猜押11 生物技术实践 （2大高频考点押题）（新高考通用）-2025年高考生物冲刺抢押秘籍

猜押11 生物技术实践 猜押考点 三年考情分析 2024年 2023年 2022年 考点1　传统发酵技术和发酵工程的应用 湖北卷T1， 浙江6月卷T10、T11， 贵州卷T14，山东卷T14， 江西卷T11，河北卷T18 山东卷T12、T20， 浙江6月卷T11、T12， 全国乙卷T37， 北京卷T13 山东卷T14、T20， 江苏卷T16， 湖北卷T11 考点2　微生物的培养与应用 浙江6月卷T14， 黑、吉、辽卷T19， 山东卷T15，湖南卷T6， 江西卷T17，河北卷T13， 北京卷T17，全国甲卷T37 北京卷T16， 浙江1月卷T19， 广东卷T10， 山东卷T15 全国乙卷T37， 全国甲卷T37， 河北卷T23， 海南卷T12 考情分析 近3年传统发酵技术的应用题目难度不大，分值也不高。大多来自实际的发酵过程，侧重考查利用所学知识解决实际问题的能力。试题主要体现了对科学思维、科学探究素养的考查，学生需具备的素养要素主要是演绎与推理、实验设计、方案实施、结果分析。 近3年对微生物的培养、筛选、计数的考查经常涉及培养基的成分分析、微生物的筛选原理、微生物的计数及分析等。 押题预测 预测2025年高考考查方向：微生物的培养和应用，生物技术在食品加工及其他方面的应用。从与酶有关的实验设计入手，考查实验变量的控制、结果的预测等。 考查热点：一是考查从实验的角度剖析微生物培养和应用及传统发酵技术的应用的每项技术，把握原理、材料、操作流程、注意事项等；二是多从实验细节入手进行考查，题目的综合性和难度适中。从命题角度看，物质的提取、分离常以新科学技术为命题背景考查学生对生物技术基础知识的掌握及解决问题的能力。 考点1传统发酵技术和发酵工程的应用 1．马奶酒是蒙古族特有的一种饮品，以新鲜马奶为原料，经过过滤去除杂质，然后加热至80~90℃，再迅速冷却至20～30℃后，加入菌粉发酵使其达到一定酸度，再添加糖、水和菌粉，进行二次发酵，获得马奶酒。下列相关叙述错误的是（    ） A．添加糖主要是为酵母菌提供碳源和能源 B．新鲜马奶加热至80～90℃主要是为杀灭杂菌 C．两次加入的“菌粉”所属菌种不同，前者是乳酸菌 D．制作马奶酒过程中的两次发酵都属于纯种发酵 【答案】D 【分析】果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厌氧微生物，在缺氧 条件下进行无氧呼吸，在氧气充足的条件下进行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的细胞核， 属于真核生物，适宜酵母菌生长的温度范围是18~30°C。 【详解】A、马奶酒酿制的主要微生物之一是酵母菌，添加糖主要是为酵母菌提供碳源和能源，A正确； B、新鲜马奶加热至80～90℃主要是消灭各种杂菌，B正确； C、两次加入的“菌粉”所属菌种不同，前者是乳酸菌，后者是酵母菌，C正确； D、制作马奶酒过程中的两次发酵，都没有经过严格灭菌，每一次发酵都不属于纯种发酵，D错误。 故选D。 【名师点拨】微生物培养基的“两种类型”和“五大成分” (1)根据物理性质可将培养基分为固体培养基和液体培养基。 (2)培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐和其他物质等。 2．利用苹果制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸菌，发酵5天。下列有关叙述正确的是（　　） A．不同微生物所需的最适温度不同，接入醋酸菌后，应适当升高发酵温度 B．苹果中的葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的线粒体中被分解 C．酵母菌和醋酸菌发酵过程中均需在密闭的条件下完成 D．醋酸菌和酵母菌均以有丝分裂的方式进行增殖 【答案】A 【分析】果酒制作的原理是酵母菌在无氧的条件下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、酵母菌适宜温度是18~30℃，醋酸菌最适温度为30~35℃，接入醋酸菌后，应适当升高发酵温度，A正确； B、葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的细胞质基质中被分解成丙酮酸，进入线粒体中被进一步分解，B错误； C、酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖，再密闭进行酒精发酵；醋酸菌为好氧菌，需持续通气，C错误； D、酵母菌一般以出芽的方式繁殖，醋酸菌以二分裂的方式进行增殖，D错误。 故选 A。 3．我国具有悠久的酿酒文化和历史，白酒小窖酿造属于传统发酵技术，已选入非物质文化 遗产保护名录。窖池容积小，它的土壤和发酵酒醅的接触面大，从而能够产生更多的香 气成分带入酒中。下列叙述错误的是（　　） A．小窖酿造是以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的 B．对分离出的酿酒酵母做扩大培养，需在无菌、无氧环境中进行 C．小窖酿造的原料多以优质谷物为主，发酵酒醅中可分离出产淀粉酶的微生物 D．窖池中形成的相对稳定的微生物体系不容易被杂菌污染，因此不需要严格灭菌 【答案】B 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。 【详解】A、小窖酿造过程中，酿酒酵母是主要菌种，但其他微生物也参与其中，共同形成香气成分，A正确； B、酵母菌在有氧时大量繁殖，无氧时主要发酵产酒精，对分离出的酿酒酵母做扩大培养需要在有氧条件下进行，B错误； C、谷物中的淀粉需经糖化（分解为葡萄糖）才能被酵母利用，发酵酒醅中可能含有产淀粉酶的微生物，C正确； D、传统发酵中，窖池内酸性环境会抑制杂菌生长，已形成稳定的微生物群落，无需严格灭菌，D正确。 故选B。 【名师点拨】无菌技术的两个方面 (1)比较温和的方法——消毒。 (2)用强烈的理化方法——灭菌。 (3)两者的最大区别是，是否杀死芽孢和孢子。 3. 微生物纯培养中“一灯附近、两法接种” 4．随着发酵工程的不断发展，发酵技术在医药工业以及农牧业等许多领域得到了广泛应用，下列说法正确的是（　　） A．传统发酵技术没有对器具、原料等进行灭菌，因此无法完全保证其产品质量 B．家庭制作泡菜和果醋过程中，发酵液表层出现的白膜是由同种微生物形成 C．在啤酒工业化生产流程中，焙烤的目的是产生风味组分，并对糖浆灭菌 D．科研人员已成功通过发酵工程获得紫杉醇、青蒿素前体等物质 【答案】A 【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，生产中是否有酒精的产生，可用重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 2、啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。 【详解】A、传统发酵技术没有进行严格的灭菌，无法完全保证其产品质量，A正确； B、家庭制作泡菜时，发酵液表层出现的白膜是产膜酵母形成的；而制作果醋过程中，发酵液表层出现的白膜是醋酸菌形成的，它们不是同种微生物，B错误； C、在啤酒工业化生产流程中，焙烤可以杀死大麦种子的胚，防止种子发芽，但不使淀粉酶失活，而对糖浆灭菌在后面的煮沸阶段进行，C错误； D、现阶段还是只能在植物中分离出紫杉醇、青蒿素前体等物质，还不能利用微生物进行发酵，不属于发酵工程的应用，D错误。 故选A。 5．酸笋是螺蛳粉的“灵魂”。在自然发酵过程中，酸笋中的乳酸菌作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质，形成了螺蛳粉的特殊风味。酸笋的传统发酵工艺包括原材料处理、装坛、发酵等过程。下列相关叙述正确的是（    ） A．乳酸菌代谢类型为异养厌氧型，所以不会分布在空气中 B．原材料处理主要是对采摘后的竹笋进行剥壳、清洗和灭菌 C．装坛时应保证竹笋被盐水全部浸没，才能保证发酵的正常进行 D．随着发酵的进行，发酵液pH值逐渐升高后保持稳定 【答案】C 【分析】制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的。发酵期间，乳酸会不断积累。泡菜在腌制过程中会有亚硝酸盐产生，亚硝酸盐含量呈现先上升后下降的趋势。 【详解】A、在自然界中，乳酸菌分布广泛，空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内都分布有乳酸菌，A错误； B、竹笋中含有发酵的天然菌种，故不能对采摘后的竹笋进行灭菌，否则会杀死发酵的天然菌种，B错误； C、盐水浸没可以创造无氧环境，利于乳酸菌生存繁殖，同时减少杂菌污染，C正确； D、乳酸逐渐积累导致发酵液pH值逐渐降低后保持稳定，D错误。 故选C。 6．小曲白酒清香纯正，以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌和兼性厌氧型微生物酵母菌。如图为用小曲进行传统酿造的流程图。下列叙述错误的是（　　） A．霉菌和酵母菌细胞中都有以核膜为界限的细胞核 B．蒸熟的原料需要冷却后才可加入小曲，以免杀死菌种 C．图中撒曲糖化阶段，主要是利用霉菌分泌的淀粉酶分解淀粉 D．若酒坛表层长出白膜，可能是酒坛密封不严使乳酸菌大量繁殖产生的 【答案】D 【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。 【详解】A、霉菌和酵母菌都是真核生物，细胞中都有以核膜为界限的细胞核，A正确； B、小曲中的菌种微生物有适宜的生存温度，温度过高会杀死菌种，B正确； C、糖化过程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶将淀粉分解为葡萄糖，以供发酵利用[点拨：糖化即淀粉分解，形成糖浆的过程]，C正确； D、若酒坛表层出现白膜，可能原因是酒坛密封不严导致杂菌污染。而乳酸菌是厌氧菌，酒坛密封不严会有空气流入，乳酸菌不能大量繁殖，D错误。 故选D。 7．图1表示苹果醋的简易制作装置和制作流程。发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图2所示据图回答下列问题：                    图1                                                               图2 (1)用图1装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，改变的环境条件是 。该过程进行的反应简式是 。 (2)图2整个发酵过程的中心环节是 。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌 （填“前”或“后”）调至酸性。在青霉素生产过程中 都必须经过严格的灭菌。如果污染了杂菌，某些杂菌会产生 将青霉素分解掉。 (3)欲从土壤中分离出能产生纤维素酶的纤维素分解菌，可用加入 作为唯一碳源制成的选择培养基进行分离。若将样品接种到分离纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是 ，通过观察是否产生 来筛选纤维素分解菌。 (4)对产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了 法，其可以用来计数的原理为 。为了避免混淆，本实验纯化菌种时使用的平板需要在培养皿的 （“皿盖”或“皿底”）做好标记。然后在恒温培养箱中需培养1—2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是 。 【答案】(1) 通入无菌空气（氧气）、升高温度 (2) 发酵罐中发酵 前 培养基、发酵设备 分解青霉素的酶 (3) 纤维素 刚果红 透明圈 (4) 稀释涂布平板 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌 皿底 为了防止培养时间不足导致菌落遗漏 【分析】1、人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质—培养基，用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。虽然各种培养基的配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。 2、发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。发酵罐中发酵是发酵工程的中心环节。 【详解】（1）酿酒过程需要在无氧条件下进行，果醋发酵需要在有氧条件下发生，酿酒的适宜温度大约在25~30℃，而果醋酿造的适宜温度大约是30~35℃，因此用图1装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，改变的环境条件是通入无菌空气（氧气）、升高温度。果醋发酵过程进行的反应简式是： （2）图2整个发酵过程的中心环节是发酵罐中发酵。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌前调至酸性。在青霉素生产过程中培养基、发酵设备都必须经过严格的灭菌。如果污染了杂菌，某些杂菌会产生分解青霉素的酶将青霉素分解掉。 （3）欲从土壤中分离出能产生纤维素酶的纤维素分解菌，可用加入纤维素作为唯一碳源制成的选择培养基进行分离，这样只有能分解利用纤维素的细菌才能在该培养基上生长。在分离纤维素分解菌的培养基中需要加入的特殊染料是刚果红。刚果红能与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红 - 纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，所以通过观察是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 （4）产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了稀释涂布平板法，其可以用来计数的原理为当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。为了避免混淆，本实验纯化菌种时使用的平板需要在培养皿的皿底做好标记，原因是若在皿盖上做标记影响微生物的观察。然后在恒温培养箱中需培养1—2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是为了防止培养时间不足导致菌落遗漏，影响数据的准确性。 考点2 微生物的培养与应用 1．为增强熊果酸（UA）抗菌效果，研究者探究了药物（P）和熊果酸（UA）的比值与抑菌圈直径大小的关系，结果如图所示。下列分析正确的是（    ） A．实验须用平板划线法将菌种接种到培养基上 B．该实验自变量是P/UA的值，因变量为是否出现抑菌圈 C．据实验结果可判断P/UA的值最适宜介于3～5 D．据实验结果可推测不同P/UA的值的抑菌效果均不同 【答案】C 【分析】稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、由实验结果出现抑菌圈可以推导出实验用稀释涂布平板法将菌种接种到培养基上，A错误； B、该实验自变量是P/UA的值，因变量是抑菌圈的直径大小，B错误； C、据实验结果可判断P/UA的值最适宜介于3～5，此时抑菌圈直径最大，C正确； D、据实验结果可推测，随着P/UA的值增大抑菌效果可能与P/UA的值较小时的抑菌效果相同，D错误。 故选C。 2．某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖而其突变株则不能。将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-（仅图1中的某一步受阻）分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续增养后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述正确的是（　　）    A．配制图2培养基时加入了琼脂和少量色氨酸，pH通常呈酸性 B．使用涂布器接种3种突变菌株，涂布前需对涂布器进行灼烧灭菌 C．TrpC-菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅰ区域的一端 D．TrpB-、TrpC-、TrpE-三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻 【答案】D 【分析】依据题图及题干信息“突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，“继续培养一段时间后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的细菌继续生长增殖”；分析得知：突变株TrpB-，将分支酸转化为邻氨基苯甲酸受阻，但可将邻氨基苯甲酸转化为吲哚，并进一步转化为色氨酸；突变株TrpC-对应Ⅱ区域，将邻氨基苯甲酸转化为吲哚受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，也可以将吲哚转化为色氨酸；突变株TrpE-对应Ⅲ区域，将吲哚转化为色氨酸受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，并进一步转化为吲哚。 【详解】A、依据题干信息“培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，推断培养基中存在少量色氨酸，培养细菌一般将pH调至中性或弱碱性，A错误； B、得到图2所示菌落，应使用接种针接种，B错误； C、依据题图及题干信息“突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”，“继续培养一段时间后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的细菌继续生长增殖”；分析得知：突变株TrpB-，将分支酸转化为邻氨基苯甲酸受阻，但可将邻氨基苯甲酸转化为吲哚，并进一步转化为色氨酸；突变株TrpC-对应Ⅱ区域，将邻氨基苯甲酸转化为吲哚受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，也可以将吲哚转化为色氨酸；突变株TrpE-对应Ⅲ区域，将吲哚转化为色氨酸受阻，但可以将分支酸转化为邻氨基苯甲酸，并进一步转化为吲哚。Ⅰ区域的TrpB-划线上端与Ⅱ区域临近，可利用Ⅱ区域TrpC-合成的邻氨基苯甲酸进一步合成吲哚及色氨酸生长增殖；Ⅰ区域的TrpB-划线下端与Ⅲ区域临近，可利用Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖；Ⅱ区域的TrpC-划线上端自身不能合成吲哚，临近的Ⅰ区域TrpB-可利用Ⅱ区域合成的邻氨基苯甲酸合成吲哚并进一步合成色氨酸，无多余的吲哚反馈给Ⅱ区域上端，所以Ⅱ区域的TrpC-划线上端不生长；Ⅱ区域的TrpC-划线下端，可利用临近Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖；Ⅲ区域TrpE-由于不能将吲哚转化为色氨酸，所以Ⅲ区域两端不生长增殖，所以Ⅱ区域的TrpC-划线下端靠近Ⅲ区域，可利用临近Ⅲ区域TrpE-合成的吲哚进一步合成色氨酸生长增殖，而不是靠近Ⅰ区域的一端，C错误； D、将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-分别划线接种在图2培养基的I、Ⅱ、Ⅲ区域，突变菌株能将积累的中间产物分泌到细胞外，使其他突变体得以生存，Ⅲ区域菌株不再生长，说明TrpE-阻断吲哚转化为色氨酸，即阻断③过程；TrpB-能够利用TrpC-和TrpE-合成的代谢产物，完成色复酸的合成，说明TrpB-阻断①过程；TrpC-只能利用TrpE-合成的代谢产物，完成色氨酸的合成，说明阻断的是②过程，因此TrpB-、TrpC-、TrpE-三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻，D正确。 故选D。 【名师点拨】微生物的分离和培养中四个注意点及分析 (1)分离特定微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。 (2)平板划线法只适用于微生物的提纯，不适用于计数，并且通常在最后一次划线的末端处的菌种最纯。 (3)倒平板的温度一般适宜在50 ℃左右，温度过高会烫手，过低培养基会凝固。 (4)平板需倒置，这样既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又防止皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。 3．鸡蛋表面附着的细菌会逐渐侵入蛋内，缩短鸡蛋保质期。对某养鸡场不同季节及不同养殖模式下生产的鸡蛋取样，按每克鸡蛋用1mL无菌生理盐水清洗鸡蛋表面，收集清洗液，用稀释涂布平板法接种、培养后计数结果如下表。相关叙述正确的是（　　） 季节 菌落数（个·g-1） 半封闭式养殖模式 全封闭式养殖模式 夏季 3.92×104 7.24×103 冬季 7.60×104 1.24×104 A．可用煮沸消毒法清理鸡蛋表面的细菌 B．若接种菌液体积为0.1mL，则表中数据是对清洗液稀释1×102倍后获得的 C．比较两种养殖模式可知鸡蛋表面的细菌主要来自环境 D．稀释涂布平板法所得活菌数比实际结果要小，可用显微计数法直接测活菌数 【答案】C 【分析】测定微生物数量的方法：①直接计数法：常用显微镜直接技术法，一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。②间接计数法：常用稀释平板计数法，平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。 【详解】A、本实验需要研究不同季节不同养殖方式下鸡蛋表面的细菌数量，若用煮沸消毒法清理鸡蛋表面的细菌，则无法得出实验数据，A错误； B、稀释平板计数法涂布的菌液体积为0.1mL，菌落数为30-300的平板适于计数，根据图中数据分析，半封闭式养殖模式对清洗液稀释1×102倍后涂板，全封闭式养殖模式对清洗液稀释1×101倍后涂板，B错误； C、半封闭式养殖模式下的鸡蛋表面菌落数明显高于全封闭式养殖模式，这说明环境中的细菌更容易污染鸡蛋表面，C正确； D、由于两个或更多的细胞可能聚集在一起形成一个菌落，因此稀释涂布平板法得到的鸡蛋表面菌落数比实际数略少，可用显微计数法直接测定时测定的是死菌和活菌的总数，要想测活菌数需要进行一定的处理，如染色，D错误。 故选C。 4．竹子富含纤维素，大熊猫每天要吃大量竹子，只能利用其中小部分纤维素。研究表明，大熊猫的基因组缺少编码纤维素酶的基因，但肠道中有多种纤维素分解菌。下列说法正确的是（　　） A．大熊猫和肠道中的纤维素分解菌是寄生的种间关系 B．大熊猫是这条捕食食物链的初级消费者，也是最低营养级 C．流向纤维素分解菌的能量属于该生态系统中未利用的能量 D．可用纤维素为唯一碳源的培养基筛选大熊猫肠道中的纤维素分解菌 【答案】D 【分析】由题意可知，大熊猫依赖肠道中纤维素分解菌消化纤维素，纤维素分解菌则吸收营养物质，因此两者的种间关系为互利共生。 【详解】A、纤维素分解菌通过大熊猫获得纤维素，同时给大熊猫提供分解产生的葡萄糖，二者是互利共生的种间关系，A错误； B、竹子→大熊猫构成一条食物链，大熊猫是这条捕食食物链的初级消费者，也是最高营养级，B错误； C、未利用的能量指的是没有被呼吸消耗，也没有流向下一营养级和分解者的能量，C错误； D、要培养筛选大熊猫肠道中的纤维素分解菌，培养基中需要添加纤维素作为唯一碳源，D正确。 故选D。 5．植物凋落物中碳氮比可影响某分解者的生命活动。当凋落物中碳氮比大于30:1时，该分解者的生命活动出现氮限制，其会从土壤非凋落物中额外吸收铵根离子和硝酸根离子；当凋落物中碳氮比小于30:1时，该分解者的生命活动出现碳限制，其通过分解作用来增加土壤中的无机氮，从而增强植物对氮的吸收。下列说法正确的是（    ） A．植物和该分解者之间可以相互提供物质和能量 B．氮被植物吸收后，可用于合成叶绿素、蛋白质和脂肪等物质 C．受碳限制时，该分解者会利用空气中的或土壤中的碳酸盐进行生命活动 D．受氮限制时，该分解者与植物是种间竞争关系；受碳限制时，其与植物是原始合作关系 【答案】D 【分析】在自然界中动物、植物的遗体、遗物不会堆积如山，是因为营腐生生活的细菌、真菌等会把动物、植物的遗体遗物分解成二氧化碳、水和无机盐等无机物，这些物质又被归还土壤，供植物重新利用，它们作为分解者促进了自然界中的物质循环。 【详解】A、该分解者只能为植物提供物质，不能为植物提供能量，A错误； B、脂肪只含C、H、O，不含N，B错误； C、分解者是异养生物，不会利用空气中的CO2或土壤中的碳酸盐进行生命活动，C错误； D、由题意可知，当该分解者的生命活动出现氮限制时，其会从土壤非凋落物中额外吸收铵根离子和硝酸根离子，此时其与植物是种间竞争关系；当该分解者的生命活动出现碳限制时，其通过分解作用来增加土壤中的无机氮，从而增强植物对氮的吸收，此时其与植物是原始合作关系，D正确。 故选D。 6．临床发现，长期使用抗生素会导致肠道菌群紊乱，肠道屏障破坏，出现腹泻。为研究某种益生菌的治疗效果，科研人员利用小鼠开展了一系列实验，部分实验结果如下。 组别 处理 体重增加量/Δg 腹泻指数 免疫球蛋白ng/mL TLR4/NF-κB表达水平 IgA IgG TLR4 NF-κB A 生理盐水 3.83 0 62.42 513.21 1 1 B 氨苄青霉素 3.49 1.33 47.65 423.87 3.08 2.85 C 氨苄青霉素+培菲康 5.26 0.71 58.67 540.57 2.19 1.40 D 氨苄青霉素+某种益生菌 3.81 1.02 53.99 452.85 2.56 2.14 注:培菲康（双歧杆菌三联活菌散）。 请回答下列问题： (1)据题分析，推测培菲康的作用和设置C组的作用分别是 。 (2)据表分析，相对于A组，B组小鼠体重增加略有降低，可能的原因是 。 (3)研究发现，TLR4/NF-κB信号通路的激活能放大炎症效应，影响肠道能量代谢，导致肠黏膜功能受损，造成慢性腹泻。据此分析，益生菌治疗腹泻的作用机理是 。 (4)基于研究结果，科研小组可进一步进行的研究工作是 。 【答案】(1)培菲康可用于肠道菌群失调引起的腹泻；C组作为（阳性）对照组，以判断某种益生菌治疗长期使用抗生素导致肠道菌群紊乱的效果。 (2)氨苄青霉素处理导致小鼠肠道菌群紊乱，出现腹泻，对营养物质的吸收减少，体重减轻。 (3)益生菌通过促进免疫球蛋白IgA、TgG的合成，增强机体免疫力；抑制TLR4和NF-κB基因表达，减轻肠粘膜受损，从而达到治疗效果。 (4)探究益生菌的最适浓度、探究益生菌对肠道菌群的影响等 【分析】分析题意，本实验目的是研究某种益生菌的治疗效果，结合表格可知， 实验的自变量不同处理方式，因变量是小鼠生理状况，包括体重增加量、腹泻指数、免疫球蛋白和TLR4/NF-κB表达水平等，据此分析作答。 【详解】（1）据表分析，C组（氨苄青霉素+培菲康）的体重增加、免疫指标（IgA、IgG）均优于B组（仅用抗生素），且TLR4/NF-κB表达下降，表明培菲康通过调节菌群和抑制炎症改善腹泻，可用于肠道菌群失调引起的腹泻；C组作为已知有效治疗的对照，用于对比D组（待测益生菌）的效果，以判断某种益生菌治疗长期使用抗生素导致肠道菌群紊乱的效果。 （2）长期使用抗生素会导致肠道菌群紊乱，肠道屏障破坏，出现腹泻。B组使用了氨苄青霉素，相对于A组，B组小鼠体重增加略有降低，其原因是氨苄青霉素处理导致小鼠肠道菌群紊乱，出现腹泻，对营养物质的吸收减少，体重减轻。 （3）分析题意，研究发现，TLR4/NF-κB信号通路的激活能放大炎症效应，影响肠道能量代谢，导致肠黏膜功能受损，表中C、D组的TLR4/NF-κB表达水平低于B组，说明益生菌通过抑制该通路减少炎症反应，修复肠道屏障功能，从而缓解腹泻，益生菌治疗腹泻的作用机理是：益生菌通过促进免疫球蛋白IgA、TgG的合成，增强机体免疫力；抑制TLR4和NF-κB基因表达，减轻肠粘膜受损，从而达到治疗效果。 （4）益生菌能治疗腹泻，科研小组可进一步进行的研究工作是探究益生菌的最适浓度、探究益生菌对肠道菌群的影响等。 7．番茄灰霉菌严重影响番茄生产，枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。为了探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的防治，研究者进行了相关实验。回答下列问题： (1)在实验室培养微生物时，需要对所用的培养基和玻璃器皿进行灭菌，可采用的方法分别是 。 (2)用液体培养基培养枯草芽孢杆菌需要摇床振荡，目的是 。培养过程中为快速检测枯草芽孢杆菌活菌数量时，需采用 计数。 (3)在检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉菌的 （化学或生物）防治作用时，首先取适量的番茄灰霉菌菌液涂布于 培养基表面，再将无菌滤纸片（直径5mm）在 菌液中浸泡，然后覆盖于番茄灰霉菌培养基中心，数秒后取出滤纸片，培养皿倒置培养一段时间，测量 的大小以判定枯草芽孢杆菌防治（抑菌）作用效果。 (4)为了筛选出更高效抑制番茄灰霉病的枯草芽孢杆菌，研究者进一步设计了如下实验：应从培养皿B中选择 号菌落继续进行纯化培养。 【答案】(1)高温蒸汽灭菌、干热灭菌 (2) 增大培养液的溶氧量，使菌体与营养物质充分接触 稀释涂布平板法 (3) 生物 固体 枯草芽孢杆(菌) 抑菌圈 (4)② 【分析】统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。（2）间接计数法（活菌计数法）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 【详解】（1）防止杂菌污染是获得纯净的微生物培养物的关键，对制备的培养基采用高压蒸汽灭菌，对所用的玻璃器皿进行干热灭菌。 （2）枯草芽孢杆菌为好氧微生物，采用摇床震荡培养可增大培养液的溶氧量，使菌体与营养物质充分接触，有利于枯草芽孢杆菌的生长繁殖。培养过程中要抽样检测活菌数量，应该采用稀释涂布平板法，用稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞，而显微镜直接计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内。 （3）利用枯草芽孢杆菌对抑制多种病原菌，属于生物防治，要检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉菌的抑制作用，先把适量的番茄灰霉菌菌液涂布于固体培养基上，将无菌滤纸片在培养过枯草芽孢杆菌菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心，若对番茄灰霉病菌有抑制作用，被覆盖的位置的番茄灰霉病菌就会被杀死，培养皿倒置培养后会出现抑菌圈，测量抑菌圈大小以判定抑菌效果强弱。 （4）B培养皿中②号的透明圈最大，而菌落直径很小，故该菌对番茄灰霉病菌的抑制作用最强，即应从培养皿B中选择②号菌落继续进行纯化培养。 【名师点拨】微生物计数的两种方法 (1)显微镜直接计数。该方法的缺点是不能区分细菌的死活，导致结果偏大。 (2)稀释涂布平板法(间接计数法)。该方法常用来统计活菌数目，但当两个或多个细胞连在一起，观察到的只是一个菌落，导致统计结果偏小。 1 / 5 学科网（北京）股份有限公司 $$ 猜押11 生物技术实践 猜押考点 三年考情分析 2024年 2023年 2022年 考点1　传统发酵技术和发酵工程的应用 湖北卷T1， 浙江6月卷T10、T11， 贵州卷T14，山东卷T14， 江西卷T11，河北卷T18 山东卷T12、T20， 浙江6月卷T11、T12， 全国乙卷T37， 北京卷T13 山东卷T14、T20， 江苏卷T16， 湖北卷T11 考点2　微生物的培养与应用 浙江6月卷T14， 黑、吉、辽卷T19， 山东卷T15，湖南卷T6， 江西卷T17，河北卷T13， 北京卷T17，全国甲卷T37 北京卷T16， 浙江1月卷T19， 广东卷T10， 山东卷T15 全国乙卷T37， 全国甲卷T37， 河北卷T23， 海南卷T12 考情分析 近3年传统发酵技术的应用题目难度不大，分值也不高。大多来自实际的发酵过程，侧重考查利用所学知识解决实际问题的能力。试题主要体现了对科学思维、科学探究素养的考查，学生需具备的素养要素主要是演绎与推理、实验设计、方案实施、结果分析。 近3年对微生物的培养、筛选、计数的考查经常涉及培养基的成分分析、微生物的筛选原理、微生物的计数及分析等。 押题预测 预测2025年高考考查方向：微生物的培养和应用，生物技术在食品加工及其他方面的应用。从与酶有关的实验设计入手，考查实验变量的控制、结果的预测等。 考查热点：一是考查从实验的角度剖析微生物培养和应用及传统发酵技术的应用的每项技术，把握原理、材料、操作流程、注意事项等；二是多从实验细节入手进行考查，题目的综合性和难度适中。从命题角度看，物质的提取、分离常以新科学技术为命题背景考查学生对生物技术基础知识的掌握及解决问题的能力。 考点1传统发酵技术和发酵工程的应用 1．马奶酒是蒙古族特有的一种饮品，以新鲜马奶为原料，经过过滤去除杂质，然后加热至80~90℃，再迅速冷却至20～30℃后，加入菌粉发酵使其达到一定酸度，再添加糖、水和菌粉，进行二次发酵，获得马奶酒。下列相关叙述错误的是（    ） A．添加糖主要是为酵母菌提供碳源和能源 B．新鲜马奶加热至80～90℃主要是为杀灭杂菌 C．两次加入的“菌粉”所属菌种不同，前者是乳酸菌 D．制作马奶酒过程中的两次发酵都属于纯种发酵 【名师点拨】微生物培养基的“两种类型”和“五大成分” (1)根据物理性质可将培养基分为固体培养基和液体培养基。 (2)培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐和其他物质等。 2．利用苹果制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸菌，发酵5天。下列有关叙述正确的是（　　） A．不同微生物所需的最适温度不同，接入醋酸菌后，应适当升高发酵温度 B．苹果中的葡萄糖是酵母菌发酵的底物，在酵母菌的线粒体中被分解 C．酵母菌和醋酸菌发酵过程中均需在密闭的条件下完成 D．醋酸菌和酵母菌均以有丝分裂的方式进行增殖 3．我国具有悠久的酿酒文化和历史，白酒小窖酿造属于传统发酵技术，已选入非物质文化 遗产保护名录。窖池容积小，它的土壤和发酵酒醅的接触面大，从而能够产生更多的香 气成分带入酒中。下列叙述错误的是（　　） A．小窖酿造是以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的 B．对分离出的酿酒酵母做扩大培养，需在无菌、无氧环境中进行 C．小窖酿造的原料多以优质谷物为主，发酵酒醅中可分离出产淀粉酶的微生物 D．窖池中形成的相对稳定的微生物体系不容易被杂菌污染，因此不需要严格灭菌 【名师点拨】无菌技术的两个方面 (1)比较温和的方法——消毒。 (2)用强烈的理化方法——灭菌。 (3)两者的最大区别是，是否杀死芽孢和孢子。 3. 微生物纯培养中“一灯附近、两法接种” 4．随着发酵工程的不断发展，发酵技术在医药工业以及农牧业等许多领域得到了广泛应用，下列说法正确的是（　　） A．传统发酵技术没有对器具、原料等进行灭菌，因此无法完全保证其产品质量 B．家庭制作泡菜和果醋过程中，发酵液表层出现的白膜是由同种微生物形成 C．在啤酒工业化生产流程中，焙烤的目的是产生风味组分，并对糖浆灭菌 D．科研人员已成功通过发酵工程获得紫杉醇、青蒿素前体等物质 5．酸笋是螺蛳粉的“灵魂”。在自然发酵过程中，酸笋中的乳酸菌作为主要微生物分解蛋白质产生硫化氢等物质，形成了螺蛳粉的特殊风味。酸笋的传统发酵工艺包括原材料处理、装坛、发酵等过程。下列相关叙述正确的是（    ） A．乳酸菌代谢类型为异养厌氧型，所以不会分布在空气中 B．原材料处理主要是对采摘后的竹笋进行剥壳、清洗和灭菌 C．装坛时应保证竹笋被盐水全部浸没，才能保证发酵的正常进行 D．随着发酵的进行，发酵液pH值逐渐升高后保持稳定 6．小曲白酒清香纯正，以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌和兼性厌氧型微生物酵母菌。如图为用小曲进行传统酿造的流程图。下列叙述错误的是（　　） A．霉菌和酵母菌细胞中都有以核膜为界限的细胞核 B．蒸熟的原料需要冷却后才可加入小曲，以免杀死菌种 C．图中撒曲糖化阶段，主要是利用霉菌分泌的淀粉酶分解淀粉 D．若酒坛表层长出白膜，可能是酒坛密封不严使乳酸菌大量繁殖产生的 7．图1表示苹果醋的简易制作装置和制作流程。发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。产黄青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。工业上生产青霉素的发酵工程流程如图2所示据图回答下列问题：                    图1                                                               图2 (1)用图1装置酿酒结束后，若要直接转入果醋发酵，改变的环境条件是 。该过程进行的反应简式是 。 (2)图2整个发酵过程的中心环节是 。在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH在灭菌 （填“前”或“后”）调至酸性。在青霉素生产过程中 都必须经过严格的灭菌。如果污染了杂菌，某些杂菌会产生 将青霉素分解掉。 (3)欲从土壤中分离出能产生纤维素酶的纤维素分解菌，可用加入 作为唯一碳源制成的选择培养基进行分离。若将样品接种到分离纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是 ，通过观察是否产生 来筛选纤维素分解菌。 (4)对产黄青霉菌进行分离纯化并计数采用了 法，其可以用来计数的原理为 。为了避免混淆，本实验纯化菌种时使用的平板需要在培养皿的 （“皿盖”或“皿底”）做好标记。然后在恒温培养箱中需培养1—2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是 。 考点2 微生物的培养与应用 1．为增强熊果酸（UA）抗菌效果，研究者探究了药物（P）和熊果酸（UA）的比值与抑菌圈直径大小的关系，结果如图所示。下列分析正确的是（    ） A．实验须用平板划线法将菌种接种到培养基上 B．该实验自变量是P/UA的值，因变量为是否出现抑菌圈 C．据实验结果可判断P/UA的值最适宜介于3～5 D．据实验结果可推测不同P/UA的值的抑菌效果均不同 2．某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸，从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖而其突变株则不能。将突变株TrpB-、TrpC-、TrpE-（仅图1中的某一步受阻）分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域，培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖，继续增养后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖，而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述正确的是（　　）    A．配制图2培养基时加入了琼脂和少量色氨酸，pH通常呈酸性 B．使用涂布器接种3种突变菌株，涂布前需对涂布器进行灼烧灭菌 C．TrpC-菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅰ区域的一端 D．TrpB-、TrpC-、TrpE-三种突变菌株分别对应图1中的①②③过程受阻 【名师点拨】微生物的分离和培养中四个注意点及分析 (1)分离特定微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。 (2)平板划线法只适用于微生物的提纯，不适用于计数，并且通常在最后一次划线的末端处的菌种最纯。 (3)倒平板的温度一般适宜在50 ℃左右，温度过高会烫手，过低培养基会凝固。 (4)平板需倒置，这样既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又防止皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。 3．鸡蛋表面附着的细菌会逐渐侵入蛋内，缩短鸡蛋保质期。对某养鸡场不同季节及不同养殖模式下生产的鸡蛋取样，按每克鸡蛋用1mL无菌生理盐水清洗鸡蛋表面，收集清洗液，用稀释涂布平板法接种、培养后计数结果如下表。相关叙述正确的是（　　） 季节 菌落数（个·g-1） 半封闭式养殖模式 全封闭式养殖模式 夏季 3.92×104 7.24×103 冬季 7.60×104 1.24×104 A．可用煮沸消毒法清理鸡蛋表面的细菌 B．若接种菌液体积为0.1mL，则表中数据是对清洗液稀释1×102倍后获得的 C．比较两种养殖模式可知鸡蛋表面的细菌主要来自环境 D．稀释涂布平板法所得活菌数比实际结果要小，可用显微计数法直接测活菌数 4．竹子富含纤维素，大熊猫每天要吃大量竹子，只能利用其中小部分纤维素。研究表明，大熊猫的基因组缺少编码纤维素酶的基因，但肠道中有多种纤维素分解菌。下列说法正确的是（　　） A．大熊猫和肠道中的纤维素分解菌是寄生的种间关系 B．大熊猫是这条捕食食物链的初级消费者，也是最低营养级 C．流向纤维素分解菌的能量属于该生态系统中未利用的能量 D．可用纤维素为唯一碳源的培养基筛选大熊猫肠道中的纤维素分解菌 5．植物凋落物中碳氮比可影响某分解者的生命活动。当凋落物中碳氮比大于30:1时，该分解者的生命活动出现氮限制，其会从土壤非凋落物中额外吸收铵根离子和硝酸根离子；当凋落物中碳氮比小于30:1时，该分解者的生命活动出现碳限制，其通过分解作用来增加土壤中的无机氮，从而增强植物对氮的吸收。下列说法正确的是（    ） A．植物和该分解者之间可以相互提供物质和能量 B．氮被植物吸收后，可用于合成叶绿素、蛋白质和脂肪等物质 C．受碳限制时，该分解者会利用空气中的或土壤中的碳酸盐进行生命活动 D．受氮限制时，该分解者与植物是种间竞争关系；受碳限制时，其与植物是原始合作关系 6．临床发现，长期使用抗生素会导致肠道菌群紊乱，肠道屏障破坏，出现腹泻。为研究某种益生菌的治疗效果，科研人员利用小鼠开展了一系列实验，部分实验结果如下。 组别 处理 体重增加量/Δg 腹泻指数 免疫球蛋白ng/mL TLR4/NF-κB表达水平 IgA IgG TLR4 NF-κB A 生理盐水 3.83 0 62.42 513.21 1 1 B 氨苄青霉素 3.49 1.33 47.65 423.87 3.08 2.85 C 氨苄青霉素+培菲康 5.26 0.71 58.67 540.57 2.19 1.40 D 氨苄青霉素+某种益生菌 3.81 1.02 53.99 452.85 2.56 2.14 注:培菲康（双歧杆菌三联活菌散）。 请回答下列问题： (1)据题分析，推测培菲康的作用和设置C组的作用分别是 。 (2)据表分析，相对于A组，B组小鼠体重增加略有降低，可能的原因是 。 (3)研究发现，TLR4/NF-κB信号通路的激活能放大炎症效应，影响肠道能量代谢，导致肠黏膜功能受损，造成慢性腹泻。据此分析，益生菌治疗腹泻的作用机理是 。 (4)基于研究结果，科研小组可进一步进行的研究工作是 。 7．番茄灰霉菌严重影响番茄生产，枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。为了探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的防治，研究者进行了相关实验。回答下列问题： (1)在实验室培养微生物时，需要对所用的培养基和玻璃器皿进行灭菌，可采用的方法分别是 。 (2)用液体培养基培养枯草芽孢杆菌需要摇床振荡，目的是 。培养过程中为快速检测枯草芽孢杆菌活菌数量时，需采用 计数。 (3)在检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉菌的 （化学或生物）防治作用时，首先取适量的番茄灰霉菌菌液涂布于 培养基表面，再将无菌滤纸片（直径5mm）在 菌液中浸泡，然后覆盖于番茄灰霉菌培养基中心，数秒后取出滤纸片，培养皿倒置培养一段时间，测量 的大小以判定枯草芽孢杆菌防治（抑菌）作用效果。 (4)为了筛选出更高效抑制番茄灰霉病的枯草芽孢杆菌，研究者进一步设计了如下实验：应从培养皿B中选择 号菌落继续进行纯化培养。 【名师点拨】微生物计数的两种方法 (1)显微镜直接计数。该方法的缺点是不能区分细菌的死活，导致结果偏大。 (2)稀释涂布平板法(间接计数法)。该方法常用来统计活菌数目，但当两个或多个细胞连在一起，观察到的只是一个菌落，导致统计结果偏小。 1 / 5 学科网（北京）股份有限公司 $$