河北省张家口市桥西区张家口市第一中学2024-2025学年高二下学期5月期中生物试题

高二年级第二学期期中考试 生物试题 1、 单项选择题：本大题共20小题，每小题2分，共40分。每小题只有一个选项符合题目要求。 1．酵母菌不但能用于酿酒，还能用于发面，下列有关说法错误的是（　　） A．酵母菌呼吸产生的二氧化碳使馒头、面包等更松软 B．酵母菌有氧呼吸的主要场所是线粒体 C．酵母菌的代谢类型是自养兼性厌氧型 D．发面时加点糖有利于酵母菌的繁殖 2．下列有关酵母菌纯培养过程的叙述，不正确的是（    ） A．该实验包括配制培养基、灭菌、倒平板、接种、分离和培养等步骤 B．培养基的灭菌既可用湿热灭菌法，也可用干热灭菌法 C．接种环蘸取一次菌液后连续划线，每次划线前需要对接种环灼烧灭菌 D．待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板 3．某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。某同学进行了“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验，具体操作流程如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．分解尿素的细菌能合成脲酶，该酶是蛋白质 B．取土样时用的铁铲和取样纸袋在使用前都需要灭菌 C．实验中制备3个平板以减小偶然因素导致的实验误差 D．5号试管的计数结果表明每克土壤中的活菌数约为1．7×107个 4．由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在食品工业、医药工业，农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程过程及其应用的叙述，正确的是（    ） A．分离、提纯产物来获得微生物细胞本身或其代谢产物，是发酵工程的中心环节 B．单细胞蛋白指从大量培养的微生物菌体中获得的蛋白质，可作为微生物饲料 C．啤酒发酵过程中糖的分解和代谢物的生成主要在后发酵阶段完成 D．利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物的生长 5．科研团队在中药材品质改良方面取得了巨大进展，他们选用狭叶柴胡（2n=12）与胡萝卜（2n=22）进行体细胞杂交，旨在培养易于大面积栽培、柴胡皂苷含量较高的柴胡—胡萝卜杂交种。下列有关叙述正确的是（    ） A．柴胡皂苷属于次生代谢物，是柴胡生长发育所必需的物质 B．柴胡—胡萝卜杂交种形成过程中会发生有丝分裂和减数分裂 C．柴胡—胡萝卜杂交种虽然是四倍体，但是不可育 D．要先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，才能诱导融合 6．紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种次生代谢物，具有高抗癌活性，现已被广泛用于乳腺癌等癌症的治疗。利用植物组织培养和细胞培养的技术是生产紫杉醇的一条重要途径。下列叙述错误的是（    ） A．红豆杉属植物体内的紫杉醇是细胞代谢所必需的营养物质 B．培养过程中，悬浮细胞的密度过大会限制悬浮细胞的增殖 C．培养过程中所用的外植体―般取自红豆杉的分生区细胞 D．为了有利于外植体的脱分化，往往需要在培养基中加入植物激素 7．三白草和鱼腥草的药用成分相近，而且在疗效上具有叠加效应。通过植物细胞工程技术培育杂种细胞，从而获得更多药用物质。实验流程如图所示，下列叙述正确的是（    ） A．过程①可使用胰蛋白酶酶解去除细胞壁 B．过程②可使用灭活的病毒诱导细胞膜融合 C．过程③中需要适量光照诱导细胞去分化 D．过程④中可进行细胞工厂化生产次生代谢物 8．下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是（    ） A．动物细胞融合与植物体细胞杂交所依据的原理相同，都能形成杂种细胞和杂种个体 B．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，但不发生基因重组 C．利用细胞工程培育“番茄—马铃薯”杂种植株，利用了植物组织培养技术 D．单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术 9．“生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼，由单克隆抗体与药物结合而成单克隆抗体能自动导向，在生物体内与特定细胞或组织结合，并由其携带的药物产生治疗作用。单克隆抗体的制备过程如图所示，下列叙述错误的是（    ） A．A过程是从小鼠脾脏中取得T淋巴细胞，给小鼠注射的特定物质相当于抗原 B．B过程最终得到的杂交瘤细胞的特点是既能产生专一抗体，又能无限增殖 C．体外培养杂交瘤细胞的培养基与用于植物组织培养的培养基在物理性质上的主要区别是前者要用液体培养基 D．特异性抗体可以通过注射抗原产生并分离抗体的方法来制备，与这种常规方法相比，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等优点 10．体细胞核移植等技术推动了我国肉牛育种技术的发展。利用核移植技术繁育肉牛，下列思路不合 ( 1 ) 高二期中考试生物试题 学科网（北京）股份有限公司 理的是（    ） A．从具有优良性状的个体上采集供体细胞 B．通过显微操作去除受体卵母细胞的核 C．利用电刺激或载体激活重构胚 D．对原肠胚进行胚胎分割以提高胚胎利用率 11．动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列叙述错误的是（    ） A．可用机械法将新鲜动物组织分散成单个细胞 B．体外培养的动物细胞大多数需悬浮在培养液中生长 C．传代培养时可用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞 D．癌细胞在培养瓶中一般不会出现接触抑制现象 12．胚胎工程的迅猛发展让人们大量繁殖优良家畜品种的愿望得以实现。下列叙述错误的是（    ） A．经获能处理后的精子才能用于体外受精 B．体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施 C．胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率 D．胚胎移植技术可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 13．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（    ） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物细胞培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．原生质体融合和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 14．关于早期胚胎发育，正确的是（    ） A．孵化前，细胞平均体积在不断减少，胚胎所含的有机物总量不断降低 B．受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期阶段 C．不同动物的胚胎移植的最佳时期均是桑椹胚及之前 D．进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，因为此时细胞还未分化 15．“DNA的粗提取与鉴定”是高中生物学实验中的一项重要实验。下列关于该实验的叙述错误的是（    ） A．研磨洋葱时所用的研磨液中需加入抑制DNA酶活性的物质 B．加入体积分数为95％的冷酒精后，从绿色菠菜滤液中析出白色DNA C．利用二苯胺试剂检验DNA时需要设置不加丝状物的对照组 D．实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，DNA提取的效率会提高 16．下表为常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断，下列说法错误的是（    ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHⅠ -G↓GATCC- KpnⅠ -GGTAC↓C- EcoRⅠ -C↓AATTC- Sau3AⅠ -↓GATC- HindⅡ -GTY↓RAC- SmaⅠ -CCC↓GGG- 注：Y为C或T，R为A或G。 A．HindⅡ、SmaⅠ两种限制酶切割后形成平末端 B．Sau3AⅠ限制酶的切割位点在识别序列的外部 C．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 D．BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶切割后形成相同的黏性末端 17．质粒是基因工程中最常用的目的基因运载工具。下列有关叙述正确的是（    ） A．用作运载体的质粒上都能找到一个或多个限制酶切割位点 B．质粒是只存在于细菌细胞质中能自主复制的小型环状双链DNA分子 C．质粒上的抗生素合成基因常作为标记基因供重组DNA的鉴定和选择 D．携带目的基因的重组质粒只有整合到宿主细胞的染色体DNA上才会随后者的复制而复制 18．逆转录PCR（RT-PCR）是一种广泛用于检测和量化特定RNA分子的技术，该技术首先将RNA模板逆转录成cDNA（与模板RNA互补的DNA单链），然后利用PCR技术进行扩增。下列有关逆转录PCR的叙述，错误的是（    ） A．以RNA为模板合成单链cDNA时需要逆转录酶的催化 B．在RT-PCR反应缓冲液中一般要添加适量Mg2+ C．由于RNA只有一条链，所以复制过程中仅用到一种引物 D．该技术可用于SARS病毒、HIV等病毒的核酸检测 19．蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的DNA片段。在基因工程中可通过PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（    ） A．用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ ( 1 ) 高二期中考试生物试题 学科网（北京）股份有限公司 B．科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C．在凝胶中DNA分子的迁移速率不只与DNA分子的大小有关 D．若电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，则用抗原-抗体结合法可能在其乳汁检测到蛛丝蛋白 20．基因工程应用广泛，成果丰硕。下列不属于基因工程应用的是（    ） A．利用X射线、紫外线照射处理培育青霉素高产菌株 B．将外源生长激素基因导入鲤鱼可提高鲤鱼的生长速率 C．将来源于某些病毒的抗病基因导入植物中培育抗病植物 D．将目的基因与乳腺中特异表达基因的启动子重组可构建乳腺生物反应器 二、多选题：本大题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求。 21．利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。参与酱油酿造过程的微生物主要有米曲霉，酵母菌和乳酸菌等。米曲霉主要负责原料的初步分解，其产生的α淀粉酶的量较高，同时其生长对O2的需求较高；酵母菌发酵可产生酒精；乳酸菌则能够促使酱油生成糠醇，提升酱油的香味。下列相关叙述错误的是（    ） A．参与酱油酿造过程的米曲霉、酵母菌和乳酸菌都属于真核生物 B．米曲霉和酵母菌在酱油生产中对O2的需求相同 C．乳酸菌通过无氧呼吸会产生乳酸、CO2及糠醇，因此要定时排气 D．米曲霉产生的α-淀粉酶有助于将淀粉水解为糖，供微生物利用 22．某研究小组为测定药物对体外培养细胞毒性的大小，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列说法正确的是（    ） A．制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶代替胰蛋白酶处理肝组织 B．CO2培养箱中CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸 C．本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小 D．若想诱导甲乙细胞融合可使用灭活病毒，灭活病毒的抗原结构依然存在 23．实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．所需培养基为合成培养基，使用时通常需要加入一些天然成分 B．传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，无须再用酶处理 C．细胞培养时需置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱 D．培养细胞1是原代培养，往往会因为细胞密度过大、有害物质积累等分裂受阻 24．下列关于PCR过程及结果的叙述正确的是（　　） A．若酶和引物都正常工作，但是不出现扩增带，其原因可能是核酸模板变性不彻底导致的 B．PCR反应的延伸过程中，DNA聚合酶只能从引物的3'端连接核糖核苷酸 C．PCR与细胞内DNA复制破坏氢键的原理相同 D．理论上推测，第n轮循环产物中只含有一种引物的DNA片段所占比例为1/2n-1 25．图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRI、BamHI、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述正确的是（    ） A．在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRI B．如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRI酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRI酶切点有1个 C．为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理 D．一个图1所示的质粒分子经EcoRI切割后，含有2个游离的磷酸基团 三、非选择题 26．科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄-马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示： (1)植物体细胞杂交依据的生物学原理有 。 (2)过程①常用的酶是 ，细胞融合完成的标志是 。 (3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂 诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，当观察到 时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 (4)过程④中的培养基常添加的植物激素是 。 27．（除特殊标记外，每空1分）某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，所谓的“三亲婴儿”，为了避免母亲把生理缺陷遗传给孩子，医生去除女性捐赠者的卵子中的细胞核，接着用母亲卵细胞中对应的遗传基因取而代之，最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育，这样诞生的孩子将会继承一位父亲和两位母亲的遗传基因。回答以下问题： (1)图中“去核”是指去除 。 (2)在体外受精前，需要将卵母细胞培养到 期。采集到的精子需要进行 处理，体外受精后还需将受精卵放入培养液中培养到一定阶段才能移植，培养液的成分一般比较复杂，除一些维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，通常需要加入 等天然成分。 (3)胚胎发育到 时，细胞开始出现分化。早期胚胎的 细胞将发育成胎儿的各种组织。 (4)从遗传角度分析，“三亲婴儿”技术还可以避免“母亲”的 （填细胞结构）中的缺陷基因传递给孩子。 28．下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题：    (1)若限制酶I的识别序列和切点是—↓GATC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，那么在①过程中，应用限制酶 切割质粒，用限制酶 切割抗虫基因。 (2)将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有 的培养基上，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入。 (3)导入重组质粒大肠杆菌的表现型是 。 (4)⑤过程所用技术称为 ，从遗传学角度来看，根本原因是根细胞具有 。 29．抗冻蛋白基因 TmAFP 是从黄粉虫幼虫体内分离得到的基因，其编码的蛋白质具有很强的抗冻活性。科学家成功将 TmAFP 基因导入甘薯中，并使甘薯获得抗冻能力，减少霜冻对甘薯的损害，提高甘薯的产量和质量。图 1 为基因工程操作可能用到的6种限制酶的识别序列（箭头表示切割位点），图 2 表示培育抗冻甘薯新品种的流程。回答下列问题： (1)有人认为用不同的限制酶切割 DNA 形成的片段可能在 DNA 连接酶的作用下拼接在一起。分析图 1 信息，概括出支持该观点的两点理由 。 (2)分析图 1 信息，进行①过程前，选择限制酶 切割质粒 P1，选择限制酶 切割抗冻蛋白基因 TmAFP，这样可以防止质粒、目的基因自身环化和反向拼接。 (3)重组质粒 P2 可能的作用是 。 (4)经⑤和⑥过程分别为 。可用 技术检测转基因甘薯植株中是否产生抗冻蛋白。 ( 1 ) 高二期中考试生物试题 学科网（北京）股份有限公司 第2页，共 2 页 高二期中考试生物试题 学科网（北京）股份有限公司 $$ 高二年级第二学期期中考试 生物答案 1．C【详解】A、酵母菌细胞呼吸会产生CO2，进而使馒头、面包等更松软，A正确；B、酵母菌是真核生物，具有线粒体，其进行有氧呼吸的主要场所是线粒体，B正确；C、酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，C错误；D、发面时加点糖，会增加酵母菌细胞呼吸需要的反应物浓度，进而为酵母菌的繁殖提供能量，所以有利于酵母菌的繁殖，D正确。故选C。 2．B【详解】B、培养基（含水分）必须用湿热灭菌，干热灭菌会导致水分蒸发、成分破坏，B错误；3．D 4．D【详解】C、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，其中酵母菌的繁殖大部分糖的分解和酒精的生成是在主发酵完成，C错误；D、利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料能通过固氮提高土壤肥力进而促进植物的生长，D正确。故选D。 5．D【详解】A、次生代谢物是一类小分子有机化合物，如酚类、萜类和含氮化合物等，它们不是植物基本的生命活动所必需的物质，A错误；B、依题意，柴胡—胡萝卜杂交种是经植物体细胞杂交形成的，不经过减数分裂过程，B错误；C、柴胡与胡萝卜都是二倍体，通过体细胞杂交形成的杂交种含有四个染色体组，是四倍体。由于该四倍体分别含有柴胡与胡萝卜的各两个染色体组，因此理论上减数分裂时能产生可育配子，并产生可育后代，C错误；D、植物细胞细胞壁的存在使得植物细胞无法融合，要先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体，原生质体才能被诱导融合，D正确。 故选D。 6．A【详解】A、次生代谢物不是生物生长所必需的，而紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物，因此紫杉醇不是红豆杉细胞代谢所必需的营养物质，A错误；B、培养过程中，悬浮培养过程中细胞密度过大、有害代谢物积累等因素会限制悬浮细胞的增殖，B正确；C、外植体选择时应选择分裂能力强、分化程度低的器官、组织或细胞，―般取自红豆杉的分生区细胞，C正确；D、外植体的脱分化和再分化，都需要在培养基中加入植物激素，D正确。故选A。 7．D【详解】A、过程①可使用纤维素酶和果胶酶酶解去除细胞壁，制备原生质体，A错误；B、过程②可使用物理方法或化学方法诱导细胞膜融合，而灭活的病毒用于诱导动物细胞融合，B错误； C、过程③形成愈伤组织过程不需要光照，C错误；D、过程④（愈伤组织培养）可进行细胞工厂化生产次生代谢物，D正确。故选D。 8．A【详解】A、动物细胞融合与植物体细胞杂交都依据细胞膜的流动性原理 ，都能形成杂种细胞。但动物细胞融合一般不能形成杂种个体，植物体细胞杂交可经植物组织培养形成杂种个体，A错误； 9．A10．D【详解】D、胚胎分割应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行，原肠胚细胞已经出现了明显的分化，细胞的全能性受到限制，不适合进行胚胎分割，D错误。故选D。 11．B【详解】B、体外培养的大多数细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，而不是悬浮生长，B错误；12．C【详解】C、胚胎分割可以获得多个胚胎，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，因此胚胎分割技术不能提高移植胚胎的成活率，C错误；D、胚胎移植可将优质雌性个体的胚胎移植到代孕母体中，使其免于妊娠过程，从而缩短繁殖周期，充分发挥繁殖潜力，D正确。故选C。 13．B 14．A【详解】A、孵化前，细胞进行分裂使细胞平均体积在不断减少，胚胎所含的有机物总量不断降低，A正确；B、受精卵发育为囊胚的过程是在透明带内完成的，囊胚后期孵化后进入原肠胚阶段，B错误；C、不同动物的胚胎移植的最佳时期不同，大部分动物的最佳时期是桑葚胚及之前，C错误； D、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，囊胚时细胞已经发生分化，D错误。故选A。 15．D研磨液中的洗涤剂用于破坏细胞膜，NaCl（高浓度）帮助溶解DNA，若更换为蒸馏水，细胞破裂不充分，且DNA在低盐溶液中溶解度降低，导致提取效率下降，D错误。故选D。 16．C【详解】A、HindⅡ、SmaⅠ两种限制酶沿着中轴线切口切开，切割后形成平末端，A正确； B、Sau3AⅠ限制酶识别GATC序列，切割位点在识别序列的外部，B正确；C、一种限制酶可以识别两种核苷酸序列，如Sau3AⅠ能识别GATC，也能识别GGATCC，C错误；D、BamHⅠ限制酶识别GGATCC序列，Sau3AⅠ限制酶识别GATC序列，切割后形成相同的黏性末端GATC，D正确。 故选C。17．A 【详解】A、并不是所有的质粒都能作为运载体的，所以也不是在所有的质粒上总能找到一个或多个限制酶切割位点，但用作运载体的质粒上都应该找到一个或多个限制酶切割位点，便于和目的基因连接，A正确；B、质粒是最常用的载体之一，它不仅存在于原核细胞中，也存在于真核细胞中，如酵母菌细胞，B错误；C、质粒上的抗生素抗性基因常作为标记基因供重组DNA的鉴定选择，以确定重组质粒是否导入宿主细胞，C错误；D、携带目的基因的重组质粒可以整合到宿主细胞的染色体DNA上，并随染色体DNA复制而复制；也可以不整合到染色体DNA上，进行自主复制，D错误。故选A。 18．C【详解】C、虽然RNA是单链，但逆转录后生成的单链cDNA需经PCR扩增，PCR扩增双链DNA时需两种引物（正向、反向），因此整个过程中至少需要两种引物，C错误；D、逆转录PCR（RT-PCR）是一种广泛用于检测和量化特定RNA分子的技术，RT-PCR可用于检测RNA病毒（如SARS病毒、HIV）的核酸，D正确。故选C。 19．A【详解】A、据题图分析可知，磷酸基团为DNA的5'端，羟基为DNA的3'端，由于DNA聚合酶只能从5'→3'延伸子链，所以在PCR扩增中引物与DNA模板链的3'端结合进行延伸，故选择图中引物②和引物③，A错误20．A【详解】A、利用 X 射线、紫外线照射处理培育青霉素高产菌株，这属于诱变育种，原理是基因突变，不是基因工程，A错误； 21．ABC【详解】A、参与酱油酿造过程的米曲霉、酵母菌都属于真核生物，而乳酸菌是原核生物，A错误；B、根据题意，米曲霉主要负责原料的初步分解，其产生的α淀粉酶的量较高，同时其生长对O2的需求较高；而酵母菌发酵可产生酒精，那么酵母菌产生酒精进行的是无氧呼吸，因此米曲霉和酵母菌在酱油生产中对O2的需求不同，B错误；C、乳酸菌通过无氧呼吸能将糖类（主要是葡萄糖）转化为乳酸，不会产生CO2，C错误；D、米曲霉产生的α-淀粉酶能够将淀粉水解为麦芽糖、葡萄糖等小分子糖类，供微生物利用，D正确。故选ABC。 22．CD【详解】A、在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误； B、细胞培养应在含CO2恒温培养箱中进行，CO2浓度维持在5%左右，CO2的作用是维持培养液的pH，B错误；C、本实验应设置对照实验，用添加药物的培养液分别培养甲、乙细胞，同时用未添加药物的培养液分别培养甲、乙细胞(作为对照)，根据变异细胞占培养细胞的比例，以检测药物对甲、乙的毒性大小，C正确；D、灭活病毒可诱导动物细胞融合，其原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，故诱导甲乙细胞融合可使用灭活病毒，灭活病毒的抗原结构依然存在，D正确。故选CD。 23．ABD【详解】A、在配制动物细胞培养液时，除了需要添加一定的营养物质（如糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等）外，往往还需加入动物的血清等天然成分，属于合成培养基，A正确；B、传代培养时，悬浮培养的细胞没有体现贴壁生长的现象，因而可以直接用离心法收集，无须 第1页，共2页 高二期中考试生物试题 学科网（北京）股份有限公司 再用酶处理，B正确；C、细胞培养时需置于含有95% 空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱，C错误；D、培养细胞1是原代培养，该过程是获得组织细胞中进行的初次培养，往往会因为细胞密度过大、有害物质积累等分裂受阻，D正确。故选ABD。 24．AD【详解】A、PCR扩增的过程包括变性、复性、延伸过程，其中变性是在高温条件下将DNA双链解开，作为模板，若在酶和引物都正常工作，但是不出现扩增带，其原因可能是核酸模板变性不彻底导致的，A正确；B、DNA的基本组成单位是脱氧核糖核苷酸，所以PCR反应的延伸过程中，DNA聚合酶只能从引物的3'端连接脱氧核糖核苷酸，B错误； C、PCR与细胞内DNA复制破坏氢键的原理不同，其中PCR通过高温破坏氢键，而细胞内DNA复制通过解旋酶破坏氢键，C错误；D、DNA进行半保留复制，每次复制都需要两种引物结合在DNA的两端，第n轮循环产物共2n个DNA分子，仅含有其中一种引物的DNA片段为2个，故理论上推测，第n轮循环产物中只含有一种引物的DNA片段所占比例为2/2n=1/2n-1，D正确。故选AD。 25．ACD【详解】A、目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcoRI，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcoRI，A正确； B、如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRI酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRI酶切点有2个，B错误；C、为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，C正确； D、一个图l所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。故选ACD。 26．(1)细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 (2) 纤维素酶和果胶酶 形成了新的细胞壁 (3) 聚乙二醇 融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光 (4)生长素和细胞分裂素 27．(1)捐献者卵母细胞的细胞核（或捐献者卵母细胞的纺锤体—染色体复合物） (2) 减数第二次分裂（MⅡ） 获能 血清 (3) 囊胚期 内细胞团 (4) 线粒体（细胞质） 【详解】（1）在细胞核移植技术中，这里的 “去核” 是指去除捐献者卵母细胞的细胞核，实质是指去除纺锤体—染色体复合物。因为要将母亲卵细胞中的细胞核移入去核的卵母细胞中，从而避免母亲的生理缺陷遗传给孩子。 （2）在体外受精前，需要将卵母细胞培养到减数第二次分裂中期（MⅡ中期），因为只有处于这个时期的卵母细胞才具备受精能力。采集到的精子需要进行获能处理。刚采集的精子不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道内发生相应生理变化后，才能获得受精能力。培养液的成分一般比较复杂，除一些维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，还需要添加血清等天然成分。 （3）胚胎发育到囊胚期时，细胞开始出现分化。囊胚期细胞分为内细胞团和滋养层细胞，其中内细胞团将来发育成胎儿的各种组织。 （4） 线粒体中存在少量的DNA，三亲婴儿的培育技术用的是母亲卵母细胞的细胞核，因此能避免母亲的线粒体（或细胞质）中的缺陷基因传递给孩子。 28．(1) Ⅱ　 Ⅰ(或Ⅰ和Ⅱ) (2)四环素 (3)抗虫性和抗四环素的特性 (4) 植物组织培养　 发育成完整个体的全部遗传物质 【详解】（1）质粒中两个标记基因中均有限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-↓GATC-，若用该酶切，抗性基因均被破坏，因此用限制酶Ⅱ切割质粒；目的基因可以用限制酶Ⅰ或两种酶一起切割，由于两种切割形成的末端序列相同，因此可以连接。 （2）根据重组质粒与普通质粒上抗性基因的种类可知，如果成功导入质粒，则大肠杆菌可以在含四环素的培养基上生长，否则死亡，则该选择培养基中应该添加四环素。 （3）由图可以看出，导入重组质粒的大肠杆菌可以具有抗四环素和抗虫的特点，因此导入重组质粒大肠杆菌的表现型是抗虫性和抗四环素的特性。 （4）⑤表示通过组织培养技术把根细胞培养成完整植物体。植物的组织培养是利用植物细胞的全能性原理。植物细胞的全能性是指植物体的每个具有完整细胞核的细胞，都具有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的潜在能力。 29．(1)不同的限制酶切割 DNA 形成的平末端可以拼接；不同的限制酶切割 DNA 可能形成相同的黏性末端可以拼接。 (2) SmaI、XbaI EcoRV、SpeI (3)将目的基因即 TmAFP基因导入Ti 质粒的 T - DNA 区段上 (4) 脱分化、再分化 抗原 - 抗体杂交 【详解】（1）不同的限制酶切割DNA形成的平末端或相同的黏性末端，可以拼接，因此用不同的限制酶切割DNA形成的片段，有可能在DNA连接酶的作用下拼接在一起。 （2）据图分析可知，为使目的基因能表达出蛋白质，目的基因应插入启动子和终止子之间，该位置有三种酶 SmaI、XbaI和HindⅢ的识别序列，目的基因的左端要接在靠近启动子的位置，若切制质粒选择 HindⅢ 则不能使目的基因左端接在靠近启动子的位置，而 SmaI和EcoRV切割产生平末端，XbaI和 SpeI切割产生 相同的黏性末端，因此根据目的基因两端的序列，为了成功得到重组质粒P2，确保TmAFP 基因插入载体中的方向正确，应选用限制酶 SmaI、XbaI切割质粒P1，选用限制酶EcoRV、SpeI切割目的基因。 （3）重组质粒P2是将重组质粒P1与 Ti 质粒构建而成，其作用是将目的基因即 TmAFP 基因整合到根瘤农杆菌的 Ti 质粒的 T - DNA 区段上，因为 Ti 质粒的 T - DNA 可转移并整合到受体细胞的染色体 DNA 上，从而便于将目的基因导入甘薯细胞。 （4）⑤过程是将含有目的基因的根瘤农杆菌感染甘薯悬浮细胞，然后进行脱分化形成愈伤组织，所以⑤是脱分化；⑥过程是愈伤组织再分化形成抗冻芽苗，所以⑥是再分化。检测转基因甘薯植株中是否产生抗冻蛋白，可用抗原 - 抗体杂交技术，利用抗原和抗体的特异性结合来判断是否有相应蛋白产生。 第2页，共 2 页 高二期中考试生物试题 学科网（北京）股份有限公司 $$