精品解析：福建省泉州市永春县第一中学2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题

永春一中高二年级期中考试生物科试卷 （2025.4） 考试时间75分钟，试卷总分100分 一、单选题（每题2分，共50分） 1. 果酒口感较好，且富含维生素和人体所需的氨基酸等，因此广受欢迎。下列关于传统果酒制作的叙述，正确的是（ ） A. 酿酒之前应该用体积分数为95%的酒精对器具进行消毒 B. 制作果酒时应该先去除枝梗和腐烂的籽粒再用清水冲洗 C. 制作果酒时每隔12小时将瓶盖打开的目的是排出多余的CO2 D. 果酒发酵时发酵瓶内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕 【答案】D 【解析】 【分析】果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核，属于真核生物，适宜酵母菌生长的温度范围是18~25℃；果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或者乙醇转化成醋酸，醋酸菌无核膜包被的细胞核，是原核生物，属于好氧菌，醋酸菌适宜生长的温度范围是30-35℃。 【详解】A、消毒时应该用体积分数为70%的酒精，而不是 95%的酒精，95%酒精会使微生物表面蛋白质迅速凝固，形成一层保护膜，阻止酒精进入微生物内部，达不到消毒的效果，A错误； B、制作果酒时应该先冲洗再去除枝梗和腐烂的籽粒，以防止杂菌污染，若先去除枝梗和腐烂籽粒再冲洗，会使果肉等暴露在空气中，增加被杂菌污染的机会，B错误； C、制作果酒时不能每隔12小时将瓶盖打开，因为打开瓶盖会导致氧气进入，影响酒精发酵（酒精发酵需要无氧环境），C错误； D、果酒发酵时发酵瓶内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕，因为发酵过程中会产生CO2气体，当不再产生气泡时，意味着发酵过程中产生气体的反应基本结束，即发酵基本完毕，D正确。 故选D。 2. 液体深层培养是指以获得大量发酵产物为目的的发酵罐大容量液体培养，可通过调节培养液的pH和温度、营养条件以及气体环境促使微生物迅速生长，产生大量代谢产物，是发酵工业生产的基本培养方法。下列叙述正确的是（　　） A. 传统发酵技术不需要防止杂菌污染，液体深层培养前需要对发酵罐中的培养基进行严格灭菌 B. 单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，可作为食品添加剂、微生物饲料等 C. 可通过过滤、沉淀等方法获得微生物代谢产物 D. 利用液体深层培养进行谷氨酸发酵生产应在中性或弱碱性条件下进行 【答案】D 【解析】 【分析】发酵工程的基本环节：发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。 【详解】A、传统发酵技术利用混合菌种发酵，没有进行严格灭菌，但是也需要采取一些措施防止杂菌污染，液体深层培养属于发酵工程，发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种，为了防止微生物的污染，需要对发酵罐中的培养基进行严格灭菌，A错误； B、单细胞蛋白是发酵获得的大量的微生物菌体，B错误； C、如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，C错误； D、环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。利用液体深层培养进行谷氨酸发酵生产应在中性或弱碱性条件下进行，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，D正确。 故选D。 3. 我国科学家将辽宁绒山羊的卵母细胞去核，并取出吕梁黑山羊体细胞的细胞核，将二者结合，体外培养获取胚胎，再移植到另一只辽宁绒山羊体内孕育，最终成功培育出体细胞克隆黑山羊。下列叙述错误的是（ ） A. 上述克隆过程中需将辽宁绒山羊卵母细胞培养到MⅡ期再去核 B. 培养吕梁黑山羊体细胞时，常在培养液中加入动物血清以提供天然营养 C. 克隆黑山羊兼具辽宁绒山羊和吕梁黑山羊的遗传物质，属于有性生殖产物 D. 体细胞克隆技术对促进优良品种繁育和增加濒危品种数量均具有重要实践意义 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞工程常用的技术有动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等。动物细胞培养是动物细胞工程的基础；动物细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术；利用动物细胞核移植技术可以培育克隆动物。在克隆动物的培育过程中，还需要用到胚胎移植技术，它属于胚胎工程的范畴。哺乳动物在自然条件下受精和早期胚胎发育的规律是胚胎工程重要的理论基础。胚胎工程技术还包括体外受精、胚胎分割等。 【详解】A、用于核移植的卵母细胞采集到后，在体外培养到MⅡ期，再进行去核操作，A正确； B、由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，B正确； C、克隆黑山羊的核遗传物质完全来自吕梁黑山羊的体细胞核，细胞质中的遗传物质来自辽宁绒山羊的卵母细胞，整个过程不涉及两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，C错误； D、在畜牧生产中，利用体细胞核移植技术，可以加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育。在保护濒危物种方面，利用体细胞核移植技术有望增加濒危物种的存活数量，D正确。 故选C。 4. 如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（ ） A. 培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子 B. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性 C. 需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④ D. 植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0（不考虑基因突变） 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图可知：对植株A的花粉经过离体培养得到的植株①单倍体植株，而后对该单倍体幼苗经秋水仙素处理得到的植物②是纯合二倍体，该过程属于单倍体育种。植株③的获得采用了植物组织培养技术，该植株的获得利用了诱变育种方法。植株④采用了植物组织培养技术，属于细胞工程育种；植株⑤的培育采用了植物体细胞杂交技术。 【详解】A、对植株A的花粉经过离体培养得到的植株①单倍体植株，而后对该单倍体幼苗经秋水仙素处理得到的植物②是纯合二倍体，该过程属于单倍体育种，A错误； B、选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，通过组织培养技术获得植株③，体现了细胞的全能性，B错误； C、图中需要通过植物组织培养技术获得的植株是①③④⑤，该过程中利用了细胞的全能性，植株②是秋水仙素处理植株①的幼苗得到，没有用到植物组织培养技术，C错误； D、植株⑤是通过植物体细胞杂交的方法获得的，其遗传物质是由植株A和植株B组成的，与植株A的基因型不同，因此植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0，D正确。 故选D。 5. 张九龄有诗云：红泥乍擘绿蚁浮，玉碗才倾黄蜜剖。寥寥数语生动描绘了色香味俱全的客家米酒。客家米酒的特点之一是甜腻入口，这与其酿酒过程使用的甜酒曲有关，甜酒曲主要含有根霉、毛霉和酵母菌等微生物。下列有关酿酒过程的叙述，错误的是（ ） A. 若酿制的米酒呈酸味，可能与长期封闭酿酒容器有关 B. 酵母菌在密闭酿酒容器内初期种群数量呈近似J型增长 C. 客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，主要目的是为了促进酵母菌增殖 D. 根霉、毛霉与酵母菌构成竞争关系，应控制酒曲中各种微生物的比例 【答案】A 【解析】 【分析】酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28℃。 【详解】A、如果米酒呈酸味，是由于醋酸杆菌利用酒精生成了醋酸，而这是在有氧的条件下进行的，与封闭的酿酒容器无关，A错误； B、酵母菌在密闭酿酒容器内初期由于空间和资源都比较丰富，所以种群呈J型增长，B正确； C、客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，为酵母菌提供适宜的温度，促进酵母菌增殖，C正确； D、根霉、毛霉与酵母菌在同一空间中都利用有机物生存，构成竞争关系，因此应该酒曲中各种微生物的比例，D正确。 故选A。 6. 研究人员将粉蓝烟草和朗氏烟草体细胞进行融合培育出新的烟草品种，其大致过程为：制备原生质体→促进原生质体融合→融合细胞→愈伤组织→烟草幼苗。同时研究人员探究了PEG 对原生质体融合的影响，结果如下表所示。下列相关叙述正确的是（　　） 编号 PEG用量（μL） PEG：原生质体悬浮液 融合率（%） 细胞碎片 1 20 1：5 6.5 + 2 40 2：5 15.5 + 3 60 3：5 19.4 + 4 80 4：5 20.4 ++ 5 100 1：1 21.6 +++ 注：原生质体悬浮液用量100μL，融合25 min。“+”表示很少；“++”表示少量；“+++”表示较多。 A. 制备原生质体时需用含纤维素酶和果胶酶的低渗溶液处理细胞 B. 若PEG对原生质体处理时间远长于 25 min，则融合率会提高 C. 由实验结果可知，促进原生质体融合的较适 PEG用量为60μL D. 细胞融合完成的标志是再生出细胞壁，其经再分化形成愈伤组织 【答案】C 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。操作步骤：先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁得到原生质体，再利用聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高PH融合法或电融合法、离心法诱导原生质体融合，融合后的杂种细胞再经过诱导可形成愈伤组织，并可进一步发育成完整的杂种植株。 【详解】A、制备原生质体时需用含纤维素酶和果胶酶的等渗溶液处理细胞，以维持原生质体正常的形态和功能，A错误； B、题中只探究了PEG对原生质体处理时间25 min时的融合率，若处理时间长于25 min，则融合率如何变化未知，B错误； C、 PEG用量为60μL时，融合率较高且细胞碎片很少，故促进原生质体融合的较适 PEG用量为60μL，C正确； D、细胞融合完成的标志是再生出细胞壁，其经脱分化形成愈伤组织，D错误； 故选C。 7. 乌珠穆沁白山羊为绒肉兼用型品种，当前因种群小、近亲繁殖而出现品种资源危机。现利用生物技术开展保护工作，相关叙述正确的是（ ） A. 动物细胞培养液中可添加一定量的抗生素以保持无菌无毒的环境 B. 核移植技术中需去除MⅡ期卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物 C. 胚胎移植操作前通常需对多只受体进行超数排卵和同期发情处理 D. 为提高胚胎的利用率，可选用未分化的囊胚和桑葚胚进行胚胎分割 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【详解】A、抗生素对病毒不起作用，故动物细胞培养过程中需要在培养液中添加一定量的抗生素以保证无菌环境，A错误； B、卵母细胞在体外培养至MⅡ期，此时处于分裂期没有完整的核，因此运用显微操作去除的核，实际是纺锤体—染色体复合物，B正确； C、胚胎移植操作前通常需对供体进行超数排卵和对受体和供体进行同期发情处理，C错误； D、为提高胚胎的利用率，可选用囊胚和桑葚胚进行胚胎分割，囊胚已经分化，D错误。 故选B。 8. 第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植,流程如图所示。图中检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断,PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是（　　） A. 采集的卵子可直接与获能的精子进行受精 B. PGD和PGS技术可分别用于筛选红绿色盲和唐氏综合征 C. 将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理 D. “理想胚胎”需培养至桑葚胚或原肠胚才能植入子宫 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。 【详解】A、体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养至MⅡ期，才可以与精子完成受精作用，A错误； B、PGD是指胚胎植入前的基因诊断，PGD可用于筛选红绿色盲，PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测，PGS可用于筛选唐氏综合征，B正确； C、将成熟的精子放在一定浓度的肝素或钙离子溶液中，用化学药物诱导精子获能，C错误; D、“理想胚胎”需培养至桑葚胚或囊胚才能植入子宫，D错误。 故选B。 9. PCR是一种在体外扩增DNA片段的技术，其最大的特点是能将微量的DNA大幅度扩增。引物的设计对DNA扩增至关重要，引物的长度一般为15~30bp，常用的是18~27bp，过长或过短均会影响产物的形成，如过短的引物会更容易与非目标序列结合，过长的引物会导致其延伸温度过高。下列相关叙述正确的是（ ） A. 扩增DNA时加入的引物使DNA连接酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 B. 引物内部以及两种引物之间不能有互补的碱基序列，否则会造成引物自连为双链 C. 引物过短会导致复性的特异性变差，可能会在模板链上出现多个连接位点 D. 引物过长，子链延伸时影响TaqDNA聚合酶的活性，直接影响氢键的形成 【答案】C 【解析】 【分析】PCR技术： ①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术； ②原理：DNA复制； ③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）； ④方式：以指数的方式扩增，即2n； ⑤过程：高温变性、低温复性、中温延伸。 【详解】A、引物使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，A错误； B、引物是单链核酸，引物内部有互补的碱基序列可能会使引物成环，引物之间有互补的碱基序列，可能会使引物之间结合成双链，B错误； C、引物过短会导致复性的特异性变差，可能会在模板链上出现多个连接位点，从而扩增出非目标的DNA片段，C正确； D、过高的温度会影响TaqDNA聚合酶的活性，会直接影响磷酸二酯键的形成，D错误。 故选C。 10. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（ ） A. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选 B. 发酵生产中，性状优良的菌种可以从自然界中筛选 C. 培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选 D. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生多种抗体的杂交瘤细胞 【答案】D 【解析】 【分析】1、单克隆抗体制备的两次筛选：①利用选择培养基筛选得到杂交瘤细胞(去掉未 杂交的细胞以及自身融合的细胞)；②进行抗体检测，筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。    2、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，此时胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段。 3、培育转基因抗虫棉主要需要四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的   检测与鉴定。 【详解】A、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，挑取质量好，活性强的胚胎进行培养或保存，可以提高胚胎移植成功的概率，A正确； B、用于发酵工程的性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，B正确； C、培育转基因抗虫棉时，在将目的基因导入受体细胞后，需要从分子水平上鉴定目的基因（Bt基因）是否成功导入、稳定存在和表达，还需要通过采摘抗虫棉的叶片饲喂棉铃虫来从个体水平上确定Bt基因是否赋予了棉花抗虫特性和评估其抗性程度，从而筛选出有较好抗虫特性的转基因抗虫棉。所以，培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选，C正确； D、制备单克隆抗体时，在筛选出杂交瘤细胞后，需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，上述筛选过程中涉及的抗体检测属于分子水平的筛选，因此，制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D错误。 故选D。 11. 荧光定量PCR检测技术可应用于新冠病毒核酸检测。其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针。当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处，会催化水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号。每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子产生（如图），通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值（荧光信号达到设定阈值时所经历的循环次数）。下列关于该技术叙述错误的是（　　） A. PCR反应体系需加入模版、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶 B. 耐高温的DNA聚合酶可催化形成磷酸二酯键和断开磷酸二酯键 C. 最终监测的荧光强度与起始时反应管内目标DNA含量呈正相关 D. Ct值越大表明检测样本中病毒数目越多，患者的危险性越高 【答案】D 【解析】 【分析】PCR 的原理是半保留复制，步骤包括变性、复性、延伸，该过程需要耐高温的 DNA 聚合酶催化，需要四种游离的脱氧核苷酸做原料。 【详解】A、PCR是一项体外扩增DNA的技术，其原理是DNA的半保留复制，故PCR反应体系需加入模板、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶（反应体系温度较高），A正确； B、分析题意“当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处，会催化水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号”可知，荧光探针与模板链碱基互补，当耐高温的聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针，因此耐高温的聚合酶催化子链延伸时，会合成磷酸二酯键，耐高温的聚合酶水解探针时，会水解磷酸二酯键，B正确； C、题干中提出"加入一个与某条模板链互补的荧光探针"，并且"每扩增一次，就有一个荧光分子生成"，因此反应最终的荧光强度与起始状态模板 DNA 含量呈正相关， C正确； D、Ct值越小，说明所需循环的次数越少，可以理解为样本中的病毒含量相对较高，越容易被检测到，而Ct值越大，说明所需循环的次数越多，检测到时需要更多的时间与循环，提示样本中病毒的含量相对较少，即病毒含量越少，被检测者的患病风险越小，D错误。 故选D。 12. 下图表示PCR过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R表示方向。下列叙述正确的是（ ） A. ②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板 B. PCR过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制 C. 以1个DNA为模板经3次循环需消耗7个引物③ D. 物质③的5′端添加了某序列，至少需经3次循环才可获得该序列的双链产物 【答案】C 【解析】 【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）：过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开）：低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【详解】A、根据DNA分子中两条链的反向平行关系可判断，②链从 L 到 R 的方向为 5′→3′，图中①②链均可作为子链合成的模板，A错误； B、PCR 过程需要通过高温处理使双链中氢键断裂成为单链，而后通过降温使子链和引物之间形成双链结构，而后调节温度是子链沿着引物的3’端延伸，B错误； C、以 1 个 DNA 为模板经 3 次循环产生的DNA分子数目为23=8，则需消耗 引物③的数目为（8×2-2）÷2=7，C正确； D、物质③的 5′端添加了某序列，至少需经 2 次循环才可获得以该序列为模板合成的双链DNA产物，D错误。 故选C。 13. 如图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，相关叙述正确的是（ ） A. 图1中溶液a是NaCl溶液，玻璃棒应沿不同方向进行搅拌 B. 图1中丝状物为粗提取的DNA，其与蛋白质均可溶于酒精 C. 若图2试管中溶液的液面高于烧杯中的液面，可能导致加热不充分 D. 图2试管2起对照作用，溶液b是溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液 【答案】C 【解析】 【分析】DNA的溶解性： （1）DNA和蛋白质等其它成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。 （2） DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA和蛋白质进一步分离。 【详解】A、图1中溶液a是研磨液过滤静置后得到的上清液，玻璃棒应沿一个方向搅拌，A错误； B、图1所示操作的原理是DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质能溶于酒精，B错误； C、图2中试管中溶液的液面应低于烧杯中的液面，否则会导致加热不充分，C正确； D、图2试管1起对照作用，目的是证明沸水浴下物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液遇二苯胺不会出现蓝色，而DNA遇二苯胺出现蓝色，D错误。 故选C。 14. 研究发现，大豆GmNF-YA19基因在干旱胁迫中有响应。科研人员利用PCR扩增GmNF-YA19基因，构建GmNF-YA19基因表达载体并转化烟草，实验过程如图1、2所示下列说法错误的是（ ） A. PCR扩增GmNF-YA19基因的前提是根据已知核苷酸序列合成两种引物 B. 为获得能正确表达目的基因的重组质粒，应选用限制酶KpnI、EcoRI进行切割 C. 终止子为一段DNA序列，其作用是使转录在所需要的地方停下来 D. 重组质粒转化烟草后，可使用含氨苄青霉素的培养基来筛选目的细胞 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、PCR扩增GmNF-YA19基因的前提是根据已知核苷酸序列合成两种引物，因为子链的延伸方式在引物的3'端，A正确； B、根据图中信息，在质粒的启动子和终止子中间含有的限制酶为PvuⅡ、Kpn I和EcoR I三种限制酶切割位点，由于Kpn I在质粒中不止一个识别位点，因此最好选用PvuⅡ和EcoR I进行切割，且在目的基因的两端也存在着两种酶的识别位点，即选用PvuⅡ和EcoR I两种限制酶切割含目的基因的DNA片段和载体，这样可以保证目的基因和质粒正向连接、避免发生自身环，B错误； C、终止子是位于基因末端的一段特殊的DNA序列，其作用是使转录过程在所需要的地方停下来，C正确； D、重组质粒转化烟草后，重组质粒中含有抗氨苄青霉素的基因，该基因可作为标记基因，因而使用含氨苄青霉素的培养基来筛选成功导入重组质粒的目的细胞，D正确。 故选B。 15. 如图是几种不同限制性内切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的是（ ） A. 以上DNA片段由5种限制酶切割后产生，切割产生①片段的限制酶识别序列由5个核苷酸组成 B. 限制酶只存在于原核生物中，作用的化学键为磷酸二酯键 C. 上述能进行连接的两个黏性片段，其连接后形成的DNA分子是 D. 两个③片段不能被E.coliDNA连接酶催化连接形成重组DNA 【答案】C 【解析】 【分析】限制性内切酶（限制酶）是一类能识别双链DNA分子中特定核苷酸序列，并在特定部位切割磷酸二酯键的酶，主要来源于原核生物（如细菌）。 【详解】A、图中①④是同一种限制酶切割形成的，因此以上DNA片段是由4种限制酶切割后产生的，切割产生①片段的限制酶，识别的碱基序列为-CTGCAG-，由6个碱基对构成，A错误； B、限制酶主要存在于原核细胞，但并不局限于原核生物中才有，作用的化学键为磷酸二酯键，B错误； C、图中①④具有相同的黏性末端，可被DNA连接酶连接形成DNA分子是，C正确； D、两个③片段属于平末端，能被E.coliDNA连接酶催化连接形成重组DNA，D错误。 故选C。 16. 小鼠体细胞克隆胚胎着床后胎盘发育显著异常可能是与克隆胚胎中H3K27me3印记基因过度表达有关，H3K27me3印记基因敲除极大提高了体细胞克隆的成功率。科学家分别测量H3K27me3印记基因敲除的克隆小鼠（甲组）、H3K27me3印记基因不敲除的克隆小鼠（乙组）和受精卵来源的小鼠（丙组）的体重和胎盘直径，结果如下图所示。下列相关分析错误的是（ ） A. 克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因 B. 克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大 C. H3K27me3印记基因过度表达抑制胎盘的发育 D. H3K27me3印记基因的表达产物可能影响早期胚胎滋养层细胞的发育 【答案】C 【解析】 【分析】1、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。该过程无精卵细胞的结合，属于无性生殖。 2、早期胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而沿透明带内壁扩展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘。 【详解】A、与丙组相比，乙组（含有H3K27me3印记基因的克隆小鼠）体重和胎盘直径均高于丙组，乙组体细胞克隆胚胎着床后胎盘发育显著异常，成活率低，推测克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因，A 正确； B、乙组克隆小鼠的体重、胎盘直径均高于受精卵来源的小鼠（丙），说明克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大，B正确； C、甲组为H3K27me3印记基因敲除的克隆小鼠，乙组为H3K27me3印记基因不敲除的克隆小鼠，通过图可以观察到乙组的体重和胎盘直径都高于甲组，说明H3K27me3印记基因过度表达会促进胎盘的发育，C错误； D、滋养层细胞会发育为胎盘和胎膜，H3K27me3印记基因的表达产物可能影响早期胚胎滋养层细胞的发育，进而影响了胎盘的发育，D正确。 故选C。 17. 我国科研人员将番木瓜环斑病毒（PRSV，一种单链RNA病毒）的复制酶基因转入番木瓜，培育出抗病毒番木瓜“华农一号”。“华农一号”能产生与PRSV的RNA形成局部双链的RNA，阻止病毒的复制。下列分析错误的是（　　） A. 培育抗病毒番木瓜“华农一号”需要用到植物组织培养技术 B. 培育“华农一号”时，可以用不同的限制酶切割质粒和目的基因 C. PCR扩增复制酶基因时，反应体系中需加入引物和TaqDNA聚合酶 D. “华农一号”通过表达出复制酶使番木瓜获得对PRSV病毒的抗性 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、培育抗病毒番木瓜"华农一号"需要用到植物组织培养技术，将含有目的基因的番木瓜细胞培育成完整植株，A正确； B、培育“华农一号”时，可以用不同的限制酶切割质粒和目的基因，能有效避免质粒和目的基因自身环化和及反向连接，B正确； C、据题意可知，该复制酶基因为一段单链RNA，需逆转录后才能进行PCR，PCR扩增时需加入耐高温的Taq DNA聚合酶完成子链的延伸，故PCR扩增复制酶基因时，反应体系中需加引物、入逆转录酶和Taq DNA 聚合酶，C正确； D、据题意可知，“华农一号”通过转录出相应的RNA与PRSV病毒的复制酶基因（RNA）互补配对，从而抑制其翻译过程，进而不能表达出复制酶，阻止病毒的复制，使番木瓜获得对PRSV病毒的抗性，D错误。 故选D。 18. 基因组印记(通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达)阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞(类似受精作用)，最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 体外培养卵母细胞时，为防止污染，需将培养皿置于二氧化碳培养箱中进行培养 B. 甲基化可能会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达 C. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同 D. 移植后的囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来 【答案】B 【解析】 【分析】从卵泡中取出卵母细胞，再将经过甲基化处理的卵母细胞进行早期胚胎培养、胚胎移植等获得孤雌小鼠。 【详解】A、动物细胞培养时加入抗生素，防止培养过程中的污染，A错误； B、由题干可知，基因组印记是通过甲基化使一个基因不表达，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达，然后促进了细胞的全能性的表现，获得孤雌小鼠，B正确； C、“孤雌小鼠”是由两个生殖细胞（修饰后的次级卵细胞和另一个卵子的极体）结合后发育形成，同时由于配子在形成过程中会经历减数分裂的基因重组，或发生基因突变，将导致两个生殖细胞结合后的“孤雌小鼠”其基因型不一定与提供卵母细胞的雌鼠相同，C错误； D、囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化，D错误。 故选B。 19. 新冠病毒通过表面的S蛋白与靶细胞膜上的血管紧张素转化酶2（ACE2）结合实现入侵。2022年3月，国家卫健委印发《新冠病毒抗原检测应用方案(试行)》，增加抗原检测作为核酸检测的补充手段。抗原检测采用双抗体夹心法，其原理如下图。结合垫处含有足量的、可移动的、与胶体金结合的抗体1，T处固定有抗体2，抗体1和抗体2与新冠病毒表面同一抗原N蛋白的不同位点发生特异性结合，呈红色。C处固定有抗体1的抗体，与抗体1结合也呈红色。下列叙述正确的是（ ） A. 若检测结果为阳性，检测过程中抗原-抗体的特异性结合发生4次 B. 若待测样本中不含新冠病毒，显色结果为C处和T处均出现红色 C. 用单克隆抗体制备技术制备抗体1，先给小鼠注射纯化的S蛋白 D. 灭活病毒疫苗制备前期，需要用具有ACE2的细胞培养新冠病毒 【答案】D 【解析】 【分析】由题意可知，结合垫处有抗体1，T处有抗体2，抗体1和抗体2与新冠病毒表面同一抗原N蛋白的不同位点发生特异性结合，呈红色，C处固定有抗体1的抗体，与抗体1结合也呈红色，说明若T处呈红色则为新冠病毒阳性，C处呈红色则试剂盒正常。 【详解】A、若检测结果为阳性，则这种结合有3次，第一次是与样本垫上B处的抗体1结合，第二次与C处垫子上固定有抗体2结合，第三次是与D处垫子上固定有抗体1的抗体结合，A错误； B、若待测样本中不含新冠病毒，则不会与样本垫上处的抗体1和T处抗体2结合，因此T不变色，游离的标记抗原继续向前到达质量控制区（C处），与此处固定的抗特异性抗原Ⅰ的抗体结合，从而使C处变红，B错误； C、结合题意可知，利用单克隆抗体制备技术制备试剂盒中的抗体1，需要先给小鼠注射纯化的N抗原蛋白，一段时间后，从小鼠的 脾脏（免疫器官）中获取已免疫的B淋巴细胞，C错误； D、病毒无细胞结构，必须寄生在活细胞内才能增殖，灭活病毒疫苗制备前期，需要用具有ACE2的细胞培养新冠病毒，D正确。 故选D。 20. 甲基消草磷属于抗微管除草剂，可以使植物的微管系统彻底解聚，从而导致有丝分裂中期受到抑制。研究发现甲基消草磷能有效诱导玉米花药培养的单倍体愈伤组织染色体加倍，可由此获得纯合的玉米新品种。下列叙述错误的是（ ） A. 甲基消草磷的功能类似秋水仙素，可以使染色体数目加倍 B. 利用玉米花药进行单倍体育种需要植物组织培养技术的支持 C. 上述玉米的育种原理为染色体变异，染色体加倍发生在愈伤组织形成前 D. 秋水仙素和甲基消草磷作用于有丝分裂的主要时期分别是前期和中期 【答案】C 【解析】 【分析】多倍体育种原理：利用染色体变异，方法：最常用的是利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。秋水仙素能抑制有丝分裂时纺锤丝的形成，染色体不能移动，使得已经加倍的染色体无法平均分配，细胞也无法分裂。当秋水仙素的作用解除后，细胞又恢复正常的生长，然后再复制分裂，就能得到染色体数目加倍的细胞。 【详解】A、甲基消草磷可以使植物的微管系统彻底解聚，导致染色体无法分离，其功能类似于秋水仙素，可以使染色体数目加倍，A正确； B、利用玉米花药进行单倍体育种需要植物组织培养技术的支持，该技术的原理是植物细胞的全能性，B正确； C、玉米单倍体育种的原理是染色体数目变异，甲基消草磷诱导玉米单倍体愈伤组织染色体加倍，该过程发生在愈伤组 织形成之后，C错误； D、秋水仙素作用于有丝分裂前期（抑制纺锤体形成），甲基消草磷作用于中期（微管解聚导致中期停滞），D正确。 故选C。 21. 甲植物具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因。科研人员通过以下途径培育出具有抗除草剂性状的优良品质丙。图中字母表示过程、数字序号表示细胞。 下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程A应置于高渗溶液中处理，再将①②诱导融合成③ B. 过程B无需筛选鉴定，形成杂种细胞后即可接种到培养基中 C. 过程C、D采用固体培养基，添加激素的种类和比例相同 D. 杂种植物丙为二倍体，有的配子不含抗除草剂基因 【答案】D 【解析】 【分析】题图分析：该图为植物体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可用酶解法；B为诱导融合过程，可以用聚乙二醇处理；③为杂种细胞再生细胞壁的过程，C为脱分化；D为再分化形成杂种植株。 【详解】A、过程 A 为去除细胞壁的过程，该过程应置于等渗溶液中处理，而后再利用诱导融合的方法将①②诱导融合成③，再生出细胞壁为杂种细胞，A错误； B、过程 B 获得的融合细胞未必都是甲的细胞核和乙的细胞质融合形成的，因而需筛选鉴定，而后形成杂种细胞即可接种到培养基中，B错误； C、过程 C 、D 分别为脱分化和再分化过程，这些过程需要在固体培养基中诱导产生，两过程中添加激素的种类和比例不同，C错误； D、由于乙的细胞核失活，杂种植物丙为二倍体，形成配子时，细胞质中的抗除草剂基因随机分配，故有的配子不含抗除草剂基因，D正确。 故选D。 22. 水体养殖过程中常会产生硝酸铵等而导致水体污染，反硝化细菌能在无氧环境中通过反硝化作用将硝酸铵转化为氮气。某人利用如图所示的方法从龙虾养殖池中筛选分离出了除氮效率高的反硝化细菌用于污水处理。下列叙述正确的是（ ） 注：BTB培养基初始pH为6.8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色 A. 需将BTB培养基先灭菌后调节pH，以利于反硝化细菌的生长 B. 挑选显蓝色的单菌落在固体培养基上划线分离，以获得纯菌株 C. BTB培养基应以硝酸铵为唯一氮源，不含氮源的培养基不能用于微生物的培养 D. 通过观察未接种的BTB培养基表面是否有菌落，可判断该培养基是否起到选择作用 【答案】B 【解析】 【分析】1、选择培养基：在培养基中加入（缺少）某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。用以菌种的分离。 2、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、培养基需要先调节pH后灭菌，A错误； B、据题意可知，反硝化细菌能在无氧环境中将硝酸铵转化为氮气，使BTB培养基由酸性变为弱碱性，故菌落周围培养基呈蓝色，应挑选显蓝色的单菌落在固体培养基上划线分离，以获得纯菌株，B正确； C、不含氮源的培养基也可以用于微生物的培养，如固氮微生物可以用不含氮源的培养基进行选择培养，C错误； D、通过观察未接种的BTB培养基（空白对照）表面是否有菌落，可判断BTB培养基在制备过程中是否被杂菌污染，而不能判断该培养基是否起到选择作用，D错误。 故选B。 23. 实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B. 二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C. 若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D. 图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A 、从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质能与小鼠产生的抗体发生特异性结合，所以该蛋白质相当于抗原，A正确。 B 、由图可知，二抗是与一抗结合的，且带有特殊标记，所以二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体，B正确。 C 、若未显示出杂交带，有可能是目的基因导入了受体细胞，但目的基因没有表达，而不是目的基因未导入受体细胞，C错误。 D 、图示操作是通过抗原 - 抗体杂交技术来检测转基因棉花是否产生了 Bt 毒蛋白，D正确。 故选C。 24. 科研人员将寒带地区海鱼中的抗冻基因转入千禧果细胞中，成功培育出抗冻千禧果。下图为培育过程中使用的Ti质粒示意图，其中Vir区的基因活化能促进T-DNA的加工和转移，下列叙述正确的是（　　） A. 构建基因表达载体时，最好选择限制酶Ⅱ和Ⅲ来切割质粒 B. 利用PCR扩增抗冻基因，需提前检测抗冻基因的全部碱基序列 C. Vir区的基因活化促进抗冻基因整合到千禧果细胞的染色体DNA上 D. 利用含卡那霉素的培养基可筛选出成功导入抗冻基因的千禧果细胞 【答案】C 【解析】 【分析】1、PCR是一种在体外快速扩增DNA的技术，其原理是DNA双链复制，包括变性、复性、延伸三个步骤； 2、基因工程的基本操作程序是：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。 【详解】A、使用限制酶Ⅱ会破坏Vir区的基因，Vir区的基因活化能促进T−DNA的加工和转移，是T−DNA转移整合到受体细胞DNA上必不可少的，不能选限制酶Ⅱ，A错误； B、使用PCR技术扩增抗冻基因，只需要知道抗冻基因两端碱基序列设计引物即可，B错误； C、农杆菌侵染植物细胞后，Ti质粒上的T−DNA能转移到被侵染的细胞并整合到该细胞的染色体DNA上，所以Vir区基因活化可促进抗冻基因整合到千禧果细胞的染色体DNA上，C正确； D、为筛选成功导入抗冻基因的千禧果细胞，最好在培养基中添加四环素，可以筛选成功导入抗冻基因的千禧果细胞，D错误。 故选C。 25. 一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维(PP)，某科研团队准备从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌。图甲表示PP分解菌分离与计数的过程，6号试管涂布的三个平板的菌落数为550、601、688；7号试管涂布的三个平板的菌落数为58、73、97；8号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。图乙表示在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂，目的菌落周围出现透明圈的情况。下列说法正确的是（ ） A. 图甲、图乙所用培养基分别为选择培养基和鉴别培养基，都以PP作为唯一碳源 B. 图甲、图乙所用接种方法分别为稀释涂布平板法和平板划线法，都需在酒精灯火焰旁进行 C. 1 g土壤样品中含有PP分解菌的估算数目是7．6×1010个，此数值一般偏大 D. 可选择图乙培养基中d/D比值大的PP分解菌作为目的菌种推广使用 【答案】A 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、甲是筛选PP分解菌的过程，培养基为选择培养基，图乙表示在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂，鉴别PP分解菌的过程，所以图乙所用培养基为鉴别培养基，都以PP作为唯一碳源，A正确； B、图甲、图乙所用接种方法都是为稀释涂布平板法，都需在酒精灯火焰旁进行，以实现无菌操作，B错误； C、由于平板计数范围为30-300，故取7号试管中的数量，7号试管的稀释倍数为108，则[（58+73+97）÷ 3]÷0.1 × 108=7.6×1010，即1 g 土壤样品中含有PP分解菌的估算数目是7.6×1010个，此数值一般偏小，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，C错误； D、可选择图乙培养基中D/d较大的菌株（降解圈直径D、菌落直径d），因为这一指标越大说明单个菌株分解PP的能力强，所以可作为目的菌种推广使用，D错误。 故选A。 二、非选择题（共4小题，50分） 26. Ⅰ乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶（LCT）的分泌量较少，导致患者无法完全消化母乳或牛乳中的乳糖，从而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时，需用乳糖酶将奶中的乳糖除去。为了提高乳糖酶的产量，科研人员从牧民的奶酪（一种近似固体的发酵牛奶制品）中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌，下图为流程示意图。请回答下列问题： 注：X-gal为乳糖酶的显色底物，乳糖酶可以将无色的X-gal分解成半乳糖和蓝色的溴靛蓝。 （1）将奶酪悬浮液接种到培养基甲中的目的是_______。 （2）若要将培养基甲中的菌液稀释10倍，应进行的操作是从培养基甲中吸取1mL的菌液，置于盛有_______的试管中。 （3）X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时，应挑选的是_______。 Ⅱ科研工作者也利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛。如图为转基因低乳糖奶牛的培育流程。请据图分析回答下列问题： （4）如图所示，转基因低乳糖奶牛的培育过程涉及的生物技术有基因工程、_______（写出两项） （5）科学家在构建重组质粒T时，首先采用PCR技术对LCT基因进行扩增，在扩增目的基因的操作过程中，加入的物质有：模板DNA、引物、4种_______以及耐高温的DNA聚合酶。若一个该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，需要_______个引物。 （6）从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是_______。 （7）在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有_______（填字母）。 A. LCT基因 B. LCTmRNA C. LCT D. LCT的抗体 【答案】（1）增加目的菌的数量（或进行扩大培养） （2）9mL的无菌水 （3）直径最大的蓝色菌落 （4）核移植、胚胎移植等 （5） ①. 脱氧核苷酸 ②. 30 （6）抗原-抗体杂交 （7）ABC 【解析】 【分析】1、分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 2、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 3、常用的灭菌方法有湿热灭菌（常用高压蒸汽灭菌）、干热灭菌和灼烧灭菌。 【小问1详解】 培养基甲是液体培养基，将奶酪悬浮液接种到培养基甲中的目的是增加目的菌的数量（或进行扩大培养）。 【小问2详解】 对菌液进行稀释时，从培养基甲的菌液中吸取1mL，置于盛有9mL的无菌水的试管中，即可将原菌液稀释10倍。 【小问3详解】 产生乳糖酶的酵母菌能将无色的X-gal分解成蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色，因此从含X-gal的培养基中挑选目的菌（能高效生产乳糖酶的酵母菌）时，应挑选直径最大的蓝色菌落。 【小问4详解】 据图1可知，培育转基因低乳糖奶牛采用的技术有基因工程、核移植、胚胎移植、早期胚胎培养技术。 【小问5详解】 利用PCR扩增时需要的条件包括：模板DNA、引物、4种脱氧核苷酸以及热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n+1-2，因此若一个该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，需要24+1-2=30个引物。 【小问6详解】 LCT基因表达产生乳糖酶（LCT）即为蛋白质，故从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是抗原-抗体杂。 【小问7详解】 通过基因工程培育出转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中含有LCT基因且会表达（表达包括转录和翻译，转录会产生LCTmRNA，翻译会产生LCT），因此可检测到的物质有LCT基因、LCTmRNA、LCT，故选ABC。 27. 我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示，请回答下列问题： （1）体内受精时，在精子触及卵细胞膜的瞬间，_______会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入。_______作为受精的标志（写出两项）。 （2）用_______对雌性小鼠进行_______处理可得到大量卵母细胞，卵细胞转化为phESC的过程相当于植物组织培养中的_______过程。 （3）不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为_______。利用胚胎分割的方法对乙进行处理，得到了多只孤雄小鼠，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意_______。 （4）利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行用于医学研究的优点是_______。（从遗传物质角度分析） 【答案】（1） ①. 透明带和卵细胞膜 ②. 在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体 （2） ①. 促性腺激素 ②. 超数排卵 ③. 脱分化 （3） ①. XX、XY或者YY ②. 将内细胞团均等分割 （4）遗传物质相同，可以基本排除由基因不同造成的个体差异；同时可利用这些遗传背景相同的动物通过它们之间的对比来分析致病基因 【解析】 【分析】卵细胞激活转化成phFSC，通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC，获得甲，从而得到孤雌小鼠；精子激活转化成ahFSC，通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC，获得乙，从而得到孤雄小鼠。 【小问1详解】 体内受精时，精子触及卵细胞膜瞬间，透明带和卵细胞膜会迅速产生生理反应（透明带反应、卵细胞膜反应），阻止后来的精子进入；在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，这是受精的标志。 【小问2详解】 对雌性小鼠注射促性腺激素，可使其超数排卵，促性腺激素的作用是促进卵巢排出更多卵母细胞，获得大量卵母细胞；卵细胞是高度分化的细胞，转化为具有分裂分化能力的 phESC，类似于植物组织培养中脱分化过程（使细胞恢复分裂增殖能力）； 【小问3详解】 孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子，精子的性染色体为X或Y，所以其性染色体可能是XX、XY或YY；囊胚阶段的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，均等分割可保证分割后胚胎正常发育，利用胚胎分割的方法对乙进行处理，得到了多只孤雄小鼠，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割； 【小问4详解】 利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，这些小鼠遗传物质相同，所以作为实验材料可以排除由基因的差异造成的个体差异，进而可以通过这些遗传背景相同的个体来对比来分析致病基因。 28. 成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌和结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FGF20抗体可用于癌症的早期诊断筛查。研究者设计如图流程制备抗FGF20单克隆抗体。请回答下列问题： （1）给小鼠注射FGF20，是为了获得_______。②过程先诱导细胞融合，再进行筛选，经筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_______。 （2）③过程需对得到的杂交瘤细胞进行_______和_______，经多次筛选，以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 （3）某些肿瘤细胞表面的PD-LI与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-I结合能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-LI和PD-I的结合，可恢复CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与化疗的联合治疗研究。部分结果见图。 ①据图分析，_______疗法的治疗效果最佳，推测其原因是_______。 ②某兴趣小组基于现有抗体——药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为_______（填“方案一”或“方案二”）可行。 【答案】（1） ①. 更多的B细胞 ②. 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 （2） ①. 克隆化培养  ②. 抗体检测  （3） ①. 联合  ②. 该疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加了活化的CTL数量 ③. 方案一 【解析】 【分析】1、动物细胞的培养：取动物胚胎或幼龄动物器官、组织，将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。2、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）。 【小问1详解】 给小鼠注射FGF20，是为了获得更多的B细胞；诱导动物细胞融合的方法有用物理法（离心、振动、电刺激）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活病毒诱导法），因此②过程应先用灭活病毒诱导法再进行筛选，经筛选获得的杂交瘤细胞同时具有骨髓瘤细胞和以免疫的B细胞的特点，即既能迅速大量增殖，又能产生抗体。 【小问2详解】 ③过程需对得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 【小问3详解】 ①由图a可知，联合疗法肿瘤体积最小，再根据图b可知，采用联合疗法时活化的CTL的数目明显高于免疫检查点疗法和化疗等，原因是该疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加了活化的CTL数量。②某肿瘤细胞表面的PD−L1与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-1结合能抑制CTL的免疫活性，故应该将化疗药物与PD−L1单克隆抗体结合在一起，即方案一的偶联物既可阻断PD−1与PD−L1结合，恢复CTL的活性，又使化疗药物靶向肿瘤细胞。 29. 番茄不耐寒，冬季容易冻坏，难以储藏。我国科研人员从某植物中提取了一种抗冻基因AtCOR15a，经过一系列过程获得转基因抗冻的番茄新品种，操作流程如图。回答下列问题： （1）用PCR技术扩增AtCOR15a基因时需要添加引物，引物的作用是_______。 （2）如果要将AtCOR15a基因与质粒正确构建重组DNA分子，一般采用双酶切法，据图分析选用的两种限制酶组合是_______。双酶切法的优势是_______。 （3）图中是采用_______法将目的基因转移到番茄细胞中，并将其整合到该细胞的_______上。 （4）为了提高AtCOR15a基因的表达能力，可将AtCOR15a基因与外源强启动子连接，如下图所示。 （注：图中①、②、③、④表示引物） 利用PCR检测上述连接是否正确，可选择的引物组合是_______。 （5）为了进一步提高番茄的储藏时间，可从该植物体内提取ErsⅠ基因（乙烯受体基因），按照下图流程将ErsⅠ基因重新导回该植物，致使该植物原有ErsⅠ基因翻译受抑制。已知限制酶EcoRⅠ和XhoⅠ、BamHⅠ切割后露出的黏性末端碱基序列不同，据图分析，提取的目的基因A、B两端需分别添加_______、_______的识别序列。 【答案】（1）使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始复制  （2） ①. BamH Ⅰ和Hind Ⅲ ②. 防止目的基因与质粒自身环化，确保目的基因与质粒正向连接 （3） ①. 农杆菌转化 ②. 染色体DNA （4）①、③ （5） ①. XhoI ②. EcoRI 【解析】 【分析】基因工程的基本操作程序：第一步：目的基因的获取；第二步：基因表达载体的构建（核心）；第三步：将目的基因导入受体细胞；第四步：目的基因的检测和表达。 【小问1详解】 DNA聚合酶不能从头开始连接脱氧核糖核苷酸，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始复制。 【小问2详解】 采用一种限制酶切割目的基因两端和质粒会产生四个相同的黏性末端，在通过DNA连接酶连接目的基因和质粒是会发生目的基因和质粒的自身环化，以及目的基因和质粒 的反向连接，采用Bam H Ⅰ和Hind Ⅲ对质粒和目的基因进行酶切；采用双酶切法切割目的基因和质粒，目的基因两端的黏性末端不相同，质粒上也保留了两个不同但与目的基因两端相同的黏性末端，可避免目的基因与质粒自身环 化，确保目的基因与质粒正向连接。 【小问3详解】 图中将目的基因转移到植物细胞的方法是农杆菌转化法，利用农杆菌转化法将目的基因转移到番茄细胞中，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 【小问4详解】 利用PCR检测连接是否成功，应当将强启动子和AtCOR15a基因都扩增出来，所以可选择的引物组合是①+③。 【小问5详解】 利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，能进入细胞的是携带目的基因的T-DNA片段，LB、RB分别是T-DNA的左边界和右边界，因此ErsI 基因(乙烯受体基因)应反向插入LB和RB之间，再接合图中的转录方向，故提取的目的基因A、B两端需分别添加XhoI和EcoRI。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 永春一中高二年级期中考试生物科试卷 （2025.4） 考试时间75分钟，试卷总分100分 一、单选题（每题2分，共50分） 1. 果酒口感较好，且富含维生素和人体所需的氨基酸等，因此广受欢迎。下列关于传统果酒制作的叙述，正确的是（ ） A. 酿酒之前应该用体积分数为95%的酒精对器具进行消毒 B. 制作果酒时应该先去除枝梗和腐烂的籽粒再用清水冲洗 C. 制作果酒时每隔12小时将瓶盖打开的目的是排出多余的CO2 D. 果酒发酵时发酵瓶内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕 2. 液体深层培养是指以获得大量发酵产物为目的的发酵罐大容量液体培养，可通过调节培养液的pH和温度、营养条件以及气体环境促使微生物迅速生长，产生大量代谢产物，是发酵工业生产的基本培养方法。下列叙述正确的是（　　） A. 传统发酵技术不需要防止杂菌污染，液体深层培养前需要对发酵罐中的培养基进行严格灭菌 B. 单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，可作为食品添加剂、微生物饲料等 C. 可通过过滤、沉淀等方法获得微生物代谢产物 D. 利用液体深层培养进行谷氨酸发酵生产应在中性或弱碱性条件下进行 3. 我国科学家将辽宁绒山羊的卵母细胞去核，并取出吕梁黑山羊体细胞的细胞核，将二者结合，体外培养获取胚胎，再移植到另一只辽宁绒山羊体内孕育，最终成功培育出体细胞克隆黑山羊。下列叙述错误的是（ ） A. 上述克隆过程中需将辽宁绒山羊卵母细胞培养到MⅡ期再去核 B. 培养吕梁黑山羊体细胞时，常在培养液中加入动物血清以提供天然营养 C. 克隆黑山羊兼具辽宁绒山羊和吕梁黑山羊的遗传物质，属于有性生殖产物 D. 体细胞克隆技术对促进优良品种繁育和增加濒危品种数量均具有重要实践意义 4. 如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（ ） A. 培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子 B. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性 C. 需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④ D. 植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0（不考虑基因突变） 5. 张九龄有诗云：红泥乍擘绿蚁浮，玉碗才倾黄蜜剖。寥寥数语生动描绘了色香味俱全的客家米酒。客家米酒的特点之一是甜腻入口，这与其酿酒过程使用的甜酒曲有关，甜酒曲主要含有根霉、毛霉和酵母菌等微生物。下列有关酿酒过程的叙述，错误的是（ ） A. 若酿制的米酒呈酸味，可能与长期封闭酿酒容器有关 B. 酵母菌在密闭酿酒容器内初期种群数量呈近似J型增长 C. 客家人用稻草为酿酒容器“保暖”，主要目的是为了促进酵母菌增殖 D. 根霉、毛霉与酵母菌构成竞争关系，应控制酒曲中各种微生物的比例 6. 研究人员将粉蓝烟草和朗氏烟草体细胞进行融合培育出新的烟草品种，其大致过程为：制备原生质体→促进原生质体融合→融合细胞→愈伤组织→烟草幼苗。同时研究人员探究了PEG 对原生质体融合的影响，结果如下表所示。下列相关叙述正确的是（　　） 编号 PEG用量（μL） PEG：原生质体悬浮液 融合率（%） 细胞碎片 1 20 1：5 6.5 + 2 40 2：5 15.5 + 3 60 3：5 19.4 + 4 80 4：5 20.4 ++ 5 100 1：1 21.6 +++ 注：原生质体悬浮液用量100μL，融合25 min。“+”表示很少；“++”表示少量；“+++”表示较多。 A. 制备原生质体时需用含纤维素酶和果胶酶的低渗溶液处理细胞 B. 若PEG对原生质体处理时间远长于 25 min，则融合率会提高 C. 由实验结果可知，促进原生质体融合的较适 PEG用量为60μL D. 细胞融合完成的标志是再生出细胞壁，其经再分化形成愈伤组织 7. 乌珠穆沁白山羊为绒肉兼用型品种，当前因种群小、近亲繁殖而出现品种资源危机。现利用生物技术开展保护工作，相关叙述正确的是（ ） A. 动物细胞培养液中可添加一定量的抗生素以保持无菌无毒的环境 B. 核移植技术中需去除MⅡ期卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物 C. 胚胎移植操作前通常需对多只受体进行超数排卵和同期发情处理 D. 为提高胚胎的利用率，可选用未分化的囊胚和桑葚胚进行胚胎分割 8. 第三代试管婴儿技术（PGD/PGS）是对早期胚胎细胞进行基因诊断和染色体检测后再进行胚胎移植,流程如图所示。图中检测包括PGD、PGS（PGD是指胚胎植入前的基因诊断,PGS是指胚胎植入前的染色体数目和结构检测）。下列叙述正确的是（　　） A. 采集的卵子可直接与获能的精子进行受精 B. PGD和PGS技术可分别用于筛选红绿色盲和唐氏综合征 C. 将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理 D. “理想胚胎”需培养至桑葚胚或原肠胚才能植入子宫 9. PCR是一种在体外扩增DNA片段的技术，其最大的特点是能将微量的DNA大幅度扩增。引物的设计对DNA扩增至关重要，引物的长度一般为15~30bp，常用的是18~27bp，过长或过短均会影响产物的形成，如过短的引物会更容易与非目标序列结合，过长的引物会导致其延伸温度过高。下列相关叙述正确的是（ ） A. 扩增DNA时加入的引物使DNA连接酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 B. 引物内部以及两种引物之间不能有互补的碱基序列，否则会造成引物自连为双链 C. 引物过短会导致复性的特异性变差，可能会在模板链上出现多个连接位点 D. 引物过长，子链延伸时影响TaqDNA聚合酶的活性，直接影响氢键的形成 10. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（ ） A. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选 B. 发酵生产中，性状优良的菌种可以从自然界中筛选 C. 培育转基因抗虫棉时，需从分子水平及个体水平进行筛选 D. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生多种抗体的杂交瘤细胞 11. 荧光定量PCR检测技术可应用于新冠病毒核酸检测。其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针。当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处，会催化水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号。每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子产生（如图），通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值（荧光信号达到设定阈值时所经历的循环次数）。下列关于该技术叙述错误的是（　　） A. PCR反应体系需加入模版、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶 B. 耐高温的DNA聚合酶可催化形成磷酸二酯键和断开磷酸二酯键 C. 最终监测的荧光强度与起始时反应管内目标DNA含量呈正相关 D. Ct值越大表明检测样本中病毒数目越多，患者的危险性越高 12. 下图表示PCR过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R表示方向。下列叙述正确的是（ ） A. ②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板 B. PCR过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制 C. 以1个DNA为模板经3次循环需消耗7个引物③ D. 物质③的5′端添加了某序列，至少需经3次循环才可获得该序列的双链产物 13. 如图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，相关叙述正确的是（ ） A. 图1中溶液a是NaCl溶液，玻璃棒应沿不同方向进行搅拌 B. 图1中丝状物为粗提取的DNA，其与蛋白质均可溶于酒精 C. 若图2试管中溶液的液面高于烧杯中的液面，可能导致加热不充分 D. 图2试管2起对照作用，溶液b是溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液 14. 研究发现，大豆GmNF-YA19基因在干旱胁迫中有响应。科研人员利用PCR扩增GmNF-YA19基因，构建GmNF-YA19基因表达载体并转化烟草，实验过程如图1、2所示下列说法错误的是（ ） A. PCR扩增GmNF-YA19基因的前提是根据已知核苷酸序列合成两种引物 B. 为获得能正确表达目的基因的重组质粒，应选用限制酶KpnI、EcoRI进行切割 C. 终止子为一段DNA序列，其作用是使转录在所需要的地方停下来 D. 重组质粒转化烟草后，可使用含氨苄青霉素的培养基来筛选目的细胞 15. 如图是几种不同限制性内切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述正确的是（ ） A. 以上DNA片段由5种限制酶切割后产生，切割产生①片段的限制酶识别序列由5个核苷酸组成 B. 限制酶只存在于原核生物中，作用的化学键为磷酸二酯键 C. 上述能进行连接的两个黏性片段，其连接后形成的DNA分子是 D. 两个③片段不能被E.coliDNA连接酶催化连接形成重组DNA 16. 小鼠体细胞克隆胚胎着床后胎盘发育显著异常可能是与克隆胚胎中H3K27me3印记基因过度表达有关，H3K27me3印记基因敲除极大提高了体细胞克隆的成功率。科学家分别测量H3K27me3印记基因敲除的克隆小鼠（甲组）、H3K27me3印记基因不敲除的克隆小鼠（乙组）和受精卵来源的小鼠（丙组）的体重和胎盘直径，结果如下图所示。下列相关分析错误的是（ ） A. 克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因 B. 克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大 C. H3K27me3印记基因过度表达抑制胎盘的发育 D. H3K27me3印记基因的表达产物可能影响早期胚胎滋养层细胞的发育 17. 我国科研人员将番木瓜环斑病毒（PRSV，一种单链RNA病毒）的复制酶基因转入番木瓜，培育出抗病毒番木瓜“华农一号”。“华农一号”能产生与PRSV的RNA形成局部双链的RNA，阻止病毒的复制。下列分析错误的是（　　） A. 培育抗病毒番木瓜“华农一号”需要用到植物组织培养技术 B. 培育“华农一号”时，可以用不同的限制酶切割质粒和目的基因 C. PCR扩增复制酶基因时，反应体系中需加入引物和TaqDNA聚合酶 D. “华农一号”通过表达出复制酶使番木瓜获得对PRSV病毒的抗性 18. 基因组印记(通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达)阻碍了哺乳动物孤雌生殖的实现。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞(类似受精作用)，最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（ ） A. 体外培养卵母细胞时，为防止污染，需将培养皿置于二氧化碳培养箱中进行培养 B. 甲基化可能会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化处理有利于其表达 C. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同 D. 移植后的囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来 19. 新冠病毒通过表面的S蛋白与靶细胞膜上的血管紧张素转化酶2（ACE2）结合实现入侵。2022年3月，国家卫健委印发《新冠病毒抗原检测应用方案(试行)》，增加抗原检测作为核酸检测的补充手段。抗原检测采用双抗体夹心法，其原理如下图。结合垫处含有足量的、可移动的、与胶体金结合的抗体1，T处固定有抗体2，抗体1和抗体2与新冠病毒表面同一抗原N蛋白的不同位点发生特异性结合，呈红色。C处固定有抗体1的抗体，与抗体1结合也呈红色。下列叙述正确的是（ ） A. 若检测结果为阳性，检测过程中抗原-抗体的特异性结合发生4次 B. 若待测样本中不含新冠病毒，显色结果为C处和T处均出现红色 C. 用单克隆抗体制备技术制备抗体1，先给小鼠注射纯化的S蛋白 D. 灭活病毒疫苗制备前期，需要用具有ACE2的细胞培养新冠病毒 20. 甲基消草磷属于抗微管除草剂，可以使植物的微管系统彻底解聚，从而导致有丝分裂中期受到抑制。研究发现甲基消草磷能有效诱导玉米花药培养的单倍体愈伤组织染色体加倍，可由此获得纯合的玉米新品种。下列叙述错误的是（ ） A. 甲基消草磷的功能类似秋水仙素，可以使染色体数目加倍 B. 利用玉米花药进行单倍体育种需要植物组织培养技术的支持 C. 上述玉米的育种原理为染色体变异，染色体加倍发生在愈伤组织形成前 D. 秋水仙素和甲基消草磷作用于有丝分裂的主要时期分别是前期和中期 21. 甲植物具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因。科研人员通过以下途径培育出具有抗除草剂性状的优良品质丙。图中字母表示过程、数字序号表示细胞。 下列相关叙述正确的是（ ） A. 过程A应置于高渗溶液中处理，再将①②诱导融合成③ B. 过程B无需筛选鉴定，形成杂种细胞后即可接种到培养基中 C. 过程C、D采用固体培养基，添加激素的种类和比例相同 D. 杂种植物丙为二倍体，有的配子不含抗除草剂基因 22. 水体养殖过程中常会产生硝酸铵等而导致水体污染，反硝化细菌能在无氧环境中通过反硝化作用将硝酸铵转化为氮气。某人利用如图所示的方法从龙虾养殖池中筛选分离出了除氮效率高的反硝化细菌用于污水处理。下列叙述正确的是（ ） 注：BTB培养基初始pH为6.8，BTB是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色 A. 需将BTB培养基先灭菌后调节pH，以利于反硝化细菌的生长 B. 挑选显蓝色的单菌落在固体培养基上划线分离，以获得纯菌株 C. BTB培养基应以硝酸铵为唯一氮源，不含氮源的培养基不能用于微生物的培养 D. 通过观察未接种的BTB培养基表面是否有菌落，可判断该培养基是否起到选择作用 23. 实验小组从苏云金芽孢杆菌中提取Bt毒蛋白，注射到小鼠体内使小鼠产生相应的抗体，再从转基因抗虫棉中提取蛋白质电泳分离后和抗体杂交，然后加入带有特殊标记的抗体以显示出杂交带，具体过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 从转基因抗虫棉中分离出的蛋白质相当于抗原 B. 二抗可能是带有放射性同位素标记的一抗的抗体 C. 若未显示出杂交带，则说明目的基因未导入受体细胞 D. 图示操作的目的是检测转基因棉花是否产生Bt毒蛋白 24. 科研人员将寒带地区海鱼中的抗冻基因转入千禧果细胞中，成功培育出抗冻千禧果。下图为培育过程中使用的Ti质粒示意图，其中Vir区的基因活化能促进T-DNA的加工和转移，下列叙述正确的是（　　） A. 构建基因表达载体时，最好选择限制酶Ⅱ和Ⅲ来切割质粒 B. 利用PCR扩增抗冻基因，需提前检测抗冻基因的全部碱基序列 C. Vir区的基因活化促进抗冻基因整合到千禧果细胞的染色体DNA上 D. 利用含卡那霉素的培养基可筛选出成功导入抗冻基因的千禧果细胞 25. 一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维(PP)，某科研团队准备从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌。图甲表示PP分解菌分离与计数的过程，6号试管涂布的三个平板的菌落数为550、601、688；7号试管涂布的三个平板的菌落数为58、73、97；8号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。图乙表示在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂，目的菌落周围出现透明圈的情况。下列说法正确的是（ ） A. 图甲、图乙所用培养基分别为选择培养基和鉴别培养基，都以PP作为唯一碳源 B. 图甲、图乙所用接种方法分别为稀释涂布平板法和平板划线法，都需在酒精灯火焰旁进行 C. 1 g土壤样品中含有PP分解菌的估算数目是7．6×1010个，此数值一般偏大 D. 可选择图乙培养基中d/D比值大的PP分解菌作为目的菌种推广使用 二、非选择题（共4小题，50分） 26. Ⅰ乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶（LCT）的分泌量较少，导致患者无法完全消化母乳或牛乳中的乳糖，从而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时，需用乳糖酶将奶中的乳糖除去。为了提高乳糖酶的产量，科研人员从牧民的奶酪（一种近似固体的发酵牛奶制品）中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌，下图为流程示意图。请回答下列问题： 注：X-gal为乳糖酶的显色底物，乳糖酶可以将无色的X-gal分解成半乳糖和蓝色的溴靛蓝。 （1）将奶酪悬浮液接种到培养基甲中的目的是_______。 （2）若要将培养基甲中的菌液稀释10倍，应进行的操作是从培养基甲中吸取1mL的菌液，置于盛有_______的试管中。 （3）X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时，应挑选的是_______。 Ⅱ科研工作者也利用生物技术培育出转基因低乳糖奶牛。如图为转基因低乳糖奶牛的培育流程。请据图分析回答下列问题： （4）如图所示，转基因低乳糖奶牛的培育过程涉及的生物技术有基因工程、_______（写出两项） （5）科学家在构建重组质粒T时，首先采用PCR技术对LCT基因进行扩增，在扩增目的基因的操作过程中，加入的物质有：模板DNA、引物、4种_______以及耐高温的DNA聚合酶。若一个该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，需要_______个引物。 （6）从分子水平上检测转基因牛细胞中LCT基因是否表达的方法是_______。 （7）在转基因低乳糖奶牛的乳腺细胞中，可检测到的物质有_______（填字母）。 A. LCT基因 B. LCTmRNA C. LCT D. LCT的抗体 27. 我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示，请回答下列问题： （1）体内受精时，在精子触及卵细胞膜的瞬间，_______会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入。_______作为受精的标志（写出两项）。 （2）用_______对雌性小鼠进行_______处理可得到大量卵母细胞，卵细胞转化为phESC的过程相当于植物组织培养中的_______过程。 （3）不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为_______。利用胚胎分割的方法对乙进行处理，得到了多只孤雄小鼠，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意_______。 （4）利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行用于医学研究的优点是_______。（从遗传物质角度分析） 28. 成纤维细胞生长因子（FGF20）会在肺癌、胃癌和结肠癌细胞中过量表达，可作为潜在的肿瘤标志物。因此抗FGF20抗体可用于癌症的早期诊断筛查。研究者设计如图流程制备抗FGF20单克隆抗体。请回答下列问题： （1）给小鼠注射FGF20，是为了获得_______。②过程先诱导细胞融合，再进行筛选，经筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_______。 （2）③过程需对得到的杂交瘤细胞进行_______和_______，经多次筛选，以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 （3）某些肿瘤细胞表面的PD-LI与细胞毒性T细胞（CTL）表面的PD-I结合能抑制CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-LI和PD-I的结合，可恢复CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与化疗的联合治疗研究。部分结果见图。 ①据图分析，_______疗法的治疗效果最佳，推测其原因是_______。 ②某兴趣小组基于现有抗体——药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为_______（填“方案一”或“方案二”）可行。 29. 番茄不耐寒，冬季容易冻坏，难以储藏。我国科研人员从某植物中提取了一种抗冻基因AtCOR15a，经过一系列过程获得转基因抗冻的番茄新品种，操作流程如图。回答下列问题： （1）用PCR技术扩增AtCOR15a基因时需要添加引物，引物的作用是_______。 （2）如果要将AtCOR15a基因与质粒正确构建重组DNA分子，一般采用双酶切法，据图分析选用的两种限制酶组合是_______。双酶切法的优势是_______。 （3）图中是采用_______法将目的基因转移到番茄细胞中，并将其整合到该细胞的_______上。 （4）为了提高AtCOR15a基因的表达能力，可将AtCOR15a基因与外源强启动子连接，如下图所示。 （注：图中①、②、③、④表示引物） 利用PCR检测上述连接是否正确，可选择的引物组合是_______。 （5）为了进一步提高番茄的储藏时间，可从该植物体内提取ErsⅠ基因（乙烯受体基因），按照下图流程将ErsⅠ基因重新导回该植物，致使该植物原有ErsⅠ基因翻译受抑制。已知限制酶EcoRⅠ和XhoⅠ、BamHⅠ切割后露出的黏性末端碱基序列不同，据图分析，提取的目的基因A、B两端需分别添加_______、_______的识别序列。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $