精品解析：河北省邯郸市武安市第一中学2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题

武安一中2024——2025学年第二学期4月期中考试 高二生物 一、单项选择题（本题共有18小题，每题只有一个选项正确，每小题2分，共36分） 1. 制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。 关于食用醋的发酵的叙述错误的是（ ） A. 菌种主要利用的是乳酸菌 B. 需要在氧气充足条件下进行发酵 C. 醋酸的合成发生在细胞质基质 D. 糖源充足时，制醋的过程有气体产生 2. 无菌操作是生物实验中一项重要的基本操作。下列过程不需要严格无菌操作的是（ ） A. 传统泡菜的制作 B. 酵母菌的纯培养 C. 动物细胞的传代培养 D. 花药离体培养 3. 稻瘟菌引起的水稻稻瘟病是危害最为严重的真菌病害之一、土壤中某些微生物能合成并分泌几丁质酶，能抑制稻瘟菌的生长，可用于稻瘟病的防治。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶。下列说法错误的是（ ） A. 纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种 B. 筛选土壤中目微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基 C. 在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落均能分泌几丁质酶 D. 可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株 4. 某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量影响”，将每道菜分为3 盘，一盘取样冷藏，一盘使用公筷，一盘不用公筷，实验过程如下图。下列相关操作或叙述正确的是（　　） A. 将细菌接种在固体培养基 X上可采用平板划线法 B. 根据菌落的特征可以准确判断细菌的种类 C. 配制的培养基需经湿热灭菌后调整pH，冷却后倒平板 D. 固体培养基 X 对菜品中的细菌没有选择性 5. 聚苯乙烯是制造碗装泡面盒、发泡快餐盒的材料。某兴趣小组试图从土壤中分离能分解聚苯乙烯的细菌，相关流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 若稀释倍数都为10，则 应为8 B. 接种时应在酒精灯火焰旁进行，可将培养皿盖完全打开 C. 将涂布器放在火焰上燃烧后立即进行涂布 D. 应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值 6. 下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 植物通过光合作用自养，因此，在植物组织培养的培养基中不需要添加有机物 B. 植物组织培养和动物细胞培养分别是植物细胞工程和动物细胞工程的基础 C. 植物组织培养必须在无光条件下进行，动物细胞培养对光照无要求 D. 植物组织培养和动物细胞培养均可用于检测有毒物质 7. 甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。如图表示利用悬浮培养生产甘草黄酮的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 可用次氯酸钠和酒精对种子进行灭菌 B. 图中添加果胶酶的主要目的是获得原生质体 C. 对细胞悬液进行人工诱变，其变异率常高于对器官或个体进行诱变 D. 图示过程能体现植物细胞的全能性 8. 人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等都离不开动物细胞培养。下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（　　） A. 动物细胞培养所需的气体条件是95%氧气加5%二氧化碳 B. 动物细胞培养基中加入血清的主要目的是补充细胞所需的未知成分 C. 动物细胞培养的原理和植物组织培养的原理相同 D. 为保证培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，培养液和培养用具等需要进行消毒处理 9. PHA是一种重要的可降解材料，中国科学家构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜或餐厨垃圾为原料在实验室发酵生产PHA，工艺流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 菌种扩大培养是发酵工程的中心环节 B. 为避免杂菌污染，可适当降低发酵液中盐的浓度 C. 发酵罐内发酵要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件 D. 发酵结束之后，采取适当的过滤、沉淀措施获得PHA 10. 黄桃精酿啤酒的制作工艺与普通啤酒有所不同，生产工艺流程为：麦芽→粉碎→糖化→过滤→煮沸→主发酵→后发酵（添加黄桃汁）→低温冷藏→成品→罐装。下列说法正确的是（ ） A. 利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌的直接碳源 B. 啤酒发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成都在后发酵阶段完成 C. 糖化是让麦芽糖分解形成糖浆，煮沸能够使酶失活及对糖浆灭菌 D. “精酿”啤酒发酵完成后，通常不需要进行过滤和消毒处理 11. 我国科学家成功地用·iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ ） A. 组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程 B. 用电刺激、Ca²⁺载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 C. ③过程中诱导细胞融合体现了细胞膜的选择透过性 D. 图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术 12. 水牛养殖是中国重要农业产业之一。与传统繁殖方法相比，家畜胚胎工程技术可以挖掘动物的繁殖潜力，提升家畜种质资源质量。下列叙述正确的是（ ） A. 培养动物细胞时，培养基中除加入细胞所需各种营养物质外，还需加入琼脂 B. 胚胎分割技术可以增加同卵多胚的数量，同时也提高了移植胚胎的成活率 C. 收集胚胎在早期胚胎和子宫建立联系之前完成，这样可提高胚胎的成活率 D. 克隆牛的培育过程中常采用注射性激素方法对良种母牛作超数排卵处理 13. 犬疱疹病毒病是一种由犬疱疹病毒引起的急性、全身出血性坏死的犬类传染病。gD蛋白是犬疱疹病毒囊膜的重要组成部分，可诱导机体产生免疫应答。研究人员首先利用转基因技术制备了gD蛋白，又以gD蛋白为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 与小鼠骨髓瘤细胞融合前，细胞甲需要通过原代和传代培养扩大细胞数量 B. 与诱导原生质体融合相比，①过程特有的方法是灭活病毒诱导法 C. 仅有杂交瘤细胞能在第1次筛选使用的培养基上生长 D. 体外培养经抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞是获得大量单克隆抗体的方法之一 14. 目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法错误的是（ ） A. 将外源基因整合到精子的染色体上，可保证外源基因稳定遗传 B. ①过程需将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理 C. ②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核的融合 D. 精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小 15. 如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述错误的是（　　） A. ①→②过程可用不同的限制酶分别切割Ti质粒和含抗虫基因的DNA B. ②→③过程可用Ca2+处理农杆菌细胞 C. ③→④过程是将重组Ti质粒整合到受体植物细胞的染色体DNA上 D. ④→⑤过程体现了植物细胞的全能性，不同阶段所需的培养条件不同 16. 关于基因表达载体构建及其组件相关说法正确的是（ ） A. 启动子是与DNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录 B. 构建基因表达载体时，一般要用同种限制酶切割含有目的基因的片段和载体 C. 构建基因表达载体时，目的基因的转录模板链的5＇端应与启动子连接 D. 基因上的终止密码子能够使转录在相应的位置停止 17. PCR引物的3′端有结合模板DNA的关键碱基，5′端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。下列相关叙述错误的是（ ） A. 图中两条子链合成一定都是从5′端向3′端延伸 B. 图示表示复性阶段，该过程的温度与引物的长短有关 C. 用图示引物扩增5次后，可以产生22个目标产物 D. PCR每次循环都消耗引物和原料，在实验过程中需要及时补充 18. 关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的实验，下列相关叙述错误的是（ ） A. 根据待分离DNA片段的大小，用电泳缓冲液配制琼脂糖溶液，加热到熔化，稍冷却后加入核酸染料混匀 B. 电泳鉴定PCR产物时加样缓冲液中的指示剂可提示终止时刻 C. PCR技术中，提高复性的温度能有效减少反应非特异条带的产生 D. 用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近 二、多项选择题（本题共有6小题，每题有两个或多个选项正确，每小题3分，漏答1分，错答0分，共18分） 19. 柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（ ） A. 黑曲霉与生产果醋和腐乳时所用主要微生物的代谢类型相同 B. 将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧 C. 将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 D. 若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油 20. 如图为经过体外受精和胚胎分割、移植培育优质奶牛的过程，A、B表示结构。下列叙述错误的是（ ） A. A为次级卵母细胞，B为内细胞团 B. 囊胚的滋养层可用于性别鉴定 C. 进行胚胎分割时，应选择发育良好的囊胚或原肠胚 D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 21. 甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。下列相关叙述正确的是（ ） A. 操作过程中生物材料、培养基、培养环境都要严格灭菌 B. 过程a中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗 C. 过程b中可以用物理法或化学法诱导原生质体融合 D. 过程c中只有活性部位互补的融合细胞才可以正常生长 22. 研究表明，髓系细胞触发受体2(TREM2)是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法错误的是（ ） A. 步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞 B. 经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖 C. 步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原—抗体杂交 D. 步骤⑥的细胞在体外分瓶培养时需要先用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞 23. 多种方法获得早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。如图列举了几项技术成果。下列叙述不正确的是（ ） A. 无需考虑受体与供体是否是同一物种 B. ①技术需获得M Ⅱ期的去核卵母细胞 C. ②技术不能对动物100%的复制 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 24. 基因定点突变的目的是通过定向改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷酸的定点诱变仅需进行两轮PCR反应即可获得，第一轮加诱变引物和侧翼引物，第一轮产物作为第二轮PCR扩增的大引物，过程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 第一轮PCR过程中复性所用的温度应低于第二轮PCR复性的温度 B. 第一轮PCR需进行3次循环才能得到目标产物 C. 第一轮PCR的产物的两条DNA链作为第二轮PCR所用的引物 D. 将某蛋白质的第21位组氨酸(CAC)改造成酪氨酸(UAC)，属于蛋白质工程 三、简答题（本题共有5个大题 。共46分） 25. 研究发现，从活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株，它们通过降解具有生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害。图1表示目标菌株GN－1的筛选流程，图2表示GN－1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。回答下列问题： （1）图中将菌液接种到含分散蓝2BLN的LB固体培养基上所用的接种方法是_____________，该接种方法要求对菌液做充分的稀释，目的是___________________。 （2）图1中菌种①和③的周围出现透明圈，透明圈形成的原理是________________。菌种①～④中，最符合要求的是___________。 （3）据图2可知，GN－1菌株接种量对脱色效果的影响是___________________。 26. Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞，科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图： （1）培养Rag₂基因缺失小鼠上皮细胞时需满足以下条件：一定的营养、无菌无毒的环境、__________、__________。 （2）步骤①中，在核移植前需将采集到的卵母细胞培养至______期去“核”，该“核”实际是指 _________ 。 （3）过程②通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大易操作、营养物质丰富外，还因为它的细胞质中可能含有__________________。 （4）ES必须从___________ 中获取，这涉及伦理问题，限制了它在医学上的应用。干细胞用于临床治疗还面临一些问题，如存在导致__________发生的风险。 27. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自________________________。 （2）步骤①常用方法包括_________________融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱导融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与_________________发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 （3）步骤②的细胞必须经过步骤③____________________________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交瘤细胞的特点是_______________________________。 （4）研究发现，ADC在患者体内作用如图2所示。 ①单克隆抗体除可以运载药物外，还有_____________ 、________________等作用。 ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致________________________。 28. 如图是构建基因表达载体的示意图，回答下列问题： （1）基因工程操作中的核心步骤是_____________。重组质粒载体的核心部件有目的基因、启动子、_______________。 （2）引物是一小段能与____________碱基互补配对的单链DNA。图中合成引物时，在引物5′端添加限制酶识别序列的原因是____________。 （3）PCR扩增目的基因需在一定的缓冲溶液中进行，每一次循环过程包括94℃变性、50℃复性、_________________三个步骤。PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2＋，作用是__________。PCR反应完成后，常采用_____________________技术来鉴定PCR的产物。 （4）构建基因表达载体时，选用双酶切切割质粒载体和目的基因的目的有___________（写出两点)，图中的T4 DNA连接酶能使目的基因片段和质粒载体片段之间形成____________键。 29. 金属硫蛋白(MT)是一类具有金属结合能力的多肽，金属离子如Ag⁺、Hg²⁺，Cd²⁺等能够与 MT的半胱氨酸上的巯基共价结合而形成络合物，从而降低金属离子对细胞的毒害。研究人员获取了柽柳和星星草MT基因的 mRNA，并最终构建了具有两种植物的MT基因载体，导入烟草，研究转基因烟草对Cd²⁺的耐受力，回答下列问题： （1）由于 PCR 技术不能直接扩增mRNA，因此实验室常用“RT-PCR 技术”来实现目的基因的获取和扩增，据此可知在进行“RT-PCR 技术”时应当在仪器中添加__________酶、_________酶、 引物、dNTP、缓冲体系。 （2）下图是pROKII质粒、柽柳MT 基因(MTcI)和星星草 MT 基因(MTx) 的相关序列示意图。 将柽柳 MT 基因连接到 pROKⅡ质粒中，应选用的限制酶是____________。 若甲和乙连接到同一个pROKII中，为了使重组质粒能够同时独立表达柽柳和星星草的MT，则 MTx还需要连接_____________序列进行优化。 （3）重组质粒进行转化后，提取烟草总DNA，用特异性引物进行扩增得到_________________序列，可检测目的基因是否已整合到烟草的基因组中。为研究转基因烟草对不同浓度 Cd²⁺的耐受力，实验思路为：将转基因烟草幼苗分别移入__________________的MS 生根培养基中，观察烟草的生长状态。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 武安一中2024——2025学年第二学期4月期中考试 高二生物 一、单项选择题（本题共有18小题，每题只有一个选项正确，每小题2分，共36分） 1. 制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。 关于食用醋的发酵的叙述错误的是（ ） A. 菌种主要利用的是乳酸菌 B. 需要在氧气充足条件下进行发酵 C. 醋酸的合成发生在细胞质基质 D. 糖源充足时，制醋的过程有气体产生 【答案】A 【解析】 【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、食用醋的发酵菌种为醋酸菌，A错误； BC、醋酸菌为严格的异养需氧型原核生物，没有线粒体，食用醋的发酵需要在氧气充足条件下进行发酵，其合成发生在细胞质基质，BC正确。 D、糖源和氧气都充足时，醋酸菌将葡萄糖分解产生乙酸、CO2（气体）和水，D正确。 故选A。 2. 无菌操作是生物实验中一项重要的基本操作。下列过程不需要严格无菌操作的是（ ） A. 传统泡菜的制作 B. 酵母菌的纯培养 C. 动物细胞的传代培养 D. 花药离体培养 【答案】A 【解析】 【分析】在传统生物技术中，无需进行严格灭菌，根据目的菌种的代谢特征设置相应的培养条件。 【详解】在传统生物技术中，如传统泡菜的制作过程，不需要严格的无菌操作，通常是根据目的菌种的代谢特征设置相应的培养条件进行的，而实验室中的一些生物工程技术，如酵母菌的纯培养、动物细胞的传代培养、花药离体培养等需要严格的无菌操作，A正确，BCD错误。 故选A。 3. 稻瘟菌引起的水稻稻瘟病是危害最为严重的真菌病害之一、土壤中某些微生物能合成并分泌几丁质酶，能抑制稻瘟菌的生长，可用于稻瘟病的防治。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶。下列说法错误的是（ ） A. 纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种 B. 筛选土壤中目的微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基 C. 在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落均能分泌几丁质酶 D. 可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株 【答案】C 【解析】 【分析】1、要从土壤中分离出能合成几丁质酶的微生物，应以几丁质为唯一碳源，以淘汰不能产生几丁质酶的真菌达到筛选效果。 2、水解圈是产生几丁质酶的微生物产生相关酶水解几丁质产生的，水解圈直径/菌落直径越大，说明该菌降解能力越强。 【详解】A、纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种，因为两种方法均可得到单菌落，A正确； B、筛选土壤中目的微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基，因为在该培养基上能生长的微生物是能利用几丁质或能利用几丁质分解产物的微生物，B正确； C、在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落不一定能分泌几丁质酶，可能部分是以几丁质的分解产物为碳源的微生物，C错误； D、水解圈是产生几丁质酶的微生物产生相关酶水解几丁质产生的，水解圈直径/菌落直径越大，说明该菌降解能力越强，故可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株，D正确。 故选C。 4. 某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为3 盘，一盘取样冷藏，一盘使用公筷，一盘不用公筷，实验过程如下图。下列相关操作或叙述正确的是（　　） A. 将细菌接种在固体培养基 X上可采用平板划线法 B. 根据菌落的特征可以准确判断细菌的种类 C. 配制的培养基需经湿热灭菌后调整pH，冷却后倒平板 D. 固体培养基 X 对菜品中的细菌没有选择性 【答案】D 【解析】 【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；微生物培养的关键是无菌技术。据题意可知，在固体培养基X上接种后还需进行计数，故只能用涂布法接种而不能用平板划线法。 【详解】A、据题意可知，在固体培养基X上接种后还需进行计数，故只能用涂布法接种而不能用平板划线法，A错误； B、在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，根据菌落的形状、大小、颜色等特征，可以初步区分出不同种微生物，但不能准确判断，B错误； C、配制的培养基需调整pH后经湿热灭菌，冷却后倒平板，C错误； D、固体培养基没有做任何处理，所以对菜品中的细菌没有选择性，D正确。 故选D。 5. 聚苯乙烯是制造碗装泡面盒、发泡快餐盒的材料。某兴趣小组试图从土壤中分离能分解聚苯乙烯的细菌，相关流程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 若稀释倍数都10，则 应为8 B. 接种时应在酒精灯火焰旁进行，可将培养皿盖完全打开 C. 将涂布器放在火焰上燃烧后立即进行涂布 D. 应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值 【答案】D 【解析】 【分析】1、平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 2、平板划线操作的注意事项：①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。③划线时最后一区域不要与第一区域相连。④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 【详解】A、若稀释倍数都为10，则x应为18，A错误； B、接种时应在酒精灯火焰旁进行，但不能将培养皿盖完全打开，B错误； C、将涂布器放在火焰上燃烧，等冷却后再进行涂布，C错误； D、应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值，D正确。 故选D。 6. 下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 植物通过光合作用自养，因此，在植物组织培养的培养基中不需要添加有机物 B. 植物组织培养和动物细胞培养分别是植物细胞工程和动物细胞工程的基础 C. 植物组织培养必须在无光条件下进行，动物细胞培养对光照无要求 D. 植物组织培养和动物细胞培养均可用于检测有毒物质 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养：①原理：植物细胞的全能性；②培养基：MS培养基（固体），通常需要加入生长素和细胞分裂素诱导；③主要过程：脱分化和再分化；④培养目的：快速繁殖或获得脱毒苗等。 【详解】A、在分化形成叶片之前植物细胞不能进行光合作用，因此植物组织培养的培养基中需要加入糖类等有机物，A错误； B、植物组织培养是植物细胞工程的基础，动物细胞培养是动物细胞工程的基础，B正确； C、植物组织培养再分化阶段必须给予光照，但愈伤组织的形成一般不需要光照，动物细胞培养对光照无要求，C错误； D、植物组织培养不能用于检测有毒物质，动物细胞培养可用于检测有毒物质，D错误。 故选B。 7. 甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。如图表示利用悬浮培养生产甘草黄酮的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 可用次氯酸钠和酒精对种子进行灭菌 B. 图中添加果胶酶的主要目的是获得原生质体 C. 对细胞悬液进行人工诱变，其变异率常高于对器官或个体进行诱变 D. 图示过程能体现植物细胞的全能性 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、可用次氯酸钠和酒精对种子进行消毒，A错误； B、图示过程中添加果胶酶的主要目的瓦解植物的胞间层，更快获得细胞悬液，B错误； C、愈伤组织细胞分裂旺盛，更易发生突变，C正确； D、题图所示过程并未从已分化的植物细胞获得完整植株，不能体现植物细胞的全能性，D错误。 故选C。 8. 人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等都离不开动物细胞培养。下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（　　） A. 动物细胞培养所需的气体条件是95%氧气加5%二氧化碳 B. 动物细胞培养基中加入血清的主要目的是补充细胞所需的未知成分 C. 动物细胞培养的原理和植物组织培养的原理相同 D. 为保证培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，培养液和培养用具等需要进行消毒处理 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液和所有培养用具需要进行灭菌处理，以及在无菌环境下进行操作。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害；②营养：使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分；③温度、pH、渗透压：哺乳动物多是36.5℃左右，适宜pH为7.2-7.4；④气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。 【详解】A、动物细胞培养所需的气体条件是95%空气加5%二氧化碳，A错误； B、动物细胞培养所需的培养基是合成培养基，其中含有水、无机盐、氨基酸等，除此之外还需要加入血清，补充动物细胞需要但还未知的一些成分，B正确； C、动物细胞培养的原理是细胞增殖（有丝分裂），而植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，C错误； D、动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害，D错误。 故选B。 9. PHA是一种重要的可降解材料，中国科学家构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜或餐厨垃圾为原料在实验室发酵生产PHA，工艺流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 菌种扩大培养是发酵工程的中心环节 B. 为避免杂菌污染，可适当降低发酵液中盐的浓度 C. 发酵罐内发酵要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件 D. 发酵结束之后，采取适当的过滤、沉淀措施获得PHA 【答案】C 【解析】 【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，A错误； B、嗜盐单胞菌H需要一定的盐浓度，其他微生物则不能在较高的盐浓度下生长，提高发酵液中盐的浓度一定程度上可以避免杂菌污染，B错误； C、在发酵过程中，需随时监测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，还要及时添加必需的营养组分，严格控制温度、pH和溶解氧等条件，C正确； D、发酵结束之后，对于菌体可采取适当的过滤、沉淀措施来分离，而对于菌体的代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，D错误。 故选C。 10. 黄桃精酿啤酒的制作工艺与普通啤酒有所不同，生产工艺流程为：麦芽→粉碎→糖化→过滤→煮沸→主发酵→后发酵（添加黄桃汁）→低温冷藏→成品→罐装。下列说法正确的是（ ） A. 利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌直接碳源 B. 啤酒发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成都在后发酵阶段完成 C. 糖化是让麦芽糖分解形成糖浆，煮沸能够使酶失活及对糖浆灭菌 D. “精酿”啤酒发酵完成后，通常不需要进行过滤和消毒处理 【答案】D 【解析】 【分析】我国是世界上啤酒的生产和消费大国。 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成 的，其中发 酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵 液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下 储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄 清、成熟的啤酒。发酵的温度和发酵的时间 随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 【详解】A、利用大麦作原料时，葡萄糖是酵母菌的直接碳源，A错误； B、啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵；大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，B错误； C、糖化是让淀粉分解形成糖浆，C错误； D、题干信息可知，精酿啤酒发酵完成后，不会过滤和消毒处理；“精酿”啤酒发酵时间长、产量低、价格高，保质期更短，D正确。 故选D。 11. 我国科学家成功地用·iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ ） A. 组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程 B. 用电刺激、Ca²⁺载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 C. ③过程中诱导细胞融合体现了细胞膜的选择透过性 D. 图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术 【答案】B 【解析】 【分析】生物体基因的碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化的现象，叫作表观遗传。除了DNA甲基化，构成染色体的组蛋白发生甲基化、乙酰化等修饰也会影响基因的表达。 【详解】A、结合题图，重构胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，发育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表达产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，保持组蛋白乙酰化，即组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程，A错误； B、在体细胞核移植过程中，用物理方法或化学方法（如电刺激、钙离子载体、乙醇、蛋白质合成酶抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B正确； C、③为动物细胞融合的过程，现了细胞膜的流动性，C错误； D、图示流程运用了体细胞核移植、胚胎移植等技术，并未运用重组 DNA技术，D错误。 故选B。 12. 水牛养殖是中国重要的农业产业之一。与传统繁殖方法相比，家畜胚胎工程技术可以挖掘动物的繁殖潜力，提升家畜种质资源质量。下列叙述正确的是（ ） A. 培养动物细胞时，培养基中除加入细胞所需各种营养物质外，还需加入琼脂 B. 胚胎分割技术可以增加同卵多胚的数量，同时也提高了移植胚胎的成活率 C. 收集胚胎在早期胚胎和子宫建立联系之前完成，这样可提高胚胎的成活率 D. 克隆牛的培育过程中常采用注射性激素方法对良种母牛作超数排卵处理 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、培养动物细胞一般使用液体培养基，A错误； B、胚胎分割技术可以增加同卵多胚的数量，但其可能性是有限的，分割次数越多，成活概率越小，B 错误； C、收集胚胎的工作必须在早期胚胎和子宫建立联系之前完成，收集胚胎后对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段，然后进行胚胎移植，C正确； D、克隆牛的培育过程中常采用注射促性激素方法对良种母牛作超数排卵处理，D错误。 故选C。 13. 犬疱疹病毒病是一种由犬疱疹病毒引起的急性、全身出血性坏死的犬类传染病。gD蛋白是犬疱疹病毒囊膜的重要组成部分，可诱导机体产生免疫应答。研究人员首先利用转基因技术制备了gD蛋白，又以gD蛋白为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 与小鼠骨髓瘤细胞融合前，细胞甲需要通过原代和传代培养扩大细胞数量 B. 与诱导原生质体融合相比，①过程特有的方法是灭活病毒诱导法 C. 仅有杂交瘤细胞能在第1次筛选使用的培养基上生长 D. 体外培养经抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞是获得大量单克隆抗体的方法之一 【答案】A 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、细胞甲是B细胞，所以不需要通过原代培养扩大细胞数量，A错误； B、与诱导原生质体融合（电刺激、聚乙二醇诱导）相比，①过程特有的方法是灭活病毒诱导法，B正确； C、仅有杂交瘤细胞能在第1次筛选使用的培养基（HAT培养基）上生长，C正确； D、经抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体，D正确。 故选A。 14. 目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法错误的是（ ） A. 将外源基因整合到精子的染色体上，可保证外源基因稳定遗传 B. ①过程需将成熟的精子放入ATP溶液中进行获能处理 C. ②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核的融合 D. 精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小 【答案】B 【解析】 【分析】分析题图：图示表示培育转基因鼠的基本流程，其中①是筛选获得导入外源基因的精子的过程，②是体外受精过程，③是早期胚胎培养过程，④是胚胎移植过程。 【详解】A、受精卵中几乎不含精子的细胞质，将外源基因整合到精子的染色体上，是保证外源基因稳定遗传的关键，A正确； B、①过程需将成熟的精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体溶液中，用化学药物诱导精子获能，获能是指获得受精的能力而不是获得能量，因此不是放在ATP溶液中，B错误； C、受精是精子和卵细胞的结合，②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合，C正确； D、与显微注射法相比，精子载体法对受精卵中核的影响会更小，理由是不需要穿过核膜，雌雄原核自动融合（通过受精作用完成整合），D正确。 故选B。 15. 如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述错误的是（　　） A. ①→②过程可用不同的限制酶分别切割Ti质粒和含抗虫基因的DNA B. ②→③过程可用Ca2+处理农杆菌细胞 C. ③→④过程是将重组Ti质粒整合到受体植物细胞的染色体DNA上 D. ④→⑤过程体现了植物细胞的全能性，不同阶段所需的培养条件不同 【答案】C 【解析】 【分析】图示是利用基因工程培育抗虫植物的示意图，其中①为质粒，作为运载体；②为重组质粒；③为含有重组质粒的农杆菌；④为含有目的基因的植物细胞；⑤为转基因植株。 【详解】A、①→②过程是构建基因表达载体，可用相同或不同的限制酶分别切割Ti质粒和含抗虫基因的DNA，Ti质粒和含抗虫基因的DNA能产生相同的末端即可，A正确； B、②→③过程是将重组Ti质粒转入农杆菌，农杆菌是细菌，可用Ca2+处理农杆菌细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境DNA分子的生理状态，从而将重组Ti质粒转入农杆菌，B正确； C、③→④过程是将重组Ti质粒导入植物细胞，重组Ti质粒上的T−DNA才能整合到受体植物细胞的染色体DNA上，C错误； D、④→⑤过程是植物组织培养，体现了植物细胞的全能性，不同阶段所需的光照、营养条件等不同，D正确。 故选C。 16. 关于基因表达载体构建及其组件相关说法正确的是（ ） A. 启动子是与DNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录 B. 构建基因表达载体时，一般要用同种限制酶切割含有目的基因的片段和载体 C. 构建基因表达载体时，目的基因的转录模板链的5＇端应与启动子连接 D. 基因上的终止密码子能够使转录在相应的位置停止 【答案】B 【解析】 【分析】基因表达载体的构建的目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点。 【详解】A、启动子是与RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录，A错误； B、构建基因表达载体时，一般要用同种限制酶切割含有目的基因的片段和载体，以便形成相同的黏性末端，B正确； C、转录时RNA聚合酶沿着DNA模板链的3＇端向5＇端延伸，因此构建基因表达载体时，目的基因的转录模板链的3＇端应与启动子连接，C错误； D、终止密码子位于mRNA上，不在基因上，D错误。 故选B。 17. PCR引物的3′端有结合模板DNA的关键碱基，5′端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。下列相关叙述错误的是（ ） A. 图中两条子链合成一定都是从5′端向3′端延伸 B. 图示表示复性阶段，该过程的温度与引物的长短有关 C. 用图示引物扩增5次后，可以产生22个目标产物 D. PCR每次循环都消耗引物和原料，在实验过程中需要及时补充 【答案】D 【解析】 【分析】PCR技术: 1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 2、原理：DNA复制。 3、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。 4、过程：高温变性、低温复性、中温延伸。 【详解】A、TaqDNA聚合酶只能从引物的3'端开始延伸DNA子链，所以两条子链合成一定都是从5′端向3′端延伸，A正确； B、图示表示复性阶段，该过程的温度与引物的长短、碱基组成等有关，引物长度越长或者GC含量越高，则复性的温度设置越高，B正确； C、经过5次循环后会产生25=32个，其中只有2个DNA分子含有最初的模板链，另仅含有第一次复制产生的单链参与形成的DNA分子有8个，因此经过5次复制产生等长的目的基因片段32-10=22个，C正确； D、PCR所需要的引物和原料是一次性添加的，在实验过程中不需要补充，D错误。 故选D。 18. 关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的实验，下列相关叙述错误的是（ ） A. 根据待分离DNA片段的大小，用电泳缓冲液配制琼脂糖溶液，加热到熔化，稍冷却后加入核酸染料混匀 B. 电泳鉴定PCR产物时加样缓冲液中的指示剂可提示终止时刻 C. PCR技术中，提高复性的温度能有效减少反应非特异条带的产生 D. 用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近 【答案】D 【解析】 【分析】DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。 【详解】A、在进行DNA片段的电泳分离时，确实需要根据待分离DNA片段的大小，用电泳缓冲液配制琼脂糖溶液，加热使其熔化，稍冷却后加入核酸染料混匀。这是因为不同大小的DNA片段在不同浓度的琼脂糖凝胶中迁移速率不同，核酸染料可以使DNA在紫外光下显色，便于观察，A正确； B、电泳鉴定PCR产物时，缓冲液中的指示剂可以指示电泳的进程，当指示剂到达合适的位置时，可提示终止时刻，以便及时停止电泳，防止DNA片段跑出凝胶，B正确； C、PCR技术中，提高复性的温度能使引物与模板更特异性地结合，减少引物与非目标区域的结合，从而有效减少反应非特异条带的产生，C正确； D、鸡血细胞有细胞核，含有DNA；而哺乳动物（如人、兔等）的成熟红细胞没有细胞核，不含DNA，所以从等体积的兔血（哺乳动物血）和鸡血中提取的DNA量差异很大，鸡血中提取的DNA量远多于兔血，D错误。 故选D。 二、多项选择题（本题共有6小题，每题有两个或多个选项正确，每小题3分，漏答1分，错答0分，共18分） 19. 柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（ ） A. 黑曲霉与生产果醋和腐乳时所用主要微生物的代谢类型相同 B. 将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧 C. 将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 D. 若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油 【答案】BD 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、由培养时需要通气振荡可知，黑曲霉的异化作用类型为需氧型，因此其代谢类型为异养需氧型，制作果醋利用的是醋酸菌，制作腐乳利用的是毛霉，它们的代谢类型均为异养需氧型，A正确； B、将菌种接种至A培养基时，平板划线法的接种工具接种环在使用前需在火焰上灼烧灭菌，B错误； C、将菌种转接至B培养基是将菌种转接至新的培养基，目的是为了进行扩大培养，从而增加菌种的数量，C正确； D、以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌(如黑曲霉)，将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制可以制成酱油产品，D错误。 故选BD。 20. 如图为经过体外受精和胚胎分割、移植培育优质奶牛的过程，A、B表示结构。下列叙述错误的是（ ） A. A为次级卵母细胞，B为内细胞团 B. 囊胚的滋养层可用于性别鉴定 C. 进行胚胎分割时，应选择发育良好的囊胚或原肠胚 D. 胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 【答案】AC 【解析】 【分析】分析题图：图示为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，其中A是卵母细胞，可与获能的精子受精形成受精卵；B是囊胚腔。 【详解】A、图中A是在体外进行成熟培养的卵母细胞，B是囊胚中的囊胚腔，A错误； B、囊胚的滋养层细胞可用于进行DNA分析，从而进行性别鉴定 ，B正确； C、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚 ，原肠胚细胞已经开始分化，不适合进行胚胎分割，C错误； D、胚胎移植是胚胎工程的最后一道工序，胚胎移植的实质就是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。 故选AC。 21. 甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。下列相关叙述正确的是（ ） A. 操作过程中生物材料、培养基、培养环境都要严格灭菌 B. 过程a中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗 C. 过程b中可以用物理法或化学法诱导原生质体融合 D. 过程c中只有活性部位互补的融合细胞才可以正常生长 【答案】BCD 【解析】 【分析】分析题图：该图为植物体细胞杂交过程，其中a为去除细胞壁，制备原生质体，可用酶解法；b为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理；c为培养筛选出所需的杂种细胞；d为脱分化。 【详解】A、操作过程中生物材料需要进行消毒，培养基、培养环境需要灭菌，培养时也要定期消毒，A错误； B、茎尖或芽尖(分生组织)病毒极少甚至无病毒，进行植物组织培养有利于获得脱毒苗，B正确； C、过程B为诱导原生质体融合，诱导方法有物理法和化学法，如聚乙二醇、离心等，C正确； D、据图分析，原生质体甲细胞质经处理失活，原生质体乙经处理细胞核失活，因此过程C中只有活性部位互补的融合细胞具有完整的细胞结构，可以正常生长，D正确。 故选BCD。 22. 研究表明，髓系细胞触发受体2(TREM2)是一种免疫抑制受体，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法错误的是（ ） A. 步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞 B. 经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖 C. 步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原—抗体杂交 D. 步骤⑥的细胞在体外分瓶培养时需要先用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞 【答案】BCD 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、步骤①向小鼠注射TREM2蛋白，让小鼠发生免疫反应，获得能产生抗体的B淋巴细胞；步骤⑤向小鼠腹腔注射分泌TREM2抗体的杂交瘤细胞，目的是获得单克隆抗体，A正确； B、经步骤②诱导后融合的细胞有多种，只有特定的杂交瘤细胞才能既能分泌TREM2抗体又可无限增殖，B错误； C、步骤③是特定培养基筛选杂交瘤细胞，只有杂交瘤细胞能在该选择培养基上生长，而自身融合的细胞和未融合的细胞不能在此培养基上生长，步骤④是筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，培养孔需要含有TREM2蛋白，原理是抗原-抗体杂交，C错误； D、步骤⑥为杂交瘤细胞在体外培养，瘤细胞在体外培养时不会发生接触抑制，不用胰蛋白酶处理，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，D错误。 故选BCD。 23. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。如图列举了几项技术成果。下列叙述不正确的是（ ） A. 无需考虑受体与供体是否是同一物种 B. ①技术需获得M Ⅱ期的去核卵母细胞 C. ②技术不能对动物100%的复制 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 【答案】AB 【解析】 【分析】动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物。 【详解】A、胚胎移植中，要选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体应是同一物种，A错误； B、①为体外受精和胚胎移植的产物，卵母细胞不需要去核，B错误； C、②为核移植获得的克隆动物，由于克隆动物的遗传物质来自供体细胞核和受体细胞的细胞质，因此该技术不能对提供细胞核的动物进行100%的复制，C正确； D、通过③得到转基因个体可通过②克隆技术实现扩大化生产，①得到的试管动物和②得到克隆动物都可通过③转基因技术实现性状改良，D正确。 故选AB。 24. 基因定点突变的目的是通过定向改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个氨基酸。大引物PCR定点突变常用来研究蛋白质结构改变导致的功能变化。单核苷酸的定点诱变仅需进行两轮PCR反应即可获得，第一轮加诱变引物和侧翼引物，第一轮产物作为第二轮PCR扩增的大引物，过程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 第一轮PCR过程中复性所用的温度应低于第二轮PCR复性的温度 B. 第一轮PCR需进行3次循环才能得到目标产物 C. 第一轮PCR的产物的两条DNA链作为第二轮PCR所用的引物 D. 将某蛋白质的第21位组氨酸(CAC)改造成酪氨酸(UAC)，属于蛋白质工程 【答案】AD 【解析】 【分析】PCR技术： 1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 2、原理：DNA复制。 3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。 4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。 5、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。 详解】A、第一轮所用引物较短，所用复性温度较第二轮低，A正确； B、第一轮PCR需要进行2次循环才能得到目标产物，B错误； C、第一轮PCR产物中的一条链作为第二轮PCR的一种引物，C错误； D、将某蛋白质的第21位组氨酸（CAC）改造成酪氨酸（UAC），应将诱变引物设计包含-ATG-或-TAC-序列，该过程属于蛋白质工程技术范畴，D正确。 故选AD。 三、简答题（本题共有5个大题 。共46分） 25. 研究发现，从活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株，它们通过降解具有生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害。图1表示目标菌株GN－1的筛选流程，图2表示GN－1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。回答下列问题： （1）图中将菌液接种到含分散蓝2BLN的LB固体培养基上所用的接种方法是_____________，该接种方法要求对菌液做充分的稀释，目的是___________________。 （2）图1中菌种①和③的周围出现透明圈，透明圈形成的原理是________________。菌种①～④中，最符合要求的是___________。 （3）据图2可知，GN－1菌株接种量对脱色效果的影响是___________________。 【答案】（1） ①. 稀释涂布平板法 ②. 使细菌分散成单个细胞，在平板上获得单菌落 （2） ①. 菌种①和③可降解分散蓝2BLN，分散蓝2BLN被降解后蓝色消失形成透明圈 ②. 菌种③ （3）随着接种量增大，GN－1菌株对分散蓝2BLN的脱色率逐渐提高 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：通过接种环在固体培养基表面连续划线操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落，这种接种方法称为平板划线法；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 根据培养基中菌落的分布可知，向含分散蓝2BLN的LB固体培养基上进行接种的方法是稀释涂布平板法。用稀释涂布平板法接种时，要对菌液进行充分的稀释，可以使细菌分散成单个细胞，在平板上获得单菌落。 【小问2详解】 图1中的菌种①和③可以降解分散蓝2BLN，从而使菌落周围的蓝色消失，形成透明圈。菌种③周围透明圈直径与菌落直径的比值较大，所以菌种③降解分散蓝2BLN的能力较强。 【小问3详解】 分析图2可知，随着GN－1菌株接种量的增大，GN－1菌株对分散蓝2BLN的脱色率逐渐提高。 26. Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞，科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图： （1）培养Rag₂基因缺失小鼠上皮细胞时需满足以下条件：一定的营养、无菌无毒的环境、__________、__________。 （2）步骤①中，在核移植前需将采集到的卵母细胞培养至______期去“核”，该“核”实际是指 _________ 。 （3）过程②通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大易操作、营养物质丰富外，还因为它的细胞质中可能含有__________________。 （4）ES必须从___________ 中获取，这涉及伦理问题，限制了它在医学上的应用。干细胞用于临床治疗还面临一些问题，如存在导致__________发生的风险。 【答案】（1） ①. 适宜的温度和pH ②. 气体环境 （2） ①. MⅡ ②. 纺锤体-染色体复合物 （3）)促进细胞核全能性表达的物质 （4） ①. （早期） 胚胎 ②. 肿瘤 【解析】 【分析】分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag基因缺失小鼠进行基因治疗的过程图解，其中①表示核移植过程，②表示早期胚胎培养过程，③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞。 【小问1详解】 动物细胞培养时需满足以下条件：无菌无毒环境，适宜的温度和 pH，含有 95%空气加5%CO2的气体环境。O₂是细胞进行有氧呼吸所必需的，CO₂可以维持培养液的pH。 【小问2详解】 核移植前需将采集到的卵母细胞培养至减数第二次分裂中期，此时的卵母细胞才具备受精能力，且细胞质中含有的物质有利于激发细胞核的全能性。这里的“核”实际上是指纺锤体 - 染色体复合物，因为在MⅡ期时，卵母细胞中的染色体和纺锤体结合紧密，去除这一复合物就相当于去除了卵母细胞的细胞核，方便后续将供体细胞的核移植进去。 【小问3详解】 过程②通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大易操作、营养物质丰富外，还因为它的细胞质中可能含有促进细胞核全能性表达的物质，能够使重组细胞更好地发育。 【小问4详解】 ES 细胞是由早期胚胎（如囊胚的内细胞团）或原始性腺中分离出来的一类细胞，ES 细胞在功能上具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。同时，干细胞用于临床治疗还面临一些问题，如存在导致肿瘤发生的风险，因为干细胞具有较强的增殖能力，如果其增殖和分化过程失控，就有可能形成肿瘤。 27. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自________________________。 （2）步骤①常用方法包括_________________融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。其中灭活病毒诱导融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与_________________发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 （3）步骤②的细胞必须经过步骤③____________________________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交瘤细胞的特点是_______________________________。 （4）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。 ①单克隆抗体除可以运载药物外，还有_____________ 、________________等作用。 ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致________________________。 【答案】（1）人的乳腺癌细胞 （2） ①. PEG##聚乙二醇 ②. 细胞膜上的糖蛋白 （3） ①. 克隆化培养和抗体检测 ②. 既能大量增殖，又能产生特定抗体 （4） ①. 作为诊断试剂 ②. 治疗疾病 ③. 癌细胞凋亡 【解析】 【分析】由图1可知，①表示动物细胞的融合，②表示利用选择培养基筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测。由图2可知，ADC不识别正常细胞，识别并结合乳腺癌细胞。 【小问1详解】 要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择人的乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理。 【小问2详解】 分析图1可知，步骤①表示动物细胞的融合，常用化学药物PEG处理，诱导细胞融合，也可用电融合法和灭活病毒诱导法等诱导融合；病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 【小问3详解】 步骤②表示利用选择培养基筛选杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是需要的，故需要进行步骤③克隆化培养和抗体检测；符合要求的杂交瘤细胞的特点是杂交瘤细胞具有无限增殖，且能产生特定抗体。 【小问4详解】 ①ADC中的单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，让药物作用于乳腺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低乳腺癌治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应，可以有效地治疗疾病；单克隆抗体除可以运载药物外，还可以作为诊断试剂，如检测相关基因有没有表达成蛋白质，或检测抗原的有无。 ②由图可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。 28. 如图是构建基因表达载体的示意图，回答下列问题： （1）基因工程操作中的核心步骤是_____________。重组质粒载体的核心部件有目的基因、启动子、_______________。 （2）引物是一小段能与____________碱基互补配对的单链DNA。图中合成引物时，在引物5′端添加限制酶识别序列的原因是____________。 （3）PCR扩增目的基因需在一定的缓冲溶液中进行，每一次循环过程包括94℃变性、50℃复性、_________________三个步骤。PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2＋，作用是__________。PCR反应完成后，常采用_____________________技术来鉴定PCR的产物。 （4）构建基因表达载体时，选用双酶切切割质粒载体和目的基因的目的有___________（写出两点)，图中的T4 DNA连接酶能使目的基因片段和质粒载体片段之间形成____________键。 【答案】（1） ①. 构建基因表达载体 ②. 终止子 （2） ①. 目的基因(或DNA母链) ②. 使扩增的目的基因含有限制酶的识别序列，便于切割后与载体连接并且不影响目的基因的复制 （3） ①. 72℃延伸 ②. 激活DNA聚合酶 ③. 琼脂糖凝胶电泳 （4） ①. 保证目的基因片段插入的方向正确、防止质粒载体或目的基因的自连 ②. 磷酸二酯 【解析】 【分析】基因工程的基本操作程序： 1、目的基因的获取； 2、基因表达载体的构建（核心），目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因； 3、将目的基因导入受体细胞，常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术，方法的受体细胞多是受精卵； 4、目的基因的检测和表达。 【小问1详解】 构建基因表达载体是基因工程操作中的核心步骤。一个完整的基因表达载体,必须有启动子、终止子、目的基因、标记基因和复制原点等； 【小问2详解】 引物是根据目的基因的一小段 DNA序列人工合成的、能与目的基因(或DNA母链)碱基互补配对的单链DNA。在引物5'端添加限制酶识别序列的原因是使扩增的目的基因含有限制酶的识别序列，便于切割后与载体连接并且不影响目的基因的复制； 【小问3详解】 在PCR循环中，变性是使DNA双链解开，复性是让引物与单链DNA互补配对，延伸则是在 DNA 聚合酶作用下，以dNTP 为原料，从引物的3′端开始合成新的 DNA 链，此步骤一般在72℃延伸；Mg2+是 DNA 聚合酶的激活剂，能维持 DNA 聚合酶的活性，保证 PCR 反应顺利进行；琼脂糖凝胶电泳可根据DNA片段的大小对PCR产物进行分离，不同大小的DNA片段在凝胶中的迁移速率不同，通过与已知分子量的 DNA 标准参照物对比，可鉴定PCR产物的大小等情况； 【小问4详解】 对目的基因和质粒同时进行双酶切，能够保证目的基因片段插人的方向正确，且可以防止质粒载体或目的基因的自连；基因工程中的DNA连接酶能使目的基因片段和质粒片段之间形成磷酸二酯键。 29. 金属硫蛋白(MT)是一类具有金属结合能力的多肽，金属离子如Ag⁺、Hg²⁺，Cd²⁺等能够与 MT的半胱氨酸上的巯基共价结合而形成络合物，从而降低金属离子对细胞的毒害。研究人员获取了柽柳和星星草MT基因的 mRNA，并最终构建了具有两种植物的MT基因载体，导入烟草，研究转基因烟草对Cd²⁺的耐受力，回答下列问题： （1）由于 PCR 技术不能直接扩增mRNA，因此实验室常用“RT-PCR 技术”来实现目的基因的获取和扩增，据此可知在进行“RT-PCR 技术”时应当在仪器中添加__________酶、_________酶、 引物、dNTP、缓冲体系。 （2）下图是pROKII质粒、柽柳MT 基因(MTcI)和星星草 MT 基因(MTx) 的相关序列示意图。 将柽柳 MT 基因连接到 pROKⅡ质粒中，应选用的限制酶是____________。 若甲和乙连接到同一个pROKII中，为了使重组质粒能够同时独立表达柽柳和星星草的MT，则 MTx还需要连接_____________序列进行优化。 （3）重组质粒进行转化后，提取烟草总DNA，用特异性引物进行扩增得到_________________序列，可检测目的基因是否已整合到烟草的基因组中。为研究转基因烟草对不同浓度 Cd²⁺的耐受力，实验思路为：将转基因烟草幼苗分别移入__________________的MS 生根培养基中，观察烟草的生长状态。 【答案】（1） ①. 逆转录酶##反转录酶 ②. 耐高温的DNA聚合酶 （2） ①. Xbal和Kpnl ②. 终止子、PstI、sphI、HindⅡ识别序列 （3） ①. MTcl(Tcl或MTcl和Tcl)和MTx ②. 含不同浓度Cd2+ 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞；（4）目的基的检测与鉴定。 【小问1详解】 RT-PCR技术指用mRNA扩增DNA的技术，需要先由mRNA逆转录形成DNA，然后在进行扩增，故应当在仪器中添加逆转录酶、耐高温的DNA聚合酶、 引物、dNTP、缓冲体系。 【小问2详解】 根据图乙可知，MT基因（MTx）的两侧含有Xbal和Kpnl的识别序列，因此将柽柳MT基因连接到pROKⅡ质粒中，应选用的限制酶是Xbal和Kpnl。PROKII上不含Smal的酶切位点，则应选择XbaⅠ与Kpnl，以保证终止子Tcl和MT基因与pROKII组成重组质粒且MT基因位于启动子P35S和终止子Tcl之间。若甲和乙连接到同一个pROKII中，则MTx还需要连接终止子、PstI、sphI、HindⅡ识别序列进行优化，才能使重组质粒能够同时独立表达柽柳和星星草的MT。 【小问3详解】 重组质粒进行转化后，提取烟草总DNA，用特异性引物进行扩增得到MTcl(Tcl或MTcl和Tcl)和MTx序列，可检测目的基因是否已整合到烟草的基因组中。为研究转基因烟草对Cd2+的耐受力，因此，实验的自变量是含不同浓度Cd2+，故实验思路为：将转基因烟草幼苗分别移入含不同浓度Cd2+的MS生根培养基中，观察烟草的生长状态。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$