内容正文:
原理和方法
操作水平
目的
分类
细胞生物学 、分子生物学、发育生物学
细胞器、细胞或组织水平
植物细胞工程和动物细胞工程
第二章 细胞工程
第1节 植物细胞工程
一、植物组织培养技术
1.细胞的全能性
(1)概念:
(2)原因:
(3)生物体生长发育过程中细胞一般不表现全能性的原因?
(4)分化程度越高,全能性越____
在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达
细胞 完整生物体 细胞 其他各种细胞
①胚胎干细胞可分化发育成为各种组织器官的细胞;
②神经干细胞分化形成各类神经细胞
每个细胞中都含有发育成完整个体所需的全套遗传信息。
低
胚胎干细胞
神经干细胞
造血干细胞
红细胞
白细胞
血小板
一、植物组织培养技术
思考:
(1)是不是所有的活细胞都具有全能性?
(2)种子发育成植株体现了全能性了吗?
(3)细胞具有的全能性一定能表现出来吗?
不是,例如哺乳动物成熟的红细胞、植物成熟的筛管细胞。
不一定
6
5.表现出全能性的条件:
①、离体
②、一定的营养条件
③、植物激素
④、适宜的培养条件
(1)概念:
(2)原理:
(3)过程:
外植体
愈伤组织
生芽、生根
完整植株
一、植物组织培养技术
外植体
植物细胞的全能性。
指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。
脱分化
再分化
神经细胞
红细胞
肌肉细胞
受精卵
上皮细胞
细胞分化:在个体发育中,由一个或一种细胞增殖产生的后代,在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。
脱分化:
再分化:
脱分化后形成的不定形的薄壁组织团块。
愈伤组织:
接种外植体
诱导愈伤组织
诱导生芽
诱导生根
脱分化
再分化
完整植株
植物组织培养过程:
再分化
脱分化的结果是形成愈伤组织
实质:基因的选择性表达
只有细胞分裂,没有细胞分化
既有细胞分裂,也有细胞分化
一、植物组织培养技术
思考:若外植体是取自植物的幼茎、叶片等含有叶绿体的部位,愈伤组织中是否会含有叶绿体?为什么?
否,培养物经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞,因此,愈伤组织中不含有叶绿体。
一、植物组织培养技术
生长素/细胞分裂素 结果
比值高 (>1)
比值低 (<1)
比值适中(=1)
促进根的分化
促进芽的分化
促进愈伤组织的形成
简记
“高”根
“低”芽
“中”愈伤
菊花的组织培养
探究·实践
外植体消毒
外植体切段
接种外植体
脱分化
再分化
移栽
方法步骤
菊花的组织培养
注意:接种时外植体的“形态学上端”朝上,不要倒插!
注意:该过程不需要光照
注意:注意顺序,先诱导生芽,再诱导生根,该过程每日需要给予适当的光照
(1)接种3~4d后,检查外植体的生长情况,统计有多少外植体被污染,有多少能正常生长,试分析它们被污染的原因。
5.结果分析与评价
培养基、接种工具灭菌不彻底;
外植体消毒不彻底;
操作过程不符合无菌操作要求等。
一、植物组织培养技术
欲培育地上长番茄和地下结马铃薯的“超级作物”
利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么?
1.过程
A细胞
B细胞
纤维素酶
果胶酶
⑴去壁:
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
⑵诱导融合
物理法:
化学法:
电融合法、离心法
聚乙二醇融合法、
高Ca2+ —高PH融合法等
脱分化
再分化
移栽
植物组织培养技术
杂种植株
愈伤组织
A原生质体
B原生质体
移栽后的植株
二、植物体细胞杂交技术
1.原理:
细胞膜具有一定的流动性
植物细胞的全能性
2.原生质体融合成功的标志:
杂种细胞再生出新的细胞壁
3.意义:
打破生殖隔离,实现远缘杂交育种
二、植物体细胞杂交技术
17
A细胞
B细胞
正在融合的原生质体
再生出细胞壁
脱分化
再分化
移栽
杂种植株
愈伤组织
A原生质体
B原生质体
移栽后的植株
二、植物体细胞杂交技术
⑴若只考虑两两融合,可形成几种融合细胞?符合要求的是?
⑵二倍体番茄和二倍体马铃薯杂交得到的“番茄—马铃薯”有几个染色体组?是几倍体?
3种(AA、BB、AB)
4个,四倍体。
变异类型:
染色体数目变异
18
课前提问:
1.植物细胞工程包括哪些技术?
2.植物组织培养技术的原理是?
植物体细胞杂交技术的原理是?
3.植物体细胞杂交技术的关键环节是?
4.原生质体融合成功的标志是?
5.诱导原生质体融合的方法有?分别包括?
概念
过程
变异类型
原理
过程
植物体细胞杂交
植物组织培养
植物细胞工程
归纳总结
原理
A细胞
B细胞
正在融合的原生质体
脱分化
再分化
移栽
植物组织培养技术
杂种植株
愈伤组织
A原生质体
B原生质体
移栽后的植株
二、植物体细胞杂交技术
二 植物细胞工程的应用
P
DDBB
ddbb
F1
DdBb
F2
D_B_
D_bb
ddB_
ddbb
高茎抗病
矮茎不抗病
F3
连续的自交直至不发生性状分离
选出ddBB
用高杆抗病(DDBB)和矮杆不抗病(ddbb)小麦品种
培育矮杆抗病小麦(ddBB)
选育出需要的矮抗纯种
生长
F4
花药
离体培养
单倍体植株
诱导
染色体加倍
稳定遗传的优良品种
明显缩短育种年限。
所得植株的性状一般能稳定遗传。
植物细胞的全能性和染色体数目变异
过程:
原理:
优点:
单倍体育种:
外植体
新品种
筛选培育
愈伤组织
脱分化
多种突变体
诱导分化
诱变处理
突变体的利用:
因为愈伤组织分裂能力旺盛(处于不断分裂的状态),更易发生突变
过程:
外植体
培养、 提取
细胞产物
愈伤组织
脱分化
细胞悬液
分散开
植物细胞培养
因为此时细胞分裂能力旺盛,代谢快,有利于产物生成。
Lavf58.20.100
Multimedia Cloud Transcode (cloud.baidu.com)
$$