精品解析：四川省绵阳市江油中学2023-2024学年高二下学期期中检测生物试题

江油中学2023-2024学年度下期2022级半期考试 生物试题 一、选择题（本题包括25小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题意） 1. 下列关于泡菜家庭制作的叙述，正确的是（　　） A. 泡菜腌制时间过长，食盐用量过高易造成细菌大量滋生 B. 制作泡菜时可向坛中加入适量陈泡菜水，可缩短发酵时间 C. 泡菜生产过程中亚硝酸盐随腌制时间逐渐积累而后趋于稳定 D. 为了避免杂菌污染，泡菜坛需严格灭菌处理，盐水需煮沸使用 【答案】B 【解析】 【分析】泡菜发酵的实验原理： 1.乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。 2.利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。 【详解】A、食盐用量过高会抑制细菌大量繁殖，A错误； B、家庭制作泡菜时，往往需要向泡菜坛内加入“陈泡菜水”，这样做的目的是提供乳酸菌菌种，进而缩短发酵时间，B正确； C、在整个发酵过程中，亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势，C错误； D、泡菜坛需要进行消毒，由于发酵过程中环境条件变化可以抑制杂菌生长，故泡菜坛不需要严格灭菌，盐水需要煮沸冷却待用，D错误。 故选B。 2. 下列关于传统发酵技术与发酵工程的说法，错误的是（　　） A. 发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身 B. 发酵条件的变化会影响微生物的生长、繁殖和代谢途径等 C. 通过发酵工程获得的单细胞蛋白可作为食品添加剂、微生物饲料等 D. 与传统发酵技术相比，发酵工程通常使用的是混合菌种 【答案】D 【解析】 【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。 2、产品不同，分离提纯的方法一般不同：①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。 3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。 4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小。 【详解】A、发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，A正确； B、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，B正确； C、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，可作为食品添加剂，例如用酵母菌生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂，甚至制成“人造肉”工人们直接使用；也可制成微生物饲料，例如在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，动物食用后能提高免疫力，C正确； D、与传统发酵技术相比，发酵工程通常使用的是单一菌种，D错误。 故选D。 3. 下列对相关操作流程的叙述，错误的是（　　） A. 泡菜制作：煮沸、冷却盐水→蔬菜处理、加调料、装坛→加盐水→无氧发酵→泡菜 B. 果酒制作：挑选葡萄→去梗剪枝→冲洗→无氧发酵→果酒 C. 酵母菌的纯培养：配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌 D. 分解尿素的细菌的培养与计数：土壤取样→样品稀释→涂布平板→培养与观察→计数 【答案】B 【解析】 【分析】制作泡菜利用的是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌。果酒制作利用的是酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 【详解】A、制作泡菜利用的菌种是乳酸菌，异化方式为厌氧型，需在无氧条件下发酵，泡菜制作为煮沸、冷却盐水→蔬菜处理、加调料、装坛→加盐水→无氧发酵→泡菜，A正确； B、制作果酒时应先冲洗后去枝梗，减少杂菌污染机会，B错误； C、酵母菌的纯培养过程为配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌，C正确； D、分解尿素的细菌的培养与计数：土壤取样→样品稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→培养与观察→计数，D正确。 故选B。 4. 微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列相关叙述正确的是（　　） A. 在微生物接种的实验中，常用紫外线对接种工具、超净工作台进行灭菌 B. 倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行 C. 配制好的培养基转移到锥形瓶后，可采用高压蒸汽灭菌或干热灭菌 D. 用平板划线法分离菌种，划线5个区域，接种环需要灼烧灭菌5次 【答案】B 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、在微生物接种的实验中，常用紫外线对接种室或超净工作台进行消毒，A错误； B、待培养基冷却至50℃左右（避免温度过高烫手）时，在酒精灯火焰附近进行倒平板操作，B正确； C、配制好的培养基转移到锥形瓶后，采用高压蒸汽灭菌，不能进行干热灭菌，C错误； D、用平板划线法分离菌种，划线5个区域，每次接种之前均需要灼烧接种环灭菌，最后划线完成也需要灼烧灭菌，共6次，D错误。 故选B。 5. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 先将10g土壤进行高温灭菌，再倒入90mL无菌水 B. 以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不一定是尿素分解菌 C. 用稀释涂布平板法进行尿素分解菌计数时，结果往往比实际值高 D. 以未接种的培养基为对照组，可判断选择培养基是否具有选择作用 【答案】B 【解析】 【分析】微生物筛选的关键是选择培养基的使用，通过选择培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他微生物在选择培养基上是不能生存或生存受到抑制。 【详解】A、先将10g土壤进行梯度稀释，再倒入90mL无菌水，不需要对土壤灭菌，A错误； B、以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌，还有可能是自生固氮菌，因此需要对筛选的尿素分解菌进行鉴定，B正确； C、因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察至的是一个菌落，故用稀释涂布平板法进行尿素分解菌计数时，结果往往比实际值低，C错误； D、以未接种的培养基为对照组，能判断培养基是否被杂菌污染，不能判断选择培养基是否有选择作用，D错误。 故选B。 6. 植物组织培养技术可应用于工厂化生产。下列有关植物细胞工程的叙述，正确的是（　　） A. 植物组织培养的条件是外植体细胞发生了基因突变或基因重组 B. 外植体培养到植株的过程只受外源激素调控，不受内源激素调控 C. 获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D. 通过植物组织培养获得次生代谢物紫杉醇的过程不需要表达细胞的全能性 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素），而非发生基因突变或基因重组，A错误； B、外植体的脱分化和再分化受外源激素（如生长素、细胞分裂素）和内源激素的共同调控。外源激素调节培养过程，但内源激素的水平和比例也直接影响细胞的分裂、分化方向，B错误； C、获得脱毒苗的常用外植体是茎尖分生组织（因其病毒含量低），而非成熟的根或茎（病毒易积累）。脱毒苗是通过组织培养去除已感染病毒，恢复为无病毒状态，但不增强对病毒的抵抗力（重新感染后仍会发病），C错误； D、生产次生代谢物（如紫杉醇）时，只需将外植体培养成愈伤组织或悬浮细胞，通过扩大培养诱导细胞合成代谢产物。此过程不需要表达细胞的全能性，只需维持细胞分裂和代谢活性，D正确。 故选D。 7. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的细胞膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，下列分析正确的是（ ） A. 过程①表示在低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体 B. 植物体细胞杂交过程中可以用灭活的病毒对原生质体进行诱导融合 C. 过程②可以根据是否发生质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生 D. 过程③培养基中生长素/细胞分裂素的比值较高有利于愈伤组织的形成 【答案】C 【解析】 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】A、获得植物原生质体的操作一般在等渗溶液中进行，若在低渗溶液中进行，则去掉细胞壁的原生质体会因吸水而涨破，A错误； B、灭活病毒诱导法是诱导动物细胞融合的方法，B错误； C、融合后的杂种细胞再生出新的细胞壁是原生质体融合完成的标志，故可利用质壁分离现象鉴定细胞壁是否再生，C正确； D、过程③的培养基中需添加比值适中的细胞分裂素和生长素，有利于形成愈伤组织，D错误。 故选C。 8. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是（　　） A. 植物体细胞杂交技术属于有性杂交，包括细胞融合和植物组织培养技术 B. 植物组织培养技术和动物细胞培养技术的原理相同 C. 卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光长时间照射等方法 D. 重构胚需要用物理或化学方法激活，使其完成细胞分裂和发育进程 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养技术：1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。2、原理：植物细胞的全能性。3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。4、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、植物体细胞杂交技术是将不同种类植物细胞融合并培养形成杂种植株，包括细胞融合和植物组织培养技术，属于无性繁殖，A错误； B、植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，B错误； C、核移植前需要使用显微操作直接去除的方法把细胞核去除（并非是显微注射法），C错误； D、在体细胞核移植过程中，用物理方法或化学方法（如电刺激、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，D正确。 故选D。 9. 从患者脱落的乳牙中获取牙髓干细胞，经体外培养，将形成的干细胞聚合体植入患者牙髓腔，使得牙齿神经、血管再生，完全恢复牙齿原有功能。下列关于相关叙述，错误的是（　　） A. 培养基中需要加入糖类、氨基酸、无机盐等营养物质，还有适量血清 B. 培养过程中定期更换培养液，主要目的是清除细胞代谢物 C. 培养过程中加入CO2的主要目的是促进细胞代谢 D. 培养牙髓干细胞时培养基的渗透压应与人体内环境相近 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【详解】A、培养基中需要加入糖类、氨基酸、无机盐等营养物质，同时还需要加入动物血清，以保证动物细胞的正常生长，A正确； B、定期更换培养液的目的主要是防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，B正确； C、培养过程中加入CO2的目的是维持培养液pH的稳定，C错误； D、培养牙髓干细胞时培养基渗透压应与人体内环境相近，因为内环境是机体进行正常生命活动的必要条件，D正确。 故选C。 10. 图甲为受精作用的过程以及早期胚胎发育示意图，图乙表示早期胚胎发育的某个时期。下列叙述正确的是（ ） A. 自然条件下，过程①在哺乳动物的子宫内进行且每次只形成一个受精卵 B. 图甲中过程②细胞数量增加，胚胎的总体积和细胞内遗传物质几乎不变 C. 随着胚胎逐步扩大，结构⑥破裂，胚胎从其中伸展出来，该过程叫作孵化 D. 图乙处于图甲中的a时期，细胞⑦将来发育成胎儿的胎膜和胎盘 【答案】B 【解析】 【分析】哺乳动物胚胎发育的重要阶段：（1）卵裂期：在透明带内进行的，特点是细胞分裂方式为有丝分裂，细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，或略有缩小。（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎。（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。 【详解】A、受精的场所在输卵管，自然条件下，过程①在哺乳动物的输卵管内进行，A错误； B、图甲中过程②（在透明带内进行）细胞通过有丝分裂数量增加，有丝分裂过程细胞中遗传物质几乎不变，胚胎的总体积不变，B正确； C、胚胎发育到囊胚阶段，囊胚进一步扩大，会导致结构⑤（透明带）破裂，胚胎从其中伸展出来，该过程叫作孵化，C错误； D、图乙为囊胚期，处于图甲中的a时期，细胞⑦为内细胞团细胞，将来发育成胎儿的各种组织，D错误。 故选B。 11. 人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员通过细胞工程技术获得杂交瘤细胞。下列相关叙述错误的是（ ） A. 在培养骨髓瘤细胞时，为防止接触抑制现象，需进行传代培养 B. 用特定的选择培养基进行筛选时，只有融合的杂交瘤细胞能在该培养基上生长 C. 将杂交瘤细胞进行体外培养，一段时间后可在细胞培养液中获得单克隆抗体 D. 若利用制得的单克隆抗体进行检测，结果为阳性，则说明该患者可能患有急性心肌梗塞 【答案】A 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、骨髓瘤细胞能够无限增殖，进行细胞培养时，一般不会出现接触抑制现象，A错误； B、用选择培养基进行筛选时，只有融合的杂交瘤细胞能生长，进而实现杂交瘤细胞的筛选，B正确； C、将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，一段时间后可在小鼠腹腔中获得单克隆抗体，若在体外条件下大规模培养，可在细胞培养液中获得单克隆抗体，C正确； D、人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一，故利用制得的单克隆抗体进行检测结果为阳性，则说明该患者可能患有急性心肌梗塞，D正确。 故选A。 12. 在家畜优良品种繁育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述正确的是（ ） A. 采集的卵母细胞要经过获能处理后才能完成受精 B. 当胚胎发育到适宜阶段时可在液氮环境中冷冻保存 C. 胚胎移植前需要对受体进行选择和免疫抑制处理 D. 运用胚胎分割技术可以提高胚胎移植的成活率 【答案】B 【解析】 【分析】1、胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作； 2、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。 【详解】A、采集的卵母细胞需要在体外进行人工培养至减数第二次分裂中期才算成熟，才具备受精能力，不是进行获能处理，A错误； B、当胚胎发育到适宜阶段时可将其取出向受体移植或冷冻保存，如可在液氮环境中冷冻保存，B正确； C、胚胎移植前，需选择健康体质和正常繁殖能力的受体且进行同期发情处理，不是进行免疫抑制处理，C错误； D、胚胎分割可以获得多个胚胎，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，D错误。 故选B。 13. 如图表示细胞工程操作中的某些过程，下列叙述正确的是（　　） A. 若A、B分别表示白菜和甘蓝的原生质体，则需对C每日给予光照以获得白菜—甘蓝植株 B. 若A、B分别表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，则仅利用抗原—抗体结合的原理即可筛选获得可分泌特定抗体的C C. 若A、B分别表示精子和卵细胞，体外受精后，需将C培养至原肠胚阶段再进行胚胎分割，以获得更多个体 D. 若A、B分别表示体细胞和去核卵母细胞，则C的遗传物质与A不完全相同 【答案】D 【解析】 【分析】题图表示细胞融合的过程，其中植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，再采用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株；单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，再克隆化培养获得单克隆抗体。 【详解】A、若A、B分别表示白菜和甘蓝的原生质体，则杂种细胞C需经脱分化和再分化形成杂种植株，脱分化过程需要避光培养，A错误； B、若A、B分别表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，诱导融合之后的细胞需先借助选择培养基筛选出杂交瘤细胞，再经克隆化培养，利用抗原—抗体杂交筛选出可分泌特定抗体的C，B错误； C、若A、B分别表示精子和卵细胞，则C需培养至桑葚胚（桑椹胚）或囊胚阶段再进行胚胎分割，C错误； D、若A、B分别表示体细胞和去核卵母细胞，则C的细胞核遗传物质来自A，细胞质遗传物质来自A和B，即C的遗传物质与A不完全相同，D正确。 故选D。 14. 生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述合理的是（　　） A. 我国允许用基因编辑技术对基因进行敲除、插入等，设计“完美试管婴儿” B. 转基因食品生产的都是自然界中存在的物质，安全检测是不必要的，可放心食用 C. 转基因微生物制成的生物武器，目前人类难以预防和治疗，危害性大，应禁止 D. 生殖性克隆人能丰富人类基因的多样性，我国允许在特定人群中进行相关实验 【答案】C 【解析】 【分析】1、转基因技术给人类带来了琳琅满目的产品，也引发了社会对转基因产品安全性的关注和争论。 2、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体，它面临很多伦理问题。我国不赞成、不允许、不支持、不接.受任何生殖性克隆人实验。 3、生物武器的种类包括致病菌、病毒和生化毒剂等，它曾对人类造成严重的伤害。我国反对生物武器及其技术和设备的扩散。 【详解】A、利用基因编辑技术设计完美试管婴儿，已经涉及新生命的诞生，会造成生物技术安全与伦理问题，A不符合题意； B、转基因食物产品通常导入了外来基因，由于该基因可能存在表达毒性物质、造成基因污染等隐患，安全检测是必需的，B不符合题意； C、转基因微生物制成的生物武器往往是人类从来没有接触过的致病菌，可能让大批受感染者突然发病而无药可医，因此该类生物武器具有目前人类难以预防和治疗的特点，应禁止，C符合题意； D、克隆为无性繁殖，可见生殖性克隆人不能丰富人类基因的多样性，我国禁止生殖性克隆人实验，D不符合题意。 故选C。 15. 4种限制酶的识别序列和切割位点如表所示。下列叙述错误的是（ ） 限制酶 BamHI EcoRI MfeI HindⅢ 识别序列和切割位点 5'-G↓GATCC-3' 5'-G↓AATTC-3' 5'-C↓AATTG-3' 5'-A↓AGCTT-3' A. 该4种限制酶识别序列都是由6个脱氧核苷酸组成 B. 该4种限制酶切割产生的DNA片段均为黏性末端 C. 该4种限制酶切割产生的DNA都不能相互连接 D. 该4种限制酶都在两条链中特定部位断裂磷酸二酯键 【答案】C 【解析】 【分析】限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的核苷酸序列，并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶。限制酶在识别序列进行交错切割，结果形成两条单链末端，这种末端的核苷酸顺序是互补的，可形成氢键，所以称为黏性末端。 【详解】A、根据表格信息，4种限制酶识别序列均是由6个核苷酸组成，A正确； B、结合表中信息可知，该4种限制酶切割产生的DNA片段均为黏性末端，B正确； C、限制酶EcoRI和MfeI能产生相同的黏性末端，它们切割的片段在DNA连接酶的作用下可以链接，C错误； D、根据限制酶的作用可知，限制酶切割DNA分子时，断裂的是磷酸二酯键，D正确； 故选C。 16. 某同学用新鲜洋葱为材料进行DNA的粗提取与鉴定实验，下列叙述错误的是（　　） A. 研磨切碎的洋葱时加入适量的研磨液有利于核DNA的释放 B. 可用预冷的体积分数为75%的酒精溶解DNA，利于其析出 C. 丝状DNA能够溶解于2mol/L的NaCl溶液 D. 沸水浴条件下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色 【答案】B 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理： （1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精； （2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，研磨切碎的洋葱时加入适量的纤维素酶有利于破坏细胞壁，有利于DNA释放，A正确； B、DNA在95%的冷酒精中溶解度小，故向含DNA的滤液中加入预冷的体积分数为95%的酒精溶液，更有利于DNA析出，不是体积分数为75%的酒精，B错误； C、DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度大，故溶解白色丝状物DNA时需要加入2mol/L的NaCl溶液，C正确； D、二苯胺试剂可作为鉴定DNA的试剂，DNA和二苯胺在沸水浴的条件下反应呈蓝色，D正确。 故选B。 17. 下列有关目基因导入受体细胞和检测的叙述，正确的是（　　） A. 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是花粉管通道法 B. 将某种药用蛋白基因直接导入动物乳腺细胞中可获得乳腺生物反应器 C. 对目的基因进行扩增时，可通过荧光标记技术实时定量测定产物的量 D. 验证转基因抗虫棉时，可通过RNA分子标记检测目的基因是否表达出蛋白质 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，A错误； B、将某种药用蛋白基因导入动物受精卵中即可获得乳腺生物反应器，B错误； C、对目的基因进行扩增时，可通过荧光标记技术，利用荧光基团和淬灭基团制成探针，实时定量测定产物的量，C正确； D、验证转基因抗虫棉是否成功时，应该通过接种实验验证，即为转基因抗虫棉接种相应抗的害虫，检测抗虫棉是否表现出抗虫特性，D错误。 故选C。 18. 研究人员利用蛋白质工程将细菌纤维素酶的第137、179、194位相应氨基酸替换为赖氨酸后，纤维素酶热稳定性得到了提高。下列叙述错误的是（　　） A. 改造纤维素酶也需要构建基因表达载体 B. 对纤维素酶的改造是通过直接改造mRNA实现的 C. 经改造后的纤维素酶热稳定性提高这一性状可遗传 D. 蛋白质工程可以改造现有蛋白质或者制造新的蛋白质 【答案】B 【解析】 【分析】蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。 【详解】AB、蛋白质工程是对基因进行修饰改造或创造合成新基因（而不是直接改造mRNA实现的），然后进行表达，故必须构建基因表达载体，A正确，B错误； C、蛋白质工程是对基因进行修饰改造或创造合成新基因，然后进行表达，改造后的蛋白质的性状能遗传给子代，因此经蛋白质工程改造后的纤维素酶热稳定性提高这一性状可遗传，C正确； D、蛋白质工程获得的是自然界没有的蛋白质，蛋白质工程可以改造现有蛋白质或者制造新的蛋白质，D正确。 故选B。 19. 下列有关DNA片段的扩增及电泳鉴定实验的叙述，正确的是（　　） A. PCR缓冲液中一般要加Mg2＋，用于激活RNA聚合酶 B. 琼脂糖熔化后立即加入适量的核酸染料混匀，用来指示DNA迁移的位置 C. 电泳时，在凝胶中的DNA分子的迁移速率只与DNA分子大小有关 D. 电泳缓冲液加入电泳槽时，需要没过凝胶1mm为宜 【答案】D 【解析】 【分析】1、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出，上百万份的DNA拷贝。2、利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增。PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。PCR仪实质上就是一台能够自动调控温度的仪器，一次PCR一般要经历30次循环。 【详解】A、DNA聚合酶需要Mg2＋激活，PCR缓冲液中一般要加Mg2＋，用于激活DNA聚合酶，A错误； B、琼脂糖熔化，要稍冷却后加入适量的核酸染料混匀，用来指示DNA迁移的位置，B错误； C、在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，C错误； D、电泳缓冲液加入电泳槽时，需要没过凝胶1mm为宜，D正确。 故选D。 20. 如图所示为来自某二倍体动物体内的细胞，下列相关叙述错误的是（ ） A. 细胞①处于细胞分裂中期，该时期着丝点排列在细胞板上 B. 细胞②处于细胞分裂间期，该时期有基因的复制与表达 C. 细胞①与③中，染色单体数目不同，但核DNA数目相同 D. 细胞①所处时期的前一时期，核膜消失，核仁逐渐解体 【答案】A 【解析】 【分析】根据题意和图示分析可知：①中染色体的着丝点排列在赤道板上，处于有丝分裂中期；②中呈染色质状态，且中心体加倍，处于有丝分裂间期；③中着丝点分裂，处于有丝分裂后期。 【详解】A、细胞①中着丝点排列在细胞中央，此时应为细胞分裂中期，而细胞板出现在植物细胞有丝分裂末期，A错误； B、间期的主要特点是DNA的复制和有关蛋白质的合成，B正确； C、细胞①中有8条染色单体，8条核DNA，而细胞③中无染色单体，核DNA数目为8条，C正确； D、细胞①所处时期的前一时期应为前期，而前期的特点有核膜逐渐消失和核仁逐渐解体，D正确。 故选A。 【点睛】 21. 线粒体置换技术是将母亲携带突变线粒体的卵子细胞核移植到去核的健康线粒体捐赠者卵胞浆中获得的重构卵母细胞，与携带者丈夫的精子进行受精，从而获得重构胚胎的技术，由重构胚胎发育而来的就是三亲婴儿。下列有关说法错误的是（ ） A. 培育三亲婴儿的过程中运用了核移植技术，但不属于无性繁殖 B. 子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应是胚胎移植的生理学基础 C. 为获得较多的卵母细胞，可对捐献者和母亲注射性激素 D. 卵母细胞捐献者携带的白化病基因不会遗传给三亲婴儿 【答案】C 【解析】 【分析】试管婴儿是指人的卵细胞和精子在体外完成受精作用，发育到早期胚胎的一定阶段，再移入到母体子宫内继续发育到足月诞生的婴儿，由于受精过程和早期胚胎发育通常在试管中完成，所以叫试管婴儿。 【详解】A、培育三亲婴儿过程中用到了核移植技术，但该过程中存在精子和卵细胞结合的过程，不属于无性繁殖，A正确； B、子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是外来胚胎移植存活的关键，是胚胎移植的理论基础，B正确； C、为获得较多的卵母细胞，可对捐献者和母亲注射促性腺激素，而不是性激素，C错误； D、发育成三亲婴儿的受精卵的细胞质来自捐献者，选择无线粒体遗传病捐献者可降低发病概率，卵母细胞捐献者只提供了细胞质基因，白化病基因存在于细胞核中，不能遗传给“三亲婴儿”，D正确。 故选C。 22. 下图分别表示某种质粒和含目的基因的DNA片段，利用相关工具酶将二者构建成基因表达载体并导入受体菌。几种可供使用的限制酶识别序列及其切割位点为EcoRⅠ：-G↓AATTC-；BamHⅠ：-G↓GATCC-；BclⅠ：-T↓GATCA-；Sau3AⅠ：-↓GATC-；SmaⅠ：-CCC↓GGG-。 注：TetR表示四环素抗性基因；AmpR表示氨苄青霉素抗性基因。 下列关于构建基因表达载体时限制酶的选择及其相关叙述，错误的是（　　） A. 若单独使用SmaI，目的基因容易发生自身环化，表达的产物可能不相同 B. 若选择BamHⅠ和SmaI，能在四环素培养基中生长的受体菌一定含有目的基因 C. 若单独使用SmaⅠ，则含有目的基因的受体菌不能在氨苄青霉素培养基中生长 D. 若用EcoRI和BclⅠ切割质粒，则需用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA 【答案】B 【解析】 【分析】限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端或平末端。 【详解】A、用同一种限制酶切割质粒和含目的基因的DNA片段后，目的基因可能会反向连接到质粒上，因此目的基因表达的产物可能不相同，A正确； B、若选择BamHⅠ和SmaⅠ切割质粒和含目的基因的DNA片段，重组质粒上含有正常的四环素抗性基因：能在四环素培养基中生长的受体菌有可能获得了重组质粒，也有可能获得的是普通质粒，B错误； C、若单独使用SmaⅠ切割质粒和含目的基因的DNA片段，会破坏质粒上的氨苄青霉素抗性基因，使含有目的基因的受体菌不能在氨苄青霉素培养基中生长，C正确； D、含目的基因的DNA片段上没有BclⅠ的识别序列，不能使用BclⅠ切割含目的基因的DNA片段，但Sau3AⅠ切割DNA后产生的黏性末端与BclⅠ相同，故若用EcoRⅠ和BclⅠ切割质粒，则需用EcoRⅠ和Sau3AI切割含目的基因的DNA片段，D正确。 故选B。 23. 用A和B两种限制酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切开），电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述错误的是（ ） A. 图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点 B. 用酶A和酶B同时处理图1中DNA片段可增加6个游离的磷酸基团 C. 若用酶A和酶B同时处理该DNA片段，则电泳后得到5种产物 D. 电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA结合，便于在紫外灯下观察 【答案】C 【解析】 【分析】限制酶酶切，是一项基于DNA限制酶的基因工程技术，其基本原理是利用限制酶对DNA上特定序列的识别，来确定切割位点并实现切割，从而获得所需的特定序列。 【详解】A、图2的结果①得到的碱基对数分别是500、3500、6000，结果②得到的碱基对数分别是2000、8000，结合图1可推测Y是限制酶A的酶切位点，X代表的碱基对数为4500，即图1中有两个限制酶A的酶切位点，切割完后得到三个长度的片段：3500、（4500+1500）、500，正好与图2的酶①结果相符，A正确； B、限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段，可断开6个磷酸二酯键，最终得到6个游离的磷酸基团，B正确； C、由题干信息限制酶在对应切点一定能切开，可知用酶A和酶B同时处理该DNA可以得到4个DNA片段，电泳后得到4种产物，C错误； D、用电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察条带，D正确。 故选C。 24. 关于“观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂”实验及相关叙述，错误的是（　　） A. 培养洋葱根尖时添加适量DNA合成抑制剂，可使细胞停滞在细胞周期的分裂期 B. 通过统计视野中不同时期的细胞数目，可比较细胞周期不同时期的时间长短 C. 有丝分裂产生的子细胞染色体数目不变，在形态结构和生理功能上与亲代细胞保持相似 D. 在同一分生区组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞，处于分裂间期的细胞数目最多 【答案】A 【解析】 【分析】细胞周期： （1）分裂间期 完成DNA分子的复制和有关蛋白质的合成，同时细胞有适度的生长。 （2）分裂期 前期：核膜消失、核仁解体，染色质成为染色体（每条染色体含两条染色单体），出现纺锤体。 中期：每条染色体的着丝粒排列在赤道板上。 后期：染色体的着丝粒分为两个，姐妹染色单体分开成为两条染色体，在纺锤丝的作用下分别移向细胞两极。 末期：染色体变为染色质，纺锤丝消失，出现新的核膜、核仁；植物细胞在赤道板上出现细胞板，细胞板扩展形成新的细胞壁，动物细胞细胞膜从细胞的中部向内凹陷，最后把细胞缢裂成两部分。 【详解】A、在有丝分裂过程中，DNA复制发生在间期，DNA合 成可逆抑制剂可使DNA的合成被阻断，若培养洋葱根尖时添加适量的 DNA 合成可逆抑制剂，则处于间期的细胞的DNA合成可被阻断，处于分裂 期的细胞暂时不受影响而继续细胞周期的运转,最终细胞会停滞在细胞周期的间期，A 错误； B、统计视野中不同时期的细胞数目，可比较细胞周期不同时期的 时间长短，B正确； C、有丝分裂过程是亲代细胞的染色体经过复制后，精确地 平均分配到两个子细胞中，因此亲子代细胞在细胞形态、结构和生理功能 上保持相似性，C正确； D、细胞周期的大部分时间处于分裂间期，大约占细胞周期的 90%~95%，因此在观察根尖分生组织细胞的有丝分裂实验中，在同一分 生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞，且处于分裂间期的细胞数最 多，D正确。 故选A。 25. 下图甲和乙是细胞分裂过程中相关规律的示意图，下列与此有关的叙述正确的（　　） A. 甲图中A＋B、B＋C、C＋D的时间长短相同，均可表示完整的细胞周期 B. 甲图中有丝分裂是在其细胞周期的B、D段完成DNA的复制 C. 乙图中的GH段表示细胞一分为二，导致细胞中DNA含量减半 D. 乙图中EF段细胞中的DNA结构不稳定，容易发生基因突变 【答案】D 【解析】 【分析】分析甲图：AC段表示分裂间期，BD段表示分裂期。 分析乙图：EF段形成的原因是DNA的复制；FG段表示有丝分裂前期和中期、减数第一次分裂、减数第二次分裂前期和中期；GH段形成的原因是着丝点分裂；H以后表示有丝分裂后期和末期、减数第二次分裂后期和末期。 【详解】A、一个细胞周期是指从上一次分裂结束开始到下一次分裂结束为止，包括分裂间期和分裂期，且间期在前，即甲图中的A＋B和C＋D，B＋C不能表示一个完整的细胞周期，但A＋B、B＋C、C＋D的时间长短相同，A错误； B、若甲图表示有丝分裂，则DNA的复制在每一个细胞周期的分裂间期完成，即图中的A、C段，B错误； C、乙图中GH段细胞中发生着丝粒，导致有丝分裂或减数第二次分裂后期染色体数目加倍，但是DNA含量未发生改变，C正确； D、乙图中EF段细胞中发生DNA复制，易发生碱基对的增添、缺失或替换，即易发生基因突变，D正确。 故选D。 二、非选择题（本题包括4个小题，共50分。考生根据要求作答） 26. 长春碱是一种新研发的抗肿瘤药物，能够抑制肿瘤细胞的增殖，但对正常细胞也有一定的毒副作用。为研究长春碱抗肿瘤的机制，科研人员采用细胞周期阻滞剂（CDK2抑制剂）处理某种哺乳动物胚胎细胞，研究长春碱的毒性与细胞周期的关系，实验流程如下： Ⅰ、分组处理。 甲组：胚胎细胞+培养液→培养24h 乙组：胚胎细胞+培养液→培养8h→转入含CDK2抑制剂的培养液培养16h 丙组：胚胎细胞+含CDK2抑制剂的培养液→培养16h→转入不含CDK2抑制剂的培养液培养8h Ⅱ、以上三组胚胎细胞每组分别取其中的一半，检测细胞核中DNA含量如下表所示；每组中的另一半细胞用长春碱处理相同时间后，检测细胞凋亡率如右图所示。回答以下问题： DNA含量 分组 甲 乙 丙 细胞占比% 2C 50.04 48.07 12.10 2C~4C 36.88 49.04 20.96 4C 13.08 2.89 66.94 （1）一个完整的细胞周期应包括细胞分裂间期和分裂期（M），根据DNA是否复制，又可将分裂间期分为：DNA合成前期（G1）、DNA合成期（S）和分裂准备期（G2），根据表中数据分析，CDK2抑制剂可将细胞分裂阻断在细胞分裂间期的_______期，依据是_______。 （2）与甲、乙两组细胞相比，丙组细胞DNA含量为4C的细胞数目明显增多，由此可说明CDK2抑制剂对细胞周期的阻断是_______（填“可逆的”或“不可逆的”）。 （3）据图分析，长春碱可将细胞分裂阻断在_______期，依据是_______。 （4）用长春碱对某肿瘤患者进行治疗时，该药物对神经细胞和造血干细胞的毒性强弱表现为_______。 【答案】（1） ①. S ②. 乙组细胞转入含CDK2抑制剂的培养液培养16h后，DNA含量为2C~4C的细胞数目增多 （2）可逆的 （3） ①. G2期或M ②. 甲、乙、丙三组细胞用长春碱处理后，凋亡率与DNA含量为4C的细胞数呈正相关，DNA含量为4C的细胞为G2期和M期细胞 （4）长春碱对神经细胞的毒性较小，对造血干细胞的毒性较大 【解析】 【分析】连续分裂的细胞，从一次分裂完成时开始，到下一次分裂完成时为止，为一个细胞周期。在细胞分裂的过程中：G1期：物质代谢活跃，迅速合成RNA和蛋白质、核糖体的增生，细胞体积显著增大，为S期的复制作好物质和能量的准备；动物细胞细胞分裂时，纺锤体由细胞两极的中心体发出。核膜在M期中的细胞分裂前期消失，M期中的细胞分裂末期出现，同时在细胞分裂末期也会重现核仁，恢复细胞核结构。 【小问1详解】 G1期细胞DNA还没有复制，DNA含量为2C，S期细胞正在进行DNA的复制，DNA含量为2C~4C，G2期和M期，DNA完成了复制，DNA含量为4C；根据表中数据可知，乙组细胞转入含CDK2抑制剂的培养液培养16h后，DNA含量为2C~4C的细胞数明显增多，说明CDK2抑制剂可将细胞分裂阻断在S期。 【小问2详解】 由于CDK2抑制剂可将细胞分裂阻断在S期，丙组在加入CDK2抑制剂的培养液中培养了16h，大部分细胞被阻断在S期，又转入不含CDK2抑制剂的培养液培养8h，原处于S期的细胞进入G2期和M期，DNA含量为4C的细胞数目增多，由此也可说明CDK2抑制剂对细胞周期的阻断是可逆的。 【小问3详解】 据图、表可知，甲、乙、丙三组细胞用长春碱处理后，凋亡率与DNA含量为4C的细胞数呈正相关，DNA含量为4C的细胞为G2期和M期细胞，说明长春碱可将细胞分裂阻断在G2期或M期。 【小问4详解】 长春碱主要是作用于能够分裂的细胞，神经细胞是高度分化的细胞，一般不能分裂，长春碱对神经细胞毒性较小，造血干细胞能够分裂，长春碱对造血干细胞的毒性较大。 27. 研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，研究发现堆肥温度随时间变化的曲线如图1，从堆肥中筛选分离出高效降解角蛋白的嗜热菌的流程如图2. 回答下列问题： （1）实验室常见的细菌培养基的营养成分包含H2O、NaCl、蛋白胨和牛肉膏等，其中蛋白胨主要为细菌提供__________、碳源和维生素等。为筛选高效降解角蛋白的嗜热菌，将堆肥样品处理后接种至以_________（填“尿素”、“角蛋白”或“蛋白胨”）为唯一氮源的培养基上进行培养。 （2）堆肥样品在________（填“a”、“b”或“c”）点取样，最可能筛选到目标菌。根据接种培养后得到的结果判断，步骤③的接种方法为______。步骤③接种培养后，发现培养基上出现两种菌落，甲菌落周围无透明圈，乙菌落周围出现透明圈，为筛选目标菌，应该选择乙菌落进一步纯化，选择的理由为_______。 （3）有人推测，甲菌可能利用了空气中的氮气作为氮源。若要进一步确定甲菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路和预期结果，即_______。 （4）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的角蛋白超过某一浓度时，某菌株对角蛋白的降解量反而下降，可能的原因为_________（答一点）。 【答案】（1） ①. 氮源 ②. 角蛋白 （2） ①. c ②. 稀释涂布平板法 ③. 乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解角蛋白 （3）将甲菌接种在无氮源培养基上，若甲菌能生长，则说明甲菌能利用空气中的氮气作为氮源；若甲菌不能生长，则说明甲菌不能利用空气中的氮气作为氮源 （4）培养基中角蛋白浓度过高，可能会导致细胞失水，进而抑制菌株的生长 【解析】 【分析】稀释涂布平板法：先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 1:10、1:100 、1:1000、1:10000 …),然后分别取不同稀释液,与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倒入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保培养一定时间即可出出菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散。 【小问1详解】 虽然各种培养基的配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质，蛋白胨主要为细菌提供氮源、碳源和维生素等。题中从堆肥中筛选分离出高效降解角蛋白的嗜热菌，所以用角蛋白为唯一氮源的培养基培养，可筛选出高效降解角蛋白的嗜热菌。 【小问2详解】 分析题及图1可知，筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，即筛选的目标菌要满足两个条件，既要耐高温又要能够高效降解角蛋白，所以在c点取样，最可能达到目的。在固体培养基表面接种微生物常采用平板划线法和稀释涂布平板法，接种培养后的效果图分别是和，可判断步骤③的接种方法为稀释涂布平板法。该研究的目标菌是高效降解角蛋白的嗜热菌，培养基中乙菌落的周围出现透明圈，说明乙菌能够降解角蛋白。 【小问3详解】 将甲菌接种在无氮源培养基上，若甲菌能生长，则说明甲菌能利用空气中的氮气作为氮源；若甲菌不能生长，则说明甲菌不能利用空气中的氮气作为氮源。 【小问4详解】 在筛选过程中，若培养基中角蛋白浓度过高，可能会导致细胞失水，进而抑制菌株的生长。 28. 生殖性克隆和治疗性克隆是两个重要的工程技术，下图是小鼠相关的研究过程。回答下列问题： （1）核移植之前，卵母细胞要培养至_____期；可通过_____法使两细胞融合，形成重构胚。与胚胎细胞核移植相比，图示移植方式难度_____。 （2）根据发育时期判断，图中早期胚胎是_____胚，其中的b、c将分别发育为_____。胚胎移植之前，需要对代孕母鼠进行_____处理。 （3）图中过程⑥的实质是_____。过程③和过程⑦中不会出现免疫排斥反应的是_____，为避免另一个过程出现免疫排斥反应，可以从_____中取小鼠成纤维细胞。 （4）B技术_____性克隆。我国政府“不赞成、不允许、不支持、不接受”将_____（填图中字母）技术应用于人类。 【答案】（1） ①. 减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期） ②. 电融合 ③. 高 （2） ①. 囊 ②. 胎膜和胎盘、胎儿的各种组织 ③. 同期发情 （3） ①. 基因的选择性表达 ②. ③ ③. 帕金森病模型鼠 （4） ①. 治疗 ②. A 【解析】 【分析】1、核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。 2、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 【小问1详解】 用于构建重组胚胎的卵母细胞需要培养至减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期）；将供体细胞注入去核卵母细胞后，还需要通过电融合法使两细胞融合形成重构胚；由于动物胚胎细胞分化程度较低，表现全能性相对容易，故动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。 【小问2详解】 由图可知，早期胚胎是囊胚，b为滋养层细胞，将来发育成胎膜和胎盘，c为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；胚胎移植之前，需要对代孕母鼠进行同期发情处理。 【小问3详解】 由图可知，过程⑥是细胞分化，细胞分化的实质是基因的选择性表达；过程③是胚胎移植，过程⑦是干细胞移植，胚胎移植过程中受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应；通过体外诱导帕金森病模型鼠细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），取自身细胞形成的iPS细胞表面抗原相同，用于治疗疾病可避免免疫排斥反应。 【小问4详解】 由题干和题图可知，A技术为生殖性克隆，B技术为治疗性克隆；我国政府“不赞成、不允许、不支持、不接受”将生殖性技术应用于人类。 29. 多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fatl，培育转fatl基因猪，操作过程如图所示。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。据图回答下列问题： （1）用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、____（答出2点）等。 （2）由图可知，在构建基因表达载体时，为克服目的基因自身环化，即线性DNA的末端相互连接形成圆环，以及便于目的基因与载体的连接，切割含目的基因的DNA和载体的限制酶应选用____和____。 （3）构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是____。除GFP基因外，未标注出的必需元件还有____。 （4）猪成纤维细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期____，以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为____。此过程中，对于悬浮培养的细胞直接用____法收集细胞处理成细胞悬液。 （5）经检测，fatl基因成功整合在猪基因组DNA后，不能说明成功培育转基因猪，还需要____。 【答案】（1）引物、4种脱氧核苷酸（原料）、（耐高温的）DNA聚合酶 （2） ①. EcoRⅠ ②. BamHⅠ （3） ①. 标记基因（使相关细胞发出绿色荧光方便进行筛选） ②. 复制原点 （4） ①. 更换培养液 ②. 传代培养 ③. 离心法 （5）进行个体生物学水平的鉴定，即检测转基因猪体内的多不饱和脂肪酸（PUFAs）是否增加 【解析】 【分析】1、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：利用PCR技术扩增。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定。 2、基因表达载体必需具备的元件有目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点。 3、目的基因的检测和鉴定：（1）分子水平上的检测 ；（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、引物、4种脱氧核苷酸（原料）、（耐高温的）DNA聚合酶等。 【小问2详解】 据题图可知，运载体有三种限制酶位点可供选择，目的基因fat1两侧有EcoRI和BamHI两种限制酶酶切位点，正好运载体上也有这两种限制酶位点，为防止目的基因自身环化使用双酶切，可选用EcoRI和BamHI切割含目的基因的DNA和载体。 【小问3详解】 构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是标记基因（使相关细胞发出绿色荧光方便进行筛选）。基因表达载体必需具备的元件有目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点；所构建的重组基因表达载体中未标注出的必需元件除了标记基因还有复制原点。 【小问4详解】 猪成纤维细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期更换培养液，以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为传代培养，此过程中，对于悬浮培养的细胞直接用离心法收集细胞处理成细胞悬液。 【小问5详解】 转基因猪已经培育成功的标志是fat1基因在转基因猪体内成功表达，此时能够检测到转基因猪体内含有fat1基因表达的蛋白质，转基因猪体内具有较高的PUFAs含量。而该实验没有检测fat1基因是否成功表达；没有在个体生物学水平鉴定转基因猪的PUFAs含量，不能说明成功培育转基因猪。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 江油中学2023-2024学年度下期2022级半期考试 生物试题 一、选择题（本题包括25小题，每小题2分，共50分。每小题只有一个选项符合题意） 1. 下列关于泡菜家庭制作的叙述，正确的是（　　） A. 泡菜腌制时间过长，食盐用量过高易造成细菌大量滋生 B. 制作泡菜时可向坛中加入适量陈泡菜水，可缩短发酵时间 C. 泡菜生产过程中亚硝酸盐随腌制时间逐渐积累而后趋于稳定 D. 为了避免杂菌污染，泡菜坛需严格灭菌处理，盐水需煮沸使用 2. 下列关于传统发酵技术与发酵工程的说法，错误的是（　　） A. 发酵工程产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身 B. 发酵条件的变化会影响微生物的生长、繁殖和代谢途径等 C. 通过发酵工程获得的单细胞蛋白可作为食品添加剂、微生物饲料等 D. 与传统发酵技术相比，发酵工程通常使用的是混合菌种 3. 下列对相关操作流程的叙述，错误的是（　　） A. 泡菜制作：煮沸、冷却盐水→蔬菜处理、加调料、装坛→加盐水→无氧发酵→泡菜 B. 果酒制作：挑选葡萄→去梗剪枝→冲洗→无氧发酵→果酒 C. 酵母菌的纯培养：配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离酵母菌→培养酵母菌 D. 分解尿素的细菌的培养与计数：土壤取样→样品稀释→涂布平板→培养与观察→计数 4. 微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列相关叙述正确的是（　　） A. 在微生物接种的实验中，常用紫外线对接种工具、超净工作台进行灭菌 B. 倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行 C. 配制好的培养基转移到锥形瓶后，可采用高压蒸汽灭菌或干热灭菌 D. 用平板划线法分离菌种，划线5个区域，接种环需要灼烧灭菌5次 5. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 先将10g土壤进行高温灭菌，再倒入90mL无菌水 B. 以尿素为唯一氮源培养基上长出的不一定是尿素分解菌 C. 用稀释涂布平板法进行尿素分解菌计数时，结果往往比实际值高 D. 以未接种的培养基为对照组，可判断选择培养基是否具有选择作用 6. 植物组织培养技术可应用于工厂化生产。下列有关植物细胞工程叙述，正确的是（　　） A. 植物组织培养的条件是外植体细胞发生了基因突变或基因重组 B. 外植体培养到植株的过程只受外源激素调控，不受内源激素调控 C. 获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病毒能力 D. 通过植物组织培养获得次生代谢物紫杉醇的过程不需要表达细胞的全能性 7. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的细胞膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，下列分析正确的是（ ） A. 过程①表示在低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体 B. 植物体细胞杂交过程中可以用灭活的病毒对原生质体进行诱导融合 C. 过程②可以根据是否发生质壁分离现象鉴别杂种细胞细胞壁是否再生 D. 过程③培养基中生长素/细胞分裂素的比值较高有利于愈伤组织的形成 8. 下列关于细胞工程的叙述，正确的是（　　） A. 植物体细胞杂交技术属于有性杂交，包括细胞融合和植物组织培养技术 B. 植物组织培养技术和动物细胞培养技术的原理相同 C. 卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光长时间照射等方法 D. 重构胚需要用物理或化学方法激活，使其完成细胞分裂和发育进程 9. 从患者脱落的乳牙中获取牙髓干细胞，经体外培养，将形成的干细胞聚合体植入患者牙髓腔，使得牙齿神经、血管再生，完全恢复牙齿原有功能。下列关于相关叙述，错误的是（　　） A. 培养基中需要加入糖类、氨基酸、无机盐等营养物质，还有适量血清 B. 培养过程中定期更换培养液，主要目的是清除细胞代谢物 C. 培养过程中加入CO2的主要目的是促进细胞代谢 D. 培养牙髓干细胞时培养基渗透压应与人体内环境相近 10. 图甲为受精作用的过程以及早期胚胎发育示意图，图乙表示早期胚胎发育的某个时期。下列叙述正确的是（ ） A. 自然条件下，过程①在哺乳动物的子宫内进行且每次只形成一个受精卵 B. 图甲中过程②细胞数量增加，胚胎的总体积和细胞内遗传物质几乎不变 C. 随着胚胎逐步扩大，结构⑥破裂，胚胎从其中伸展出来，该过程叫作孵化 D. 图乙处于图甲中的a时期，细胞⑦将来发育成胎儿的胎膜和胎盘 11. 人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员通过细胞工程技术获得杂交瘤细胞。下列相关叙述错误的是（ ） A. 在培养骨髓瘤细胞时，为防止接触抑制现象，需进行传代培养 B. 用特定的选择培养基进行筛选时，只有融合的杂交瘤细胞能在该培养基上生长 C. 将杂交瘤细胞进行体外培养，一段时间后可在细胞培养液中获得单克隆抗体 D. 若利用制得的单克隆抗体进行检测，结果为阳性，则说明该患者可能患有急性心肌梗塞 12. 在家畜优良品种繁育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。下列叙述正确的是（ ） A. 采集的卵母细胞要经过获能处理后才能完成受精 B. 当胚胎发育到适宜阶段时可在液氮环境中冷冻保存 C. 胚胎移植前需要对受体进行选择和免疫抑制处理 D. 运用胚胎分割技术可以提高胚胎移植的成活率 13. 如图表示细胞工程操作中的某些过程，下列叙述正确的是（　　） A. 若A、B分别表示白菜和甘蓝的原生质体，则需对C每日给予光照以获得白菜—甘蓝植株 B. 若A、B分别表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，则仅利用抗原—抗体结合的原理即可筛选获得可分泌特定抗体的C C. 若A、B分别表示精子和卵细胞，体外受精后，需将C培养至原肠胚阶段再进行胚胎分割，以获得更多个体 D. 若A、B分别表示体细胞和去核卵母细胞，则C的遗传物质与A不完全相同 14. 生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述合理的是（　　） A. 我国允许用基因编辑技术对基因进行敲除、插入等，设计“完美试管婴儿” B. 转基因食品生产的都是自然界中存在的物质，安全检测是不必要的，可放心食用 C. 转基因微生物制成的生物武器，目前人类难以预防和治疗，危害性大，应禁止 D. 生殖性克隆人能丰富人类基因的多样性，我国允许在特定人群中进行相关实验 15. 4种限制酶的识别序列和切割位点如表所示。下列叙述错误的是（ ） 限制酶 BamHI EcoRI MfeI HindⅢ 识别序列和切割位点 5'-G↓GATCC-3' 5'-G↓AATTC-3' 5'-C↓AATTG-3' 5'-A↓AGCTT-3' A. 该4种限制酶识别序列都是由6个脱氧核苷酸组成 B. 该4种限制酶切割产生的DNA片段均为黏性末端 C. 该4种限制酶切割产生的DNA都不能相互连接 D. 该4种限制酶都在两条链中特定部位断裂磷酸二酯键 16. 某同学用新鲜洋葱为材料进行DNA的粗提取与鉴定实验，下列叙述错误的是（　　） A. 研磨切碎的洋葱时加入适量的研磨液有利于核DNA的释放 B. 可用预冷的体积分数为75%的酒精溶解DNA，利于其析出 C. 丝状DNA能够溶解于2mol/L的NaCl溶液 D. 沸水浴条件下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色 17. 下列有关目的基因导入受体细胞和检测的叙述，正确的是（　　） A. 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是花粉管通道法 B. 将某种药用蛋白基因直接导入动物乳腺细胞中可获得乳腺生物反应器 C. 对目的基因进行扩增时，可通过荧光标记技术实时定量测定产物的量 D. 验证转基因抗虫棉时，可通过RNA分子标记检测目的基因是否表达出蛋白质 18. 研究人员利用蛋白质工程将细菌纤维素酶的第137、179、194位相应氨基酸替换为赖氨酸后，纤维素酶热稳定性得到了提高。下列叙述错误的是（　　） A. 改造纤维素酶也需要构建基因表达载体 B. 对纤维素酶的改造是通过直接改造mRNA实现的 C. 经改造后的纤维素酶热稳定性提高这一性状可遗传 D. 蛋白质工程可以改造现有蛋白质或者制造新的蛋白质 19. 下列有关DNA片段的扩增及电泳鉴定实验的叙述，正确的是（　　） A. PCR缓冲液中一般要加Mg2＋，用于激活RNA聚合酶 B. 琼脂糖熔化后立即加入适量的核酸染料混匀，用来指示DNA迁移的位置 C. 电泳时，在凝胶中的DNA分子的迁移速率只与DNA分子大小有关 D. 电泳缓冲液加入电泳槽时，需要没过凝胶1mm为宜 20. 如图所示为来自某二倍体动物体内的细胞，下列相关叙述错误的是（ ） A. 细胞①处于细胞分裂中期，该时期着丝点排列在细胞板上 B. 细胞②处于细胞分裂间期，该时期有基因的复制与表达 C. 细胞①与③中，染色单体数目不同，但核DNA数目相同 D. 细胞①所处时期的前一时期，核膜消失，核仁逐渐解体 21. 线粒体置换技术是将母亲携带突变线粒体的卵子细胞核移植到去核的健康线粒体捐赠者卵胞浆中获得的重构卵母细胞，与携带者丈夫的精子进行受精，从而获得重构胚胎的技术，由重构胚胎发育而来的就是三亲婴儿。下列有关说法错误的是（ ） A. 培育三亲婴儿的过程中运用了核移植技术，但不属于无性繁殖 B. 子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应是胚胎移植的生理学基础 C. 为获得较多的卵母细胞，可对捐献者和母亲注射性激素 D. 卵母细胞捐献者携带的白化病基因不会遗传给三亲婴儿 22. 下图分别表示某种质粒和含目的基因的DNA片段，利用相关工具酶将二者构建成基因表达载体并导入受体菌。几种可供使用的限制酶识别序列及其切割位点为EcoRⅠ：-G↓AATTC-；BamHⅠ：-G↓GATCC-；BclⅠ：-T↓GATCA-；Sau3AⅠ：-↓GATC-；SmaⅠ：-CCC↓GGG-。 注：TetR表示四环素抗性基因；AmpR表示氨苄青霉素抗性基因。 下列关于构建基因表达载体时限制酶的选择及其相关叙述，错误的是（　　） A. 若单独使用SmaI，目的基因容易发生自身环化，表达的产物可能不相同 B. 若选择BamHⅠ和SmaI，能在四环素培养基中生长的受体菌一定含有目的基因 C. 若单独使用SmaⅠ，则含有目的基因的受体菌不能在氨苄青霉素培养基中生长 D. 若用EcoRI和BclⅠ切割质粒，则需用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA 23. 用A和B两种限制酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切开），电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述错误的是（ ） A. 图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点 B. 用酶A和酶B同时处理图1中DNA片段可增加6个游离的磷酸基团 C. 若用酶A和酶B同时处理该DNA片段，则电泳后得到5种产物 D. 电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA结合，便于在紫外灯下观察 24. 关于“观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂”实验及相关叙述，错误的是（　　） A. 培养洋葱根尖时添加适量DNA合成抑制剂，可使细胞停滞在细胞周期的分裂期 B. 通过统计视野中不同时期的细胞数目，可比较细胞周期不同时期的时间长短 C. 有丝分裂产生的子细胞染色体数目不变，在形态结构和生理功能上与亲代细胞保持相似 D. 在同一分生区组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞，处于分裂间期的细胞数目最多 25. 下图甲和乙是细胞分裂过程中相关规律的示意图，下列与此有关的叙述正确的（　　） A. 甲图中A＋B、B＋C、C＋D的时间长短相同，均可表示完整的细胞周期 B. 甲图中有丝分裂是在其细胞周期的B、D段完成DNA的复制 C. 乙图中的GH段表示细胞一分为二，导致细胞中DNA含量减半 D. 乙图中EF段细胞中的DNA结构不稳定，容易发生基因突变 二、非选择题（本题包括4个小题，共50分。考生根据要求作答） 26. 长春碱是一种新研发的抗肿瘤药物，能够抑制肿瘤细胞的增殖，但对正常细胞也有一定的毒副作用。为研究长春碱抗肿瘤的机制，科研人员采用细胞周期阻滞剂（CDK2抑制剂）处理某种哺乳动物胚胎细胞，研究长春碱的毒性与细胞周期的关系，实验流程如下： Ⅰ、分组处理。 甲组：胚胎细胞+培养液→培养24h 乙组：胚胎细胞+培养液→培养8h→转入含CDK2抑制剂的培养液培养16h 丙组：胚胎细胞+含CDK2抑制剂的培养液→培养16h→转入不含CDK2抑制剂的培养液培养8h Ⅱ、以上三组胚胎细胞每组分别取其中的一半，检测细胞核中DNA含量如下表所示；每组中的另一半细胞用长春碱处理相同时间后，检测细胞凋亡率如右图所示。回答以下问题： DNA含量 分组 甲 乙 丙 细胞占比% 2C 50.04 48.07 12.10 2C~4C 36.88 49.04 20.96 4C 13.08 2.89 66.94 （1）一个完整的细胞周期应包括细胞分裂间期和分裂期（M），根据DNA是否复制，又可将分裂间期分为：DNA合成前期（G1）、DNA合成期（S）和分裂准备期（G2），根据表中数据分析，CDK2抑制剂可将细胞分裂阻断在细胞分裂间期的_______期，依据是_______。 （2）与甲、乙两组细胞相比，丙组细胞DNA含量为4C的细胞数目明显增多，由此可说明CDK2抑制剂对细胞周期的阻断是_______（填“可逆的”或“不可逆的”）。 （3）据图分析，长春碱可将细胞分裂阻断在_______期，依据是_______。 （4）用长春碱对某肿瘤患者进行治疗时，该药物对神经细胞和造血干细胞的毒性强弱表现为_______。 27. 研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，研究发现堆肥温度随时间变化的曲线如图1，从堆肥中筛选分离出高效降解角蛋白的嗜热菌的流程如图2. 回答下列问题： （1）实验室常见的细菌培养基的营养成分包含H2O、NaCl、蛋白胨和牛肉膏等，其中蛋白胨主要为细菌提供__________、碳源和维生素等。为筛选高效降解角蛋白的嗜热菌，将堆肥样品处理后接种至以_________（填“尿素”、“角蛋白”或“蛋白胨”）为唯一氮源的培养基上进行培养。 （2）堆肥样品在________（填“a”、“b”或“c”）点取样，最可能筛选到目标菌。根据接种培养后得到的结果判断，步骤③的接种方法为______。步骤③接种培养后，发现培养基上出现两种菌落，甲菌落周围无透明圈，乙菌落周围出现透明圈，为筛选目标菌，应该选择乙菌落进一步纯化，选择的理由为_______。 （3）有人推测，甲菌可能利用了空气中的氮气作为氮源。若要进一步确定甲菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路和预期结果，即_______。 （4）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的角蛋白超过某一浓度时，某菌株对角蛋白的降解量反而下降，可能的原因为_________（答一点）。 28. 生殖性克隆和治疗性克隆是两个重要的工程技术，下图是小鼠相关的研究过程。回答下列问题： （1）核移植之前，卵母细胞要培养至_____期；可通过_____法使两细胞融合，形成重构胚。与胚胎细胞核移植相比，图示移植方式难度_____。 （2）根据发育时期判断，图中早期胚胎是_____胚，其中的b、c将分别发育为_____。胚胎移植之前，需要对代孕母鼠进行_____处理。 （3）图中过程⑥的实质是_____。过程③和过程⑦中不会出现免疫排斥反应的是_____，为避免另一个过程出现免疫排斥反应，可以从_____中取小鼠成纤维细胞。 （4）B技术是_____性克隆。我国政府“不赞成、不允许、不支持、不接受”将_____（填图中字母）技术应用于人类。 29. 多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fatl，培育转fatl基因猪，操作过程如图所示。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。据图回答下列问题： （1）用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、____（答出2点）等。 （2）由图可知，在构建基因表达载体时，为克服目的基因自身环化，即线性DNA的末端相互连接形成圆环，以及便于目的基因与载体的连接，切割含目的基因的DNA和载体的限制酶应选用____和____。 （3）构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是____。除GFP基因外，未标注出的必需元件还有____。 （4）猪成纤维细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期____，以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为____。此过程中，对于悬浮培养的细胞直接用____法收集细胞处理成细胞悬液。 （5）经检测，fatl基因成功整合在猪基因组DNA后，不能说明成功培育转基因猪，还需要____。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $