精品解析：安徽省安庆市第二中学2024-2025学年高二下学期期中考试生物试题

安庆二中 2024-2025学年度第二学期期中考试高二生物试题 （考试时间：75分钟 满分：100分） 一、单选题（本大题共16小题，每题3分，共48分）。 1. 下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是（ ） A. 用酵母菌发酵酿制果酒，选择溴麝香草酚蓝水检测产生的酒精 B. 利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵 C. 腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵 D. 泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量一直升高，发酵10天以上的泡菜不能食用 【答案】C 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。 4、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、用酵母菌发酵酿制果酒，选择溴麝香草酚蓝水溶液检测产生的二氧化碳，用酸性重铬酸钾溶液鉴定酒精，A错误； B、乳酸菌是厌氧菌，因此利用乳酸菌制作酸奶过程中都要密封发酵，B错误； C、腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵，C正确； D、泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量先升高后降低，发酵10天以上的泡菜中亚硝酸盐含量相对较低，可以食用，D错误。 故选C。 2. 下列关于微生物的培养与计数的描述正确的是（ ） ①分离分解尿素的细菌要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基 ②对微生物计数可以使用平板划线法和稀释涂布平板法接种微生物 ③纤维素分解菌鉴定时，在培养基中加入酚红指示剂，如果指示剂变红则能初步鉴定 ④在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别较大，则需重新进行实验 ⑤进行微生物培养时要每隔24h统计一次菌落的数目 ⑥获得菌落数目为30~300的平板就说明实验操作成功 A. ①④⑤ B. ②③⑥ C. ②④⑤ D. ③⑤⑥ 【答案】A 【解析】 【分析】稀释涂布平板法：稀释涂布平板法除了可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测样品大约含有多少活菌。 【详解】①分离分解尿素的细菌，要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，进行筛选，①正确； ②对微生物计数可以使用稀释涂布平板法接种微生物，平板划线法无法计数，②错误； ③纤维素分解菌鉴定时，在培养基中加入刚果红染色剂，而不是酚红指示剂，③错误； ④在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别较大，则说明实验结果有误，需重新进行实验，④正确； ⑤进行微生物培养时要每隔24h统计一次菌落的数目，以确定培养情况，⑤正确； ⑥获得2个或2个以上菌落数目为30-300的平板，才说明实验操作成功，⑥错误； 综上所述，A正确，BCD错误。 故选A。 3. 从某污水处理系统中分离出多种细菌，经进一步筛选获得具有高效降低污水中有机污染物（COD为有机污染物分解时化学需氧量）能力的菌株，过程如图所示。下列相关说法错误的是（　　） A. 牛肉膏蛋白胨培养基可用高压蒸汽灭菌法灭菌 B. 为确定接种时菌液的最佳稀释倍数可先用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目 C. 图中平板划线法获得的菌落具有不同的菌落特征 D. 挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是扩大化培养菌株 【答案】C 【解析】 【分析】1、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、测定微生物数量的方法有显微镜直接计数、统计菌落数目（稀释涂布平板法）。 【详解】A、牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基，可用高压蒸汽灭菌法灭菌，A正确； B、用显微镜直接计数法统计不同稀释倍数的菌液中的细菌数目，可确定接种时菌液的最佳稀释倍数，B正确； C、由菌落分布情况可知，在该固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法，C错误； D、挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是增大菌株的数量（扩大培养），D正确。 故选C。 4. 利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。下图为某企业通过发酵制作酱油的流程图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 米曲霉发酵过程中，添加小麦主要是为米曲霉的生长提供氮源 B. 米曲霉发酵过程中，通常会大量分泌制作酱油过程所需的酶类 C. 发酵池发酵阶段，添加的乳酸菌和酵母菌在细胞结构上存在明显不同 D. 发酵池发酵阶段，添加食盐是抑制发酵过程杂菌污染和繁殖重要措施 【答案】A 【解析】 【分析】微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。 【详解】A、小麦的主要成分为淀粉，主要是为米曲霉的生长提供碳源，A错误； B、米曲霉发酵过程中，通常会大量分泌制作酱油过程所需的酶类，从而将大豆、小麦、麦麸等物质中的大分子有机物分解，B正确； C、乳酸菌为原核生物，酵母菌为真核生物，原核生物的细胞结构中不含核膜包被的细胞核，真核生物的细胞结构中含有核膜包被的细胞核，C正确； D、食盐具有杀菌作用，发酵池发酵阶段，添加食盐抑制发酵过程杂菌污染和繁殖重要措施，D正确。 故选A。 5. 甘薯由于具有增强免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等作用，故越来越被人们喜爱。但甘薯属于无性繁殖作物，同时又是同源六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相关操作不合理的是（ ） A. 用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，可以解决种苗用量大、成本高的问题 B. 利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高 C. 利用原生质体融合实现体细胞杂交，克服杂交不亲和，可以充分利用遗传资源 D. 利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，有利于缩短育种年限 【答案】B 【解析】 【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株，植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【详解】A、植物细胞工程应用之一是：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，被人们形象地称为植物的快速繁殖技术，也叫作微型繁殖技术。它不仅可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，还可以保持优良品种的遗传特性。A正确； B、茎尖等分裂旺盛部位基本无病毒感染。目前采用茎尖组织培养技术脱去病毒，已在许多作物上获得成功。脱毒的作物不仅能增产而且品质也明显优于没有脱毒的作物。脱毒≠抗病毒，B错误； C、原生质体的融合原理是细胞膜具有一定的流动性，通过去壁、促融、细胞壁再生、组织培养技术后可培育出异源杂合体，C正确； D、愈伤组织具有分裂旺盛的优点，适合用于诱变育种，能提高突变频率，有利于缩短育种年限。D正确。 故选B。 6. 在下列过程中，需要采用植物组织培养技术的是（ ）　 ①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株②用花药离体培养得到的单倍体植株③用基因工程培养抗棉铃虫的植株④利用细胞工程培养“番茄马铃薯”杂种植株⑤无子西瓜的大量繁殖 A. ①②③④ B. ①③④⑤ C. ①②④⑤ D. ②③④⑤ 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养是指利用特定的培养基将离体的植物细胞、组织或器官培养成完整植株的过程，所以花药的离体培养、基因工程中的受体细胞的培养、植物体细胞杂交后杂种细胞的培养以及植物的大量快速繁殖都要用到植物组织培养技术。 【详解】①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，①错误； ②利用花药离体培养得到的单倍体植株，需要采用植物组织培养技术，②正确； ③利用基因工程培养抗棉铃虫的植株，需要采用植物组织培养技术，③正确； ④利用细胞工程培养“番茄马铃薯”杂种植株，需要采用植物组织培养技术，④正确； ⑤无子西瓜的大量繁殖，需要采用植物组织培养技术，⑤正确，所以②③④⑤正确， 故选D。 7. 下列技术或方法与原理相符的是（ ） A. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖 B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性 C. 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性 D. 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组 【答案】A 【解析】 【分析】细胞的全能性指高度分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能；植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性；单克隆抗体的制备过程没有将细胞培养成个体，其原理属于细胞增殖；早期胚胎培养进行的是有丝分裂，没有体现细胞膜的流动性；人鼠细胞融合涉及细胞膜的融合过程，故体现细胞膜的流动性这一结构特点；转基因抗虫棉的培育利用的是基因工程技术，其原理是基因重组；克隆羊多利的培育运用的是核移植技术，其原理是动物细胞核的全能性。 【详解】人参细胞培养和动物细胞的培养中细胞要进行有丝分裂，故体现了细胞增殖这一原理，A项正确；植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性，单克隆抗体的制备过程没有将细胞培养成个体，其原理属于细胞增殖，B项错误；早期胚胎培养进行的是有丝分裂，体现了细胞的增殖能力，没有体现膜的流动性，人鼠细胞融合体现了细胞膜的流动性，C项错误；转基因抗虫棉的培育是基因工程，原理是基因重组，克隆羊多利的培育是核移植，胚胎移植，无基因重组，D项错误。 8. 某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为不正确的是（ ） 选项 比较项目 植物细胞工程 动物细胞工程 A 技术手段 植物组织培养、 植物体细胞杂交 动物细胞培养和融合、核移植、 单克隆抗体的制备 B 特殊处理 机械法去除细胞壁 胰蛋白酶处理，制成细胞悬液 C 融合方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、生物方法 D 培养基区别 生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 通常加入动物血清 A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【分析】植物细胞工程的技术手段主要有植物组织培养和植物体细胞杂交，其中植物组织培养是植物细胞工程的基础；动物细胞工程的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植和核移植，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。动、植物细胞工程的原理和技术手段有相似之点，但也存在不同之处，需要考生在平时的学习过程中注意列表比较。 【详解】A、技术手段：植物细胞工程的技术手段有植物组织培养和植物体细胞杂交；动物细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合、动物细胞核移植、单克隆抗体的制备等技术，A正确； B、特殊处理：植物体细胞杂交时，需要用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，动物细胞培养时需要用胰蛋白酶处理制备细胞悬浮液，B错误； C、融合方法：诱导植物细胞融合的方法有物理（离心、振动和电激等）和化学方法（聚乙二醇）；诱导动物细胞融合的方法有物理、化学和生物方法（灭活的病毒），C正确； D、培养基区别：植物细胞工程中的培养基中需要用生长素和细胞分裂素以影响愈伤组织的生长和分化；动物细胞工程的培养液中需要加入动物血清、血浆等天然成分，D正确。 故选B。 9. 某实验室做了如图所示的实验研究，下列相关叙述，正确的是（ ） A. 过程①形成的诱导干细胞分化程度高 B. 过程②产生具有不同种类蛋白质的各类细胞 C. 过程③不需用选择性培养基进行筛选 D. 过程④单抗释放需要膜上载体蛋白的协助 【答案】B 【解析】 【详解】本题考查细胞分化及细胞工程相关知识，考查学生的综合应用能力。过程①形成的诱导干细胞分化程度低，全能性高，A错。过程②是细胞的分化过程，细胞分化是基因选择性表达的结果，因此产生了不同种类的蛋白质，B正确。过程③要用选择培养基才能选出杂交瘤细胞，C错。过程④分泌抗体蛋白，是外排过程，不需载体蛋白协助，D错。 10. 杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，相关叙述正确的是（ ） A. 选用的雌性杜泊羊只要有健康体质和正常繁殖能力就行 B. 从卵巢中采集的卵母细胞都可直接与获能的精子进行体外受精 C. 为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂 D. 为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎 【答案】D 【解析】 【分析】1、据图可知，通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊，涉及体外受精技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。 2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、选用的雌性杜泊羊不仅要有健康体质和正常繁殖能力，还需具有优秀的遗传特性和生产性能，A 错误； B、从卵巢中获得的卵母细胞是不成熟的卵母细胞，需培养成熟后才能与获能精子结合，B错误； C、对受体和供体做同期发情处理，受体对植入胚胎不会产生排斥反应，不需注射免疫抑制剂，C错误； D、扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎或多胎， D 正确。 故选 D 。 11. 下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是（　　） A. 工程菌产生的生长激素可以直接使用效果良好 B. 将重组质粒导入细菌B常用的方法是用Ca2+处理细菌 C. 目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有四环素的培养基上生长 D. 将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的是只导入了质粒A的细菌 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：图示表示将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的过程。质粒A上含有四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因，构建基因表达载体后，破坏了质粒A的抗氨苄青霉素基因，但抗四环素基因正常，所以导入重组质粒或普通质粒的大肠杆菌都能抗四环素，但导入重组质粒的大肠杆菌不能抗氨苄青霉素。 【详解】A、由于细菌无内质网和高尔基体，对合成的生长激素不能加工、修饰，故工程菌产生的生长激素不能直接使用，A错误； B、将目的基因导入细菌时，常用Ca2+处理细菌，使之处于能够吸收重组质粒的状态，B正确； C、目的基因成功表达的标志是合成人的生长激素，而不是在含有四环素的培养基上生长，C错误； D、由于抗氨苄青霉素基因被破坏，抗四环素基因没有被破坏，将重组质粒导入细菌，细菌涂布在含有四环素的培养基上能生长；而质粒A含有抗四环素抗基因，因此导入质粒A的细菌也能在含有四环素的培养基上生长，D错误。 故选B。 12. 关于基因工程下列说法正确的有（　　） ①限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 ②基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工 ③重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体 ④只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达 ⑤所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 ⑥基因工程可以将一种生物的优良性状移植到另一种生物身上 ⑦质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的运载体 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体、动植物病毒。 【详解】①一种限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列，其具有特异性，所以限制酶的切口不都是GAATTC碱基序列，①错误； ②基因工程又称基因拼接技术，是在DNA上进行的分子水平的设计施工，②正确； ③重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶，运载体不属于工具酶，③错误； ④目的基因进入受体细胞后不一定能成功实现表达，因此还需要进行检测和鉴定，④错误； ⑤一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶识别的序列不同，⑤错误； ⑥基因工程又称基因拼接技术，基因工程可以将一种生物的优良性状移植到另一种生物身上，⑥正确； ⑦质粒是基因工程中常用作运载目的基因的载体，但不是唯一的载体，⑦错误。 故选A。 13. 动物生物反应器的研究开发重点是动物血液反应器和动物乳腺反应器，即把人体相关基因整合到动物胚胎里，使生出的转基因动物血液中或长大后产生的乳汁中含有人类所需要的药用蛋白质。以下相关说法错误的是（ ） A. 在制备乳腺生物反应器时需将目的基因导入受精卵中 B. 将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等结合在一起构建表达载体 C. 实验过程中采用显微注射的方法导入目的基因 D. 获得的转基因动物只有乳腺细胞内具有目的基因 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤 （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、在制备乳腺生物反应器时需将目的基因导入到受精卵中，A正确； B、培育动物生物反应器时，将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等结合在一起构建表达载体，B正确； C、将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，C正确； D、转基因动物的体细胞是由同一个受精卵（含有目的基因）经有丝分裂形成的，故体细胞均含目的基因，D错误。 故选D。 14. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓，但在治疗过程中发现其抗凝血活性低。研究人员欲提高水蛭素抗凝血活性，正确的操作步骤是（　　） ①确定影响活性的氨基酸序列 ②分析水蛭素的空间结构，找到影响其活性的结构域 ③推测需要替换的氨基酸序列 ④构建表达载体，使其在受体细胞中表达 ⑤PCR技术获得改造后的水蛭素基因 ⑥确定基因中的碱基序列 A. ②①③⑤⑥④ B. ②③⑥①⑤④ C. ②①③⑥⑤④ D. ①②③④⑤⑥ 【答案】C 【解析】 【分析】蛋白质工程：指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。 【详解】运用蛋白质工程技术，先分析水蛭素的空间结构，找到影响其活性的结构域，然后确定影响活性的氨基酸序列，推测需要替换的氨基酸序列，最终确定基因中的碱基序列，据此通过PCR技术获得改造后的水蛭索基因，并构建表达载体，使其在受体细胞中表达，可提高水蛭素抗凝血活性，综上，ABD错误，C正确。 故选C。 15. 下列对于生物技术安全与伦理问题认识不合理的是（　　） A. 通过防止转基因作物花粉的传播，减少对野生植物的基因污染 B. 通过禁止销售、食用转基因食品，提高转基因产品的安全性 C. 对植入前的胚胎进行遗传学诊断，有助于父母生育健康婴儿 D. 参观细菌战历史陈列馆，可帮助人们认识生物武器的危害 【答案】B 【解析】 【分析】目前对转基因生物安全性的争论主要是食物安全和环境安全，另外还有生物安全问题，转基因生物的安全性问题。转基因食品、产品上都要标注原料来自转基因生物。当今社会的普遍观点是反对生殖性克隆人实验，但不反对转基因；试管婴儿可以设计婴儿的性别，反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿。 【详解】A、转基因作物可以通过花粉或种子将外源基因扩散到其他植物，从而对生态环境造成潜在的危害，所以通过防止转基因作物花粉的传播，减少对野生植物的基因污染，A正确； B、转基因食品的安全性问题还有待进一步研究，现在还没有禁止销售、食用转基因食品，可以通过标注转基因食品，增加转基因产品的安全性，B错误； C、胚胎植入前遗传学诊断可以排除男女双方或一方患有的多种遗传病，有助于父母生育健康婴儿，C正确； D、可以参观细菌战历史陈列馆或观看相关影像资料，帮助人们认识生物武器的危害，D正确。 故选B。 16. 拟南芥中RGL1酶作为E3泛素连接酶（AtRZF1）的抑制因子在响应植物干旱胁迫中发挥着重要作用。研究发现，AtRZF1功能丧失突变体比野生型拟南芥具有更高的耐旱性。研究人员采用融合PCR技术（原理如下图所示）将RGL1酶基因和AtRZF1基因连接起来构建融合基因以研究两种基因的相互作用。下列说法正确的是（　　） A. RGL1酶在植物干旱胁迫响应中起到正调控作用 B. 图中第一阶段经过1次PCR循环即可获得双链等长的DNA C. 图中第二阶段构建融合基因时能够起到“搭桥融合”作用的引物有4种 D. 融合PCR技术操作过程中的每个阶段都需经历两次降温和一次升温 【答案】A 【解析】 【分析】1、PCR是利用DNA在体外摄氏95℃高温时变性会变成单链，低温(经常是60℃左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72℃左右)，DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链，基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。 2、融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。 【详解】A、据题意，AtRZF1功能丧失突变体比野生型拟南芥具有更高的耐旱性，说明AtRZF1在干旱胁迫响应中起抑制作用，而RGL1酶作为E3泛素连接酶（AtRZF1）的抑制因子，所以RGL1酶在植物干旱胁迫响应中起到正调控作用，A正确； B、由图可知，引物2和引物3的一端都添加了一段序列，所以经过1次PCR循环得到的是含有引物2、引物3的产物，其DNA双链不等长，该产物继续进行第二次扩增（循环），才能获得双链等长的DNA，B错误； C、由图可知，融合PCR中是通过在引物2和引物3的一端添加能碱基互补配对的序列，从而在第二阶段利用这两段互补序列形成具有重叠链的PCR引物。所以能够起到“搭桥融合”作用的引物有2种，即引物2和引物3，C错误； D、PCR技术操作过程中，每轮循环是需要一次降温和两次升温，D错误； 故选A。 二、非选择题：本大题共5小题，共52分。 17. 请回答下列与生物技术实践相关的问题。 （1）无菌技术主要通过消毒和灭菌这两种方法来避免杂菌的污染，用酒精棉球擦拭操作者双手和用酒精灯火焰引燃残余酒精灼烧涂布器分别属于___________（方法）和__________（方法）。 （2）在腐乳、泡菜制作过程中，需要氧气的是________制作；该过程中起主要作用的微生物是________，其代谢类型为___________________。 （3）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。 ①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有__________________和_________________。 ②虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、_______________________。 （4）酵母菌是一种真菌，可用于制作果酒。果汁发酵后是否产生酒精，可以用______________来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现特定的颜色。 【答案】（1） ①. 消毒 ②. 灭菌 （2） ①. 腐乳 ②. 毛霉 ③. 异养需氧型 （3） ①. 平板划线法 ②. 稀释涂布平板法 ③. 无机盐、碳源、氮源 （4）重铬酸钾溶液 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氯型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，腐乳制作的茵种主要是毛霉，代谢类型是需氧型真菌。泡菜的制作原理:起作用的乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型。 2、微生物常见的接种的方法①平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 用酒精棉球擦拭接种环属于消毒，用酒精灯火焰灼烧接种环属于灭菌。 【小问2详解】 在腐乳制作过程中起主要作用的微生物是毛霉，腐乳制作时需要氧气，其代谢类型为异养需氧型；在泡菜制作过程中起主要作用的微生物是乳酸菌，属于厌氧菌。 【小问3详解】 实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。 各种培养基中一般都含有水、无机盐、碳源、氮源。 【小问4详解】 检验酒精可用酸性重铬酸钾溶液，它遇酒精能够由橙色变为灰绿色。 【点睛】本题考查微生物培养和传统发酵技术，意在考查考生对所学知识要点的理解，把握知识间内在联系，运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。 18. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。 据图回答下列问题： （1）过程①所需的酶是______________________________。 （2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的__________________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 （3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是___________________。原生质体经过______________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 （4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和______________植株的根尖，通过_____________、_______________、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。 （5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1~4中一定是杂种植株的有_______________。 （6）对杂种植株进行___________________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。 【答案】 ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 叶绿体 ③. 保持原生质体完整性 ④. 细胞壁 ⑤. 双亲（或花椰菜和黑芥 ） ⑥. 解离 ⑦. 漂洗 ⑧. 1、2、4 ⑨. 黑腐病菌 【解析】 【详解】（1）要得到植物细胞的原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶处理细胞，使细胞壁分解。 （2）由于要培养的是抗黑腐病的花椰菜，所以需要供体含有黑腐病抗性基因，供体是由光照培养的黑芥苗提供的，所以供体一定含有叶绿体。 （3）原生质体培养液中加入甘露醇其作用是避免原生质体吸水涨破，原生质体经过细胞壁再生，才能进行分裂分化。 （4）要看再生植株染色体变异类型需要观察再生植株与双亲的染色体差异，观察染色体需要经过解离、漂洗、染色和制片几个过程。 （5）再生植株1、2、4同时含有花椰菜和黑芥的基因组，所以一定是杂种植株。 （6）黑腐病菌的抗性基因进入到杂种植物体内，杂种植株能抗黑腐病，所以对杂种植株进行病菌接种实验，是筛选杂种植株的方法。 19. 传统上，癌症有化疗、免疫疗法、放疗和手术等治疗方法。研究结果显示，干细胞疗法在癌症治疗方面有新的突破，源自骨髓的间充质干细胞自然迁移并黏附在肿瘤上，可用于将抗癌药物直接输送至癌细胞。间充质干细胞还可以调节肿瘤微环境中的免疫成分以延缓癌症发展。请回答下列问题： （1）间充质干细胞在体外培养时要先用_____________酶处理使其分散成单个细胞；间充质干细胞需要置于含95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，原因是___________。 （2）若自体间充质干细胞不能满足使用，可以进行克隆，动物体细胞核移植所用的受体细胞通常是__________。可通过___________去除受体细胞的细胞核，哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，其中移植成功率较高的是_______________，原因是____________。 （3）阿霉素是一种抗肿瘤药物，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。治疗肿瘤时，可以用单克隆抗体捆绑阿霉素制成生物导弹，有针对性的作用于肿瘤细胞，单克隆抗体是由________________分泌的，具有__________（答出2点）的特点；与直接使用阿霉素相比，生物导弹的优点是____________。 【答案】（1） ①. 胰蛋白（或胶原蛋白） ②. O2是间充质干细胞细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH （2） ①. MⅡ期（去核）的卵母细胞 ②. 显微操作 ③. 胚胎细胞核移植 ④. 动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难 （3） ①. 杂交瘤细胞 ②. 能准确地识别抗原的细微差异，与肿瘤细胞抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 ③. 能减轻阿霉素对正常细胞的伤害 【解析】 【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 2、动物细胞培养的流程：取动物组织块——剪碎组织——用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞——制成细胞悬液——转入培养液中（原代培养）——放入二氧化碳培养箱培养——贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞制成细胞悬液——转入培养液（传代培养）——二氧化碳培养箱。 【小问1详解】 在动物细胞培养的过程中，间充质干细胞要先用胰蛋白（或胶原蛋白）酶处理使其分散成单个细胞；培养箱中空气含有的O2是间充质干细胞细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【小问2详解】 动物体细胞核移植所用的受体细胞通常是MⅡ期去核的卵母细胞，可通过显微操作去除受体细胞的细胞核。哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此胚胎细胞核移植的成功率较高。 小问3详解】 单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的，具有能准确地识别抗原的细微差异，与肿瘤细胞抗原发生特异性结合，并且可以大量制备等特点；阿霉素对正常细胞也有一定毒性，而单克隆抗体特异性强，可减轻阿霉素对正常细胞的伤害。 20. 透明质酸酶在临床上常用作药物渗透剂，目前主要从动物组织中提取。科研人员尝试将透明质酸酶基因转入大肠杆菌，使其得到高效表达。如图中NcoⅠ和XhoⅠ为限制酶，重叠延伸PCR是一种定点突变技术。请据图回答下列问题： （1）步骤①的目的是保护_______。 （2）若图中的透明质酸酶基因来自cDNA文库，则在进行步骤②之前需在其前、后端分别接上特定的_______，否则该基因就不能转录。步骤②需要用________切割质粒。 （3）图中A是_____；早期实验人员利用大肠杆菌作为受体，后来发现用毛霉或酵母菌作为受体更具优势，从生物体结构角度分析，最可能的原因是___。 （4）目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定地维持和表达其遗传特性，只有通过检测和鉴定才能知道。检测转基因生物DNA上是否插入了目的基因的方法是________。 【答案】（1）透明质酸酶基因，防止NcoⅠ限制酶破坏目的基因 （2） ①. 启动子、终止子 ②. NcoⅠ和XhoⅠ （3） ①. 基因表达载体 ②. 毛霉或酵母菌是真核细胞，有内质网和高尔基体能对蛋白质进行加工 （4）PCR技术##聚合酶链式反应 【解析】 【分析】目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因一一PCR技术： ②检测目的基因是否转录出了mRNA一一PCR技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质一一抗原一抗体杂交技术。个体 水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 分析图解可知，图中目的基因的中间存在NcoI限制酶的切割位点，因此步骤①的目的是为了保护透明质酸酶基因，防止NcoⅠ限制酶破坏目的基因。 小问2详解】 基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因等。启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端，因此在进行步骤②之前需在透明质酸酶基因前、后端分别接上特定的启动子、终止子，否则该基因就不能转录。目的基因获得使用的限制酶是NcoⅠ和XhoⅠ，所以步骤②需要用NcoⅠ和XhoⅠ切割质粒。 小问3详解】 据图可知，图中A是基因表达载体，由于毛霉或酵母菌是真核细胞，有内质网和高尔基体加工，可以对分泌蛋白质进行加工，故早期实验人员利用大肠杆菌作为受体，后来发现用毛霉或酵母菌作受体更具优势。 【小问4详解】 检测转基因生物DNA上是否插入了目的基因的方法有PCR技术、DNA分子杂交等。 21. 赤霉素与其受体GID结合后，可以促进植物茎秆伸长。蓝光能够激活蓝光受体CRY，抑制赤霉素的作用，为探究该机理，研究者分别构建了含有His-CRY和GST-GID融合基因的表达载体，表达出相应的融合蛋白。His和GST均为短肽，它们与其他蛋白形成的融合蛋白能与His或GST抗体结合，且不影响其他蛋白的结构和功能。 （1）构建含上述融合基因的表达载体。 ①结合图1分析，欲使His短肽连在CRY的氨基酸序列前面（氨基端），则应在___________（填“F引物”或“R引物”）的5'端加上His短肽的编码序列。 ②为使融合基因能与载体相连接，还需在F引物和R引物上添加相应的酶切位点序列，该序列应该位于His短肽编码序列的___________（填“5'”或“3'”）端。 ③用同样的方法扩增CST-GID融合基因，并构建相关表达载体。 （2）将两个表达载体同时导入拟南芥细胞，一段时间后裂解细胞，将含有His抗体的磁珠加入裂解液中，充分孵育后收集磁珠，将磁珠上的蛋白（磁珠蛋白）分离下来，进行抗原抗体杂交，结果如图2。 ①对细胞裂解液蛋白进行抗原—抗体杂交的目的是确定His-CRY和GST-GID这两个融合基因在拟南芥细胞已正常_________________。对磁珠蛋白进行His抗体检测的目的是确定磁珠上的His抗体可以结合_________________。 ②图示结果说明，蓝光的作用机理是光激活CRY后，CRY与______________结合，使赤霉素无法发挥作用，从而抑制赤霉素的作用。 【答案】（1） ①. F引物 ②. 5' （2） ①. 表达 ②. His短肽 ③. 赤霉素受体GID 【解析】 【分析】基因工程的基本操作步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、 DNA 连接酶、载体。 【小问1详解】 ①由图1可知，欲使 His 短肽连在 CRY 的氨基酸序列前面(氨基端)，即获得“ 3’—His 短肽—CRY 基因—5’ ”的基因表达载体，由图可知CRY 基因的3’端对应的为F引物，即要将 His 短肽加在 CRY 的氨基端，应在 CRY 基因模板链的 3’端上加 His 短肽编码序列，对应的是 F 引物；而且加上的 His 序列不与 CRY 转录模板配对，所以只能加在 F 引物 5’端，才能保证引物与模板配对后可以正常延伸。 ②为使融合基因能与载体相连接，酶切位点序列应该位于F引物的3’ 端，His短肽编码序列的5’端。 【小问2详解】 ①为确定 His-CRY 和 GST-GID 这两个融合基因在拟南芥细胞中已正常表达，应对细胞裂解液蛋白进行抗原-抗体杂交，并且为了确定磁珠上的 His抗体可以结合 His 短肽，对磁珠蛋白进行 His抗体检测。 ②由题意可知，蓝光可以激活蓝光受体CRY，抑制赤霉素作用，分析图2，对细胞裂解液蛋白进行抗原-抗体杂交，无论黑暗或蓝光条件下，均具有条带，但含有His 抗体的磁珠蛋白组，黑暗条件下没有检测到GST条带，但蓝光组出现了GST条带，说明蓝光激活 CRY 后，CRY 与赤霉素受体 GID 结合，使赤霉素无法发挥作用，从而抑制赤霉素的作用。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 安庆二中 2024-2025学年度第二学期期中考试高二生物试题 （考试时间：75分钟 满分：100分） 一、单选题（本大题共16小题，每题3分，共48分）。 1. 下列关于传统发酵技术应用叙述，正确的是（ ） A. 用酵母菌发酵酿制果酒，选择溴麝香草酚蓝水检测产生的酒精 B. 利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵 C. 腐乳制作主要利用毛霉等生物产生的脂肪酶和蛋白酶进行发酵 D. 泡菜制作过程中，亚硝酸盐含量一直升高，发酵10天以上的泡菜不能食用 2. 下列关于微生物的培养与计数的描述正确的是（ ） ①分离分解尿素的细菌要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基 ②对微生物计数可以使用平板划线法和稀释涂布平板法接种微生物 ③纤维素分解菌鉴定时，在培养基中加入酚红指示剂，如果指示剂变红则能初步鉴定 ④在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别较大，则需重新进行实验 ⑤进行微生物培养时要每隔24h统计一次菌落的数目 ⑥获得菌落数目为30~300的平板就说明实验操作成功 A. ①④⑤ B. ②③⑥ C. ②④⑤ D. ③⑤⑥ 3. 从某污水处理系统中分离出多种细菌，经进一步筛选获得具有高效降低污水中有机污染物（COD为有机污染物分解时化学需氧量）能力的菌株，过程如图所示。下列相关说法错误的是（　　） A. 牛肉膏蛋白胨培养基可用高压蒸汽灭菌法灭菌 B. 为确定接种时菌液的最佳稀释倍数可先用显微镜直接计数法统计菌液中的细菌数目 C. 图中平板划线法获得的菌落具有不同的菌落特征 D. 挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的是扩大化培养菌株 4. 利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。下图为某企业通过发酵制作酱油的流程图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 米曲霉发酵过程中，添加小麦主要是为米曲霉的生长提供氮源 B. 米曲霉发酵过程中，通常会大量分泌制作酱油过程所需的酶类 C. 发酵池发酵阶段，添加的乳酸菌和酵母菌在细胞结构上存在明显不同 D. 发酵池发酵阶段，添加食盐是抑制发酵过程杂菌污染和繁殖重要措施 5. 甘薯由于具有增强免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等作用，故越来越被人们喜爱。但甘薯属于无性繁殖作物，同时又是同源六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相关操作不合理的是（ ） A. 用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，可以解决种苗用量大、成本高的问题 B. 利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高 C. 利用原生质体融合实现体细胞杂交，克服杂交不亲和，可以充分利用遗传资源 D. 利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，有利于缩短育种年限 6. 在下列过程中，需要采用植物组织培养技术的是（ ）　 ①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株②用花药离体培养得到的单倍体植株③用基因工程培养抗棉铃虫的植株④利用细胞工程培养“番茄马铃薯”杂种植株⑤无子西瓜的大量繁殖 A ①②③④ B. ①③④⑤ C. ①②④⑤ D. ②③④⑤ 7. 下列技术或方法与原理相符的是（ ） A. 人参细胞大量培养和动物细胞培养——细胞增殖 B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性 C. 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性 D. 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组 8. 某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为不正确的是（ ） 选项 比较项目 植物细胞工程 动物细胞工程 A 技术手段 植物组织培养、 植物体细胞杂交 动物细胞培养和融合、核移植、 单克隆抗体的制备 B 特殊处理 机械法去除细胞壁 胰蛋白酶处理，制成细胞悬液 C 融合方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、生物方法 D 培养基区别 生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 通常加入动物血清 A. A B. B C. C D. D 9. 某实验室做了如图所示的实验研究，下列相关叙述，正确的是（ ） A. 过程①形成的诱导干细胞分化程度高 B. 过程②产生具有不同种类蛋白质的各类细胞 C. 过程③不需用选择性培养基进行筛选 D. 过程④单抗释放需要膜上载体蛋白的协助 10. 杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如下图所示，相关叙述正确的是（ ） A. 选用的雌性杜泊羊只要有健康体质和正常繁殖能力就行 B. 从卵巢中采集的卵母细胞都可直接与获能的精子进行体外受精 C. 为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂 D. 为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎 11. 下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是（　　） A. 工程菌产生的生长激素可以直接使用效果良好 B. 将重组质粒导入细菌B常用的方法是用Ca2+处理细菌 C. 目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有四环素的培养基上生长 D. 将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的是只导入了质粒A的细菌 12. 关于基因工程下列说法正确的有（　　） ①限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 ②基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工 ③重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体 ④只要目基因进入受体细胞就能成功实现表达 ⑤所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 ⑥基因工程可以将一种生物的优良性状移植到另一种生物身上 ⑦质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的运载体 A. 2项 B. 3项 C. 4项 D. 5项 13. 动物生物反应器的研究开发重点是动物血液反应器和动物乳腺反应器，即把人体相关基因整合到动物胚胎里，使生出的转基因动物血液中或长大后产生的乳汁中含有人类所需要的药用蛋白质。以下相关说法错误的是（ ） A. 在制备乳腺生物反应器时需将目的基因导入受精卵中 B. 将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因启动子等结合在一起构建表达载体 C. 实验过程中采用显微注射的方法导入目的基因 D. 获得的转基因动物只有乳腺细胞内具有目的基因 14. 水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓，但在治疗过程中发现其抗凝血活性低。研究人员欲提高水蛭素抗凝血活性，正确的操作步骤是（　　） ①确定影响活性的氨基酸序列 ②分析水蛭素的空间结构，找到影响其活性的结构域 ③推测需要替换的氨基酸序列 ④构建表达载体，使其在受体细胞中表达 ⑤PCR技术获得改造后的水蛭素基因 ⑥确定基因中的碱基序列 A. ②①③⑤⑥④ B. ②③⑥①⑤④ C. ②①③⑥⑤④ D. ①②③④⑤⑥ 15. 下列对于生物技术安全与伦理问题认识不合理的是（　　） A. 通过防止转基因作物花粉的传播，减少对野生植物的基因污染 B. 通过禁止销售、食用转基因食品，提高转基因产品的安全性 C. 对植入前的胚胎进行遗传学诊断，有助于父母生育健康婴儿 D. 参观细菌战历史陈列馆，可帮助人们认识生物武器的危害 16. 拟南芥中RGL1酶作为E3泛素连接酶（AtRZF1）的抑制因子在响应植物干旱胁迫中发挥着重要作用。研究发现，AtRZF1功能丧失突变体比野生型拟南芥具有更高的耐旱性。研究人员采用融合PCR技术（原理如下图所示）将RGL1酶基因和AtRZF1基因连接起来构建融合基因以研究两种基因的相互作用。下列说法正确的是（　　） A. RGL1酶在植物干旱胁迫响应中起到正调控作用 B. 图中第一阶段经过1次PCR循环即可获得双链等长的DNA C. 图中第二阶段构建融合基因时能够起到“搭桥融合”作用的引物有4种 D. 融合PCR技术操作过程中的每个阶段都需经历两次降温和一次升温 二、非选择题：本大题共5小题，共52分。 17. 请回答下列与生物技术实践相关的问题。 （1）无菌技术主要通过消毒和灭菌这两种方法来避免杂菌的污染，用酒精棉球擦拭操作者双手和用酒精灯火焰引燃残余酒精灼烧涂布器分别属于___________（方法）和__________（方法）。 （2）在腐乳、泡菜制作过程中，需要氧气的是________制作；该过程中起主要作用的微生物是________，其代谢类型为___________________。 （3）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。 ①土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有__________________和_________________。 ②虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、_______________________。 （4）酵母菌是一种真菌，可用于制作果酒。果汁发酵后是否产生酒精，可以用______________来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现特定的颜色。 18. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。 据图回答下列问题： （1）过程①所需的酶是______________________________。 （2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的__________________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 （3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是___________________。原生质体经过______________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 （4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和______________植株的根尖，通过_____________、_______________、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。 （5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1~4中一定是杂种植株的有_______________。 （6）对杂种植株进行___________________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。 19. 传统上，癌症有化疗、免疫疗法、放疗和手术等治疗方法。研究结果显示，干细胞疗法在癌症治疗方面有新的突破，源自骨髓的间充质干细胞自然迁移并黏附在肿瘤上，可用于将抗癌药物直接输送至癌细胞。间充质干细胞还可以调节肿瘤微环境中的免疫成分以延缓癌症发展。请回答下列问题： （1）间充质干细胞在体外培养时要先用_____________酶处理使其分散成单个细胞；间充质干细胞需要置于含95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，原因是___________。 （2）若自体间充质干细胞不能满足使用，可以进行克隆，动物体细胞核移植所用的受体细胞通常是__________。可通过___________去除受体细胞的细胞核，哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，其中移植成功率较高的是_______________，原因是____________。 （3）阿霉素是一种抗肿瘤药物，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。治疗肿瘤时，可以用单克隆抗体捆绑阿霉素制成生物导弹，有针对性的作用于肿瘤细胞，单克隆抗体是由________________分泌的，具有__________（答出2点）的特点；与直接使用阿霉素相比，生物导弹的优点是____________。 20. 透明质酸酶在临床上常用作药物渗透剂，目前主要从动物组织中提取。科研人员尝试将透明质酸酶基因转入大肠杆菌，使其得到高效表达。如图中NcoⅠ和XhoⅠ为限制酶，重叠延伸PCR是一种定点突变技术。请据图回答下列问题： （1）步骤①的目的是保护_______。 （2）若图中的透明质酸酶基因来自cDNA文库，则在进行步骤②之前需在其前、后端分别接上特定的_______，否则该基因就不能转录。步骤②需要用________切割质粒。 （3）图中A是_____；早期实验人员利用大肠杆菌作为受体，后来发现用毛霉或酵母菌作为受体更具优势，从生物体结构角度分析，最可能的原因是___。 （4）目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定地维持和表达其遗传特性，只有通过检测和鉴定才能知道。检测转基因生物DNA上是否插入了目的基因的方法是________。 21. 赤霉素与其受体GID结合后，可以促进植物茎秆伸长。蓝光能够激活蓝光受体CRY，抑制赤霉素的作用，为探究该机理，研究者分别构建了含有His-CRY和GST-GID融合基因的表达载体，表达出相应的融合蛋白。His和GST均为短肽，它们与其他蛋白形成的融合蛋白能与His或GST抗体结合，且不影响其他蛋白的结构和功能。 （1）构建含上述融合基因的表达载体。 ①结合图1分析，欲使His短肽连在CRY的氨基酸序列前面（氨基端），则应在___________（填“F引物”或“R引物”）的5'端加上His短肽的编码序列。 ②为使融合基因能与载体相连接，还需在F引物和R引物上添加相应的酶切位点序列，该序列应该位于His短肽编码序列的___________（填“5'”或“3'”）端。 ③用同样的方法扩增CST-GID融合基因，并构建相关表达载体。 （2）将两个表达载体同时导入拟南芥细胞，一段时间后裂解细胞，将含有His抗体的磁珠加入裂解液中，充分孵育后收集磁珠，将磁珠上的蛋白（磁珠蛋白）分离下来，进行抗原抗体杂交，结果如图2。 ①对细胞裂解液蛋白进行抗原—抗体杂交的目的是确定His-CRY和GST-GID这两个融合基因在拟南芥细胞已正常_________________。对磁珠蛋白进行His抗体检测的目的是确定磁珠上的His抗体可以结合_________________。 ②图示结果说明，蓝光的作用机理是光激活CRY后，CRY与______________结合，使赤霉素无法发挥作用，从而抑制赤霉素的作用。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$