人教版高中生物选修三专题一第一节《DNA重组技术的基本工具》课件（共20张PPT）

DNA重组技术的基本工具 2016.4.27 问题展示一 限制酶 1、限制酶作用中要点？ 2、限制酶把这个化学键（？）剪断后产生了什么样的结果？ 3、限制酶可以剪切任何长度（两个要点）的序列吗？ 问题解决 1.限制性核酸内切酶的分布？ 2.限制性核酸内切酶的作用？ 练习；限制性核酸内切酶能不能识别并切割RNA序列？ 主要从原核生物中分离纯化（细菌和霉菌）。 能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间磷酸二酯键断开。 3.内切酶切割DNA后形成的末端——黏性末端、平末端是如何形成的？ 4.识别序列的组成:大多数由六个核苷酸组成 5.切割后产生的DNA片段末端的形式 总结规律: 限制酶所识别的序列有什么特点？ 无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段： (1) …CTGCA    (2) …AC    (3) GC…    …G            …TG        CG…（4） …G      (5)    G…  (6) …GC       …CTTAA     ACGTC…      …CG (7) GT…       (8)AATTC…      CA…              G… 你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？ 6.限制性核酸内切酶的特点是？ 练习：限制酶与解旋酶作用位点的区别？ 具有特异性。 问题展示二 DNA连接酶 1DNA连接酶来自哪两种生物，又被命名为分成哪两类DNA连接酶？ 2 DNA连接酶是连接的限制酶剪切的末端吗？若是，怎么连接？有何不同之处? 3 DNA连接酶与DNA聚合酶作用的区别？（连接DNA链,连接部位,相同点） 2. DNA连接酶的作用？E.coliDNA连接酶与T4DNA连接酶作用区别？ DNA连接酶连接的是主链还是氢键？ 差别: E.coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之间进行连接; T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,