞核中的去氧核糖核酸和碱性蛋白与伊红结合呈红色，而细胞质中的酸性物质与亚甲蓝结合呈蓝色。瑞氏染色通过物理吸附和化学亲和作用，使细胞各部分呈现不同的颜色，便于显微镜下观察。 仪器与材料 PART03 仪器与材料 显微镜，家鸡血液，载玻片，洗耳球，玻璃铅笔(蜡笔)，吸水纸，小烧杯，蒸馏水，洗瓶，滴管，染色缸， 瑞氏染色液，香柏油，二甲苯，擦镜纸。 操作规程与要求 PART04 操作规程与要求 1、载玻片准备： 用擦镜纸把载玻片擦拭干净。 2、制作血涂片： 取一张玻片为载片，另一张玻片为推片。一手拇指和中指挟持载片两端，另一手持推片前三分之一处，用推片一角蘸取被检血液少许置于载片右端三分之一处，推片置于血滴前方，并轻轻向后移动推片，使之与血滴接触，待血液扩散后，再以30—40°角向前匀速用力推进涂抹，形成均匀血膜即可，涂片必须一次性完成，禁止来回反复涂片。 操作规程与要求 3、干燥： 血涂片制作后放在玻片架上或反复摇动自然晾干，之后放入标本盒内以备用。 操作规程与要求 4、染色： 用玻璃铅笔(或蜡笔)在血涂片的血膜两端划线。 操作规程与要求 4、染色： 用瑞氏染色法进行染色。即：在血涂片上滴加瑞氏染色液，使染色液完全覆盖血膜，染色2分钟后用滴管滴加等量蒸馏水，洗耳球轻轻吹吸，使染液和蒸馏水混合均匀，静置染色至8分钟，洗瓶冲洗干净，吸水纸除去残留水滴，干燥后镜检。 操作规程与要求 5、镜检： 按照先低倍后高倍的原则，先在低倍镜下找到视野，然后逐次转换至高倍、油镜，并用油镜观察，视野下可见血细胞涂片均匀，细胞无破损，无染料颗粒沉积，染色效果较好，结构清晰。 操作规程与要求 6、油镜镜头清理： 观察结束后，使用滴管滴1-2滴二甲苯于擦镜纸上，将油镜镜头上的香柏油清理干净，整理好显微镜后离开。 操作规程与要求 注意事项 （1）血涂片制作 推片时用力要均匀，避免血膜过厚或过薄。 血滴大小要适中，一般取5μL左右。 推片速度要适中，过快或过慢都会影响血膜质量。 （2）瑞氏染色 染色前血涂片必须干透，否则细胞容易脱落。 染液与缓冲液的比例要适当，一般为1:2 - 4。 冲洗时要用流水，避免染料沉淀在血涂片上。 染色时间要根据具体情况调整，新配制的染液可能需要较长时间。 学生练习 PART05 学生练习 分组练习 1. 将学生分成若干小组，每组配备血样、载玻片、推片、吸水纸、镊子、瑞氏染液、缓冲液、显微镜等操作用具，让学生在小组内进行模拟练习。 2. 学生在小组内轮流进行操作练习，其他同学认真观察并给予指导和帮助。 3. 每组推选一名学生进行操作演示，其他学生进行观察和评价，教师进行总结和补充。 角色扮演 1.学生进行角色扮演，分为“实验操作者”和“观察者”，模拟真实实验场景。 2.“实验操作者”需向“观察者”解释操作目的和步骤，同时进行操作练习。 课堂小结 PART06 课堂小结 回顾血涂片的制作步骤和瑞氏染色的操作方法。 总结血涂片制作和瑞氏染色的关键操作技巧，如血样的采集、涂片的制作、染色时间的控制、显微镜的使用等。 THANKS Lavf58.46.101 Lavf58.46.101 Lavf58.46.101 $$