精品解析：江西省南昌市东湖区南昌市第二中学2024-2025学年高二下学期5月月考生物试题

一、单选题（共12题，每题2分，共计24分） 1. 下列关于真核生物和原核生物的叙述，正确的是（ ） A. 真核生物的活细胞均有线粒体，可进行有氧呼吸 B. 真核细胞的增殖方式是有丝分裂，原核细胞的增殖方式是二分裂 C. 真核生物和原核生物的主要遗传物质均为DNA D. 真核生物的遗传物质主要在染色体上，原核生物的遗传物质主要在拟核中 【答案】D 【解析】 【分析】原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核，没有核膜、核仁和染色体；原核生物没有复杂的细胞器，只有核糖体一种细胞器，但原核生物含有细胞膜、细胞质结构，含有核酸和蛋白质等物质。 【详解】A、哺乳动物成熟的红细胞无线粒体，不能进行有氧呼吸，A错误； B、真核生物的增殖方式有有丝分裂、无丝分裂和减数分裂，原核生物的分裂方式为二分裂，B错误； C、真核生物和原核生物的遗传物质都是DNA，C错误； D、真核生物的遗传物质主要存在于细胞核中的染色体上，原核生物无细胞核，其遗传物质主要存在于拟核中，D正确。 故选D。 2. 细胞学说的建立经历了漫长的探究过程。下列有关叙述正确的是（ ） A. 施莱登和施旺是细胞学说的建立者，运用了不完全归纳法 B. 细胞学说认为所有生物均由细胞及细胞产物构成，阐明了生物体结构的统一性 C. 细胞学说的建立经历了器官、组织、细胞、分子水平的认知过程 D. 魏尔肖总结出“新细胞是由老细胞通过有丝分裂产生的” 【答案】A 【解析】 【分析】细胞学说揭示了细胞统一性和生物体结构的统一性，内容包括：（1）细胞是一个有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成；（2）细胞是一个相对独立的单位，既有它自己的生命，又对与其他细胞共同组成的整体的生命起作用；（3）新细胞由老细胞经过分裂产生。 【详解】A、施莱登和施旺是细胞学说的建立者，在通过观察了各种动植物后，运用不完全归纳法概括了细胞学说，A正确； B、细胞学说认为动植物由细胞及细胞产物构成，病毒没有细胞结构，B错误； C、细胞学说的建立经历了器官、组织、细胞水平的认知过程，未到达分子水平，C错误； D、魏尔肖总结出“新细胞是由老细胞通过分裂产生的” ，未提到有丝分裂，D错误。 故选A。 3. 清代袁枚在《随园食单》中，详尽记载了泡菜的制作工艺：“冬菜黄芽菜，泥头七日便熟“泥头”就是用泥密封容器口），然欲久放非盐不可，淡则味鲜，咸则味恶。常腌一大坛三伏时开之……香美异常，色白如玉。”以下有关说法错误的是（ ） A. 泡菜制作过程中起主要作用的微生物是乳酸菌，“泥头”的目的是为该菌提供无氧环境 B. 为了确保“淡则味鲜”，盐水浓度不宜过高，可以配制质量百分比为3%的盐水用于发酵 C. “咸则味恶”的原因，可能是由于溶液浓度过高使乳酸菌失水死亡，从而影响发酵效果 D. 若腌制时间少于“七日”，可能导致泡菜中亚硝酸盐含量高，影响泡菜品质 【答案】B 【解析】 【分析】泡菜的制作过程：将清水与盐按照适当的比例配制盐水，将盐、水煮沸冷却，将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。 【详解】A、泡菜制作过程中起主要作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，发酵时需要营造无氧环境，“泥头”的目的是为该菌提供无氧环境，A正确； B、泡菜发酵时盐水浓度应是5%-20%的浓度，B错误； C、乳酸菌的生存需要适宜的渗透压等环境，“咸则味恶”的原因可能是由于溶液浓度过高，使乳酸菌失水死亡，从而导致发酵效果降低，C正确； D、亚硝酸盐的含量与发酵时间有关，若腌制时间少于“七日”，可能导致泡菜中亚硝酸盐含量高，影响泡菜品质，D正确。 故选B。 4. 平板划线法是接种和分离微生物最常用的一种方法，据图分析下列操作正确的是（ ） A. 在该操作过程中需要在酒精灯火焰上灼烧涂布器6次 B. 每一次划线都应该从上一次划线的末端开始划线 C. 为保证无菌操作，每次划线前，均需在酒精灯火焰附近蘸取一环菌液 D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在30—300之间的实验组平板进行计数 【答案】B 【解析】 【分析】平板划线操作的注意事项：①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌；②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；③划线时最后一区域不要与第一区域相连。④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 【详解】A、在平板划线法中，接种环在每次划线前和划线结束后都需要在酒精灯火焰上灼烧灭菌。图中共有5次划线，那么划线前灼烧1次，划线结束后灼烧1次，总共需要灼烧6次，但这里使用的是接种环而非涂布器，A错误； B、平板划线法中，每一次划线都应该从上一次划线的末端开始划线，这样可以使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落，B正确； C、在平板划线法中，只有第一次划线时需要蘸取菌液，从第二次划线开始，是以上一次划线末端的细菌作为菌种来源，不需要再蘸取菌液，C错误； D、确定对照组无菌后，选择菌落在30-300之间的平板进行计数，这是稀释涂布平板法的计数要求，而平板划线法一般不用于计数，D错误。 故选B。 5. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，正确的是（ ） A. 精子触及卵细胞膜的瞬间，会发生卵细胞膜反应，防止多精子入卵 B. “设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 C. 对优良供体母牛进行人工授精，收集胚胎后即可移植到受体母牛体内进行繁殖 D. 对胚胎进行移植时，需要将胚胎移植到同种的、遗传性状优良的雌性体内 【答案】B 【解析】 【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。 【详解】A、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入，A错误； B、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前，根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测， 设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，B正确； C、收集胚胎后要先进行质量检查，才能进行移植，C错误； D、进行胚胎移植时，代孕个体不需要具有优良的遗传性状，D错误。 故选B。 6. 在制备单克隆抗体的过程中HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，一种杂交瘤细胞只能产一种抗体。科学家通过动物细胞融合技术，将两株不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成双杂交瘤细胞AB．双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，可以产生双特异性抗体AB．据图分析，下列说法正确的是（ ） A. 双杂交瘤细胞同时识别α、β抗原后，才能产生双特异性抗体 B. 双杂交瘤细胞的筛选需要进行克隆化培养和抗体检测 C. 对双杂交瘤细胞进行传代培养时，需用胰蛋白酶使之分散 D. 体外培养双杂交瘤细胞需要定期更换培养液以创设无菌环境 【答案】B 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、杂交瘤细胞是由已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，无需接触抗原就能产生抗体，A错误； B、单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞需要进行两次筛选，第一次利用选择培养基筛选出能在特定培养基生长且能无限增殖的杂交瘤细胞，第二次筛选可用抗原-抗体杂交的方法筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞是由两个杂交瘤细胞融合而成，需要进行克隆化培养和抗体检测，B正确； C、双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，若要传代培养，细胞培养液直接离心，去除上清液培养基，加入新鲜培养基即可，不用胰蛋白酶处理，C错误； D、体外培养双克隆抗体需要定期更换培养液以补充营养，减少代谢废物的产生，创造无毒环境，D错误。 故选B。 7. 下列有关“DNA 粗提取与鉴定”、“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”实验叙述，正确的是（ ） A. 洋葱切碎后加研磨液研磨过滤后，滤液放置于4℃冰箱，DNA存在于沉淀物中 B. 可以利用洋葱为实验材料，也可以选择鸡血、猪血等作为DNA粗提取的实验材料 C. 琼脂糖凝胶电泳实验中使用的微量离心管、枪头等需进行高压蒸汽灭菌 D. 电泳时，在电场作用下，带电荷的DNA分子会向着与它所带电荷相同的电极移动 【答案】C 【解析】 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；③在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。 【详解】A、洋葱切碎后加研磨液研磨过滤后，滤液放置4℃冰箱放置，DNA存在于上清液中，A错误； B、理论上只要富含DNA的生物组织均可作为该实验的材料，猪为哺乳动物，猪血中的红细胞没有细胞核，不含核DNA，不适合作为DNA粗提取的实验材料，B错误； C、琼脂糖凝胶电泳实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水等在使用前都必须进行高压灭菌处理，C正确； D、电泳时，在电场作用下，带电荷的DNA分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，D错误。 故选C。 8. 皂苷是分布广泛且结构复杂的天然产物，具有多种生物活性。乙酰化是皂苷最常见的修饰之一，对提高其生物活性起着重要作用。皂苷乙酰化最有可能由酰基转移酶（ATs）催化，天然的ATs催化效率较低，研究人员利用蛋白质工程技术改良了ATs，大大地提高了其催化效率。下列叙述错误的是（ ） A. 该技术不能通过直接改造ATs的结构来提高其催化效率 B. 根据ATs的氨基酸序列能准确推出相应的脱氧核苷酸序列 C. 该技术的实施需要限制酶、DNA连接酶以及载体等工具 D. 该技术难度很大，因为蛋白质发挥功能必须依赖复杂的空间结构 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程过程包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。一个完整的基因表达载体包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因。蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。 【详解】A、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。所以可以通过改造编码ATs的基因，进而改造ATs的结构来提高其催化效率，A正确； B、由于密码子的简并性，一种氨基酸可能由多种密码子编码，所以根据ATs的氨基酸序列不能准确推出相应的脱氧核苷酸序列，B错误； C、蛋白质工程的实施过程中，需要对基因进行修饰或合成，这就需要限制酶、DNA连接酶以及载体等工具，C正确； D、蛋白质结构复杂，功能多样，蛋白质工程难度很大的主要原因是蛋白质的功能必须依赖其复杂的空间结构，D正确。 故选B。 9. 疟疾是一种由疟原虫引起的严重危害人类健康的红细胞寄生虫病。当疟原虫pfert基因编码的蛋白第76位赖氨酸(密码子为AAA)替换成苏氨酸(密码子为ACA)时，疟原虫获得对氯喹(一种抗疟疾药物)的抗性。研究人员根据pfrt基因的序列，设计了F1、F2、R1和R2共4种备选引物，用于扩增目的片段，以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图1。对来自两位疟疾患者的pfert基因进行分析，将扩增产物用限制酶ApoⅠ(识别位点为切割，电泳结果如图2。下列说法错误的是（　　） A. 引物不需要与pfcrt基因序列完全匹配，F1和R1可特异性扩增目的片段 B. 出现F1和R2扩增结果的原因可能是引物长度过短导致其与非目的片段结合 C. 使用F2和R1未扩增出相应片段，可能是引物与模板不互补或复性温度不合适 D. 据图2可知，治疗患者1的疟疾不能使用氯喹，应使用青蒿素等其他抗疟疾药物 【答案】D 【解析】 【分析】PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。 【详解】A、引物只需与模板 DNA的特定区域单链互补即可，并不需要与基因整体序列一致，F1和R1只扩增出1个目的片段，说明其扩增具有特异性，A正确； B、F1和R2扩增获得3个片段，原因可能是引物长度过短导致引物与非目的片段结合，扩增出非目的片段，B正确； C、F2和R1引物无法扩增出目的条带，可能是F2和R1的序列与模板不互补，或复性温度不合适，C正确； D、当疟原虫pcnt 基因编码的蛋白第76位赖氨酸(密码子为 AAA)替换成苏氨酸(密码子为ACA)时，疟原虫获得对氯喹的抗性，再结合 ApoI酶的识别序列及电泳结果可知，正常 pcn 基因中含 ApoI酶切位点，突变后不含，而用ApoI切割后，患者1的结果显示2个条带说明患者1感染的疟原虫为正常 pfcnt基因控制的不抗氯喹个体，患者2的结果显示为1个条带，说明患者2感染的疟原虫为抗氯喹个体，故患者2应使用氯喹以外的其他抗疟疾药物，D错误。 故选D。 10. 下表为常用的限制酶及其识别序列和切割位点，由此推断的以下说法中，正确的是（ ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHI G↓GATCC KpnI GGTAC↓C EcoRI G↓AATTC Sau3AI ↓GATC HindⅡ GTY↓RAC SmaI CCC↓GGG （注：Y=C或T，R=A或G） A. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B. 若两种限制酶的识别序列相同，则形成的末端一定能通过DNA连接酶相互连接 C. DNA连接酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶均可催化磷酸二酯键的形成 D. 限制酶EcoRI进行一次切割，会形成1个游离的5'末端和1个游离的3'末端 【答案】C 【解析】 【分析】限制酶的特点：识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点进行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。 【详解】A、由图可知，由于Y＝C或T，R＝A或G，因此Hind  II可以识别多种核苷酸序列，A错误； B、若两种限制酶的识别序列相同，但由于切割的位点不同，切割后形成的末端不同，这样产生的末端就不能通过DNA连接酶相互连接，B错误； C、DNA连接酶连接DNA片段、DNA聚合酶催化脱氧核苷酸连接形成DNA长链，RNA聚合酶催化核糖核苷酸形成RNA，所以三者均可催化磷酸二酯键的形成，C正确； D、一个限制酶切割一次，使DNA双链断开，会有两个磷酸二酯键断裂，形成2个黏性末端或平末端，会形成2个游离的5'末端和2个游离的3'末端，D错误。 故选C。 11. 发酵工程是在传统发酵技术的基础上发展起来的，下列叙述正确的是（ ） A. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 B. 发酵工程的菌种可直接来自原材料中天然存在的微生物 C. pH会影响微生物代谢物的形成，谷氨酸棒状杆菌在酸性条件下会积累谷氨酸 D. 发酵产品如果是代谢物，可采取提取、分离和纯化措施来获得产品 【答案】D 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。 【详解】A、单细胞蛋白是指通过发酵获得的大量的微生物菌体，而不是从微生物细胞中提取的，A错误； B、发酵工程的菌种通常是经过人工选育的优良菌种，而不是直接来自原材料中天然存在的微生物。天然存在的微生物可能存在发酵效率低、产物不纯等问题，经过人工选育的菌种能更好地满足生产需求，B错误； C、在谷氨酸发酵生产过程中，谷氨酸的积累受pH值的影响显著。‌在中性和弱碱性条件下，谷氨酸会积累‌，而在‌酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺‌‌，C错误； D、发酵产品若是微生物代谢物，分离、提纯产物的方法是要根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施，D正确。 故选D。 12. 如图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程①中除草剂抗性基因插入T-DNA中，导致T-DNA片段失活 B. 过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化 C. 幼胚经灭菌后置于合适的培养基上可诱导形成愈伤组织 D. 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程的操作步骤：目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定。 【详解】A、转基因植物需要用到土壤农杆菌的Ti质粒的T-DNA片段，需要把目的基因插入T-DNA片段中，T-DNA能将目的基因带入受体细胞，并将其整合到受体细胞的染色体DNA上，故①过程中T-DNA片段不会失活，A错误； B、若两种限制酶产生的黏性末端相同，则酶切产物仍可发生自身环化，B错误； C、幼胚经消毒而非灭菌后置于合适的培养基上可诱导形成愈伤组织，C错误； D、报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色，而愈伤组织表面残留的农杆菌会导致未转化的愈伤组织能在含除草剂的培养基中生长，因此过程③应在培养基中加入除草剂和物质K，D正确。 故选D。 二、多选题（共4题，共计16分。全部答对得4分，不全得2分，答错或未写得0分） 13. 为制备带有荧光标记的DNA探针，研究人员在反应系统内只添加了DNA聚合酶、缓冲液、H2O和4种dNTP（dN-Pα~Pβ~Pγ，其中dGTP被荧光标记）的反应管①~③中分别加入适量单链DNA（如下所示）。形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区。下列说法正确的是（　　） 反应管①：5′-GGCTATAGCCAGA-3' 反应管②：5′-GTTTCGCGATGGC-3′；3′-AGCGCTACCGATG-5′ 反应管③：5'-CCAGGAGATTGC-3′；3′-CCTCTAACGATC-5′ A. 反应管②的反应系统内因缺乏模板或引物不能进行PCR扩增 B. 实验结束后，能得到带有荧光标记DNA探针的反应管只有③ C. 实验中需要用荧光物质对dGTP的γ位磷酸基团进行标记 D. DNA聚合酶沿模板链将dNTP逐个连接到引物的5′端 【答案】B 【解析】 【详解】A、反应管②的两条单链DNA分子之间具有互补的序列，既是模板又是引物，可以进行PCR，但双链DNA区之外的5'端模板链中没有碱基C，不能与被荧光标记的dGTP结合，因此无法制备带有荧光标记的DNA探针，A错误； B、①中两条单链DNA分子之间具有互补序列，但双链DNA区之外的3'端无模板，因此无法进行DNA合成，不能得到带有荧光标记的DNA探针，③中两条单链DNA分子之间具有互补序列，且双链DNA区之外的5′端有模板和碱基C，在模板链的3'端能连接上被荧光标记的dGTP，因此进行DNA合成能得到带有荧光标记的DNA探针，B正确； C、dGTP的γ位与β位之间的特殊化学键会断裂为PCR提供能量，因此若对dGTP的γ位磷酸基团进行标记，则标记不会出现在子链中，需要用荧光物质对dGTP的α位磷酸基团进行标记，C错误； D、DNA聚合酶沿模板链将dNTP逐个连接到引物的3'端，D错误。 故选B。 14. 果糖被广泛应用于奶茶等含糖饮料、糖果和烘培食品的加工。有证据表明，膳食中的果糖会促进肿瘤的生长从而加快多种癌症的进展，肝细胞中的酮糖激酶-C（KHK-C）可将果糖转化成多种代谢产物。为探索相关机制，科学家采用不同的培养液对小鼠宫颈癌细胞进行体外培养，操作流程和结果如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 免疫功能正常时，机体内细胞毒性T细胞能够识别并接触、裂解癌细胞 B. ①通常用机械方法或酶法处理，②置于95%空气和5%CO2的气体环境培养 C. 据图分析，果糖会直接促进癌细胞生长和增殖 D. 果糖的代谢产物经血液运输提供给癌细胞可能促进肿瘤的生长 【答案】ABD 【解析】 【分析】动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。动物细胞培养需满足基本的营养条件，培养液中需有氨基酸、无机盐、糖类和维生素等，同时需要适宜的温度、pH和渗透压，还需在无菌无毒的环境下去培养。无菌：对培养液和所有的培养用具进行灭菌处理，在无菌的环境下进行操作；无毒：定期更换培养液，以便清除代谢产物。 【详解】A、机体内细胞毒性T细胞能够识别并接触、裂解癌细胞，执行免疫监视的功能，A正确； B、实验中①是将肿瘤分散成单细胞，通常用机械方法或胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理；过程②为动物细胞培养，常采用95%的空气和5%的CO2，B正确； CD、从题干中看不出果糖是否直接促进癌细胞生长和增殖，同时根据题干信息，肝细胞中的酮糖激酶-C（KHK-C）可将果糖转化成多种代谢产物，这些代谢产物经过血液运输，提供给癌细胞，促进癌细胞生长和增殖，C错误，D正确。 故选ABD。 15. “不等大小引物法”是一种通过使用大小不等的正向和反向引物进行PCR来制备单链DNA（ssDNA）的方法，其原理是通过在引物的一端修饰一个大基团（如富含GC的茎环结构），使得修饰的引物与未修饰的引物进行PCR时，产生的两条单链的大小差异较大，可通过凝胶电泳后的条带位置不同进行分离纯化获得目标ssDNA，过程如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. 富含GC的茎环结构应修饰在引物的5'端 B. PCR扩增所得双链DNA应经72℃高温变性后再电泳 C. 电泳结束后，携带大分子标记物的ssDNA距离点样孔较近 D. 若循环10次，可得到210个携带大分子标记物的ssDNA 【答案】AC 【解析】 【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 【详解】A、引物的作用是使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，因此大分子修饰物应修饰在引物的5'端，A正确； B、PCR扩增的双链DNA应经高温变性后再电泳得到ssDNA，但72℃较适合子链的延伸，应选择更高的温度（如超过90℃）进行变性处理，B错误； C、在凝胶中，DNA分子的迁移速率与大小相关，携带大分子标记物的ssDNA在凝胶中的移动速度较慢，电泳结束后距离点样孔较近，C正确； D、若循环10次，可得到210个DNA分子，变性形成单链后可得到（210-1）个携带大分子标记物的ssDNA，D错误。 故选AC。 16. Cre-loxP系统能实现特定基因的敲除(如图1)。把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列(loxP1和loxP2)串在一起，构建表达载体T(如图2)。部分荧光蛋白基因会被Cre酶随机“剪掉”，且两个loxP1之间或两个loxP2之间的基因，最多会被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表达，随机呈现不同的颜色。下列说法正确的是（ ） A. Cre酶切下一个待敲除基因的过程，需要破坏四个磷酸二酯键 B. 若小鼠细胞含一个表达载体T(不含Cre酶)，其肌肉组织细胞呈红色 C. 若小鼠细胞含一个表达载体T(含Cre酶)，其脑组织细胞呈红色或黄色或蓝色 D. 若小鼠细胞含两个表达载体T(含Cre酶)，其一个细胞内可能随机出现两种颜色 【答案】ACD 【解析】 【分析】1、基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。2、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。 【详解】A、DNA单链上相邻的两个脱氧核苷酸之间通过磷酸二酯键相连，DNA由两条单链螺旋缠绕形成，Cre酶切下一个待敲除基因的过程中，需要切断基因前后两端，因此需要破坏四个磷酸二酯键，A正确； B、据图可知，小鼠有编码红、黄、蓝荧光蛋白的基因，前端有脑组织特异性表达的启动子，肌肉细胞不会表达颜色基因，故若小鼠细胞含一个表达载体T(不含Cre酶)，其肌肉组织细胞呈无色，B错误； C、1oxP1、1oxP2位置如图2黑白三角符号所示，两个loxP1和两个loxP2之 间的基因最多会被Cre酶敲除一次，将含Cre酶的病毒注入小鼠体内，Cre酶表达情况不同，识别的loxP不同，则有可能未敲除荧光蛋白基因，此时为红色(同不含Cre酶时)，也有可能敲除两个loxP1之间的红色荧光蛋白基因，此时为黄色，也有可能敲除两个1oxP2之间的红色和黄色荧光蛋白基因，此时为蓝色，因而不同脑细胞会差异表达红色、黄色或蓝色荧光蛋白基因，C正确； D、小鼠脑组织细胞内有2个相同表达载体T(含Cre酶)，Cre酶对每个DNA片段随机剪切，因而细胞的颜色由细胞内两种荧光蛋白的颜色叠加而成，故其脑组织细胞可能出现两种颜色，D正确。 故选ACD。 三、非选择题（60分） 17. 黄河三角洲自然保护区物种资源极为丰富，是全球最大的东方白鹳繁殖地。以下是湿地中常见的几种单细胞生物，结合生物学知识回答以下问题： （1）草履虫参与构成的生命系统的所有结构层次是_____。 （2）图中属于原核细胞的是_____，判断依据是_____；蓝细菌能进行光合作用的主要原因是_____。 （3）采集湿地水样进行显微观察，如图所示是在显微镜下观察到的不同视野，若将视野1转为视野2，正确的操作步骤是_____（选择下列需要进行的操作进行排序，填序号）；若使用显微镜时，视野出现一半亮一半暗，可能的原因是_____（写出两点）。 ①调节粗准焦螺旋抬高镜筒②调节光圈使视野明亮③调节细准焦螺旋使物像清晰④转动转换器换上高倍镜⑤向右移动装片⑥向左移动装片 【答案】（1）细胞（个体）、种群、群落、生态系统、生物圈 （2） ①. 蓝细菌 ②. 蓝细菌没有以核膜为界限的细胞核 ③. 细胞内含有叶绿素和藻蓝素 （3） ①. ⑥④②③ ②. 反光镜角度调整不到位、遮光器的光圈调整不到位 【解析】 【分析】1、生命系统的结构层次由小到大依次是细胞、组织、器官、系统、个体、种群、群落、生态系统和生物圈。 2、原核生物与真核生物最显著的区别是原按生物没有以核膜为界限的细胞核。 3、病毒与原核生物、真核生物的显著区别是病毒没有细胞结构。 4、显微镜成像特点：倒立的虚像；移片的原则：偏哪儿移哪儿。 【小问1详解】 草履虫是单细胞生物，草履虫参与构成的生命系统的所有结构层次是细胞（个体）、种群、群落、生态系统、生物圈。 【小问2详解】 原核细胞无以核膜为界限的细胞核，图中属于原细胞的是蓝细菌；此类细胞由于含有叶绿素和藻蓝素，故可进行光合作用。 【小问3详解】 由于显微镜成像为倒立的虚像，要想将物像移至视野中央，方法是物像偏哪个方向，就向哪个方向移动装片，视野2中观察到的物像在视野1中的左侧，因此要想将该物像移至视野中央，应该向左移动装片；从视野1转为视野2是由低倍镜换用高倍镜进行观察，步骤：移动玻片标本（向左移动）使要观察的物像到达视野中央→转动转换器选择高倍镜，对准通光孔→调节光圈，换用较大光圈使视野较为明亮→再转动细准焦螺旋使物像更加清晰。所以将视野1转为视野2，正确的操作步骤是⑥④②③。视野中明亮是有光通过，与光的通路相关的结构有反光镜、遮光器的光圈、物镜，一半亮一半暗说明有一半光的通路被挡，则反光镜角度调整不到位、遮光器的光圈调整不到位、转换器调整不到位都有可以出现这种情况。 18. 白色污染问题已引起全社会广泛关注，降解塑料的研究和开发是解决白色污染的理想途径之一、地膜的主要成分是聚乙烯[化学式为（C2H4）n]。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示的操作。X培养基是选择培养基，聚乙烯分解菌在该培养基上会形成透明圈。回答下列问题： （1）在筛选聚乙烯分解菌过程中，应选择_____的土壤，制作培养基时，应将_____作为X培养基中的唯一碳源。 （2）可挑选X培养基中的_____（填序号）中的单菌落接种到Y培养基上进行培养。配制Y培养基时，其pH一般调至_____。为获得大量该菌，可对该菌进行摇床培养，好处是_____、_____。 （3）在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为28、50、52、54、313，则每升原菌液样品中细菌数为 _____个。 【答案】（1） ①. 含废旧地膜丰富 ②. 聚乙烯 （2） ①. ⑤ ②. 中性或弱碱性 ③. 增加培养液中的溶氧量 ④. 使菌株与培养液充分接触，有利于物质交换 （3）5.2×108 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 筛选聚乙烯分解菌，依据题干信息，地膜的主要成分是聚乙烯，所以应选择含废旧地膜丰富的土壤制作样品，制作培养基时，应该聚乙烯作为X培养基中的唯一碳源，并使用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。 【小问2详解】 透明圈直径/菌落直径越大，说明该菌的降解能力越强，所以应选择⑤中单菌落接种到Y培养基上进行培养，培养细菌时，其pH一般调至中性或弱碱性。用摇床进行培养，可以增大培养液中溶氧量，促进微生物的有氧呼吸，还能够增加菌体与培养液的接触，有利于物质交换，提高营养物质的利用率。 【小问3详解】 在用稀释涂布平板法进行计数时，通常需要平板上的菌落数介于30-300之间，故28、313数值无效，所以每升原菌液样品中的细菌数为（50+52+54）÷3÷0.1×103×103=5.2×108个/升。 19. 人参有“百草之王”的美誉，现代医学研究表明，人参中富含人参皂苷，有很高的生物活性，具有调节免疫、抗肿瘤、抗氧化等诸多作用。科研人员利用植物细胞工程技术来生产人参皂苷，下图表示生产的主要流程，请回答问题： （1）选用人参的幼根作为外植体，先要对其进行消毒处理，后需要用_____反复冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害。 （2）将愈伤组织分散成单个细胞再培养的优点是_____，从而促进细胞更快速生长分裂。 （3）蔗糖浓度的筛选是优化悬浮细胞培养体系的重要条件之一，蔗糖浓度过低或过高均不利于悬浮细胞的培养，原因是_____。 （4）_____是启动植物细胞脱分化和再分化过程的关键激素。 （5）科研人员研究了人参皂苷Rh2和顺铂（一种常见的化疗药物）对肿瘤的抑制效果，实验方案如下表： ①制备肿瘤小鼠模型 首先培养肿瘤细胞，培养液中需加入_____，主要目的是补充未知的营养物质。将肿瘤细胞悬浊液皮下接种于小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0．1mL细胞悬浊液。接种2周后皮下形成直径5mm左右瘤体的模型小鼠。 ②分组进行实验处理 将上述40只模型鼠随机均分为四组，A组：生理盐水对照组；B组：Rh2组；C组：顺铂组；D组：Rh2+顺铂（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积，相同且适宜条件下连续饲养16天。 ③实验结果绘成曲线 ④根据结果得出结论 结论有_____（答两点）。 【答案】（1）无菌水 （2）增大与营养物质接触面积 （3）蔗糖浓度过低不能给细胞提供足够的碳源和能源，过高会造成细胞失水死亡 （4）生长素与细胞分裂素 （5） ①. 动物血清##血清 ②. 顺铂和Rh2均能抑制肿瘤生长、单独使用Rh2抑制肿瘤生长的效果不如顺铂/顺铂和Rh2联合给药效果更好 【解析】 【分析】植物的组织培养指的是在无菌的条件下，将植物的茎尖、茎段或是叶片等切成小块，培养在特制的培养基上，通过细胞的增殖和分化，使它逐渐发育成完整的植物体。 【小问1详解】 选用人参的幼根作为外植体，先要对其进行消毒处理，后需要用无菌水反复冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害。 【小问2详解】 将愈伤组织分散成单个细胞再培养可增大细胞与营养物质接触面积，有利于细胞的生长和分裂。 【小问3详解】 蔗糖既可以为离体的组织细胞提供碳源和能源，同时又能维持培养液的渗透压，蔗糖浓度过低不能给细胞提供足够的碳源和能源，过高会造成细胞失水死亡，因此蔗糖浓度过低或过高均不利于悬浮细胞的培养。 【小问4详解】 在诱导杂种细胞发育成完整植株时，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度和比例等都会影响植物细胞的发育方向。 【小问5详解】 ①动物细胞培养液中一般会含有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入动物血清（血清）等天然物质，主要目的是补充未知的营养物质。 ②根据实验结果可知，B和C组肿瘤的体积均小于A对照组，且D组肿瘤的体积最小，因此可得出的结论有：顺铂和Rh2均能抑制肿瘤生长、单独使用Rh2抑制肿瘤生长的效果不如顺铂/顺铂和Rh2联合给药效果更好。 20. 基因工程自20世纪70年代兴起后，在农牧业、医药卫生领域和食品工业等方面展示出广阔的前景。如图是通过基因工程获得转基因生物或产品的流程图，请回答下列问题： （1）若要构建小鼠乳腺生物反应器批量生产人抗利尿激素，应先从人体_____细胞中获取总RNA，通过逆转录获得cDNA，再经PCR后获得抗利尿激素基因。 （2）通过PCR技术可扩增目的基因，PCR的每次循环一般可以分为_____三步。一条单链cDNA在PCR仪中进行n次循环，需要消耗_____个引物。 （3）图中质粒A上m、n分别是启动子和终止子，RNA聚合酶在模板DNA链上的移动方向是_____（填“5′-3′”或“3′-5′”）。已知目的基因转录的模板链b链，箭头处是限制酶的切点（Nco Ⅰ：5′-C↓CATGG-3′；Nhe Ⅰ：5′-G↓GATCC-3′），目的基因无法与载体A连接，为了使目的基因成功表达，需要在目的基因两侧加接末端，b链处加接末端5′_____。 （4）构建小鼠乳腺生物反应器时，科研人员需要将抗利尿激素基因与小鼠乳腺蛋白基因启动子重组在一起，目的是_____。膀胱生物反应器与乳腺生物反应器相比，具有的显著优势在于不受转基因动物的_____的限制，而且从尿液中提取蛋白质比在乳汁中提取简便、高效。 【答案】（1）下丘脑 （2） ①. 变性、复性、延伸 ②. 2n-1 （3） ①. 3′→5′ ②. GATC （4） ①. 使抗利尿激素基因在小鼠的乳腺中表达 ②. 性别、年龄（发育时期） 【解析】 【分析】①表示逆转录，②表示DNA的复制，③表示构建基因表达载体，④表示把目的基因导入受体细胞。 【小问1详解】 抗利尿激素在下丘脑中合成，要通过逆转录的方法合成抗利尿激素的基因，应该在下丘脑细胞中提取总RNA。 【小问2详解】 PCR需要经过变性、复性、延伸三步操作。一条单链cDNA在PCR仪中进行n次循环，共产生2n-1个DNA分子，共有2n条链，其中2n-1条链是新合成的，新合成的链都需要1个引物，所以需要2n-1个引物。 【小问3详解】 RNA聚合酶在模板DNA链上的移动方向是3′-5′，子链的延伸方向是：5′-3′。若目的基因转录的模板链b链，则目的基因转录的方向是从右向左，结合质粒上的限制酶识别位点可知，目的基因的右侧应该加上NcoⅠ的识别序列，左侧加上NheⅠ的识别序列，NheⅠ切割后的黏性末端为5′GATC3′，故应在b链5′加上末端5′GATC-3′。 【小问4详解】 为了让抗利尿激素基因到小鼠的乳腺中表达，需要在目的基因的前面加上小鼠乳腺蛋白基因的启动子。与乳腺生物反应器相比，用膀胱生物反应器生产蛋白质，可从转基因动物一出生就收集产物，不受转基因动物的性别和年龄的限制。 21. 若两个DNA分子具有同源序列。同源序列之间会发生类似于染色体互换的行为，该过程称为同源重组。利用这种原理，可以将目的基因插入到表达载体上。相关结构如图1所示。 （1）一般来说基因表达载体，除启动子、终止子之外，还应该包含__________（至少回答两点）。 （2）根据图1载体的结构，可判断a、b、c、d四条链，属于模板链的是_______________。根据图2目的基因的方向分析，在构建基因表达载体时，其非模板链的__________（填写“3’”或“5’”）端应靠近启动子。 （3）为使目的基因具有和载体同源的序列，引物Ⅲ和引物Ⅳ都要依据_________序列进行设计。请写出引物Ⅲ（目的基因上游）的序列：5’________3’；（写出10个碱基即可）。 （4）在载体线性化的过程中，使用了PCR的方法，用到了两种引物，引物I和引物II。在鉴定农杆菌中是否含有重组质粒时，重新设计了引物Ⅲ和引物Ⅳ，以便同时用四种引物对农杆菌中提取的DNA进行PCR，图3为某同学预期的PCR产物电泳图谱。 ①需要对引物Ⅲ和引物Ⅳ重新设计的原因是_______________。 ②根据图谱分析，PCR产物在电场中的移动方向为__________（填写“M→N”或“N→M”），四种预期结果中含有重组质粒的是___________，最不可能出现的是_____________。 【答案】（1）目的基因、标记基因、复制原点 （2） ①. b、c ②. 5’ （3） ①. 载体一端序列和目的基因一端序列相关 ②. AGCCTCATTG （4） ①. 原引物Ⅲ和引物Ⅳ含有载体两端的相关序列，容易与引物Ⅰ和物引Ⅱ进行配对 ②. ③. Ⅲ ④. Ⅱ 【解析】 【分析】PCR技术：（1） 概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。（2）原理：DNA双链复制。（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物。（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。（5）过程：变性、复性、延伸。 【小问1详解】 一般来说基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、标记基因、复制原点等。 【小问2详解】 若要通过PCR技术扩增获得线性化的载体，根据引物结合在模板链的3’端的原则，选用的两种引物需要结合在a链和c链上，因此属于模板链的是a和c链。构建基因表达载体时，为保证目的基因的正确转录，需要将模板链的3’端靠近启动子，由于模板链和非模板链反向平行，因此需要将非模板链的5’端靠近启动子。 【小问3详解】 为使目的基因具有和载体同源的序列，扩增目的基因时所用的引物Ⅲ和引物Ⅳ既要与目的基因的模板链存在互补的碱基序列，也要在引物的5’端加上部分与载体一端的一条链的序列互补的碱基序列，才能保证目的基因两端带有和载体两端存在相同的碱基序列，因此引物Ⅲ和引物Ⅳ都要依据载体一端序列和目的基因一端序列相关序列进行设计。由于引物Ⅲ位于目的基因的上游，因此需要与目的基因模板链的3’端存在互补的序列，即含有与目的基因非模板链5’端首端相同的序列，同时需要含有与载体A端的a链部分相同的碱基序列，故引物Ⅲ的序列为5’AGCCTCATTG3’。 【小问4详解】 ①由于原引物Ⅲ和引物Ⅳ含有载体两端的相关序列，容易与引物Ⅰ和物引Ⅱ进行配对，影响扩增过程，因此需要重新设计引物Ⅲ和引物Ⅳ，以便同时用四种引物对农杆菌中提取的DNA进行PCR。 ②电泳过程中分子量大的DNA片段跑的慢，因此可知PCR产物在电场中的移动方向为N→M。线性DNA的长度为800bp，目的基因的长度为300bp，因此重组质粒的长度为1100bp，故含有重组质粒的是Ⅲ。引物Ⅲ和引物Ⅳ扩增得到的目的基因长度约为300bp，引物Ⅰ和物引Ⅱ扩增得到的线性载体长度为800，而引物Ⅰ与Ⅲ（或Ⅳ）或扩增出重组DNA，长度为1100bp左右，但Ⅱ中出现了约为200bp的片段，四种引物扩增的产物都不会出现该片段，故最不可能出现的是Ⅱ。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 一、单选题（共12题，每题2分，共计24分） 1. 下列关于真核生物和原核生物的叙述，正确的是（ ） A. 真核生物的活细胞均有线粒体，可进行有氧呼吸 B. 真核细胞的增殖方式是有丝分裂，原核细胞的增殖方式是二分裂 C. 真核生物和原核生物的主要遗传物质均为DNA D. 真核生物的遗传物质主要在染色体上，原核生物的遗传物质主要在拟核中 2. 细胞学说的建立经历了漫长的探究过程。下列有关叙述正确的是（ ） A. 施莱登和施旺是细胞学说的建立者，运用了不完全归纳法 B. 细胞学说认为所有生物均由细胞及细胞产物构成，阐明了生物体结构的统一性 C. 细胞学说的建立经历了器官、组织、细胞、分子水平的认知过程 D. 魏尔肖总结出“新细胞是由老细胞通过有丝分裂产生的” 3. 清代袁枚在《随园食单》中，详尽记载了泡菜的制作工艺：“冬菜黄芽菜，泥头七日便熟“泥头”就是用泥密封容器口），然欲久放非盐不可，淡则味鲜，咸则味恶。常腌一大坛三伏时开之……香美异常，色白如玉。”以下有关说法错误的是（ ） A. 泡菜制作过程中起主要作用的微生物是乳酸菌，“泥头”的目的是为该菌提供无氧环境 B. 为了确保“淡则味鲜”，盐水浓度不宜过高，可以配制质量百分比为3%的盐水用于发酵 C. “咸则味恶”的原因，可能是由于溶液浓度过高使乳酸菌失水死亡，从而影响发酵效果 D. 若腌制时间少于“七日”，可能导致泡菜中亚硝酸盐含量高，影响泡菜品质 4. 平板划线法是接种和分离微生物最常用的一种方法，据图分析下列操作正确的是（ ） A. 在该操作过程中需要在酒精灯火焰上灼烧涂布器6次 B. 每一次划线都应该从上一次划线的末端开始划线 C. 为保证无菌操作，每次划线前，均需在酒精灯火焰附近蘸取一环菌液 D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在30—300之间的实验组平板进行计数 5. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，正确的是（ ） A. 精子触及卵细胞膜的瞬间，会发生卵细胞膜反应，防止多精子入卵 B. “设计试管婴儿”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 C. 对优良供体母牛进行人工授精，收集胚胎后即可移植到受体母牛体内进行繁殖 D. 对胚胎进行移植时，需要将胚胎移植到同种的、遗传性状优良的雌性体内 6. 在制备单克隆抗体的过程中HAT选择培养基可以筛选出融合成功的杂交瘤细胞，一种杂交瘤细胞只能产一种抗体。科学家通过动物细胞融合技术，将两株不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成双杂交瘤细胞AB．双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，可以产生双特异性抗体AB．据图分析，下列说法正确的是（ ） A. 双杂交瘤细胞同时识别α、β抗原后，才能产生双特异性抗体 B. 双杂交瘤细胞的筛选需要进行克隆化培养和抗体检测 C. 对双杂交瘤细胞进行传代培养时，需用胰蛋白酶使之分散 D. 体外培养双杂交瘤细胞需要定期更换培养液以创设无菌环境 7. 下列有关“DNA 粗提取与鉴定”、“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”实验叙述，正确的是（ ） A. 洋葱切碎后加研磨液研磨过滤后，滤液放置于4℃冰箱，DNA存在于沉淀物中 B. 可以利用洋葱为实验材料，也可以选择鸡血、猪血等作为DNA粗提取的实验材料 C. 琼脂糖凝胶电泳实验中使用的微量离心管、枪头等需进行高压蒸汽灭菌 D. 电泳时，在电场作用下，带电荷的DNA分子会向着与它所带电荷相同的电极移动 8. 皂苷是分布广泛且结构复杂的天然产物，具有多种生物活性。乙酰化是皂苷最常见的修饰之一，对提高其生物活性起着重要作用。皂苷乙酰化最有可能由酰基转移酶（ATs）催化，天然的ATs催化效率较低，研究人员利用蛋白质工程技术改良了ATs，大大地提高了其催化效率。下列叙述错误的是（ ） A. 该技术不能通过直接改造ATs的结构来提高其催化效率 B. 根据ATs的氨基酸序列能准确推出相应的脱氧核苷酸序列 C. 该技术的实施需要限制酶、DNA连接酶以及载体等工具 D. 该技术难度很大，因为蛋白质发挥功能必须依赖复杂的空间结构 9. 疟疾是一种由疟原虫引起的严重危害人类健康的红细胞寄生虫病。当疟原虫pfert基因编码的蛋白第76位赖氨酸(密码子为AAA)替换成苏氨酸(密码子为ACA)时，疟原虫获得对氯喹(一种抗疟疾药物)的抗性。研究人员根据pfrt基因的序列，设计了F1、F2、R1和R2共4种备选引物，用于扩增目的片段，以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图1。对来自两位疟疾患者的pfert基因进行分析，将扩增产物用限制酶ApoⅠ(识别位点为切割，电泳结果如图2。下列说法错误的是（　　） A. 引物不需要与pfcrt基因序列完全匹配，F1和R1可特异性扩增目的片段 B. 出现F1和R2扩增结果的原因可能是引物长度过短导致其与非目的片段结合 C. 使用F2和R1未扩增出相应片段，可能是引物与模板不互补或复性温度不合适 D. 据图2可知，治疗患者1的疟疾不能使用氯喹，应使用青蒿素等其他抗疟疾药物 10. 下表为常用的限制酶及其识别序列和切割位点，由此推断的以下说法中，正确的是（ ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHI G↓GATCC KpnI GGTAC↓C EcoRI G↓AATTC Sau3AI ↓GATC HindⅡ GTY↓RAC SmaI CCC↓GGG （注：Y=C或T，R=A或G） A. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B. 若两种限制酶的识别序列相同，则形成的末端一定能通过DNA连接酶相互连接 C. DNA连接酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶均可催化磷酸二酯键的形成 D. 限制酶EcoRI进行一次切割，会形成1个游离的5'末端和1个游离的3'末端 11. 发酵工程是在传统发酵技术的基础上发展起来的，下列叙述正确的是（ ） A. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 B. 发酵工程的菌种可直接来自原材料中天然存在的微生物 C. pH会影响微生物代谢物的形成，谷氨酸棒状杆菌在酸性条件下会积累谷氨酸 D. 发酵产品如果是代谢物，可采取提取、分离和纯化措施来获得产品 12. 如图是培育抗除草剂玉米的技术路线图，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程①中除草剂抗性基因插入T-DNA中，导致T-DNA片段失活 B. 过程①用两种限制酶就可防止酶切产物自身环化 C. 幼胚经灭菌后置于合适的培养基上可诱导形成愈伤组织 D. 过程③应在培养基中加入除草剂和物质K 二、多选题（共4题，共计16分。全部答对得4分，不全得2分，答错或未写得0分） 13. 为制备带有荧光标记的DNA探针，研究人员在反应系统内只添加了DNA聚合酶、缓冲液、H2O和4种dNTP（dN-Pα~Pβ~Pγ，其中dGTP被荧光标记）的反应管①~③中分别加入适量单链DNA（如下所示）。形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区。下列说法正确的是（　　） 反应管①：5′-GGCTATAGCCAGA-3' 反应管②：5′-GTTTCGCGATGGC-3′；3′-AGCGCTACCGATG-5′ 反应管③：5'-CCAGGAGATTGC-3′；3′-CCTCTAACGATC-5′ A. 反应管②的反应系统内因缺乏模板或引物不能进行PCR扩增 B. 实验结束后，能得到带有荧光标记DNA探针的反应管只有③ C. 实验中需要用荧光物质对dGTP的γ位磷酸基团进行标记 D. DNA聚合酶沿模板链将dNTP逐个连接到引物的5′端 14. 果糖被广泛应用于奶茶等含糖饮料、糖果和烘培食品的加工。有证据表明，膳食中的果糖会促进肿瘤的生长从而加快多种癌症的进展，肝细胞中的酮糖激酶-C（KHK-C）可将果糖转化成多种代谢产物。为探索相关机制，科学家采用不同的培养液对小鼠宫颈癌细胞进行体外培养，操作流程和结果如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 免疫功能正常时，机体内细胞毒性T细胞能够识别并接触、裂解癌细胞 B. ①通常用机械方法或酶法处理，②置于95%空气和5%CO2的气体环境培养 C. 据图分析，果糖会直接促进癌细胞生长和增殖 D. 果糖的代谢产物经血液运输提供给癌细胞可能促进肿瘤的生长 15. “不等大小引物法”是一种通过使用大小不等的正向和反向引物进行PCR来制备单链DNA（ssDNA）的方法，其原理是通过在引物的一端修饰一个大基团（如富含GC的茎环结构），使得修饰的引物与未修饰的引物进行PCR时，产生的两条单链的大小差异较大，可通过凝胶电泳后的条带位置不同进行分离纯化获得目标ssDNA，过程如图所示。下列有关叙述正确的是（ ） A. 富含GC的茎环结构应修饰在引物的5'端 B. PCR扩增所得双链DNA应经72℃高温变性后再电泳 C. 电泳结束后，携带大分子标记物的ssDNA距离点样孔较近 D. 若循环10次，可得到210个携带大分子标记物的ssDNA 16. Cre-loxP系统能实现特定基因的敲除(如图1)。把几种荧光蛋白基因和Cre酶能识别并切割的序列(loxP1和loxP2)串在一起，构建表达载体T(如图2)。部分荧光蛋白基因会被Cre酶随机“剪掉”，且两个loxP1之间或两个loxP2之间的基因，最多会被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表达，随机呈现不同的颜色。下列说法正确的是（ ） A. Cre酶切下一个待敲除基因的过程，需要破坏四个磷酸二酯键 B. 若小鼠细胞含一个表达载体T(不含Cre酶)，其肌肉组织细胞呈红色 C. 若小鼠细胞含一个表达载体T(含Cre酶)，其脑组织细胞呈红色或黄色或蓝色 D. 若小鼠细胞含两个表达载体T(含Cre酶)，其一个细胞内可能随机出现两种颜色 三、非选择题（60分） 17. 黄河三角洲自然保护区物种资源极为丰富，是全球最大的东方白鹳繁殖地。以下是湿地中常见的几种单细胞生物，结合生物学知识回答以下问题： （1）草履虫参与构成的生命系统的所有结构层次是_____。 （2）图中属于原核细胞的是_____，判断依据是_____；蓝细菌能进行光合作用的主要原因是_____。 （3）采集湿地水样进行显微观察，如图所示是在显微镜下观察到的不同视野，若将视野1转为视野2，正确的操作步骤是_____（选择下列需要进行的操作进行排序，填序号）；若使用显微镜时，视野出现一半亮一半暗，可能的原因是_____（写出两点）。 ①调节粗准焦螺旋抬高镜筒②调节光圈使视野明亮③调节细准焦螺旋使物像清晰④转动转换器换上高倍镜⑤向右移动装片⑥向左移动装片 18. 白色污染问题已引起全社会广泛关注，降解塑料的研究和开发是解决白色污染的理想途径之一、地膜的主要成分是聚乙烯[化学式为（C2H4）n]。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示的操作。X培养基是选择培养基，聚乙烯分解菌在该培养基上会形成透明圈。回答下列问题： （1）在筛选聚乙烯分解菌过程中，应选择_____的土壤，制作培养基时，应将_____作为X培养基中的唯一碳源。 （2）可挑选X培养基中的_____（填序号）中的单菌落接种到Y培养基上进行培养。配制Y培养基时，其pH一般调至_____。为获得大量该菌，可对该菌进行摇床培养，好处是_____、_____。 （3）在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为28、50、52、54、313，则每升原菌液样品中细菌数为 _____个。 19. 人参有“百草之王”的美誉，现代医学研究表明，人参中富含人参皂苷，有很高的生物活性，具有调节免疫、抗肿瘤、抗氧化等诸多作用。科研人员利用植物细胞工程技术来生产人参皂苷，下图表示生产的主要流程，请回答问题： （1）选用人参的幼根作为外植体，先要对其进行消毒处理，后需要用_____反复冲洗，以避免消毒剂长时间作用而产生毒害。 （2）将愈伤组织分散成单个细胞再培养的优点是_____，从而促进细胞更快速生长分裂。 （3）蔗糖浓度的筛选是优化悬浮细胞培养体系的重要条件之一，蔗糖浓度过低或过高均不利于悬浮细胞的培养，原因是_____。 （4）_____是启动植物细胞脱分化和再分化过程的关键激素。 （5）科研人员研究了人参皂苷Rh2和顺铂（一种常见的化疗药物）对肿瘤的抑制效果，实验方案如下表： ①制备肿瘤小鼠模型 首先培养肿瘤细胞，培养液中需加入_____，主要目的是补充未知的营养物质。将肿瘤细胞悬浊液皮下接种于小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0．1mL细胞悬浊液。接种2周后皮下形成直径5mm左右瘤体的模型小鼠。 ②分组进行实验处理 将上述40只模型鼠随机均分为四组，A组：生理盐水对照组；B组：Rh2组；C组：顺铂组；D组：Rh2+顺铂（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积，相同且适宜条件下连续饲养16天。 ③实验结果绘成曲线 ④根据结果得出结论 结论有_____（答两点）。 20. 基因工程自20世纪70年代兴起后，在农牧业、医药卫生领域和食品工业等方面展示出广阔的前景。如图是通过基因工程获得转基因生物或产品的流程图，请回答下列问题： （1）若要构建小鼠乳腺生物反应器批量生产人抗利尿激素，应先从人体_____细胞中获取总RNA，通过逆转录获得cDNA，再经PCR后获得抗利尿激素基因。 （2）通过PCR技术可扩增目的基因，PCR的每次循环一般可以分为_____三步。一条单链cDNA在PCR仪中进行n次循环，需要消耗_____个引物。 （3）图中质粒A上m、n分别是启动子和终止子，RNA聚合酶在模板DNA链上的移动方向是_____（填“5′-3′”或“3′-5′”）。已知目的基因转录的模板链b链，箭头处是限制酶的切点（Nco Ⅰ：5′-C↓CATGG-3′；Nhe Ⅰ：5′-G↓GATCC-3′），目的基因无法与载体A连接，为了使目的基因成功表达，需要在目的基因两侧加接末端，b链处加接末端5′_____。 （4）构建小鼠乳腺生物反应器时，科研人员需要将抗利尿激素基因与小鼠乳腺蛋白基因启动子重组在一起，目的是_____。膀胱生物反应器与乳腺生物反应器相比，具有的显著优势在于不受转基因动物的_____的限制，而且从尿液中提取蛋白质比在乳汁中提取简便、高效。 21. 若两个DNA分子具有同源序列。同源序列之间会发生类似于染色体互换的行为，该过程称为同源重组。利用这种原理，可以将目的基因插入到表达载体上。相关结构如图1所示。 （1）一般来说基因表达载体，除启动子、终止子之外，还应该包含__________（至少回答两点）。 （2）根据图1载体的结构，可判断a、b、c、d四条链，属于模板链的是_______________。根据图2目的基因的方向分析，在构建基因表达载体时，其非模板链的__________（填写“3’”或“5’”）端应靠近启动子。 （3）为使目的基因具有和载体同源的序列，引物Ⅲ和引物Ⅳ都要依据_________序列进行设计。请写出引物Ⅲ（目的基因上游）的序列：5’________3’；（写出10个碱基即可）。 （4）在载体线性化的过程中，使用了PCR的方法，用到了两种引物，引物I和引物II。在鉴定农杆菌中是否含有重组质粒时，重新设计了引物Ⅲ和引物Ⅳ，以便同时用四种引物对农杆菌中提取的DNA进行PCR，图3为某同学预期的PCR产物电泳图谱。 ①需要对引物Ⅲ和引物Ⅳ重新设计的原因是_______________。 ②根据图谱分析，PCR产物在电场中的移动方向为__________（填写“M→N”或“N→M”），四种预期结果中含有重组质粒的是___________，最不可能出现的是_____________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $