1.2微生物的培养技术及应用期末复习知识清单-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

1. 培养基的类别：物理划分为液体培养基、半固体培养基（琼脂量为0.3%～0.7%）、固体培养基（琼脂量为1.5%～2.0%）；成分划分为天然培养基（不确定的成分）、合成体培养基（化学成分完全确定）； 用途划分为通用培养基、选择培养基、鉴别培养基。 2. 液体培养基常用于大规模快速繁殖某种微生物，半固体培养基可用于观察微生物的运动和分类鉴定等，固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等。 3. 培养基营养成分：碳源、氮源（氮源物质主要用于合成细胞中的蛋白质、核酸等）、水、无机盐、生长因子（微生物自身不能合成或合成量不足，但又是微生物生长和代谢所必需的小分子）等。 4. 培养微生物时，除了必需的营养成分外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。 5. 消毒：是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。 6. 灭菌：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 7. 对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 8. 消毒的方法：①物理方法：煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒等。②化学方法：采用碘酒、体积分数为70%的酒精、双氧水等化学药剂，对实验室的空间、操作台表面、实验人员的工作服与手等进行消毒。③生物方法：生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。 9. 灭菌的方法： ①湿热灭菌：高压蒸汽灭菌，常用高压蒸汽灭菌锅，在压力100kPa、温度121 ℃条件下。原理是高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性，操作简便，效果可靠，可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成分不被破坏，培养基用高压蒸汽灭菌法。 ②干热灭菌：干热灭菌锅，玻璃器皿 （如试管、培养皿、吸管、注射器）、金属器具 （如针头、 镊子、剪刀等）耐高温，需保持干燥的物品。 ③灼烧灭菌：接种工具，如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具。 10. 纯培养的过程：配制培养基、灭菌、接种、分离、培养。 11. 采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物，稀释涂布法能够用于微生物计数。 12. 倒平板待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，温度太高容易烫伤手，温度太低培养基凝固。 13. 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高；将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 14. 在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，最好不要用这个平板培养微生物，防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 15. 怎么确定所倒平板未被杂菌污染或灭菌彻底？将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。 16. 平板画线法，灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线，接种完成后，也需要灼烧接种环，防止微生物污染环境，总共灼烧6次。 17. 平板画线法分离微生物原理：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落。 18. 平板画线法的注意事项：①接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次；②划线首尾不能相接③每次划线前灼烧接种环进行灭菌；④划线操作结束后，仍需灼烧接种环，培养皿倒置培养。 19. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时， 仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 取菌种前：杀死接种环上原有微生物。 每次划线前：杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端 接种结束后：杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 20. 在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种。 21. 在作第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线的原因？ 使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，以便获得单个菌落。 22. 选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 23. 在培养基中加入青霉素能够抑制细菌生长，培养基缺乏氮源时可分离自生固氮微生物，培养基缺乏有机碳源时能够分离出自养微生物，尿素是唯一氮源时能够分解尿素的微生物能正常生长，以纤维素为唯一碳源时能分解纤维素的微生物能正常生长。 24. 分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解为NH3和CO2。 25. 鉴别培养基：加入某种指示剂或化学药品，使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应，例如伊红美蓝培养基鉴定是否含有大肠杆菌（存在出现黑色菌落）。 26. 测定土壤中细菌的数量，一般选用1×104 、1×105 和1×106 倍稀释的稀释液进行平板培养。 27. 在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为30〜300、适于计数的平板。 28. 统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 学科网（北京）股份有限公司 $$