2.2动物细胞工程期末复习知识清单-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

1. 动物细胞培养所需的基本条件，营养条件：糖类、氨基酸、无机盐、维生素等，其他条件：无菌、无毒的环境、适宜的气体环境、适宜的温度、pH和渗透压。 2. 无毒可以定期更换培养液，清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 3. 培养动物细胞一般使用液体培养基，通常需加入血清等一些天然成分。 4. 动物细胞培养的气体环境需要O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。 5. 一般选择动物的胚胎或幼龄动物的组织、器官，分化程度低，增殖能力越强，更容易培养。 6. 分散组织细胞用机械的方法（淋巴组织可以采用滤网挤压、研磨的方式、脾脏内淋巴细胞可以采用脾内注射盐溶液冲洗、血细胞可以采用密度梯度离心的方法），或用胰蛋白酶（处理时间不能过长，会消化掉细胞）、胶原蛋白酶等处理的方法，将组织分散成单个细胞；用胃蛋白酶不行，因为胃蛋白的适宜pH是2-3，如果用胃蛋白酶来分散细胞，在胃蛋白酶发挥作用的情况下，细胞会被杀死。 7. 把细胞分散开目的是①分散成单个细胞后容易培养，细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出；②不分散细胞间会有接触抑制，不能正常生长。 8. 体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，细胞生长往往贴附在培养瓶的瓶壁上；一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖； 9. 接触抑制（糖蛋白）：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖（癌细胞失去接触抑制）。 10. 传代培养：将分瓶后的细胞培养称为传代培养；对于悬浮生长细胞可以采用离心方式进行收集然后分瓶（取沉淀，上清液中含有胰蛋白酶可以去除），对于贴壁生长细胞采用胰蛋白酶处理。 11. 原代培养：人们通常将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。 12. 细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物的细胞则相反。 13. 动物和人体内仍保留着少数具有分裂和分化能力的细胞，这些细胞叫作干细胞。 14. 干细胞按照不同潜能分：全能干细胞（如胚胎干细胞）、多能干细胞（如造血干细胞）、单能干细胞（如神经干细胞）。 15. 干细胞按照不同来源分：胚胎干细胞（早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞）、成体干细胞（成体组织或器官内的干细胞，包括骨髓中的造血干细胞、神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞等）。 16. 诱导多能干细胞（iPS细胞）：通过多种技术手段诱导相应体细胞，获得类似胚胎干细胞的一种细胞。 17. 动物细胞融合体现细胞膜结构特点是具有一定流动性，杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 18. 动物细胞融合诱导方法：物理法（电融合法）、化学法（聚乙二醇（PEG)融合法）、生物法（灭活病毒诱导法，如仙台病毒）。 19. 细胞融合的过程包括：细胞膜融合、细胞质融合、细胞核融合。 20. 细胞融合成功的标志：植物细胞再生出细胞壁，动物细胞进行有丝分裂。 21. 一种B细胞（被抗原活化的B细胞，但不是浆细胞）和骨髓瘤细胞（无限增殖）融合形成杂交细胞，既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体（杂交瘤细胞特点）。 22. 分离B淋巴细胞依靠细胞表面受体与固定在固相载体上的抗原结合，实质是BCR与固定在载体上的抗原结合，取出固相载体，再将与抗原结合的B淋巴细胞从载体上冲洗下来。 23. 一种抗原有多种抗原决定簇，能够活化多种B细胞，产生多种抗体。在单克隆抗体的过程中，会出现未融合的骨髓瘤细胞、未融合的B细胞，融合的杂交瘤细胞等，区分这些细胞采用选择培养基（原理：HAT培养基筛选技术，HAT培养基中含有氨基喋吟，氨基喋吟阻断DNA的全合成途径，骨髓瘤细胞采用的是缺陷型细胞，不能进行补救合成，未形成杂交细胞的都不能合成DNA）进行选择，将杂交瘤细胞进行体外培养或者注射到小鼠腹腔产生抗体。 24. 被抗原活化的B细胞不能进行增殖，杂交瘤细胞具有无休止、快速地进行分裂增殖，分泌特异性抗体的特性。 25. 筛选能够产生需要抗体的杂交瘤细胞需要用有限稀释法，将不同的杂交瘤细胞放入96孔板中，尽量保证每个孔只有一个杂交瘤细胞（倒置相差显微镜检查）。 26. 利用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行特异性抗体检测。 27. 单克隆抗体的应用：早孕检测（抗人绒毛膜促性腺激素HCG）、ADC（使用高效细胞毒素类药物进行有效杀伤肿瘤细胞）抗体-药物偶联物将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合。 28. ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成，抗体主要发挥靶向运输作用，药物对靶细胞杀伤作用。 29. 单克隆抗体优点：灵敏性高，抗体可以识别微量的抗原、特异性强。 30. 动物细胞核移植技术：将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。 31. 动物细胞核移植原理是动物细胞核具有全能性。 32. 动物细胞核移植分为胚胎细胞核移植、体细胞核移植。 33. 为何选MⅡ期的卵母细胞？①其细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质；②卵母细胞体积大，易操作；③卵母细胞营养物质丰富。 34. 卵母细胞去核采用显微操作法，实际上是去除纺锤体-染色体复合物，将细胞核和第一极体一并吸出。 35. 卵母细胞去核目的是保证核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自供体细胞。 36. 将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点？①对卵母细胞损伤较小；②保证供体细胞的细胞核不被破坏，操作方便。 37. 通过电融合法使两细胞融合， 供体核进入卵母细胞，形成重构胚；用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 38. 克隆动物细胞核的遗传物质来自供体动物，但细胞质中的遗传物质同时来自供体细胞和受体卵母细胞。 39. 体细胞核移植技术的应用： 加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。 再利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白转基因克隆动物的细胞、组织或器官可以作为异种移植的供体。 以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞，经过诱导分化能形成相应的细胞、组织或器官，将它们移植给患者时可以避免免疫排斥反应。 学科网（北京）股份有限公司 $$