专题15 细胞工程-【好题汇编】2025年高考生物二模试题分类汇编（新高考通用）

专题15 细胞工程 考点概览 考点01 植物细胞工程 考点02 动物细胞工程 考点03 胚胎工程 植物细胞工程考点01 一、单选题 1．（2025·河北石家庄·二模）中药材贡菊含有多种活性物质，具有清肝明目、驱邪降火等功效，适合口干、火旺、目涩的人群。为获得更多该中药材，可采用生物相关工程技术对贡菊进行脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是（　　） A．利用贡菊的茎段作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗 B．贡菊中含有的绿原酸、菊内酯等次生代谢物通常是贡菊基本生命活动所必需的 C．操作过程中，贡菊幼胚细胞和培养基都需要经过严格的灭菌处理 D．在接种外植体之前，需先后用酒精和次氯酸钠溶液对其进行消毒 【答案】D 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、茎尖中几乎不含病毒，故利用贡菊的茎尖作为外植体来获得脱毒苗，A错误； B、贡菊中含有的初生代谢物通常才是贡菊基本生命活动所必需的，B错误； C、贡菊幼胚细胞不需要经过严格的灭菌处理，C错误； D、外植体在接种于培养基培养时，需先后用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒，消毒流程为先用流水充分冲洗后的外植体用酒精消毒30s，然后立即用无菌水清洗2~3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2~3次，D正确。 故选D。 2．（2025·江西·二模）不同种植物体细胞杂交会出现较严重的染色体间排斥现象。不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色体,与未经射线照射的受体细胞融合,所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉能产生抗癌药物紫杉醇,为了培育产生紫杉醇的柴胡,科研人员将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了不对称体细胞杂交,诱导融合后,只统计了6组细胞,如下表所示。下列叙述正确的是（　　） 材料 融合细胞组号 1 2 3 4 5 6 染色体数(条) 9-11 12 12-14 12-16 13 14 A．需用一定剂量的紫外线照射柴胡原生质体与未经紫外线照射的红豆杉原生质体融合 B．表中有4组细胞为杂交细胞,这些细胞经植物组织培养获得的植株可能产生紫杉醇 C．在能够高效合成紫杉醇的杂交细胞中,应选择红豆杉的核基因含量较高的进行培养 D．将红豆杉和柴胡的愈伤组织分别用胰蛋白酶处理,能够各自获得有活力的原生质体 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交技术就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术； 植物体细胞杂交的过程：①诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；②细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成；③植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；④杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。 【详解】A、红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)，据表格所示的细胞中染色体数目（均小于24）可知，为了培育产生紫杉醇的柴胡，需用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体与未经紫外线照射的柴胡原生质体融合，A错误； B、因为柴胡细胞染色体数为12条，并且红豆杉细胞中染色体数目为24条，因此科研人员筛选的目标细胞中的染色体数目为大于12小于24条的细胞。柴胡细胞染色体数为12条，多余的染色体是其他细胞融合参与进去的。可判断组号为3、4、5、6的细胞为杂交细胞。这些细胞经植物组织培养获得的植株均可能产生紫杉醇，B正确； C、红豆杉和柴胡有远缘杂交不亲和障碍，两种植物细胞的染色体间排斥较为明显，柴胡细胞是作为受体细胞，所以应在能够高效合成紫杉醇的杂交细胞中选择红豆杉的核基因含量较低的杂交细胞进行培养，C错误； D、将红豆杉和柴胡的愈伤组织分别用纤维素酶和果胶酶处理，能够各自获得有活力的原生质体，D错误。 故选B。 3．（2025·江苏·二模）研究人员以野生窄叶芍药的幼嫩茎段为外植体，通过在MS培养基中添加不同的植物生长调节剂研究影响愈伤组织诱导的主要因素，结果如下表。下列叙述错误的是（    ） 编号 植物生长调节剂组合 诱导率% 污染率% 褐化率% ① 6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L 84.3 3.60 3.33 ② 6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L 88.8 9.71 13.76 ③ 6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L 79.0 7.14 18.25 ④ 6-BA1.5mg/L+NAA1.0mg/L 70.3 1.60 26.70 注：植物组织培养中，（外植体）褐化会导致外植体脱分化、再分化和生长受阻，甚至使培养材料死亡。 A．选择嫩茎为外植体的主要原因是其分化程度低，易于诱导出愈伤组织 B．外植体接种到诱导愈伤组织培养基的操作应在酒精灯火焰旁进行 C．窄叶芍药愈伤组织诱导的最佳植物生长调节剂组合为② D．本研究为野生芍药资源的保护、扩大及开发利用提供了实践参考 【答案】C 【分析】该实验的自变量是植物生长调节剂类型及组合，检测指标是愈伤组织的诱导率、污染率、褐化率。 【详解】A、嫩茎分化程度低，细胞全能性更易表达，易于脱分化诱导出愈伤组织，A正确； B、外植体接种在酒精灯火焰旁进行，利用火焰旁的局部无菌环境，可减少污染，符合无菌操作要求，B正确； C、组合②虽诱导率为88.8%，但褐化率达13.76%（褐化会阻碍外植体脱分化、再分化甚至导致死亡），污染率为9.71%，综合来看，需兼顾诱导率、褐化率和污染率。而组合①诱导率84.3%，但污染率3.60%、褐化率3.33%，整体更优，最佳组合是①，C错误； D、通过研究愈伤组织诱导条件，利用组织培养技术可实现芍药快速繁殖，为野生芍药资源的保护与开发利用提供实践参考，D正确。 故选C。 4．（2025·广东清远·二模）科学家为解决马铃薯因感染茄科霍尔氏菌导致产量下降问题，利用植物体细胞杂交技术成功获得了茄子融合亲本的青枯病抗性杂种植株。下列相关说法错误的是（　　） A．混合酶液处理过程需要用纤维素酶和果胶酶混合去除细胞壁 B．过程①可利用聚乙二醇、Ca2+载体等方法诱导原生质体融合 C．过程②成功的标志是融合的原生质体长出新的细胞壁 D．过程③需对获得的杂种植株进行筛选 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交是指将两个来自不同种植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并将杂种细胞培育成新的植物体技术。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，在进行植物体细胞杂交时，需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，以获得原生质体，所以混合酶液处理过程需要用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁，A正确； B、过程①是诱导原生质体融合，常用的方法有物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇），而Ca2+载体一般用于将目的基因导入微生物细胞（如大肠杆菌）时，使细胞处于感受态，不是诱导原生质体融合的方法，B错误； C、过程②中融合的原生质体成功的标志是长出新的细胞壁，这意味着杂种细胞已经形成了完整的细胞结构，C正确； D、过程③是从愈伤组织培育成杂种植株，由于融合过程可能存在多种情况，所以需对获得的杂种植株进行筛选，以得到具有青枯病抗性的杂种植株，D正确。 故选B。 5．（2025·云南曲靖·二模）马铃薯易感染病毒，为培育脱毒苗，研究人员对植株进行30~35℃、28天的高温预处理，然后取其茎尖进行植物组织培养，获得了高脱毒率的脱毒苗。下列叙述错误的是（    ） A．对马铃薯植株进行高温预处理有可能使某些病毒的蛋白质变性 B．利用茎尖进行植物组织培养，是因为茎尖的病毒极少，甚至无病毒 C．茎尖组织细胞需要经过纤维素酶和果胶酶的处理才能进行脱分化培养 D．诱导马铃薯生芽和生根的培养基中，生长素和细胞分裂素的比例一般不同 【答案】C 【分析】1、植物组织培养是将离体的植物器官、组织或细胞，在人工控制的条件下，培养成完整植株的技术。在培育脱毒苗时，利用茎尖等部位是因为这些部位病毒含量低； 2、植物组织培养的应用：微型繁殖、作物脱毒(选材应该选择茎尖组织)、制造人工种子、单倍体育种(最大的优点是明显缩短育种年限，得到的全为纯种)、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产； 3、马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可利用马铃薯茎尖进行组织培养形成脱毒苗，该过程包括脱分化和再分化两个重要的步骤，该培养基中要加入生长素和细胞分裂素。 【详解】A、高温可以使蛋白质变性，对马铃薯植株进行高温预处理有可能使某些病毒的蛋白质变性，A正确； B、茎尖的病毒极少，甚至无病毒，所以利用茎尖进行植物组织培养可以获得脱毒苗，B正确； C、植物组织培养中，茎尖组织细胞不需要经过纤维素酶和果胶酶的处理，直接进行脱分化培养，C错误； D、诱导马铃薯生芽和生根的培养基中，生长素和细胞分裂素的比例一般不同，生长素和细胞分裂素的比例高时促进生根，比例低时促进生芽，D正确。 故选C。 6．（2025·陕西汉中·二模）植物甲（2n=20）抗虫、抗病性强，植物乙（2n=16）抗倒伏、耐盐碱。现科研人员培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　）    A．可通过分析植物丙的染色体数，来鉴定其是否为杂种植株（2n=18） B．过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C．过程④和⑤的培养基中均需要植物激素和光照等条件 D．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 【答案】D 【分析】分析题图：图示为甲、乙两种植物细胞融合并培育新植株的过程，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②③表示人工诱导原生质体融合以及再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化形成愈伤组织；⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。 【详解】A、植物甲染色体数为2n=20，植物乙染色体数为2n=16，二者体细胞杂交形成的杂种植株丙的染色体数应为20+16=36，而不是2n=18，所以不能通过染色体数为2n=18来鉴定其为杂种植株，A错误； B、过程②是诱导原生质体融合，常用的物理方法有离心、振动、电激等，化学方法是用聚乙二醇（PEG）诱导，而灭活的仙台病毒常用于诱导动物细胞融合，不是植物原生质体融合的常用方法，B错误； C、过程④是脱分化，脱分化过程不需要光照，在避光条件下进行更有利于愈伤组织的形成；过程⑤是再分化，再分化过程需要光照，以利于叶绿素的合成和植株的生长等，C错误； D、过程①中对植物甲和植物乙用酶处理的时间不同，很可能是因为两种亲本的细胞壁结构存在差异，不同结构的细胞壁对酶解的抵抗能力和所需时间不同，D正确。 故选D。 7．（2025·内蒙古·二模）铁皮石斛因自然繁殖力弱、生长缓慢及人类掠夺式采挖导致资源枯竭，植物组织培养技术为其繁殖提供了新思路。下列相关叙述正确的是（　　） A．在铁皮石斛生长发育过程中，所有细胞都能表现出全能性 B．诱导愈伤组织形成需要光照，后续再分化过程需黑暗处理 C．生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响细胞的发育方向 D．运用植物组织培养技术繁育铁皮石斛，可提高遗传多样性 【答案】C 【分析】植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的形成。 【详解】A、细胞全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。在铁皮石斛生长发育过程中，并不是所有细胞都能表现出全能性。一般来说，高度分化的细胞需要在离体、适宜的营养物质等条件下才有可能表现出全能性，而生物体内的细胞由于受到机体的调控等因素，并不会都表现出全能性，A错误； B、诱导愈伤组织形成时不需要光照，因为在黑暗条件下有利于细胞脱分化形成愈伤组织；后续再分化过程需要光照，光照可以促进叶绿素的合成以及芽的分化等，B错误； C、在植物组织培养过程中，生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响细胞的发育方向。当生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成；当细胞分裂素含量高于生长素时，主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成，C正确； D、运用植物组织培养技术繁育铁皮石斛，其原理是植物细胞的全能性，该过程属于无性生殖，遗传物质基本不发生改变，所以不能提高遗传多样性，D错误。 故选C。 8．（2025·辽宁·二模）与常规栽培技术相比，利用植物细胞培养进行药用次生代谢产物的生产具有显著的优越性，根据不同的需求可以采用不同的技术流程（如下图）。下列相关叙述错误的是（    ） A．培养体系1、2、3中的细胞基因型不完全相同 B．上图的过程与植物组织培养都需要更换培养基 C．将目标产物合成途径中的关键酶基因导入悬浮细胞，可用花粉管通道法 D．愈伤组织没有叶绿体，是异养型细胞，因此需在培养基中加入有机碳源 【答案】C 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、由图可知，体系1经转基因细胞系筛选培养获得，故其基因型与体系2和体现3不同，A正确； B、植物激素的浓度和比例等都会影响植物细胞的发育方向。结合图示，培养体系3先需要利用外植体诱导培养产生愈伤组织，再转移到诱导生根的培养基上产生毛状根，即上图过程中需要更换培养基，B正确； C、花粉管通道法是指在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道，将外源DNA导入受精卵细胞，并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。故将目标产物合成途径中的关键酶基因导入悬浮细胞，不可用花粉管通道法，C错误； D、在具有叶片分化之前植物细胞不能进行光合作用，所以植物组织培养的培养基中需要加入有机营养物质，D正确。 故选C。 9．（2025·广东深圳·二模）胞质雄性不育（CMS）是线粒体基因引起的胞质功能混乱现象，表现为花粉不育。经γ射线处理的芜菁细胞（AA，A表示染色体组）和甘蓝细胞（BB，B表示染色体组）融合，可获得CMS甘蓝植株（BB）。下列分析错误的是（　　） A．芜菁细胞和甘蓝细胞融合前需要去除两者的细胞壁 B．γ射线照射的作用是促进芜菁细胞与甘蓝细胞融合 C．融合后的CMS甘蓝获得了芜菁细胞的细胞质基因 D．植物体细胞杂交技术为培育CMS甘蓝提供一种路径 【答案】B 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】A、植物细胞由于有细胞壁的存在不能直接融合，需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A正确； B、γ射线照射的作用是破坏芜菁细胞的染色质，B错误； C、两种细胞融合产生的CMS甘蓝植株（BB）只含有甘蓝的染色体组，并且获得了芜菁细胞的细胞质基因，C正确； D、由题干信息可知，培育CMS甘蓝采用了植物体细胞杂交技术，即植物体细胞杂交技术为培育CMS甘蓝提供一种路径，D正确。 故选B。 10．（2025·北京朝阳·二模）我国科研人员改良棉花幼胚的体外培养技术，加快了幼胚发育至幼苗的速度（如图），缩短了棉花杂交育种所需的时间。相关叙述正确的是（　　） A．接种用的外植体幼胚需要消毒，培养基需要灭菌 B．幼胚经过脱分化和再分化发育为试管苗 C．图中不同幼胚的基因组成完全相同 D．该过程体现了高度分化的植物细胞具有全能性 【答案】A 【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。 【详解】A、为了防止杂菌污染，要对外植体进行消毒处理，对培养基要进行高压蒸汽灭菌处理，A正确； B、幼胚就是新植物的幼体，不需要经过脱分化处理，经过正常的分裂、分化就可以发育成完整的植物体，B错误； C、不同的幼胚是不同的受精卵发育而来，基因型不一定相同，C错误； D、幼胚是由受精卵发育而来的，是新植物的幼体，由幼胚发育成新植株是自然的发育过程，未体现细胞高度分化的植物细胞具有全能性，D错误。 故选A。 11．（2025·北京丰台·二模）青蒿素是从黄花蒿中提取的代谢物。研究人员在对黄花蒿进行组织培养时，发现愈伤组织中不合成青蒿素，而再分化形成的芽和苗中均能检测到青蒿素。相关分析最合理的是（　　） A．青蒿素合成需要细胞分化形成特定结构 B．芽和苗通过光合作用产生ATP为青蒿素合成提供能量 C．生长素与细胞分裂素的比例不会影响青蒿素产量 D．培养基中添加高浓度蔗糖有利于提高青蒿素产量 【答案】A 【分析】植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，愈伤组织中不合成青蒿素，青蒿素合成需要细胞分化形成特定结构，A正确； B、青蒿素合成所需的能量来自细胞呼吸，愈伤组织也可以进行细胞呼吸提供ATP，B错误； C、生长素与细胞分裂素的比例会影响细胞的分化，影响青蒿素产量，C错误； D、培养基中添加高浓度蔗糖会导致植物细胞失水，过高可能会导致死亡，不利于提高青蒿素产量，D错误。 故选A。 12．（2025·陕西商洛·二模）研究表明，一般能增加免疫器官重量的物质也具有一定增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组；实验处理如下表。下列有关叙述正确的是（　　） 组别 甲组 乙组 丙组（空白对照组） 实验处理 三白草细胞和鱼腥草细胞杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草细胞和鱼腥草细胞直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃；连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 A．三白草和鱼腥草细胞杂交前需先用酶解法处理获得原生质层 B．诱导三白草和鱼腥草的细胞融合可以使用PEG或灭活的病毒 C．丙组处理为加入等量蒸馏水，甲组愈伤组织形成过程中不发生基因的选择性表达 D．若甲、乙组结果相同且大于丙组，说明杂交愈伤组织能产生两种植物的细胞产物 【答案】D 【分析】植物体细胞杂交是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术 【详解】A、三白草和鱼腥草细胞杂交前需先用酶解法处理获得原生质体，而不是原生质层，常使用纤维素酶、果胶酶，A错误； B、诱导三白草和鱼腥草的细胞融合可以使用PEG，不使用灭活的病毒，B错误； C、甲组愈伤组织形成过程中存在基因的选择性表达过程，C错误； D、甲组处理是三白草细胞和鱼腥草细胞杂种愈伤组织的蒸馏水提取物，乙组处理是三白草细胞和鱼腥草细胞直接混合后的蒸馏水提取物，丙组是空白对照组，若甲、乙组结果相同且大于丙组，说明杂交愈伤组织能同时产生两种植物的细胞产物，D正确。 故选D。 13．（2025·山西晋城·二模）如图为利用植物细胞工程培育杂种植株的过程，A～C表示相关过程。下列叙述正确的是（　　） A．过程A首先需要用酶解法去除细胞壁，再用灭活病毒进行诱导融合 B．过程A中同种细胞的原生质体也可相互融合形成自体融合细胞 C．用秋水仙素处理过程B中的融合细胞，可使其形成新的细胞壁 D．过程C使用等比例的生长素和细胞分裂素更有利于杂种植株的形成 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交需要用纤维素酶、果胶酶去除植物细胞的细胞壁，形成原生质体，然后诱导原生质体的融合，杂种细胞融合完成的标志是生出新的细胞壁，之后进行植物组织培养，形成杂种植株。 【详解】A、过程A首先需要用酶解法去除细胞壁，再用化学法，如PEG融合法;或物理法，如电融合法、离心法等进行诱导融合，灭活的病毒处理是诱导动物细胞融合，A错误； B、过程A中同种细胞的原生质体也可相互融合形成自体融合细胞，B正确； C、秋水仙素处理可使染色体数目加倍，不能使融合细胞形成新的细胞壁，C错误； D、等比例的生长素和细胞分裂素处理会使愈伤组织只分裂不分化，不利于杂种植株的形成，D错误。 故选B。 14．（2025·黑龙江·二模）外植体接种到培养基上的组织培养过程称为初代培养，是植物组织培养技术的重要步骤。下列相关叙述正确的是（    ） A．外植体和培养基需要进行严格的灭菌处理 B．进行初代培养时，培养基应适当增大细胞分裂素的比例 C．在黑暗条件进行初代培养诱导愈伤组织形成 D．外植体经初代培养后分化产生不定根和芽 【答案】C 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。 【详解】A、外植体不能进行灭菌处理，A错误; B、初代培养是为了获得愈伤组织，培养基应保持细胞分裂素与生长素的比值接近1，B错误; C、在黑暗条件进行初代培养诱导愈伤组织形成，C正确; D、外植体经初代培养后脱分化获得愈伤组织，愈伤组织需更换培养基才能诱导产生不定根和芽，D错误。 故选C。 15．（2025·天津·二模）天津小站稻因品质优良而闻名。科研人员为获得小站稻脱毒苗，选取其茎尖进行植物组织培养，流程如下图所示。 茎尖组织→①→愈伤组织→②→脱毒苗 下列叙述正确的是（    ） A．②阶段需调整激素比例以诱导根和芽的形成 B．①过程需光照以促进细胞脱分化 C．愈伤组织的细胞无细胞壁，分裂能力强 D．脱毒苗的抗病毒能力可遗传给子代 【答案】A 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。 【详解】A、图中过程①代表脱分化，过程②③代表再分化，过程①②③所用的培养基成分及配比不都相同，主要是植物激素的含量比例不同，即②阶段需调整激素比例以诱导根和芽的形成，A正确； B、①过程为脱分化过程，该过程不需光照，B错误； C、愈伤组织是一团高度液泡化的、无定形状态的薄壁细胞，分裂能力强，全能性高，C错误； D、脱毒苗携带病毒较少或无毒，不具有抗病毒能力，D错误。 故选A。 16．（2025·山东潍坊·二模）赤霉病是小麦最严重的疾病之一，可以采用赤霉菌毒素来处理小麦的部分组织，再通过植物组织培养筛选获得抗赤霉病植株。下列说法正确的是（　　） A．小麦主要依靠其初生代谢物来抵抗赤霉菌毒素 B．筛选时，应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种 C．培养外植体先用酒精处理30min，再用次氯酸钠处理30s D．先将愈伤组织接到生根培养基上，然后再转接到生芽培养基上 【答案】B 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，诱导其生成完整植株的技术。 【详解】A、植物的次生代谢产物是植物在长期进化中对生态环境适应的结果，许多次生代谢产物具有抵御病菌侵害等作用，小麦主要依靠其次生代谢物来抵抗赤霉菌毒素，而不是初生代谢物。初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢过程，其产物如糖类、蛋白质等主要用于植物的基本生命活动，与抵抗病菌毒素关系不大，A错误； B、筛选抗赤霉病植株时，应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种，这样的品种在受到赤霉菌毒素影响时，受伤害程度相对较小，更有可能筛选出具有抗赤霉病能力的植株。如果选择对赤霉菌毒素敏感度高的品种，这些植株在培养过程中很容易受到毒素影响而死亡，不利于筛选出抗毒植株，B正确； C、培养外植体时，先用体积分数为70%的酒精处理30 - 60s，再用次氯酸钠处理10 - 30min，而不是先用酒精处理30min，再用次氯酸钠处理30s。酒精处理时间过长会对外植体造成伤害，次氯酸钠处理时间过短则可能无法达到很好的消毒效果，C错误； D、在植物组织培养中，一般先将愈伤组织接到生芽培养基上，诱导生芽，然后将生出芽的组织再接到生根培养基上，诱导生根。如果先接到生根培养基上，可能不利于芽的分化和生长，D错误。 故选B。 17．（2025·安徽淮南·二模）科学家将人参和胡萝卜细胞的原生质体融合，经培养获得8个杂种愈伤组织，检测发现这8个杂种愈伤组织均含有次生代谢物人参皂苷，其中大多数人参皂苷含量明显高于人参愈伤组织。蛋白质电泳检测中发现一条只在8个杂种愈伤组织中出现的特异条带。下列相关叙述正确的是（    ） A．可使用PEG融合法和灭活病毒诱导法促进两种原生质体融合 B．愈伤组织形成杂种植株是人参和胡萝卜细胞融合完成的标志 C．进行上述杂种愈伤组织培养时用到的培养基中不含有机物 D．大多数杂种愈伤组织的人参皂苷含量较高，可能与特异条带的蛋白质有关 【答案】D 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A、可使用PEG融合法促进两种原生质体融合，不能使用灭活病毒诱导，A错误； B、再生细胞壁的形成是人参和胡萝卜细胞融合完成的标志，B错误： C、进行上述杂种愈伤组织培养时用到的培养基中需要添加有机物，C错误； D、根据题干信息：蛋白质电泳检测中发现一条只在8个杂种愈伤组织中出现的特异条带，因此可以推测大多数杂种愈伤组织的人参皂苷含量较高，可能与特异条带的蛋白质有关，D正确。 故选D。 18．（2025·河北衡水·二模）利用微型繁殖技术可以获得大量的百合脱毒苗，进而获得无病毒、健康、高产的百合植株。制备百合脱毒苗的实验操作流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．实验中使用的培养基和所有器械都要灭菌，而外植体只需要进行酒精消毒即可 B．以上获得大量脱毒苗的过程属于无性繁殖，体现了植物细胞的全能性 C．从分生区取材培养获得的脱毒苗可以解决百合品质变差及产量降低的退化情况 D．植物微型繁殖技术既能实现种苗的大量繁殖，也能保持优良品种的遗传特性 【答案】A 【分析】植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。作物脱毒材料：分生区（如茎尖、芽尖）细胞；植物脱毒方法：进行组织培养；结果：形成脱毒苗。 【详解】A、在植物组织培养过程中，为了防止杂菌污染，实验中使用的培养基和所有器械都要进行灭菌处理，外植体需要进行消毒处理，一般先用体积分数为70%的酒精消毒，再用质量分数为0.1%的氯化汞溶液消毒，而不是仅进行酒精消毒，A错误； B、从图中可以看出，利用百合的分生区细胞，通过脱分化形成愈伤组织，再经过再分化形成芽，进而培育成脱毒苗，这个过程没有经过两性生殖细胞的结合，属于无性繁殖。并且该过程由植物细胞发育成完整的植株，体现了植物细胞的全能性，B正确； C、植物的分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因此从分生区取材培养获得的脱毒苗可以解决百合因病毒感染导致的品质变差及产量降低的退化情况，C正确； D、植物微型繁殖技术属于无性繁殖，具有能保持优良品种的遗传特性，还能在短时间内实现种苗的大量繁殖等优点，D正确。 故选A。 19．（2025·山西太原·二模）科研人员利用植物体细胞杂交技术培育出营养丰富、高产、高抗的优质猕猴桃新品种，其过程如下图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．过程Ⅰ脱分化时发生了基因的选择性表达 B．过程Ⅱ需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 C．过程Ⅲ形成的融合原生质体含六个染色体组 D．过程Ⅳ中可通过观察细胞中叶绿体的分布筛选细胞 【答案】C 【分析】进行植物体细胞杂交时需要用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除植物细胞的细胞壁，然后用相应的诱导方法诱导原生质体融合，植物细胞的融合通常使用化学法（聚乙二醇）或物理方法诱导融合，融合后的杂种细胞利用植物的组织培养技术培育成植株。 【详解】A 、细胞脱分化形成愈伤组织的过程本质上是基因的选择性表达，A正确； B、制备原生质体须用纤维素酶和果胶酶酶解细胞壁，B正确； C、过程III是原生质体融合，若品种A与品种B的原生质体融合，融合后的细胞染色体组数为六个染色体组，若品种A与品种C的原生质体融合，融合后的细胞染色体组数也含有六个染色体组，若品种B与品种C的原生质体融合，融合后的细胞含有四个染色体组，所以并不是所有情况下形成的融合原生质体都含六个染色体组，C错误； D 、过程IV是将融合的原生质体培养成杂种植株，不同品种的细胞中叶绿体的分布可能不同，因此可通过观察细胞中叶绿体的分布来筛选出杂种细胞，进而培养出杂种植株，D正确。 故选C。 20．（2025·山西·二模）现有甲、乙两个二倍体烟草品种，其基因型分别为aaBB和AAbb，在光强大于800勒克斯（光照强度单位）时都不能生长，这是aa或bb作用的结果。取甲、乙的花粉分别培养成植株丙、丁，将其叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后放到大于800勒克斯光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。下列相关叙述错误的是（    ） A．丙和丁有性杂交的子代在强光照下能发育成植株 B．将叶肉细胞制成原生质体时须在等渗溶液中进行 C．上述实验中发育形成的二倍体植株只有一种基因型 D．杂种融合细胞不能通过观察染色体数目进行筛选 【答案】A 【分析】植物体细胞杂交技术就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。 【详解】A、丙、丁植株为单倍体植株，高度不育，不能进行有性杂交，A错误； B、植物细胞外面有一层细胞壁，会阻碍细胞间的融合。将叶肉细胞制成原生质体时，需要去除细胞壁。为了保持细胞的正常形态和生理功能，须在等渗溶液中进行操作，防止细胞因渗透吸水或失水而涨破或皱缩，B正确； C、丙（aB）和丁（Ab）的原生质体融合，可能产生的融合细胞基因型有aaBB、AAbb、AaBb，在光强大于800勒克斯（光照强度单位）时都不能生长，这是aa或bb作用的结果，所以aaBB、AAbb不能生长，只有AaBb的植株可以正常生长，因此上述实验中发育形成的二倍体植株只有一种基因型，C正确； D、杂种融合细胞可能有aaBB、AAbb、AaBb等不同基因型，它们的染色体数目可能相同（都是二倍体），所以不能通过观察染色体数目进行筛选，D正确。 故选A。 21．（2025·云南红河·二模）研究表明，人参与胡萝卜体细胞杂交，获得的杂种细胞形成的愈伤组织中含有人参皂苷，且含量是融合前人参愈伤组织中的1．4倍。下列叙述正确的是（    ） A．可用电融合法、聚乙二醇融合法或者灭活病毒诱导得到杂种细胞 B．用纤维素酶和果胶酶处理人参、胡萝卜的愈伤组织获得原生质体 C．为提高人参愈伤组织的产生率，诱导时应注意严格灭菌并提供光照 D．人参与胡萝卜的体细胞能进行杂交，说明二者之间不存在生殖隔离 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A、电融合法、聚乙二醇融合法可用于诱导植物体细胞杂交获得杂种细胞，但灭活病毒诱导法适用于动物细胞融合，不能用于植物细胞，A错误； B、植物细胞壁主要成分是纤维素和果胶，人参、胡萝卜的愈伤组织细胞有细胞壁，用纤维素酶和果胶酶处理可去除细胞壁获得原生质体，B正确； C、诱导愈伤组织形成过程中，应严格灭菌，且一般需避光培养，光照不利于愈伤组织形成，C错误； D、人参和胡萝卜属于不同物种，存在生殖隔离，体细胞杂交打破了生殖隔离限制，D错误。 故选B。 22．（2025·河北邢台·二模）原生质体比正常植物细胞更易接受外源DNA，其制备过程主要包括取材→剪碎→酶解。下列叙述错误的是（　　） A．可用台盼蓝染液来鉴定原生质体活性 B．剪碎的目的是使酶与细胞充分接触 C．取材后需用酒精和次氯酸钠对材料灭菌 D．细胞壁可能会阻止外源DNA进入细胞 【答案】C 【分析】植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以制备原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶将细胞壁去除，这种去除细胞壁的方法称为酶解法。 【详解】A、台盼蓝可鉴别原生质体活性，活细胞不被染成蓝色，死细胞膜破损，被染成蓝色，A正确； B、剪碎材料可增大接触面积，便于酶解细胞壁，B正确； C、酒精和次氯酸钠常用于消毒（减少微生物数量），而非灭菌，C错误； D、细胞壁的存在可能阻碍外源DNA进入细胞，原生质体因去除了细胞壁，更易吸收外源DNA，D正确。 故选C。 23．（2025·重庆·二模）次生代谢产物在植物抗虫、抗病等方面发挥作用，也是药物、香料和色素等的重要来源。次生代谢产物X是植物体在干旱、虫害或微生物侵害等胁迫过程中产生的防御物质。其研发流程为：筛选高产细胞→确定细胞生长和产物X合成的关系（如图）→发酵生产X。下列叙述错误的是（    ） A．为了大量获取X，应先培养大量细胞，后改变条件使细胞停止生长 B．可利用基因工程的方法改造酵母菌，利用发酵工程生产X C．为提高目标细胞的X含量，可将微生物菌体或其产物作为诱导因子加入到培养基中 D．图示测定数据应该是来自细胞周期不同步、来源多样的细胞群 【答案】D 【分析】分析图示可知：在培养过程中细胞生物量不断增加，一段时间后才开始形成次生代谢产物X；当细胞生物量达到最大值、细胞停止生长后，次生代谢产物X才大量增加。 【详解】A、据实验结果可知，细胞停止生长后才开始大量合成X，为了大量获取X，应先培养大量细胞，后改变条件使细胞停止生长，A正确； B、可以把植物中合成X的相关基因导入酵母菌构建工程菌，利用发酵工程生产X，B正确； C、次生代谢产物X是植物体在干旱、虫害或微生物侵害等胁迫过程中产生的防御物质，为提高目标细胞的X含量，可将微生物菌体或其产物作为诱导因子加入到培养基中，C正确； D、图示测定数据应该是来自细胞周期同步、来源一致的细胞群，D错误。 故选D。 24．（2025·辽宁沈阳·二模）为培育切花菊脱毒苗，研究者在切取茎尖进行组织培养前先对母株适度热处理，以抑制难以脱除的病毒活性。下列叙述错误的是（    ） A．选取茎尖的原因是茎尖病毒极少甚至无病毒 B．设置热处理温度时需同时考虑病毒种类和母株耐受性 C．使用固体培养基既能固定茎尖又能减缓其水分流失 D．生根阶段可直接将植物激素加入诱导愈伤组织的培养基中 【答案】D 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、在植物组织培养中，选取茎尖进行培养来获得脱毒苗是常见的方法。因为植物分生区（如茎尖）的细胞分裂旺盛，病毒难以侵染，所以茎尖病毒极少甚至无病毒，这种特性使其适合作为培育脱毒苗的材料，A正确； B、在对母株进行热处理时，温度的设置至关重要。一方面，不同种类的病毒对温度的耐受性不同，需要合适的温度来抑制病毒活性；另一方面，母株自身对温度也有一定的耐受范围，温度过高可能会损伤母株。所以设置热处理温度时需同时考虑病毒种类和母株耐受性，B正确； C、固体培养基具有一定的支撑作用，能够固定茎尖，使其在培养过程中保持稳定的位置。同时，固体培养基的存在可以减缓水分的散失速度，为茎尖提供相对稳定的湿度环境，有利于茎尖的生长和发育，C正确； D、在植物组织培养的不同阶段，对植物激素的种类和浓度要求是不同的。诱导愈伤组织的培养基中植物激素的配比是特定的，而生根阶段需要的植物激素种类和比例与诱导愈伤组织阶段不同。所以生根阶段不能直接将植物激素加入诱导愈伤组织的培养基中，需要重新配制合适的培养基，D错误。 故选D。 25．（2025·浙江金华·二模）研究人员以白菜细胞（2n=20）与甘蓝细胞（2n=18）进行植物体细胞杂交得到杂种植株。通过PCR对杂种植株和亲本植株的物种特异性DNA进行扩增，电泳结果如下图所示。下列说法错误的是（　　） A．据图推测杂种植株的染色体数小于38条 B．叶绿体密度与液泡颜色等差异可做为区分杂交细胞类型的依据 C．通过凝胶电泳结果可知，杂种植株兼具有白菜和甘蓝的某些遗传特性 D．植物体细胞杂交的优点是可以克服远缘杂交不亲合，并保持双亲优良性状 【答案】D 【分析】植物体细胞杂交，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。过程为将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法（离心或电融合法）或是化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。 【详解】A、由图可知，杂种植株只包含部分白菜和甘蓝的DNA，因此可推测杂种植株的染色体数小于38条，A正确； B、利用叶绿体密度、液泡颜色等细胞学差异来鉴定不同杂交类型是体细胞融合实验的常用方法，B正确； C、由图可知，杂种植株兼具有白菜和甘蓝的部分遗传物质，故具有白菜和甘蓝的某些遗传特性，C正确； D、植物体细胞杂交的优点是可以克服远缘杂交不亲合，但不一定能保持双亲优良性状，D错误。 故选D。 26．（2025·安徽黄山·二模）铁皮石斛是名贵中药，其有效成分生物碱是细胞的次级代谢产物。图 1 是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎（简称 PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程；图 2 是培养过程中 PLBs 质量、生物碱含量的变化曲线图。下列叙述错误的是（　　） A．与黑暗条件相比，光照条件下 PLBs 的生长起始早、快速生长时间长 B．培养 PLBs 生产生物碱，运用了植物细胞具有全能性的原理 C．应选择细胞数量与生物碱产量的比值小的 PLBs 用于生物碱生产 D．为探究生物碱生产适宜条件，还应检测黑暗条件下生物碱含量变化 【答案】B 【分析】植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 【详解】A、从图2中可以明显看出，光照条件下PLBs质量开始上升的时间比黑暗条件下早，即生长起始早；并且在较长时间内质量持续上升，快速生长时间长，A正确； B、培养PLBs生产生物碱，只是利用了细胞增殖来获得更多的细胞以生产生物碱，并没有发育成完整的植株，没有体现植物细胞具有全能性的原理，植物细胞全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能，B错误； C、细胞数量与生物碱产量的比值小，意味着在相同细胞数量的情况下，生物碱产量较高，这样的PLBs用于生物碱生产效率更高，C正确； D、图2中仅展示了光照条件下PLBs质量和生物碱含量的变化，为全面探究生物碱生产适宜条件，检测黑暗条件下生物碱含量变化，对比光照和黑暗条件对生物碱生产的影响，是很有必要的，D正确。 故选B。 27．（2025·江西南昌·二模）某植物组织培养中，愈伤组织再分化所用的培养基含有植物激素X和Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，愈伤组织的变化情况如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．当激素X的浓度高于Y时促进根的分化 B．植物组织培养和动物细胞培养的原理相同 C．愈伤组织是外植体脱分化产生的原生质体 D．愈伤组织再分化过程中一般需要光照 【答案】D 【分析】题图分析：据图可知，当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时，未分化细胞群经分裂形成愈伤组织；当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，未分化细胞群分化形成芽；当植物激素X与植物激素Y的浓度比小于1时，未分化细胞群分化形成根。据此推测，激素X是细胞分裂素，激素Y是生长素。 【详解】A、据图可知，当激素X的浓度高于Y时，未分化细胞群分化形成芽，A错误； B、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是动物细胞增殖，两项技术依据的原理不同，B错误； C、已经分化的细胞可以经过脱分化，转变成未分化的细胞，进而形成不定形的薄壁组织团块，这称为愈伤组织。故愈伤组织是外植体经脱分化后形成的一团未分化植物细胞，不等同于“原生质体（去掉细胞壁的细胞），C错误； D、愈伤组织再分化过程中一般需要光照，以诱导叶绿素合成，D正确。 故选D。 28．（2025·河北衡水·二模）花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列有关叙述正确的是（　　） A．图1培育出的杂种植株减数分裂时体细胞中最多含有64条染色体 B．②过程可用物理法如高Ca2+—高pH融合法或化学法如PEG融合法诱导细胞融合，杂种细胞再生出细胞壁是植物细胞融合成功的标志 C．图1培育杂种植株所用的技术体现了细胞膜具有一定流动性原理、染色体变异和植物细胞具有全能性原理 D．可将病菌悬浮液均匀喷施于图2中的1和5植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质；植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍。 【详解】A、花椰菜的染色体数为2n=18，紫罗兰的染色体数为2n=14。杂种植株的染色体数应为两者之和，即32条。因此，减数分裂时体细胞中最多含有32条染色体，而不是64条，A错误； B、②过程为诱导植物细胞融合，可用化学法如高Ca 2+  —高pH融合法或PEG融合法诱导细胞融合。杂种细胞再生出细胞壁是植物细胞融合成功的标志，B错误； C、植物体细胞杂交技术将杂种细胞培养成完整植株，体现了植物细胞全能性;两个物种细胞的融合体现了细胞膜流动性原理，也体现染色体数目变异的原理，C正确； D、根据图谱分析4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，是杂种植株，可将病菌悬浮液均匀喷施于4、5号杂种植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株，D错误。 故选C。 29．（2025·重庆·二模）不对称体细胞杂交是利用射线、限制酶等方法处理供体细胞或原生质体，处理后的染色体易发生断裂和丢失，然后再和一个正常受体的细胞或原生质体融合。研究人员用拟南芥与雄性不育性状的萝卜进行体细胞不对称体细胞杂交实验，获得了雄性不育的拟南芥。下列叙述错误的是（    ） A．利用PEG法和电融合法促使原生质体的结合 B．通过细胞的显微观察来鉴定杂种植株染色体形态特征和倍性 C．不对称体细胞杂交技术可以改良受体细胞线粒体基因组或叶绿体基因组 D．不对称体细胞杂交在减少非目标性状的引入及提高杂种育性上具有一定的优越性 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交技术：（1）植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。（2）融合方法：物理法包括离心、振动、电刺激等；化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（3）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。（4）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。（5）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。（6）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。 【详解】A、植物原生质体融合的方法有PEG法和电融合法等，A正确； B、不同种类的植物细胞染色体的形态特征不相同，因此可以通过细胞的显微观察来鉴定杂种植株染色体形态特征和倍性，B正确； C、不对称体细胞杂交是利用射线、限制酶等方法处理供体细胞或原生质体，处理后的染色体易发生断裂和丢失，线粒体和叶绿体中没有染色体，即线粒体和叶绿体内的基因组不会发生丢失，所以不对称体细胞杂交技术不可以改良受体细胞线粒体基因组或叶绿体基因组，C错误； D、经处理后的染色体易发生断裂和丢失，从而导致不对称体细胞杂交获得的重组细胞尽可能仅含所需目标性状的染色体，多倍体一般育性较低，此方法得到的细胞相比正常细胞仅多出较少数量的染色体，因此可提高杂种育性，D正确。 故选C。 30．（2025·浙江杭州·二模）紫草素是一种重要的化工产品，可从天然紫草中获取，但来源有限。科学家先利用紫草叶片培育出紫草愈伤组织，再通过培养基中的各类成分诱导愈伤组织合成紫草素，实现紫草素的大规模生产。下列叙述错误的是（　　） A．上述过程体现了植物细胞具有全能性 B．上述过程中紫草细胞经历了脱分化 C．培育紫草愈伤组织的过程需控制植物激素配比 D．可利用基因工程和发酵工程大量合成紫草素 【答案】A 【分析】植物组织培养技术的关键：（1）条件：离体，一定营养物质，激素等。（2）培养基状态：固体培养基，主要成分：无机营养成分、有机营养成分、激素、琼脂。（3）细胞学基础：细胞全能性。 【详解】A、植物细胞全能性是指具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 题干中只是利用紫草叶片培育出愈伤组织，再诱导愈伤组织合成紫草素，并没有发育成完整的植物体，所以没有体现植物细胞的全能性，A错误； B、从紫草叶片培育出紫草愈伤组织，这一过程是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程，即脱分化过程，B正确； C、在植物组织培养中，培育愈伤组织时，植物激素的配比会影响细胞的分裂和分化，所以需要控制植物激素配比，C正确； D、基因工程可以将相关基因导入受体细胞，使其大量合成紫草素；发酵工程可以利用微生物等进行发酵生产紫草素，所以可利用基因工程和发酵工程大量合成紫草素，D正确。 故选A。 31．（2025·河南·二模）某科研团队致力于保护一种濒危兰花，由于其野外种群数量稀少，且自然繁殖困难，科研人员选取兰花的茎尖作为外植体，通过植物组织培养的方式进行人工繁殖。下列有关说法正确的是（　　） A．茎尖全能性高且不易发生变异，故选其作外植体 B．提高生长素和细胞分裂素的比值能促进根的分化 C．提供适当的光照有利于加速外植体形成愈伤组织 D．常用诱导剂直接处理外植体以获得大量的突变体 【答案】B 【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。 【详解】A、选取茎尖作为外植体是因为其分裂能力强，且含病毒少，而不是不易发生变异，A错误； B、在植物组织培养中，提高生长素和细胞分裂素的比值能促进根的分化，B正确； C、外植体培育形成愈伤组织的过程中一般不需要光照，C错误； D、常用诱导剂处理愈伤组织来获得大量的突变体，因为愈伤组织细胞细胞壁较薄、处于不断分裂状态，更容易发生突变，D错误。 故选B。 32．（2025·河北衡水·二模）生物兴趣小组成员以西瓜5天龄幼苗子叶（子叶尚未完全展开且颜色为淡绿色）为外植体进行相关研究，得到如图所示实验结果，相关叙述错误的是（　　） A．实验开始前应对外植体消毒，对人工配置的MS培养基进行灭菌处理 B．与胚状体细胞相比，愈伤组织细胞分化程度低 C．结果表明西瓜子叶诱导形成愈伤组织的最适暗处理时间（以周为单位）是1周 D．暗处理时间长短对细胞再分化率影响大于脱分化率 【答案】C 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、该实验的外植体需要消毒处理，人工配置的MS培养基进行灭菌处理，A正确； B、愈伤组织是由已分化的细胞变为未分化的细胞，胚状体是由愈伤组织分化而来，因此愈伤组织细胞分化程度低，B正确； C、从图中数据可以看出，暗处理1周时愈伤组织的诱导率并不是最高，所以西瓜子叶诱导形成愈伤组织的最适暗处理时间并不是是1周，C错误； D、从图中可以看出，不同暗处理时间下愈伤组织诱导率（代表脱分化率）差异不大，说明暗处理时间长短对细胞脱分化率影响不大；而胚状体诱导率（代表再分化率）在不同暗处理时间下有明显差异，说明暗处理时间长短影响再分化率，暗处理时间长短对细胞再分化率影响大于脱分化率，D正确。 故选C。 33．（2025·河北衡水·二模）藿香（高等植物）是一种重要的中草药，科研人员利用藿香的叶片为外植体进行植物组织培养，过程如图所示。下列叙述不正确的是（　　）    A．②过程为脱分化，该过程无需光照，期间会发生基因突变、基因重组或染色体变异 B．①选用幼嫩细胞更易进行，图中技术证明了植物细胞具有全能性 C．③过程中细胞分裂素与生长素的比值高时有利于诱导生芽 D．先诱导生芽后诱导生根有利于试管苗独立进行光合作用 【答案】A 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、①过程为接种外植体，②过程为脱分化，该过程中可能会发生基因突变和染色体变异，但一般不发生基因重组，基因重组一般发生在减数分裂过程中，A错误； B、幼嫩细胞分裂能力强，分化程度低，①选用幼嫩细胞更易进行，图中技术证明了植物细胞具有全能性，B正确； C、③过程中细胞分裂素与生长素的比值高时有利于诱导生芽，比值低时有利于诱导生根，C正确； D、先诱导生芽后诱导生根，生芽后形成的叶能进行光合作用，制造有机物，为后续生根及植株的生长提供物质和能量，有利于试管苗独立进行光合作用，D正确。 故选A。 34．（2025·贵州贵阳·二模）科研人员分离了天山雪莲（2n = 32）和莴苣（2n = 18）的原生质体并将其融合，为天山雪莲新种选育奠定了基础，培育过程如图所示。下列叙述正确的是（    ）    A．过程②可以用PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法等 B．过程④诱导形成愈伤组织期间一般不需要光照 C．经过程②得到的c细胞只有1种类型，因此不需要筛选 D．最后得到的试管苗体细胞中含有25条染色体 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A、灭活病毒诱导法是动物细胞融合的常用方法，A错误； B、诱导愈伤组织期间一般不需要光照，在后续的培养过程中，需要给与适当时间与强度的光照，B正确； C、细胞融合的过程中，可能会发生自体融合（即同一种细胞之间的融合）和异体融合（即不同种细胞之间的融合），所以我们需要对融合后的细胞进行筛选，选择我们需要的异体融合的细胞，C错误； D、天山雪莲的染色体数为2n=32，而莴苣的染色体数为2n=18，所以融合后的细胞应该含有32+18=50条染色体，D错误。 故选B。 35．（2025·陕西汉中·二模）血红蛋白（Hb）能携带O2，透明颤菌含有Hb，将Hb基因转入青霉菌可提高青霉素的产量。研究人员制备了两种营养缺陷型（菌株不能在缺乏该营养物质的培养基上生长）菌株的原生质体，并诱导细胞融合，来获得杂种菌株，过程如图所示。下列分析正确的是（　　） A．处理①和处理②均需要选用纤维素酶和果胶酶 B．在全营养的高渗溶液中，进行处理③来诱导细胞融合 C．处理④是在缺乏甲硫氨酸和精氨酸的培养基中筛选 D．Hb基因使营养缺陷型青霉菌恢复合成青霉素的能力 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。植物体细胞杂交的意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，扩大亲本范围，培育作物新品种。 【详解】A、酶具有专一性，纤维素酶和果胶酶可去除植物细胞的细胞壁，但透明颤菌属于细菌，细胞壁的成分主要是肽聚糖，青霉菌是真菌，细胞壁成分主要是几丁质，A错误； B、③过程不能在过高渗透压的溶液中进行融合，B错误； C、融合细胞兼有两个细胞的特点，可利用缺乏甲硫氨酸和精氨酸的基本培养基筛选出融合细胞，C正确； D、营养缺陷型青霉菌并不是不能合成青霉素，而是不能在缺乏该营养物质的培养基上生长，D错误。 故选C。 36．（2025·黑龙江哈尔滨·二模）植物组织培养技术是植物细胞工程中最基本的一项技术，下列说法正确的是（    ） A．花药离体培养时无需进行脱分化即可进行直接操作 B．在植物组织培养过程中一直需要在充足的光照下进行 C．配置培养基时需根据不同的需求适当调整生长素和乙烯的含量比例 D．利用菊花的花瓣进行植物组织培养后获得幼苗是因为植物细胞内含有全套的遗传物质 【答案】D 【分析】植物组织培养是指在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、器官等培养在人工配制的培养基上，使其生成完整植株或使其细胞增殖产生细胞代谢产物的技术。 【详解】A、花药离体培养是植物组织培养的一种，需要先进行脱分化形成愈伤组织，再经过再分化形成完整植株，而不是无需进行脱分化即可直接操作，A错误； B、在植物组织培养的脱分化阶段，不需要光照，因为脱分化是形成愈伤组织的过程，光照可能会影响愈伤组织的形成；在再分化阶段，需要光照，以利于叶绿素的合成和植株的生长发育，所以不是在植物组织培养过程中一直需要充足的光照，B错误； C、在配置植物组织培养的培养基时，需要根据不同的需求适当调整生长素和细胞分裂素的含量比例，而不是生长素和乙烯的含量比例，乙烯主要与果实成熟等生理过程有关，C错误； D、利用菊花的花瓣进行植物组织培养后获得幼苗，这是因为植物细胞具有全能性，而细胞具有全能性的原因是植物细胞内含有全套的遗传物质，在适宜的条件下，这些遗传物质可以表达，从而发育成完整的植株，D正确。 故选D。 37．（2025·河南·二模）芦荟细胞质中具有抗旱基因，高粱细胞核中具有耐盐碱基因。当细胞中细胞核或细胞质失活时，细胞均无法分裂。利用芦荟细胞和高粱细胞培养既耐盐又耐旱的杂种植株的过程如图所示，其中①~③代表实验过程，碘乙酸可钝化原生质体使细胞质失活，从而有助于获得稳定的杂种植株。下列叙述错误的是（    ） A．①用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，体现了酶的专一性 B．②获得的融合细胞经③获得的植株中不一定都是杂种植株 C．经③获得杂种植株的过程，体现了植物细胞的全能性 D．用Ƴ射线对芦荟原生质体进行处理的目的是使其细胞核失活 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交可以克服植物有性杂交不亲和性、打破物种之间的生殖隔离，操作过程包括：原生质体制备、原生质体融合、杂种细胞筛选、杂种细胞培养、杂种植株再生以及杂种植株鉴定等步骤。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此①用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，体现了酶的专一 性，A正确； B、②获得的融合细胞分为具有同种核的细胞和杂种细胞，当细胞中细胞核或细胞质失活时，细胞 均无法分裂，因此②获得的融合细胞中只有杂种细胞能经过③发育为植株，所以所获得的植株一定都是杂 种植株，B错误； C、经③融合细胞获得杂种植株的过程，体现了植物细胞的全能性，根本原因是植物细胞具有植物生长发育的全部遗传信息，C正确； D、芦荟细胞质中具有抗早基 因，因此用Y射线对芦荟原生质体进行处理的目的是使其细胞核失活，D正确。 故选B。 38．（2025·吉林·二模）番茄（2N=24）和马铃薯（4N=48）是常见的且营养丰富的两类蔬菜，深受人们喜爱。随着现代生物技术的发展，科学家设法通过植物体细胞杂交技术培育出新型的品种番茄-马铃薯，现在已经培育出该植株。下图是番茄-马铃薯培育过程示意图，有关叙述正确的是（    ） A．①过程需要用到蛋白酶和果胶酶处理去除细胞壁 B．该植株的培育成功说明番茄和马铃薯未形成生殖隔离 C．植物体细胞杂交技术遵循孟德尔遗传定律 D．⑤过程与④过程所使用的激素比例不同 【答案】D 【分析】植物体细胞杂交是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。 【详解】A、①过程需要用到纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁，A错误； B、该植株的培育成功是由于将两种植物的原生质体融合在一个细胞中，克服了远缘杂交的障碍，不能说明番茄和马铃薯未形成生殖隔离，B错误； C、植物体细胞杂交技术没有经过两性细胞的结合，不遵循孟德尔遗传定律，C错误； D、④过程为脱分化过程，⑤过程为再分化过程，所使用的激素比例不同，D正确。 故选D。 39．（2025·辽宁·二模）利用两个不同品种的矮牵牛（2n=14），通过植物体细胞杂交技术，可得到具有优良性状的杂种植株。下列相关叙述正确的是（    ） A．植物体细胞杂交过程中会发生基因重组 B．新品种杂种植株的体细胞中最多含有28条染色体 C．植物体细胞杂交过程利用了染色体变异和植物细胞全能性等原理 D．诱导杂种植株形成过程中要用到秋水仙素、生长素和细胞分裂素等试剂 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质；植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍。 【详解】A、将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞的过程中未发生减数分裂，所以不存在基因重组，A错误； B、新品种杂种植株的体细胞中正常状态含有28条染色体，但在有丝分裂后期时含的染色体最多，有56条染色体，B错误； C、植物体细胞杂交过程利用了染色体变异，将杂交细胞利用植物组织培养技术培育成杂种植株的过程才体现了细胞全能性原理，C正确； D、在诱导杂种细胞发育成完整植株时，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，它们的浓度和比例等都会影响植物细胞的发育方向，但是不会用到秋水仙素，D错误。 故选C。 40．（2025·安徽池州·二模）已知普通小麦（2p=42）花药离体培养得到的幼苗白化现象非常严重，且研究发现：给小麦授以玉米（2n=20）的花粉，1天后杂种胚含有21条小麦染色体和10条玉米染色体，7天后杂种胚中只有21条小麦染色体（杂种胚是存活的）。现欲利用纯合高秆抗病和矮秆易感病小麦品种（两对性状独立遗传）快速高效地培育出纯合矮秆抗病小麦，研究小组已将两品种杂交，F₁全为高秆抗病。对于后续方案的设计，最合理的是（    ） A．取F₁花粉进行离体培养→秋水仙素处理幼苗→筛选所需类型 B．将F₁自交→选择子代矮秆抗病类型连续官交，逐代淘汰→筛选所需类型 C．对F₁授以玉米花粉→取1天后的杂种胚离体培养→秋水仙素处理幼苗→筛选所需类型 D．对F₁授以玉米花粉→取7天后的杂种胚离体培养→秋水仙素处理幼苗→筛选所需类型 【答案】D 【分析】单倍体是由配子直接发育来的生物体，花粉中有植物的雄配子，培育单倍体幼苗常采用花粉离体培养的方法获得。秋水仙素能抑制纺锤体的形成，导致染色体不能移向细胞两极，引起染色体数目加倍。但是花药离体培养得到的植株为单倍体植株，因此容易出现白化植株。 【详解】对于小麦而言，杂交育种时间非常长，花药离体培养效果又很差。现欲在短时间内培育出纯合矮秆抗病小麦，可先将纯合高秆抗病和矮秆易感病小麦品种杂交获得F1代，可然后F1的高秆抗病（或F2的矮秆抗病）小麦授以玉米的花粉，取7天后的杂种胚离体培养得到单倍体幼苗，再用秋水仙素处理单倍体幼苗获得纯合植株，再经过筛选就可得到纯合矮秆抗病小麦。 故选D。 41．（2025·贵州铜仁·二模）植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．①中酶处理的时间不同，可能是甲、乙细胞壁主要成分不同 B．过程②中可用高Ca2+—高pH或聚乙二醇诱导原生质体融合 C．过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D．可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 【答案】A 【分析】1、植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。 2、分析题图：图示为甲、乙两种植物细胞融合并培育新植株的过程，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②③表示人工诱导原生质体融合以及再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化形成愈伤组织；⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。 【详解】A、过程①中酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，甲、乙细胞壁主要成分都是纤维素和果胶，A错误； B、过程②为原生质体的融合，常用高Ca2+—高pH或聚乙二醇诱导原生质体融合，B正确； C、过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，C正确； D、植物丙是植物甲和植物乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。 故选A。 42．（2025·内蒙古赤峰·二模）关于细胞工程的叙述错误的是（　　） A．培育草莓脱毒苗常选择茎尖组织培养技术 B．常用机械法或胰蛋白酶处理动物组织以分散成单个细胞 C．由iPS细胞分化产生的特定细胞可在新药测试中发挥重要作用 D．细胞产物的工厂化生产提高单个细胞中次生代谢产物的含量 【答案】D 【分析】1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，属于无性生殖。2、动物细胞融合不同于植物细胞融合的方法是灭活的病毒。 【详解】A、茎尖分裂旺盛，感染病毒的几率小，培育草莓脱毒苗常选择茎尖组织培养技术，A正确； B、动物细胞之间有蛋白质黏连，常用机械法或胰蛋白酶处理动物组织以分散成单个细胞，B正确； C、iPS细胞是未分化的细胞，由iPS细胞分化产生的特定细胞可在新药测试中发挥重要作用，C正确； D、细胞产物的工厂化生产提高所有细胞的次生代谢产物的总量，但无法提高单个细胞中次生代谢产物的含量，D错误。 故选D。 43．（2025·山东枣庄·二模）紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁，成为世界上首例药用植物细胞工程产品。下列说法错误的是（    ） A．紫草宁是紫草细胞的次生代谢物 B．可以利用液体培养基进行工厂化生产 C．紫草宁的工厂化生产需要先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 D．紫草宁的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制 【答案】C 【分析】植物组织培养的条件：细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等)，一定的营养(无机、有机成分)和植物激素。 【详解】A、紫草宁是紫草细胞培养过程中产生的次生代谢物，不是紫草细胞生长和生存所必需的，A正确； B、进行工厂化生产需要植物细胞增殖，利用液体培养基，B正确； C、紫草宁的工厂化生产不需要先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获取产物时再使用，C错误； D、紫草宁的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制，因此对于社会、经济、环境保护具有重要意义，D正确。 故选C。 44．（2025·江苏南通·二模）下图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程。下列说法正确的是（    ）    A．生物碱属于次生代谢产物，是铁皮石斛生长所必需的物质 B．图中过程①为脱分化形成PLBs，过程②为再分化生产生物碱 C．培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量比值小的PLBs D．过程①②常用葡萄糖做碳源，原因是蔗糖不易被植物细胞吸收 【答案】C 【分析】在一定的激素和营养等条件的诱导下，外植体可脱分化形成愈伤组织。在脱分化过程中，植物细胞的分化程度逐渐降低，全能性逐渐升高。脱分化形成的愈伤组织由一些排列疏松而无规则，高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞组成。 【详解】A、生物碱是铁皮石斛的次生代谢物，不是细胞进行正常生命活动必需的物质，A错误； B、题意显示PLBs类似愈伤组织，因此，图中过程①为脱分化形成PLBs，过程②为植物细胞培养过程，不属于再分化，B错误； C、该实验目的是要生产生物碱，故需要选择生物碱产量/细胞数量的值大的PLBs作为高产细胞系，或者说细胞数量/生物碱产量比值小的PLBs，C正确； D、过程①②常用蔗糖做碳源，因为蔗糖更有利于渗透压调节，D错误。 故选C。 45．（2025·四川雅安·二模）马铃薯四倍体栽培种（4n=48）易感染青枯病，而马铃薯野生型（2n=24）有青枯病抗性基因，科研人员利用图示操作技术培养了抗病型马铃薯栽培种。下列说法正确的是（　　）    A．制备原生质体时需要用胰蛋白酶将植物细胞分散成单个细胞 B．诱导原生质体融合时可以在无菌水中采用PEG融合法或电融合法 C．可以通过镜检观察染色体数目来初步筛选含青枯病抗病基因的融合原生质体 D．抗病型马铃薯栽培种为异源三倍体植株，因联会紊乱不能形成配子 【答案】C 【分析】体细胞杂交又称体细胞融合，指将两个原生质体不同的体细胞融合成一个体细胞的过程。融合形成的杂种细胞，兼有两个细胞的染色体，而后通过植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，该过程利用的原理是植物细胞的全能性，即植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】A、制备原生质体时需要用纤维素酶和果胶酶将植物细胞的细胞壁分解获得原生质体，A错误； B、诱导原生质体融合时可以在一定浓度的溶液中（植物细胞的等渗液或较高渗）采用PEG融合法或电融合法，否则会导致原生质体吸水涨破，B错误； C、根据题意可知，融合原生质体中含有的染色体数目为70，因而可以通过镜检观察染色体数目来初步筛选含青枯病抗病基因的融合原生质体，C正确； D、抗病型马铃薯栽培种为异源六倍体植株，其减数分裂过程中不会发生联会紊乱，D错误。 故选C。 46．（2025·陕西咸阳·二模）三白草和鱼腥草的药用成分相近，而且在疗效上具有叠加效应。通过植物细胞工程技术培育杂种细胞，从而获得更多药用物质。实验流程如图所示，下列叙述正确的是（    ） A．过程①可使用胰蛋白酶酶解去除细胞壁 B．过程②可使用灭活的病毒诱导细胞膜融合 C．过程③中需要适量光照诱导细胞去分化 D．过程④中可进行细胞工厂化生产次生代谢物 【答案】D 【分析】图示为三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③脱分化形成愈伤组织，④是植物细胞培养并提取代谢产物。 【详解】A、过程①可使用纤维素酶和果胶酶酶解去除细胞壁，制备原生质体，A错误； B、过程②可使用物理方法或化学方法诱导细胞膜融合，而灭活的病毒用于诱导动物细胞融合，B错误； C、过程③形成愈伤组织过程不需要光照，C错误； D、过程④（愈伤组织培养）可进行细胞工厂化生产次生代谢物，D正确。 故选D。 47．（2025·河南新乡·二模）石蒜碱是从石蒜等的鳞茎中提取的一种次级代谢物，用石蒜碱制成的内胺盐具有较强的抗肿瘤作用，常用于肿瘤的治疗。实验人员采用植物细胞悬浮培养技术生产石蒜碱的过程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．过程①为脱分化，通常用细胞分裂素和赤霉素进行诱导 B．过程②为了使细胞分散开，通常用胶原蛋白酶进行处理 C．过程③通过提取、分离和纯化的方法获取石蒜碱 D．图示生产石蒜碱的过程体现了植物细胞的全能性 【答案】C 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、愈伤组织的诱导（过程①）通常需外源生长素和细胞分裂素配合使用，并非细胞分裂素和赤霉素，A错误； B、将愈伤组织分散成单个悬浮细胞（过程②）时常用纤维素酶和果胶酶处理，胶原蛋白酶主要用于动物细胞消化，B错误； C、石蒜碱是从石蒜等的鳞茎中提取的一种次级代谢物，用由悬浮培养得到的含石蒜碱细胞团可经提取、分离和纯化获得石蒜碱，实现细胞产物的工厂化生产，C正确； D、题图中仅体现了外植体脱分化并利用细胞产次级代谢产物，并未形成完整个体或分化为其他各种细胞，不能体现全能性，D错误。 故选C。 48．（2025·黑龙江哈尔滨·二模）紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的二萜类生物碱类化合物，是一种有效的抗癌药物，传统生产方法是从红豆杉树皮和树叶中提取，下图为利用植物细胞工程生产紫杉醇的流程图，相关叙述正确的是（    ） A．紫杉醇是植物代谢活动产生的，属于初生代谢物 B．①②过程通常采用液体培养基，需要适当强度的光照 C．上述流程图中涉及植物组织培养和植物细胞培养等技术 D．③过程需要用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 【答案】C 【分析】植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。 【详解】A、次生代谢物是生物体产生的一大类并非生长发育所必需的小分子有机化合物，紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢物，A错误； B、①②过程主要是外植体诱导愈伤组织及其分化，一般先在固体培养基上进行，且愈伤组织诱导常不需强光，B错误； C、由流程图可知既有外植体诱导愈伤组织并分化成完整植株（属于植物组织培养），也有将单个细胞在进行大规模悬浮培养（属于植物细胞培养），C正确； D、胰蛋白酶、胶原蛋白酶等是动物细胞消化常用的酶，植物细胞分离常用纤维素酶、果胶酶等，D错误。 故选C。 49．（2025·甘肃白银·二模）下列关于细胞工程的说法正确的是（    ） A．植物组织培养与动物体细胞核移植技术的原理都是细胞的全能性 B．PEG既可以用于动物细胞融合，也能够用于植物体细胞杂交 C．悬浮培养的动物细胞会因接触抑制而分裂受阻 D．抗体—药物偶联物主要利用其中的抗体杀死肿瘤细胞 【答案】B 【分析】1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 2、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株．植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 3、体细胞核移植：又称体细胞克隆，作为动物细胞工程技术的常用技术手段，即把体细胞移入去核卵母细胞中，使其重组并能发育为新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物个体．用核移植方法获得的动物称为克隆动物。 【详解】A、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物体细胞核移植技术的原理是动物细胞核的全能性，A错误； B、PEG既可以用于动物细胞融合，也能够用于植物体细胞杂交过程中原生质体的融合，B正确； C、悬浮培养的动物细胞会因密度过大、有害代谢物积累而分裂受阻，贴壁细胞会发生接触抑制现象，C错误； D、抗体一药物偶联物主要利用其上的抗体结构来识别肿瘤细胞，起杀伤作用的是其上偶联的药物，D错误。 故选B。 50．（2025·江西九江·二模）庐山云雾茶是传统名茶，是中国名茶系列之一；云雾茶富含茶多酚、咖啡因等物质，具有一定的保健功能。科学家可通过快速繁殖技术来培育茶树的种苗，下列叙述错误的是（    ） A．快速繁殖技术亦称为微型繁殖技术，实质是植物组织培养技术 B．茶多酚、咖啡因等物质是组织培养过程中产生的初生代谢产物 C．接种外植体需要在酒精灯火焰旁进行，以减少杂菌的污染 D．快速繁殖技术的原理是已分化的植物细胞仍具有发育成个体的潜能 【答案】B 【分析】次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。 【详解】A、一般将用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，叫做植物的微型繁殖技术，也叫快速繁殖技术，A正确； B、茶多酚、咖啡因等物质是组织培养过程中产生的次生代谢产物，B错误； C、接种外植体是将外植体转移至培养基中，需要在超净台内酒精灯火焰旁进行，以减少杂菌的污染，C正确； D、细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体或者各种细胞的潜能，快速繁殖技术的原理是已分化的植物细胞仍具有发育成个体的潜能，D正确。 故选B。 51．（2025·黑龙江哈尔滨·二模）植物细胞工程在植物繁殖新途径等方面都有广泛的应用，并取得了显著的社会效益和经济效益。下图表示植物细胞工程应用的相关操作，相关叙述正确的是（　　）    A．A途径中发生的可遗传变异有基因突变和基因重组 B．经B途径得到的大多数植株的隐性性状容易显现 C．经E途径得到的次生代谢物是生物生长和生存所必需的 D．上述应用得到的植株体细胞中的染色体数均相同 【答案】B 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、A 途径是植物组织培养进行快速繁殖，该过程主要是有丝分裂，有丝分裂过程中可能发生基因突变，但不会发生基因重组（基因重组一般发生在减数分裂过程中），所以 A 途径中发生的可遗传变异主要是基因突变，A错误； B、B 途径是通过花药离体培养获得单倍体幼苗，再经染色体加倍得到纯合子。单倍体中基因成单存在，经染色体加倍后得到的纯合子，其隐性性状容易显现出来，B正确； C、次生代谢产物不是生物生长和生存所必需的物质，而初生代谢产物才是生物生长和生存所必需的，E 途径得到的是次生代谢产物，C错误； D、通过植物组织培养（如 A 途径）得到的植株体细胞染色体数与原植株相同；通过单倍体育种（B 途径），先得到单倍体，其染色体数是原植株的一半，再经染色体加倍后与原植株相同；植物体细胞杂交（F 途径）得到的植株体细胞中的染色体数是两融合细胞染色体数之和，与原植株不同，所以上述应用得到的植株体细胞中的染色体数并不都相同，D 错误。 故选B。 52．（2025·江苏南通·二模）百岁兰是一种濒危物种。为研发稳定高效的百岁兰叶片愈伤组织诱导体系，科研人员探究了避光与昼夜节律（16h光照和8h黑暗）对诱导百岁兰叶片愈伤组织的影响，实验结果见下图。相关叙述错误的是（    ） A．愈伤组织诱导过程中基因发生选择性表达，该过程也可发生基因突变和染色体变异 B．实验所用的培养基通常为固体培养基，且培养基中的生长素和细胞分裂素比例适中 C．暗处理和昼夜节律处理所用培养基中均需要添加蔗糖，且蔗糖的添加量要一致 D．昼夜节律处理下百岁兰脱分化和再分化的速率更快，愈伤组织生长更好 【答案】D 【分析】1、植物组织培养的流程是：离体的植物器官、组织或细胞经脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经再分化形成胚状体，长出芽和根，进而形成完整植株。离体培养的植物器官、组织或细胞被称为外植体。 2、植物组织培养时，生长素与细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，二者的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向：生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成；生长素与细胞分裂素比例升高，利于根的分化、抑制芽的形成；生长素与细胞分裂素比例降低，利于芽的分化、抑制根的形成。 【详解】A、在一定的激素和营养等条件的诱导下，外植体（离体的植物器官、组织或细胞）经脱分化形成愈伤组织，在此过程中，基因发生选择性表达，也可发生基因突变和染色体变异，A正确； B、实验所用的培养基通常为固体培养基，生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成，B正确； C、暗处理和昼夜节律处理所用培养基中均需要添加蔗糖，蔗糖的添加量为无关变量，为了排除蔗糖的添加量不同而对实验结果的影响，蔗糖的添加量要一致， C正确； D、外植体经脱分化形成愈伤组织。分析曲线图可知：昼夜节律处理下百岁兰脱分化的速率更快，愈伤组织生长更好，D错误。 故选D。 53．（2025·江苏盐城·二模）植物组织培养的培养基中常添加蔗糖作为碳源物质，而不使用葡萄糖作为碳源物质。相关推测不合理的是（    ） A．植物细胞吸收蔗糖的速率较低，有利于培养基渗透压较长时间保持稳定 B．植物细胞可能分泌蔗糖酶，能够催化蔗糖水解以便于吸收利用 C．大多数微生物更倾向于利用葡萄糖作为碳源，使用蔗糖可减少微生物的污染 D．培养基中相同质量分数的蔗糖形成的渗透压要高于葡萄糖，可防止细胞脱水 【答案】D 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。 【详解】A、植物组织培养的培养基中常添加蔗糖作为碳源物质，原因之一是植物细胞吸收蔗糖的速率明显低于吸收葡萄糖的速率，有利于培养基渗透压较长时间保持稳定，A正确； B、蔗糖为二糖，在蔗糖酶的作用下水解为1分子葡萄糖和1分子果糖，才能被细胞吸收，所以植物细胞可能分泌蔗糖酶，能够催化蔗糖水解以便于吸收利用，B正确； C、微生物生长所需的碳源一般是葡萄糖，所以蔗糖作为碳源与葡萄糖相比，可在一定程度上减少微生物的污染，C正确； D、蔗糖的分子量大于葡萄糖，培养基中相同质量分数的蔗糖形成的渗透压低于葡萄糖，可防止细胞渗透失水，D错误。 故选D。 54．（2025·四川成都·二模）科学家将人参和胡萝卜细胞的原生质体融合，经培养获得8个杂种愈伤组织，检测发现这8个杂种愈伤组织均含有人参皂苷（一种次生代谢物），其中大多数人参皂苷含量明显高于人参愈伤组织。蛋白质电泳检测中发现一条只在8个杂种愈伤组织中出现的特异条带。下列叙述正确的是（    ） A．人参皂苷是杂种愈伤组织细胞分裂和分化所必需的重要物质 B．可使用PEG融合法和灭活病毒诱导法促进两种原生质体融合 C．愈伤组织形成杂种植株过程中需要调整相关激素的比例和浓度 D．特异蛋白质条带的出现说明在杂种愈伤组织中发生了基因突变 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。 【详解】A、人参皂苷是次生代谢物，不是杂种愈伤组织细胞分裂和分化所必需的重要物质，A错误； B、植物原生质体融合可使用PEG融合法，但灭活病毒诱导法常用于动物细胞融合，不能用于植物原生质体融合，B错误； C、愈伤组织形成杂种植株的过程属于植物组织培养，需要调整生长素和细胞分裂素等相关激素的比例和浓度，以调控其脱分化和再分化过程，C正确； D、特异蛋白质条带的出现可能是基因重组导致的，不一定是基因突变，因为细胞融合过程会发生基因重组，D错误。 故选C。 二、多选题 55．（2025·山东泰安·二模）已知番茄是二倍体植物，马铃薯是四倍体植物，如图为马铃薯和番茄的体细胞杂交过程图。下列分析正确的是（    ） A．过程①应置于等渗溶液中，利用果胶酶和胶原蛋白酶处理细胞 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．过程⑤升高细胞分裂素和生长素的比值，可促进愈伤组织形成丛芽 D．植株A7细胞中具有来自亲本的2个细胞核 【答案】BC 【分析】植物体细胞杂交过程：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体，过程①应置于较高渗溶液中，使其处于微弱的质壁分离状态，A错误； B、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞，得到原生质体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，故融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织，B正确； C、细胞分裂素与生长素比值高时有利于芽的分化，C正确； D、体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的遗传物质，只有1个细胞核，D错误。 故选BC。 56．（2025·河北唐山·二模）以甘蔗为原料生产的蔗糖占我国食糖产量的90%，但其受到花叶病毒侵染后会引起减产。通过诱变处理和植物组织培养相结合可以培育出抗花叶病毒的甘蔗。下列有关叙述正确的是（　　） A．该育种过程的原理有基因突变和细胞的全能性 B．脱分化阶段应给予适当光照 C．对愈伤组织进行诱变处理后需接种病毒进行筛选 D．此方法可能需要处理大量的材料才可得到抗花叶病毒的甘蔗 【答案】ACD 【分析】1、作物脱毒材料：分生区（如茎尖）细胞；植物脱毒方法：进行组织培养；结果：形成脱毒苗。 2、突变体的利用：（1）原因：在植物组织培养的过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变；（2）利用：筛选出对人们有利的突变体培育成新品种。 【详解】A、诱变处理的原理是基因突变，植物组织培养的原理是细胞的全能性，所以该育种过程的原理有基因突变和细胞的全能性，A正确； B、脱分化阶段不需要光照，再分化阶段需要适当光照，以利于叶绿素的形成等，B错误； C、对愈伤组织进行诱变处理后，需要接种病毒，看其是否能正常生长，以此筛选出抗花叶病毒的变异类型，C正确； D、由于基因突变具有不定向性，所以此方法可能需要处理大量的材料，才有可能得到抗花叶病毒的甘蔗，D正确。 故选ACD。 57．（2025·河北衡水·二模）甲植物具有由核基因控制的多种优良性状，乙植物的细胞质中含有抗除草剂基因，下图是将乙细胞的抗性基因引入甲细胞的体细胞杂交流程，相关叙述错误的是（　　） A．若甲、乙两种植株存在生殖隔离，该实验也可以成功 B．过程B体现了细胞膜的流动性，细胞壁是植物细胞的边界 C．两两融合的细胞有三种，同种融合的细胞无法存活可以达到筛选目的 D．A需要用纤维素酶和胶原蛋白酶在等渗溶液中处理植物细胞获得原生质体 【答案】BD 【分析】植物体细胞杂交过程： 先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，借助物理或化学方法诱导原生质体融合，得到的杂种细胞再经过诱导形成愈伤组织，并进一步发育成完整植株。 【详解】A、植物体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍，即使甲、乙两种植株存在生殖隔离，通过体细胞杂交技术也能使它们的原生质体融合，进而培养出杂种植株，所以该实验可以成功，A正确； B、过程B是原生质体的融合，原生质体融合体现了细胞膜的流动性。 但是植物细胞的边界是细胞膜，而不是细胞壁，细胞壁具有全透性，不能控制物质进出细胞，B错误； C、两两融合的细胞有三种情况：甲 - 甲融合细胞、乙 - 乙融合细胞、甲 - 乙融合细胞。 由于甲原生质体经过R - G处理细胞质失去活性，乙原生质体经过紫外线照射细胞核失去活性，所以甲 - 甲融合细胞和乙 - 乙融合细胞无法存活，这样就可以筛选出甲 - 乙融合细胞，达到筛选目的，C正确； D、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，A过程需要用纤维素酶和果胶酶在等渗溶液中处理植物细胞，去除细胞壁，获得原生质体。在等渗溶液中处理可以维持原生质体的形态，防止原生质体吸水涨破或失水皱缩，D错误。 故选B。 58．（2025·河北衡水·二模）下列关于动物细胞工程和植物细胞工程的叙述，不正确的是（　　） A．花药离体培养得到单倍体植株需要用到秋水仙素来诱导细胞融合恢复成二倍体 B．生产中获得草莓脱毒苗和动物干细胞的培养均使用高压蒸汽灭菌的固体培养基 C．植物组织培养和动物细胞培养均需要经过脱分化过程 D．愈伤组织和小鼠iPS细胞的诱导形成均发生了基因的选择性表达 【答案】ABC 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、花药离体培养得到单倍体植株通常用秋水仙素处理使得染色体加倍，A错误； B、动物干细胞的培养使用的是液体培养基，B错误； C、动物细胞培养不需要经过脱分化过程，C错误； D、脱分化形成愈伤组织以及小鼠iPS细胞的诱导形成均发生了基因的选择性表达，D正确。 故选ABC。 59．（2025·辽宁鞍山·二模）下列有关植物愈伤组织的叙述，正确的是（    ） A．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 B．通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖 C．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 D．体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 【答案】AB 【分析】植物体细胞杂交过程：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。 【详解】A、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞，得到原生质体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，故融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织，A正确； B、通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于植物的组织培养，从繁殖看，没有经过两性生殖细胞的融合，所以属于无性繁殖，B正确； C、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁可获得原生质体，C错误； D、体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的遗传物质，只有1个细胞核，D错误。 故选AB。 60．（2025·江苏泰州·二模）藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如下图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述错误的是（　　） A．组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生不定向突变 B．过程①中外植体依次使用次氯酸钠和70%酒精溶液进行消毒 C．过程③④所用的培养基中添加的植物激素的种类和比例不同 D．筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分 【答案】BCD 【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，主要包括脱分化和再分化两个步骤。 【详解】A、植物组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生突变，突变是不定向的，A正确； B、过程①为外植体消毒，外植体依次使用70%酒精溶液和次氯酸钠进行消毒，B错误； C、③④过程添加的植物激素种类相同，但浓度和比例不同，C错误； D、筛选出目标突变株后可利用植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产，培养生产药用成分，D错误。 故选BCD。 三、解答题 61．（2025·河北衡水·二模）狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字代表处理或生理过程。请回答下列相关问题：    (1)狼爪瓦松的叶肉细胞之所以能培养为新个体是因为植物细胞具有全能性，即 。 (2)②过程形成的愈伤组织是 组织团块。 是启动②③的关键，其中通常需要光照的是 （填序号）过程，光照作用是 。 (3)图中②③过程培养获得植株乙的优点有 （答出一点）。 (4)图中④过程中，相较于以幼苗为实验材料，选择 作为实验材料的优点有诱变频率大于个体水平，在较小的空间内一次性可处理大量材料或空间利用率更高，得到的变异体数目更多。图中⑤过程中用到的酶为 。诱导原生质体融合的化学方法除了图中方法外还有 。 【答案】(1)发育成完整个体的潜能 (2) 不定形的薄壁（无组织结构、松散的薄壁） 生长素和细胞分裂素的浓度和配比 ③ 诱导叶绿素的合成，满足叶绿体利用光能进行光合作用制造有机物 (3)可以高效、快速地实现种苗的大量增殖；保持优良品种的遗传特性；可全年连续实验和生产，节约人力物力 (4) 愈伤组织 纤维素酶、果胶酶 电融合法、高Ca2+-高pH融合法 【分析】图中①表示外植体接种，②表示脱分化，③表示再分化，④表示再分化过程产生突变体，⑤表示去除细胞壁获得原生质体，⑥表示黄酮类化合物的提取。 【详解】（1）狼爪瓦松的叶肉细胞之所以能培养为新个体是因为植物细胞具有全能性，即发育成完整个体的潜能。 （2）脱分化的细胞不断分裂增殖，产生不定形的薄壁（无组织结构、松散的薄壁）组织团块，称为愈伤组织。植物生长素和细胞分裂素是植物组织培养不可缺少的两种调节物质，两者的浓度和配比在脱分化和再分化中起着关键作用。诱导叶绿素的合成，满足叶绿体利用光能进行光合作用制造有机物需要光照，所以利用植物组织培养技术培养植株时，脱分化过程（②）一般不需要光照，再分化过程（③）需要光照。 （3）植物组织培养技术不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，从生殖方式上来说植物组织培养技术属于无性生殖，因此还可以保持优良品种的遗传特性；可全年连续实验和生产，节约人力物力。 （4）图中④过程中，相较于以幼苗为实验材料，选择愈伤组织作为实验材料的优点有诱变频率大于个体水平，在较小的空间内一次性可处理大量材料或空间利用率更高，得到的变异体数目更多。图中⑤过程中用到的酶为纤维素酶、果胶酶。诱导原生质体融合的化学方法除了图中方法外还有电融合法、高Ca2+-高pH融合法。 62．（2025·河北衡水·二模）下图表示科学家通过植物细胞工程，利用番茄叶细胞（2N=24）和马铃薯叶细胞（4N=48）杂交培育“番茄一马铃薯”植株的过程，回答下列问题。    (1)）取番茄—马铃薯充分展开的嫩叶片，对其消毒处理后用 （填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次备用。在①过程中，原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的 ，从而维持原生质体的形态和活性。 (2)番茄—马铃薯植株的培育过程采用的是 技术，该技术完成的标志是 。若由杂种细胞培育成的新品种为六倍体，则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株为几倍体？ 。 (3)融合后的“番茄一马铃薯”细胞，在有丝分裂后期含有 条染色体。从过程④到过程⑤需要更换新的培养基，原因是 。 (4)图中⑤过程中当植物细胞分裂素与生长素的浓度比小于1时，培养基的作用是 。操作后得到的“番茄一马铃薯”并没有预想中的“地上结番茄，底下结马铃薯”，可能的原因是 。 【答案】(1) 无菌水 渗透压 (2) 植物体细胞杂交 获得杂种植株 单倍体 (3) 144 诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同 (4) 诱导生根 基因表达相互干扰 【分析】据图分析可知，图中①表示酶解法去除细胞壁，②表示原生质体的融合，③表示再生细胞壁，④表示脱分化，⑤表示再分化。 【详解】（1）取番茄—马铃薯充分展开的嫩叶片，对其消毒处理后用无菌水冲洗叶片5次备用，蒸馏水可能有杂菌。在①过程中，原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，从而维持原生质体的形态和活性。 （2）番茄—马铃薯植株的培育过程采用的是植物体细胞杂交技术，该技术完成的标志是获得杂种植株。若由杂种细胞培育成的新品种为六倍体，则此杂种植株的花粉虽然有三个染色体组，但经离体培养得到的植株为单倍体。 （3）融合后的“番茄一马铃薯”细胞，已知番茄叶细胞（2N=24）和马铃薯叶细胞（4N=48），杂种植株含有72条染色体，在有丝分裂后期染色体数目加倍，含有144条染色体。由于诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同，所以从过程④到过程⑤需要更换新的培养基。 （4）图中⑤过程中当植物细胞分裂素与生长素的浓度比小于1时，培养基的作用是诱导生根，大于1，有利于诱导生芽；等于1，有利于诱导产生愈伤组织。操作后得到的“番茄一马铃薯”并没有预想中的“地上结番茄，底下结马铃薯”，可能的原因是“番茄—马铃薯”超级杂种植株即含有番茄的遗传物质也含有马铃薯的遗传物质，该杂种细胞含有同源染色体，但基因的表达过程是相互调控影响的过程，二者的遗传物质相互作用，可能影响了表达。 63．（2025·宁夏石嘴山·二模）马铃薯是世界四大粮食作物之一。青枯病是马铃薯最大的细菌性病害，目前还没有有效的防治手段，常造成严重减产。马铃薯栽培种缺乏青枯病抗性，同时由于种间杂交障碍，野生和近缘物种的抗性资源得不到利用，科研人员用抗青枯病茄子与马铃薯栽培种通过体细胞杂交，获得了马铃薯—茄子的杂种植株，部分杂种植株成功获得了茄子融合亲本的青枯病抗性，研究过程如下图。回答下列问题： (1)过程①除去马铃薯细胞和茄子细胞的细胞壁所用的是 酶。 (2)杂种细胞通过④形成了愈伤组织，使用的激素是 ，它们的 和 会影响植物的发育方向。 (3)用于培养愈伤组织的培养基采用 灭菌法，原因是 。 (4)鉴定杂种植株是否具有抗青枯病的方法是 。 (5)马铃薯—茄子的杂种植株并没有像科研人员想象的那样，地上结茄子同时地下结马铃薯，可能的原因 。 【答案】(1)纤维素酶和果胶 (2) 生长素和细胞分裂素 浓度 比例 (3) 高压蒸汽灭菌法/湿热灭菌法 可以保持培养基中的水分 (4)通过接种青枯病菌，观察杂种植株是否染病 (5)马铃薯—茄子杂种植株中两个物种的遗传物质的表达相互干扰（合理即可） 【分析】植物细胞具有细胞壁，会妨碍植物细胞融合，需经纤维素酶和果胶酶处理后获得原生质体。再经诱导获得融合细胞，融合细胞通过脱分化和再分化过程最终获得再生植株。实验遵循对照原则和单一变量原则。 【详解】（1）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，去除植物细胞壁需要用纤维素酶和果胶酶。 （2）在植物组织培养中，诱导脱分化形成愈伤组织常用的激素是生长素和细胞分裂素。它们的浓度和比例会影响植物的发育方向，比如生长素与细胞分裂素比例适中时，有利于愈伤组织的形成；生长素比例高时，有利于根的分化；细胞分裂素比例高时，有利于芽的分化。 （3）用于培养愈伤组织的培养基一般采用高压蒸汽灭菌法。因为高压蒸汽灭菌法可以在高温高压下杀死培养基中的各种微生物及其芽孢，且能保持培养基中的水分，若采用干热灭菌法，会使培养基中的水分丧失，影响后续培养。 （4）要鉴定杂种植株是否具有抗青枯病的能力，最直接的方法就是让杂种植株接触青枯病菌，观察其是否染病。如果染病则说明不具有抗性，如果不染病则说明具有抗性。 （5）马铃薯 - 茄子杂种植株并没有像科研人员想象的那样地上结茄子同时地下结马铃薯，可能是因为杂种植株中两个物种的遗传物质在表达过程中相互干扰，导致相关基因不能按照预期的方式表达，从而无法形成相应的器官或产物。 64．（2025·天津和平·二模）基因工程为培育抗病毒植物开辟了新途径。下图为研究人员培育转黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因（CMV—CP基因）番茄的主要过程示意图。（Kanr为卡那霉素抗性基因）。 (1)将CMV-CP基因导入番茄细胞后，培育的番茄植株具有抗CMV感染能力，过程①接种的农杆菌细胞中，Kanr及CMV-CP基因应整合在Ti质粒的T—DNA内部，这是由于Ti质粒中仅T—DNA片段可以进入植物细胞并 。 (2)过程③、④所需的培养基为 （填“固体”或“液体”）培养基。研究发现高浓度的卡那霉素会使番茄的愈伤组织不能生长甚至死亡，③、④培养基中加入适宜浓度Kanr的作用为 。 (3)过程⑤再生植株抗性鉴定时，引物序列设计的主要依据是 。 (4)过程⑤利用PCR技术对样品CMV-CP基因扩增后电泳，根据标准参照，可以初步确定整合了CMV-CP基因的再生植株。通常需进一步通过基因碱基序列测定确认，原因是琼脂糖凝胶电泳技术仅能用于分析待检测DNA分子的 ，无法确定待检测DNA分子的碱基序列。 【答案】(1)整合到植物细胞染色体DNA中 (2) 固体 杀死没有导入重组DNA的普通番茄细胞 (3)CMV—CP基因两端的部分核苷酸序列 (4)大小 【分析】将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法（原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上；根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。 【详解】（1）因Ti质粒中仅T-DNA片段可以进入植物细胞并整合到植物细胞染色体DNA中，故Kanr及CMV-CP基因应整合在Ti质粒的T-DNA内部。 （2）过程③、④为植物组织培养中的过程，植物组织培养过程所需的培养基为固体培养基。③、④培养基中加入适宜浓度Kan的作用为杀死没有导入重组DNA的普通番茄细胞。 （3）引物是能与DNA模板链结合的短的单链片段，过程⑤再生植株抗性鉴定时，引物应根据CMV—CP基因两端的部分核苷酸序列设计。 （4）电泳是指带电粒子在电场作用下，向与其携带电荷相反的电极迁移的过程；琼脂糖凝胶电泳技术仅能用于分析待检测DNA分子的大小，无法确定待检测DNA分子的碱基序列。故过程⑤利用PCR技术对样品CMV-CP基因扩增后电泳，根据标准参照，可以初步确定整合了CMV-CP基因的再生植株，通常需进一步通过基因碱基序列测定确认。 动物细胞工程考点02 一、单选题 1．（2025·山东·二模）间充质干细胞（MSCs）是一类具有自我更新和多向分化能力的成体干细胞。梗死的心肌形成的恶性炎症-自由基循环使移植的MSCs难以存活，且心脏收缩及高血流使MSCs难以有效滞留，制约了疗效。若利用Ca2+将具有自由基强效清除功能的多巴胺聚合在MSCs表面；另将多种抗体基因拼接起来导入MSCs，使其表达出黏附炎症组织的多价抗体（anti-VCAM1）并修饰在MSCs表面，大大提高疗效。下列说法错误的是（    ） A．MSCs表面聚合的多巴胺为MSCs创造了有利的环境 B．anti-VCAM1的产生利用了动物细胞融合技术 C．anti-VCAM1使MSCs在梗死心肌组织中有效滞留 D．间充质干细胞能分化成多种细胞或组织 【答案】B 【分析】干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞。多潜能干细胞能分化成多种细胞类型。细胞分化是指同一来源的细胞逐渐发生形态结构、生理功能和蛋白质合成上的差异。 细胞分化的实质是基因的选择性表达，即细胞中遗传信息的执行情况不同。 【详解】A、MSCs表面聚合的多巴胺可以强效清除自由基，而自由基会使MSCs难以存活，因此MSCs表面聚合的多巴胺为MSCs创造了有利的环境，A正确； B、将多种抗体基因拼接起来导入MSCs，使其表达出黏附炎症组织的多价抗体（anti-VCAM1），利用的是基因工程技术，B错误； C、心脏收缩及高血流使MSCs难以有效滞留，制约了疗效，多价抗体（anti-VCAM1）能黏附炎症组织，从而使MSCs在梗死心肌组织中有效滞留，C正确； D、间充质干细胞（MSCs）是一类具有自我更新和多向分化能力的成体干细胞，说明其能分化成多种细胞或组织，D正确。 故选B。 2．（2025·山东泰安·二模）由PRRSV病毒引发的传染病—“猪繁殖与呼吸综合征”俗称猪蓝耳病，是对猪最具经济破坏性的疾病。科学家通过以下流程培育能自动产生PRRSV抗体的转基因克隆猪，进而对该病进行诊断和治疗。下列说法正确的是（　　） A．获得D猪的基础技术是动物体细胞核移植技术 B．步骤①通常采用离心法使两细胞融合 C．步骤②中可采用Ca2+载体激活重构胚 D．步骤③中涉及的主要是胚胎早期培养技术 【答案】C 【分析】据图分析，图示核移植技术培育转基因克隆猪培育过程涉及的技术手段有基因工程技术、核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等，利用转基因技术将病毒外壳蛋白基因(目的基因)导入B猪的体细胞核中，然后将B猪的体细胞核移植到A猪的去核卵母细胞中，再将重组细胞培养到一定阶段并移植到C猪的子宫中去，最后分娩产生了D转基因克隆猪。 【详解】A、分析可知，获得D猪设计去核卵母细胞与含有目的基因的细胞的融合，基础技术是动物细胞培养技术，A错误； B、步骤①通常通过电融合法使两细胞融合，B错误； C、通常用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确； D、步骤③表示将早期胚胎移植给C猪，其技术手段为胚胎移植，D错误。 故选C。 3．（2025·辽宁·二模）抗原表位指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团，是抗原与T细胞或B细胞表面的抗原识别受体及抗体特异性结合的最小结构单位。下图为单克隆抗体的制备过程，下列叙述错误的是（    ） A．可用PEG或灭活的病毒诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合 B．经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞能够产生的抗体共3种 C．克隆化培养和抗体检测后的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体 D．由图可知，利用一种抗原经杂交瘤技术可以获得多种单克隆抗体 【答案】B 【分析】单克隆抗体的制备:（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、在单克隆抗体制备过程中，灭活的病毒（如仙台病毒）是常用的细胞融合诱导剂，用于促进骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合，A正确； B、经选择培养基筛选后，由于B细胞有多种，杂交瘤细胞能够产生的抗体有多种，B错误； C、克隆化培养和抗体检测的目的是筛选出单一克隆的杂交瘤细胞，每个克隆只能产生一种特异性抗体，C正确； D、利用一种抗原，可以通过杂交瘤技术获得针对该抗原不同表位的多种单克隆抗体，D正确。 故选B。 4．（2025·北京西城·二模）病毒PEDV会使猪患流行性腹泻，在制备抗PEDV的单克隆抗体时加入不同浓度维生素C（VC），杂交瘤细胞增殖情况及抗体分泌情况如图和表格所示。叙述错误的是（　　）    VC/（ng·mL-1） 抗体效价 0 1：4000 5 1：4000 10 1：8000 20 1：2000 A．可用灭活病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 B．培养杂交瘤细胞需在培养基中添加动物血清 C．10ng·mL-1VC显著促进杂交瘤细胞增殖 D．20ng·mL-1VC通过抑制细胞增殖降低抗体效价 【答案】D 【分析】柱状图展示了不同浓度维生素对杂交瘤细胞增殖情况的影响。横坐标为VC浓度，设置了0、5、10、20这几个浓度梯度。纵坐标代表杂交瘤细胞数量。当VC浓度为0ng·mL-1时，杂交瘤细胞数量为一个特定值，此为对照组数据，是衡量其他浓度VC对细胞增殖影响的基准。 【详解】A、在制备单克隆抗体时，可用灭活病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，这是常用的细胞融合方法之一，A正确； B、动物细胞培养需要适宜的营养条件，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分，B正确； C、从图中可以看出，与不添加 VC（0ng·mL-1VC）相比，添加10ng·mL-1VC 时，杂交瘤细胞数量明显增加，故10ng·mL-1VC显著促进杂交瘤细胞增殖，C正确；​ D、从图中可知，20ng·mL-1VC时杂交瘤细胞数量与不添加 VC（0ng·mL-1VC）相比，细胞数量增加，故并未抑制细胞增殖，D错误。 故选D。 5．（2025·天津·二模）T-DMI是曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体-药物偶联物，对HER-2蛋白有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述错误的是（    ） A．用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 B．向小鼠反复注射HER-2，以便在脾脏中获取免疫的B淋巴细胞 C．用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜的蛋白质和脂质分子会重新排布 D．T-DMI中曲妥珠单抗与HER-2特异性结合是对癌细胞进行选择性杀伤的关键 【答案】A 【分析】抗体-药物偶联物通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。 【详解】A、用选择培养基可以筛选出杂交瘤细胞，这些杂交瘤细胞还需要经过抗原—抗体杂交技术才能筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞，A错误； B、向小鼠体内反复注射HER-2，目的是以便在脾脏中获取免疫的B淋巴细胞，B正确； C、用灭活的病毒诱导细胞融合时，病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，C正确； D、T-DMI中曲妥珠单抗能与HER-2蛋白特异性结合，将其携带的药物定向运输至HER-2过度表达的转移性乳腺癌细胞中，这能保证药物DMI对癌细胞的选择性杀伤，D正确。 故选A。 6．（2025·山东德州·二模）胚胎补偿技术是指将供体的iPS细胞注入特定器官发育缺陷的宿主囊胚中，使其补偿发育出所需器官的技术。中国科学家利用该技术在猪胚胎中发育生成人源化肾脏，过程如图所示。经检测，这些肾脏中人源细胞比例最高可达70%。下列说法错误的是（    ） A．基因P和M是猪的肾脏发育过程中的关键基因 B．过程②可利用Ca2+载体激活重构胚 C．过程④应将人源iPS细胞注入囊胚的滋养层中 D．利用胚胎补偿技术制备的器官进行移植仍存在免疫排斥问题 【答案】C 【分析】嵌合胚胎的肾脏是利用人类iPS细胞与实验猪早期胚胎形成人兽胚胎嵌合体的过程。 【详解】A、根据题意，利用该技术在猪胚胎中发育生成人源化肾脏，而猪的早期胚胎中敲除基因P和M，基因P和M是猪的肾脏发育过程中的关键基因，A正确； B、细胞融合后用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B正确； C、过程④应将人源iPS细胞注入囊胚的内细胞团中，滋养层发育成的是胎盘和胎膜，C错误； D、该技术在猪胚胎中发育生成人源化肾脏，肾脏中人源细胞比例最高可达70%，利用胚胎补偿技术制备的器官进行移植仍存在免疫排斥问题，D正确。 故选C。 7．（2025·山东德州·二模）特应性皮炎是一种过敏性皮肤病，患者的II型辅助性T细胞（Th2）被过度激活，其分泌的细胞因子IL-4显著增多，导致IgE抗体水平升高，进而产生过敏反应。下列说法正确的是（    ） A．Th2通常在接受抗原呈递细胞传递的抗原信息后才能分泌IL-4 B．细胞因子IL-4可作为激活B细胞的第二个信号 C．过敏原再次入侵后产生的IgE抗体才能吸附在某些细胞表面 D．IL-4受体的单克隆抗体可减少IL-4的释放进而缓解过敏反应 【答案】A 【分析】过敏反应是过敏原再次侵入有过敏体质的机体时，初次接触过敏原使机体产生的抗体吸附在细胞表面这时与过敏原结合，进而使靶细胞释放组织胺等化学物质，引发过敏反应。 【详解】A、在特异性免疫过程中，辅助性T细胞（Th2）通常需要接受抗原呈递细胞传递的抗原信息后才能被激活，进而分泌细胞因子IL - 4，A正确； B、激活B细胞的第二个信号是辅助性T细胞表面的特定分子发生变化并与B细胞结合，而不是细胞因子IL - 4，细胞因子IL - 4可促进B细胞的分裂、分化，B错误； C、IgE抗体在第一次接触过敏原时就会产生并吸附在某些细胞表面，而不是过敏原再次入侵后产生的IgE抗体才吸附，C错误； D、IL - 4受体的单克隆抗体可以与IL - 4受体结合，阻止IL - 4与受体结合，从而缓解过敏反应，但不能减少IL - 4的释放，D错误。 故选A。 8．（2025·福建龙岩·二模）CD87是某种癌细胞膜上的受体蛋白，与癌细胞的转移和增殖有关。CD3是所有T细胞表面的特异性抗原，该抗原被激活后，能极大促进T细胞的免疫效力。科研人员尝试通过诱导两种杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，以筛选出能同时结合CD87和CD3的双特异性抗体CD87×CD3，如图所示。    下列相关叙述正确的是（　　） A．制备双杂交瘤细胞时，需要将CD87、CD3分别注射到小鼠体内 B．双杂交瘤细胞需要用CD87和CD3刺激才会产生双特异性抗体 C．小鼠体内培养双杂交瘤细胞时需从小鼠脾脏中提取双特异性抗体 D．体外培养的双杂交瘤细胞会出现贴壁生长和接触抑制现象 【答案】A 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、制备双杂交瘤细胞时，需要将CD87、CD3分别注射到小鼠体内，引起机体的体液免疫，获得免疫小鼠的脾脏细胞，其中含有被激活的B淋巴细胞，该细胞增殖、分化可产生浆细胞，而浆细胞能产生抗体，A正确； B、双杂交瘤细胞不仅能产生所需要的抗体，而且还能大量增殖，其产生抗体的过程不需要用CD87和CD3刺激，B错误； C、小鼠体内培养双杂交瘤细胞时需从小鼠腹水中提取双特异性抗体，C错误； D、体外培养的双杂交瘤细胞不会出现贴壁生长和接触抑制现象，因为该细胞表现为无限增殖的特征，D正确。 故选A。 9．（2025·广东汕头·二模）某酶联免疫法试剂盒可用于单纯疱疹病毒的IgG抗体检测，如图是其说明书中检测原理的描述。下列叙述错误的是（　　） 酶联免疫检测原理：将已知抗原固定在试剂盒中的载体上，IgG抗体与该抗原结合后，再与酶标记抗体结合，酶标抗体中的酶催化某种显色物质发生显色（阳性）反应 A．酶标记抗体中的酶所催化底物不一定是蛋白质 B．血浆中待测抗体的含量对显色的深浅产生影响 C．若血清检测为阳性提示曾感染过单纯疱疹病毒 D．阴性结果时发生固定抗原与酶标抗体特异结合 【答案】D 【分析】酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，作用机理是降低化学反应所需的活化能。 【详解】A、酶具有专一性，酶标记抗体中的酶所催化的底物由该酶的性质决定，不一定是蛋白质，A正确； B、血浆中待测抗体（IgG抗体）含量越多，与固定抗原结合的量越多，进而结合的酶标记抗体也越多，酶催化显色物质显色就越深，所以血浆中待测抗体的含量对显色的深浅产生影响，B正确； C、若血清检测为阳性，说明血清中有与单纯疱疹病毒抗原结合的IgG抗体，IgG抗体的产生是机体曾感染过单纯疱疹病毒引发免疫反应的结果，提示曾感染过单纯疱疹病毒，C正确； D、根据检测原理，阴性结果时说明血清中没有与固定抗原结合的IgG抗体，也就不会发生酶标抗体与固定抗原通过IgG抗体的间接结合，即不会发生固定抗原与酶标抗体特异结合，D错误。 故选D。 10．（2025·广东汕头·二模）阿尔茨海默病的病理特征常见淀粉样蛋白β（Aβ）斑块沉积。针对Aβ的单克隆抗体可能对该病有疗效。下列关于制备抗Aβ的单克隆抗体的叙述，错误的是（　　） A．小鼠多次注射Aβ并分离B淋巴细胞 B．用灭活病毒诱导B淋巴细胞相互融合 C．杂交瘤细胞进行抗Aβ抗体阳性检测 D．从细胞培养液或小鼠腹水中收集抗体 【答案】B 【分析】单克隆抗体制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、将特定的抗原蛋白（Aβ）注射到小鼠体内，目的是从小鼠体内获得已经免疫的B淋巴细胞，A错误； B、用灭活病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，B错误； C、经选择培养基筛选出的杂交瘤细胞有多种，并不是所有杂交瘤细胞都能产生抗Aβ单克隆抗体，因此杂交瘤细胞进行抗Aβ抗体阳性检测，C正确； D、杂交瘤细胞可以在小鼠腹腔中或外界培养液中培养，因此可以从细胞培养液或小鼠腹水中收集抗体，D正确。 故选B。 11．（2025·甘肃白银·二模）类器官是一种在体外培养的、由干细胞分化而来的三维细胞团，具有与器官类似的结构和功能，在医疗上具有广泛的应用前景，下图表示类器官培养流程。下列叙述正确的是（　　）    A．体细胞与多能干细胞中核酸和蛋白质种类不完全相同 B．类器官应放在CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 C．囊胚的滋养层细胞属于多能干细胞，可以在体外培养成类器官 D．培养类器官时，为减轻代谢物积累对细胞的伤害，可在培养液中加入抗生素 【答案】A 【分析】动物细胞培养是指从动物体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。该技术是动物细胞工程的基础。 动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、体细胞与多能干细胞中核DNA相同，mRNA和蛋白质种类不完全相同，核酸包括DNA和RNA，故体细胞与多能干细胞中核酸和蛋白质种类不完全相同，A正确； B、类器官应放在CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH，B错误； C、囊胚的内细胞团细胞全能性高，可以在体外培养成类器官，C错误； D、为了减轻代谢物积累对细胞的伤害，须定期更换培养液，D错误。 故选A。 12．（2025·安徽滁州·二模）研究表明，药物佐妥昔单抗能延长胃癌患者生存期。临床试验结果显示，接受佐妥昔单抗治疗的晚期胃癌患者寿命更长，疾病进展延缓。下列有关杂交瘤细胞克隆化培养获得佐妥昔单抗过程的叙述，正确的是（　　） A．体外培养杂交瘤细胞时，要通入95%的O2和5%的CO2 B．佐妥昔单抗的制备利用了细胞培养、细胞融合等技术 C．用选择培养基可筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞 D．杂交瘤细胞的克隆化培养过程中不需考虑细菌污染问题 【答案】B 【分析】动物细胞培养的基本条件（1）无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；定期更换培养液以清除代谢废物。（2）营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等之外，通常还需要加入血清等一些天然成分。（3）温度、pH和渗透压：最适温度为（36.5±0.5）℃，多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。（4）气体环境：含95%空气加5%CO2的混合气体，CO2的作用是维持培养液pH。 【详解】A、体外培养杂交瘤细胞时，要通入95%的空气和5%的CO2，A错误； B、佐妥昔单抗的制备过程呈利用了细胞培养技术（培养骨髓瘤细胞、B细胞和杂交瘤细胞），细胞融合技术（B细胞和骨髓瘤细胞融合），B正确； C、用选择培养基可筛选出杂交瘤细胞，利用抗原—抗体杂交技术筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、杂交瘤细胞的克隆化培养过程中需考虑细菌污染问题，细菌污染会影响动物细胞的培养，D错误。 故选B。 13．（2025·北京昌平·二模）H18杂交瘤细胞能够产生抗人肝癌单克隆抗体，但该细胞在培养过程中的凋亡现象制约着其生产能力的提高。Bcl-XL是一种抗凋亡蛋白，利用Bcl-XL基因改造杂交瘤细胞，获得了稳定表达Bcl-XL的杂交瘤细胞。下列说法错误的是（　　） A．制备H18杂交瘤细胞利用了动物细胞融合技术 B．利用产生特定抗体的B细胞与瘤细胞制备H18杂交瘤细胞 C．将Bcl-XL基因直接注射至H18杂交瘤细胞可实现稳定表达 D．经筛选可获得既抗凋亡又能分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞 【答案】C 【分析】动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 【详解】AB、动物细胞融合技术可使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞，融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。利用产生抗人肝癌抗体的B细胞与瘤细胞融合，可制备H18杂交瘤细胞，A正确，B正确； C、将Bcl-XL基因直接注射至H18杂交瘤细胞可能出现Bcl-XL基因被降解、Bcl-XL基因无法正确并稳定表达等问题，故要将Bcl-XL基因与载体构成基因表达载体，再导入H18杂交瘤细胞进行稳定表达，C错误； D、通过基因改造后，如果H18杂交瘤细胞成功整合了Bcl-XL基因，则H18杂交瘤细胞能同时具备既抗凋亡又能分泌单克隆抗体两种特性，可筛选出这样的细胞，D正确。 故选C。 14．（2025·山西晋城·二模）细胞核重编程是将已经分化的成体细胞进行诱导，让其重新回到发育早期的多能性干细胞状态，通俗来讲，就是在细胞层面实现了“返老还童”。早在20世纪60年代，Gurdon等用蝌蚪肠道的成熟特化细胞的细胞核替换掉青蛙卵母细胞的细胞核，从而使重组细胞发育为性成熟的成体青蛙，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　）    A．回到发育早期的多能性干细胞状态可重新获得发育成各种类型细胞的能力 B．用紫外线照射破坏卵母细胞中的染色体，其目的是破坏卵母细胞的细胞核 C．对早期胚胎细胞进行培养时，一般需提供营养、酸性环境和95％的氧气 D．图中采用显微注射法将蝌蚪肠上皮细胞的细胞核注入去核的卵母细胞 【答案】C 【分析】在一定条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。 【详解】A、干细胞具有发育全能性，回到发育早期的多能性干细胞状态时，可重新获得发育成各种类型细胞的能力，A正确； B、用紫外线照射破坏卵母细胞中的染色体，其目的是破坏卵母细胞的细胞核，B正确； C、对早期胚胎细胞进行培养时，一般需提供营养、弱碱性环境和95％的无菌空气和5％的二氧化碳，而非氧气，C错误； D、图中采用显微注射法将蝌蚪肠上皮细胞的细胞核注入去核的卵母细胞，D正确。 故选C。 15．（2025·浙江宁波·二模）胚胎工程中的体外受精技术，须将采集到的卵母细胞进行体外培养至成熟。下列叙述正确的是（　　） A．培养卵母细胞要在充满CO₂的培养箱中进行 B．培养基中添加灭菌的血清有利于卵母细胞的培养 C．初次培养的卵母细胞经传代培养可得到大量细胞 D．卵母细胞经培养至完成减数分裂后才可用于受精 【答案】B 【分析】精子的准备：精子获能，刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力； 卵子的准备：动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力； 对大型动物是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精（或从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞）。 【详解】A、培养动物细胞（包括卵母细胞）通常是在含有 95% 空气和 5% CO2的混合气体的培养箱中进行，A错误； B、血清中含有丰富的营养物质和一些生长因子等，在培养基中添加灭菌的血清有利于卵母细胞的培养，B正确； C、卵母细胞是高度分化的细胞，一般不能进行传代培养，C错误； D、卵母细胞培养至减数第二次分裂中期就可用于受精，而不是完成减数分裂后，D错误。 故选B。 16．（2025·江西上饶·二模）我国研究人员率先利用某组蛋白去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，通过调控重构胚相关基因表达，解决了体细胞克隆猴胚胎发育率低这一技术难点，培育出了第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 B．②过程去核实际上是去掉卵母细胞纺锤体—染色体复合物 C．使用合成培养基培养融合细胞时，需要额外再添加一些营养物质 D．Kd4d的mRNA能降低组蛋白甲基化水平，提高克隆猴胚胎发育率 【答案】D 【分析】卵母细胞的细胞质中含有一些能够促进细胞核全能性表达的物质，②过程是去除卵母细胞的细胞核，目的是为供体细胞的核提供一个去核的卵母细胞环境，保证细胞核全能性能够顺利表达，而细胞质中也存在有遗传物质DNA，因此克隆动物的遗传物质来自核供体和卵母细胞供体。 【详解】A、胚胎细胞分化程度低，全能性相对较高，而体细胞分化程度高，恢复全能性更困难，因此动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植，A正确； B、核移植使用的卵母细胞处于减数分裂Ⅱ中期，此时细胞核无核膜、核仁，“核”实际上是纺锤体—染色体复合物，B正确； C、由于人们对细胞所需的营养物质尚未研究清楚，培养动物细胞使用的培养基通常需要添加天然营养物质血清等，C正确； D、基因通过控制蛋白质的合成来调控生命活动，根据题干信息可知，Kd4d的mRNA能够合成某组蛋白去甲基化酶，在该酶的作用下，能降低组蛋白甲基化水平，调控重构胚相关基因表达，从而提高克隆猴胚胎发育率，并不是Kd4d的mRNA能降低组蛋白甲基化水平，D错误。 故选D。 17．（2025·黑龙江·二模）单克隆抗体药物是生物制药中最热门的领域之一，治疗方向覆盖肿瘤、心血管疾病、自身免疫病和新发突发传染病等领域。下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是（    ） A．对小鼠多次用同种抗原进行刺激的目的是获得大量抗体 B．用灭活病毒诱导细胞融合，以便获得分泌抗体的杂交瘤细胞 C．对融合后的细胞进行选择培养，以便获得能无限增殖的细胞 D．对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，目的是从培养液中提取单克隆抗体 【答案】B 【分析】单克隆抗体的制备： 1、细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。 2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。 3、两次次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 4、两次抗体检测：专一抗体检验阳性。 5、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。 6、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。 【详解】A、对小鼠多次用同种抗原进行刺激的目的是获得能产生特定抗体的B淋巴细胞，A错误； B、用灭活病毒诱导细胞融合，以便获得分泌抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、对融合后的细胞进行选择培养，去除未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞，以便获得融合的杂交瘤细胞，C错误； D、对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，目的是筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D错误。 故选B。 18．（2025·山东潍坊·二模）科研人员分别利用两种抗原获得了能产生单克隆抗体的两种杂交瘤细胞，将两种杂交瘤细胞再次融合，得到了双杂交瘤细胞。该双杂交瘤细胞可产生能识别上述两种抗原的双特异性抗体。下列说法错误的是（　　） A．获得双杂交瘤细胞用到的技术主要有动物细胞融合、动物细胞培养 B．培养双杂交瘤细胞时，需提供CO₂维持培养液的pH C．获得的双杂交瘤细胞需要两种相应的抗原刺激后才能产生双特异性抗体 D．筛选双杂交瘤细胞时需使用制备两种杂交瘤细胞时所使用的两种抗原 【答案】C 【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、获得双杂交瘤细胞用到的技术主要有动物细胞融合（B细胞与骨髓瘤细胞的融合、杂交瘤细胞融合）、动物细胞培养，A正确； B、动物细胞培养需要氧气，需要气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值），B正确； C、获得的双杂交瘤细胞不需要抗原刺激就能产生双特异性抗体，C错误； D、将两种杂交瘤细胞再次融合，得到了双杂交瘤细胞，筛选双杂交瘤细胞时需使用制备两种杂交瘤细胞时所使用的两种抗原，D正确。 故选C。 19．（2025·云南曲靖·二模）下列研究中，主要运用体细胞核移植技术的是（    ） A．提供疾病模型动物 B．治疗帕金森综合征 C．生产单克隆抗体 D．培养可供移植的人体皮肤 【答案】A 【分析】1、动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础。检测有毒物质离不开动物细胞的培养； 2、动物体细胞核移植：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。 【详解】A、通过体细胞核移植技术，将患病动物的体细胞核移植到去核的卵母细胞中，再经过一系列操作发育成动物个体，从而提供疾病模型动物，A正确； B、治疗帕金森综合征通常采用药物治疗、手术治疗等方法，体细胞核移植技术一般不直接用于治疗帕金森综合征，B错误； C、生产单克隆抗体主要是通过杂交瘤细胞技术，将骨髓瘤细胞和经过免疫的B淋巴细胞融合，再筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞进行培养生产抗体，不是运用体细胞核移植技术，C错误； D、培养可供移植的人体皮肤主要是通过皮肤干细胞培养等技术，不是体细胞核移植技术，D错误。 故选A。 20．（2025·江西鹰潭·二模）某些肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-1结合能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-LI和PD-1的结合，可恢复CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与化疗的联合治疗研究。已知黑色素瘤细胞能分泌吸引某类细胞靠近的细胞因子CXCL1。部分结果见图。下列叙述正确的是（    ）    A．联合疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加活化的CTL数量，还能使化疗药物靶向肿瘤细胞 B．据图示分析，联合疗法组肿瘤体积最小治疗效果最好的原因是模型小鼠体内CTL的数量更多 C．将CXCLI受体基因的表达载体导入CTL中，将其培育成小鼠，可进一步提高治疗效果 D．基于现有抗体—药物偶联物的思路，应选择化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起 【答案】A 【分析】根据题图可知，肿瘤细胞表面的PD−L1通过与T细胞表面的PD−1蛋白特异性结合，抑制T细胞增殖分化，从而逃避免疫系统的攻击。 【详解】A、由上述两图可知，联合疗法肿瘤体积最小，采用联合疗法时活化的CTL的数目明显高于免疫检查点疗法和化疗等，原因是该疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加了活化的CTL数量，还能使化疗药物靶向肿瘤细胞，A正确； B、分析题图可知，与免疫检查点疗法相比，联合疗法组肿瘤体积最小治疗效果最好的原因是模型小鼠体内活化的CTL的数量更多，而不是单纯的CTL的数量增加，B错误； C、CTL细胞是高度分化的细胞，不能培育成小鼠。为使CTL响应此信号，可在CTL中导入CXCL1受体基因后再将其回输小鼠体内，从而进一步提高治疗效果，C错误； D、某肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-1结合能抑制CTL的免疫活性，基于现有抗体—药物偶联物的思路，故应该将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合在一起，这样既可阻断PD-1与PD-L1 结合，恢复CTL的活性，又使化疗药物靶向肿瘤细胞，D错误。 故选A。 21．（2025·河北衡水·二模）科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞能增殖分化为多种组织细胞，用于某些疾病的治疗。下列有关叙述正确的是（　　）    A．干细胞是从胚胎中分离提取的细胞 B．造血干细胞分化程度高于iPS细胞，且具有组织特异性 C．iPS细胞分化产生的组织细胞基因、蛋白质相同 D．获得iPS细胞的过程中，细胞的遗传物质一定不变 【答案】B 【分析】干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞，包括骨髓中的造血干细胞、神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞等。一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。 【详解】A、胚胎干细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离提取的细胞，干细胞不一定来自胚胎，如造血干细胞，A错误； B、造血干细胞已经发生了一定程度的分化，而iPS细胞具有多能性，能增殖分化为多种组织细胞，说明iPS细胞的分化程度低于造血干细胞。并且造血干细胞能分化形成各种血细胞，具有组织特异性，B正确； C、iPS细胞分化产生不同组织细胞的过程是基因选择性表达的过程。虽然细胞中的基因是相同的（因为都来自同一个iPS细胞），但由于基因的选择性表达，不同组织细胞合成的蛋白质是不同的，C错误； D、获得iPS细胞的过程中，通常是通过导入特定的转录因子等方法来诱导小鼠成纤维细胞重编程获得iPS细胞。在这个过程中，细胞的遗传物质可能会发生改变，D错误。 故选B。 22．（2025·甘肃庆阳·二模）为了快速检测某病毒，以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，主要技术路线如图所示。下列叙述错误的是（　　）    A．步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射的是抗原和杂交瘤细胞 B．步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是能在体外无限增殖 C．③④培养的目的是扩大杂交瘤细胞的数量 D．单克隆抗体可以运载药物，也可以用于治疗疾病 【答案】C 【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、步骤①是向小鼠注射抗原（病毒外壳蛋白A），刺激小鼠产生能分泌特异性抗体的B淋巴细胞；步骤⑤是将筛选出的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔中，最终可在腹水中收集到大量单克隆抗体，A正确； B、步骤②所用的 SP2/0 细胞是骨髓瘤细胞，其生长特点是能在体外无限增殖 ，B正确； C、步骤③用特定的选择培养基进行筛选，在该选择培养基上，只有融合的杂交瘤细胞才能够生长，没有融合的细胞及同种核融合的细胞不能生长，因此步骤③培养的目的是获得杂交瘤细胞；步骤④是将杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、单克隆抗体特异性强、灵敏度高，可运载药物制成 “生物导弹”，也可直接用于治疗疾病 ，D正确。 故选C。 23．（2025·云南红河·二模）大熊猫是中国特有的珍稀濒危动物，目前野生大熊猫大约有2000只。2024年，我国研究团队首创了大熊猫iPS细胞重编程方法，即把从大熊猫身上提取的普通皮肤细胞（皮肤成纤维细胞）重编程为干细胞，大致流程如图。据图分析，下列说法正确的是（    ） A．该研究中把外源性核酸导入体细胞的方法是显微注射法 B．体外培养大熊猫iPS细胞时要求无菌无毒且需要N2和O2 C．大熊猫的成纤维细胞和成熟红细胞理论上均可重编程为iPS细胞 D．大熊猫iPS细胞被诱导为其他细胞类型的过程②属于细胞的再分化 【答案】D 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【详解】A、据图可知，该研究中把外源性核酸导入质粒的方法是电穿孔法，iPS细胞重编程通常使用病毒载体（如逆转录病毒或慢病毒）或化学方法（如小分子化合物）来导入外源性核酸，而不是显微注射法，A错误； B、体外培养大熊猫iPS细胞时要求无菌无毒的环境，但气体条件是95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH），B错误； C、大熊猫成熟红细胞无细胞核和任何细胞器，理论上不能重编程为iPS细胞，C错误； D、大熊猫iPS细胞被诱导为其他细胞类型的过程②属于细胞的再分化，iPS细胞被诱导为其他细胞类型的过程属于细胞的再分化，D正确。 故选D。 24．（2025·四川达州·二模）成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌及结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在肿瘤的标记物。将药物与特异性识别FGF20的单克隆抗体结合制成抗体-药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，其制作过程如图。下列分析错误的是（　　） A．注射FGF20是为获得能产生特定抗体的B细胞，PEG可换为灭活病毒 B．筛选1和筛选2都利用了单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异 C．ADC通过抗体与肿瘤细胞膜上受体结合后，以胞吞方式进入肿瘤细胞 D．利用同位素或荧光标记的单克隆抗体在组织中成像，可定位诊断肿瘤 【答案】B 【分析】题图分析：抗体药物偶联物（ADC） 通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，被肿瘤细胞特异性识别，通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，导致溶酶体裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。 【详解】A、注射FGF20是为获得能产生特定抗体的B细胞，B细胞和骨髓瘤细胞融合可以加PEG，也可以通过灭活病毒诱导融合，A正确； B、筛选1是利用HAT选择培养基进行筛选，经过筛选1获得杂交瘤细胞，筛选2利用了单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，筛选出能产生抗FGF20抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、ADC通过抗体与肿瘤细胞膜上受体结合后，ADC是大分子物质，以胞吞方式进入肿瘤细胞，C正确； D、由于单克隆抗体可以特异性识别肿瘤细胞，因此利用同位素或荧光标记的单克隆抗体在组织中成像，可定位诊断肿瘤，D正确。 故选B。 25．（2025·河北·二模）研究人员制备了37株iPS细胞系，将其中6株iPS细胞系注射入1500多个四倍体小鼠胚胎，最终3株iPS细胞系获得了27只活体小鼠，其中首只iPS细胞克隆鼠被命名为“小小”。下列相关叙述错误的是（    ） A．iPS细胞只能通过体外诱导小鼠的成纤维细胞转化获得 B．培养iPS细胞时需提供含CO2混合气体，以维持培养液的pH C．培养iPS细胞的过程中会发生接触抑制现象，此时细胞会停止增殖 D．首只iPS细胞克隆鼠“小小”的诞生，说明iPS细胞具有全能性 【答案】A 【分析】胚胎干细胞（ES细胞）具有自我更新及多向分化潜能，为发育学、遗传学、人类疾病的发病机理与替代治疗等研究提供非常宝贵的资源。iPS细胞技术是借助基因导入技术将某些特定因子基因导入动物或人的体细胞，以将其重编程或诱导为ES细胞样的细胞，即iPS细胞。 【详解】A、iPS细胞最初由小鼠成纤维细胞转化而来，但T细胞和B细胞也能分化形成iPS细胞，A错误； B、应该将iPS细胞置于含95%空气和5%CO2混合气体的恒温箱中培养，其中CO2可维持培养液的pH，B正确； C、培养iPS细胞的过程中会发生接触抑制现象，此时细胞停止增殖，需要用胰蛋白酶处理使之分散，C正确； D、细胞全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，首只iPS细胞克隆鼠“小小”的诞生，说明iPS细胞具有全能性，D正确。 故选A。 26．（2025·江苏南通·二模）单克隆抗体的发展经历了多个阶段，如最初的鼠源性单克隆抗体，其制备路线如图1所示。由其发展形成的嵌合性单克隆抗体，用人的恒定区取代小鼠的恒定区，保留鼠单抗的可变区序列，形成了人—鼠杂合的抗体，如图2所示。下列有关分析错误的是（    ）    A．蛋白A刺激小鼠和刺激人体产生的抗体结构不完全相同 B．小鼠体内抗体的种类与抗体基因的种类通常不是一一对应的 C．制备的人鼠嵌合单抗常用于制备病毒抗原检测的试纸 D．第二次筛选时将杂交瘤细胞接种到多孔培养板上进行克隆化培养和抗体检测 【答案】C 【分析】单克隆抗体的制备： 1、细胞来源：经免疫的B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。 2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。 3、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生所需抗体的细胞群。 4、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。 5、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。 【详解】A、由于小鼠和人体的免疫系统存在差异，对同一抗原（蛋白A）的免疫应答也不完全相同。 因此，蛋白A刺激小鼠和刺激人体产生的抗体结构不完全相同，A正确； B、小鼠体内的一个抗体基因可以通过基因重排等机制产生多种不同的抗体。 所以，小鼠体内抗体的种类与抗体基因的种类通常不是一一对应的，B正确； C、人 - 鼠嵌合单抗虽然保留了鼠单抗的可变区序列，能与相应抗原结合，但由于其存在一定的人源化部分，在免疫原性等方面与天然的鼠源单抗有所不同。 目前常用于制备病毒抗原检测试纸的主要是单克隆抗体，尤其是鼠源单克隆抗体，人 - 鼠嵌合单抗一般不常用于制备病毒抗原检测的试纸，C错误； D、单克隆抗体制备过程中，第二次筛选时将杂交瘤细胞接种到多孔培养板上，进行克隆化培养和抗体检测，目的是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，D正确。 故选C。 27．（2025·甘肃·二模）体外动物细胞培养制造出的细胞培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细胞生长基质，其表面能使细胞贴附。下列叙述错误的是（    ） A．①过程可用机械方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶处理获得细胞悬液 B．③④过程需使用经灭菌处理的培养液，富含细胞生长所需的营养物质 C．③过程加入微载体为细胞提供更大附着面积，延迟接触抑制出现，可增加产量 D．动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，培养过程中细胞通过有丝分裂增加细胞数目 【答案】A 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、①过程为制备细胞悬液的过程，可用机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理的方法获得细胞悬液，胃蛋白酶最适pH为2，在7.2~7.4的环境中会失活，A错误； B、③④过程需使用经灭菌处理的培养液，培养细胞时提供95%空气+5%CO2，B正确； C、③过程中加入微载体为细胞提供了更大的附着面积，为生物提供了更多的空间，延迟接触抑制出现，可增加产量，C正确； D、动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，培养过程中细胞通过有丝分裂增加细胞数目，D正确。 故选A。 28．（2025·安徽马鞍山·二模）我国研究人员通过体细胞核移植技术完全自主培育出了克隆猫。下列叙述正确的是（    ） A．制备供体细胞的培养基，再灭菌后再加入血清等一些天然成分 B．采集的卵母细胞通过显微操作去核后，再在体外培养到MII期 C．为了提高核移植的成功率可将重组细胞直接移植到代孕猫体内 D．对受体猫进行同期发情处理的目的是避免其对外来胚胎发生免疫排斥 【答案】A 【分析】1、动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，继而发育成动物个体的技术。 2、利用核移植技术克隆动物时，其基本操作为获取去核卵细胞→构建重构胚→激活重构胚→胚胎移植→获得克隆个体。 【详解】A、制备供体细胞的培养基时，培养基需先高温灭菌，冷却后加入不耐高温的血清等成分，以避免破坏其活性，A正确； B、采集的卵母细胞需先在体外培养至MⅡ期（减数分裂Ⅱ中期），才能进行去核操作，B错误； C、核移植后的重组细胞需先体外培养形成早期胚胎（如桑椹胚或囊胚），才能移植到代孕母体，直接移植未发育的细胞会显著降低成功率，C错误； D、受体子宫不会对移植的胚胎发生免疫排斥，供体和受体要进行同期发情处理目的是使供体与受体出现相同的生理变化，为供体的胚胎植 入受体提供了相同的生理环境，D错误。 故选A。 29．（2025·广西来宾·二模）2024年9月25日，我国科学家邓宏魁研究团队在国际上首次报告了利用化学重编程诱导多能干细胞（CiPS）制备的胰岛细胞移植，实现了1型糖尿病的临床功能性治愈。具体治疗过程见下图，下列有关说法错误的是（    ） A．脂肪细胞变为CiPS细胞与CiPS细胞变为胰岛细胞，两者的实质是基因选择性表达 B．脂肪细胞变为CiPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程，是类似的 C．上图中的脂肪细胞、CiPS细胞、胰岛细胞的核DNA，是完全相同的 D．该治疗过程说明细胞分化具有可逆性，分化后的细胞在体内可恢复为初始状态 【答案】D 【分析】科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。 【详解】A、脂肪细胞变为CiPS 细胞，是关键基因表达的结果，是一种基因选择性表达，而CiPS细胞变为胰岛细胞也是一种基因选择性表达，A正确； B、植物组织培养中的脱分化过程，是使组织细胞恢复全能性，而脂肪细胞变为CiPS细胞的过程也是恢复细胞全能性功能的过程，B正确； C、据图可知，图中的脂肪细胞经诱导变成CiPS细胞，CiPS细胞再分化成胰岛细胞，过程中并没有改变细胞的核DNA，故脂肪细胞、CiPS细胞、胰岛细胞的核DNA都是相同的，C正确； D、分化后的细胞在机体内，由于受细胞间相互作用影响等因素，导致其不能再恢复为初始状态，D错误。 故选D。 30．（2025·广东湛江·二模）2017年11月27日，世界上首个体细胞克隆猴在我国诞生！培育克隆猴的流程如下图所示。下列有关叙述正确的是（    ） A．克隆猴的成功培育体现了动物细胞具有全能性 B．灭活的仙台病毒短暂处理，目的是使mRNA和TSA容易进入细胞 C．对重构胚的处理目的是调节相关基因表达，提高胚胎的发育率 D．应选择健康且有正常繁殖能力的代孕母猴，移植前需进行免疫检查 【答案】C 【分析】将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、克隆猴的成功培育体现了动物细胞核具有全能性，A错误； B、灭活的仙台病毒短暂处理，是为了诱导细胞融合，B错误； C、对重构胚的处理目的是调节相关基因表达，提高胚胎的发育率，C正确； D、选择健康且有正常繁殖能力的代孕母猴，子宫不会对外来胚胎产生免疫排斥，因此移植前无需进行免疫检查，D错误。 故选C。 31．（2025·浙江绍兴·二模）爆发性A族溶血性链球菌（GAS）能够在人体内迅速繁殖，他分泌的蛋白质类毒素可使患者产生相应抗体。对于疑似感染者，可以通过单克隆抗体检测机体产生的抗体，从而进行初步诊断。下列关于由小鼠杂交瘤细胞生产检测用单克隆抗体的叙述，错误的是（    ） A．需要利用细胞融合技术和细胞培养技术 B．需要给小鼠注射GAS分泌的蛋白质类毒素 C．需要多次筛选才能得到所需杂交瘤细胞 D．体内培养杂交瘤细胞无需使用CO₂培养箱 【答案】B 【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、制备单克隆抗体的过程利用了动物细胞培养技术和细胞融合技术，A正确； B、需要给小鼠注射GAS分泌的蛋白质类毒素，蛋白质类毒素作为抗原可以起特异性免疫反应，但是该蛋白质类毒素应该脱毒处理后才能作为抗原利用，否则有毒性会对小鼠有毒害作用，B错误； C、动物细胞融合过程中由于细胞随机融合，且不能百分之百成功融合，因此获得的是多种类型的细胞，包括未融合的细胞、同种融合的细胞和杂种细胞。对获得的杂种细胞选择培养后，还需要再进行体外克隆化培养和抗体检测，并经过多次筛选才能获得杂交瘤细胞，C正确； D、体内培养杂交瘤细胞无需使用CO₂培养箱，D正确。 故选B。 二、多选题 32．（2025·山东菏泽·二模）树突状细胞可迁移到抗原所在部位，受抗原刺激后，可在抗原所在部位增殖后大部分形成活化的树突状细胞，为探究该过程是否有记忆树突状细胞（可迁移到特异性抗原所在部位增殖分化）产生，研究人员将B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠分为甲、乙、丙三组进行相关实验，实验过程和结果如表所示。下列说法正确的是（    ） 项目 甲组 乙组 丙组 步骤① 腹腔注射生理盐水 腹腔注射B品系小鼠的肝细胞 腹腔注射C品系小鼠的肝细胞 步骤② 28天后去除骨髓，移植C品系小鼠的骨髓 步骤③ 7天后检测骨髓中活化的树突状细胞数量 树突状细胞数量 + + ++++ 注：同一品系小鼠不同细胞的抗原相同，用于移植的骨髓经过处理后只含抗原成分，其中的细胞不产生免疫应答，“+”的多少表示数量的多少。 A．注射B．C品系小鼠肝细胞的目的是诱导A小鼠机体产生记忆T细胞和记忆B细胞 B．用B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠作为实验材料排除了特异性免疫对实验的干扰 C．步骤②去除骨髓可以排除骨髓产生的树突状细胞对实验结果的影响 D．结果表明甲、乙、丙三组中只有丙组可检测到记忆树突状细胞的产生 【答案】BCD 【分析】树突状细胞的功能是摄取、处理病原体使之暴露出特有的抗原，然后将抗原呈递给辅助性T细胞，激发机体的特异性免疫过程。 【详解】A、注射B、C品系小鼠肝细胞的目的是诱导A小鼠机体产生记忆树突状细胞，A错误； B、B细胞和T细胞参与特异性免疫，故用B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠作为实验材料排除了特异性免疫对实验的干扰，B正确； C、骨髓中的造血干细胞会分化形成各种免疫细胞，步骤②去除骨髓可以排除骨髓产生的树突状细胞对实验结果的影响，C正确； D、树突状细胞的免疫记忆体现在Ⅲ组注射了C鼠的肝细胞后移植C的骨髓后活化的树突状细胞的数量多，Ⅱ组和Ⅰ组未注射C品系小鼠肝细胞，故移植C的骨髓后，两组检测到的活化树突状细胞数量少而且相近，因此可表明甲、乙、丙三组中只有丙组可检测到记忆树突状细胞的产生，D正确。 故选BCD。 33．（2025·山东日照·二模）过继性治疗适用于肿瘤晚期患者，是指将具有抗肿瘤活性的细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗。过继性治疗相关过程如图所示。下列说法正确的是（　　） A．过继性细胞治疗中，需从健康人体内获得能特异性杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞 B．筛选时；需要加入肿瘤细胞表面抗原筛选出特异性杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞 C．扩大培养时，细胞会因有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等出现分裂受阻 D．过继性治疗过程中不会产生免疫排斥反应，同时具有特异性强、毒副作用小等优点 【答案】BCD 【分析】细胞毒性T淋巴细胞对某些病毒、肿瘤细胞等抗原物质具有杀伤作用，与自然杀伤细胞构成机体抗病毒、抗肿瘤免疫的重要防线。 【详解】A、过继性治疗适用于肿瘤晚期患者，是指将具有抗肿瘤活性的细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗，因此过继性治疗通常采用患者自身的细胞，以避免免疫排斥反应，A错误； B、筛选过程中需加入肿瘤细胞表面抗原，以筛选出能够特异性识别并杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞，确保其靶向性，B正确； C、在体外扩大培养时，动物细胞会因接触抑制（贴壁生长停止）、代谢废物积累和营养不足导致分裂受阻，这是细胞培养的常见限制因素，C正确； D、若使用自体细胞，过继性治疗不会引发免疫排斥；同时，特异性靶向肿瘤细胞的特性使其毒副作用相对较小，D正确。 故选BCD。 34．（2025·江西·二模）CD47是一种跨膜糖蛋白,它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合,从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6倍至5倍,导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测,抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用,为此他们按照如下流程进行了实验。下列叙述正确的是（　　） A．多次进行步骤①的处理目的是获得更多抗CD47抗体 B．图中②③都需要使用特定的选择性培养基进行筛选 C．实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需要适宜的温度和pH D．对照组应设置为不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系 【答案】CD 【分析】单克隆抗体的制备的流程： （1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。 （2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。 （3）克隆化培养和抗体检测。 （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 （5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、步骤①是向小鼠体内注射特定的抗原，多次向免疫动物注射抗原CD47的目的是获得更多分泌抗CD47抗体的B淋巴细胞，A错误； B、过程③用（专一）抗体检测（抗原—抗体杂交）的方法筛选出能产生抗CD47抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需要适宜的温度和pH，因为细胞的生活环境需要适宜的温度和pH，C正确； D、该实验的自变量为是否含有单克隆抗体，故实验组为巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系，对照组应设置为不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系，D正确。 故选CD。 35．（2025·江西上饶·二模）某病毒颗粒表面有蛋白S（含有多种不同的抗原决定簇，每种抗原决定簇能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员利用小鼠（2N）采用杂交瘤技术制备了抗S单克隆抗体（只考虑细胞两两融合），过程如图。相关叙述错误的是（　　）    A．给小鼠注射抗原蛋白S后应从小鼠肝脏中提取B淋巴细胞 B．诱导融合的杂交瘤细胞染色体组数最多可达到8个 C．可用同一种方法筛选杂交瘤细胞和单一类型的杂交瘤细胞 D．单克隆抗体A和单克隆抗体B均能检测S蛋白 【答案】AC 【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、应从小鼠脾脏中提取B淋巴细胞，A错误； B、诱导融合的杂交瘤细胞在有丝分裂后期染色体组数可以达到8个，B正确； C、筛选杂交瘤细胞可以用特定选择培养基筛选，筛选单一类型的杂交瘤细胞需要用96孔板，通过克隆化培养，及抗体检测筛选，C错误； D、单克隆抗体A和单克隆抗体B都来自筛选出的杂交瘤细胞，因此都能够特异性识别S蛋白上的抗原决定簇，检测S蛋白，D正确。 故选AC。 36．（2025·内蒙古包头·二模）某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（能刺激机体产生多种抗体）。为高效检测S蛋白，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体（如下图）。下列叙述正确的是（    ） A．利用纤维素酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞 B．细胞融合后需用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞 C．图中的两种单克隆抗体可能相同，也可能不同 D．图中的两种单克隆抗体都能够特异性识别S蛋白 【答案】BCD 【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、利用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞，A错误； B、在制备单克隆抗体时，用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，B正确； C、由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基，能刺激机体产生多种抗体，每一个抗原决定簇能够刺激机体产生一种抗体，单克隆抗体A和单克隆抗体B均是由蛋白S刺激产生的，因此两种单克隆抗体可能相同，也可能不同，C正确； D、单克隆抗体A和单克隆抗体B都是由通过抗体检测筛选出的杂交瘤细胞产生的，因此都能够特异性识别S蛋白上的抗原，D正确。 故选BCD。 37．（2025·江西新余·二模）2024年《科学》杂志报道，科学家成功研发新型抗体-药物偶联物（ADC）“DS-8201”，该药物由靶向HER2蛋白的单克隆抗体与细胞毒性药物ENH-1通过可裂解连接子偶联而成，用于治疗HER2阳性乳腺癌。下列叙述正确的是（　　） A．制备DS-8201中的单克隆抗体，需将HER2蛋白注入小鼠体内以激活B淋巴细胞 B．体外培养杂交瘤细胞时，需定期更换培养液以清除代谢废物和补充营养物质 C．ENH-1能够特异性识别并杀伤HER2阳性乳腺癌细胞，而对正常细胞无影响 D．该药物在溶酶体中被降解后释放ENH-1，体现了连接子的“可裂解”特性 【答案】ABD 【分析】细胞融合技术制备单克隆抗体的基本方法：用外界抗原刺激动物（如小鼠、兔子等），使其发生免疫反应，使B淋巴细胞产生抗体；利用仙台病毒或聚乙二醇等融合因子进行诱导，使能产生抗体的B淋巴细胞与可以无限传代的骨髓瘤细胞融合；经过筛选，获得既能产生特异性抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞；通过对杂交瘤细胞的克隆培养，获得单克隆抗体。 【详解】A、单克隆抗体的制备需要先用特定抗原（此处为HER2蛋白）免疫小鼠，激活B淋巴细胞产生特异性抗体。这是制备单克隆抗体的第一步，符合杂交瘤技术的基本原理，A正确； B、杂交瘤细胞在体外培养时，需要定期更换培养液以清除细胞代谢废物，同时补充新鲜营养物质，这是动物细胞培养的基本要求，B正确； C、ENH-1是细胞毒性药物，本身不具有特异性识别能力。特异性识别是由单克隆抗体部分实现的。ENH-1只是通过抗体靶向递送到特定细胞后才发挥作用，C错误； D、ADC药物的关键特征之一就是其可裂解连接子，该连接子能在溶酶体中被降解，从而释放细胞毒性药物ENH-1.这是ADC药物的核心作用机制，D正确。 故选ABD。 38．（2025·江苏南通·二模）单倍体胚胎干细胞是指只含一套染色体，但拥有类似于正常干细胞分裂、分化能力的细胞群。利用小鼠建立单倍体胚胎干细胞的操作如下图。下列叙述错误的是（    ）    A．过程①中，用于受精的卵母细胞处于MⅡ B．获得的单倍体胚胎干细胞中，性染色体为X或Y C．该操作涉及体外受精技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术等 D．过程②、③、④透明带和卵细胞膜之间存在1个第一极体和1个第二极体 【答案】BC 【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。 【详解】A、体外受精前需要对精子进行获能处理，需要将卵母细胞培养至减数分裂Ⅱ中期，A正确； B、精子中含有的性染色体为X染色体或Y染色体，卵细胞中含有的性染色体为X染色体，由图可知，在建立单倍体胚胎干细胞过程中，是去除雄原核，所以获得的单倍体干细胞中含有的性染色体是X染色体，而不含Y染色体，B错误； C、由图可知，在培养单倍体胚胎干细胞的过程中，首先发生体外受精，然后通过核移植去除雄原核，再对去除雄原核的细胞进行培养，没有涉及胚胎移植技术，C错误； D、卵母细胞在减数第一次分裂过程中产生第一极体，第一极体不再进行减数第二次分裂，在受精时，次级卵母细胞完成减数第二次分裂，产生第二极体，所以过程②、③、④透明带和卵细胞膜之间存在1个第一极体和1个第二极体，D正确。 故选BC。 39．（2025·辽宁沈阳·二模）抗糖化血红蛋白的单克隆抗体常作为糖尿病诊断试剂。糖化血红蛋白（HbA1c）与牛血清白蛋白（BSA）结合形成偶联物（HbAlc-BSA）后才能激活免疫系统。利用同品系小鼠的骨髓瘤细胞与B细胞制备抗HbAlc的单克隆抗体。下列叙述错误的是（    ） A．向小鼠注射HbA1c-BSA是为了获得同时抗HbA1c和BSA的抗体 B．PEG诱导细胞融合后可通过分析染色体数目来筛选杂交瘤细胞 C．经多次筛选最终得到的杂交瘤细胞既能大量增殖又能分泌所需抗体 D．利用单克隆抗体与HbAlc特异性结合实现糖尿病快速灵敏诊断 【答案】AB 【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、向小鼠注射HbA1c-BSA的目的是激活免疫系统，获得抗HbA1c的抗体，A错误； B、融合的具有同种核的细胞和杂交瘤细胞的染色体数目相同，故需要利用选择培养基来筛选杂交瘤细胞，B错误； C、经过克隆培养与抗体检测，最终得到的杂交瘤细胞既能大量增殖又能分泌所需抗体，C正确； D、利用同品系小鼠的骨髓瘤细胞与B细胞制备抗HbAlc的单克隆抗体，单克隆抗体与HbAlc特异性结合实现糖尿病快速灵敏诊断，D正确。 故选AB。 40．（2025·山东临沂·二模）PSMA是某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。将两株不同杂交瘤细胞融合形成的双杂交瘤细胞，既能够悬浮在培养基中生长繁殖，又可以产生双特异性抗体PSMA×CD28。PSMA×CD28既能选择性地靶向结合某种癌细胞表面的PSMA蛋白，又能特异性地结合T细胞表面的CD28蛋白，从而激活T细胞，通过活化的T细胞来识别和杀灭目标癌细胞。图1所示为双特异性抗体PSMA×CD28的制备流程，图2所示为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理。下列分析正确的是（    ） A．①过程需给小鼠分别注射PSMA蛋白、CD28蛋白，才能最终得到图2中有效激活T细胞和杀伤癌细胞的双特异性抗体PSMA×CD28 B．图1至少进行3次抗原检测进行筛选才能得到双杂交瘤细胞XY，最后一次筛选需在96孔板的孔洞中同时加入PSMA和CD28蛋白 C．对⑤过程得到的双杂交瘤细胞进行传代培养前，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 D．获得的杂交瘤细胞XY要置于含有95%空气和5%混合气体的培养箱中进行培养 【答案】AD 【分析】单克隆抗体的制备过程：①用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。 ②用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。③对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。④将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。⑤从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、双特异性抗体既能选择性地靶向结合某种癌细胞表面的PSMA蛋白，又能特异性地结合T细胞表面的CD28蛋白，所以双特异性抗体生产过程中，应先将癌细胞表面的PSMA蛋白和T细胞表面的CD28蛋白作为抗原注射到小鼠体内，使小鼠产生免疫反应，才能最终得到图2中有效激活T细胞和杀伤癌细胞的双特异性抗体PSMA×CD28，A正确； B、筛选双特异性抗体时需要使用制备单克隆抗体时所使用的图2中抗原物质，该过程需要先用一种抗原（如PSMA）筛选出能够分泌抗PSMA抗体的杂交瘤细胞，再用另一种抗原（如CD28）从已筛选出的杂交瘤细胞中筛选出能分泌抗CD28抗体的杂交瘤细胞，所以筛选获得双特异性抗体时至少需要进行过2次抗原检测，B错误； C、⑤过程得到的双杂交瘤细胞能悬浮在培养基中生长繁殖，不需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，只有贴壁生长的细胞进行传代培养前才需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，C错误； D、动物细胞培养时，通常将细胞置于含有95%空气和5% CO2 混合气体的CO2培养箱中进行培养，95% 空气提供细胞代谢所需的氧气，5%CO2可以维持培养液的 pH，所以获得的杂交瘤细胞XY要置于含有95%空气和5% CO2 混合气体的 CO2 培养箱中进行培养，D正确。 故选AD。 三、解答题 41．（2025·河南许昌·二模）动物器官移植到人体内（异种移植）或是解决全球器官紧缺的办法之一、研究团队对猪肾内皮细胞进行基因编辑、改造后，得到了3种工程细胞和可提供异种移植肾源的供体猪。具体流程及部分测量数据如图示。 (1)研究证实供体猪的3个聚糖抗原基因（3KO）会导致人类、猴等受体的组织不相容。若以未经改造的猪肾作为异体肾源进行器官移植，受体动物的 细胞和抗体都有可能对供体器官产生特异性攻击效应，导致出现 现象。利用CRISPR—Cas9编辑技术敲除肾内皮细胞的3KO，该技术需人工设计一种“向导”RNA，其部分序列与3KO遵循 原则结合，并引导Cas9蛋白断裂DNA双链，从而敲除3KO。 (2)研究表明7个人类基因（7TG）可增加不同物种之间的兼容性。获取7TG的方法有 （答出一种即可）。 (3)为验证敲除3KO、插入7TG对异体细胞的保护作用，研究者将三组细胞与受体猴血清共孵育，置于CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是 。测量裂解细胞数如图示。据此得出结论 。 (4)供体猪器官常携带多种病毒，其中部分病毒潜在人畜传播风险。例如已有实验证明PERV（猪内源性逆转录病毒）可以整合到体外培养的人类细胞基因组中。试分析若给人进行异种移植，PERV的基因可能通过供体猪器官整合到人类基因组的途径 。因此，为确保安全，对已构建好的3KO.7TG.细胞需要进行灭活PERV处理，且在临床试行前须在动物模型中测试。 (5)从3KO.7TG.RI.细胞通过④过程构建供体猪所利用的现代生物学技术有 （至少答出两种）。 【答案】(1) 细胞毒性T 免疫排斥 （碱基）互补配对 (2)从基因文库中获取、PCR技术扩增目的基因、化学方法直接人工合成 (3) 维持培养液的pH 敲除3KO并插入7TG会对异体细胞有更强的保护作用 (4)供体猪器官携带猪内源性逆转录病毒（PERV），PERV接触并侵染人类细胞，在人体细胞内逆转录形成DNA，整合到人类基因组中 (5)动物体细胞核移植、动物细胞培养（或早期胚胎培养）、胚胎移植 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】（1）免疫排斥反应主要与细胞免疫中的细胞毒性T细胞有关，故若以未经改造的猪肾作为异体肾源进行器官移植，受体动物的细胞毒性T细胞和抗体都有可能对供体器官产生特异性攻击效应，导致出现免疫排斥反应；利用CRISPR-Cas9编辑技术敲除肾内皮细胞的3KO，该技术需人工设计一种“向导”RNA，其部分序列与3KO遵循碱基互补配对原则。 （2）7TG属于目的基因，获取目的基因的方法有：从基因文库中获取、PCR技术扩增目的基因、化学方法直接人工合成等方法。 （3）动物细胞培养时二氧化碳的作用是维持培养液的pH；结合图示可知，与猪肾内皮处理组相比，敲除3KO并插入7TG最少，说明敲除3KO并插入7TG会对异体细胞有更强的保护作用。 （4）分析题意，PERV的基因可能通过供体猪器官整合到人类基因组的途径是：供体猪器官携带猪内源性逆转录病毒（PERV），PERV接触并侵染人类细胞，在人体细胞内逆转录形成DNA，整合到人类基因组中。 （5）从从3KO.7TG.RI.细胞通过④过程构建供体猪需要对培养动物细胞到早期胚胎阶段，还涉及体细胞核移植的过程，故所利用的现代生物学技术有：动物体细胞核移植、动物细胞培养（或早期胚胎培养）、胚胎移植。 42．（2025·山西临汾·二模）H1N1病毒是甲型流感病毒的一种，也是人类最常感染的流感病毒之一，该病毒危害性很大，可利用细胞工程生产H1N1病毒抗体用于检测和治疗，生产流程图如下。请回答下列有关问题。 (1)图中X细胞和Y细胞分别代表 和 。 (2)经过①②过程获得的肝细胞与神经细胞的核基因 (填“相同”或“不相同”)，mRNA (填“相同”或“不相同”)。 (3)③过程先用选择培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，再将其接种到96孔板上进行培养和 检测，经过多次筛选后选择出 。在96孔板的每个孔中尽量只接种1个细胞，原因是 。 (4)已知H1N1病毒表面同一抗原的不同位点可分别与抗体1和抗体2发生特异性结合。现将制备好的H1N1抗体1和H1N1抗体2用于检测患者是否感染H1N1，原理如下图，其中待测液体加到A处样本垫，B处含有过量游离的结合胶体金的抗体1，C处的垫子上固定有抗体2，D处垫子上固定有与抗体1特异性结合的抗体。将待测液体加到A处，一段时间后，若 处会变为红色(填图中字母)，则说明受检个体感染H1N1。 注：胶体金与抗体1结合后可显红色胶体金和抗原与抗体1的结合位点不同，且不固定在垫子上。 【答案】(1) 骨髓瘤细胞 (已免疫的)B淋巴细胞 (2) 相同 不相同 (3) 抗体 能分泌抗H1N1病毒抗体的杂交瘤细胞 确保每个孔中的子细胞都来源于同一个亲本细胞，便于筛选出能分泌抗H1N1病毒抗体的杂交瘤细胞 (4)C和D 【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。 【详解】（1）图中X细胞为骨髓瘤细胞，Y细胞为已免疫的B淋巴细胞，因此Z细胞为能产生特定抗体的杂交瘤细胞，对该细胞进行体外或体内培养可获得大量的抗体。 （2）经过①②过程获得的肝细胞与神经细胞的核基因“相同”，因为它们都是由诱导干细胞经过有丝分裂、分化形成的，但由于基因的选择性表达，因此两种细胞中mRNA不相同。 （3）③过程先用选择培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，再将其接种到96孔板上进行培养和抗原-抗体检测，经过多次筛选后选择出能分泌抗H1N1病毒抗体的杂交瘤细胞，该操作过程中用到了抗原-抗体特异性结合的原理实现。在96孔板的每个孔中尽量只接种1个细胞，这样可以确保每个孔中的子细胞都来源于同一个亲本细胞，便于筛选出能分泌抗H1N1病毒抗体的杂交瘤细胞，进而获得由单一杂交瘤细胞克隆出的细胞群分泌的抗体。 （4）已知H1N1病毒表面同一抗原的不同位点可分别与抗体1和抗体2发生特异性结合。现将制备好的H1N1抗体1和H1N1抗体2用于检测患者是否感染H1N1，原理如下图，其中待测液体加到A处样本垫，B处含有过量游离的结合胶体金的抗体1，C处的垫子上固定有抗体2，D处垫子上固定有与抗体1特异性结合的抗体。将待测液体加到A处，若待测液体中含有H1N1，则其带有的抗原会与B处的游离的结合胶体金的抗体1结合，并向左移动，由于C处有抗体2，因而病毒抗原在该处会与抗体2结合并显色，多余的抗体1继续向左移动，会与固定在D处的抗体1特异性结合的抗体结合进而显色，据此可推测，若C处和D处会变为红色，则说明受检个体感染H1N1。 43．（2025·四川宜宾·二模）白藜芦醇属于多酚类化合物，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等功能。科研人员尝试利用植物细胞工程技术规模化生产白藜芦醇，并结合免疫检测技术开发快速检测方法。回答下列问题。 (1)白藜芦醇可由虎杖代谢产生，但并非是虎杖生长和生存所必需的，白藜芦醇是虎杖的 （填“初生代谢物”或“次生代谢物”）。 (2)取虎杖无菌幼苗的茎尖作为外植体，切成小段后接种于培养基中，诱导其 ，即失去其 ，进而形成愈伤组织，愈伤组织的特点是 ，将愈伤组织进行悬浮培养，诱导产生白藜芦醇。 (3)白藜芦醇直接免疫机体不能产生抗体，可将其与牛血清蛋白偶联，进而诱导机体产生抗体。科研人员利用细胞工程技术制备抗白藜芦醇单克隆抗体的基本流程如图所示： 抗原X为 ，细胞A具有的特点是 ，过程③需要对细胞A进行 ，经过多次筛选，就可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，体外培养所需细胞时，需要定期更换培养液，目的是 。 【答案】(1)次生代谢物 (2) 脱分化 特有的结构与功能 高度液泡化、不定形的薄壁组织团块 (3) 白藜芦醇——牛血清蛋白偶联物 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 克隆化培养与抗体检测 清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对所培养的细胞自身造成危害 【分析】制备单克隆抗体的过程，首先要通过融合获得杂交瘤细胞，后需要两次对细胞进行筛选：第一次是在特定的选择性培养基上，将杂交瘤细胞筛选出来；由于筛选出的杂交瘤细胞有很多种，因此第二次筛选的目的是通过专一抗体检测阳性和克隆化培养，从很多种杂交瘤细胞中将既能大量增殖、又能产生抗紫杉醇的抗体的杂交瘤细胞筛选出来。 最终筛选出来的杂交瘤细胞，可以将其注射到小鼠腹腔内进行体内培养，也可以在体外培养液中进行大规模培养。单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点。 【详解】（1）次生代谢物是植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，已知白藜芦醇并非是虎杖生长和生存所必需的，所以白藜芦醇是虎杖的次生代谢物。 （2）取植物的外植体接种于培养基中，诱导其脱分化，脱分化是指已分化的细胞失去其特有的结构和功能，转变为未分化细胞的过程，即失去其特有的结构和功能，进而形成愈伤组织，愈伤组织的特点是高度液泡化、不定形的薄壁组织团块。 （3）要制备抗白藜芦醇单克隆抗体，抗原X为白藜芦醇-牛血清蛋白偶联物，因为白藜芦醇直接免疫机体不能产生抗体，与牛血清蛋白偶联后作为抗原。细胞A是杂交瘤细胞，具有既能迅速大量增殖，又能产生抗体的特点，过程③需要对细胞A进行克隆化培养和抗体检测，以筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，体外培养所需细胞时，需要定期更换培养液，目的是清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对所培养的细胞自身造成危害。 44．（2025·北京朝阳·二模）哺乳动物的脂肪组织包含白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）。研究者研究了BAT对癌细胞的影响。 (1)糖酵解是癌细胞获得能量的重要途径。糖酵解是有氧呼吸的第一阶段，该途径将葡萄糖分解为 ，同时产生H+，H+被转运到胞外，引起细胞外酸化。 (2)细胞外酸化速率（ECAR）反映细胞糖酵解能力。检测体外培养的乳腺癌细胞的ECAR，结果如图1。 ①加入寡霉素后，ECAR继续上升的原因是细胞有氧呼吸受抑制， ，糖酵解加快。 ②加入葡萄糖和寡霉素后，ECAR值的变化均来源于糖酵解的速率变化而非其它产H+途径的变化，证据是 。 (3)BAT在成年动物体内量很少。研究者向WAT中导入特定基因表达载体，使其转化为BAT，利用图2所示装置共培养BAT和乳腺癌细胞3天后，分离癌细胞，测定其数量和糖酵解能力。 ①与直接将两种细胞混合培养相比，图2装置可排除BAT细胞通过 影响癌细胞的可能。 ②该实验设两组对照，对照组1为癌细胞单独培养，对照组2为 。 (4)实验结果显示，两个对照组间无显著差异，而实验组与对照组差异显著，表明BAT对癌细胞的增殖和糖酵解能力有抑制作用。请在ECAR检测结果图中补充绘制实验组曲线。 【答案】(1)丙酮酸、[H] (2) 细胞依赖无氧呼吸产生ATP以保证能量供应 加入2-脱氧葡萄糖后，ECAR值降至初始水平 (3) 直接接触 癌细胞与导入空载体的WAT用图2装置共培养 (4) 【分析】有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和[H]，合成少量ATP；第三阶段是氧气和[H]反应生成水，合成大量ATP。 【详解】（1）有氧呼吸的第一阶段是将葡萄糖分解为丙酮酸、[H]，同时产生H+，H+被转运到胞外，引起细胞外酸化。 （2）①分析题意可知，寡霉素可抑制线粒体中ATP中合成酶的功能，而线粒体是有氧呼吸的主要场所内，故加入寡霉素后，能够抑制有氧呼吸，ECAR继续上升的原因是细胞有氧呼吸受抑制，细胞依赖无氧呼吸产生ATP以保证能量供应，糖酵解加快。 ②葡萄糖是糖酵解的直接底物，寡霉素抑制有氧呼吸后，细胞只能依赖糖酵解产生能量，因此，ECAR的变化直接反映了糖酵解速率的变化，排除了其他产H+途径的干扰，即加入2-脱氧葡萄糖后，ECAR值降至初始水平，说明ECAR值的变化均来源于糖酵解的速率变化而非其它产H+途径的变化。 （3）①图2所示的装置通过物理隔离的方式，使得BAT细胞和乳腺癌细胞无法直接接触，从而排除了BAT细胞通过直接接触影响癌细胞的可能性。 ②对照组1是癌细胞单独培养，用于观察癌细胞在无其他细胞影响下的生长和代谢情况，对照组2是癌细胞与导入空载体的WAT用图2装置共培养，用于观察WAT细胞对癌细胞的影响，从而与BAT细胞的影响进行对比。 （4）根据实验结果，BAT对癌细胞的增殖和糖酵解能力有抑制作用，因此在ECAR检测结果图中，实验组的曲线应低于对照组1和对照组2的曲线，表明BAT的存在降低了癌细胞的糖酵解速率，可绘制图形如下： 胚胎工程考点03 一、单选题 1．（2025·河北石家庄·二模）我国研究人员经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴。下列相关叙述正确的是（　　） A．体细胞核移植需用取自新鲜卵巢的卵母细胞直接做受体细胞 B．常用Ca2+载体或聚乙二醇激活重构胚，使其完成分裂和发育进程 C．需将重组细胞体外培养至早期囊胚再进行胚胎移植 D．胚胎移植前需要对供体猴与受体猴进行同期发情处理 【答案】C 【分析】体细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 【详解】A、取自卵巢的卵母细胞需要培养到MⅡ期时，才可进行核移植，A错误； B、常用Ca2+载体或乙醇激活重构胚，B错误； C、胚胎移植的胚胎应是具有全能性的胚胎，因此需要将重组细胞体外培养至早期囊胚再进行胚胎移植，C正确； D、体细胞核移植技术中，通常不需要对供体进行同期发处理，D错误。 故选C。 2．（2025·江西萍乡·二模）我国科学家从食蟹猴体内分离出胚胎干细胞，将其注射到猪胚胎中，得到的嵌合胚胎再移植到代孕母猪体内，培育出了“猪 - 猴嵌合体”仔猪，过程如下图。下列说法错误的是（    ） A．胚胎干细胞存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内任何一种类型的细胞的潜能 B．以上过程涉及了动物细胞培养、动物细胞核移植、胚胎分割、胚胎移植等技术 C．若将发育到桑葚胚或囊胚的嵌合胚胎进行均等分割，可能提高胚胎的利用率 D．胚胎移植前对代孕母猪进行同期发情处理，是为了给嵌合胚胎提供适宜的发育环境 【答案】B 【分析】1、动物细胞培养是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。2、胚胎干细胞，（1）来源：哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。（2）特点：具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。 【详解】A、‌胚胎干细胞从囊胚的内细胞团中分离获得，具有发育的全能性，可以分化为成年动物体内的任何一种组织细胞‌，A正确； B、以上过程不涉及动物细胞核移植，B错误； C、若将发育到桑葚胚或囊胚的嵌合胚胎进行均等分割，可以得到更多的胚胎，可能提高胚胎的利用率，C正确； D、同期发情处理通过使用激素制剂人为地控制并调整母猪的发情周期，使其在预定时间内集中发情，从而确保供体和受体母猪的生殖器官处于相同的生理状态‌，D正确。 故选B。 3．（2025·山东青岛·二模）促红细胞生成素(EPO)是一种激素样蛋白质，可促进体内红细胞生成。人类可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物，其过程如图。下列说法正确的是（　　） A．为得到更多的卵母细胞，可在步骤②注射雌激素或孕激素 B．采集的卵母细胞可以直接和精子进行受精 C．可以在转EPO基因仓鼠的任意细胞获得EPO成分 D．培养细胞时需要将其放在95%空气和5%CO2的混合气体 【答案】D 【分析】基因工程技术的基本步骤： 1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； 2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等； 3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样； 4、目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、为获得更多的卵母细胞，通常在步骤②注射促性腺激素，促使雌性个体超数排卵，以得到更多卵母细胞，而不是注射雌激素或孕激素，A错误； B、采集的卵母细胞一般需要培养到减数第二次分裂中期才能与获能的精子进行受精，不能直接和精子进行受精，B错误； C、转EPO基因仓鼠中，只有能表达EPO基因的细胞才能获得EPO成分，不是任意细胞都可以，如成熟的红细胞（无细胞核及众多细胞器，不能表达相关基因）等就无法获得，C错误； D、动物细胞培养时需要将其放在95%空气（提供细胞呼吸所需氧气）和5% CO2（维持培养液的pH）的混合气体环境中，D正确。 故选D。 4．（2025·江西上饶·二模）我国研究人员率先利用某组蛋白去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，通过调控重构胚相关基因表达，解决了体细胞克隆猴胚胎发育率低这一技术难点，培育出了第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 B．②过程去核实际上是去掉卵母细胞纺锤体—染色体复合物 C．使用合成培养基培养融合细胞时，需要额外再添加一些营养物质 D．Kd4d的mRNA能降低组蛋白甲基化水平，提高克隆猴胚胎发育率 【答案】D 【分析】卵母细胞的细胞质中含有一些能够促进细胞核全能性表达的物质，②过程是去除卵母细胞的细胞核，目的是为供体细胞的核提供一个去核的卵母细胞环境，保证细胞核全能性能够顺利表达，而细胞质中也存在有遗传物质DNA，因此克隆动物的遗传物质来自核供体和卵母细胞供体。 【详解】A、胚胎细胞分化程度低，全能性相对较高，而体细胞分化程度高，恢复全能性更困难，因此动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植，A正确； B、核移植使用的卵母细胞处于减数分裂Ⅱ中期，此时细胞核无核膜、核仁，“核”实际上是纺锤体—染色体复合物，B正确； C、由于人们对细胞所需的营养物质尚未研究清楚，培养动物细胞使用的培养基通常需要添加天然营养物质血清等，C正确； D、基因通过控制蛋白质的合成来调控生命活动，根据题干信息可知，Kd4d的mRNA能够合成某组蛋白去甲基化酶，在该酶的作用下，能降低组蛋白甲基化水平，调控重构胚相关基因表达，从而提高克隆猴胚胎发育率，并不是Kd4d的mRNA能降低组蛋白甲基化水平，D错误。 故选D。 5．（2025·天津·二模）一种能实现“线粒体置换”目的的技术原理如图所示，该技术可预防人类线粒体遗传病传给子代。下列叙述正确的是（    ） A．供体次级卵母细胞中含有46个DNA分子 B．图中重组次级卵母细胞中含有两条X染色体 C．重组次级卵母细胞膜外极体的遗传物质与患者相同 D．患者第一极体基本不携带线粒体遗传病的致病基因 【答案】D 【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、受精作用。分析题图：取患者（有线粒体遗传病）的卵母细胞，获取第一极体，供卵的卵母细胞，去除其纺锤体和极体，保留其细胞质，然后诱导患者第一极体和供卵者的细胞质融合，形成原核的同时排出第二极体，然后，进行有丝分裂。 【详解】A、供体次级卵母细胞中含的DNA分子大于46条，因为线粒体中也含DNA，A错误; B、图中显示的重组次级卵母细胞是处于减数第二次分裂中期的细胞，故此时重组的次级卵母细胞只含1条X染色体，B错误; C、重组次级卵母细胞是由第一极体和去核的卵母细胞形成的，其细胞膜外极体的遗传物质来自供体，与患者不同，C错误； D、第一极体是卵原细胞经过减数第一次分裂产生的，线粒体存在于细胞质中，减数第一次分裂主要是同源染色体分离，第一极体基本不含细胞质，也就基本不携带线粒体遗传病的致病基因，D正确。 故选D。 6．（2025·河北唐山·二模）下列有关细胞工程技术的说法，错误的是（　　） A．可以采用显微操作法去除卵母细胞的细胞核 B．体外培养干细胞时加入血清以补充某些营养物质 C．制备单克隆抗体时，经选择培养基筛选即可得到杂交瘤细胞 D．当胚胎处于囊胚阶段时，应取内细胞团细胞做DNA分析，鉴定性别 【答案】D 【分析】选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。 【详解】A、经常通过显微操作法去除MII期卵母细胞的细胞核，A正确； B、动物细胞培养的过程中，营养物质包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，但由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此还需要加入血清等成分以补充某些营养物质，B正确； C、制备单克隆抗体时，由于细胞融合是随机的，故可能得到多种类型的杂交细胞，如可能得到B细胞-B细胞型、骨髓瘤-骨髓瘤细胞型、B细胞-骨髓瘤细胞型；因此需要用选择培养基抑制B细胞-B细胞型、骨髓瘤-骨髓瘤细胞型的细胞生长，筛选出B细胞-骨髓瘤细胞型的杂交瘤细胞，C正确； D、内细胞团发育为胎儿的各种组织，滋养层发育为胎盘和胎膜，因此当胚胎处于囊胚阶段时，应取滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别，D错误。 故选D。 7．（2025·山东泰安·二模）由PRRSV病毒引发的传染病—“猪繁殖与呼吸综合征”俗称猪蓝耳病，是对猪最具经济破坏性的疾病。科学家通过以下流程培育能自动产生PRRSV抗体的转基因克隆猪，进而对该病进行诊断和治疗。下列说法正确的是（    ）    A．获得D猪的基础技术是动物体细胞核移植技术 B．步骤①通常采用离心法使两细胞融合 C．步骤②中可采用Ca2+载体激活重构胚 D．步骤③中涉及的主要是胚胎早期培养技术 【答案】C 【分析】据图分析，图示核移植技术培育转基因克隆猪培育过程涉及的技术手段有基因工程技术、核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等，利用转基因技术将病毒外壳蛋白基因(目的基因)导入B猪的体细胞核中，然后将B猪的体细胞核移植到A猪的去核卵母细胞中，再将重组细胞培养到一定阶段并移植到C猪的子宫中去，最后分娩产生了D转基因克隆猪。 【详解】A、分析可知，获得D猪设计去核卵母细胞与含有目的基因的细胞的融合，基础技术是动物细胞培养技术，A错误； B、步骤①通常通过电融合法使两细胞融合，B错误； C、通常用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C正确； D、步骤③表示将早期胚胎移植给C猪，其技术手段为胚胎移植，D错误。 故选C。 8．（2025·广东广州·二模）研究发现，将牛的重构胚的染色体组蛋白上特定位点的甲基化去除，可提高重构胚的发育率和牛体细胞核移植的成功率。下列说法错误的是（    ） A．可将供体细胞注入去核卵母细胞中形成牛的重构胚 B．向重构胚注入去甲基化酶的mRNA可能有助于胚胎正常发育 C．应将重构胚培养至囊胚或原肠胚后移植入受体母牛子宫 D．推测表观遗传现象是制约体细胞核移植成功的原因之一 【答案】C 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、将供体细胞注入到去核卵母细胞中可形成牛的重构胚，A正确； B、向重构胚注入去甲基化酶的mRNA，该mRNA可翻译形成去甲基化酶将牛的重构胚的染色体组蛋白上特定位点的甲基化去除，从而有助于胚胎正常发育，B正确； C、应将重构胚培养至囊胚后移植入受体母牛子宫，原肠胚不能再进行胚胎移植，C错误； D、染色体组蛋白上特定位点的甲基化去除，可提高重构胚的发育率和牛体细胞核移植的成功率，组蛋白的去甲基化是一种表观遗传，因此推测表观遗传现象是制约体细胞核移植成功的原因之一，D正确。 故选C。 9．（2025·安徽淮南·二模）我国科学家综合利用多种现代生物技术，首次在猪胚胎内培育出主要由人体细胞构成的“人—猪嵌合中期肾”，且维持到胚胎第28天（过程如图所示）。已知胚胎在未分化前细胞间相互连接比较松散，可塑性强。过程①采用了CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除掉与猪肾脏发育密切相关的关键基因SLX1。下列相关叙述正确的是（    ）    A．采用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除基因SLX1，可促进人源化肾脏的发育 B．过程③中选择猪的桑葚胚或原肠胚等早期胚胎导入iPS细胞成功率更高 C．动物细胞应放入含5%CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 D．利用胚胎分割技术增加人源化中肾数量的过程属于有性生殖 【答案】A 【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、题干中提到采用CRISPR - Cas9基因编辑技术敲除与猪肾脏发育密切相关的关键基因SLX1。 因为要在猪胚胎内培育主要由人体细胞构成的“人 - 猪嵌合中期肾”，敲除猪自身与肾脏发育相关基因后，减少了猪自身基因对肾脏发育的影响，有利于人源化肾脏的发育，A正确； B、胚胎在未分化前相互连接比较松散，可塑性强，所以过程③中选择猪的桑葚胚导入iPS成功率更高，B错误； C、动物细胞应放入含5%CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是维持pH的相对稳定，C错误； D、利用胚胎分割技术增加人源化中肾数量的过程属于无性生殖，D错误。 故选A。 10．（2025·内蒙古包头·二模）胚胎工程技术可以用于品质优良奶牛的扩大繁殖。下列叙述错误的是（    ） A．采集的新鲜精子经获能处理后可用于体外受精 B．受精卵发育成桑葚胚或囊胚时可用于胚胎分割 C．同一胚胎经分割产生的后代具有不同的遗传物质 D．外源促性腺激素处理供体母牛可诱发超数排卵 【答案】C 【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术；受精作用是指在生物体的有性生殖过程中，精子和卵细胞通常要融合在一起，才能发育成新个体；体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养（需要培养到MII中期）、精子的采集和获能、受精；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种。 【详解】A、在体外受精时，采集的新鲜精子必须要经过获能处理，才能具备受精能力，从而用于体外受精，A正确； B、受精卵发育到桑葚胚或囊胚阶段时，细胞具有较高的全能性，此时可进行胚胎分割，B正确； C、同一胚胎经分割产生的后代，它们来自同一个受精卵，遗传物质是相同的，而不是具有不同的遗传物质，C错误； D、给供体母牛注射外源促性腺激素，可以促使其超数排卵，获得更多的卵子，D正确。 故选C。 11．（2025·山西太原·二模）在生物工程的许多技术中，“检查”“筛选”等操作步骤至关重要。下列有关叙述错误的是（    ） A．卵母细胞在进行体外受精前，需要检查其是否发育到MⅡ期 B．制备单克隆抗体时，用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 C．培育克隆动物时，在胚胎移植后需对代孕母体进行妊娠检查 D．筛选雌性胚胎时，需取囊胚期的内细胞团细胞做DNA分析 【答案】D 【分析】1、单克隆抗体的制备用到了动物细胞培养和动物细胞融合等技术。 2、哺乳动物的体外受精技术主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。 3、胚胎移植主要包括供体、受体的选择和处理，配种或人工授精，胚胎的采集、检查、培养或保存，胚胎的移植，以及移植后的检查等步骤。 4、取囊胚的滋养层进行DNA分析，鉴定性别。 【详解】A、MⅡ期的卵母细胞才具备与精子受精的能力，所以卵母细胞在进行体外受精前，需要检查其是否发育到MⅡ期，A正确； B、制备单克隆抗体时，在培养基上有未融合的亲本细胞、融合的具有同种核的细胞以及杂交瘤细胞，所以需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞，B正确； C、培育克隆动物时，在胚胎移植后需对代孕母体进行妊娠检查，以便了解胚胎的发育情况，C正确； D、筛选雌性胚胎时，需取囊胚期的滋养层细胞做DNA分析，D错误。 故选D。 12．（2025·云南红河·二模）大熊猫是中国特有的珍稀濒危动物，目前野生大熊猫大约有2000只。2024年，我国研究团队首创了大熊猫iPS细胞重编程方法，即把从大熊猫身上提取的普通皮肤细胞（皮肤成纤维细胞）重编程为干细胞，大致流程如图。据图分析，下列说法正确的是（    ） A．该研究中把外源性核酸导入体细胞的方法是显微注射法 B．体外培养大熊猫iPS细胞时要求无菌无毒且需要N2和O2 C．大熊猫的成纤维细胞和成熟红细胞理论上均可重编程为iPS细胞 D．大熊猫iPS细胞被诱导为其他细胞类型的过程②属于细胞的再分化 【答案】D 【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。） 【详解】A、据图可知，该研究中把外源性核酸导入质粒的方法是电穿孔法，iPS细胞重编程通常使用病毒载体（如逆转录病毒或慢病毒）或化学方法（如小分子化合物）来导入外源性核酸，而不是显微注射法，A错误； B、体外培养大熊猫iPS细胞时要求无菌无毒的环境，但气体条件是95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH），B错误； C、大熊猫成熟红细胞无细胞核和任何细胞器，理论上不能重编程为iPS细胞，C错误； D、大熊猫iPS细胞被诱导为其他细胞类型的过程②属于细胞的再分化，iPS细胞被诱导为其他细胞类型的过程属于细胞的再分化，D正确。 故选D。 13．（2025·四川达州·二模）我国科学家成功利用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（　　） A．过程①的小分子化合物诱导成纤维细胞突变为iPS细胞 B．过程②的实质是通过显微操作去除核膜包被的细胞核 C．Kdm4d的mRNA和TSA能激活重构胚，使其完成发育进程 D．当重构胚发育到原肠胚时进行胚胎移植可增大移植成功率 【答案】C 【分析】核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。 【详解】A、iPS细胞是通过重编程技术将成纤维细胞转化为多能干细胞，而不是通过突变，A错误； B、过程②的实质是通过显微操作去除纺锤体-染色体复合物，B错误； C、Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，两者共同作用有助于重构胚的表观遗传重编程，从而完成后续发育，C正确； D、哺乳动物克隆通常在桑葚胚或囊胚期移植，原肠胚期移植不利于成功率的提高，D错误。 故选C。 14．（2025·辽宁沈阳·二模）利用动物体细胞核移植技术促进优良畜群繁育。下列叙述错误的是（    ） A．采用紫外线短时照射卵母细胞可达到“去核”的效果 B．供体细胞需来自遗传性状优良的个体 C．利用Ca2+载体或电刺激可激活重构胚 D．最好选择原肠胚进行分割来提高胚胎利用率 【答案】D 【分析】细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 【详解】A、紫外线能破坏细胞结构，对卵母细胞进行短时间照射，可破坏其细胞核，从而达到“去核”的效果，A正确； B、体细胞核移植是将供体细胞的细胞核移入去核卵母细胞中，培育出与供体遗传性状相似的个体。为了获得优良畜群，供体细胞需来自遗传性状优良的个体，这样才能将优良性状传递下去，B正确； C、在体细胞核移植过程中，重组细胞需要被激活才能开始分裂和发育。利用Ca²⁺载体或电刺激等方法可以激活重构胚，使其进行正常的细胞分裂和胚胎发育过程，C正确； D、桑葚胚或囊胚细胞具有较高的全能性，进行胚胎分割时，选择桑葚胚或囊胚可提高胚胎利用率；而原肠胚细胞已经出现了明显的分化，全能性降低，不适合进行分割来提高胚胎利用率，D错误。 故选D。 15．（2025·浙江金华·二模）2011年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛，其乳汁中含有较高含量的赖氨酸。其基本流程为：构建乳腺专一表达载体→表达载体导入牛胚胎成纤维细胞（BEF）→核移植→重组细胞的体外培养及胚胎移植→检测。下列叙述错误的是（　　） A．表达载体导入的牛胚胎成纤维细胞（BEF）为供体细胞 B．需将重组细胞体外培养至桑椹胚或囊胚再进行胚胎移植 C．高产赖氨酸转基因克隆奶牛的性别与胚胎受体母牛无关 D．检测时可选取克隆奶牛牛耳组织细胞检测目的基因的表达情况 【答案】D 【分析】基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。为了实现基因工程的目标，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作，它包括目的基因的获得、重组DNA的形成，重组DNA导入受体细胞也称（宿主）细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。 【详解】A、根据题意可知，表达载体导入的牛胚胎成纤维细胞（BEF）在核移植过程中提供细胞核，因此为供体细胞，A正确； B、胚胎移植时需将重组细胞体外培养至桑椹胚或囊胚再进行胚胎移植，B正确； C、胚胎受体母牛只负责孕育个体，不影响克隆牛的遗传物质，因此高产赖氨酸转基因克隆奶牛的性别与胚胎受体母牛无关，该克隆牛的性别由提供细胞核的个体的性别决定，C正确； D、由于导入的基因只在乳腺细胞内表达，因此检测目的基因的表达情况不能选用克隆奶牛牛耳组织细胞，D错误。 故选D。 16．（2025·福建·二模）我国科学家通过诱导转录因子过表达抑制DNA复制，将小鼠成纤维细胞培养成单倍体滋养层干细胞，这些干细胞可无限增殖且具有分化能力。下列叙述错误的是（    ） A．成纤维细胞转化成单倍体滋养层干细胞的原理是染色体变异 B．单倍体滋养层干细胞可被诱导分化为胚胎的上皮组织 C．培养单倍体干细胞有助于发现某些未知的隐性突变基因 D．该成果可为基因筛查及遗传病机制的研究提供模型 【答案】B 【分析】科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。 【详解】A、成纤维细胞转化成单倍体滋养层干细胞染色体数目减少，原理是染色体变异，A正确； B、单倍体滋养层干细胞中染色体减少一半，不能被诱导分化为胚胎的上皮组织，B错误； CD、培养单倍体干细胞隐性基因会表现相应性状，有助于发现某些未知的隐性突变基因，也可为基因筛查及遗传病机制的研究提供模型，CD正确。 故选B。 17．（2025·河南新乡·二模）科学家通过培育小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞，成功获得了“1母亲0父亲”的雌性小鼠，且该雌性小鼠能正常生殖产生后代，有关技术如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A．用雌激素对母鼠进行超数排卵处理可以获得更多的卵母细胞 B．图中过程①②的分裂方式分别为减数分裂和有丝分裂 C．用于过程③的细胞取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团 D．第2阶段的卵子为次级卵母细胞，过程④为减数分裂Ⅱ的部分过程 【答案】A 【分析】分析题图：第1阶段，未减数分裂的卵母细胞经相关酶处理并刺激其进行过程①所示的减数分裂形成卵细胞，体外培养的卵细胞进行过程②所示的有丝分裂和细胞分化形成孤雌单倍体囊胚，从该囊胚中取内细胞团通过过程③体外构建孤雌单倍体胚胎干细胞。第2阶段，孤雌单倍体胚胎干细胞入卵后，形成雄原核的同时，卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体，形成雌原核，第2阶段原核形成的图中有两个极体、雌原核和雄原核，说明卵母细胞已完成了减数分裂。 【详解】A、超数排卵是指应用外源的促性腺激素，诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子，因此用促性腺激素对母鼠进行超数排卵处理可以获得更多的卵母细胞，A错误； B、图中过程①分裂的结果形成的是卵细胞，其分裂方式为减数分裂；过程②分裂的结果形成的孤雌单倍体囊胚细胞的染色体数目与卵细胞的相同，其分裂方式为有丝分裂，B正确； C、聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育为胎儿的各种组织，沿透明带内壁扩展和排列的细胞称为滋养层细胞，将来发育为胎膜和胎盘，所以过程③体外构建孤雌单倍体胚胎干细胞时，取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团，C正确； D、图中第2阶段，将孤雌单倍体胚胎干细胞注入卵子的过程相当于体外受精，因此第2阶段的卵子为次级卵母细胞，过程④原核形成的图中有两个极体，说明过程④为减数分裂Ⅱ的部分过程，D正确。 故选A。 18．（2025·河北衡水·二模）中国空间站在国际上首次实现干细胞在太空早期造血。在太空培养的干细胞呈现出优于地面的生长方式，在微重力环境中干细胞的体外培养更接近于胚胎内干细胞的增殖与分化。下列关于干细胞的叙述，不正确的是（　　） A．造血干细胞只能分化为特定的细胞或组织 B．诱导多能干细胞应用前景优于胚胎干细胞，但临床应用会有导致肿瘤发生的危险 C．可以借助载体将特定基因导入已分化的B细胞或成纤维细胞转化而来 D．干细胞的分化会导致细胞形态结构及遗传物质改变 【答案】D 【分析】干细胞的分类：（1）胚胎干细胞：具有形成完整个体的分化潜能。（2）成体干细胞：具有分化出多种细胞组织的潜能，如神经干细胞可分化为各类神经细胞，造血干细胞可分化为红细胞、白细胞等各类血细胞。 【详解】A、造血干细胞具体组织特异性，造血干细胞只能分化为特定的细胞或组织，A正确； B、诱导多能干细胞的诱导过程中无须破坏胚胎，而且诱导多能干细胞可以来源于病人自身的细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，诱导多能干细胞应用前景优于胚胎干细胞，但若分化失控可能导致肿瘤，B正确； C、可以通过载体导入特定基因（如Oct4、Sox2等）可使已分化的B细胞或成纤维细胞重编程为多能干细胞，C正确； D、干细胞的分化实质是基因的选择性表达，不会导致遗传物质改变，D错误。 故选D。 19．（2025·山西临汾·二模）下列有关动物细胞工程及胚胎工程的说法正确的是（　　） A．动物细胞在体外培养时一般有接触抑制现象，而癌细胞体外培养时不出现接触抑制 B．人体内的干细胞包括胚胎干细胞、造血干细胞、诱导多能干细胞等多种类型 C．PEG融合法适用于诱导原生质体融合钙离子载体法适用于诱导动物细胞融合 D．进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应 【答案】A 【分析】由于正常的动物细胞存在接触抑制，因此动物细胞培养过程中会出现细胞贴壁生长、单层生长和分裂次数有限的现象。但癌细胞能无限增殖，不会出现接触抑制，能出现多层生长。 【详解】A、动物细胞在体外培养时一般有接触抑制现象，而癌细胞细胞膜上的糖蛋白减少，细胞间粘连性下降，故癌细胞体外培养时不出现接触抑制，A正确； B、人体内不存在诱导多能干细胞，诱导多能干细胞是体细胞诱导形成的，B错误； C、PEG融合法适用于诱导原生质体和动物细胞融合，钙离子载体法适用于激活重构胚，C错误； D、胚胎工程中，供体和受体一般属于同种生物，一般不发生免疫排斥反应，D错误。 故选A。 20．（2025·黑龙江哈尔滨·二模）猪因其生理特性、器官大小以及胚胎发育过程等方面与人类存在高度相似性，已成为“种植”人类器官极具潜力的动物模型。如图表示我国科学家利用猪作为载体，培育可供人类移植使用的人源肾脏的相关流程示意图。下列相关叙述错误的是（    ） A．推测SIXI和SALLI两种基因是猪肾脏发育必需的基因 B．一般用显微操作去核法获得去核的卵母细胞 C．该实验流程中涉及了体外受精、动物细胞培养、核移植、胚胎移植等生物技术 D．注入人源干细胞的目的是使人源干细胞分裂分化产生人的器官 【答案】C 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。 【详解】A、根据SIXI/SALLI缺陷的早期胚胎发育成肾脏缺陷胚胎可知，这两个基因是猪肾脏发育必需的基因，A正确； B、采集的卵母细胞普遍采用显微操作去核法去除细胞核，B正确； C、该实验流程包括了核移植、体外胚胎培养、胚胎移植等生物技术，但不包括体外受精技术，C错误； D、干细胞具有较强的分裂和分化能力，注入人源干细胞的目的是使人源干细胞分裂分化产生人的器官，以用于器官移植等，D正确。 故选C。 21．（2025·辽宁·二模）在细胞工程中，一种技术手段的实施可能需要另一种技术手段的支持。下列说法错误的是（    ） A．单克隆抗体制备过程离不开动物细胞培养 B．胚胎分割技术能大大提高胚胎移植的成功率 C．核移植后要进行胚胎移植才能获得克隆动物 D．植物体细胞杂交要经历植物组织培养这一阶段 【答案】B 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、动物细胞培养是细胞工程的基础，单克隆抗体制备过程离不开动物细胞培养，A正确； B、胚胎分割时分割次数越多，分割后胚胎成 活的概率越小。目前，仍然以二分胚胎的分割和移植 效率最高，这样的分割成为提高家畜胚胎利用率的手 段之一，B错误； C、胚胎移植是胚胎工程的最后一道工序，核移植后要进行胚胎移植才能获得克隆动物，C正确； D、植物体细胞杂交包括原生质体融合和植物组织培养两个主要阶段，故植物体细胞杂交要经历植物组织培养这一阶段，D正确。 故选B。 22．（2025·河南郑州·二模）青海的科研人员对陶赛特母羊超数排卵处理后，收集卵子使其在体外成熟，同时采集陶赛特公羊的精子并获能处理，在体外环境中完成受精和早期胚胎发育，将胚胎移植到经同期发情处理的藏系母羊子宫中，成功获得了数量可观的陶赛特试管羊。下列相关叙述正确的是（    ） A．排出的卵子已经完成了减数分裂 B．藏系羊和陶赛特羊不存在生殖隔离 C．精子获能是使精子获得受精所需能量 D．陶赛特试管羊比陶赛特杂交羊更优质 【答案】B 【分析】体外受精主要操作步骤： （1）卵母细胞的采集和培养：方法一：对小型动物一般用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。方法二：对大型动物是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精（或从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞）； （2）精子的采集和获能：在体外受精前，要对精子进行获能处理。采集方法：假阴道法、手握法和电刺激法等。获能方法：培养法和化学法； （3）受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 【详解】A、排出的卵子已经完成了减数第一次分裂，减数第二次分裂在受精作用中完成，A错误； B、藏系羊和陶赛特羊不存在生殖隔离，因而可以提高陶赛特试管羊胚胎移植的成功率，B正确； C、精子获能是将精子培养到可以与处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞进行受精的过程，而精子获能量并不是获得能量，C错误； D、陶赛特试管羊和陶赛特杂交羊都是有性生殖的产物，均具有多样性，只不过通过体外受精和胚胎移植后可以获得大量的胚胎，提高了雌性优质动物的繁殖潜力，D错误。 故选B。 23．（2025·河南安阳·二模）中国科学家首次利用嵌合胚胎成功构建了高比例胚胎干细胞的活嵌合体猴，部分过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．不能用某种成体干细胞替代胚胎干细胞 B．嵌合囊胚发育至原肠胚期再进行胚胎移植 C．胚胎干细胞的培养液中应添加一定量的动物血清 D．嵌合体猴的培育为遗传修饰模型猴的构建奠定了基础 【答案】B 【分析】胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。胚胎干细胞，是高度未分化的细胞。如果进行体外培养，能够无限的增殖和分化。胚胎肝细胞还可以分化成多功能的细胞。胚胎干细胞具有多能性，可以分化成多种组织的能力但是无法独自发育成一个个体细胞。 【详解】A、胚胎干细胞具有发育的全能性，而成体干细胞的分化潜能相对较低，具有组织特异性，不能替代胚胎干细胞，A正确； B、胚胎移植时应选桑葚胚或囊胚进行胚胎移植，B错误； C、在使用合成培养基培养胚胎干细胞时，通常需要加入动物血清等一些天然成分，C正确； D、嵌合体猴的培育成功为进一步进行遗传修饰模型猴的构建提供了技术和经验等方面的基础，D正确。 故选B。 24．（2025·内蒙古赤峰·二模）下列关于早期胚胎发育的叙述正确的是（　　） A．精子获能后与卵子结合，卵子一经排出就具各受精能力 B．桑葚胚阶段，在胚胎的内部开始出现含有液体的腔 C．经胚胎移植产生的后代，其遗传特性与受体保持一致 D．进行胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查 【答案】D 【分析】1、雌性动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到MII期时，才具备与获能的精子受精的能力； 2、动物的胚胎发育过程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体； 3、 胚胎移植：指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、卵子排出后一般需要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时才具备受精能力，并非一经排出就具备受精能力，A错误； B、在囊胚阶段，胚胎内部开始出现含有液体的囊胚腔，而不是桑葚胚阶段，B错误； C、经胚胎移植产生的后代，其遗传物质来自供体，与供体保持一致，而不是与受体保持一致，C错误； D、受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，所以进行胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查，D正确。 故选D。 25．（2025·江西九江·二模）下图为我国科学家培育克隆猴“中中”和“华华”的流程图，其中组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）和组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）在基因表达调控中发挥重要功能。科学家高超的操作是成功的关键：可在10秒之内完成去核操作，在15秒之内将体细胞注入去核的卵母细胞中。下列说法错误的是（    ）    A．图中灭活的仙台病毒短暂处理的目的是诱导细胞融合 B．科学家高超的操作技巧可大大减少对卵母细胞的损伤 C．Kdm4d和TSA都有助于重构胚完成相关基因的表达 D．出生的克隆小猴的表型与图中胎猴的表型完全相同 【答案】D 【分析】1、克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2、动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。 【详解】A、灭活的仙台病毒具有促融的作用，因此图中用灭活的仙台病毒短暂处理的作用是诱导细胞融合，A正确； B、科学家高超的操作是成功的关键，可大大减少对卵母细胞的损伤，B正确； C、由题干信息可知，组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）和组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）在基因表达调控中发挥重要功能，因此可推测Kdm4d和TSA都有助于重构胚完成相关基因的表达，C正确； D、克隆小猴的细胞核基因全部来自猴胎，但细胞质基因有一部分来自母猴，因此出生的克隆小猴的表型与图中胎猴的表型不完全相同，D错误。 故选D。 26．（2025·四川广安·二模）科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出克隆鼠，具体流程如图所示。下列相关说法错误的是（    ） A．克隆鼠的遗传物质来自黑鼠，与胚胎供体灰鼠和代孕白鼠无关 B．进行性别鉴定和遗传病筛查常取囊胚内细胞团细胞进行DNA分析 C．可利用特定基因、特定蛋白或者小分子化合物等来诱导形成iPS细胞 D．2细胞胚胎可从灰鼠输卵管内获得，也可体外受精后进行胚胎培养获得 【答案】B 【分析】通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞。 【详解】A、据图可知，来自灰鼠的胚胎供体的内细胞团不发育，ips细胞来自黑鼠，所以克隆鼠的遗传物质来自黑鼠，与胚胎供体灰鼠和代孕白鼠无关，A正确； B、内细胞团细胞和滋养层细胞来自同一受精卵通过有丝分裂产生，而内细胞团细胞会分化形成不同的组织和器官，所以进行性别鉴定和遗传病筛查常取滋养层细胞进行DNA分析，B错误； C、可利用特定基因、特定蛋白或者小分子化合物等相关因子来诱导形成iPS细胞，C正确； D、卵裂的发生发生在输卵管中，所以2细胞胚胎可从灰鼠输卵管内获得，也可体外受精后进行胚胎培养获得，D正确。 故选B。 27．（2025·安徽安庆·二模）异体器官移植是替代器官功能的有效途径。中国科学家综合利用多种现代生物技术，在猪的体内培育出了一个“人—猪嵌合中期肾”，部分流程如下图所示，图中数字表示相关过程。已知胚胎在未分化前相互连接比较松散，可塑性强。下列相关叙述正确的是（    ） A．选择猪的桑葚胚或原肠胚等早期胚胎导入ipsc成功率更高 B．过程②使用蛋白酶合成促进剂激活重构胚发育成早期胚胎 C．利用胚胎分割等有性生殖技术可以增加人源化中肾的数量 D．过程④选择的受体母猪应具有健康的体质和正常繁殖能力 【答案】D 【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、根据题意可知，胚胎在未分化前相互连接比较松散，可塑性强，因此应选择猪的桑葚胚或囊胚等早期胚胎导入ipsc成功率更高，而原肠胚时期的细胞已经发生了分化，A错误； B、可用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B错误； C、胚胎分割属于无性繁殖，C错误； D、过程④是胚胎移植，应选择有健康体质和正常繁殖能力的母猪作为受体，使其完成繁重而漫长的妊娠和育仔任务，D正确。 故选D。 28．（2025·浙江温州·二模）动物细胞培养技术在生物制药、疾病治疗等领域中发挥着重要作用。关于动物细胞培养技术的应用，下列叙述错误的是（    ） A．培养哺乳动物受精卵至原肠胚阶段，用于胚胎移植 B．培养干细胞并诱导分化，用于治疗细胞损伤或病变 C．培养正常细胞并观察药物对其的影响，评估药物的疗效和安全性 D．培养杂交瘤细胞制备单克隆抗体，用于癌症及免疫性疾病的治疗 【答案】A 【分析】动物细胞培养技术的应用：(1)生产有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。(2)基因工程中受体细胞的培养。(3)用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。(4)科学家培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究.如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。 【详解】A、哺乳动物胚胎移植，一般是将培养到桑椹胚或囊胚阶段的胚胎进行移植，而不是培养到原肠胚阶段，因为原肠胚细胞已经出现明显分化，此时进行胚胎移植不利于胚胎的进一步发育和着床，A错误； B、干细胞具有分裂和分化能力，培养干细胞并诱导其分化，可用于治疗因细胞损伤或病变导致的疾病，如用造血干细胞治疗白血病等，B正确； C、通过培养正常细胞，观察药物对这些细胞的影响，能够评估药物的有效性和安全性，这是药物研发过程中的重要环节，C正确； D、杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，培养杂交瘤细胞可制备单克隆抗体，单克隆抗体可用于癌症及免疫相关疾病的诊断、治疗等，D正确。 故选A。 29．（2025·江苏盐城·二模）体外培养发现绝大多数的克隆胚胎在囊胚阶段出现发育阻滞，用Wnt信号通路抑制剂处理后，出生率可大幅提高。下列叙述正确的是（    ） A．胚胎发育早期依次经历卵裂、囊胚和桑葚胚阶段 B．胚胎发育过程中部分细胞凋亡是基因选择性表达的结果 C．Wnt信号通路持续异常激活可促进克隆胚胎发育过程 D．动物克隆需利用动物细胞培养、同期发情和胚胎移植等技术 【答案】B 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、胚胎发育早期依次经历卵裂期、桑葚胚和囊胚阶段，A错误； B、胚胎发育过程中部分细胞凋亡是基因选择性表达的结果，是基因控制的主动死亡的结果，B正确； C、Wnt通路抑制剂处理克隆囊胚后，供体的核移植胚胎出生率可大幅提高，因此Wnt信号通路持续异常激活可阻碍克隆胚胎发育过程，C错误； D、动物克隆需用到动物细胞培养、核移植和胚胎移植等技术，D错误。 故选B。 30．（2025·江苏盐城·二模）体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。 下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（    ） A．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞 B．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂 II ，排出第二极体后形成雌原核 C．“设计试管婴儿 ”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 D．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割 【答案】D 【分析】体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物。 【详解】AB、体内受精时，当精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后卵子完成减数第二次分裂、排出第二极体、形成雌原核，AB正确； C、设计试管婴儿是指体外受精形成的胚胎在植入母体孕育前，根据人们的需要，将胚胎的一个细胞取出，进行某些基因检测， 设计试管婴儿利用了体外受精技术、胚胎移植技术和植入前胚胎遗传学诊断技术，C正确； D、对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行均等分割，不能选择原肠胚，因为原肠胚高度分化，D错误。 故选D。 31．（2025·四川成都·二模）Foxn1基因对于功能性胸腺的形成是必要的，其突变导致无胸腺表型。研究人员将某小鼠的胚胎干细胞注射至Foxn1基因突变的桑葚胚中形成嵌合胚胎，将嵌合胚胎移入受体小鼠的子宫内，成功培育出含有正常胸腺的嵌合体小鼠。下列叙述正确的是（    ） A．导入的胚胎干细胞发育成正常胸腺体现了动物细胞的全能性 B．嵌合胚胎在原肠胚阶段切割后移植可获得更多的嵌合体小鼠 C．植入胚胎前通常需对受体小鼠注射促性腺激素使其超数排卵 D．嵌合体小鼠体内不同部位的体细胞遗传信息不一定是相同的 【答案】D 【分析】胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。胚胎干细胞，是高度未分化的细胞。如果进行体外培养，能够无限的增殖和分化。胚胎肝细胞还可以分化成多功能的细胞。胚胎干细胞具有多能性，可以分化成多种组织的能力但是无法独自发育成一个个体细胞。胚胎里的干细胞被称为一种“全能”细胞，可以分化成所有类型的细胞，并且携带生物体的全套遗传信息。 【详解】A、导入的胚胎干细胞发育成正常胸腺只是发育成了相应的器官，没有发育成完整的个体，不能体现动物细胞的全能性，A错误； B、原肠胚阶段细胞已经分化，所以嵌合原肠胚阶段进行胚胎分割一般不会产生更多的嵌合体猴，B错误； C、嵌合胚胎移植前，需要对代孕母猴注射孕激素，进行同期发情处理，C错误； D、将某小鼠的胚胎干细胞注射至Foxn1基因突变的桑葚胚中形成嵌合胚胎，嵌合胚胎至少由两种遗传信息的细胞组成，因此嵌合体小鼠体内不同部位的体细胞遗传信息不一定是相同的，D正确。 故选D。 32．（2025·吉林长春·二模）通过多种方法获得的早期胚胎，均需经胚胎移植获得后代。下列相关叙述正确的是（　　）    A．胚胎移植前可取内细胞团的细胞进行性别鉴定 B．①试管动物的性状几乎与供体母本性状相同 C．获得动物②的过程属于无性繁殖 D．③过程获得的干扰素常用于治疗细菌感染性疾病 【答案】C 【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。 题图分析，图中过程①是培育试管动物，过程②是克隆技术，属于无性繁殖，过程③是转基因技术获得转基因动物。 【详解】A、胚胎移植前可取滋养层的细胞鉴定性别，避免对内细胞团的发育造成影响，A错误； B、①过程得到的试管动物性状是由提供卵子的供体母本和提供精子的父本共同决定的，B错误； C、过程②是克隆技术，将牛的体细胞核移植到去核卵母细胞中，培育获得克隆动物遗传物质基本与供体牛基本相同，属于无性繁殖，C正确； D、③过程培育转基因动物，从转基因动物的乳汁中可获得干扰素，干扰素常用于治疗病毒感染性疾病，D错误。 故选C。 33．（2025·江苏泰州·二模）精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，用该方法制备转基因鼠的基本流程如图所示。下列叙述正确的有（　　） A．①过程中精子获能后细胞膜的流动性增加 B．②过程采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质都来自父母双方 C．③过程形成的早期胚胎发育到桑葚胚或原肠胚才能进行胚胎移植 D．④过程进行胚胎移植前需要对供体和受体进行超数排卵处理 【答案】A 【分析】分析题图：图示表示培育转基因鼠的基本流程，其中①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，②是体外受精过程，③是早期胚胎培养过程，④是胚胎移植过程。 【详解】A、①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，该过程中获能后的精子运动加速，能够迅速的游向卵子，膜流动性增加，A正确； B、②采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质来自父母双方和外源基因，不都来自父母双方，B错误； C、③过程形成的早期胚胎发育到桑葚胚或囊胚才能进行胚胎移植，C错误； D、④是胚胎移植过程，应选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，进行胚胎移植前需要对供体雌性个体进行超数排卵处理，对受体进行同期发情处理，D错误。 故选A。 二、多选题 34．（2025·江苏南京·二模）利用胚胎工程等技术可以提高奶牛的繁殖能力。如图表示繁殖良种奶牛以及获取胚胎干细胞的流程。下列叙述错误的有（　　） A．获得早期胚胎的途径除体外受精外还有核移植、体内受精和胚胎分割等 B．①过程可产生遗传物质相同的同卵双胎，此过程属于有性繁殖 C．胚胎干细胞培养与早期胚胎培养所用培养液成分相同，且都需加入血清 D．图中②过程涉及胚胎性别鉴定、胚胎移植、妊娠检查等技术 【答案】BC 【分析】胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术；经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。 【详解】A、获得早期胚胎的途径除体外受精外，核移植可得到重组胚胎，体内受精能形成自然胚胎，胚胎分割是对早期胚胎进行分割，这些都可获得早期胚胎，A正确； B、①过程是胚胎分割，分割得到的胚胎来自同一个受精卵，遗传物质相同，可产生同卵双胎。但胚胎分割是无性繁殖技术，因为没有两性生殖细胞的结合，B 错误； C、胚胎干细胞培养与早期胚胎培养所用培养液成分有区别，胚胎干细胞培养一般需加入抑制分化的物质等，二者成分不完全相同，C错误； D、图中②过程将早期囊胚移植到受体母牛子宫内发育成小牛，涉及胚胎性别鉴定（若有需求）、胚胎移植，移植后需进行妊娠检查，D正确。 故选BC。 35．（2025·内蒙古·二模）下图为运用胚胎移植技术培育高产奶牛的过程。在胚胎移植前，工作人员要借助公牛Y染色体上的SRY基因设计引物，构建PCR体系鉴定胚胎性别。下列说法正确的是（　　） A．需对普通黄牛与供卵的高产奶牛进行同期发情处理 B．采集到的精子和卵母细胞要分别进行获能处理和成熟培养 C．可从囊胚中选取滋养层细胞提取DNA，进行性别鉴定 D．将SRY-PCR检测呈阳性的胚胎移植后，可得到高产奶牛 【答案】ABC 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，分析题图，①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢复， ⑤是胚胎移植。 【详解】A、在胚胎移植前，需要对受体（普通黄牛）和供体进行同期发情处理，使它们的生理状态相同，为胚胎移入受体提供相同的生理环境，A正确； B、采集到的精子需要进行获能处理，才能具备受精能力；采集到的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期（即成熟培养），才具备与精子受精的能力，B正确； C、囊胚中的滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，因此可从囊胚中选取滋养层细胞提取DNA，进行性别鉴定，这样既不影响胚胎的发育，又能鉴定胚胎性别，C正确； D、SRY基因是Y染色体上的性别决定基因，将SRY - PCR检测呈阳性的胚胎说明含有Y染色体，为雄性胚胎，而高产奶牛是雌性，所以将SRY - PCR检测呈阳性的胚胎移植后，得到的是普通黄牛（雄性），而不是高产奶牛，D错误。 故选ABC。 36．（2025·江苏南通·二模）单倍体胚胎干细胞是指只含一套染色体，但拥有类似于正常干细胞分裂、分化能力的细胞群。利用小鼠建立单倍体胚胎干细胞的操作如下图。下列叙述错误的是（    ）    A．过程①中，用于受精的卵母细胞处于MⅡ B．获得的单倍体胚胎干细胞中，性染色体为X或Y C．该操作涉及体外受精技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术等 D．过程②、③、④透明带和卵细胞膜之间存在1个第一极体和1个第二极体 【答案】BC 【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。 【详解】A、体外受精前需要对精子进行获能处理，需要将卵母细胞培养至减数分裂Ⅱ中期，A正确； B、精子中含有的性染色体为X染色体或Y染色体，卵细胞中含有的性染色体为X染色体，由图可知，在建立单倍体胚胎干细胞过程中，是去除雄原核，所以获得的单倍体干细胞中含有的性染色体是X染色体，而不含Y染色体，B错误； C、由图可知，在培养单倍体胚胎干细胞的过程中，首先发生体外受精，然后通过核移植去除雄原核，再对去除雄原核的细胞进行培养，没有涉及胚胎移植技术，C错误； D、卵母细胞在减数第一次分裂过程中产生第一极体，第一极体不再进行减数第二次分裂，在受精时，次级卵母细胞完成减数第二次分裂，产生第二极体，所以过程②、③、④透明带和卵细胞膜之间存在1个第一极体和1个第二极体，D正确。 故选BC。 37．（2025·河北衡水·二模）成体干细胞是指存在于已经分化组织中的未完全分化的细胞，能自我更新且能特化形成所在组织中的一种或多种细胞。下列叙述错误的是（　　） A．骨髓中造血干细胞通过分裂和分化可产生各种血细胞属于多向分化潜能，体现了细胞全能性 B．神经干细胞体外增殖方式一定为有丝分裂，体外分化过程与细胞内基因表达的调控有关 C．一般认为，成体干细胞具有发育成完整个体的能力 D．自体造血干细胞移植可用于治疗系统性红斑狼疮 【答案】AC 【分析】哺乳动物的胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，在功能上具有发育的全能性。 【详解】A、细胞全能性是指细胞发育成完整个体的能力，骨髓中造血干细胞通过分裂和分化可产生各种血细胞的过程没有体现了细胞全能性，A错误； B、神经干细胞的增殖方式为有丝分裂，分化过程由基因选择性表达调控，B正确； C、胚胎干细胞具有发育成完整个体的能力，而成体干细胞是已经分化组织中的未完全分化的细胞，不具有发育成完整个体的能力，C错误； D、自体造血干细胞移植可通过重建免疫系统治疗系统性红斑狼疮，D正确。 故选AC。 三、解答题 38．（2025·贵州·二模）天然抗性蛋白基因表达的N蛋白可抑制多种胞内寄生菌的感染，技术人员通过转基因技术获得了含有N蛋白基因的荷斯坦牛，其中，采用细胞工程技术进行了相关操作，过程如图所示。 回答下列问题： (1)N蛋白基因表达载体中，标记基因的作用是 ，该基因表达载体构建的基本操作是 。 (2)图中①操作的目的是 。②过程指的是 ，该过程需要对受体母牛进行同期发情处理，其作用是 。 (3)激活重构胚的具体方法有 （答出1点即可）。为提高重构胚胎的利用率，短时间内获得更多转基因荷斯坦牛，请写出实验思路 。 【答案】(1) 便于重组DNA分子的筛选 用限制酶切割载体和含有N蛋白基因的DNA片段，然后用DNA连接酶，将N蛋白基因片段拼接到载体的切口处 (2) 保证重组细胞的遗传物质主要来自供体细胞核/保证重组细胞发育而来的荷斯坦牛的性状主要由供体细胞核决定 胚胎移植 使受体母牛具有相同的生理状态，提高胚胎移植的成活率 (3) 电刺激/钙离子载体/乙醇/蛋白酶合成抑制剂等 培养重构胚，选择发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚进行胚胎分割，分割后的胚胎经培养后移植给受体母牛 【分析】来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了提高胚胎的利用率，可用胚胎分割技术；胚胎分割时，应选择桑椹胚或囊胚期的胚胎进行操作。 【详解】（1）标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因（N 蛋白基因），从而将含有目的基因的细胞筛选出来 。限制酶能够识别特定的核苷酸序列并在特定部位切割 DNA，用相同的限制酶切割目的基因和载体可以产生相同的黏性末端或平末端，便于 DNA 连接酶将它们连接形成重组 DNA 分子。因此该基因表达载体构建的基本操作是用限制酶切割载体和含有N蛋白基因的DNA片段，然后用DNA连接酶，将N蛋白基因片段拼接到载体的切口处。 （2）图中①操作是将含 N 蛋白基因表达载体的细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，其目的是保证重组细胞的遗传物质主要来自供体细胞核。②过程指的是胚胎移植 。胚胎移植是将早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的受体母牛子宫内，使之继续发育为新个体的技术。同期发情处理可以使供体和受体母牛的生理状态相同，为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境 ，提高胚胎移植的成活率。 （3）激活重构胚的具体方法：电刺激（或钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等） ，这些方法可以模拟受精过程中的一些信号，促使重构胚开始进行细胞分裂和发育。胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成 2 等份、4 等份或 8 等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术，这样可以在短时间内获得更多的转基因荷斯坦牛。因此为提高重构胚胎的利用率，可以培养重构胚，选择发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚进行胚胎分割，分割后的胚胎经培养后移植给受体母牛， 39．（2025·辽宁鞍山·二模）图1是我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和胚胎发育潜能研究的流程。人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态（naive）和始发态（primed）．naive干细胞具有最高的发育潜能，primed干细胞全能性相对较低。图2是OGT、OGA以及细胞骨架蛋白在胚胎干细胞中表达情况的电泳图谱，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶。 (1)猴子芽体相当于 期的胚胎，过程③的起点细胞应取自芽体的 部位。 (2)过程④⑤形成的胚胎是 。过程⑥需对受体母猴进行的处理是 。 (3)据图2推测，naive干细胞发育潜能更高的原因可能是 ；该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作为对照的作用是 。 (4)过程①需在图2中的诱导培养基中完成，目的是 。与过程①相比，过程②培养液中还应添加 。 【答案】(1) 囊胚 内细胞团 (2) 原肠胚 同期发情 (3) 细胞中的蛋白质糖基化程度低 排除细胞本身蛋白表达受阻的情况/保证细胞都具有正常表达蛋白质的功能 (4) primed干细胞中表达更多的OGA，从而转化为 naive干细胞 促进胚胎发育的物质 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】（1）分析图1，猴子芽体后续能进一步发育形成胚胎，在胚胎发育过程中，囊胚期的胚胎开始出现细胞分化，具有内细胞团等结构，可进一步发育成个体，,故猴子芽体相当于囊胚期的胚胎；囊胚期的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，过程③的起点细胞应取自芽体的内细胞团部位。 （2）过程④⑤是从囊胚进一步发育，形成的胚胎是原肠胚；过程⑥是胚胎移植，需对受体母猴进行同期发情处理，使供受体生殖器官的生理变化相同，为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境。 （3）据题干信息和图2分析可知，naive干细胞中OGT相对含量高，OGA相对含量低，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶，naive干细胞发育潜能更高的原因可能是naive干细胞中的蛋白质糖基化程度低；该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作为对照，是因为其表达量相对稳定，不受实验处理的影响，可以作为内参基因用于校正其他蛋白的表达水平，排除细胞本身蛋白表达受阻的情况（或保证细胞都具有正常表达蛋白质的功能）。 （4）过程①是将primed干细胞诱导形成naive干细胞，需在图2中的诱导培养基中完成，目的是primed干细胞中表达更多的OGA，从而转化为naive干细胞；与过程①相比，过程②是naive干细胞的培养，naive干细胞具有较高的发育潜能，故培养液中还应添加能促进胚胎发育的物质。 40．（2025·四川成都·二模）有些人由于乳糖酶分泌少，不能完全消化牛奶中的乳糖，饮用牛奶后易出现腹泻等不适症状，这称为乳糖不耐受。为了解决这一问题，科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，使获得的转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响。根据如下操作流程回答相关问题：    (1)为了获得更多的卵母细胞，在进行①过程前，需要用 处理奶牛A，从输卵管中采集卵母细胞后，还需要体外培养至 期，才可以进行③过程。通过图中②过程采集的B奶牛精子不能直接使成熟的卵细胞受精，常要用化学诱导法对奶牛的精子进行 处理，即用一定浓度的 处理。 (2)⑤过程表示将重组质粒导入受体细胞，常用的方法是 。 (3)⑥过程在移植胚胎前，可以选择发育良好、形态正常的 进行胚胎分割。 (4)外源基因插入奶牛受精卵中的DNA上后，导致有的受精卵发育成转基因奶牛，有的会死亡。分析导致受精卵死亡的最可能原因是 。⑦过程的检测结果为 时，说明转基因奶牛D是符合要求的优质牛。 【答案】(1) （外源）促性腺激素 MⅡ 获能 肝素或钙离子载体 (2)显微注射（利用显微注射将目的基因注入受精卵中） (3)囊胚或桑葚胚 (4) 外源基因插入奶牛受精卵中的DNA上后，导致受精卵内生命活动必须的某些基因不能表达 转基因奶牛的乳汁中乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响，且乳汁产量也不受影响 【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 【详解】（1）为了获得更多的卵母细胞，需要对奶牛A进行促排卵，一般通过注射促性腺激素处理母牛，采集的卵母细胞还需要培养至M Ⅱ中期，才能进行③体外受精作用过程。精子进行受精作用之前需要进行获能处理，即用一定浓度的肝素或钙离子载体处理。 （2）⑤过程表示将重组质粒导入动物受精卵中，常用的方法是利用显微注射法将目的基因注入受精卵中。 （3）在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或者囊胚。分割囊胚时，需要注意将内细胞团均等分割。 （4）外源基因插入受精卵中的DNA上后，导致受精卵死亡的最可能原因是：外源基因插入奶牛受精卵中的DNA上后，导致受精卵内生命活动必须的某些基因不能表达（合理即可）；⑦过程的检测结果为转基因奶牛的乳汁中乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响，且乳汁产量也不受影响时表示转基因成功，说明转基因奶牛D是符合要求的优质牛。 41．（2025·陕西咸阳·二模）基因编辑技术在胚胎工程中得到广泛的应用。如图1表示利用基因编辑技术培养小鼠B的过程，图2表示使用CRISPR/dCas9技术进行基因编辑的过程，其中dCas9不具有内切核酸酶活性，它能与不同作用的酶（A）结合，对基因进行定点修饰。回答下列问题。      (1)图1中，从卵泡中取出卵母细胞进行体外培养，需要的气体环境是 ，培养基中通常需要加入血清等一些天然成分的原因是 $$ 专题15 细胞工程 考点概览 考点01 植物细胞工程 考点02 动物细胞工程 考点03 胚胎工程 植物细胞工程考点01 一、单选题 1．（2025·河北石家庄·二模）中药材贡菊含有多种活性物质，具有清肝明目、驱邪降火等功效，适合口干、火旺、目涩的人群。为获得更多该中药材，可采用生物相关工程技术对贡菊进行脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是（　　） A．利用贡菊的茎段作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗 B．贡菊中含有的绿原酸、菊内酯等次生代谢物通常是贡菊基本生命活动所必需的 C．操作过程中，贡菊幼胚细胞和培养基都需要经过严格的灭菌处理 D．在接种外植体之前，需先后用酒精和次氯酸钠溶液对其进行消毒 2．（2025·江西·二模）不同种植物体细胞杂交会出现较严重的染色体间排斥现象。不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色体,与未经射线照射的受体细胞融合,所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉能产生抗癌药物紫杉醇,为了培育产生紫杉醇的柴胡,科研人员将红豆杉(2n=24)与柴胡(2n=12)进行了不对称体细胞杂交,诱导融合后,只统计了6组细胞,如下表所示。下列叙述正确的是（　　） 材料 融合细胞组号 1 2 3 4 5 6 染色体数(条) 9-11 12 12-14 12-16 13 14 A．需用一定剂量的紫外线照射柴胡原生质体与未经紫外线照射的红豆杉原生质体融合 B．表中有4组细胞为杂交细胞,这些细胞经植物组织培养获得的植株可能产生紫杉醇 C．在能够高效合成紫杉醇的杂交细胞中,应选择红豆杉的核基因含量较高的进行培养 D．将红豆杉和柴胡的愈伤组织分别用胰蛋白酶处理,能够各自获得有活力的原生质体 3．（2025·江苏·二模）研究人员以野生窄叶芍药的幼嫩茎段为外植体，通过在MS培养基中添加不同的植物生长调节剂研究影响愈伤组织诱导的主要因素，结果如下表。下列叙述错误的是（    ） 编号 植物生长调节剂组合 诱导率% 污染率% 褐化率% ① 6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L 84.3 3.60 3.33 ② 6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L 88.8 9.71 13.76 ③ 6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L 79.0 7.14 18.25 ④ 6-BA1.5mg/L+NAA1.0mg/L 70.3 1.60 26.70 注：植物组织培养中，（外植体）褐化会导致外植体脱分化、再分化和生长受阻，甚至使培养材料死亡。 A．选择嫩茎为外植体的主要原因是其分化程度低，易于诱导出愈伤组织 B．外植体接种到诱导愈伤组织培养基的操作应在酒精灯火焰旁进行 C．窄叶芍药愈伤组织诱导的最佳植物生长调节剂组合为② D．本研究为野生芍药资源的保护、扩大及开发利用提供了实践参考 4．（2025·广东清远·二模）科学家为解决马铃薯因感染茄科霍尔氏菌导致产量下降问题，利用植物体细胞杂交技术成功获得了茄子融合亲本的青枯病抗性杂种植株。下列相关说法错误的是（　　） A．混合酶液处理过程需要用纤维素酶和果胶酶混合去除细胞壁 B．过程①可利用聚乙二醇、Ca2+载体等方法诱导原生质体融合 C．过程②成功的标志是融合的原生质体长出新的细胞壁 D．过程③需对获得的杂种植株进行筛选 5．（2025·云南曲靖·二模）马铃薯易感染病毒，为培育脱毒苗，研究人员对植株进行30~35℃、28天的高温预处理，然后取其茎尖进行植物组织培养，获得了高脱毒率的脱毒苗。下列叙述错误的是（    ） A．对马铃薯植株进行高温预处理有可能使某些病毒的蛋白质变性 B．利用茎尖进行植物组织培养，是因为茎尖的病毒极少，甚至无病毒 C．茎尖组织细胞需要经过纤维素酶和果胶酶的处理才能进行脱分化培养 D．诱导马铃薯生芽和生根的培养基中，生长素和细胞分裂素的比例一般不同 6．（2025·陕西汉中·二模）植物甲（2n=20）抗虫、抗病性强，植物乙（2n=16）抗倒伏、耐盐碱。现科研人员培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　）    A．可通过分析植物丙的染色体数，来鉴定其是否为杂种植株（2n=18） B．过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合 C．过程④和⑤的培养基中均需要植物激素和光照等条件 D．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 7．（2025·内蒙古·二模）铁皮石斛因自然繁殖力弱、生长缓慢及人类掠夺式采挖导致资源枯竭，植物组织培养技术为其繁殖提供了新思路。下列相关叙述正确的是（　　） A．在铁皮石斛生长发育过程中，所有细胞都能表现出全能性 B．诱导愈伤组织形成需要光照，后续再分化过程需黑暗处理 C．生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响细胞的发育方向 D．运用植物组织培养技术繁育铁皮石斛，可提高遗传多样性 8．（2025·辽宁·二模）与常规栽培技术相比，利用植物细胞培养进行药用次生代谢产物的生产具有显著的优越性，根据不同的需求可以采用不同的技术流程（如下图）。下列相关叙述错误的是（    ） A．培养体系1、2、3中的细胞基因型不完全相同 B．上图的过程与植物组织培养都需要更换培养基 C．将目标产物合成途径中的关键酶基因导入悬浮细胞，可用花粉管通道法 D．愈伤组织没有叶绿体，是异养型细胞，因此需在培养基中加入有机碳源 9．（2025·广东深圳·二模）胞质雄性不育（CMS）是线粒体基因引起的胞质功能混乱现象，表现为花粉不育。经γ射线处理的芜菁细胞（AA，A表示染色体组）和甘蓝细胞（BB，B表示染色体组）融合，可获得CMS甘蓝植株（BB）。下列分析错误的是（　　） A．芜菁细胞和甘蓝细胞融合前需要去除两者的细胞壁 B．γ射线照射的作用是促进芜菁细胞与甘蓝细胞融合 C．融合后的CMS甘蓝获得了芜菁细胞的细胞质基因 D．植物体细胞杂交技术为培育CMS甘蓝提供一种路径 10．（2025·北京朝阳·二模）我国科研人员改良棉花幼胚的体外培养技术，加快了幼胚发育至幼苗的速度（如图），缩短了棉花杂交育种所需的时间。相关叙述正确的是（　　） A．接种用的外植体幼胚需要消毒，培养基需要灭菌 B．幼胚经过脱分化和再分化发育为试管苗 C．图中不同幼胚的基因组成完全相同 D．该过程体现了高度分化的植物细胞具有全能性 11．（2025·北京丰台·二模）青蒿素是从黄花蒿中提取的代谢物。研究人员在对黄花蒿进行组织培养时，发现愈伤组织中不合成青蒿素，而再分化形成的芽和苗中均能检测到青蒿素。相关分析最合理的是（　　） A．青蒿素合成需要细胞分化形成特定结构 B．芽和苗通过光合作用产生ATP为青蒿素合成提供能量 C．生长素与细胞分裂素的比例不会影响青蒿素产量 D．培养基中添加高浓度蔗糖有利于提高青蒿素产量 12．（2025·陕西商洛·二模）研究表明，一般能增加免疫器官重量的物质也具有一定增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组；实验处理如下表。下列有关叙述正确的是（　　） 组别 甲组 乙组 丙组（空白对照组） 实验处理 三白草细胞和鱼腥草细胞杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草细胞和鱼腥草细胞直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃；连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 A．三白草和鱼腥草细胞杂交前需先用酶解法处理获得原生质层 B．诱导三白草和鱼腥草的细胞融合可以使用PEG或灭活的病毒 C．丙组处理为加入等量蒸馏水，甲组愈伤组织形成过程中不发生基因的选择性表达 D．若甲、乙组结果相同且大于丙组，说明杂交愈伤组织能产生两种植物的细胞产物 13．（2025·山西晋城·二模）如图为利用植物细胞工程培育杂种植株的过程，A～C表示相关过程。下列叙述正确的是（　　） A．过程A首先需要用酶解法去除细胞壁，再用灭活病毒进行诱导融合 B．过程A中同种细胞的原生质体也可相互融合形成自体融合细胞 C．用秋水仙素处理过程B中的融合细胞，可使其形成新的细胞壁 D．过程C使用等比例的生长素和细胞分裂素更有利于杂种植株的形成 14．（2025·黑龙江·二模）外植体接种到培养基上的组织培养过程称为初代培养，是植物组织培养技术的重要步骤。下列相关叙述正确的是（    ） A．外植体和培养基需要进行严格的灭菌处理 B．进行初代培养时，培养基应适当增大细胞分裂素的比例 C．在黑暗条件进行初代培养诱导愈伤组织形成 D．外植体经初代培养后分化产生不定根和芽 15．（2025·天津·二模）天津小站稻因品质优良而闻名。科研人员为获得小站稻脱毒苗，选取其茎尖进行植物组织培养，流程如下图所示。 茎尖组织→①→愈伤组织→②→脱毒苗 下列叙述正确的是（    ） A．②阶段需调整激素比例以诱导根和芽的形成 B．①过程需光照以促进细胞脱分化 C．愈伤组织的细胞无细胞壁，分裂能力强 D．脱毒苗的抗病毒能力可遗传给子代 16．（2025·山东潍坊·二模）赤霉病是小麦最严重的疾病之一，可以采用赤霉菌毒素来处理小麦的部分组织，再通过植物组织培养筛选获得抗赤霉病植株。下列说法正确的是（　　） A．小麦主要依靠其初生代谢物来抵抗赤霉菌毒素 B．筛选时，应选择对赤霉菌毒素敏感度低的品种 C．培养外植体先用酒精处理30min，再用次氯酸钠处理30s D．先将愈伤组织接到生根培养基上，然后再转接到生芽培养基上 17．（2025·安徽淮南·二模）科学家将人参和胡萝卜细胞的原生质体融合，经培养获得8个杂种愈伤组织，检测发现这8个杂种愈伤组织均含有次生代谢物人参皂苷，其中大多数人参皂苷含量明显高于人参愈伤组织。蛋白质电泳检测中发现一条只在8个杂种愈伤组织中出现的特异条带。下列相关叙述正确的是（    ） A．可使用PEG融合法和灭活病毒诱导法促进两种原生质体融合 B．愈伤组织形成杂种植株是人参和胡萝卜细胞融合完成的标志 C．进行上述杂种愈伤组织培养时用到的培养基中不含有机物 D．大多数杂种愈伤组织的人参皂苷含量较高，可能与特异条带的蛋白质有关 18．（2025·河北衡水·二模）利用微型繁殖技术可以获得大量的百合脱毒苗，进而获得无病毒、健康、高产的百合植株。制备百合脱毒苗的实验操作流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．实验中使用的培养基和所有器械都要灭菌，而外植体只需要进行酒精消毒即可 B．以上获得大量脱毒苗的过程属于无性繁殖，体现了植物细胞的全能性 C．从分生区取材培养获得的脱毒苗可以解决百合品质变差及产量降低的退化情况 D．植物微型繁殖技术既能实现种苗的大量繁殖，也能保持优良品种的遗传特性 19．（2025·山西太原·二模）科研人员利用植物体细胞杂交技术培育出营养丰富、高产、高抗的优质猕猴桃新品种，其过程如下图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．过程Ⅰ脱分化时发生了基因的选择性表达 B．过程Ⅱ需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 C．过程Ⅲ形成的融合原生质体含六个染色体组 D．过程Ⅳ中可通过观察细胞中叶绿体的分布筛选细胞 20．（2025·山西·二模）现有甲、乙两个二倍体烟草品种，其基因型分别为aaBB和AAbb，在光强大于800勒克斯（光照强度单位）时都不能生长，这是aa或bb作用的结果。取甲、乙的花粉分别培养成植株丙、丁，将其叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后放到大于800勒克斯光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。下列相关叙述错误的是（    ） A．丙和丁有性杂交的子代在强光照下能发育成植株 B．将叶肉细胞制成原生质体时须在等渗溶液中进行 C．上述实验中发育形成的二倍体植株只有一种基因型 D．杂种融合细胞不能通过观察染色体数目进行筛选 21．（2025·云南红河·二模）研究表明，人参与胡萝卜体细胞杂交，获得的杂种细胞形成的愈伤组织中含有人参皂苷，且含量是融合前人参愈伤组织中的1．4倍。下列叙述正确的是（    ） A．可用电融合法、聚乙二醇融合法或者灭活病毒诱导得到杂种细胞 B．用纤维素酶和果胶酶处理人参、胡萝卜的愈伤组织获得原生质体 C．为提高人参愈伤组织的产生率，诱导时应注意严格灭菌并提供光照 D．人参与胡萝卜的体细胞能进行杂交，说明二者之间不存在生殖隔离 22．（2025·河北邢台·二模）原生质体比正常植物细胞更易接受外源DNA，其制备过程主要包括取材→剪碎→酶解。下列叙述错误的是（　　） A．可用台盼蓝染液来鉴定原生质体活性 B．剪碎的目的是使酶与细胞充分接触 C．取材后需用酒精和次氯酸钠对材料灭菌 D．细胞壁可能会阻止外源DNA进入细胞 23．（2025·重庆·二模）次生代谢产物在植物抗虫、抗病等方面发挥作用，也是药物、香料和色素等的重要来源。次生代谢产物X是植物体在干旱、虫害或微生物侵害等胁迫过程中产生的防御物质。其研发流程为：筛选高产细胞→确定细胞生长和产物X合成的关系（如图）→发酵生产X。下列叙述错误的是（    ） A．为了大量获取X，应先培养大量细胞，后改变条件使细胞停止生长 B．可利用基因工程的方法改造酵母菌，利用发酵工程生产X C．为提高目标细胞的X含量，可将微生物菌体或其产物作为诱导因子加入到培养基中 D．图示测定数据应该是来自细胞周期不同步、来源多样的细胞群 24．（2025·辽宁沈阳·二模）为培育切花菊脱毒苗，研究者在切取茎尖进行组织培养前先对母株适度热处理，以抑制难以脱除的病毒活性。下列叙述错误的是（    ） A．选取茎尖的原因是茎尖病毒极少甚至无病毒 B．设置热处理温度时需同时考虑病毒种类和母株耐受性 C．使用固体培养基既能固定茎尖又能减缓其水分流失 D．生根阶段可直接将植物激素加入诱导愈伤组织的培养基中 25．（2025·浙江金华·二模）研究人员以白菜细胞（2n=20）与甘蓝细胞（2n=18）进行植物体细胞杂交得到杂种植株。通过PCR对杂种植株和亲本植株的物种特异性DNA进行扩增，电泳结果如下图所示。下列说法错误的是（　　） A．据图推测杂种植株的染色体数小于38条 B．叶绿体密度与液泡颜色等差异可做为区分杂交细胞类型的依据 C．通过凝胶电泳结果可知，杂种植株兼具有白菜和甘蓝的某些遗传特性 D．植物体细胞杂交的优点是可以克服远缘杂交不亲合，并保持双亲优良性状 26．（2025·安徽黄山·二模）铁皮石斛是名贵中药，其有效成分生物碱是细胞的次级代谢产物。图 1 是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎（简称 PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程；图 2 是培养过程中 PLBs 质量、生物碱含量的变化曲线图。下列叙述错误的是（　　） A．与黑暗条件相比，光照条件下 PLBs 的生长起始早、快速生长时间长 B．培养 PLBs 生产生物碱，运用了植物细胞具有全能性的原理 C．应选择细胞数量与生物碱产量的比值小的 PLBs 用于生物碱生产 D．为探究生物碱生产适宜条件，还应检测黑暗条件下生物碱含量变化 27．（2025·江西南昌·二模）某植物组织培养中，愈伤组织再分化所用的培养基含有植物激素X和Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，愈伤组织的变化情况如图所示。下列相关叙述正确的是（    ） A．当激素X的浓度高于Y时促进根的分化 B．植物组织培养和动物细胞培养的原理相同 C．愈伤组织是外植体脱分化产生的原生质体 D．愈伤组织再分化过程中一般需要光照 28．（2025·河北衡水·二模）花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列有关叙述正确的是（　　） A．图1培育出的杂种植株减数分裂时体细胞中最多含有64条染色体 B．②过程可用物理法如高Ca2+—高pH融合法或化学法如PEG融合法诱导细胞融合，杂种细胞再生出细胞壁是植物细胞融合成功的标志 C．图1培育杂种植株所用的技术体现了细胞膜具有一定流动性原理、染色体变异和植物细胞具有全能性原理 D．可将病菌悬浮液均匀喷施于图2中的1和5植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株 29．（2025·重庆·二模）不对称体细胞杂交是利用射线、限制酶等方法处理供体细胞或原生质体，处理后的染色体易发生断裂和丢失，然后再和一个正常受体的细胞或原生质体融合。研究人员用拟南芥与雄性不育性状的萝卜进行体细胞不对称体细胞杂交实验，获得了雄性不育的拟南芥。下列叙述错误的是（    ） A．利用PEG法和电融合法促使原生质体的结合 B．通过细胞的显微观察来鉴定杂种植株染色体形态特征和倍性 C．不对称体细胞杂交技术可以改良受体细胞线粒体基因组或叶绿体基因组 D．不对称体细胞杂交在减少非目标性状的引入及提高杂种育性上具有一定的优越性 30．（2025·浙江杭州·二模）紫草素是一种重要的化工产品，可从天然紫草中获取，但来源有限。科学家先利用紫草叶片培育出紫草愈伤组织，再通过培养基中的各类成分诱导愈伤组织合成紫草素，实现紫草素的大规模生产。下列叙述错误的是（　　） A．上述过程体现了植物细胞具有全能性 B．上述过程中紫草细胞经历了脱分化 C．培育紫草愈伤组织的过程需控制植物激素配比 D．可利用基因工程和发酵工程大量合成紫草素 31．（2025·河南·二模）某科研团队致力于保护一种濒危兰花，由于其野外种群数量稀少，且自然繁殖困难，科研人员选取兰花的茎尖作为外植体，通过植物组织培养的方式进行人工繁殖。下列有关说法正确的是（　　） A．茎尖全能性高且不易发生变异，故选其作外植体 B．提高生长素和细胞分裂素的比值能促进根的分化 C．提供适当的光照有利于加速外植体形成愈伤组织 D．常用诱导剂直接处理外植体以获得大量的突变体 32．（2025·河北衡水·二模）生物兴趣小组成员以西瓜5天龄幼苗子叶（子叶尚未完全展开且颜色为淡绿色）为外植体进行相关研究，得到如图所示实验结果，相关叙述错误的是（　　） A．实验开始前应对外植体消毒，对人工配置的MS培养基进行灭菌处理 B．与胚状体细胞相比，愈伤组织细胞分化程度低 C．结果表明西瓜子叶诱导形成愈伤组织的最适暗处理时间（以周为单位）是1周 D．暗处理时间长短对细胞再分化率影响大于脱分化率 33．（2025·河北衡水·二模）藿香（高等植物）是一种重要的中草药，科研人员利用藿香的叶片为外植体进行植物组织培养，过程如图所示。下列叙述不正确的是（　　）    A．②过程为脱分化，该过程无需光照，期间会发生基因突变、基因重组或染色体变异 B．①选用幼嫩细胞更易进行，图中技术证明了植物细胞具有全能性 C．③过程中细胞分裂素与生长素的比值高时有利于诱导生芽 D．先诱导生芽后诱导生根有利于试管苗独立进行光合作用 34．（2025·贵州贵阳·二模）科研人员分离了天山雪莲（2n = 32）和莴苣（2n = 18）的原生质体并将其融合，为天山雪莲新种选育奠定了基础，培育过程如图所示。下列叙述正确的是（    ）    A．过程②可以用PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法等 B．过程④诱导形成愈伤组织期间一般不需要光照 C．经过程②得到的c细胞只有1种类型，因此不需要筛选 D．最后得到的试管苗体细胞中含有25条染色体 35．（2025·陕西汉中·二模）血红蛋白（Hb）能携带O2，透明颤菌含有Hb，将Hb基因转入青霉菌可提高青霉素的产量。研究人员制备了两种营养缺陷型（菌株不能在缺乏该营养物质的培养基上生长）菌株的原生质体，并诱导细胞融合，来获得杂种菌株，过程如图所示。下列分析正确的是（　　） A．处理①和处理②均需要选用纤维素酶和果胶酶 B．在全营养的高渗溶液中，进行处理③来诱导细胞融合 C．处理④是在缺乏甲硫氨酸和精氨酸的培养基中筛选 D．Hb基因使营养缺陷型青霉菌恢复合成青霉素的能力 36．（2025·黑龙江哈尔滨·二模）植物组织培养技术是植物细胞工程中最基本的一项技术，下列说法正确的是（    ） A．花药离体培养时无需进行脱分化即可进行直接操作 B．在植物组织培养过程中一直需要在充足的光照下进行 C．配置培养基时需根据不同的需求适当调整生长素和乙烯的含量比例 D．利用菊花的花瓣进行植物组织培养后获得幼苗是因为植物细胞内含有全套的遗传物质 37．（2025·河南·二模）芦荟细胞质中具有抗旱基因，高粱细胞核中具有耐盐碱基因。当细胞中细胞核或细胞质失活时，细胞均无法分裂。利用芦荟细胞和高粱细胞培养既耐盐又耐旱的杂种植株的过程如图所示，其中①~③代表实验过程，碘乙酸可钝化原生质体使细胞质失活，从而有助于获得稳定的杂种植株。下列叙述错误的是（    ） A．①用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，体现了酶的专一性 B．②获得的融合细胞经③获得的植株中不一定都是杂种植株 C．经③获得杂种植株的过程，体现了植物细胞的全能性 D．用Ƴ射线对芦荟原生质体进行处理的目的是使其细胞核失活 38．（2025·吉林·二模）番茄（2N=24）和马铃薯（4N=48）是常见的且营养丰富的两类蔬菜，深受人们喜爱。随着现代生物技术的发展，科学家设法通过植物体细胞杂交技术培育出新型的品种番茄-马铃薯，现在已经培育出该植株。下图是番茄-马铃薯培育过程示意图，有关叙述正确的是（    ） A．①过程需要用到蛋白酶和果胶酶处理去除细胞壁 B．该植株的培育成功说明番茄和马铃薯未形成生殖隔离 C．植物体细胞杂交技术遵循孟德尔遗传定律 D．⑤过程与④过程所使用的激素比例不同 39．（2025·辽宁·二模）利用两个不同品种的矮牵牛（2n=14），通过植物体细胞杂交技术，可得到具有优良性状的杂种植株。下列相关叙述正确的是（    ） A．植物体细胞杂交过程中会发生基因重组 B．新品种杂种植株的体细胞中最多含有28条染色体 C．植物体细胞杂交过程利用了染色体变异和植物细胞全能性等原理 D．诱导杂种植株形成过程中要用到秋水仙素、生长素和细胞分裂素等试剂 40．（2025·安徽池州·二模）已知普通小麦（2p=42）花药离体培养得到的幼苗白化现象非常严重，且研究发现：给小麦授以玉米（2n=20）的花粉，1天后杂种胚含有21条小麦染色体和10条玉米染色体，7天后杂种胚中只有21条小麦染色体（杂种胚是存活的）。现欲利用纯合高秆抗病和矮秆易感病小麦品种（两对性状独立遗传）快速高效地培育出纯合矮秆抗病小麦，研究小组已将两品种杂交，F₁全为高秆抗病。对于后续方案的设计，最合理的是（    ） A．取F₁花粉进行离体培养→秋水仙素处理幼苗→筛选所需类型 B．将F₁自交→选择子代矮秆抗病类型连续官交，逐代淘汰→筛选所需类型 C．对F₁授以玉米花粉→取1天后的杂种胚离体培养→秋水仙素处理幼苗→筛选所需类型 D．对F₁授以玉米花粉→取7天后的杂种胚离体培养→秋水仙素处理幼苗→筛选所需类型 41．（2025·贵州铜仁·二模）植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错误的是（    ） A．①中酶处理的时间不同，可能是甲、乙细胞壁主要成分不同 B．过程②中可用高Ca2+—高pH或聚乙二醇诱导原生质体融合 C．过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素 D．可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株 42．（2025·内蒙古赤峰·二模）关于细胞工程的叙述错误的是（　　） A．培育草莓脱毒苗常选择茎尖组织培养技术 B．常用机械法或胰蛋白酶处理动物组织以分散成单个细胞 C．由iPS细胞分化产生的特定细胞可在新药测试中发挥重要作用 D．细胞产物的工厂化生产提高单个细胞中次生代谢产物的含量 43．（2025·山东枣庄·二模）紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁，成为世界上首例药用植物细胞工程产品。下列说法错误的是（    ） A．紫草宁是紫草细胞的次生代谢物 B．可以利用液体培养基进行工厂化生产 C．紫草宁的工厂化生产需要先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 D．紫草宁的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节、天气等的限制 44．（2025·江苏南通·二模）下图是以铁皮石斛为材料，培养拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程。下列说法正确的是（    ）    A．生物碱属于次生代谢产物，是铁皮石斛生长所必需的物质 B．图中过程①为脱分化形成PLBs，过程②为再分化生产生物碱 C．培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量比值小的PLBs D．过程①②常用葡萄糖做碳源，原因是蔗糖不易被植物细胞吸收 45．（2025·四川雅安·二模）马铃薯四倍体栽培种（4n=48）易感染青枯病，而马铃薯野生型（2n=24）有青枯病抗性基因，科研人员利用图示操作技术培养了抗病型马铃薯栽培种。下列说法正确的是（　　）    A．制备原生质体时需要用胰蛋白酶将植物细胞分散成单个细胞 B．诱导原生质体融合时可以在无菌水中采用PEG融合法或电融合法 C．可以通过镜检观察染色体数目来初步筛选含青枯病抗病基因的融合原生质体 D．抗病型马铃薯栽培种为异源三倍体植株，因联会紊乱不能形成配子 46．（2025·陕西咸阳·二模）三白草和鱼腥草的药用成分相近，而且在疗效上具有叠加效应。通过植物细胞工程技术培育杂种细胞，从而获得更多药用物质。实验流程如图所示，下列叙述正确的是（    ） A．过程①可使用胰蛋白酶酶解去除细胞壁 B．过程②可使用灭活的病毒诱导细胞膜融合 C．过程③中需要适量光照诱导细胞去分化 D．过程④中可进行细胞工厂化生产次生代谢物 47．（2025·河南新乡·二模）石蒜碱是从石蒜等的鳞茎中提取的一种次级代谢物，用石蒜碱制成的内胺盐具有较强的抗肿瘤作用，常用于肿瘤的治疗。实验人员采用植物细胞悬浮培养技术生产石蒜碱的过程如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A．过程①为脱分化，通常用细胞分裂素和赤霉素进行诱导 B．过程②为了使细胞分散开，通常用胶原蛋白酶进行处理 C．过程③通过提取、分离和纯化的方法获取石蒜碱 D．图示生产石蒜碱的过程体现了植物细胞的全能性 48．（2025·黑龙江哈尔滨·二模）紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的二萜类生物碱类化合物，是一种有效的抗癌药物，传统生产方法是从红豆杉树皮和树叶中提取，下图为利用植物细胞工程生产紫杉醇的流程图，相关叙述正确的是（    ） A．紫杉醇是植物代谢活动产生的，属于初生代谢物 B．①②过程通常采用液体培养基，需要适当强度的光照 C．上述流程图中涉及植物组织培养和植物细胞培养等技术 D．③过程需要用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理 49．（2025·甘肃白银·二模）下列关于细胞工程的说法正确的是（    ） A．植物组织培养与动物体细胞核移植技术的原理都是细胞的全能性 B．PEG既可以用于动物细胞融合，也能够用于植物体细胞杂交 C．悬浮培养的动物细胞会因接触抑制而分裂受阻 D．抗体—药物偶联物主要利用其中的抗体杀死肿瘤细胞 50．（2025·江西九江·二模）庐山云雾茶是传统名茶，是中国名茶系列之一；云雾茶富含茶多酚、咖啡因等物质，具有一定的保健功能。科学家可通过快速繁殖技术来培育茶树的种苗，下列叙述错误的是（    ） A．快速繁殖技术亦称为微型繁殖技术，实质是植物组织培养技术 B．茶多酚、咖啡因等物质是组织培养过程中产生的初生代谢产物 C．接种外植体需要在酒精灯火焰旁进行，以减少杂菌的污染 D．快速繁殖技术的原理是已分化的植物细胞仍具有发育成个体的潜能 51．（2025·黑龙江哈尔滨·二模）植物细胞工程在植物繁殖新途径等方面都有广泛的应用，并取得了显著的社会效益和经济效益。下图表示植物细胞工程应用的相关操作，相关叙述正确的是（　　）    A．A途径中发生的可遗传变异有基因突变和基因重组 B．经B途径得到的大多数植株的隐性性状容易显现 C．经E途径得到的次生代谢物是生物生长和生存所必需的 D．上述应用得到的植株体细胞中的染色体数均相同 52．（2025·江苏南通·二模）百岁兰是一种濒危物种。为研发稳定高效的百岁兰叶片愈伤组织诱导体系，科研人员探究了避光与昼夜节律（16h光照和8h黑暗）对诱导百岁兰叶片愈伤组织的影响，实验结果见下图。相关叙述错误的是（    ） A．愈伤组织诱导过程中基因发生选择性表达，该过程也可发生基因突变和染色体变异 B．实验所用的培养基通常为固体培养基，且培养基中的生长素和细胞分裂素比例适中 C．暗处理和昼夜节律处理所用培养基中均需要添加蔗糖，且蔗糖的添加量要一致 D．昼夜节律处理下百岁兰脱分化和再分化的速率更快，愈伤组织生长更好 53．（2025·江苏盐城·二模）植物组织培养的培养基中常添加蔗糖作为碳源物质，而不使用葡萄糖作为碳源物质。相关推测不合理的是（    ） A．植物细胞吸收蔗糖的速率较低，有利于培养基渗透压较长时间保持稳定 B．植物细胞可能分泌蔗糖酶，能够催化蔗糖水解以便于吸收利用 C．大多数微生物更倾向于利用葡萄糖作为碳源，使用蔗糖可减少微生物的污染 D．培养基中相同质量分数的蔗糖形成的渗透压要高于葡萄糖，可防止细胞脱水 54．（2025·四川成都·二模）科学家将人参和胡萝卜细胞的原生质体融合，经培养获得8个杂种愈伤组织，检测发现这8个杂种愈伤组织均含有人参皂苷（一种次生代谢物），其中大多数人参皂苷含量明显高于人参愈伤组织。蛋白质电泳检测中发现一条只在8个杂种愈伤组织中出现的特异条带。下列叙述正确的是（    ） A．人参皂苷是杂种愈伤组织细胞分裂和分化所必需的重要物质 B．可使用PEG融合法和灭活病毒诱导法促进两种原生质体融合 C．愈伤组织形成杂种植株过程中需要调整相关激素的比例和浓度 D．特异蛋白质条带的出现说明在杂种愈伤组织中发生了基因突变 二、多选题 55．（2025·山东泰安·二模）已知番茄是二倍体植物，马铃薯是四倍体植物，如图为马铃薯和番茄的体细胞杂交过程图。下列分析正确的是（    ） A．过程①应置于等渗溶液中，利用果胶酶和胶原蛋白酶处理细胞 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．过程⑤升高细胞分裂素和生长素的比值，可促进愈伤组织形成丛芽 D．植株A7细胞中具有来自亲本的2个细胞核 56．（2025·河北唐山·二模）以甘蔗为原料生产的蔗糖占我国食糖产量的90%，但其受到花叶病毒侵染后会引起减产。通过诱变处理和植物组织培养相结合可以培育出抗花叶病毒的甘蔗。下列有关叙述正确的是（　　） A．该育种过程的原理有基因突变和细胞的全能性 B．脱分化阶段应给予适当光照 C．对愈伤组织进行诱变处理后需接种病毒进行筛选 D．此方法可能需要处理大量的材料才可得到抗花叶病毒的甘蔗 57．（2025·河北衡水·二模）甲植物具有由核基因控制的多种优良性状，乙植物的细胞质中含有抗除草剂基因，下图是将乙细胞的抗性基因引入甲细胞的体细胞杂交流程，相关叙述错误的是（　　） A．若甲、乙两种植株存在生殖隔离，该实验也可以成功 B．过程B体现了细胞膜的流动性，细胞壁是植物细胞的边界 C．两两融合的细胞有三种，同种融合的细胞无法存活可以达到筛选目的 D．A需要用纤维素酶和胶原蛋白酶在等渗溶液中处理植物细胞获得原生质体 58．（2025·河北衡水·二模）下列关于动物细胞工程和植物细胞工程的叙述，不正确的是（　　） A．花药离体培养得到单倍体植株需要用到秋水仙素来诱导细胞融合恢复成二倍体 B．生产中获得草莓脱毒苗和动物干细胞的培养均使用高压蒸汽灭菌的固体培养基 C．植物组织培养和动物细胞培养均需要经过脱分化过程 D．愈伤组织和小鼠iPS细胞的诱导形成均发生了基因的选择性表达 59．（2025·辽宁鞍山·二模）下列有关植物愈伤组织的叙述，正确的是（    ） A．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 B．通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖 C．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 D．体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 60．（2025·江苏泰州·二模）藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如下图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述错误的是（　　） A．组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生不定向突变 B．过程①中外植体依次使用次氯酸钠和70%酒精溶液进行消毒 C．过程③④所用的培养基中添加的植物激素的种类和比例不同 D．筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分 三、解答题 61．（2025·河北衡水·二模）狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其产生的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程进行培养，具体过程如图所示，其中的数字代表处理或生理过程。请回答下列相关问题：    (1)狼爪瓦松的叶肉细胞之所以能培养为新个体是因为植物细胞具有全能性，即 。 (2)②过程形成的愈伤组织是 组织团块。 是启动②③的关键，其中通常需要光照的是 （填序号）过程，光照作用是 。 (3)图中②③过程培养获得植株乙的优点有 （答出一点）。 (4)图中④过程中，相较于以幼苗为实验材料，选择 作为实验材料的优点有诱变频率大于个体水平，在较小的空间内一次性可处理大量材料或空间利用率更高，得到的变异体数目更多。图中⑤过程中用到的酶为 。诱导原生质体融合的化学方法除了图中方法外还有 。 62．（2025·河北衡水·二模）下图表示科学家通过植物细胞工程，利用番茄叶细胞（2N=24）和马铃薯叶细胞（4N=48）杂交培育“番茄一马铃薯”植株的过程，回答下列问题。    (1)）取番茄—马铃薯充分展开的嫩叶片，对其消毒处理后用 （填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次备用。在①过程中，原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的 ，从而维持原生质体的形态和活性。 (2)番茄—马铃薯植株的培育过程采用的是 技术，该技术完成的标志是 。若由杂种细胞培育成的新品种为六倍体，则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株为几倍体？ 。 (3)融合后的“番茄一马铃薯”细胞，在有丝分裂后期含有 条染色体。从过程④到过程⑤需要更换新的培养基，原因是 。 (4)图中⑤过程中当植物细胞分裂素与生长素的浓度比小于1时，培养基的作用是 。操作后得到的“番茄一马铃薯”并没有预想中的“地上结番茄，底下结马铃薯”，可能的原因是 。 63．（2025·宁夏石嘴山·二模）马铃薯是世界四大粮食作物之一。青枯病是马铃薯最大的细菌性病害，目前还没有有效的防治手段，常造成严重减产。马铃薯栽培种缺乏青枯病抗性，同时由于种间杂交障碍，野生和近缘物种的抗性资源得不到利用，科研人员用抗青枯病茄子与马铃薯栽培种通过体细胞杂交，获得了马铃薯—茄子的杂种植株，部分杂种植株成功获得了茄子融合亲本的青枯病抗性，研究过程如下图。回答下列问题： (1)过程①除去马铃薯细胞和茄子细胞的细胞壁所用的是 酶。 (2)杂种细胞通过④形成了愈伤组织，使用的激素是 ，它们的 和 会影响植物的发育方向。 (3)用于培养愈伤组织的培养基采用 灭菌法，原因是 。 (4)鉴定杂种植株是否具有抗青枯病的方法是 。 (5)马铃薯—茄子的杂种植株并没有像科研人员想象的那样，地上结茄子同时地下结马铃薯，可能的原因 。 64．（2025·天津和平·二模）基因工程为培育抗病毒植物开辟了新途径。下图为研究人员培育转黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因（CMV—CP基因）番茄的主要过程示意图。（Kanr为卡那霉素抗性基因）。 (1)将CMV-CP基因导入番茄细胞后，培育的番茄植株具有抗CMV感染能力，过程①接种的农杆菌细胞中，Kanr及CMV-CP基因应整合在Ti质粒的T—DNA内部，这是由于Ti质粒中仅T—DNA片段可以进入植物细胞并 。 (2)过程③、④所需的培养基为 （填“固体”或“液体”）培养基。研究发现高浓度的卡那霉素会使番茄的愈伤组织不能生长甚至死亡，③、④培养基中加入适宜浓度Kanr的作用为 。 (3)过程⑤再生植株抗性鉴定时，引物序列设计的主要依据是 。 (4)过程⑤利用PCR技术对样品CMV-CP基因扩增后电泳，根据标准参照，可以初步确定整合了CMV-CP基因的再生植株。通常需进一步通过基因碱基序列测定确认，原因是琼脂糖凝胶电泳技术仅能用于分析待检测DNA分子的 ，无法确定待检测DNA分子的碱基序列。 动物细胞工程考点02 一、单选题 1．（2025·山东·二模）间充质干细胞（MSCs）是一类具有自我更新和多向分化能力的成体干细胞。梗死的心肌形成的恶性炎症-自由基循环使移植的MSCs难以存活，且心脏收缩及高血流使MSCs难以有效滞留，制约了疗效。若利用Ca2+将具有自由基强效清除功能的多巴胺聚合在MSCs表面；另将多种抗体基因拼接起来导入MSCs，使其表达出黏附炎症组织的多价抗体（anti-VCAM1）并修饰在MSCs表面，大大提高疗效。下列说法错误的是（    ） A．MSCs表面聚合的多巴胺为MSCs创造了有利的环境 B．anti-VCAM1的产生利用了动物细胞融合技术 C．anti-VCAM1使MSCs在梗死心肌组织中有效滞留 D．间充质干细胞能分化成多种细胞或组织 2．（2025·山东泰安·二模）由PRRSV病毒引发的传染病—“猪繁殖与呼吸综合征”俗称猪蓝耳病，是对猪最具经济破坏性的疾病。科学家通过以下流程培育能自动产生PRRSV抗体的转基因克隆猪，进而对该病进行诊断和治疗。下列说法正确的是（　　） A．获得D猪的基础技术是动物体细胞核移植技术 B．步骤①通常采用离心法使两细胞融合 C．步骤②中可采用Ca2+载体激活重构胚 D．步骤③中涉及的主要是胚胎早期培养技术 3．（2025·辽宁·二模）抗原表位指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团，是抗原与T细胞或B细胞表面的抗原识别受体及抗体特异性结合的最小结构单位。下图为单克隆抗体的制备过程，下列叙述错误的是（    ） A．可用PEG或灭活的病毒诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合 B．经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞能够产生的抗体共3种 C．克隆化培养和抗体检测后的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体 D．由图可知，利用一种抗原经杂交瘤技术可以获得多种单克隆抗体 4．（2025·北京西城·二模）病毒PEDV会使猪患流行性腹泻，在制备抗PEDV的单克隆抗体时加入不同浓度维生素C（VC），杂交瘤细胞增殖情况及抗体分泌情况如图和表格所示。叙述错误的是（　　）    VC/（ng·mL-1） 抗体效价 0 1：4000 5 1：4000 10 1：8000 20 1：2000 A．可用灭活病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 B．培养杂交瘤细胞需在培养基中添加动物血清 C．10ng·mL-1VC显著促进杂交瘤细胞增殖 D．20ng·mL-1VC通过抑制细胞增殖降低抗体效价 5．（2025·天津·二模）T-DMI是曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体-药物偶联物，对HER-2蛋白有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述错误的是（    ） A．用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 B．向小鼠反复注射HER-2，以便在脾脏中获取免疫的B淋巴细胞 C．用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜的蛋白质和脂质分子会重新排布 D．T-DMI中曲妥珠单抗与HER-2特异性结合是对癌细胞进行选择性杀伤的关键 6．（2025·山东德州·二模）胚胎补偿技术是指将供体的iPS细胞注入特定器官发育缺陷的宿主囊胚中，使其补偿发育出所需器官的技术。中国科学家利用该技术在猪胚胎中发育生成人源化肾脏，过程如图所示。经检测，这些肾脏中人源细胞比例最高可达70%。下列说法错误的是（    ） A．基因P和M是猪的肾脏发育过程中的关键基因 B．过程②可利用Ca2+载体激活重构胚 C．过程④应将人源iPS细胞注入囊胚的滋养层中 D．利用胚胎补偿技术制备的器官进行移植仍存在免疫排斥问题 7．（2025·山东德州·二模）特应性皮炎是一种过敏性皮肤病，患者的II型辅助性T细胞（Th2）被过度激活，其分泌的细胞因子IL-4显著增多，导致IgE抗体水平升高，进而产生过敏反应。下列说法正确的是（    ） A．Th2通常在接受抗原呈递细胞传递的抗原信息后才能分泌IL-4 B．细胞因子IL-4可作为激活B细胞的第二个信号 C．过敏原再次入侵后产生的IgE抗体才能吸附在某些细胞表面 D．IL-4受体的单克隆抗体可减少IL-4的释放进而缓解过敏反应 8．（2025·福建龙岩·二模）CD87是某种癌细胞膜上的受体蛋白，与癌细胞的转移和增殖有关。CD3是所有T细胞表面的特异性抗原，该抗原被激活后，能极大促进T细胞的免疫效力。科研人员尝试通过诱导两种杂交瘤细胞融合形成双杂交瘤细胞，以筛选出能同时结合CD87和CD3的双特异性抗体CD87×CD3，如图所示。    下列相关叙述正确的是（　　） A．制备双杂交瘤细胞时，需要将CD87、CD3分别注射到小鼠体内 B．双杂交瘤细胞需要用CD87和CD3刺激才会产生双特异性抗体 C．小鼠体内培养双杂交瘤细胞时需从小鼠脾脏中提取双特异性抗体 D．体外培养的双杂交瘤细胞会出现贴壁生长和接触抑制现象 9．（2025·广东汕头·二模）某酶联免疫法试剂盒可用于单纯疱疹病毒的IgG抗体检测，如图是其说明书中检测原理的描述。下列叙述错误的是（　　） 酶联免疫检测原理：将已知抗原固定在试剂盒中的载体上，IgG抗体与该抗原结合后，再与酶标记抗体结合，酶标抗体中的酶催化某种显色物质发生显色（阳性）反应 A．酶标记抗体中的酶所催化底物不一定是蛋白质 B．血浆中待测抗体的含量对显色的深浅产生影响 C．若血清检测为阳性提示曾感染过单纯疱疹病毒 D．阴性结果时发生固定抗原与酶标抗体特异结合 10．（2025·广东汕头·二模）阿尔茨海默病的病理特征常见淀粉样蛋白β（Aβ）斑块沉积。针对Aβ的单克隆抗体可能对该病有疗效。下列关于制备抗Aβ的单克隆抗体的叙述，错误的是（　　） A．小鼠多次注射Aβ并分离B淋巴细胞 B．用灭活病毒诱导B淋巴细胞相互融合 C．杂交瘤细胞进行抗Aβ抗体阳性检测 D．从细胞培养液或小鼠腹水中收集抗体 11．（2025·甘肃白银·二模）类器官是一种在体外培养的、由干细胞分化而来的三维细胞团，具有与器官类似的结构和功能，在医疗上具有广泛的应用前景，下图表示类器官培养流程。下列叙述正确的是（　　）    A．体细胞与多能干细胞中核酸和蛋白质种类不完全相同 B．类器官应放在CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 C．囊胚的滋养层细胞属于多能干细胞，可以在体外培养成类器官 D．培养类器官时，为减轻代谢物积累对细胞的伤害，可在培养液中加入抗生素 12．（2025·安徽滁州·二模）研究表明，药物佐妥昔单抗能延长胃癌患者生存期。临床试验结果显示，接受佐妥昔单抗治疗的晚期胃癌患者寿命更长，疾病进展延缓。下列有关杂交瘤细胞克隆化培养获得佐妥昔单抗过程的叙述，正确的是（　　） A．体外培养杂交瘤细胞时，要通入95%的O2和5%的CO2 B．佐妥昔单抗的制备利用了细胞培养、细胞融合等技术 C．用选择培养基可筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞 D．杂交瘤细胞的克隆化培养过程中不需考虑细菌污染问题 13．（2025·北京昌平·二模）H18杂交瘤细胞能够产生抗人肝癌单克隆抗体，但该细胞在培养过程中的凋亡现象制约着其生产能力的提高。Bcl-XL是一种抗凋亡蛋白，利用Bcl-XL基因改造杂交瘤细胞，获得了稳定表达Bcl-XL的杂交瘤细胞。下列说法错误的是（　　） A．制备H18杂交瘤细胞利用了动物细胞融合技术 B．利用产生特定抗体的B细胞与瘤细胞制备H18杂交瘤细胞 C．将Bcl-XL基因直接注射至H18杂交瘤细胞可实现稳定表达 D．经筛选可获得既抗凋亡又能分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞 14．（2025·山西晋城·二模）细胞核重编程是将已经分化的成体细胞进行诱导，让其重新回到发育早期的多能性干细胞状态，通俗来讲，就是在细胞层面实现了“返老还童”。早在20世纪60年代，Gurdon等用蝌蚪肠道的成熟特化细胞的细胞核替换掉青蛙卵母细胞的细胞核，从而使重组细胞发育为性成熟的成体青蛙，过程如图所示。下列叙述错误的是（　　）    A．回到发育早期的多能性干细胞状态可重新获得发育成各种类型细胞的能力 B．用紫外线照射破坏卵母细胞中的染色体，其目的是破坏卵母细胞的细胞核 C．对早期胚胎细胞进行培养时，一般需提供营养、酸性环境和95％的氧气 D．图中采用显微注射法将蝌蚪肠上皮细胞的细胞核注入去核的卵母细胞 15．（2025·浙江宁波·二模）胚胎工程中的体外受精技术，须将采集到的卵母细胞进行体外培养至成熟。下列叙述正确的是（　　） A．培养卵母细胞要在充满CO₂的培养箱中进行 B．培养基中添加灭菌的血清有利于卵母细胞的培养 C．初次培养的卵母细胞经传代培养可得到大量细胞 D．卵母细胞经培养至完成减数分裂后才可用于受精 16．（2025·江西上饶·二模）我国研究人员率先利用某组蛋白去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，通过调控重构胚相关基因表达，解决了体细胞克隆猴胚胎发育率低这一技术难点，培育出了第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 B．②过程去核实际上是去掉卵母细胞纺锤体—染色体复合物 C．使用合成培养基培养融合细胞时，需要额外再添加一些营养物质 D．Kd4d的mRNA能降低组蛋白甲基化水平，提高克隆猴胚胎发育率 17．（2025·黑龙江·二模）单克隆抗体药物是生物制药中最热门的领域之一，治疗方向覆盖肿瘤、心血管疾病、自身免疫病和新发突发传染病等领域。下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是（    ） A．对小鼠多次用同种抗原进行刺激的目的是获得大量抗体 B．用灭活病毒诱导细胞融合，以便获得分泌抗体的杂交瘤细胞 C．对融合后的细胞进行选择培养，以便获得能无限增殖的细胞 D．对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，目的是从培养液中提取单克隆抗体 18．（2025·山东潍坊·二模）科研人员分别利用两种抗原获得了能产生单克隆抗体的两种杂交瘤细胞，将两种杂交瘤细胞再次融合，得到了双杂交瘤细胞。该双杂交瘤细胞可产生能识别上述两种抗原的双特异性抗体。下列说法错误的是（　　） A．获得双杂交瘤细胞用到的技术主要有动物细胞融合、动物细胞培养 B．培养双杂交瘤细胞时，需提供CO₂维持培养液的pH C．获得的双杂交瘤细胞需要两种相应的抗原刺激后才能产生双特异性抗体 D．筛选双杂交瘤细胞时需使用制备两种杂交瘤细胞时所使用的两种抗原 19．（2025·云南曲靖·二模）下列研究中，主要运用体细胞核移植技术的是（    ） A．提供疾病模型动物 B．治疗帕金森综合征 C．生产单克隆抗体 D．培养可供移植的人体皮肤 20．（2025·江西鹰潭·二模）某些肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-1结合能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-LI和PD-1的结合，可恢复CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与化疗的联合治疗研究。已知黑色素瘤细胞能分泌吸引某类细胞靠近的细胞因子CXCL1。部分结果见图。下列叙述正确的是（    ）    A．联合疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加活化的CTL数量，还能使化疗药物靶向肿瘤细胞 B．据图示分析，联合疗法组肿瘤体积最小治疗效果最好的原因是模型小鼠体内CTL的数量更多 C．将CXCLI受体基因的表达载体导入CTL中，将其培育成小鼠，可进一步提高治疗效果 D．基于现有抗体—药物偶联物的思路，应选择化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起 21．（2025·河北衡水·二模）科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞能增殖分化为多种组织细胞，用于某些疾病的治疗。下列有关叙述正确的是（　　）    A．干细胞是从胚胎中分离提取的细胞 B．造血干细胞分化程度高于iPS细胞，且具有组织特异性 C．iPS细胞分化产生的组织细胞基因、蛋白质相同 D．获得iPS细胞的过程中，细胞的遗传物质一定不变 22．（2025·甘肃庆阳·二模）为了快速检测某病毒，以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，主要技术路线如图所示。下列叙述错误的是（　　）    A．步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射的是抗原和杂交瘤细胞 B．步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是能在体外无限增殖 C．③④培养的目的是扩大杂交瘤细胞的数量 D．单克隆抗体可以运载药物，也可以用于治疗疾病 23．（2025·云南红河·二模）大熊猫是中国特有的珍稀濒危动物，目前野生大熊猫大约有2000只。2024年，我国研究团队首创了大熊猫iPS细胞重编程方法，即把从大熊猫身上提取的普通皮肤细胞（皮肤成纤维细胞）重编程为干细胞，大致流程如图。据图分析，下列说法正确的是（    ） A．该研究中把外源性核酸导入体细胞的方法是显微注射法 B．体外培养大熊猫iPS细胞时要求无菌无毒且需要N2和O2 C．大熊猫的成纤维细胞和成熟红细胞理论上均可重编程为iPS细胞 D．大熊猫iPS细胞被诱导为其他细胞类型的过程②属于细胞的再分化 24．（2025·四川达州·二模）成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌及结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在肿瘤的标记物。将药物与特异性识别FGF20的单克隆抗体结合制成抗体-药物偶联物（ADC），可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，其制作过程如图。下列分析错误的是（　　） A．注射FGF20是为获得能产生特定抗体的B细胞，PEG可换为灭活病毒 B．筛选1和筛选2都利用了单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异 C．ADC通过抗体与肿瘤细胞膜上受体结合后，以胞吞方式进入肿瘤细胞 D．利用同位素或荧光标记的单克隆抗体在组织中成像，可定位诊断肿瘤 25．（2025·河北·二模）研究人员制备了37株iPS细胞系，将其中6株iPS细胞系注射入1500多个四倍体小鼠胚胎，最终3株iPS细胞系获得了27只活体小鼠，其中首只iPS细胞克隆鼠被命名为“小小”。下列相关叙述错误的是（    ） A．iPS细胞只能通过体外诱导小鼠的成纤维细胞转化获得 B．培养iPS细胞时需提供含CO2混合气体，以维持培养液的pH C．培养iPS细胞的过程中会发生接触抑制现象，此时细胞会停止增殖 D．首只iPS细胞克隆鼠“小小”的诞生，说明iPS细胞具有全能性 26．（2025·江苏南通·二模）单克隆抗体的发展经历了多个阶段，如最初的鼠源性单克隆抗体，其制备路线如图1所示。由其发展形成的嵌合性单克隆抗体，用人的恒定区取代小鼠的恒定区，保留鼠单抗的可变区序列，形成了人—鼠杂合的抗体，如图2所示。下列有关分析错误的是（    ）    A．蛋白A刺激小鼠和刺激人体产生的抗体结构不完全相同 B．小鼠体内抗体的种类与抗体基因的种类通常不是一一对应的 C．制备的人鼠嵌合单抗常用于制备病毒抗原检测的试纸 D．第二次筛选时将杂交瘤细胞接种到多孔培养板上进行克隆化培养和抗体检测 27．（2025·甘肃·二模）体外动物细胞培养制造出的细胞培养肉是一种人造肉，具有营养可控、结构仿真、口感真实的特点。其主要生产流程如下图，图中的微载体是一种固体的细胞生长基质，其表面能使细胞贴附。下列叙述错误的是（    ） A．①过程可用机械方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶处理获得细胞悬液 B．③④过程需使用经灭菌处理的培养液，富含细胞生长所需的营养物质 C．③过程加入微载体为细胞提供更大附着面积，延迟接触抑制出现，可增加产量 D．动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，培养过程中细胞通过有丝分裂增加细胞数目 28．（2025·安徽马鞍山·二模）我国研究人员通过体细胞核移植技术完全自主培育出了克隆猫。下列叙述正确的是（    ） A．制备供体细胞的培养基，再灭菌后再加入血清等一些天然成分 B．采集的卵母细胞通过显微操作去核后，再在体外培养到MII期 C．为了提高核移植的成功率可将重组细胞直接移植到代孕猫体内 D．对受体猫进行同期发情处理的目的是避免其对外来胚胎发生免疫排斥 29．（2025·广西来宾·二模）2024年9月25日，我国科学家邓宏魁研究团队在国际上首次报告了利用化学重编程诱导多能干细胞（CiPS）制备的胰岛细胞移植，实现了1型糖尿病的临床功能性治愈。具体治疗过程见下图，下列有关说法错误的是（    ） A．脂肪细胞变为CiPS细胞与CiPS细胞变为胰岛细胞，两者的实质是基因选择性表达 B．脂肪细胞变为CiPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程，是类似的 C．上图中的脂肪细胞、CiPS细胞、胰岛细胞的核DNA，是完全相同的 D．该治疗过程说明细胞分化具有可逆性，分化后的细胞在体内可恢复为初始状态 30．（2025·广东湛江·二模）2017年11月27日，世界上首个体细胞克隆猴在我国诞生！培育克隆猴的流程如下图所示。下列有关叙述正确的是（    ） A．克隆猴的成功培育体现了动物细胞具有全能性 B．灭活的仙台病毒短暂处理，目的是使mRNA和TSA容易进入细胞 C．对重构胚的处理目的是调节相关基因表达，提高胚胎的发育率 D．应选择健康且有正常繁殖能力的代孕母猴，移植前需进行免疫检查 31．（2025·浙江绍兴·二模）爆发性A族溶血性链球菌（GAS）能够在人体内迅速繁殖，他分泌的蛋白质类毒素可使患者产生相应抗体。对于疑似感染者，可以通过单克隆抗体检测机体产生的抗体，从而进行初步诊断。下列关于由小鼠杂交瘤细胞生产检测用单克隆抗体的叙述，错误的是（    ） A．需要利用细胞融合技术和细胞培养技术 B．需要给小鼠注射GAS分泌的蛋白质类毒素 C．需要多次筛选才能得到所需杂交瘤细胞 D．体内培养杂交瘤细胞无需使用CO₂培养箱 二、多选题 32．（2025·山东菏泽·二模）树突状细胞可迁移到抗原所在部位，受抗原刺激后，可在抗原所在部位增殖后大部分形成活化的树突状细胞，为探究该过程是否有记忆树突状细胞（可迁移到特异性抗原所在部位增殖分化）产生，研究人员将B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠分为甲、乙、丙三组进行相关实验，实验过程和结果如表所示。下列说法正确的是（    ） 项目 甲组 乙组 丙组 步骤① 腹腔注射生理盐水 腹腔注射B品系小鼠的肝细胞 腹腔注射C品系小鼠的肝细胞 步骤② 28天后去除骨髓，移植C品系小鼠的骨髓 步骤③ 7天后检测骨髓中活化的树突状细胞数量 树突状细胞数量 + + ++++ 注：同一品系小鼠不同细胞的抗原相同，用于移植的骨髓经过处理后只含抗原成分，其中的细胞不产生免疫应答，“+”的多少表示数量的多少。 A．注射B．C品系小鼠肝细胞的目的是诱导A小鼠机体产生记忆T细胞和记忆B细胞 B．用B细胞和T细胞都缺失的A品系小鼠作为实验材料排除了特异性免疫对实验的干扰 C．步骤②去除骨髓可以排除骨髓产生的树突状细胞对实验结果的影响 D．结果表明甲、乙、丙三组中只有丙组可检测到记忆树突状细胞的产生 33．（2025·山东日照·二模）过继性治疗适用于肿瘤晚期患者，是指将具有抗肿瘤活性的细胞回输给肿瘤患者机体进行治疗。过继性治疗相关过程如图所示。下列说法正确的是（　　） A．过继性细胞治疗中，需从健康人体内获得能特异性杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞 B．筛选时；需要加入肿瘤细胞表面抗原筛选出特异性杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T细胞 C．扩大培养时，细胞会因有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等出现分裂受阻 D．过继性治疗过程中不会产生免疫排斥反应，同时具有特异性强、毒副作用小等优点 34．（2025·江西·二模）CD47是一种跨膜糖蛋白,它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合,从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6倍至5倍,导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测,抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用,为此他们按照如下流程进行了实验。下列叙述正确的是（　　） A．多次进行步骤①的处理目的是获得更多抗CD47抗体 B．图中②③都需要使用特定的选择性培养基进行筛选 C．实验组中巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系需要适宜的温度和pH D．对照组应设置为不加单克隆抗体的巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系 35．（2025·江西上饶·二模）某病毒颗粒表面有蛋白S（含有多种不同的抗原决定簇，每种抗原决定簇能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员利用小鼠（2N）采用杂交瘤技术制备了抗S单克隆抗体（只考虑细胞两两融合），过程如图。相关叙述错误的是（　　）    A．给小鼠注射抗原蛋白S后应从小鼠肝脏中提取B淋巴细胞 B．诱导融合的杂交瘤细胞染色体组数最多可达到8个 C．可用同一种方法筛选杂交瘤细胞和单一类型的杂交瘤细胞 D．单克隆抗体A和单克隆抗体B均能检测S蛋白 36．（2025·内蒙古包头·二模）某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（能刺激机体产生多种抗体）。为高效检测S蛋白，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体（如下图）。下列叙述正确的是（    ） A．利用纤维素酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞 B．细胞融合后需用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞 C．图中的两种单克隆抗体可能相同，也可能不同 D．图中的两种单克隆抗体都能够特异性识别S蛋白 37．（2025·江西新余·二模）2024年《科学》杂志报道，科学家成功研发新型抗体-药物偶联物（ADC）“DS-8201”，该药物由靶向HER2蛋白的单克隆抗体与细胞毒性药物ENH-1通过可裂解连接子偶联而成，用于治疗HER2阳性乳腺癌。下列叙述正确的是（　　） A．制备DS-8201中的单克隆抗体，需将HER2蛋白注入小鼠体内以激活B淋巴细胞 B．体外培养杂交瘤细胞时，需定期更换培养液以清除代谢废物和补充营养物质 C．ENH-1能够特异性识别并杀伤HER2阳性乳腺癌细胞，而对正常细胞无影响 D．该药物在溶酶体中被降解后释放ENH-1，体现了连接子的“可裂解”特性 38．（2025·江苏南通·二模）单倍体胚胎干细胞是指只含一套染色体，但拥有类似于正常干细胞分裂、分化能力的细胞群。利用小鼠建立单倍体胚胎干细胞的操作如下图。下列叙述错误的是（    ）    A．过程①中，用于受精的卵母细胞处于MⅡ B．获得的单倍体胚胎干细胞中，性染色体为X或Y C．该操作涉及体外受精技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术等 D．过程②、③、④透明带和卵细胞膜之间存在1个第一极体和1个第二极体 39．（2025·辽宁沈阳·二模）抗糖化血红蛋白的单克隆抗体常作为糖尿病诊断试剂。糖化血红蛋白（HbA1c）与牛血清白蛋白（BSA）结合形成偶联物（HbAlc-BSA）后才能激活免疫系统。利用同品系小鼠的骨髓瘤细胞与B细胞制备抗HbAlc的单克隆抗体。下列叙述错误的是（    ） A．向小鼠注射HbA1c-BSA是为了获得同时抗HbA1c和BSA的抗体 B．PEG诱导细胞融合后可通过分析染色体数目来筛选杂交瘤细胞 C．经多次筛选最终得到的杂交瘤细胞既能大量增殖又能分泌所需抗体 D．利用单克隆抗体与HbAlc特异性结合实现糖尿病快速灵敏诊断 40．（2025·山东临沂·二模）PSMA是某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白，CD28是T细胞表面受体。将两株不同杂交瘤细胞融合形成的双杂交瘤细胞，既能够悬浮在培养基中生长繁殖，又可以产生双特异性抗体PSMA×CD28。PSMA×CD28既能选择性地靶向结合某种癌细胞表面的PSMA蛋白，又能特异性地结合T细胞表面的CD28蛋白，从而激活T细胞，通过活化的T细胞来识别和杀灭目标癌细胞。图1所示为双特异性抗体PSMA×CD28的制备流程，图2所示为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理。下列分析正确的是（    ） A．①过程需给小鼠分别注射PSMA蛋白、CD28蛋白，才能最终得到图2中有效激活T细胞和杀伤癌细胞的双特异性抗体PSMA×CD28 B．图1至少进行3次抗原检测进行筛选才能得到双杂交瘤细胞XY，最后一次筛选需在96孔板的孔洞中同时加入PSMA和CD28蛋白 C．对⑤过程得到的双杂交瘤细胞进行传代培养前，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 D．获得的杂交瘤细胞XY要置于含有95%空气和5%混合气体的培养箱中进行培养 三、解答题 41．（2025·河南许昌·二模）动物器官移植到人体内（异种移植）或是解决全球器官紧缺的办法之一、研究团队对猪肾内皮细胞进行基因编辑、改造后，得到了3种工程细胞和可提供异种移植肾源的供体猪。具体流程及部分测量数据如图示。 (1)研究证实供体猪的3个聚糖抗原基因（3KO）会导致人类、猴等受体的组织不相容。若以未经改造的猪肾作为异体肾源进行器官移植，受体动物的 细胞和抗体都有可能对供体器官产生特异性攻击效应，导致出现 现象。利用CRISPR—Cas9编辑技术敲除肾内皮细胞的3KO，该技术需人工设计一种“向导”RNA，其部分序列与3KO遵循 原则结合，并引导Cas9蛋白断裂DNA双链，从而敲除3KO。 (2)研究表明7个人类基因（7TG）可增加不同物种之间的兼容性。获取7TG的方法有 （答出一种即可）。 (3)为验证敲除3KO、插入7TG对异体细胞的保护作用，研究者将三组细胞与受体猴血清共孵育，置于CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是 。测量裂解细胞数如图示。据此得出结论 。 (4)供体猪器官常携带多种病毒，其中部分病毒潜在人畜传播风险。例如已有实验证明PERV（猪内源性逆转录病毒）可以整合到体外培养的人类细胞基因组中。试分析若给人进行异种移植，PERV的基因可能通过供体猪器官整合到人类基因组的途径 。因此，为确保安全，对已构建好的3KO.7TG.细胞需要进行灭活PERV处理，且在临床试行前须在动物模型中测试。 (5)从3KO.7TG.RI.细胞通过④过程构建供体猪所利用的现代生物学技术有 （至少答出两种）。 42．（2025·山西临汾·二模）H1N1病毒是甲型流感病毒的一种，也是人类最常感染的流感病毒之一，该病毒危害性很大，可利用细胞工程生产H1N1病毒抗体用于检测和治疗，生产流程图如下。请回答下列有关问题。 (1)图中X细胞和Y细胞分别代表 和 。 (2)经过①②过程获得的肝细胞与神经细胞的核基因 (填“相同”或“不相同”)，mRNA (填“相同”或“不相同”)。 (3)③过程先用选择培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，再将其接种到96孔板上进行培养和 检测，经过多次筛选后选择出 。在96孔板的每个孔中尽量只接种1个细胞，原因是 。 (4)已知H1N1病毒表面同一抗原的不同位点可分别与抗体1和抗体2发生特异性结合。现将制备好的H1N1抗体1和H1N1抗体2用于检测患者是否感染H1N1，原理如下图，其中待测液体加到A处样本垫，B处含有过量游离的结合胶体金的抗体1，C处的垫子上固定有抗体2，D处垫子上固定有与抗体1特异性结合的抗体。将待测液体加到A处，一段时间后，若 处会变为红色(填图中字母)，则说明受检个体感染H1N1。 注：胶体金与抗体1结合后可显红色胶体金和抗原与抗体1的结合位点不同，且不固定在垫子上。 43．（2025·四川宜宾·二模）白藜芦醇属于多酚类化合物，具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等功能。科研人员尝试利用植物细胞工程技术规模化生产白藜芦醇，并结合免疫检测技术开发快速检测方法。回答下列问题。 (1)白藜芦醇可由虎杖代谢产生，但并非是虎杖生长和生存所必需的，白藜芦醇是虎杖的 （填“初生代谢物”或“次生代谢物”）。 (2)取虎杖无菌幼苗的茎尖作为外植体，切成小段后接种于培养基中，诱导其 ，即失去其 ，进而形成愈伤组织，愈伤组织的特点是 ，将愈伤组织进行悬浮培养，诱导产生白藜芦醇。 (3)白藜芦醇直接免疫机体不能产生抗体，可将其与牛血清蛋白偶联，进而诱导机体产生抗体。科研人员利用细胞工程技术制备抗白藜芦醇单克隆抗体的基本流程如图所示： 抗原X为 ，细胞A具有的特点是 ，过程③需要对细胞A进行 ，经过多次筛选，就可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，体外培养所需细胞时，需要定期更换培养液，目的是 。 44．（2025·北京朝阳·二模）哺乳动物的脂肪组织包含白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）。研究者研究了BAT对癌细胞的影响。 (1)糖酵解是癌细胞获得能量的重要途径。糖酵解是有氧呼吸的第一阶段，该途径将葡萄糖分解为 ，同时产生H+，H+被转运到胞外，引起细胞外酸化。 (2)细胞外酸化速率（ECAR）反映细胞糖酵解能力。检测体外培养的乳腺癌细胞的ECAR，结果如图1。 ①加入寡霉素后，ECAR继续上升的原因是细胞有氧呼吸受抑制， ，糖酵解加快。 ②加入葡萄糖和寡霉素后，ECAR值的变化均来源于糖酵解的速率变化而非其它产H+途径的变化，证据是 。 (3)BAT在成年动物体内量很少。研究者向WAT中导入特定基因表达载体，使其转化为BAT，利用图2所示装置共培养BAT和乳腺癌细胞3天后，分离癌细胞，测定其数量和糖酵解能力。 ①与直接将两种细胞混合培养相比，图2装置可排除BAT细胞通过 影响癌细胞的可能。 ②该实验设两组对照，对照组1为癌细胞单独培养，对照组2为 。 (4)实验结果显示，两个对照组间无显著差异，而实验组与对照组差异显著，表明BAT对癌细胞的增殖和糖酵解能力有抑制作用。请在ECAR检测结果图中补充绘制实验组曲线。 胚胎工程考点03 一、单选题 1．（2025·河北石家庄·二模）我国研究人员经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴。下列相关叙述正确的是（　　） A．体细胞核移植需用取自新鲜卵巢的卵母细胞直接做受体细胞 B．常用Ca2+载体或聚乙二醇激活重构胚，使其完成分裂和发育进程 C．需将重组细胞体外培养至早期囊胚再进行胚胎移植 D．胚胎移植前需要对供体猴与受体猴进行同期发情处理 2．（2025·江西萍乡·二模）我国科学家从食蟹猴体内分离出胚胎干细胞，将其注射到猪胚胎中，得到的嵌合胚胎再移植到代孕母猪体内，培育出了“猪 - 猴嵌合体”仔猪，过程如下图。下列说法错误的是（    ） A．胚胎干细胞存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内任何一种类型的细胞的潜能 B．以上过程涉及了动物细胞培养、动物细胞核移植、胚胎分割、胚胎移植等技术 C．若将发育到桑葚胚或囊胚的嵌合胚胎进行均等分割，可能提高胚胎的利用率 D．胚胎移植前对代孕母猪进行同期发情处理，是为了给嵌合胚胎提供适宜的发育环境 3．（2025·山东青岛·二模）促红细胞生成素(EPO)是一种激素样蛋白质，可促进体内红细胞生成。人类可通过基因工程合成EPO基因，并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物，其过程如图。下列说法正确的是（　　） A．为得到更多的卵母细胞，可在步骤②注射雌激素或孕激素 B．采集的卵母细胞可以直接和精子进行受精 C．可以在转EPO基因仓鼠的任意细胞获得EPO成分 D．培养细胞时需要将其放在95%空气和5%CO2的混合气体 4．（2025·江西上饶·二模）我国研究人员率先利用某组蛋白去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，通过调控重构胚相关基因表达，解决了体细胞克隆猴胚胎发育率低这一技术难点，培育出了第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植 B．②过程去核实际上是去掉卵母细胞纺锤体—染色体复合物 C．使用合成培养基培养融合细胞时，需要额外再添加一些营养物质 D．Kd4d的mRNA能降低组蛋白甲基化水平，提高克隆猴胚胎发育率 5．（2025·天津·二模）一种能实现“线粒体置换”目的的技术原理如图所示，该技术可预防人类线粒体遗传病传给子代。下列叙述正确的是（    ） A．供体次级卵母细胞中含有46个DNA分子 B．图中重组次级卵母细胞中含有两条X染色体 C．重组次级卵母细胞膜外极体的遗传物质与患者相同 D．患者第一极体基本不携带线粒体遗传病的致病基因 6．（2025·河北唐山·二模）下列有关细胞工程技术的说法，错误的是（　　） A．可以采用显微操作法去除卵母细胞的细胞核 B．体外培养干细胞时加入血清以补充某些营养物质 C．制备单克隆抗体时，经选择培养基筛选即可得到杂交瘤细胞 D．当胚胎处于囊胚阶段时，应取内细胞团细胞做DNA分析，鉴定性别 7．（2025·山东泰安·二模）由PRRSV病毒引发的传染病—“猪繁殖与呼吸综合征”俗称猪蓝耳病，是对猪最具经济破坏性的疾病。科学家通过以下流程培育能自动产生PRRSV抗体的转基因克隆猪，进而对该病进行诊断和治疗。下列说法正确的是（    ）    A．获得D猪的基础技术是动物体细胞核移植技术 B．步骤①通常采用离心法使两细胞融合 C．步骤②中可采用Ca2+载体激活重构胚 D．步骤③中涉及的主要是胚胎早期培养技术 8．（2025·广东广州·二模）研究发现，将牛的重构胚的染色体组蛋白上特定位点的甲基化去除，可提高重构胚的发育率和牛体细胞核移植的成功率。下列说法错误的是（    ） A．可将供体细胞注入去核卵母细胞中形成牛的重构胚 B．向重构胚注入去甲基化酶的mRNA可能有助于胚胎正常发育 C．应将重构胚培养至囊胚或原肠胚后移植入受体母牛子宫 D．推测表观遗传现象是制约体细胞核移植成功的原因之一 9．（2025·安徽淮南·二模）我国科学家综合利用多种现代生物技术，首次在猪胚胎内培育出主要由人体细胞构成的“人—猪嵌合中期肾”，且维持到胚胎第28天（过程如图所示）。已知胚胎在未分化前细胞间相互连接比较松散，可塑性强。过程①采用了CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除掉与猪肾脏发育密切相关的关键基因SLX1。下列相关叙述正确的是（    ）    A．采用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除基因SLX1，可促进人源化肾脏的发育 B．过程③中选择猪的桑葚胚或原肠胚等早期胚胎导入iPS细胞成功率更高 C．动物细胞应放入含5%CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞呼吸 D．利用胚胎分割技术增加人源化中肾数量的过程属于有性生殖 10．（2025·内蒙古包头·二模）胚胎工程技术可以用于品质优良奶牛的扩大繁殖。下列叙述错误的是（    ） A．采集的新鲜精子经获能处理后可用于体外受精 B．受精卵发育成桑葚胚或囊胚时可用于胚胎分割 C．同一胚胎经分割产生的后代具有不同的遗传物质 D．外源促性腺激素处理供体母牛可诱发超数排卵 11．（2025·山西太原·二模）在生物工程的许多技术中，“检查”“筛选”等操作步骤至关重要。下列有关叙述错误的是（    ） A．卵母细胞在进行体外受精前，需要检查其是否发育到MⅡ期 B．制备单克隆抗体时，用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 C．培育克隆动物时，在胚胎移植后需对代孕母体进行妊娠检查 D．筛选雌性胚胎时，需取囊胚期的内细胞团细胞做DNA分析 12．（2025·云南红河·二模）大熊猫是中国特有的珍稀濒危动物，目前野生大熊猫大约有2000只。2024年，我国研究团队首创了大熊猫iPS细胞重编程方法，即把从大熊猫身上提取的普通皮肤细胞（皮肤成纤维细胞）重编程为干细胞，大致流程如图。据图分析，下列说法正确的是（    ） A．该研究中把外源性核酸导入体细胞的方法是显微注射法 B．体外培养大熊猫iPS细胞时要求无菌无毒且需要N2和O2 C．大熊猫的成纤维细胞和成熟红细胞理论上均可重编程为iPS细胞 D．大熊猫iPS细胞被诱导为其他细胞类型的过程②属于细胞的再分化 13．（2025·四川达州·二模）我国科学家成功利用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（　　） A．过程①的小分子化合物诱导成纤维细胞突变为iPS细胞 B．过程②的实质是通过显微操作去除核膜包被的细胞核 C．Kdm4d的mRNA和TSA能激活重构胚，使其完成发育进程 D．当重构胚发育到原肠胚时进行胚胎移植可增大移植成功率 14．（2025·辽宁沈阳·二模）利用动物体细胞核移植技术促进优良畜群繁育。下列叙述错误的是（    ） A．采用紫外线短时照射卵母细胞可达到“去核”的效果 B．供体细胞需来自遗传性状优良的个体 C．利用Ca2+载体或电刺激可激活重构胚 D．最好选择原肠胚进行分割来提高胚胎利用率 15．（2025·浙江金华·二模）2011年我国首次利用转基因和体细胞核移植技术成功培育了高产赖氨酸转基因克隆奶牛，其乳汁中含有较高含量的赖氨酸。其基本流程为：构建乳腺专一表达载体→表达载体导入牛胚胎成纤维细胞（BEF）→核移植→重组细胞的体外培养及胚胎移植→检测。下列叙述错误的是（　　） A．表达载体导入的牛胚胎成纤维细胞（BEF）为供体细胞 B．需将重组细胞体外培养至桑椹胚或囊胚再进行胚胎移植 C．高产赖氨酸转基因克隆奶牛的性别与胚胎受体母牛无关 D．检测时可选取克隆奶牛牛耳组织细胞检测目的基因的表达情况 16．（2025·福建·二模）我国科学家通过诱导转录因子过表达抑制DNA复制，将小鼠成纤维细胞培养成单倍体滋养层干细胞，这些干细胞可无限增殖且具有分化能力。下列叙述错误的是（    ） A．成纤维细胞转化成单倍体滋养层干细胞的原理是染色体变异 B．单倍体滋养层干细胞可被诱导分化为胚胎的上皮组织 C．培养单倍体干细胞有助于发现某些未知的隐性突变基因 D．该成果可为基因筛查及遗传病机制的研究提供模型 17．（2025·河南新乡·二模）科学家通过培育小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞，成功获得了“1母亲0父亲”的雌性小鼠，且该雌性小鼠能正常生殖产生后代，有关技术如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A．用雌激素对母鼠进行超数排卵处理可以获得更多的卵母细胞 B．图中过程①②的分裂方式分别为减数分裂和有丝分裂 C．用于过程③的细胞取自孤雌单倍体囊胚中的内细胞团 D．第2阶段的卵子为次级卵母细胞，过程④为减数分裂Ⅱ的部分过程 18．（2025·河北衡水·二模）中国空间站在国际上首次实现干细胞在太空早期造血。在太空培养的干细胞呈现出优于地面的生长方式，在微重力环境中干细胞的体外培养更接近于胚胎内干细胞的增殖与分化。下列关于干细胞的叙述，不正确的是（　　） A．造血干细胞只能分化为特定的细胞或组织 B．诱导多能干细胞应用前景优于胚胎干细胞，但临床应用会有导致肿瘤发生的危险 C．可以借助载体将特定基因导入已分化的B细胞或成纤维细胞转化而来 D．干细胞的分化会导致细胞形态结构及遗传物质改变 19．（2025·山西临汾·二模）下列有关动物细胞工程及胚胎工程的说法正确的是（　　） A．动物细胞在体外培养时一般有接触抑制现象，而癌细胞体外培养时不出现接触抑制 B．人体内的干细胞包括胚胎干细胞、造血干细胞、诱导多能干细胞等多种类型 C．PEG融合法适用于诱导原生质体融合钙离子载体法适用于诱导动物细胞融合 D．进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应 20．（2025·黑龙江哈尔滨·二模）猪因其生理特性、器官大小以及胚胎发育过程等方面与人类存在高度相似性，已成为“种植”人类器官极具潜力的动物模型。如图表示我国科学家利用猪作为载体，培育可供人类移植使用的人源肾脏的相关流程示意图。下列相关叙述错误的是（    ） A．推测SIXI和SALLI两种基因是猪肾脏发育必需的基因 B．一般用显微操作去核法获得去核的卵母细胞 C．该实验流程中涉及了体外受精、动物细胞培养、核移植、胚胎移植等生物技术 D．注入人源干细胞的目的是使人源干细胞分裂分化产生人的器官 21．（2025·辽宁·二模）在细胞工程中，一种技术手段的实施可能需要另一种技术手段的支持。下列说法错误的是（    ） A．单克隆抗体制备过程离不开动物细胞培养 B．胚胎分割技术能大大提高胚胎移植的成功率 C．核移植后要进行胚胎移植才能获得克隆动物 D．植物体细胞杂交要经历植物组织培养这一阶段 22．（2025·河南郑州·二模）青海的科研人员对陶赛特母羊超数排卵处理后，收集卵子使其在体外成熟，同时采集陶赛特公羊的精子并获能处理，在体外环境中完成受精和早期胚胎发育，将胚胎移植到经同期发情处理的藏系母羊子宫中，成功获得了数量可观的陶赛特试管羊。下列相关叙述正确的是（    ） A．排出的卵子已经完成了减数分裂 B．藏系羊和陶赛特羊不存在生殖隔离 C．精子获能是使精子获得受精所需能量 D．陶赛特试管羊比陶赛特杂交羊更优质 23．（2025·河南安阳·二模）中国科学家首次利用嵌合胚胎成功构建了高比例胚胎干细胞的活嵌合体猴，部分过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．不能用某种成体干细胞替代胚胎干细胞 B．嵌合囊胚发育至原肠胚期再进行胚胎移植 C．胚胎干细胞的培养液中应添加一定量的动物血清 D．嵌合体猴的培育为遗传修饰模型猴的构建奠定了基础 24．（2025·内蒙古赤峰·二模）下列关于早期胚胎发育的叙述正确的是（　　） A．精子获能后与卵子结合，卵子一经排出就具各受精能力 B．桑葚胚阶段，在胚胎的内部开始出现含有液体的腔 C．经胚胎移植产生的后代，其遗传特性与受体保持一致 D．进行胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查 25．（2025·江西九江·二模）下图为我国科学家培育克隆猴“中中”和“华华”的流程图，其中组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）和组蛋白脱乙酰酶抑制剂（TSA）在基因表达调控中发挥重要功能。科学家高超的操作是成功的关键：可在10秒之内完成去核操作，在15秒之内将体细胞注入去核的卵母细胞中。下列说法错误的是（    ）    A．图中灭活的仙台病毒短暂处理的目的是诱导细胞融合 B．科学家高超的操作技巧可大大减少对卵母细胞的损伤 C．Kdm4d和TSA都有助于重构胚完成相关基因的表达 D．出生的克隆小猴的表型与图中胎猴的表型完全相同 26．（2025·四川广安·二模）科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出克隆鼠，具体流程如图所示。下列相关说法错误的是（    ） A．克隆鼠的遗传物质来自黑鼠，与胚胎供体灰鼠和代孕白鼠无关 B．进行性别鉴定和遗传病筛查常取囊胚内细胞团细胞进行DNA分析 C．可利用特定基因、特定蛋白或者小分子化合物等来诱导形成iPS细胞 D．2细胞胚胎可从灰鼠输卵管内获得，也可体外受精后进行胚胎培养获得 27．（2025·安徽安庆·二模）异体器官移植是替代器官功能的有效途径。中国科学家综合利用多种现代生物技术，在猪的体内培育出了一个“人—猪嵌合中期肾”，部分流程如下图所示，图中数字表示相关过程。已知胚胎在未分化前相互连接比较松散，可塑性强。下列相关叙述正确的是（    ） A．选择猪的桑葚胚或原肠胚等早期胚胎导入ipsc成功率更高 B．过程②使用蛋白酶合成促进剂激活重构胚发育成早期胚胎 C．利用胚胎分割等有性生殖技术可以增加人源化中肾的数量 D．过程④选择的受体母猪应具有健康的体质和正常繁殖能力 28．（2025·浙江温州·二模）动物细胞培养技术在生物制药、疾病治疗等领域中发挥着重要作用。关于动物细胞培养技术的应用，下列叙述错误的是（    ） A．培养哺乳动物受精卵至原肠胚阶段，用于胚胎移植 B．培养干细胞并诱导分化，用于治疗细胞损伤或病变 C．培养正常细胞并观察药物对其的影响，评估药物的疗效和安全性 D．培养杂交瘤细胞制备单克隆抗体，用于癌症及免疫性疾病的治疗 29．（2025·江苏盐城·二模）体外培养发现绝大多数的克隆胚胎在囊胚阶段出现发育阻滞，用Wnt信号通路抑制剂处理后，出生率可大幅提高。下列叙述正确的是（    ） A．胚胎发育早期依次经历卵裂、囊胚和桑葚胚阶段 B．胚胎发育过程中部分细胞凋亡是基因选择性表达的结果 C．Wnt信号通路持续异常激活可促进克隆胚胎发育过程 D．动物克隆需利用动物细胞培养、同期发情和胚胎移植等技术 30．（2025·江苏盐城·二模）体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可为胚胎移植提供可用的胚胎。 下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的是（    ） A．精子入卵后细胞膜会迅速发生生理反应，阻止其他精子进入卵细胞 B．在精子的刺激下，卵子完成减数分裂 II ，排出第二极体后形成雌原核 C．“设计试管婴儿 ”利用了体外受精技术、胚胎移植技术和遗传学诊断技术 D．对奶牛胚胎进行分割时，应选择发育良好、形态正常的原肠胚进行均等分割 31．（2025·四川成都·二模）Foxn1基因对于功能性胸腺的形成是必要的，其突变导致无胸腺表型。研究人员将某小鼠的胚胎干细胞注射至Foxn1基因突变的桑葚胚中形成嵌合胚胎，将嵌合胚胎移入受体小鼠的子宫内，成功培育出含有正常胸腺的嵌合体小鼠。下列叙述正确的是（    ） A．导入的胚胎干细胞发育成正常胸腺体现了动物细胞的全能性 B．嵌合胚胎在原肠胚阶段切割后移植可获得更多的嵌合体小鼠 C．植入胚胎前通常需对受体小鼠注射促性腺激素使其超数排卵 D．嵌合体小鼠体内不同部位的体细胞遗传信息不一定是相同的 32．（2025·吉林长春·二模）通过多种方法获得的早期胚胎，均需经胚胎移植获得后代。下列相关叙述正确的是（　　）    A．胚胎移植前可取内细胞团的细胞进行性别鉴定 B．①试管动物的性状几乎与供体母本性状相同 C．获得动物②的过程属于无性繁殖 D．③过程获得的干扰素常用于治疗细菌感染性疾病 33．（2025·江苏泰州·二模）精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，用该方法制备转基因鼠的基本流程如图所示。下列叙述正确的有（　　） A．①过程中精子获能后细胞膜的流动性增加 B．②过程采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质都来自父母双方 C．③过程形成的早期胚胎发育到桑葚胚或原肠胚才能进行胚胎移植 D．④过程进行胚胎移植前需要对供体和受体进行超数排卵处理 二、多选题 34．（2025·江苏南京·二模）利用胚胎工程等技术可以提高奶牛的繁殖能力。如图表示繁殖良种奶牛以及获取胚胎干细胞的流程。下列叙述错误的有（　　） A．获得早期胚胎的途径除体外受精外还有核移植、体内受精和胚胎分割等 B．①过程可产生遗传物质相同的同卵双胎，此过程属于有性繁殖 C．胚胎干细胞培养与早期胚胎培养所用培养液成分相同，且都需加入血清 D．图中②过程涉及胚胎性别鉴定、胚胎移植、妊娠检查等技术 35．（2025·内蒙古·二模）下图为运用胚胎移植技术培育高产奶牛的过程。在胚胎移植前，工作人员要借助公牛Y染色体上的SRY基因设计引物，构建PCR体系鉴定胚胎性别。下列说法正确的是（　　） A．需对普通黄牛与供卵的高产奶牛进行同期发情处理 B．采集到的精子和卵母细胞要分别进行获能处理和成熟培养 C．可从囊胚中选取滋养层细胞提取DNA，进行性别鉴定 D．将SRY-PCR检测呈阳性的胚胎移植后，可得到高产奶牛 36．（2025·江苏南通·二模）单倍体胚胎干细胞是指只含一套染色体，但拥有类似于正常干细胞分裂、分化能力的细胞群。利用小鼠建立单倍体胚胎干细胞的操作如下图。下列叙述错误的是（    ）    A．过程①中，用于受精的卵母细胞处于MⅡ B．获得的单倍体胚胎干细胞中，性染色体为X或Y C．该操作涉及体外受精技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术等 D．过程②、③、④透明带和卵细胞膜之间存在1个第一极体和1个第二极体 37．（2025·河北衡水·二模）成体干细胞是指存在于已经分化组织中的未完全分化的细胞，能自我更新且能特化形成所在组织中的一种或多种细胞。下列叙述错误的是（　　） A．骨髓中造血干细胞通过分裂和分化可产生各种血细胞属于多向分化潜能，体现了细胞全能性 B．神经干细胞体外增殖方式一定为有丝分裂，体外分化过程与细胞内基因表达的调控有关 C．一般认为，成体干细胞具有发育成完整个体的能力 D．自体造血干细胞移植可用于治疗系统性红斑狼疮 三、解答题 38．（2025·贵州·二模）天然抗性蛋白基因表达的N蛋白可抑制多种胞内寄生菌的感染，技术人员通过转基因技术获得了含有N蛋白基因的荷斯坦牛，其中，采用细胞工程技术进行了相关操作，过程如图所示。 回答下列问题： (1)N蛋白基因表达载体中，标记基因的作用是 ，该基因表达载体构建的基本操作是 。 (2)图中①操作的目的是 。②过程指的是 ，该过程需要对受体母牛进行同期发情处理，其作用是 。 (3)激活重构胚的具体方法有 （答出1点即可）。为提高重构胚胎的利用率，短时间内获得更多转基因荷斯坦牛，请写出实验思路 。 39．（2025·辽宁鞍山·二模）图1是我国科学家利用胚胎干细胞建立体外胚胎和胚胎发育潜能研究的流程。人胚胎干细胞存在两种不同状态，即原始态（naive）和始发态（primed）．naive干细胞具有最高的发育潜能，primed干细胞全能性相对较低。图2是OGT、OGA以及细胞骨架蛋白在胚胎干细胞中表达情况的电泳图谱，OGT是负责在蛋白质上加糖基的酶，OGA是负责将糖基从蛋白质上去除的酶。 (1)猴子芽体相当于 期的胚胎，过程③的起点细胞应取自芽体的 部位。 (2)过程④⑤形成的胚胎是 。过程⑥需对受体母猴进行的处理是 。 (3)据图2推测，naive干细胞发育潜能更高的原因可能是 ；该实验设置细胞骨架蛋白表达量组别作为对照的作用是 。 (4)过程①需在图2中的诱导培养基中完成，目的是 。与过程①相比，过程②培养液中还应添加 。 40．（2025·四川成都·二模）有些人由于乳糖酶分泌少，不能完全消化牛奶中的乳糖，饮用牛奶后易出现腹泻等不适症状，这称为乳糖不耐受。为了解决这一问题，科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，使获得的转基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响。根据如下操作流程回答相关问题：    (1)为了获得更多的卵母细胞，在进行①过程前，需要用 处理奶牛A，从输卵管中采集卵母细胞后，还需要体外培养至 期，才可以进行③过程。通过图中②过程采集的B奶牛精子不能直接使成熟的卵细胞受精，常要用化学诱导法对奶牛的精子进行 处理，即用一定浓度的 处理。 (2)⑤过程表示将重组质粒导入受体细胞，常用的方法是 。 (3)⑥过程在移植胚胎前，可以选择发育良好、形态正常的 进行胚胎分割。 (4)外源基因插入奶牛受精卵中的DNA上后，导致有的受精卵发育成转基因奶牛，有的会死亡。分析导致受精卵死亡的最可能原因是 。⑦过程的检测结果为 时，说明转基因奶牛D是符合要求的优质牛。 41．（2025·陕西咸阳·二模）基因编辑技术在胚胎工程中得到广泛的应用。如图1表示利用基因编辑技术培养小鼠B的过程，图2表示使用CRISPR/dCas9技术进行基因编辑的过程，其中dCas9不具有内切核酸酶活性，它能与不同作用的酶（A）结合，对基因进行定点修饰。回答下列问题。      (1)图1中，从卵泡中取出卵母细胞进行体外培养，需要的气体环境是 ，培养基中通常需要加入血清等一些天然成分的原因是 。 (2)图1中，将极体注入次级卵母细胞常采用的方法是 ，该过程的作用相当于 。对卵母细胞进行H19和Gt12基因甲基化，lgf2r、Snrpn等多个基因去甲基化处理的目的是 。 (3)图1中将囊胚移植到代孕母鼠之前，需要对代孕母鼠进行 处理。 (4)图2中，使用CRISPR/dCas9技术对基因编辑时，sgRNA的作用是 ，设计sgRNA时应保证 。目标序列的甲基化和去甲基化的遗传效应属于 。 试卷第1页，共3页 2 / 2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$