精品解析：安徽省阜阳市临泉县田家炳实验中学（临泉县教师进修学校）2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题

2024-2025学年第二学期高二年级期中教学质量检测 生物试卷 (75分钟　100分) 一、选择题(本大题共16小题,每小题3分,共48分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。) 1. 酿酒用的酒曲是以谷物为原料，破碎加水压制而成的。酒曲富含酵母菌和霉菌等多种微生物，经水浸泡活化后加入蒸熟的米即可用于酿酒。下列叙述正确的是（　　） A. 适合酒曲中酵母菌的生长温度为30~35 ℃ B. 为防止杂菌污染，需要对酒曲进行灭菌处理 C. 酒曲经水浸泡活化有利于提高酶的活性和酵母菌的代谢 D. 酿酒过程中密封的时间越长，产生的酒精量就越多 2. 酸奶是人们喜爱的乳制品,在制作酸奶时,利用的生物是（ ） A. 乳酸菌 B. 酵母菌 C. 醋酸菌 D. 青霉菌 3. 微生物实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列说法错误的是（ ） A. 用紫外线对空气进行消毒前，可适量喷洒石炭酸等消毒液以加强消毒效果 B. 灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子 C. 灼烧法灭菌对象可以是金属器具，也可以是玻璃器具 D. 无菌操作时，要对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行清洁和消毒 4. 下列关于果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的叙述,正确的是（ ） A. 制作泡菜所需的微生物是一种需氧型细菌 B. 制作果醋的乳酸菌,属于严格的厌氧型微生物 C. 家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都是纯种发酵 D. 泡菜制作过程中,亚硝酸盐的含量会先上升后下降 5. 在反刍动物瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物以尿素为唯一氮源。某小组计划从牛瘤胃中分离出该类微生物进行研究,下图表示实验所用的培养基配方。下列说法错误的是（ ） 本实验使用的培养基配方 KH₂PO₄ Na₂HPO4 MgS04·7H₂O 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g l。0g 15.0g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000 mL。 A. 该培养基为固体培养基,在倒平板操作前,要进行高压蒸汽灭菌 B. 该培养基上只有尿素分解菌能够存活,因而长出的菌落无须菌种鉴定 C. 接种针可以通过灼烧灭菌,灼烧时使用酒精灯的外焰效果更好 D. 尿素分解菌能够使培养基的pH升高,可据此初步确定所需菌种 6. 某科研机构以菊花为材料进行组织培养，步骤如下图。下列说法错误的是（　　） A. X常选用幼嫩的菊花茎段，并需对其进行消毒处理 B. 配制培养基时，可不加入琼脂，便于X与培养基充分接触 C. A过程需要避光处理，促进愈伤组织的形成 D. B过程培养基中植物激素的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向 7. 与传统育种相比，植物体细胞杂交在培育作物新品种方面的重大突破表现在（ ） A. 克服远缘杂交不亲和的障碍 B. 能在短时间内快速得到纯合子植株 C. 缩短育种周期，减少盲目性 D. 快速培育无病毒植株，保留杂种优势 8. 为保证实验的成功,选择合适的生物材料非常关键。下列选择不合理的是（ ） A. 选择动物胚胎或幼龄动物的组织、器官进行动物细胞培养,有利于获得大量细胞 B. 从野生红豆杉的树皮或树叶中大量提取紫杉醇 C. 常选用植物的茎尖组织培养以获得脱毒植株 D. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理可筛选出有用的突变体 9. 科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。下列说法错误的是（ ） A. 干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞，前者只存在于早期胚胎中 B. iPS细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织 C. 在培养iPS细胞的过程中，定期更换培养液可清除代谢废物 D. 来源于病人自身的体细胞的iPS细胞，能够避免免疫排斥问题 10. 华蟾素注射液是我国经典的抗肿瘤药物,研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理,用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验,结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 在体外培养细胞时,必须保证环境是无菌、无毒的 B. 肝癌细胞培养时,需将它们置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养 C. 据图甲可知,华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖,且其抑制效果只与浓度呈正相关 D. 图乙结果进一步表明,华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制 11. 高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，如图为该过程中的某一时期示意图。下列有关叙述错误的是（ ） A. 图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团 B. 高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期，终止于生命结束 C. 胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化 D. 进行胚胎分割时，应选择图示时期之后的胚胎进行 12. 绝大部分用于生产生物医药产品的哺乳动物细胞为贴壁生长细胞,这给大规模生物医药产品的生产带来很大困难。微载体的出现,从根本上改变了传统的细胞培养工艺,以悬浮在培养液中的微珠作为细胞贴附的载体,可以在轻度搅拌下进行动物细胞培养。下列说法错误的是（ ） A. 轻度搅拌有利于细胞氧气供应 B. 接触抑制现象有利于传统工艺中产品的大规模生产 C. 微珠为细胞的贴壁生长提供了足够的表面积 D. 传代培养时,贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理 13. 木聚糖酶可以将木聚糖(植物细胞壁的成分之一)降解为木糖,在酿造、饲料生产中都有广泛应用。木聚糖酶可以用黑曲霉发酵生产,下图是生产该酶的连续发酵装置图。下列有关叙述正确的是（ ） A. 选育菌种是发酵工程的中心环节,所用菌种一般较单一 B. 在发酵生产中,选育出的优良菌种可以直接接种 C. 培养液和发酵装置在接种前都需进行严格灭菌处理 D. 在发酵过程中,需要适时向装置中不再添加必需的营养组分 14. 春季甲流肆虐,不少学校因学生陆续得病而停课。下图表示生产用于预防和治疗甲型流感的单克隆抗体过程。下列相关说法正确的是（ ） A. 若A细胞是小鼠的骨髓瘤细胞,则B细胞是取自无感染病毒的动物或人的B淋巴细胞 B. d过程的常用诱导剂有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒 C. C→D的筛选是指对杂交瘤细胞的克隆化培养和抗体检测,且需经过多次筛选 D. E过程表示将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔,从小鼠血浆中提取单克隆抗体 15. 下图是研究2，4-D对红色金钱柳悬浮细胞生长与花青素合成影响的实验结果。相关叙述错误的是（　　） A. 细胞悬浮培养的主要原理是愈伤组织细胞分裂旺盛 B. 培养基应用葡萄糖、无机盐、激素等配制 C. 本实验中2，4-D具有抑制细胞生长的作用 D. 结果表明一定浓度的2，4-D会促进花青素的合成 16. 我国首例克隆猫“大蒜”培育过程:从供体猫大腿部采集一块皮下组织,提取体细胞与去核的卵母细胞融合,构建重组胚胎,再植入代孕猫的子宫内,直至分娩。下列说法正确的是（ ） A. 体细胞的分化程度比胚胎细胞的高,但不影响通过核移植获得克隆动物的难度 B. 去除卵母细胞的细胞核时,可通过显微操作技术,用吸管吸出细胞核 C. 用电融合法使体细胞与卵母细胞融合后,不需要再对重组胚胎进行激活 D. 克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞有全能性,其遗传物质全部来自供体细胞 三、非选择题(本大题共5小题,共52分。) 17. 米酒，旧时叫“醴”，其酿制工艺简单，口味香甜醇美。下图表示发酵过程中的代谢途径。回答下列问题： （1）制作时用糯米酿制，需要等煮熟的糯米温度降低后再拌上酒曲（酵母菌）进行发酵，这是为了防止________________________________。在家中用陶土罐酿制米酒时，不需要进行严格的灭菌处理，这是因为_________________________________。 （2）陶土罐中要预留部分空间，一方面通过①②过程可以___________________________，另一方面是为了避免_____________________________。 （3）制作成功的米酒若暴露在空气中，酒味会逐渐消失而出现醋酸味，此时发挥作用的微生物是________。此现象在_________（填“冬季”或“夏季”）更易发生，其原因是_________________________________。 18. 精喹禾灵是一种新型早田茎叶处理剂,化学成分为某种含氮有机物,对阔叶作物田的禾本科杂草有很好的防效。精喹禾灵在土壤中可被微生物分解,从土壤中筛选出能高效降解精喹禾灵的微生物,可应用于污染的土壤和水体的修复。请回答下列问题: （1）为了确保能从土壤样品中分离得到所需的微生物,可以通过选择培养来增加能降解精喹禾灵的微生物菌种的浓度。将10 g土壤样品添加到以_____为唯一氮源和碳源的液体培养基中,从用途的角度来看,该培养基属于______。培养时需将培养基置于摇床上振荡培养,目的是_________ （2）在接种操作前,应随机抽取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间,其目的是______。 （3）若对筛选获得的菌株进行计数,则应选择下图中____图对应的操作方法。在5个平板上,均接种稀释倍数为104的菌液0.1 mL,培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为134、13、123、150和141,则每毫升样品中含有该菌数量约为__________个。与血细胞计数法相比,此计数方法测得的数量偏__________(填“多”或“少”),原因是____________。  （4）对精喹禾灵降解微生物的降解能力进行测定时,将选出的菌种接入培养基中培养,每24 h采样一次,测定培养基中________,计算降解率。 19. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体过程如下图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。 （1）过程①选择幼嫩的叶用于接种的原因是____________。接种一段时间后，发现部分外植体被污染，不能正常生长，被污染的原因可能是________________________。 （2）启动②③的关键激素是______；⑤需要用______处理，原生质体的培养液需要维持一定浓度，原因是________________________。 （3）乙、丙、丁三种植株中核遗传物质与甲相同的是______。通过⑥生产黄酮类化合物时发现，正常愈伤组织中几乎没有黄酮类化合物，加入茉莉酸甲酯和水杨酸会明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，且细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，从基因控制生物性状的角度推测，茉莉酸甲酯和水杨酸的作用途径是________________________。 20. 病毒抗原检测试剂盒的生产依赖于病毒单克隆抗体的制备。制取某病毒S蛋白的单克隆抗体部分过程如下图所示。请回答下列问题: （1）制备单克隆抗体过程中要用到______技术。制备单克隆抗体过程中,a操作是指往小鼠体内注射____,使小鼠产生能分泌相应抗体的____,并在体外让_________与骨髓瘤细胞融合。与诱导植物原生质体融合相比,诱导这两种细胞融合的特有方法是________。 （2）在细胞内DNA合成一般有两条途径:主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基蝶呤可以阻断此途径;另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据此原理,向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基蝶呤____(填“能”或“不能”)筛选杂交瘤细胞,原因是_____。 （3）诱导融合后至少要经过两次筛选,图中的筛选2是利用________的原理,将能产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选出来。这类细胞具有______的特点,可直接用于生成单克隆抗体。 21. 研究人员利用引进的优良品种奶牛A、B作为供体，用本地品种奶牛C作为受体，大规模培育出优良品种奶牛，操作流程如图。 （1）过程①常用_______处理，目的是使A牛_______。 （2）采集的精子与卵母细胞要分别在体外进行____，才能用于体外受精。只有发育到____期的卵子才能与精子结合。 （3）胚胎移植前需对受体母牛C进行_______处理，为供体的胚胎提供相同的生理环境，以确保胚胎移植后能正常发育。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_______。 （4）应用胚胎分割技术，应选择发育良好、形态正常的______胚进行分割。在对内细胞团进行分割时，为保证正常发育，须做到______。如需对初期胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的_______细胞进行鉴定。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024-2025学年第二学期高二年级期中教学质量检测 生物试卷 (75分钟　100分) 一、选择题(本大题共16小题,每小题3分,共48分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。) 1. 酿酒用的酒曲是以谷物为原料，破碎加水压制而成的。酒曲富含酵母菌和霉菌等多种微生物，经水浸泡活化后加入蒸熟的米即可用于酿酒。下列叙述正确的是（　　） A. 适合酒曲中酵母菌的生长温度为30~35 ℃ B. 为防止杂菌污染，需要对酒曲进行灭菌处理 C. 酒曲经水浸泡活化有利于提高酶的活性和酵母菌的代谢 D. 酿酒过程中密封的时间越长，产生的酒精量就越多 【答案】C 【解析】 【分析】家庭制作米酒利用的是酵母菌发酵原理，酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活，有氧条件下，酵母菌把葡萄糖分解成二氧化碳和水，释放出较多的能量；无氧条件下，酵母菌则把葡萄糖分解成二氧化碳和酒精，释放出较少的能量。酵母菌是异养兼性厌氧型微生物，酵母菌进行酒精发酵的反应式是C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量。 【详解】A、适合酒曲中酵母菌的生长温度为18-25℃，发酵的适合温度是25-30℃，A错误； B、酒曲中富含酵母菌，对酒曲进行灭菌处理会杀死酵母菌，不利于酒精发酵（不能进行酒精发酵），B错误； C、酒曲经水浸泡后会活化，有利于提高酵母菌细胞中酶的活性，从而有利于酵母菌的代谢，加速发酵，C正确； D、当酒精含量达到一定程度后，会抑制酵母菌的生命活动，酵母菌甚至会死亡，产生的酒精的量也不会增加，D错误。 故选C。 2. 酸奶是人们喜爱的乳制品,在制作酸奶时,利用的生物是（ ） A. 乳酸菌 B. 酵母菌 C. 醋酸菌 D. 青霉菌 【答案】A 【解析】 【分析】酸奶制作时利用的生物是乳酸菌；酿酒时利用的微生物是酵母菌；果醋制作用的微生物是醋酸菌。 【详解】在制作酸奶时，利用的生物是乳酸菌，A正确。 故选A。 3. 微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列说法错误的是（ ） A. 用紫外线对空气进行消毒前，可适量喷洒石炭酸等消毒液以加强消毒效果 B. 灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子 C. 灼烧法灭菌的对象可以是金属器具，也可以是玻璃器具 D. 无菌操作时，要对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行清洁和消毒 【答案】B 【解析】 【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌；消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。 【详解】A、用紫外线对空气进行消毒前,可适量喷洒石炭酸等消毒液以加强消毒效果，A正确； B、灭菌可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子，但消毒只能杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子)，B错误； C、灼烧法灭菌的对象是金属器具，如接种环，也可以是玻璃器具，如瓶口、涂布器，C正确； D、无菌操作时，对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行清洁和消毒，D正确。 故选B。 4. 下列关于果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的叙述,正确的是（ ） A. 制作泡菜所需的微生物是一种需氧型细菌 B. 制作果醋的乳酸菌,属于严格的厌氧型微生物 C. 家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都是纯种发酵 D. 泡菜制作过程中,亚硝酸盐的含量会先上升后下降 【答案】D 【解析】 【分析】1、乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸，可用于乳制品的发酵、泡菜的腌制等。乳酸菌种类很多，在自然界中分布广泛，空气、土壤、植物体表、人或动物的肠道内都有乳酸菌分布。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌； 2、醋酸菌是好氧细菌，当O2、糖源都充足时能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸；当缺少糖源时则直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30～35 ℃。 【详解】A、制作泡菜所需的微生物是乳酸菌，乳酸菌是厌氧型细菌 ，不是需氧型细菌，A错误； B、制作果醋的微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌 ，不是乳酸菌，且乳酸菌也不是严格厌氧型（是兼性厌氧），B错误； C、家庭制作果酒、果醋和腐乳时，利用的菌种来自原材料或空气中的微生物，不是纯种发酵 ，C错误； D、泡菜制作过程中，初期由于硝酸盐还原菌的作用，亚硝酸盐含量上升；随着发酵进行，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸抑制硝酸盐还原菌，同时亚硝酸盐会被分解，其含量下降 ，D正确。 故选D。 5. 在反刍动物瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物以尿素为唯一氮源。某小组计划从牛瘤胃中分离出该类微生物进行研究,下图表示实验所用的培养基配方。下列说法错误的是（ ） 本实验使用的培养基配方 KH₂PO₄ Na₂HPO4 MgS04·7H₂O 葡萄糖 尿素 琼脂 14g 2.1g 0.2g 10.0g l。0g 150g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000 mL。 A. 该培养基为固体培养基,在倒平板操作前,要进行高压蒸汽灭菌 B. 该培养基上只有尿素分解菌能够存活,因而长出的菌落无须菌种鉴定 C. 接种针可以通过灼烧灭菌,灼烧时使用酒精灯的外焰效果更好 D. 尿素分解菌能够使培养基的pH升高,可据此初步确定所需菌种 【答案】B 【解析】 【分析】培养基营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 【详解】A、由于培养基配方中含有琼脂，琼脂是一种凝固剂，所以该培养基为固体培养基。在倒平板操作前，为防止杂菌污染，需要对培养基进行高压蒸汽灭菌，A正确； B、鉴定分离纯化的菌种为尿素分解菌，根据尿素分解菌产生的脲酶将尿素分解产生的氨与酚红指示剂显红色的原理，所以可在培养基中加入酚红指示剂用于菌种鉴定，B错误； C、接种针等金属用具可以通过灼烧灭菌，酒精灯外焰温度高，灼烧时使用酒精灯的外焰效果更好，能更有效地杀死微生物，C正确； D、尿素分解菌能够将尿素分解为氨，氨呈碱性，会使培养基的pH升高，因此可据此初步确定所需菌种，D正确。 故选B。 6. 某科研机构以菊花为材料进行组织培养，步骤如下图。下列说法错误的是（　　） A. X常选用幼嫩的菊花茎段，并需对其进行消毒处理 B. 配制培养基时，可不加入琼脂，便于X与培养基充分接触 C. A过程需要避光处理，促进愈伤组织的形成 D. B过程培养基中植物激素的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向 【答案】B 【解析】 【分析】图中X为外植体，A为脱分化，B为再分化，Y是胚状体。 【详解】A、X为外植体，常选用幼嫩的菊花茎段，并对其进行消毒处理，A正确； B、诱导愈伤组织需用固体培养基，配置培养基时，必须加入琼脂，待培养基灭菌凝固后在接种外植体X，B错误； C、A为脱分化，需避光处理，促进愈伤组织的形成，C正确； D、B为再分化，培养基中植物激素的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向，细胞分裂素浓度高可促进芽的分化，生长素浓度高可促进根的分化，D正确。 故选B。 7. 与传统育种相比，植物体细胞杂交在培育作物新品种方面的重大突破表现在（ ） A. 克服远缘杂交不亲和的障碍 B. 能在短时间内快速得到纯合子植株 C. 缩短育种周期，减少盲目性 D. 快速培育无病毒植株，保留杂种优势 【答案】A 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术是指将来源不同的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。 【详解】A、传统杂交育种只限于进行有性生殖的同种生物之间，而植物体细胞杂交克服远缘杂交不亲和的障碍培育出作物新品种，A正确； B、植物体细胞杂交技术不一定能得到纯合子植株，B错误； C、植物体细胞杂交能缩短育种周期，但这不是其突出特点，C错误； D、植物体细胞杂交不能快速培育无病毒植株，快速培育无病毒植株应该采用植物组织培养技术，D错误。 故选B。 8. 为保证实验的成功,选择合适的生物材料非常关键。下列选择不合理的是（ ） A. 选择动物胚胎或幼龄动物的组织、器官进行动物细胞培养,有利于获得大量细胞 B. 从野生红豆杉的树皮或树叶中大量提取紫杉醇 C. 常选用植物的茎尖组织培养以获得脱毒植株 D. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理可筛选出有用的突变体 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞培养常选择动物胚胎或幼龄动物的组织、器官进行动物细胞培养，细胞分化程度低，细胞分裂能力强，利于细胞增殖，数量增多，动物细胞培养的原理是细胞增殖；植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，可以采用茎尖组织培养技术脱去病毒，从而获得脱毒苗。 【详解】A、动物胚胎或幼龄动物的器官或组织细胞分化程度低，细胞分裂能力强，选择动物胚胎或幼龄动物的组织、器官进行动物细胞培养有利于获得大量细胞，A正确； B、野生红豆杉是濒危物种，采用植物细胞工程获得大量紫杉醇，B错误； C、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，可以采用茎尖组织培养技术脱去病毒，从而获得脱毒苗，C正确； D、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此选择植物的愈伤组织进行诱变处理，再进行人工选择，可获得优质的突变体，D正确。 故选B。 9. 科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似于胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。下列说法错误的是（ ） A. 干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞，前者只存在于早期胚胎中 B. iPS细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织 C. 在培养iPS细胞的过程中，定期更换培养液可清除代谢废物 D. 来源于病人自身的体细胞的iPS细胞，能够避免免疫排斥问题 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件 （1）充足的营养供给--微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 （2）适宜温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 （3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 （4）气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞，前者只存在于早期胚胎中，而成体干细胞多来自于人体的组织且增殖能力有限，A正确； B、iPS细胞全称为诱导性多能干细胞，是由体细胞诱导而成的干细胞，具有和胚胎干细胞类似的发育多潜能性，具有分化成各种组织或器官的潜能，B错误； C、在培养iPS细胞的过程中，定期更换培养液可清除代谢废物，同时也能给细胞通过营养，C正确； D、ips细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。 故选B。 10. 华蟾素注射液是我国经典的抗肿瘤药物,研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理,用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验,结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 在体外培养细胞时,必须保证环境是无菌、无毒的 B. 肝癌细胞培养时,需将它们置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养 C. 据图甲可知,华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖,且其抑制效果只与浓度呈正相关 D. 图乙的结果进一步表明,华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃+0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2 （维持培养液的pH）。 【详解】A、动物细胞培养时无菌和无毒的环境是细胞培养的基本要求，A正确； B、动物细胞培养时需将其置于含有95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2 （维持培养液的pH）混合气体的CO2培养箱中进行培养，B正确； C、据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，与浓度和作用时间都呈正相关，C错误； D、图乙的结果进一步表明，随着华蟾素浓度的增加，处于间期的细胞增多，则华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞进入分裂期，可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制 ，D正确。 故选C。 11. 高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，如图为该过程中的某一时期示意图。下列有关叙述错误的是（ ） A. 图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团 B. 高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期，终止于生命结束 C. 胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化 D. 进行胚胎分割时，应选择图示时期之后的胚胎进行 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图，图示为胚胎发育过程某一时期示意图，该时期为囊胚期，其中①为透明带；②为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。 【详解】A、如图是囊胚期示意图，①②③依次称之为透明带、滋养层、内细胞团，A正确； B、细胞分化贯穿于整个生命历程，在胚胎时期达到最大限度，高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束，B正确； C、胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化，C正确； D、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，图示细胞所处时期可以进行，D错误。 故选D。 12. 绝大部分用于生产生物医药产品的哺乳动物细胞为贴壁生长细胞,这给大规模生物医药产品的生产带来很大困难。微载体的出现,从根本上改变了传统的细胞培养工艺,以悬浮在培养液中的微珠作为细胞贴附的载体,可以在轻度搅拌下进行动物细胞培养。下列说法错误的是（ ） A. 轻度搅拌有利于细胞的氧气供应 B. 接触抑制现象有利于传统工艺中产品的大规模生产 C. 微珠为细胞的贴壁生长提供了足够的表面积 D. 传代培养时,贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理 【答案】B 【解析】 【分析】1、原代培养和传代培养：①原代培养：指没有分瓶之前的细胞培养。②传代培养指细胞悬浮液培养一段时间后，分瓶进行的细胞培养。 2、细胞贴壁：进行细胞培养时，一般情况下，细胞悬液中分散的细胞会很快贴附在瓶壁上，即细胞贴壁。接触抑制：贴壁细胞不断分裂生长到相互接触时，会停止分裂增殖，这种现象即为接触抑制。因为有接触抑制现象，所以贴壁生长的细胞一般为单层细胞。癌变的细胞没有接触抑制现象，可无限增殖。 【详解】A、动物细胞培养需要满足营养条件、无菌无毒条件、适宜的温度、pH和渗透压、适宜的气体环境，搅拌有利于氧气供应，A正确； B、接触抑制即当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖，因此为产品的大规模生产带来困难，B错误； C、以悬浮在培养液中的微珠作为细胞贴附的载体，增加了细胞贴壁的表面积，C正确； D、传代培养时，悬浮培养的细胞直接利用离心法收集，贴壁细胞用胰蛋白酶处理，使之分散成单个细胞，再用离心法收集，之后，将收集的细胞制成悬浮液，分瓶培养，D正确。 故选B。 13. 木聚糖酶可以将木聚糖(植物细胞壁的成分之一)降解为木糖,在酿造、饲料生产中都有广泛应用。木聚糖酶可以用黑曲霉发酵生产,下图是生产该酶的连续发酵装置图。下列有关叙述正确的是（ ） A. 选育菌种是发酵工程的中心环节,所用菌种一般较单一 B. 在发酵生产中,选育出优良菌种可以直接接种 C. 培养液和发酵装置在接种前都需进行严格灭菌处理 D. 在发酵过程中,需要适时向装置中不再添加必需的营养组分 【答案】C 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面，发酵过程是发酵的中心环节，A错误； B、在大规模的发酵生产中，需要将选育出的优良菌种经过多次的 扩大培养，当达到一定数量后再接种，B错误； C、培养液和发酵装置在接种前都需进行严格灭菌处理，防止杂菌污染，C正确； D、在发酵过程中，装置内的营养组分会被消耗，需要适时向装置中再添加必需的营养组分，D错误。 故选C。 14. 春季甲流肆虐,不少学校因学生陆续得病而停课。下图表示生产用于预防和治疗甲型流感的单克隆抗体过程。下列相关说法正确的是（ ） A. 若A细胞是小鼠的骨髓瘤细胞,则B细胞是取自无感染病毒的动物或人的B淋巴细胞 B. d过程的常用诱导剂有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒 C. C→D的筛选是指对杂交瘤细胞的克隆化培养和抗体检测,且需经过多次筛选 D. E过程表示将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔,从小鼠血浆中提取单克隆抗体 【答案】B 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自感染病毒的动物或人的B淋巴细胞，A错误； B、融合动物细胞常用的方法有化学方法（PEG）、灭活的病毒，B正确； C、C→D的筛选是将融合成功的杂交瘤细胞筛选出来，C错误； D、E过程表示将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，从小鼠腹水中提取单克隆抗体，D错误。 故选B。 15. 下图是研究2，4-D对红色金钱柳悬浮细胞生长与花青素合成影响的实验结果。相关叙述错误的是（　　） A. 细胞悬浮培养的主要原理是愈伤组织细胞分裂旺盛 B. 培养基应用葡萄糖、无机盐、激素等配制 C. 本实验中2，4-D具有抑制细胞生长的作用 D. 结果表明一定浓度的2，4-D会促进花青素的合成 【答案】B 【解析】 【分析】植物激素是由植物体内产生，能从产生部位运送到作用部位，对植物的生长发育有显著影响的微量有机物。人们发现的植物激素有生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸和乙烯等。 【详解】A、愈伤组织是不定形的薄壁组织团块，愈伤组织细胞分裂旺盛，是细胞悬浮培养的主要原理，A正确； B、将愈伤组织接种到含有特定激素的培养基上，就可以诱导其再分化成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整的植株，愈伤组织的培养基需要添加蔗糖，B错误； C、2，4－D是生长素类似物，由图可知，生物量随2，4－D浓度增大而减小，说明本实验中2，4－D具有抑制细胞生长的作用，C正确； D、当2，4－D的浓度小于0.25mg/L时，花青素的产量高于对照组，说明一定浓度的2，4－D会促进花青素的合成，D正确。 故选B。 16. 我国首例克隆猫“大蒜”的培育过程:从供体猫大腿部采集一块皮下组织,提取体细胞与去核的卵母细胞融合,构建重组胚胎,再植入代孕猫的子宫内,直至分娩。下列说法正确的是（ ） A. 体细胞的分化程度比胚胎细胞的高,但不影响通过核移植获得克隆动物的难度 B. 去除卵母细胞的细胞核时,可通过显微操作技术,用吸管吸出细胞核 C. 用电融合法使体细胞与卵母细胞融合后,不需要再对重组胚胎进行激活 D. 克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞有全能性,其遗传物质全部来自供体细胞 【答案】B 【解析】 【分析】1、动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，继而发育成动物个体的技术。2、利用核移植技术克隆动物时，其基本操作为获取去核卵细胞→构建重构胚→激活重构胚→胚胎移植→获得克隆个体。 【详解】A、体细胞比胚胎细胞的分化程度高，恢复其全能性十分困难，故体细胞核移植获得克隆动物的难度明显高于胚胎细胞核移植，A错误； B、在核移植过程中，可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，获得去核卵母细胞，B正确； C、用电融合法使体细胞与卵母细胞融合后，还需要再对重组胚胎进行激活，其目的是使其完成细胞分裂和发育进程，C错误； D、通过核移植方法培育的克隆动物，其细胞核的遗传物质全部来自供体细胞核，但细胞质中的遗传物质则来自提供去核卵细胞的雌性，D错误。 故选B。 三、非选择题(本大题共5小题,共52分。) 17. 米酒，旧时叫“醴”，其酿制工艺简单，口味香甜醇美。下图表示发酵过程中的代谢途径。回答下列问题： （1）制作时用糯米酿制，需要等煮熟的糯米温度降低后再拌上酒曲（酵母菌）进行发酵，这是为了防止________________________________。在家中用陶土罐酿制米酒时，不需要进行严格的灭菌处理，这是因为_________________________________。 （2）陶土罐中要预留部分空间，一方面通过①②过程可以___________________________，另一方面是为了避免_____________________________。 （3）制作成功的米酒若暴露在空气中，酒味会逐渐消失而出现醋酸味，此时发挥作用的微生物是________。此现象在_________（填“冬季”或“夏季”）更易发生，其原因是_________________________________。 【答案】（1） ①. 温度过高杀死酵母菌 ②. 发酵的无氧环境和产生的酒精会抑制大部分微生物的生长、繁殖 （2） ①. 产生大量能量以促进酵母菌的繁殖 ②. 发酵液溢出 （3） ①. 醋酸菌 ②. 夏季 ③. 醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，而夏季气温较高，有利于醋酸菌的发酵 【解析】 【分析】许多新鲜水果(如葡萄)的果皮表面附着有大量的不同种类的野生酵母菌。在这些酵母菌的作用下，水果可以发酵成果酒。在有氧的条件下，果酒经醋酸菌的作用还可以进一步发酵成果醋。制作果酒和果醋：①许多新鲜水果（如葡萄）的果皮表面附着有大量的不同种类的野生酵母菌。②将器具用洗洁精清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，晾干备用。③葡萄汁装入发酵瓶中（留有大约1/3的空间），盖好瓶盖。④温度控制在18~30℃进行发酵。每隔12h左右将瓶盖拧松一次（释放CO2，防止发酵瓶爆裂），再拧紧瓶盖。发酵时间为10~12d。⑤当葡萄酒制作完成后，打开瓶盖，盖上一层纱布，进行葡萄醋的发酵。发酵温度为30~35℃，时间为7~8d。 【小问1详解】 为了防止温度过高杀死酵母菌，需要等煮熟的糯米温度降低后再拌上酒曲进行发酵。发酵的无氧环境和产生的酒精会抑制大部分微生物的生长、繁殖，因此在家中用陶土罐酿制米酒时，不需要进行严格的灭菌处理。 【小问2详解】 陶土罐中要预留部分空间，一方面酵母菌通过①②有氧呼吸过程可以产生大量能量以进行大量繁殖，另一方面为了避免发酵过程中产生的CO2导致陶土罐中压力增大，发酵液溢出。 【小问3详解】 制作成功的米酒若暴露在空气中，在有氧的条件下，米酒经醋酸菌的作用发酵成米醋，因而酒味会逐渐消失而出现醋酸味。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，而夏季气温较高，有利于醋酸菌的发酵，因此此现象在夏季更易发生。 18. 精喹禾灵是一种新型早田茎叶处理剂,化学成分为某种含氮有机物,对阔叶作物田的禾本科杂草有很好的防效。精喹禾灵在土壤中可被微生物分解,从土壤中筛选出能高效降解精喹禾灵的微生物,可应用于污染的土壤和水体的修复。请回答下列问题: （1）为了确保能从土壤样品中分离得到所需的微生物,可以通过选择培养来增加能降解精喹禾灵的微生物菌种的浓度。将10 g土壤样品添加到以_____为唯一氮源和碳源的液体培养基中,从用途的角度来看,该培养基属于______。培养时需将培养基置于摇床上振荡培养,目的是_________ （2）在接种操作前,应随机抽取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间,其目的是______。 （3）若对筛选获得的菌株进行计数,则应选择下图中____图对应的操作方法。在5个平板上,均接种稀释倍数为104的菌液0.1 mL,培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为134、13、123、150和141,则每毫升样品中含有该菌数量约为__________个。与血细胞计数法相比,此计数方法测得的数量偏__________(填“多”或“少”),原因是____________。  （4）对精喹禾灵降解微生物的降解能力进行测定时,将选出的菌种接入培养基中培养,每24 h采样一次,测定培养基中________,计算降解率。 【答案】（1） ①. 精喹禾灵 　 　 ②. 选择培养基 ③. 提高培养基中溶解氧的含量,使菌体和培养液充分接触 （2）检测培养基灭菌是否合格 （3） ①. 乙 ②. 1.37×107 ③. 少 ④. 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落 （4）残留精喹禾灵的浓度 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【小问1详解】 本实验目的是从土壤中筛选出能高效降解精喹禾灵的微生物，则应以精喹禾灵 为唯一氮源和碳源；该培养基能让分解该物质的微生物生长，而其他的微生物受到抑制，属于选择培养基；培养时需将培养基置于摇床上振荡培养，一方面可以使微生物菌体与培养液充分接触，另一方面也可提高培养基中溶解氧的含量。 【小问2详解】 在接种操作前，应随机抽取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间，这样可以通过检测培养基灭菌是否合格来说明实验数据的可靠性。 【小问3详解】 稀释涂布平板法计数时，应选择菌落数在30-300之间的进行，在5个平板上，均接种稀释倍数为104的菌液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的菌落数分别为134、13、123、150和141，则每毫升样品中含有该菌数量约为（134＋123＋150＋141）/4÷0.1×104=1.37×107；由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个，故与血细胞计数法相比，此计数方法测得的数量偏少。 【小问4详解】 对精喹禾灵降解微生物的降解能力进行测定时，将选出的菌种接入培养基中培养，每24h采样一次，测定培养基中残留精喹禾灵浓度，计算降解率，进而通过比较找到残留精喹禾灵浓度最低的那一组中的微生物即为高效降解精喹禾灵的目的菌。 19. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体过程如下图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。 （1）过程①选择幼嫩的叶用于接种的原因是____________。接种一段时间后，发现部分外植体被污染，不能正常生长，被污染的原因可能是________________________。 （2）启动②③的关键激素是______；⑤需要用______处理，原生质体的培养液需要维持一定浓度，原因是________________________。 （3）乙、丙、丁三种植株中核遗传物质与甲相同的是______。通过⑥生产黄酮类化合物时发现，正常愈伤组织中几乎没有黄酮类化合物，加入茉莉酸甲酯和水杨酸会明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，且细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，从基因控制生物性状的角度推测，茉莉酸甲酯和水杨酸的作用途径是________________________。 【答案】（1） ①. 分裂能力强，分化程度低（全能性高） ②. 培养基、接种工具灭菌不彻底；外植体消毒不彻底；接种操作过程不符合无菌操作要求等 （2） ①. 生长素和细胞分裂素 ②. 纤维素酶、果胶酶 ③. 保持原生质体渗透压，维持细胞形态稳定 （3） ①. 乙、丁 ②. 茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物 【解析】 【分析】据图分析，①表示将植株甲幼嫩的叶接种到培养基中，使其生长；②表示经过脱分化过程培养出愈伤组织；③表示再分化形成芽、根；④表示对植物的愈伤组织进行诱变处理，促使其发生突变；⑤表示植物体细胞杂交获得原生质体；⑥表示植物体细胞培养。 【小问1详解】 幼嫩的叶有丝分裂旺盛，细胞分裂能力强，分化程度低，有利于植物组织培养，因此①选择幼嫩的叶用于接种。接种一段时间后，发现部分外植体被污染，不能正常生长，被污染的原因可能是培养基、接种工具灭菌不彻底；外植体消毒不彻底；接种操作过程不符合无菌操作要求等。 【小问2详解】 在组织培养中，生长素用于诱导细胞的分裂和根的分化，细胞分裂素的主要作用是促进组织细胞的分裂或从愈伤组织和器官上分化出不定芽，所以启动②脱分化和③再分化的关键激素是生长素和细胞分裂素；⑤在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体；此外为保持原生质体渗透压，维持细胞形态稳定，原生质体的培养液需要维持一定浓度。 【小问3详解】 乙、丙、丁三种植株中核遗传物质与甲相同的是乙、丁，由题意可知，加入茉莉酸甲酯和水杨酸后，愈伤组织细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，说明茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶基因的表达，酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物。 20. 病毒抗原检测试剂盒的生产依赖于病毒单克隆抗体的制备。制取某病毒S蛋白的单克隆抗体部分过程如下图所示。请回答下列问题: （1）制备单克隆抗体过程中要用到______技术。制备单克隆抗体过程中,a操作是指往小鼠体内注射____,使小鼠产生能分泌相应抗体的____,并在体外让_________与骨髓瘤细胞融合。与诱导植物原生质体融合相比,诱导这两种细胞融合的特有方法是________。 （2）在细胞内DNA合成一般有两条途径:主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基蝶呤可以阻断此途径;另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据此原理,向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基蝶呤____(填“能”或“不能”)筛选杂交瘤细胞,原因是_____。 （3）诱导融合后至少要经过两次筛选,图中的筛选2是利用________的原理,将能产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选出来。这类细胞具有______的特点,可直接用于生成单克隆抗体。 【答案】（1） ①. 动物细胞培养和动物细胞融合 　 　 　 　 ②. S蛋白 ③. B淋巴细胞 ④. B淋巴细胞 ⑤. 灭活病毒诱导法 （2） ①. 能 　 ②. B淋巴细胞不能无限增殖,骨髓瘤细胞因DNA合成途径被阻断而不能增殖,杂交瘤细胞可通过辅助途径合成DNA,能够增殖 （3） ①. 抗原—抗体特异性结合 　 ②. 既能迅速大量增殖,又能产生特定抗体 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问1详解】 制备单克隆抗体过程中要培养骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。制备单克隆抗体过程中，a操作是指往小鼠体内注射S蛋白（特定抗原），使小鼠产生能分泌相应抗体的B淋巴细胞,并在体外让B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合的特有方法是这两种细胞融合的特有方法是灭活病毒诱导法。 【小问2详解】 诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中，如果只考虑细胞两两融合，则存在浆细胞和浆细胞的融合细胞、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞、浆细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞，浆细胞和浆细胞的融合细胞不能增殖，添加氨基蝶呤后，DNA合成的主要途径被阻断，骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞没有辅助途径，而杂交瘤细胞可通过辅助途径合成DNA，能够增殖。 【小问3详解】 图中的筛选2是进行克隆化培养和抗体检测，利用抗原―抗体特异性结合的原理将能产生特定抗体的杂交瘤细胞细胞筛选出来，这类细胞具有骨髓瘤细胞能迅速大量增殖的特点，又具有浆细胞能产生特定抗体的特点。 21. 研究人员利用引进的优良品种奶牛A、B作为供体，用本地品种奶牛C作为受体，大规模培育出优良品种奶牛，操作流程如图。 （1）过程①常用_______处理，目的是使A牛_______。 （2）采集的精子与卵母细胞要分别在体外进行____，才能用于体外受精。只有发育到____期的卵子才能与精子结合。 （3）胚胎移植前需对受体母牛C进行_______处理，为供体的胚胎提供相同的生理环境，以确保胚胎移植后能正常发育。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_______。 （4）应用胚胎分割技术，应选择发育良好、形态正常的______胚进行分割。在对内细胞团进行分割时，为保证正常发育，须做到______。如需对初期胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的_______细胞进行鉴定。 【答案】（1） ①. 促性腺激素 ②. 超数排卵 （2） ①. 获能处理和成熟培养 ②. MⅡ （3） ①. 同期发情 ②. 受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应 （4） ①. 桑葚胚或囊 ②. 均等分割 ③. 滋养层 【解析】 【分析】分析题图：①为超数排卵，②为显微操作去核，③为早期胚胎培养，④为动物细胞融合获得重构胚， 整个题图中涉及到的技术有：动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养、胚胎分割、胚胎移植等。 【小问1详解】 自然状态下，母牛产生的卵细胞不多，过程①常用促性腺激素处理，目的是使A牛超数排卵，获得更多的卵细胞用于受精作用，从而获得更多的胚胎。 【小问2详解】 采集到的卵母细胞需要培养至减数第二次分裂时期才具备受精作用，而获得的精子也不能直接用于受精作用，需要进行获能处理，可以在相应的获能溶液中培养获得受精的能力，故采集的精子与卵母细胞要分别在体外进行获能处理和成熟培养，才能用于体外受精。只有发育到MⅡ期的卵子才能与精子结合。 【小问3详解】 胚胎移植前需对受体母牛C进行同期发情处理（可以注射相应的激素达到该目的），为供体的胚胎提供相同的生理环境，以确保胚胎移植后能正常发育。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应，使得移植进入子宫的胚胎能够生存，为后续的培养发育提供可能。 【小问4详解】 早期胚胎具有很强的分裂能力，并保持着细胞全能性，应用胚胎分割技术，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割，将它移入盛有操作液的培养皿中，然后在显微镜下用分割针或分割刀分割；在对内细胞团进行分割时，为保证正常发育，须做到均等分割，保证各胚胎发育的正常；如需对初期胚胎进行性别鉴定，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定，对于人工控制动物性别具有重要意义。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$